94 Indo. J. Chem.

, 2006, 6 (1), 94 - 98

SYNTHESIS AND PHYSICOCHEMISTRY PROPERTIES PREDICTION OF A NEW

POTENTIAL ANTI-INFLAMMATORY AGENT: DIACETYL PENTAGAMAVUNON-1

Sintesis Dan Prediksi Parameter Fisikokimia Senyawa Baru Berpotensi Anti-Inflamasi:

Diasetil Pentagamavunon-1

Supardjan A. Margonoa,*, Pudjonoa, St. Layli Prasojob, Jeffry Julianusa

and Enade Perdana Istyastonoc
a
Department of Pharmaceutical Chemistry, Faculty of Pharmacy,
Gadjah Mada University, Sekip Utara Yogyakarta 55281
b
Centre for Education and Research ENADION - Yogyakarta
c
Department of Pharmaceutical Chemistry, Faculty of Pharmacy,
University of Sanata Dharma, Paingan, Maguwoharjo Yogyakarta 55281

Received 24 March 2006; Accepted 31 March 2006

ABSTRACT

Synthesis and physicochemistry properties prediction of a potential anti-inflammatory agent, diacetyl

pentagamavunon-1 (diacetyl PGV-1), has been done. The synthesis was using pentagamavunon-1 (PGV-1)
-3 -3 -3 -3
(2,87x10 mole) and anhydride acetic acid (26x10 mole; 37x10 mole; 49x10 mole) as starting materials and
NaOH ethanolic as a catalyst. The AM1 semiempirical quantum-chemical calculations using the computational
chemistry approach was used to predict and compare the physicochemisty properties of diacetyl PGV-1 to PGV-1.
-3 -3
Odorless, light-yellow powder has been obtained. The powder was 0.8512–0.9602 g (2.02 x10 – 2.22x10 mole;
70.4–77.4%) and the purity of the powder was 92.4%. The purity of the product has been examined by high
1
performance liquid chromatography (HPLC), while the structure elucidation has been done using IR (Infra Red), H-
NMR (Nuclear Magnetic Resonance) and MS (Mass Spectroscopy). The physicochemisty properties prediction
showed that diacetyl PGV-1 was more hydrophobic than PGV-1.

Keywords: Anti-inflammatory, PGV-1, diacetyl PGV-1, AM1.

PENDAHULUAN asam arakidonat menjadi prostaglandin G2 (PGG2)

melalui jalur COX dan mengganggu metabolisme
Asam asetil salisilat atau aspirin (Gambar 1) prostaglandin H2 (PGH2) dari PGG2) [1,3,4].
merupakan obat anti-inflamasi yang telah dipergunakan Berdasarkan hasil penelitian diketahui aspirin
sejak 1897 dan hingga saat ini masih dipergunakan dan selektif terhadap COX-1 yang terkait dengan efek
menarik perhatian peneliti terkait dengan mekanisme samping yang merugikan pada saluran pencernaan
molekulernya [1]. Aspirin merupakan satu-satunya obat dan ginjal sehingga perlu dikembangkan senyawa
anti-inflamasi yang berikatan secara kovalen dengan yang selektif COX-2 [2]. Kalgutkar et al. menggunakan
siklooksigenase (COX), enzim yang bertanggung jawab aspirin sebagai senyawa penuntun untuk
pada pembentukan mediator inflamasi, prostaglandin pengembangan senyawa baru analog aspirin yang
[1,2]. Asetilasi residu serin 530 pada COX-1 dan residu mampu mengasetilasi secara selektif COX-2 [1].
serin 516 pada COX-2 dapat mengganggu metabolisme Senyawa 2,5-bis(4’-hidroksi-3’,5’-dimetil-benzi-
O liden)-siklopentanon (Gambar 2) diketahui memiliki
aktivitas sebagai anti-inflamasi [5], dan telah
dipatenkan oleh Fakultas Farmasi Universitas Gadjah
OH Mada dan diberi nama pentagamavunon-1 (PGV-1).
Diasetil pentagamavunon-1 (diasetil PGV-1) (Gambar
3) merupakan bentuk ester asetat dari PGV-1.
Esterifikasi PGV-1 merupakan salah satu modifikasi
O yang dilakukan untuk mendapatkan senyawa turunan
PGV-1 yang berpotensi memiliki aktivitas anti-
inflamasi. Keberadaan gugus asetil pada diasetil PGV-
O 1 juga diharapkan dapat seperti aspirin, yang dapat
Gambar 1 Aspirin mengasetilasi residu serin 530 pada COX-1 dan residu
serin 516 pada COX-2 [3] namun dengan selektivitas

