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FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MATEMATICA

Tema : Tamizaje fitoquímico posible capacidad antioxidante en diferentes


extractos de Salpichroa sanmiguelina

ALUMNO : Silva Suarez Gerson


Docente : Nora Herrera
Escuela Profesional de Química
Tamizaje fitoquímico posible capacidad antioxidante en diferentes
extractos de Salpichroa sanmiguelina

Resumen
Las plantas que proceden del género Salpichroa han presentado capacidad
antioxidante asociadas en gran número de plantas por la presencia de flavonoides .
Se encontró una nueva especie “Salpichroa sanmiguelina” en la cual se la clasifico en
este género por sus características taxonómicas y morfológicas . El presente trabajo
tiene la finalidad de caracterizar cualitativa y cuantitativamente metabolitos
presentes en los extractos de hojas , tallos y bayas de la planta ; por último, se
evaluará su capacidad antioxidante total de las diferentes partes de la planta .
1 PROBLEMA DE LA INVESTIGACION
1.1 Descripción del problema

En el mundo existen una gran cantidad de plantas con un gran número de


diversos metabolitos secundarios que provienen de diversas especies que a
pesar de pertenecer a su vez a la misma familia o subfamilia podrían tener
efectos en nuestra salud .
El uso de plantas medicinales es una práctica muy común en nuestro mundo ; de
acuerdo con la Organización mundial de la salud (OMS) el 80 por ciento de la
población de los países en desarrollo recurre a distintos tipos de ellas para
satisfacer sus necesidades médicas 2016 .
Los compuestos fenólicos se encuentran en las mayorías de plantas y la
capacidad antioxidante es una de sus propiedades mas importantes porque la
oxidación provoca daños en los ácidos nucleicos , proteínas , lípidos , y otras
macromoléculas causando así trastornos cardiovasculares y enfermedades
neurodegenerativas .
Salpichroa sanmiguelina fue encontrada entre 5 a 6 Km la provincia de San miguel
ubicado en el departamento de Cajamarca asociándola al género Salpichroa(
Fam. Solanaceae , subfam Solanoideae ) por la información taxonómica y
descriptiva de la planta ; la sospecha de su actividad antioxidante se basa que se
ya se ha estudiado la actividad antioxidante en diferentes géneros de plantas
pero que pertenecen a la misma familia : “Solanaceae” que pertenecen a la vez
a la subfamilia : Solanoideae ; por ejemplo , “Physalis peruviana” conocido como
aguaymanto hoy ampliamente conocido y consumido en nuestro país se
encontró que contienen gran potencia de actividad antioxidante debido a los
compuestos fenólicos contenidos en el fruto .Es por ello por lo que la finalidad
de este trabajo es investigar la posible capacidad antioxidante presente en las
diferentes partes de la planta Salpichroa sanmiguelina y compararlas ; si bien no
se identificara la molécula de la posible capacidad antioxidante esta investigación
será un primer avance en la investigación sobre esta nueva especie también a su
vez identificar cualitativamente y cuantitativamente los principales metabolitos
secundarios presentes.
1.2 FORMULACIÒN DE PROBLEMA

1.2.1 Problemas generales

i. ¿ Tendrá actividad antioxidante las hojas , tallo o bayas de la planta


Salpichroa sanmiguelina?
ii. ¿ Cuales son los principales metabolitos secundarios presentes en la
planta Salpichroa sanmiguelina?

1.2.2 Problemas específicos


i. ¿ Cual es la parte de la planta que posee mayor actividad antioxidante?
ii. ¿ Serán los fenoles totales y flavonoides se podrán cuantificar por el
método Folin-Ciocalteu y el método cloruro de aluminio
respectivamente ?

1.3 OBJETIVOS

1.3.1 Objetivo general


i. Determinar la actividad antioxidante de las diferentes partes de la
planta por el método DPPH.
ii. Identificar los principales metabolitos secundarios a través de ensayos
colorimétricos.

