Contenido de Fenoles Totales

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Contenido de fenoles totales, flavonoides y actividad antioxidante del


extracto atomizado de las hojas de Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) pers
“chilca”. Ayacucho – 2018
Tania Mirian Zanabria Carbajal, Marco R. Arones Jara
Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga.
Farmacia y Bioquímica UNSCH

RESUMEN
La actividad antioxidante cumple una función importante en las enfermedades neurodegenerativas ya que
contribuye a la disminución de los radicales libres, estrés oxidativo y prevención de células cancerígenas.
Los objetivos planteados de este trabajo de investigación fueron demostrar la actividad antioxidante,
cuantificar el contenido de flavonoides y compuestos fenólicos del extracto de las hojas de Baccharis
uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca” e identificar los metabolitos secundarios. Este estudio descriptivo se
realizó en el laboratorio de Centro de Desarrollo, Análisis y Control de Calidad de Medicamentos y
Fitomedicamentos (CEDACMEF) de la Escuela Profesional de Farmacia y Bioquímica de la Facultad de
Ciencias de la Salud de la Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga, durante los meses de
octubre del 2018 y marzo del 2019 en la ciudad de Ayacucho. Los metabolitos principales presentes en el
extracto atomizado fueron: flavonoides, taninos, fenoles y triterpenos El contenido de fenoles totales fue de
155,3 mg. EAG/g.EA. Mientras el contenido de flavonoides fue 32,2 +/- 0,05 (mg ERu/g Ext.At.). Finalmente
se determinó la actividad antioxidante del extracto atomizado de hojas de Baccharis uniflora (Ruiz & Pav)
Pers “chilca”, mediante el método DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidracilo). La concentración inhibitoria 50 (CI50)
del extracto atomizado de hojas de Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca” sobre el radical DPPH fue
de 286,8± 1,01ug/mL. Finalmente se concluye que, el extracto atomizado de hojas de Baccharis uniflora
(Ruiz & Pav) Pers “chilca”, presenta compuestos bioactivos con propiedades antioxidante.

SUMMARY
The antioxidant activity plays an important role in neurodegenerative diseases as it contributes to the reduction of free
radicals, oxidative stress and prevention of cancer cells. The objectives of this research work were to demonstrate
antioxidant activity, quantify the content of flavonoids and phenolic compounds from the extract of the leaves of Baccharis
uniflora (Ruiz & Pav) Pers "chilca" and identify secondary metabolites. This descriptive study was carried out in the
laboratory of the Center for Development, Analysis and Quality Control of Medicines and Phytomedication (CEDACMEF)
of the Professional School of Pharmacy and Biochemistry of the Faculty of Health Sciences of the National University of
San Cristóbal the Huamanga, during the months of October 2018 and March 2019 in the city of Ayacucho. The main
metabolites present in the atomized extract were: flavonoids, tannins, phenols and triterpenes. The total phenolic content
was 155.3 mg. EAG / g.EA. While the flavonoid content was 32.2 +/- 0.05 (mg ERu / g Ext.At.). Finally, the antioxidant
activity of the atomized extract of Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca” leaves was determined by the DPPH
method (2,2-diphenyl-1-picrylhydracil). The inhibitory concentration 50 (IC50) of the atomized extract of Baccharis uniflora
(Ruiz & Pav) Pers "chilca" leaves on the DPPH radical was 286.8 ± 1.01ug / mL. Finally, it is concluded that the atomized
extract of Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca” leaves has bioactive compounds with antioxidant properties.

INTRODUCCIÓN
Desde tiempos inmemoriales, el hombre ha importancia económica y ambiental3. Las
estado dependiendo de la Madre Naturaleza para diferentes especies del género Baccharis en
todas sus necesidades básicas1. Es por ello que medicina popular se usa por sus propiedades
forman parte de lo que ahora se conoce como digestivas, hepatoprotectoras, antiinflamatorias
medicina tradicional2 como analgésicos en varias dolencias,
El género Baccharis es uno de los géneros más contusiones e inflamaciones;3, 4diuréticos,
importantes de la familia asteraceae,1 que tratamiento de la diabetes, antibiótico,
representa una de las familias más numerosas de enfermedades gastrointestinales, ulceras.4 Los
angiospermas con más de 1500 géneros y más efectos benéficos de estas especies pueden ser
de 20 000 especies. Las asteráceas ocupan el atribuidos al menos en parte a las propiedades
segundo lugar entre las familias más diversas de antioxidantes y depuradoras de radicales libres.4
la flora peruana. Esta familia es reconocida en el Actualmente, el estudio de antioxidantes
Perú por presentar alrededor de 245 géneros y naturales tiene un importante impacto científico y
1530 especies. El género Baccharis es económico, en tal sentido, nuestro país tiene un
exclusivamente americano y presenta 250 abundante riqueza en cuanto a las plantas
especies, 70 de las cuales están presentes en el silvestres con potentes efectos antioxidantes y
Perú y 20 de estas son endémicas.2 pigmentos naturales que bien podrían ser
Se utilizan ampliamente en América del Sur, no utilizadas en la industria dermocosmética y en la
solo en medicina tradicional, sino también por su industria alimentaria5. La actividad antioxidante

