Nikita

How does a cell when it has grown karge enough such that it should divide and produce
progenu cells? Even in the case of E. Coli, the best known of all celluler organism, we still do
not know the moleculer mechanism by which cells “measure” cell mass and initiate cell division
at precisely the right time. We kow that the initiation of rounds of chromosome replication is
very precisely controlled irrespective of the growth conditions. Moreover, many of the
macromolleculs that are involved in the initiation of chromosome replication have been
identified in E.coli. nevertheless, although several models have been proposed to explain how
cells maintai the proper ratio of active origins of replication to cell mass, the details of the
mechanism of this precise control of cell division remain unknown.
Bagaimana sebuah sel ketika telah tumbuh cukup banyak sehingga harus membelah dan
menghasilkan sel progenu? Bahkan dalam kasus E. Coli, yang paling dikenal dari semua
organisme seluler, kita masih belum tahu mekanisme molekuler yang dengannya sel "mengukur"
massa sel dan memulai pembelahan sel pada waktu yang tepat. Kami menunjukkan bahwa
inisiasi putaran replikasi kromosom sangat tepat dikontrol terlepas dari kondisi pertumbuhan.
Selain itu, banyak makromolekul yang terlibat dalam inisiasi replikasi kromosom telah
diidentifikasi dalam E.coli. Namun, meskipun beberapa model telah diusulkan untuk
menjelaskan bagaimana sel mempertahankan rasio yang tepat dari asal aktif replikasi terhadap
massa sel, rincian mekanisme kontrol pembelahan sel yang tepat ini masih belum diketahui.
In eukaryotic cellsm the control of cell division is more complex than in prokaryotic
because not only must chromosome duplication and cytikinesis be regulated but in addition, the
complements if the mitotic apparatus must form and function ar the propertime in the cell cyle.
In the yeast Sacharomyces cereviseae, the process of cell division has been partially dissected by
isolating and studying temperature sensitive mutants taht are blocked at various stage of the cell
cycle. The mutants genes are designated cdc for the cell division cycle defects that they cause.
By determining the stages in the cell cycle at which the various cdc mutants are blocked,
geneticts are begining to define the sequence of events that occur during cell growth and
division. If the product of these cdc genes can be identified and their functions determined, it will
eventually be possible to define the processes the occur during the cell cycle in molecular terms.
Although much remains to be learned before we understand the control of cell division at the
molecular level, some of the key components of this important regulatory circuitry have been
identified.
Dalam sel eukariotik kontrol pembelahan sel lebih kompleks daripada prokariotik karena
tidak hanya duplikasi kromosom dan cytikinesis harus diatur tetapi juga pelengkap jika peralatan
mitosis harus membentuk dan berfungsi pada saat propertime dalam sel sel. Dalam ragi
Sacharomyces cereviseae, proses pembelahan sel telah sebagian dibedah dengan mengisolasi dan
mempelajari mutan suhu sensitif yang diblokir pada berbagai tahap siklus sel. Gen mutan
ditunjuk sebagai cdc untuk defek siklus pembelahan sel yang disebabkannya. Dengan
menentukan tahapan dalam siklus sel di mana berbagai mutan CDC diblokir, genetika mulai
menentukan urutan peristiwa yang terjadi selama pertumbuhan dan pembelahan sel. Jika produk
dari gen cdc ini dapat diidentifikasi dan fungsinya ditentukan, pada akhirnya akan mungkin
untuk menentukan proses yang terjadi selama siklus sel dalam istilah molekuler. Meskipun
masih banyak yang harus dipelajari sebelum kita memahami kontrol pembelahan sel pada tingkat
molekuler, beberapa komponen kunci dari rangkaian regulasi penting ini telah diidentifikasi.

