FLAG-Tag
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Das FLAG-Tag ist ein Protein-Tag, das bei der Proteinreinigung und Proteincharakterisierung von rekombinanten Proteinen verwendet wird.
Eigenschaften
[Bearbeiten | Quelltext bearbeiten]Das FLAG-Tag hat die Aminosäuresequenz DYKDDDDK.[1] Dadurch vergrößert sich die Masse um 1012 Da. Es kann am N-Terminus oder am C-Terminus des rekombinanten Proteins angehängt werden und auch als TAP-Tag, jedoch wird es von manchen Antikörpern nur am N-Terminus erkannt und gebunden, z. B. M1/4E11. Gelegentlich ist das Tyrosin im FLAG-Tag sulfatiert, wodurch die Antikörperbindung beeinträchtigt werden kann.[2] Wie bei anderen Protein-Tags kann eine Protease-Schnittstelle zwischen das rekombinante Protein und das FLAG-Tag eingefügt werden, um nach der Reinigung das FLAG-Tag proteolytisch abzuspalten.
Einzelnachweise
[Bearbeiten | Quelltext bearbeiten]- ↑ Thomas P. Hopp, Kathryn S. Prickett, Virginia L. Price, Randell T. Libby, Carl J. March, Douglas Pat Cerretti, David L. Urdal, Paul J. Conlon: A Short Polypeptide Marker Sequence Useful for Recombinant Protein Identification and Purification. In: Bio/Technology. 6, 1988, S. 1204, doi:10.1038/nbt1088-1204.
- ↑ M. R. Hunter, N. L. Grimsey, M. Glass: Sulfation of the FLAG epitope is affected by co-expression of G protein-coupled receptors in a mammalian cell model. In: Scientific reports. Band 6, Juni 2016, S. 27316, doi:10.1038/srep27316, PMID 27273047, PMC 4895180 (freier Volltext).