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cumple una función importante en las Medicamentos y Fitomedicamentos "Laboratorio


enfermedades neurodegenerativas ya que de Control de Calidad", de la Escuela Profesional
contribuye a la disminución de los radicales de Farmacia y Bioquímica de las Facultad de
libres, estrés oxidativo y prevención de células Ciencias de la Salud, Universidad Nacional San
cancerígenas.9 .Estudios químicos previos sobre Cristóbal de Huamanga, Ayacucho, Perú.
diferentes especies del género Baccharis han Definición de la población y muestra
encontrado varios compuestos como Población
terpenoides, tricotecenos, cromenas y Hojas de Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers
flavonoides.1 Además, se ha revelado que los “chilca” que crecen en las zonas áridas del centro
extractos de plantas son una fuente importante poblado de Huaraca, Anchac-Huasi provincia de
de compuestos químicos con alta actividad Vinchos del departamento de Ayacucho.
antioxidante. Este capítulo pretende resumir los Muestra
principales temas relacionados con la actividad 20 g de hojas desecadas de Baccharis uniflora
antioxidante que se encuentran en extractos de (Ruiz & Pav) Pers “chilca”, cantidad que se
plantas o metabolitos secundarios como los recolectó en horas de la mañana en el mes de
fenoles y los flavonoides, entre otros compuestos mayo.
aislados de fuentes naturales. También se han Muestreo
incluido varios métodos para determinar la La técnica de muestreo fue no probabilística en
capacidad antioxidante.6 la que se empleó la estrategia del
Los radicales libres son compuestos altamente muestreo aleatorio simple. El muestreo fue de
inestables que contiene uno o más electrones conveniencia ya que permitió seleccionar
desapareados, que fácilmente conducen a aquellos casos accesibles que acepten ser
reacciones incontroladas generando un estrés incluidos. Esto, fundamentado en la conveniente
oxidativo.10,7 accesibilidad y proximidad de los datos para el
La finalidad de esta investigación no es descubrir investigador.
un nuevo fármaco u obtenerlo; lo que se trata es Criterios de inclusión
demostrar la actividad antioxidante in vitro de los  Hojas en buen estado de conservación.
compuestos fenólicos y flavonoides totales  Hojas integras sin lesiones por traumatismo
cuantificados y obtenidos del extracto atomizado o plaga.
de las hojas de Baccharis uniflora (Ruiz & Pav)  Hojas normalmente pigmentadas.
Pers, debido a que la planta no cuenta con Criterios de exclusión
estudios, por lo tanto, éste sería el primer trabajo  Hojas que se encuentren en mal estado de
realizado para la comunidad científica. También conservación y que presente signos visibles
se realizó el análisis fitoquímico preliminar. Por lo de descomposición microbiana.
tanto, el objetivo de esta investigación está  Hojas, de plantas en etapa juvenil.
enfocada en contribuir con la búsqueda de  Hojas incompletas, con lesiones por
nuevos antioxidantes de origen natural que traumatismo o plaga.
enriquezca el conocimiento actual sobre los Unidad experimental
antioxidantes y su papel en la salud humana. Por Veinte gramos de hoja seca, molido de Baccharis
otro lado, el trabajo tiene utilidad metodológica ya uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca”.
que podrían realizarse futuras investigaciones Diseño metodológico
que utilizaran metodologías compatibles. Recolección e identificación de la muestra
Objetivo general vegetal
Demostrar la actividad antioxidante y cuantificar Las hojas de Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers
el contenido de flavonoides y compuestos “chilca” fueron recolectadas, seleccionadas,
fenólicos del extracto atomizado de las hojas de lavadas y envueltas en papel kraft para su
Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca”, secado a temperatura ambiente por un periodo
Ayacucho - 2018 de tres semanas cambiando el papel de soporte
Objetivo especifico y removiendo el vegetal para evitar su
 Realizar la identificación fitoquímica del descomposición, en una habitación oscura y con
extracto atomizado de las hojas Baccharis buena ventilación, luego se procedió a reducir el
uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca”. tamaño de la muestra, y se guardó en un frasco
 Determinar el contenido de flavonoides del de boca ancha color ámbar debidamente rotulado
extracto atomizado de las hojas de para ser conservado a temperatura ambiente. La
Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca”. clasificación taxonómica de la planta (hojas, tallo,
 Determinar el contenido de compuestos flor, raíz), fue realizada por el Mg. Hamilton
fenólicos del extracto atomizado de las hojas Beltrán Santiago, según al Sistema de
de Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers Clasificación de Arthur Cronquist et al., 1988.
“chilca”. Preparación de La muestra.
 Determinar la capacidad antioxidante del Se pesó 20 gramos de muestra seca pulverizada
extracto atomizado de las hojas de por duplicado las cuales se llevaron a macerar
Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca”. con 200 ml de etanol 70° en un recipiente de color
ámbar por un tiempo de 48h. Luego se llevó a un
MATERIALES Y MÉTODOS equipo de percolación, después se dejó salir el
Ubicación del trabajo de investigación percolado a razón de 20 gotas por minuto cada
El trabajo de investigación se realizó en el Centro 24h (agregando continuamente el solvente) por 3
de Desarrollo, Análisis y Control de Calidad de días y posteriormente se filtró (3 veces) para