Regulation Of The Mitotic Cell Cycle in Eukaryotes

As a cell grows, the cell membrane and most components of the cytosol increase in size
and quantity. When the cell reaches a critical mss, it devides, producing two smaller progeny
cells. Under appropriate conditions, the progeny cells will in turn grow and divide. As cells
proceed through this cell cycle, two key processes must take place in an accurate and coordinated
manner. (1) the genetic material mus be duplicated (semoconservative replication of DNA), (2)
the two copies of the genetic material must be faithfullt distributed to the two progeny cells
(motosis), (3) how does a cell know when to initiate replication of its DNA? How does a cell
know when to begin the chromosomal consensations of mitosis? How are these two processes
coordinated so that mitotic chromosome condensation do not begin before the DNA has been
replicated? Clearly, a cell must have sme mechanism by which it keeps track of where it is in the
cell cycle. Although detailed answers to these questions are not yet available, some answers are
beggining to emerge, and some of the key players in the circuitry that regulates the cell cycle are
known.
Ketika sel tumbuh, membran sel dan sebagian besar komponen sitosol bertambah besar
dalam ukuran dan kuantitas. Ketika sel mencapai titik kritis, sel itu membelah, menghasilkan dua
sel keturunan yang lebih kecil. Dalam kondisi yang tepat, sel-sel progeni pada gilirannya akan
tumbuh dan membelah. Ketika sel melanjutkan melalui siklus sel ini, dua proses utama harus
dilakukan secara akurat dan terkoordinasi. (1) materi genetik harus digandakan (replikasi DNA
semokonservatif), (2) dua salinan materi genetik harus setia didistribusikan ke dua sel keturunan
(motosis), (3) bagaimana sel tahu kapan harus memulai replikasi DNA-nya? Bagaimana sel tahu
kapan memulai konsensus mitosis kromosom? Bagaimana kedua proses ini terkoordinasi
sehingga kondensasi kromosom mitosis tidak dimulai sebelum DNA direplikasi? Jelas, sebuah
sel harus memiliki mekanisme kecil yang dengannya ia melacak keberadaannya dalam siklus sel.
Meskipun jawaban rinci untuk pertanyaan-pertanyaan ini belum tersedia, beberapa jawaban
mulai muncul, dan beberapa pemain kunci dalam sirkuit yang mengatur siklus sel diketahui.
Studies of cell division cycle (cdc) mutants of the yeasts Schizisaccharomyces pombe and
Saccharomyces cerevisiae and of early embryonic cleavafe divisions in the toad Xenopus laevis
have shown that there are two points at which a cell makes a commitment to proccesed through
the ensuing stages of the cell cycle (Fig 17.1). the first point, called Start, occur near the end of
the G1 phase. At Start, a cell becomes committed to the initiation of DNA syntesis a short time
later at the onset of the S phase of the cell cycle. The second point is the commitment to proceed
through the chromosomal consensation and chromatid separation events of mitosis; the occurs at
the very beginning of the M phase of the cell cycle. Rerent evidence indicates that certain key
regulatory proteins function as signals in both commitment steps.
Studi tentang siklus pembelahan sel (cdc) mutan ragi Schizisaccharomyces pombe dan
Saccharomyces cerevisiae dan divisi awal cleavafe embrionik dalam katak Xenopus laevis telah
menunjukkan bahwa ada dua titik di mana sel membuat komitmen untuk diproses melalui tahap-
tahap berikutnya dari sel. siklus sel (Gbr 17.1). titik pertama, yang disebut Mulai, terjadi di dekat
akhir fase G1. Pada awal, sebuah sel menjadi berkomitmen untuk inisiasi sintesis DNA beberapa
saat kemudian pada permulaan fase S dari siklus sel. Poin kedua adalah komitmen untuk
melanjutkan melalui konsensus kromosom dan peristiwa pemisahan kromatid mitosis; ini terjadi
pada awal fase M dari siklus sel. Bukti yang ada menunjukkan bahwa protein pengatur kunci
berfungsi sebagai sinyal dalam kedua langkah komitmen.
A mitosis promoting (MPF) was first discovered in Xenopus. When MPF was injected
into Xenopus oocytes, it stimulated the oocytes to enter M phase. MPF have been shown to
contain at least two wssenntial components; 1) proteins called cyclins that undergo cycles of
syntesis and accumulation during G1 and G2 and degradation during M phase 2) a startt and M
phase specific protein kinase called pp34, whch is the product of the cdc2 gene of S. Pombe and
the CDC28 gene of S. Cereviseae. Recent evidence indicates that pp34 is involved in both
commitment events: Start and the onset of M pase. Moreover, the results show that
phosphorylation / dephosphorylation of a sigle tyrosine residue may directly regulate both the
initiation of DNA replivation and the onset of M phase when pp34 interacts with the appropriate
cyclin (Fig 17.1). recent evidence indicates that pp34 protei kinase interacts with two calsses of
cyclins, one class M cyclins, involved n the M phase commitment and the second class, G1
cyclins, involved in the start decision.
Promosi mitosis (MPF) pertama kali ditemukan di Xenopus. Ketika MPF disuntikkan ke
dalam oosit Xenopus, ia merangsang oosit untuk memasuki fase M. MPF telah terbukti
mengandung setidaknya dua komponen utama; 1) protein yang disebut siklon yang menjalani
siklus sintaksis dan akumulasi selama G1 dan G2 dan degradasi selama fase M 2) protein kinase
spesifik fase awal dan M yang disebut pp34, yang merupakan produk dari gen cdc2 dari S.
Pombe dan gen CDC28 dari S. Cereviseae. Bukti terbaru menunjukkan bahwa pp34 terlibat
dalam kedua acara komitmen: Mulai dan permulaan M pase. Selain itu, hasilnya menunjukkan
bahwa fosforilasi / defosforilasi residu sigle tyrosine dapat secara langsung mengatur inisiasi
penggantian DNA dan timbulnya fase M ketika pp34 berinteraksi dengan cyclin yang sesuai
(Gbr 17.1). bukti terbaru menunjukkan bahwa pp34 protei kinase berinteraksi dengan dua kalsin
cyclins, satu cyclins kelas M, terlibat dalam komitmen fase M dan kelas kedua, cyclins G1,
terlibat dalam keputusan awal
Although addutional cmponents are undoubtedly involved in the circuitry that regulates
the cell cycle in eukaryotes, the cyclins and the pp34 protein kinase are key components, and
homo;ogous proteins have been identified in several eukaryotes, including humans, frogs, sea
urhins, and starfish. One of the attractive aspects of having one or more of the same molecules
involved in both commitment steps is that this provides a mechanism by which a cell can
remember, based on the conformational states of these molecules, where it is in the cell cycle and
thus accurately coordinate Start and the onset of M phase. Clearly our knowledge of the
molecular mechanism that control the orderly passage of cells through the cell cycle is still
incomplete. Neverthess, new information is accumulating very rapidly, and one can anticipate
that a detailed picture of the circuitry cpntrolling cell growth and division will emerge during the
next few years at least for some simple eukaryotes such as the yeast.
Meskipun cmon tambahan tambahan tidak diragukan lagi terlibat dalam sirkuit yang
mengatur siklus sel dalam eukariota, siklon dan protein kinase pp34 merupakan komponen
utama, dan protein homo telah diidentifikasi dalam beberapa eukariota, termasuk manusia, katak,
urin laut, dan bintang laut . Salah satu aspek menarik dari memiliki satu atau lebih molekul yang
sama terlibat dalam kedua langkah komitmen adalah bahwa ini menyediakan mekanisme di
mana sel dapat mengingat, berdasarkan keadaan konformasi molekul-molekul ini, di mana ia
berada dalam siklus sel dan dengan demikian secara akurat mengoordinasi Mulai dan permulaan
fase M. Jelas sekali pengetahuan kita tentang mekanisme molekuler yang mengendalikan
jalannya sel yang teratur melalui siklus sel masih belum lengkap. Namun demikian, informasi
baru terakumulasi dengan sangat cepat, dan orang dapat mengantisipasi bahwa gambaran
terperinci dari sirkuit yang mengendalikan pertumbuhan dan pembelahan sel akan muncul
selama beberapa tahun ke depan setidaknya untuk beberapa eukariota sederhana seperti ragi.