* Corresponding author.

Supardjan A. Margono, et al.

 Indo. J. Chem., 2006, 6 (1), 94 - 98 95

Liquid Chromatography (HPLC) (Shimadzu), dan alat

O gelas pada umumnya.
Prediksi Parameter Fisikokimia
Perangkat keras berupa satu set komputer yang
mampu melakukan perhitungan kimia komputasi.
Perangkat lunak CS ChemDraw Ultra untuk pemodelan
molekul dua dimensi (2D). Perangkat lunak
HO OH
HyperChem Pro ver. 6.0 untuk melakukan perhitungan
kimia kuantum dan prediksi sifat fisikokimia.
Gambar 2. PGV-1
Prosedur penelitian
O
Sintesis Diasetil PGV-1
-3
Senyawa PGV-1 sejumlah 2,87x10 mol (1 g)
dimasukkan dalam larutan 10% NaOH dalam etanol
O
dan dihangatkan di atas waterbath pada suhu 50-60 C
O O
sampai larut, yang ditandai dengan terbentuknya
warna merah, kemudian didiamkan selama satu
malam. Larutan tersebut kemudian ditambah dengan
O O anhidrida asetat, diaduk selama tiga jam di atas
O
Gambar 3. Diasetil PGV-1 waterbath pada suhu 50- 60 C, dengan perbandingan
mol PGV-1 : mol anhidrida asetat = 1:9; 1:13; 1:17.
pada COX-2 guna menghindari efek samping yang biasa Endapan dikumpulkan dan dicuci dengan air sampai
dimiliki oleh obat anti-inflamasi non steroid [1-3]. netral, kemudian dicuci dengan etanol. Analisis hasil
Prediksi sifat fisikokimia dilakukan untuk dilakukan dengan mengukur titik lebur, dan dilanjutkan
membandingkan lipofilisitas diasetil PGV-1 dengan uji kemurnian dengan HPLC (kolom C18; fase gerak
PGV-1. Diasetil PGV-1 diharapkan lebih lipofilik daripada asetonitril : ammonium asetat 0,05 M = 70 :30).
PGV-1 sehingga lebih mudah diabsorbsi melalui Elusidasi struktur dilakukan dengan spektrofotometri
membran. Prediksi sifat fisikokimia dilakukan infra merah, spektrofotometri UV-Vis, spektroskopi
menggunakan metode kimia komputasi semiempirik 1
resonansi magnetik inti ( H-NMR), dan spektroskopi
AM1. Metode semiempirik AM1 memberikan hasil massa.
analisis HKSA yang baik, seperti pada seri turunan
kurkumin sebagai inhibitor GST kelas mu [6,7], dan Prediksi Parameter Fisikokimia
sebagai antioksidan dibandingkan dengan metode PM3 Senyawa PGV-1 dan diasetil PGV-1 dibuat
[8]. Selain itu metode AM1 dapat digunakan untuk struktur dua dimensi (2D) menggunakan paket program
memprediksi struktur 3D dari 15-fenilprotoporfirin IX [9]. CS ChemDraw Ultra, kemudian dipindahkan ke paket
AM1 telah dikembangkan pula oleh Nakano et al. untuk program HyperChem dan dilakukan penambahan atom
mendapatkan metode baru perhitungan muatan bersih H untuk melengkapi strukturnya dan dibentuk menjadi
atom [10]. struktur tiga dimensi (3D). Pada struktur 3D dilakukan
optimasi sudut torsi substituen pada residu benzena.
METODE PENELITIAN Optimasi sudut torsi dilakukan pada metode mekanika
molekul MM+ menggunakan fasilitas Potential pada
Bahan
menu Compute.
PGV-1 (Laboratorium Molnas UGM); natrium Struktur yang terbentuk dioptimasi geometri
hidroksida, anhidrida asetat, etanol, asetonitril, dan menggunakan metode semiempirik AM1 yang
amonium asetat. Semua bahan-bahan di atas buatan disediakan oleh paket program HyperChem dengan
Merck dan berkualitas pro analisis (p.a). algoritma Polak-Ribiere. Batas konvergensi ditentukan
setelah tercapai gradien 0,001 kkal/Å.mol.
Alat Dilakukan perhitungan Single Point pada struktur
hasil optimasi menggunakan metode semiempirik AM1.
Sintesis Diasetil PGV-1 Log file perhitungan disimpan untuk mengetahui
Termopan (Reichert Austria; Nr.340 579), momen dipol (µ), dan panas pembentukan (Hf)
spektrofotometer IR (Shimadzhu FTIR-8201 PC), molekul hasil optimasi.
spektrofotometer UV-Vis (Spectronic Genesys 5 Milton
1
Roy), spektrometer H-NMR (JEOL-MY 60), HASIL DAN PEMBAHASAN
spektrometer massa (Mariner Mass), High Performance
Sintesis Diasetil PGV-1