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evitar polvillos. Seguidamente se procedió a  Se tomó 100 μL de las muestras


concentrar la muestra en baño maría a una convenientemente diluidas
temperatura de 60°C hasta obtener una cantidad  500 μL del reactivo Folin – Ciocalteau 1:10
de 200 ml y una concentración de etanol de 10°.  400 μL de una solución de carbonato de
Finalmente, el extracto concentrado es llevado al sodio al 7,5 %.
atomizador Mini Spray Driver B-290 del  Se mezcló en un tubo de ensayo
CEDACMEF obteniéndose un polvo fino la cual  Se dejó reaccionar a temperatura ambiente
se envasó en unos tubos estériles y libres de durante 30 minutos.
humedad.  Se leyó las absorbancias de las muestras a
Tamizaje fitoquímico una longitud de onda de 765 nm utilizando
La identificación fitoquímica del extracto de las un espectrofotómetro.
hojas de Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers  El contenido de fenoles totales se expresó
“chilca”, se realizó siguiendo los procedimientos en miligramos de equivalentes de ácido
de Pérez et al. Una vez obtenido el extracto gálico (GAE) por gramo de material vegetal
atomizado se realizó las pruebas pertinentes seco, a partir de una curva de calibración del
para la identificación cualitativa de los principales estándar ácido gálico de 10 a 60 μg/mL.
grupos de metabolitos secundarios, se tomó un Determinación del contenido de flavonoides
1mg de polvo fino, se reconstituyo con alcohol de totales
70° y se le agregaron los reactivos El contenido de flavonoides totales del extracto
correspondientes para generar reacciones atomizado de las hojas Baccharis Uniflora (R&P)
simples específicas de coloración y precipitación Pers “chilca” se determinó por el método de
.31 Zhishen et aL.35 con algunas modificaciones y la
Determinación del contenido de fenoles sustancia estándar utilizada fue el compuesto
totales flavonoide rutina.
El contenido de fenoles totales se determinó por Fundamento.
el método colorimétrico de Singleton y Rossi.32 Este método se basa en la reacción de los grupos
con algunas modificaciones y se utilizó el ácido OH de los flavonoides y el aluminio (Al +3)
gálico como estándar. formando un complejo rosado que se mide en el
Fundamento.
espectrofotómetro a una longitud de onda de 510
La técnica de Folin-Ciocalteau se utiliza para nm.36
determinar antioxidantes fenólicos y Procedimiento:
polifenólicos, este reactivo de folin-ciocalteu a. Preparación de la curva de calibración.
contiene molibdato y tungstato sódico que, al Primero se preparó cloruro de aluminio (Alcl3) 2%
reaccionar con los compuestos fenólicos y etanol al 50°. Luego se pesó 1mg de rutina, la
presentes, forman complejos fosfomolíbdico - cual se llevó a un matraz de 25 mL, se disolvió
fosfotúngstico. En medio básico la transferencia con 2,5 mL de metanol y se enrazó con etanol de
de electrones reduce estos complejos a óxidos 50° obteniéndose una concentración de rutina de
de tungsteno (W8O23) y molibdeno (Mo8O23), 40 µg/mL. De esta solución stock se tomó
los cuales son cromógemos de color azul intenso alícuotas de 1; 1,5; 2; 2,5; 3; 3,5 y 4 mL
que son proporcionales a la cantidad de respectivamente a la cual se le agregó 0,5 mL de
compuestos fenólicos presentes en la muestra de tricloruro de aluminio y etanol al 50 % cantidad
interés.33,34 suficiente para 5 mL. El blanco se prepara de
Procedimiento: igual forma sin la solución de rutina.
a. Preparación de la curva de calibración Dejamos reposar 30 minutos y luego se realizó
(estándar: ácido gálico). las respectivas lecturas en el espectrofotómetro
Se Pesó 20 mg de ácido gálico la cual se disolvió a una longitud de onda de 415 nm.
con un volumen de 25 mL de agua destilada b. Preparación de la muestra.
obteniéndose una solución stock con una Se pesó 100,5 mg de extracto atomizado de las
concentración de 800 µg/mL. De esta solución hojas de Baccharis Uniflora (R&P) Pers “chilca”,
madre de prepararon soluciones estándares a las la cual se llevó a disolver en 10 mL de etanol 70°,
concentraciones de 10; 20; 40; 60 µg/mL de esta solución se tomó 2 mL y este se llevó a
respectivamente. un volumen de 25 mL.
El método consiste en tomar 100µL de las Luego de la solución anterior se tomó 2 mL, se le
muestras convenientemente diluidas, y se colocó agregó 0,5 mL de AlCl3 y etanol 70° cantidad
en tubos de ensayo debidamente rotulados, a los suficiente para 5 mL.
cuales se le agrego 500 µL del reactivo folin y 400 Después de treinta minutos de incubación a
µL de carbonato de sodio 7,5 % y se dejó reposar temperatura ambiente, se realizó la lectura de la
por tiempo de 30 minutos en un ambiente oscuro, absorbancia a una longitud de onda de 415 nm.
pasado el tiempo estimado se realizó la lectura El contenido de flavonoides totales del extracto
en el espectrofotómetro a una longitud de onda se calculó como equivalentes de rutina (mg de
de 765 nm. rutina/g MS) a partir de la ecuación obtenida de
b. Preparación de la muestra.
la curva de calibración de este compuesto.
 Se pesó 100,5 mg del extracto atomizado de El tratamiento del extracto atomizado de
las hojas de Baccharis Uniflora (R&P) Pers Baccharis Uniflora (R&P) Pers “chilca” se realizó
“chilca” y se llevó diluciones de 10 mL; 25 mL por triplicado.
y 5 mL aforado con etanol de 70° (solución
muestra)