Figure 17.1 diagram showing some of the factors that regulate the progression of eukaryotic cells
through the mitotic cell cycle. Cell make commitments to proceed through the ensuing stages at
two points (1) start, a point late in G1 at which a commitment is made to subsequently initiate
DNA syntesis (S phase), (2) the beginning of M phase, at which time a commitment is made
procced through the chromosomal consensation and chromatid separation phases of mitosis,
proteins called cyclins undergo cycles synthesis and accumuation and then degradation as the
cell passed through the cell cycle, the cyclins interact with a key regulatory protein designeted
pp34. The phosporylation / dephos[orylation of a tyrosine residur of pp34 has been shown to
determine the inactive / active states of this important regulator.
Gambar 17.1 Diagram menunjukkan beberapa faktor yang mengatur perkembangan sel
eukariotik melalui siklus sel mitosis. Sel membuat komitmen untuk melanjutkan melalui tahap
berikutnya pada dua titik (1) mulai, titik di akhir G1 di mana komitmen dibuat untuk kemudian
memulai sintaksis DNA (fase S), (2) awal fase M, pada saat itu komitmen dibuat melalui
konsensus kromosom dan fase pemisahan kromatid mitosis, protein yang disebut cyclins
menjalani siklus sintesis dan akumulasi dan kemudian degradasi ketika sel melewati siklus sel,
cyclins berinteraksi dengan protein pengatur kunci yang dirancang pp34. Phosporylation /
dephos [orilasi tyrosine residur pp34 telah terbukti menentukan keadaan tidak aktif / aktif dari
regulator penting ini.