1.3.2 Objetivos específicos


i. Determinar que parte de la planta posee mayor actividad
antioxidante.
ii. Cuantificar los fenoles y flavonoides totales en la planta por el método
Folin-Ciocalteu y el método cloruro de aluminio respectivamente.
1.4 JUSTIFICACIÒN

1.4.1 Justificación teórica .- La importancia teórica de esta investigación se centra


en el estudio de la capacidad antioxidante de la planta Salpichroa
sanmiguelina , la identificación cualitativa de los metabolitos secundarios de
la planta, así como la cuantificación de los fenoles totales y flavonoides .

1.4.2 Justificación práctica .- La determinación de la capacidad antioxidante de las


diferentes partes de la planta podría contribuir para el desarrollo y
elaboración de productos naturales basándonos en la parte de la planta que
tenga mayor contenido de esta actividad .

1.4.3 justificación económica .- Uno de los usos que se le da a la planta Salpichroa


sanmiguelina según el reporte dado por segundo Leiva González
(descubridor de esta nueva especie ) fue que sus bayas maduras de color
negra de esta planta son consumidas por el hombre – supongo que de esta
localidad- por su sabor dulce y delicioso pericarpo . Es por ello que si se logra
confirmar una mediana o alta capacidad antioxidante en esta parte de la
planta podríamos brindarle un valor agregado a este fruto de la planta y
podríamos fomentar su comercialización .
2 MARCO TEÒRICO
2.1 Antecedentes
2.1.1 Nacionales
i. Estudios realizados por la alumnos UNMSM conformado por ( Jurado
Teixeira, Bertha, Aparcana Ataurima, Isabel Mercedes, Villarreal Inca,
Leydi Steffani, Ramos Llica, Eva, Calixto Cotos, María Rosario, Hurtado
Manrique, Paola Estefanía, & Acosta Alfaro, Katherin María del Carmen.
(2016). Evaluaron el contenido de polifenoles totales y la capacidad
antioxidante de los extractos etanólicos de los frutos de aguaymanto
(Physalis peruviana L. que pertenece a la misma familia y sub familia que
la planta Salpichroa sanmiguelina) de diferentes lugares del Perú. La
investigación tuvo como objetivos valorar y comparar el contenido de
polifenoles totales por el método de Folin-Ciocalteu y la capacidad
antioxidante de los frutos de Physalis peruviana L., provenientes de
Huánuco, Junín, Ancash y Cajamarca, por el método del DPPH (1,1-
difenil-2-picrilhidrazilo). El fruto procedente de Huánuco presentó
mayor contenido de compuestos fenólicos expresados como 149,3
± 1,62 mg/Eq de ácido gálico/100 g de fruto. Asimismo, mayor
capacidad antioxidante obteniendo como concentración inhibitoria
IC50 1,86 mg/mL, comparado con los frutos provenientes de Junín,
Ancash y Cajamarca; por lo que resultaría una buena fuente para
la elaboración de diversos productos alimenticios benéficos para la
salud (funcionales o nutraceúticos) y para la economía.
2.1.2 Internacionales
i. Estudios demostrados ( Wu et al . 2005; Chang et al. 2008) Taiwan. por
demostraron que la planta Physalis peruviana que pertenece a la misma
familia y subfamilia que la planta Salpichroa sanmiguelina presenta
actividades antioxidantes . Este estudio comprobó un alto poder
antioxidante y niveles altos de flavonoides y contenido fenólico
especialmente en los frutos de la planta. El objetivo de este estudio fue
examinar las actividades antioxidantes del extracto PPEW y su efecto
protector contra la hepatotoxicidad inducida por acetaminofén (APAP) en
ratas .Usando diferentes modelos de ensayo antioxidante como, por
ejemplo : tiocianato férrico, 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo (DPPH) y poder
reductor, el PPWE (que fue el nombre del extracto acuoso de P. peruviana
) mostró un aumento dependiente de la dosis en las actividades
antioxidantes, con actividad antioxidante total (IC 50 : 0,81 μ g / ml)
cercano al de la vitamina C (IC 50: 0,89 μ g / ml) . Si nos basamos solo en el
contexto del estudio la capacidad antioxidante el análisis cromatográfico
de líquidos de alta resolución mostró que el ácido elágico (aprox. 0,2%),
pero no otros, podría ser el componente principal que contribuye a las
actividades antioxidantes del PPWE. El presente estudio concluye que
PPWE posee actividad antioxidante y un potente efecto hepatoprotector
contra la lesión hepática inducida por APAP en ratas .