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Determinación de la actividad antioxidante in especificar las características, realizar la


vitro identificación preliminar de metabolitos
Ensayo del DPPH según (Brand-Willians y secundarios, medir la cantidad de fenoles,
col,1995) flavonoides y evaluar la capacidad antioxidante.
La determinación de la actividad antioxidante del Los datos recogidos servirán como
extracto atomizado de las hojas Baccharis conocimientos básicos para posteriores
Uniflora (R&P) Pers “chilca” se llevó a cabo de investigaciones.
acuerdo al método Brand-Willians y Col.36 con Diseño de investigación
algunas modificaciones y cada una de los El diseño de la investigación es descriptivo38.
ensayos se realizó por triplicado. 𝐌−𝐎
Fundamento Dónde:
El radical DPPH es un compuesto sólido de color M: Corresponde a los tratamientos, extracto
púrpura y presenta un electrón desapareado, atomizado de las hojas de Baccharis uniflora
cuando este radical libre se estabiliza frente a un (Ruiz & Pav) Pers “chilca”.
antioxidante se decolora hasta quedar de color O: Es la observación de la composición de
amarillo pálido.25 fenoles totales, flavonoides y actividad
Procedimiento antioxidante.
Se procede a preparar 50 mL de la solución
madre DPPH en etanol 96° a una concentración ANÁLISIS DE DATOS
de 40 mg/mL, posteriormente se mantiene en Los datos que se obtuvieron de la evaluación de
refrigeración y protegido de la luz, se realizaron los estudios serán procesados por Microsoft y en
diluciones de 35; 30; 25; 20; 15; 10; 5; 1 µg/mL. el Softwar OriginPro. Los resultados se expresan
La curva de calibración se construye a partir de como promedio, la diferencia significativa
los valores de absorbancia obtenidos a 515 nm existente entre los tratamientos será evaluada del
de todas las soluciones (1 a 40 µg/mL), medidas análisis de varianza (ANOVA one-way), seguidos
en una cubeta de vidrio con el camino óptico de de la prueba de t-student, con un nivel de
1cm y teniendo como “blanco” el etanol.38 significancia estadística de 0,05. Los promedios
El extracto etanólico de las hojas Baccharis de la actividad antioxidante son reportados en
Uniflora (R&P) Pers “chilca”, y el control positivo gráficos y los valores de CI50 son reportados en
(trolox) en etanol 96°, fueron diluidos a tablas. Para identificar diferencias
concentraciones de 250; 200; 150; 100; 50 y 25 estadísticamente significativas de las
mg/mL. Las medidas de absorbancia de las concentraciones evaluadas se calculó en análisis
mezclas de reacción (0,3 mL de solución de de varianza, comparaciones múltiples de Duncan
muestra y 2,7 mL de la solución madre de DPPH y t de Student de muestras independientes con
a la concentración de 40 µg/mL) se realizaron a nivel de confianza de 95%, mediante el programa
515 nm a 1; 5 y 10 minutos, cada 10 minutos de SPSS versión 20.0.
hasta 1 hora. Se utilizó una mezcla de etanol (2,7
mL) y 0,3 del extracto como blanco. RESULTADOS
Cálculos: Tabla 1. Identificación de metabolitos