Intercellular Communication in Multicellular Eukaryotes

 In multicellular eukaryotes, the mechanism that control cell division and cell growth are
even more complex because a new dimension intercellular commubicaton must play major role.
Bach tissue within an organ and each organ within the body of an orgaism must grow to proper
size for that particular species. The growth of bones, musclesm the liver, the pancreas, and so on
must all be correctly coordinated during the growth and development of a mouse, a rabbit, or a
human. Clerly, or this to occur, cell division mustbe under very precise control within each tissue
and must be subject to different regulatory signals in differents tissues and organ. Because of the
intricate interrelationships that exist between the different tissues of a multicellular plat or
animal, intercellular communication must play an essential central role in the growth and
differentiation of higher plants and animal. How doses this intercellular communication occur?
What are the mechanism by which cellular differantiation and cell growth and division are
regulated at present, we know that there are a host of factors that stimulate or inhibit the growth
and division of specific types of cells.
Dalam eukariota multiseluler, mekanisme yang mengontrol pembelahan sel dan
pertumbuhan sel bahkan lebih kompleks karena dimensi baru commubicaton antar sel harus
memainkan peran utama. Jaringan Bach dalam suatu organ dan setiap organ dalam tubuh
orgaisme harus tumbuh dengan ukuran yang sesuai untuk spesies tertentu. Pertumbuhan tulang,
otot di hati, pankreas, dan sebagainya harus dikoordinasikan dengan benar selama pertumbuhan
dan perkembangan tikus, kelinci, atau manusia. Clerly, atau ini terjadi, pembelahan sel harus di
bawah kontrol yang sangat tepat dalam setiap jaringan dan harus tunduk pada sinyal peraturan
yang berbeda di jaringan dan organ yang berbeda. Karena keterkaitan yang rumit yang ada antara
jaringan yang berbeda dari plat atau hewan multisel, komunikasi antar sel harus memainkan
peran sentral yang penting dalam pertumbuhan dan diferensiasi tanaman dan hewan tingkat
tinggi. Bagaimana dosis komunikasi antar sel ini terjadi? Bagaimana mekanisme perbedaan sel
dan pertumbuhan serta pembelahan sel diatur saat ini, kita tahu bahwa ada sejumlah faktor yang
merangsang atau menghambat pertumbuhan dan pembelahan jenis sel tertentu.
Cell division, like all other biological proccesses, is undr genetic control. Certain genes
must regulate the process of cell division un response to intracellular, intercelluar, and
environmental signal. These regulatory genes are undoubtedly subject to mutation, like all other
genes. Mutation that abolish the function of these regulatory genes would be expected to lead to
abnormal cell division in the extreme, either the inability to devide at all or the inability to stop
dividing.
Pembelahan sel, seperti semua proses biologis lainnya, adalah kontrol genetik yang tidak
ada. Gen tertentu harus mengatur proses pembelahan sel un respons terhadap sinyal intraseluler,
antar sel, dan lingkungan. Gen pengatur ini tidak diragukan lagi tunduk pada mutasi, seperti
semua gen lainnya. Mutasi yang menghapuskan fungsi gen pengatur ini diharapkan akan
menyebabkan pembelahan sel yang abnormal di ekstrem, baik ketidakmampuan untuk membagi
sama sekali atau ketidakmampuan untuk berhenti membelah.
To date, we do not know the details of how cell division is controlled for any cell of any
higher animal, nor have we identified all of the genes that regulate this process i any higher
eukaryote. However, recent studies of viral genes called oncogenses which can cause a loss of
the normal control of cell division, have led to the identification of a set pf homologous gebes
calles protooncogeses in the genomes of normal animalsm including human. These normal
cellular protooncogense can be converted into tumor causing cellular oncogenses by mutations or
by becoming associated with new regulatory sequences through recombination processes. These
and related observations indicate that the normal cellular functions of the protooncogenes
involve specific apsects of the control of cell division. In fact, it now seems likely that break
through is understanding the normal contol of cell division may result form studies on the
distruptions of normal control that occur in cancer cells.
Sampai saat ini, kami tidak tahu rincian tentang bagaimana pembelahan sel dikendalikan
untuk setiap sel dari hewan yang lebih tinggi, kami juga belum mengidentifikasi semua gen yang
mengatur proses ini di eukariota yang lebih tinggi. Namun, penelitian baru-baru ini tentang gen
virus yang disebut oncogenses yang dapat menyebabkan hilangnya kontrol normal pembelahan
sel, telah menyebabkan identifikasi satu set geb homolog yang disebut protooncogeses dalam
genom hewan normal termasuk manusia. Protooncogense seluler normal ini dapat dikonversi
menjadi tumor yang menyebabkan onkogen seluler melalui mutasi atau dengan menjadi terkait
dengan sekuens pengaturan baru melalui proses rekombinasi. Pengamatan ini dan yang terkait
menunjukkan bahwa fungsi seluler normal protooncogenes melibatkan bagian spesifik dari
kontrol pembelahan sel. Kenyataannya, sekarang tampaknya kemungkinan menerobos adalah
memahami contol normal pembelahan sel dapat menghasilkan bentuk studi pada gangguan
kontrol normal yang terjadi pada sel kanker.

