TP Bleu Patenté - Enoncé Du TP 1

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FSTBM – Département de chimie Année universitaire 2021/2022

Travaux pratiques :

Détermination de la concentration du «Bleu patenté / E131 » par spectrophotométrie UV-


Visible

1. Généralités sur la spectrophotométrie UV-Visible :

La technique de spectrophotométrie est basée sur la propriété de la matière, et plus


particulièrement de certaines molécules, d'absorber certaines longueurs d'ondes du spectre
UV-visible.

• Elle nous permet de déterminer la concentration d’une substance chimique,

• Elle est généralement associée à la colorimétrie, ou on mesure la couleur d’une


substance,

• Elle peut aussi nous renseigner sur les groupements qu’on a, mais l’information est
très peu signifiante;

Intérêts de la spectroscopie UV-Visible :

● Large domaine d’applications (Chimie minérale, organique, biochimie), 90% des


analyses médicales;
● Analyses quantitatives (loi de Beer-Lambert);
● Grande sensibilité : limite de détection ≈ 10-5 M;
● Précision : 1 - 5% erreur;
● Simplicité, rapidité.

Les composants clés des spectrophotomètres UV-visibles sont:

• Une source qui génère une large bande de rayonnement électromagnétique (UV et
visible);

• Un dispositif de dispersion (monochromateur) qui sélectionne une ou plusieurs


longueurs d'onde particulières;

• Une cellule échantillon;

• Un ou plusieurs détecteurs pour mesurer l'intensité du rayonnement.


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La Loi de Beer-Lambert:

ε : est le coefficient d’extinction molaire à une longueur d’onde donnée, en L mol -1 cm-1 ;

est le trajet optique en cm;


c : est la concentration de la solution étudiée mol L-1.

2. A propos du bleu patenté V (E131):

Le bleu patenté V est un additif alimentaire autorisé en France. Son code E131 indique par la
lettre E qu’il s’agit d’un colorant, le nombre associé correspond à sa couleur bleue. Sa dose
journalière admissible (DJA) est de 2,5 mg par kilogramme de masse corporelle.

Figure 1: Représentation de la molécule de « Bleu patenté V ».

La couleur perçue :

Une espèce incolore n’absorbe aucune radiation du spectre visible. Lorsqu’une espèce
chimique n’absorbe que dans un seul domaine de longueurs d’onde du visible, Sa couleur est
la couleur complémentaire de celle des radiations absorbées.

Exemple:

Si on a du rouge, on absorbe du cyan.

Si on a du jaune, on absorbe du bleu.


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Figure 2 : Schéma représentatif des couleurs complémentaires et leurs longueurs d’ondes.

3. Protocole expérimentale :

- Diluez le « Sirop de menthe » 10 fois, avec de l’eau distillé.


- Sur le spectrophotomètre UV-Vis, faites un balayage du « Bain de bouche » et du
« Sirop de menthe » dilué, entre 400nm et 700nm.
- Peser à l’aide d’une balance analytique 10 mg de Bleu Patenté V.
- Introduisez la masse pesée dans une fiole jaugé de 1L et complétez jusqu’au trait
jaugé pour obtenir une solution (S0) de concentration de 10 mg/L.
- En utilisant la solution S0, préparez différentes concentrations pour établir une
courbe d’étalonnage (6, 4, 3, 2, 1 mg/L).
- Afficher la radiation lumineuse de longueur d'onde  correspondant au maximum
d’absorption.
- Mesurez l’absorption des solutions préparées ; établissez la courbe d’étalonnage.
- Calculez la concentration du « Bain de bouche » et du « Sirop de menthe » dilué.
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Conseils pratiques :

● Allumer l’appareil au moins 15 minutes avant utilisation ;

● Toujours s’assurer que l’appareil est sur la bonne longueur d’onde ;

● Tenir la cuve depuis ses côtés opaques et bien nettoyer les côtés claires avant
lecture ;

● Mettre les cuves correctement dans le spectrophotomètre : il faut que la lumière


traverse les côtés transparents des cuves.

● Toujours faire le zéro avec le solvant utilisé ;

● Ne pas dépasser une absorbance de 1,2 ;

● Utilisez une cuve en quartz pour les longueurs d’onde de moins de 350 nm ;

● Assurez-vous que la courbe d’étalonnage respecte la règle et .


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