secundarios del extracto atomizado de las hojas
 Calcular el porcentaje de actividad de Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) pers “chilca”.
antioxidante Ayacucho - 2018
%AA
{[Abscontrol − (Absmuestra − Absblanco )]x100} Metabolitos Ensayos Resultados Observaciones
= secundarios
Abscontrol
Donde:
Abs control: absorbancia inicial de la solución
Flavonoides Shinoda ++ Coloración
metanólica de DPPH, amarilla
Abs muestra: absorbancia de la reacción del DPPH
con la muestra. Fenoles y/o Cloruro +++ Coloración
Taninos Férrico verde intenso
(tipo
Calcular la concentración media inhibición de la pirocatecólicos
actividad antioxidante, de la ecuación lineal del
porcentaje de actividad antioxidante versus
concentración Trolox y extractos atomizados, Esteroides Liebermann ++ Verde intenso
y/o y burchard visible
utilizando el software Excel37 triterpenoides
Tipo y diseño de investigación Leyenda:
Tipo de investigación
El presente trabajo de investigación corresponde (+): Poco / leve
a un estudio de tipo descriptivo, observacional y (++): Regular / moderado
básico, con un nivel de investigación de enfoque
cuantitativo.
Se basa en recoger información sobre la
identificación taxonómica de la planta objeto,

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(+++): Abundante / inte Tabla 2. Concentración media inhibitoria (IC50%)


200.0 de la actividad antioxidante del extracto
atomizado de las hojas de Baccharis Uniflora
contenido de fenoles y flavonoides

(Ruiz & Pav) pers “chilca”. Ayacucho – 2018


155,4 mg
160.0 AGE/g Método Trolox
Baccharis
(ug/mL)
Uniflora
120.0
(mg/g)

DPPH 39,8 ± 0,43* 286,8 ± 1,01*


80.0

DISCUSIÓN
40.0
32.23 mg
RU/g La biodiversidad es el banco de moléculas
bioactivas que demanda la industria de los
productos farmacológicos, cosmecéuticos,
0.0 nutricosméticos, fitocosméticos, de perfumes,
Fenoles Totales Flavonoides fragancias, sabores y aromas39. En tal sentido,
los metabolitos presentes en los vegetales se
TRATAMIENTO asocian con una capacidad antioxidante natural,
y que estudios epidemiológicos han mostrado
efectos benéficos para la salud humana26.
Tratamiento Fenoles totales Flavonoides
totales En la presente investigación se buscó determinar
(mgAG/g Ext. At.) el contenido de fenoles totales, flavonoides y
(mgRu/g actividad antioxidante del extracto atomizado de
Ext.At.) las hojas de Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) pers
“chilca”.
155,4 +/- 0,15 32,2 +/- 0,05
Mediante el análisis fitoquímico se pudo
Figura 1. Contenido de fenoles totales y determinar cualitativamente la presencia de
flavonoides, compuestos fenólicos, taninos,
flavonoides del extracto atomizado de las hojas
esteroides y/o triterpenos y alcaloides.
de Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) pers “chilca”.
Resultando positivo para estos metabolitos y
Ayacucho – 2018
95.45
negativo para quinonas y saponinas por lo que
100.0 este extracto atomizado de las hojas de
Actividad antioxidante (%)

Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) pers. “chilca”


80.0 presenta un alto contenido de compuestos
fenólicos que le otorgan propiedades
60.0 50.49 terapéuticas para la salud, el cual se puede
observar en la tabla 1. Así mismo, en la
40.0
25.62 identificación de esteroides y/o triterpenos, se
16.85 observa una coloración verde intenso, dada la
20.0 7.75
5.98 abundancia reconocida de los triterpenos de
0.0
origen vegetal, se han reportado diversas
25 50 100 25 50 100 propiedades de estos compuestos, donde resalta
el efecto anticancerígeno, función hepática, biliar
Trolox (ug/mL) Baccharis uniflora y propiedades antihipertensivas y
(ug/mL) antiinflamatorias40.
Tratamiento
Herrera et al41, demostraron la presencia de
compuestos fenólicos, flavonoides y alcaloides
en grandes cantidades en las hojas de Baccharis.
Tratamiento Concentración (ug/mL) latifolia. los cuales les confieren el poder
antioxidante.
25 50 100
Trolox 25,62 50,49 ± 95,45 ± 0,12+ En el extracto atomizado de las hojas de
± 0,48* Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) pers. “chilca”, los
0,98* metabolitos que predominan en mayor cantidad
son: flavonoides, fenoles, esteroides y/o
Baccharis 5,98 ± 7,75 ± triterpenos; que dicho sea de paso actúan como
Uniflora 0,32* 0,36* 16.85 ± 0,12* antioxidantes protegiendo los lípidos, la sangre y
demás fluidos corporales del ataque de radicales
ANOVA, P = 5,26 x 10-26 libres de especies del oxígeno42.
Figura 2. Porcentaje de actividad antioxidante Gutiérrez et al43, menciona que el perfil químico
por el método de DPPH del extracto atomizado de una planta medicinal es directamente
de las hojas de Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) relacionado con sus usos tradicionales,
pers “chilca”. Ayacucho – 2018 actividades biológicas y propiedades