Supardjan A. Margono, et al.

96 Indo. J. Chem., 2006, 6 (1), 94 - 98

1
Sintesis diasetil PGV-1 dilakukan tiga kali dengan a. Spektrum H-NMR PGV-1 (d6-DMSO) [5] =
perbandingan mol PGV-1 : anhidrida asetat: 1 : 9; 1 : 13; δ 2,24 ppm (singlet (s), 12 H, -CH3); 3,04 ppm (s,
dan 1 : 17. Hasil sintesis diperoleh serbuk berwarna 4H, siklopentanon-CH2); 7,28 ppm (s, 6H, -CH=C-
kuning terang. Serbuk yang diperoleh pada sintesis dan Ar-H); 8,92 ppm (s, 2H, -OH).
-3 1
pertama sebesar 0,8512 g (2,02x10 mol; rendemen = b. Spektrum H-NMR diasetil PGV-1 (CDCl3) =
o
70,4%) dengan titik lebur 200-210 C, pada sintesis δ 2,24 ppm (s, 12 H, -CH3); 2,4 ppm (s, 6H, -CO-
-3
kedua sebesar 0,9342 g (2,18x10 mol; rendemen = CH3); 3,1 ppm (s, 4H, siklopentanon-CH2); 7,32 ppm
o
76,1%) dengan titik lebur 197-202 C dan pada sintesis (s, 4H, Ar-H); 7,5 ppm (s, 2H, -CH=C-).
-3 1
ketiga sebesar 0,9602 g (2,22x10 mol; rendemen = Dari perbandingan spektrum H-NMR tersebut
o
77,4%) dengan titik lebur 196-204 C. terlihat adanya substitusi proton hidroksi fenolik (δ 8,92
Kromatogram HPLC menunjukkan ada 2 puncak ppm) oleh proton residu asetil (δ 2,4 ppm). Hal ini
dengan puncak dominan ditunjukkan pada waktu retensi menunjukkan bahwa senyawa merupakan hasil
(Rt) = 6,61 menit, diduga merupakan senyawa diasetil diasetilasi dari PGV-1 dan semakin menegaskan
PGV-1. Puncak pada Rt 6,61 menit tersebut memiliki bahwa senyawa hasil sintesis merupakan diasetil PGV-
luas area 92,4%. Setelah dilakukan pencucian dengan 1.
etanol, senyawa hasil sintesis mempunyai titik lebur Hasil pengujian titik lebur dan HPLC
o
240,1-241,4 C. Untuk memastikan struktur senyawa mengindikasikan bahwa produk hasil sintesis tidak
tersebut dilakukan elusidasi struktur secara murni. Dari hasil MS diketahui bahwa pengotor
+
spektrometri. Hasil uji spektrofotometri UV-Vis memiliki m/z = 391 (M+H) , atau BM = 390 sma.
menunjukkan bahwa PGV-1 dalam etanol memiliki maks Pengotor diduga merupakan monoasetil PGV-1 yang
= 406,0 nm, sedangkan senyawa hasil sintesis dalam memiliki BM = 390 sma. Diasetil PGV-1 ditemukan
+
etanol memiliki maks = 367,0 nm. Hal ini menimbulkan sebagai puncak dengan m/z = 433 (M+H) , atau BM =
dugaan awal bahwa senyawa hasil sintesis merupakan 432 sma. Hal ini semakin menegaskan bahwa
senyawa yang berbeda dengan PGV-1 dan diharapkan senyawa hasil sintesis merupakan diasetil PGV-1.
merupakan diasetil PGV-1.
Hasil uji spektrofotometri IR pada PGV-1 dan Prediksi Parameter Fisikokimia
diasetil PGV-1 disajikan sebagai berikut: Struktur 3D PGV-1 yang telah dilakukan optimasi
a. Bilangan gelombang puncak-puncak pada spektrum sudut torsi substituen pada residu benzena disajikan