Cancer Cells: Loss of Control of Cell Division

Cancer is a large class of diverse diseases, all of which exhibit uncontrolled cell growth
and division. In noncirculatory tissues, such uncontrolled cell growth produces cell masses calles
tumors. Cancerous or malignant tumors are those from which cells detach and migrate to other
parts of the body, giving rise to secondary tumors. Noncancerous or benign tumors do not
metastasize.
Kanker adalah kelas besar dari beragam penyakit, yang semuanya menunjukkan
pertumbuhan dan pembelahan sel yang tidak terkendali. Pada jaringan yang tidak bersirkulasi,
pertumbuhan sel yang tidak terkontrol menghasilkan massa sel yang disebut tumor. Tumor
kanker atau ganas adalah mereka dari mana sel melepaskan dan bermigrasi ke bagian lain dari
tubuh, sehingga menimbulkan tumor sekunder. Tumor non-kanker atau jinak tidak bermetastasis.
Human cancers are responsible for an enormous amount of suffering. Thus, a large
amount of money and effort have been diected to the study of these diseases. Although there has
beeb great progress in the detection and treatment of cancers, there has been little progress
toward understanding the molecular bases of cancers. However, there is now extensive evidence
for the occurrence of various types of cancer in animal.
Kanker pada manusia bertanggung jawab atas sejumlah besar penderitaan. Dengan
demikian, sejumlah besar uang dan usaha telah diarahkan untuk mempelajari penyakit ini.
Meskipun telah ada kemajuan besar dalam pendeteksian dan pengobatan kanker, ada sedikit
kemajuan menuju pemahaman dasar molekuler kanker. Namun, sekarang ada bukti luas untuk
terjadinya berbagai jenis kanker pada hewan.