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farmacológicas. De la Cruz44, refiere que los presentó una actividad antioxidante de 5,98 ±
flavonoides (presentes en el género Baccharis), 0,32%; 7,75 ± 0,36% y 16,85 ±0,12%
como los ácidos fenólicos demuestran fuerte respectivamente. Mientras, que el Trolox, a las
atrapamiento de radicales libres y al mismo mismas concentraciones presentó una actividad
tiempo son capaces de inhibir la formación antioxidante de 25,62 ± 0,98%; 50,49 ± 0,48% y
de estos últimos al enlazarse con iones de 95,45 ± 0,12% respectivamente (p < 0,05). Así, la
metales de transición, es por esta razón que mayor inhibición de las hojas se observó a
Almeida45, en su tesis menciona que el estudio 100ug/ml con 16,85%. Por lo que existe una
es crítico, debido a la higroscopia inherente del diferencia estadisticamente significativa
extracto atomizado y a la cantidad de extracto
añadido. Las medidas utilizadas para evitar estos Rodríguez et al47, En su trabajo de investigación
inconvenientes es adecuar un área de trabajo “Estudio morfoanatómico sobre poblaciones de
controlado el porcentaje de humedad en el baccharis microcephala y su actividad
medio. antioxidante”, mencionan que los resultados de la
investigación indican que la capacidad
El procedimiento de Folin-Ciocalteu es un depuradora del DPPH no sólo depende del
método ampliamente utilizado y proporciona una contenido total de flavonoides en los extractos
estimación rápida y útil del contenido de fenoles sino de la proporción de los compuestos.
en extractos vegetales46. Como se puede
observar en la figura 1, presenta los resultados Así mismo, Pineda et al48. mencionan que la
del contenido de fenoles totales en el extracto capacidad antioxidante depende del tipo y
atomizado de las hojas de Baccharis Uniflora concentración de los antioxidantes involucrados.
(Ruiz & Pav) pers. “chilca”, donde se determinó En las condiciones en que se encuentran varios
que dicha muestra presenta fenoles totales, de estos compuestos, el cual presenta diferente
expresados en ácido gálico por gramo de capacidad antioxidante en el estudio: Capacidad
extracto de 155,4 mg. EAG/g.EA (p < 0,05). antioxidante y potencial de sinergismo entre los
principales constituyentes antioxidantes de
En la figura 8, se muestra el contenido de fenoles algunos alimentos.
y flavonoides totales de las hojas de Baccharis
Uniflora (Ruiz & Pav) pers “chilca” que fueron de El extracto atomizado de las hojas de Baccharis
155,4 +/- 0,15 (mg EAG/g Ext. At.) y 32,2 +/- 0,05 Uniflora (Ruiz & Pav) pers. “chilca” contiene
(mg ERu/g Ext.At.), respectivamente. En este metabolitos secundarios que actúan en la
caso el contenido de compuestos fenolicos neutralización de los radicales libres, como los
totales fue mayor en cuanto al resultado obtenido fenoles y los flavonoides.
en el estudio de Khorshid Z. et al, donde el Estos flavonoides contiene en su estructura
extracto de hojas de achicoria utilizado tenia un química un número variable de grupos hidroxilo
alto contenido de flavonoides (6,82 mg/g de RE) fenólicos y excelentes propiedades de quelación
y contenido fenólico de (85 mg/g EAG) que puede del hierro y otros metales de transición, que las
ser responsable de su actividad antioxidante. Por confiere una gran capacidad antioxidante,
otro lado,Tiopanta T2, indicó que el extracto desempeñando un papel esencial en la
liofilizado de las hojas de Baccharis protección frente a los fenómenos de daño
genistelloides presentó 504,82 mg QE/g de oxidativo, y efectos terapéuticos en un elevado
flavonoides y 225,76 mg GA/g de fenoles totales, número de patologías, incluyendo la cardiopatía
que son valores superiores a los resultados isquémica, la aterosclerosis y el cáncer.45
obtenidos en esta investigación. El valor inferior
reportado en el trabajo de investigación puede El IC50 del DPPH mide la efectividad de un
estar estrechamente relacionada con las compuesto para inhibir una actividad biológica
propiedades farmacológicas y medicinales. Por y/o bioquímica49. En esta investigación se midió
ende, con lo mencionado se deja en evidencia la concentración del extracto atomizado de las
que la cantidad de fenoles y flavonoides es muy hojas de Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) pers.
variable entre una especie a otra, y esta variación “chilca”, necesarios para disminuir en un 50% la
se debe a muchos factores como el proceso de concentración inicial de los radicales libres
extracción que fueron sometidos. (DPPH+), teniendo en cuenta que a menor valor
de IC50 es mayor la actividad antioxidante30. En
El método utilizado para determinar la actividad tal sentido, en la tabla 2 nos muestra la
antioxidante fue de decoloración del radical concentración media inhibitoria de la actividad
DPPH, que nos da una confianza y seguridad en antioxidante del extracto atomizado de las hojas
los resultados, ya que es un radical estable y de Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) pers. “chilca”;
estandarizado. Para determinar la actividad donde la concentración media inhibitoria por el
antioxidante se trabajó con la curva de método DPPH, fue 286,8 ± 1,01*ug/mL. A
calibración de DPPH que se elaboró de acuerdo comparación con el trolox que fue de 39,8±
a Sousa45. En la figura 8, se presenta los 0,43*ug/mL.
resultados de la actividad antioxidante del
extracto atomizado de las hojas de Baccharis Existen trabajos de investigación que confirman
Uniflora (Ruiz & Pav) pers. “chilca”, evaluado la capacidad antioxidante de esta especie tal
según el método DPPH. Para ello se tomaron como la investigación realizada por Figueroa et
diferentes concentraciones de 25 ug/mL; 50 al49, donde se demostró que las hojas y tallos de
ug/mL y 100 ug/mL, donde dicha muestra Baccharis genistelloides “carqueja” contienen
una concentración de 0.00015 ug/mL, y

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finalmente concluyen que, el porcentaje de REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS


captación de DPPH es proporcional a la
concentración. 1. Rahman I, Afzal A, Iqbal Z, Ijaz F, Ali N, Shah
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depuradora de radicales libres (IC50=12 µg/ml). http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/
Siendo una de las especies con mejor actividad S07 38081X18300592
antioxidante a diferencia de la planta en estudio,
2. Toapanta Iza. Evaluación de la actividad anti-
Así mismo, existen trabajos de investigación que inflamatoria y citotóxica in vitro del extracto
confirman la capacidad antioxidante de esta hidroalcohólico de hojas de Baccharis
especie tal como la investigación realizada por genistelloides (Lam.) Pers. [Internet] [Tesis].
Justil, et50. Quienes trabajaron con el extracto [Riobamba]: Escuela Superior Politecnica de
etanólico de Baccharis genistelloides procedente Chimborazo; 2018. Disponible en:
de Junín, encontrando un efecto quimioprotector http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/
sobre el cáncer de colon en ratas inducido con 9554
DPPH°(IC50=0.15 µg/ml). Es necesario resaltar
la importancia de este resultado ya que con esta 3. Ascari J, de Oliveira M, Nunes D, Granato D,
pequeña concentración del extracto de Baccharis Scharf D, Simionatto E, et al. Chemical
genistelloides se puede conseguir una gran composition, antioxidant and antiinflammatory
actividad antirradicalaria. activities of the essential oils from male and
female specimens of Baccharis punctulata
Los resultados de la presente investigación como (Asteraceae). J Ethnopharmacol. [Internet]. 2019
se observa es inferior al obtenido en el extracto [citado 01 de marzo de 2019]. Disponible en:
de Baccharis genistelloides., donde los factores https://doi.org/10.1016/j.jep.2019.01.005
que pueden afectar en su capacidad
antiradicalaria son: la metodología de extracción, 4. Rodríguez M, Martínez M, Ferrari S,
el tipo de solvente y la metodología de Campagna M, Bandoni A, Gattuso S, et al.
atomización. Estudio morfoanatómico sobre poblaciones de
baccharis microcephala y su actividad
CONCLUSIONES antioxidante. comparación con otras especies de
Baccharis. Bol latinoam caribe plantas med
 Se realizó la identificación fitoquímica del aromáticas [Internet]. 2007 [citado 2 de junio de
extracto atomizado de las hojas de Baccharis 2019];6(5). Disponible
uniflora (Ruiz & Pav) Pers “chilca” en:http://www.redalyc.org/resumen.oa? id=
encontrándose metabólicos principales 85617 50 8044.
como: flavonoides, taninos, fenoles,
esteroides y/o triterpenos y alcaloides. 5. Ibáñez C, Afonso L, Tapia Y, Lizarazu J, et al.
 Se determinó el contenido de flavonoides Búsqueda de colorantes naturales en el valle de
totales del extracto atomizado de las hojas zongo con posibles propiedades antioxidantes
de Baccharis uniflora (Ruiz & Pav) Pers y/o fotoprotectoras. Investig Amp Desarro.
“chilca”. En la cual se obtuvo la cantidad de 2016;1(16):5-24.
fenoles totales de 155,4 mg equivalentes al
6. Bianchina F, Ruíz R, Gutierrez A. Capacidad
ácido gálico por gramo de extracto
antioxidante in vitro de los flavonoides totales
atomizado.
obtenidos del extracto fluido de hojas y tallos de
 Se determinó el contenido de compuestos Baccharis genistelloides. SCIÉNDO [Internet].
fenólicos del extracto atomizado de las hojas 2018;21(2):249-57. Disponible en:
de Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) pers. http://www.revistas.unitru.edu.pe/index.php/SCI
“chilca”; la cual fue de 32,2 +/- 0,05 mg ENDO/article/view/1910
equivalentes de rutina por gramo de extracto
atomizado. 7. Almeyda Rodas W. Fenoles totales y actividad
 Por último, se determinó la actividad antioxidante del extracto atomizado de las hojas
antioxidante del extracto atomizado de las de Calceolaria engleriana Kraenzl “wawillay”,
hojas de Baccharis Uniflora (Ruiz & Pav) Ayacucho 2017. [Internet] [Tesis]. [Ayacucho]:
pers. “chilca”; donde la concentración media Universidad Nacional de San Cristobal de
inhibitoria por el método DPPH fue 286,8 ± Huamanga; 2017. Disponible en:
1,01 µg/mL. A comparación con el trolox que http://repositorio.unsch.edu.
fue de 39,8± 0,43 µg/mL. Por otro lado, el pe/handle/UNSCH/2333
porcentaje de actividad antioxidante por el
8.Reynoso L, Rodríguez F. Capacidad
método DPPH a diferentes concentraciones
antioxidante del néctar de prunus pérsica
de 25 µg/Ml; 50 µg/mL y 100 µg/mL, dicha
(durazno) y aloe vera (sábila) in vitrio con el 2,2
muestra presentó una actividad antioxidante
difenil – 1 – picrilhidrazilo (dpph*) [Internet]
5,98 ± 0,32%; 7,75 ± 0,36% y 16.85 ±0,12%
[Tesis]. [Trujillo]: Universidad Nacional de Trujillo;
respectivamente. Mientras, que el Trolox, a
2016. Disponible en:
las mismas concentraciones presentó una
http://renati.sunedu.gob.pe/handle/sunedu/9790
actividad antioxidante de 25,62 ± 0,98%;
9
50,49 ± 0,48% y 95,45 ± 0,12%
respectivamente.

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