-1
IR PGV-1 (dalam pelet KBr) = 3357,8 cm (sedang); pada Gambar 4, sedangkan struktur diasetil PGV-1
-1 -1 -
2920,0 cm (lemah); 1672,2 cm (lemah); 1585,4 cm disajikan pada Gambar 5. Pada PGV-1 dilaporkan
1 -1
(kuat); 1533,3 cm (sedang). memiliki sudut torsi C15-C14-C22-H42 PGV-1 sebesar
o
b. Bilangan gelombang puncak-puncak pada spektrum 0,0 , begitu pula sudut torsi C16-C15-O26-H50, C17-
-1
IR diasetil PGV-1 (dalam pelet KBr) = 2922,0 cm C16-C21-H37, C2-C3-C23-H45, C6-C1-C24-H47 dan
-1 -1
(lemah); 1759,0 cm (kuat); 1693,4 cm (sedang); C1-C2-O25-H49. Pada diasetil PGV-1 dilaporkan
-1 -1
1627,8 cm (kuat); 1596,9 cm (sedang). memiliki sudut torsi C3-C2-O25-C26 dan C14-C15-
o
Dari perbandingan spektrum IR tersebut terlihat 029-C30 sebesar -90,0 , sudut torsi C2-O25-C26-O27
o
bahwa senyawa hasil sintesis merupakan senyawa yang dan C15-O29-C30-O31 sebesar 0,0 , sudut torsi O25-
o
berbeda dari PGV-1 sebagai starting material. Analisis C26-C28-H55 dan O29-C30-C32-H58 sebesar 180 ,
spektrum IR [11] menunjukkan bahwa produk sudut torsi C4-C3-C23-H49 dan C13-C14-C22-H46
o
merupakan PGV-1 yang telah kehilangan gugus sebesar 15,0 , dan sudut torsi C2-C1-C24-H53 dan
o
hidroksil. Hal ini ditunjukkan dengan tidak munculnya C15-C16-C21-H45 sebesar 45 . Struktur-struktur
-1
puncak pada 3357,8 cm yang ada pada spektrum IR tersebut dijadikan titik awal optimasi geometri
PGV-1 di spektrum IR diasetil PGV-1. Spektrum IR juga menggunakan metode kimia kuantum semiempirik
menunjukkan bahwa senyawa hasil sintesis merupakan AM1.
PGV-1 dengan tambahan gugus karbonil. Hal ini Struktur 3D hasil optimasi geometri dengan
ditunjukkan pada spektrum IR diasetil PGV-1 oleh dua metode semi empirik AM1 PGV-1 disajikan pada
-1
puncak yang tajam dan kuat pada 1627,8 cm dan Gambar 6, sedangkan diasetil PGV-1 disajikan pada
-1
1759,0 cm , sedangkan pada spektrum IR PGV-1 Gambar 7. Baik PGV-1 maupun diasetil PGV-1
hanya ada satu puncak yang tajam dan kuat pada menunjukkan bahwa residu benzena dengan cincin
-1
1672,2 cm . Hal ini semakin memperkuat dugaan siklopentanon tidak saling koplanar sehingga kerangka
bahwa senyawa hasil sintesis merupakan diasetil PGV- induk kedua senyawa tersebut tidak planar. Kurkumin,
1. senyawa penuntun dalam pengembangan senyawa
1 1
Spektrum H-NMR PGV-1 dan spektrum H-NMR PGV-1 dan diasetil PGV-1, memiliki struktur 3D yang
diasetil PGV-1 disajikan untuk mengidentifikasi posisi planar [6, 12-14]. Hal ini diduga disebabkan oleh
proton dalam PGV-1 maupun senyawa hasil sintesis. halangan sterik yang ditimbulkan oleh residu cincin
Hasil analisis [11] disajikan sebagai berikut: siklopentanon pada PGV-1 dan diasetil PGV-1 yang