ii. Otra especie en la que se ha reportado la presencia de flavonoides es P.


solanaceus que pertenece a la misma familia y subfamilia que la planta
Salpichroa .Esta planta es nativa de México y está ampliamente
distribuida en el país (Nee, 1986; Villaseñor et al. 1998). Su fruto es una
baya ovoide o esférica, glutinosa que se consume en algunas zonas rurales
de diferentes estados del país (Miranda et al.2006). Trabajos previos
reportan flavonoles como rutina y glucósidos de quercetina en el cáliz y
en las raíces de la planta ,los cuales fueron extraídos mediante solventes
orgánicos, para luego ser particionados y purificados mediante
cromatografía, la elucidación estructural de estos flavonoles se llevó a
cabo mediante espectroscopia de resonancia magnética nuclear (Pérez-
Castorena et al. 2013). P. solanaceusjunto con otras diez especies forma
la sección Angulatae (subgénero Rydbergis) (Martínez, 1998).Aunque la
sección contiene unas pocas especies sólo los cálices de P. ixocarpa han
sido estudiados y cuatro flavonoides, tres de ellos glicósidos de
quercetina fueron aislados (Matlawska et al.1994).En el caso de las
raíces, sólo las de tres especies de la sección Angulatae, P. angulata, P.
ixocarpa, y P.philadelphica han sido analizadas hasta el momento (Basey
et al.1992).
2.2 BASES TEORICAS

2.2.1 Historia en el estudio de las plantas medicinales en el Perú y el mundo

El primer investigador peruano fue el doctor Noriega que en año 1937 realizó
estudios en seres humanos con plantas alucinógenas, como el Toe (Datura
suaveolens), Ayahuasca (Banisteriopsis) y “San Pedro” (Opuntia cilíndrica o
Trichocereus pachanoi), en 1955, relacionó las plantas con sus propiedades
farmacológicas . Si hablamos del origen del estudio de las plantas medicinales
tendríamos que mencionar a la antigua Sumeria en la cual se estudió cientos
de plantas medicinales incluyendo mirra y opio están listadas en tabletas de
arcilla. En el antiguo Egipto, los papiros de Ebers listan más de 800 plantas
medicinales, tales como el aloe, cannabis, ricino, enebro y mandrágora.
Judith., Sumner, (2000). medicina ayurvédica, como se documenta en
el Athara Veda, el Rig Veda y el Suruta Samhita, ha usado cientos de hierbas
y especias farmacológicamente activas, como por ejemplo la cúrcuma que
contiene curcumina Aggarwal, Bharat B.; Sundaram, Chitra; Malani, Nikita;
Ichikawa, Haruyo (2007). La farmacopea china registra plantas medicinales
en el Shennong Ben Cao Jing, que incluyen chaulmoogra para
tratar lepra, efedra y cáñamo Judith., Sumner, (2000). The natural history of
medicinal plants Esta se expandió en la dinastía Tang. Wu, Jing-Nuan, (2005).
En el siglo IV antes de Cristo, Teofrasto, discípulo de Aristóteles, escribió el
primer texto de botánica sistemática, llamado Historia plantarum. Grene,
Marjorie, (2004) En el siglo I después de Cristo, el médico griego Pedanías
Dioscorides documentó más de 1.000 recetas de medicinas con base en más
de 600 plantas medicinales, en De materia medica. Este documento siguió
siendo la referencia autorizada sobre herboristería por más de 1.500 años,
hasta el siglo XVII

2.2.2 Descripción botánica Salpichroa sanmiguelina

Salpichroa sanmiguelina es una nueve especie del norte del Perú habita entre
km 5-6 entre San Miguel-El Empalme (a un km arriba del río), prov. San
Miguel, región Cajamarca, Perú, entre los 06º 58’11,4”-5º 58’25,0” S y
78º50’21,6”-78º50’06,0” W, y entre 2777-2842 m de elevación.

i. Tallos : Tallos viejos 4-angulosos (alas membranosas, marrón claro,


glabras), geniculados, compactos, sin lenticelas, glabros, nunca
ruminados, 8-12 mm de diámetro en la base; tallos jóvenes rollizos a
veces ligeramente uno angulosos, geniculados, verdes, lustrosos,
compactos, sin lenticelas, glabros a veces rodeados por una cobertura
de algunos pelos simples eglandulares transparentes con mayor
densidad en los nudos.
ii. Hojas : Hojas alternas; pecíolo semirrollizo, verde, verde intenso los
bordes en la superficie adaxial, glabrescente rodeado por una
cobertura de algunos pelos simples eglandulares transparentes en la
superficie adaxial, glabro la superficie abaxial, 9-13 mm de longitud;
lámina lanceolada a ligeramente cordiforme, suculenta, verde intenso
la superficie adaxial, verde claro la superficie abaxial, opaca en ambas
superficies, glabra a veces glabrescente rodeada por una cobertura de
algunos pelos simples eglandulares transparentes sobre las
nervaduras principales en la superficie adaxial, glabra a veces
glabrescente rodeadas por escasos pelos simples eglandulares
transparentes la superficie abaxial, aguda en el ápice, redondeada en
la base, entero en el borde, 33-46 mm de largo por 21-22 mm de
ancho.

iii. Flores : Flores solitarias, pentámeras; pedúnculo 5-anguloso


ampliándose gradualmente hacia el área distal, verdo amarillento,
nutante, glabro, 7-8 mm de longitud

iv. Caliz : Cáliz ampliamente campanulado con 5 abultamientos al nivel


de las nervaduras principales en el área basal, verde externamente,
verdoso interiormente, glabro externa e interiormente, suculento,
aplanado las nervaduras principales, 3-3,2 mm de diámetro del limbo
en la antesis; limbo 5-lobulado; lóbulos largamente triangulares
(=deltoideos disminuyendo hacia el área distal), verde externamente,
verdoso interiormente, glabros externa e interiormente, ciliados
rodeados por una cobertura de algunos pelos simples eglandulares
transparentes y algunos escasos pelos glandulares transparentes en
los bordes, suculentos, adpresos a la corola, nunca revolutos,
aplanados las nervaduras principales, 5,7-5,8 mm de largo por 1,2- 1,3
mm de ancho; tubo 1-1,1 mm de largo por 2,6-3 mm de diámetro.

v. Corola : Corola tubular, urceolada el ¼ basal, angostamente tubular en


la altura media, ligeramente inflada el ¼ distal, constricta el área distal,
amarillenta externa e interiormente, glabra externa e interiormente,
se rompe con facilidad, suculenta, sobresalientes las nervaduras
principales, 5-5,5 mm de diámetro del limbo en la antesis; limbo 5-
lobulado; lóbulos triangulares, amarillo intenso externa e
interiormente, glabros externa e interiormente, ciliados rodeados por
una cobertura de pelos simples eglandulares transparentes en los
bordes, suculentos, reflexos en los ápices, involutos en los bordes,
sobresalientes las nervaduras principales, 3-3,3 mm de largo por 1,9-
2 mm de ancho; tubo (17-) 18,3-18,5 mm de largo por 3,8-4 mm de
diámetro (base), 2,4-2,5 mm (medio), 3,3-3,4 mm (distal) de diámetro.
Estambres 5, apostémonos, criptostémonos, insertos en el ¼ distal del
interior del tubo corolino; filamentos estaminales homodínamos; área
libre de los filamentos estaminales lineares aplanados ampliándose
gradualmente hacia el área distal, verdosos, glabros, 1,8-1,9 (-2) mm
de longitud; área soldada aplanada, blanquecina, glabra, 10-11 mm de
longitud; anteras lineares, paralelas, blanquecinas, blanco las suturas,
verde el conectivo, sin mucrón apical incipiente, glabras, 2,2-2,3 mm
de largo por 0,7-0,8 mm de diámetro
vi. Ovario Piriforme : Ovario piriforme, verde disco nectarífero rojo
intenso poco notorio que ocupa el 10- 20% de su longitud basal, 5-
anguloso, 4-4,4 mm de largo por 1,8-2 mm de diámetro; estilo incluso,
filiforme ampliándose gradualmente hacia el área distal, erecto,
blanco cremoso, glabro, 11-12,3 mm de longitud; estigma capitado,
bilobado, verde intenso, 0,5-0,6 mm de alto por 0,8-0,9 mm de
diámetro.
vii. Baya nutante : Baya nutante, globosa a ligeramente oblonga, negra a
la madurez, estilo persistente, 12,2-12,5 mm de largo por 12-12,2 mm
de diámetro; cáliz fructífero persistente, acrescente, adpreso
envuelve ajustadamente el ¼ basal de la baya, 4-5 mm de largo por
10-10,2 mm de diámetro. Semillas 9-14 por baya, orbiculares, marrón
claro (inmaduras), reticulado foveolado el epispermo, 2,7-28 mm de
largo por 2,7- 2,8 mm de diámetro; embrión circinado, blanco
cremoso, dos cotiledones desiguales (interno largo, externo corto),
1,7-1,8 mm de largo por 1,7-1,8 mm de diámetro.