Supardjan A. Margono, et al.

 Indo. J. Chem., 2006, 6 (1), 94 - 98 97

Gambar 4 Struktur 3D PGV-1 hasil optimasi sudut torsi Gambar 6 Struktur 3D PGV-1 hasil optimasi geometri
substituen pada residu benzena menggunakan metode menggunakan metode semi empirik AM1.
mekanika molekul MM+

Gambar 5 Struktur 3D diasetil PGV-1 hasil Gambar 7 Struktur 3D diasetil PGV-1 hasil optimasi
optimasi sudut torsi substituen pada residu benzena geometri menggunakan metode semi empirik AM1.
menggunakan metode mekanika molekul MM+.

menggantikan residu asetil aseton pada kurkumin. parameter fisikokimia menunjukkan bahwa diasetil
Perbedaan substituen pada cincin benzena diduga tidak PGV-1 memiliki ΔHf = -139,019 kkal/mol relatif stabil
berpengaruh pada planaritas kerangka induk, namun dibandingkan PGV-1, ΔHf = -76,041 kkal/mol.
pada aktivitas biologis senyawa terkait dengan
parameter hidrofobisitas (lipofilisitas). KESIMPULAN
Hasil prediksi parameter hidrofobik senyawa,
dalam hal ini menggunakan momen dipol menunjukkan 1. Diasetil PGV-1 dapat disintesis dari PGV-1 dan
bahwa asetilasi gugus hidroksi pada cincin benzena anhidrida asetat sebagai starting material dan NaOH
PGV-1 meningkatkan sifat hidrofobik. Diasetil PGV-1 sebagai katalis dengan rendemen 70,4-77,4% dan
memiliki momen dipol 2,431 Debye sedangkan PGV-1 kemurnian 92,4%.
memiliki momen dipol sebesar 4,610 Debye. Hal ini akan 2. Diasetil PGV-1 relatif lebih hidrofobik daripada PGV-
berpengaruh terhadap absorbsi senyawa dalam tubuh. 1.
Semakin hidrofobik (lipofil) maka senyawa akan lebih
mudah diserap sehingga lebih mudah berinteraksi DAFTAR PUSTAKA
dengan reseptor dan menimbulkan aksi farmakologis,
dengan demikian diasetil PGV-1 diharapkan memiliki 1. Kalgutkar, A.S., Crews, B.C., Rowlinson, S.W.,
aktivitas farmakologis yang lebih baik daripada PGV-1. Garner, C., Seibert, K, Marnett, L.J., 1998,
Sebagai analgetik, diasetil PGV-1 dilaporkan lebih baik Science, 280, 1268-1270.
daripada PGV-1 [15]. 2. Hamor, G.H., 1989, Nonsteroidal Anti-inflammatory
Rendemen yang diperoleh dalam sintesis ini cukup Drugs, in Principle of Medicinal Chemistry, Edited
tinggi, yaitu antara 70,4-77,4%. Hal ini diduga terkait by: W.O. Foye, Lea & Febiger, Piladelphia, 503-
dengan panas pembentukan (ΔHf) produk yang jauh 530.
lebih rendah dibandingkan reaktan, dengan kata lain 3. Vane, J.R., and Botting, R.M., 1996, Overview-
produk relatif stabil dibandingkan reaktan sehingga Mechanism of Action of Anti-inflammatory Drugs in
reaksi cenderung berjalan ke arah produk. Hasil prediksi Improved Non-Steroid Anti-Inflammatory Drugs

Supardjan A. Margono, et al.

98 Indo. J. Chem., 2006, 6 (1), 94 - 98

COX-2 Enzyme Inhibitors, Eds. Vane, S.J., Botting, 10. Nakano, T., Kaminuma, T., Uebayasi, M., and
J., and Botting, R., Kluwer Academic Publishers and Nakata, Y., 2001, Chem-Bio Inform. J., 1 (1), 35-
William Harvey Press, Great Britain, 1-28. 40.
4. Van Bladeren, P.J. and Van Ommen, B., 1991, 11. Silverstein, R.M. and Webster, F.X., 1998,
Pharmacol. Ther., 51, 35-46. Spectrometric Identification of Organic
th
5. Sardjiman, 2000, Synthesis of some new series of Compounds, 6 edition, John Wiley & Sons, Inc,
curcumin analogues, anti-oxidative, anti- Canada.
inflammatory, antibacterial activities and qualitative 12. Nurfina, A.N., Reksohadiprojo, M.S., Timmerman,
structure-activity relationship, PhD Thesis, Gadjah H., Jenie, U.A., Sugiyanto, D., and Van der Goot,
Mada University, Yogyakarta. H., 1997, Eur. J. Med. Chem., 32, 321-328.
6. Istyastono, E.P., Sudibyo, M., Pranowo, H.D., dan 13. Supardjan, A. M., 1999, Synthesis and Anti-
Tahir, I., 2003, Indo. J. Chem., 3 (3), 179-185. inflammatory Activity of Some 4-substitued
7. Istyastono, E.P. dan Sudibyo, M., 2005, Majalah Curcumin Derivatives, PhD Thesis, Gadjah Mada
Farmasi Indonesia, 16 (4), 204-213. University, Yogyakarta.
8. Sudarmanto, B.S.A., 2002, Analisis Hubungan 14. Istyastono, E.P., Supardjan, A.M., dan Pranowo,
Kuantitatif Struktur-Aktivitas Seri Senyawa Analog H.D., 2003, Majalah Farmasi Indonesia, 14 (3),
Kurkumin Sebagai Antioksidan Menggunakan 107-113.
Deskriptor Berdasarkan Perhitungan Kimia 15. Septika, E., 2005, Uji Efek Analgetik Diasetil
Kuantum, Tesis S2, Fakultas MIPA, Universitas Pentagamavunon-1 pada Mencit Jantan Galur
Gadjah Mada, Yogyakarta. BALB/C dengan Metode Rangsang Kimia, Skripsi,
9. Wang, J., Niemevs, F., Lad, L., Huang, L., Alvares, Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada,
D.E., Buldain, G., Poulos, T.L., and de Montellano, Yogyakarta.
P.R.O., 2004, J. Biol. Chem, 279 (41), 42593-42604.

Supardjan A. Margono, et al.