2.2.3 Medición de la capacidad antioxidante por el método DPPH


El Fundamento del método desarrollado por( Brand-Willamset al), DPPH, consiste en
que este radical tiene un electrón desapareado y es de color azul-violeta,
decolorándose hacia amarillo pálido por reacción con una sustancia antioxidante; la
absorbancia es medida espectrofotométricamente a 517nm. La diferencia de
absorbancias permite obtener el porcentaje de captación de radicales libres.
Posteriormente, con los valores de las absorbancias obtenidas se determinó el % de
captación de radicales libres (DPPH) mediante la siguiente formula:
2.2.4 Tamizaje fitoquímico de metabolitos secundarios mediante métodos
colorimétricos .
i. Fenoles totales y/o taninos. Se realizó mediante el método del cloruro férrico
(Chhabra et al., 1984).
ii. Flavonoides. Se utilizó el ensayo de Shinoda (Bonilla-Rios et al., 2014).
iii. Saponinas. La identificación de saponinas se realizó mediante el método de
la espuma. (Robles-García et al., 2016).
iv. Cumarinas. Para la determinación cualitativa de cumarina, se utilizó la prueba
del hidróxido de sodio. (Vázquez y García-Vieyra, 2017).
v. Quinonas. La determinación colorimétrica de quinonas se realizó la prueba
de ácido sulfúrico (Vázquez y García-Vieyra, 2017).
vi. Terpenoides. La identificación de terpenoides según la metodología de
Vázquez y García-Vieyra (2017).

2.2.5 Determinación cuantitativa de fenoles totales y flavonoides .

i. Fenoles totales. La determinación cuantitativa de fenoles totales se realizó


mediante el método de Folin-Ciocalteu, según lo planteado por Ocampo et al.
(2014) con algunas modificaciones. Losresultados se expresaron en mg de
ácido ascórbico/mg de extracto.
ii. Flavonoides. El estudio cuantitativo de flavonoides se realizó mediante el
método del cloruro de aluminio, según precisiones citadas por Chekol y Desta
(2018), algunas modificadas. Los resultados se expresarán como mg de
quercetina /mg de extracto .

3 HIPOTESIS : implícita
Salpichroa sanmiguelina tiene capacidad antioxidante en la hoja parte de la planta
.Esta sospecha se basa en que se ha hecho estudios en otras especies distintas al de
la planta pero que poseen la misma familia y subfamilia como en el caso del
aguaymanto Physalis peruviana .
Variable dependiente : La actividad antioxidante y cuantificación fenoles totales y
flavonoides.
Variable independiente : numero de veces que se mide la actividad antioxidante
por método DDPH ( por triplicado )
REFERENCIAS
LEIVA GONZALEZ, Segundo.Salpichroa sanmiguelina (Solanaceae) una nueva especie del Norte del
Perú. Arnaldoa [online]. 2018, vol.25, n.2, pp.355-364. ISSN 1815-
8242. http://dx.doi.org/http://doi.org/10.22497/arnaldoa.252.25204.

Matlawska, I., M. Wojcinska, L. S. Jankiewicz & Z. Kowalewski. 1994. Flavonoids of Physalis ixocarpa.
Acta Pol. Pharm. 51, 263-265.

Menzel, Y. M. 1951. The citotaxonomy and genetics of Physalis. Proc. Am. Philos. Soc. 95(2), 132-183.

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