Tumor Inducing Viruses: Viral Oncogenes

Most of our information about oncogenes has come from studies of RNA tumor viruses
or retroviruses, the name retrovirus is rerived from the fact that these viruses store their genetic
information in a single strandes RNA genome and then conyert it into a homologous double
stranded DNA form after infecting a host cell. Thus, they use a backward flow of genetic
information. Usually, genetic information flows form DNA to RNA during transcription. The
retroviruses code for a special enzyme, called reverse transcriptase, which catalyzes the synthesis
of homologous DNA sequences using RNA molecules as templates.
Sebagian besar informasi kami tentang onkogen berasal dari studi virus tumor RNA atau
retrovirus, nama retrovirus diambil dari fakta bahwa virus ini menyimpan informasi genetik
mereka dalam genom RNA untai tunggal dan kemudian mengubahnya menjadi bentuk DNA
untai ganda homolog setelah menginfeksi sel inang. Dengan demikian, mereka menggunakan
aliran informasi genetik yang terbelakang. Biasanya, informasi genetik mengalir dari DNA ke
RNA selama transkripsi. Kode retrovirus untuk enzim khusus, yang disebut reverse transcriptase,
yang mengkatalisis sintesis urutan DNA homolog menggunakan molekul RNA sebagai templat.
The genomes of DNA tumor viruses such as polyoma virus, SV40 and adenoviruses also
contain oncogenes thar are able to induce the uncontrolled meoplastic growth of animal cells
growing in culture. However, the oncogenes of these DNA viruses have proven more difficult to
study than those of the retroviruses because the tumor inducing properties of these DNA viruses
are not easily distinguished form effects caused by the replication of the viral chromosomes and
the expression of other viral genes that eventually lead to the death of the infected host cells.
Thus, the discussion of viral oncogenes in this chapter will restricted to retroviral oncogenes.
Genom virus tumor DNA seperti virus polioma, SV40, dan adenovirus juga mengandung
onkogen yang mampu menginduksi pertumbuhan meoplastik sel hewan yang tidak terkendali
yang tumbuh dalam kultur. Namun, onkogen virus DNA ini terbukti lebih sulit dipelajari
daripada retrovirus karena tumor yang menginduksi sifat-sifat virus DNA ini tidak mudah
dibedakan bentuknya efek yang disebabkan oleh replikasi kromosom virus dan ekspresi gen
virus lainnya. akhirnya menyebabkan kematian sel inang yang terinfeksi. Dengan demikian,
pembahasan onkogen virus dalam bab ini akan terbatas pada onkogen retroviral.

Life Cycle of Rous Sarcoma Virus

The best known of the retroviruses is Rous sarcoma viruse, which induces cancer in
chicken cells, the life cycle of Rous sarcoma virus is diagrammed in Fig 17.2. Shortly after Rous
sarcoma virus infect a cell, its RNA genome is replicated to its DNA form by reverse
transcriptase, and the viral DNA is integrated into the chromosomal DNA of the host cell. In this
integrated state, it is replicated and transcribed by the host cells metabolic machinery, just like
the normal genes of the host cell.
Retrovirus yang paling terkenal adalah Rous sarcoma viruse, yang menginduksi kanker
dalam sel-sel ayam, siklus hidup virus Rous sarcoma digambarkan pada Gambar 17.2. Segera
setelah virus Rous sarcoma menginfeksi sel, genom RNA-nya direplikasi ke bentuk DNA-nya
dengan reverse transcriptase, dan DNA virus diintegrasikan ke dalam DNA kromosom sel inang.
Dalam keadaan terintegrasi ini, ia direplikasi dan ditranskripsi oleh mesin metabolisme sel inang,
sama seperti gen normal sel inang

Figure 17.2 Life cycle of the Rous sarcoma RNA tumor virus, The ability of this virus to cause
cancer resides in the src oncogene
Gambar 17.2 Siklus hidup dari virus tumor RNA sarcoma RNA, Kemampuan virus ini untuk
menyebabkan kanker berada pada oncog src

The genome of Rous sarcoma virus contains just four genes; gag, which codes for the
capsid protein of the virion; pol, which codes for reverse transcriptase; env, which codes for the
protein spikes of the viral encelope; and the oncogene src, which codes for a membrane bound
protein kinase. The viral genome also carries its own strong promoter, thus, the four viral gene
products are syntesized in large amounts. The src gene is entriretly responsible for the ability of
Rous sarcoma virus to caise cancer, the deletion of this one gene yields a virus that infects and
replicates just like the src containing virus, but one that is totally nononcogenic.
Genom virus Rous sarcoma hanya mengandung empat gen; gag, yang mengkode protein
kapsid virion; pol, yang mengkode reverse transcriptase; env, yang mengkode lonjakan protein
dari virus encelope; dan src onkogen, yang mengkode protein kinase terikat membran. Genom
virus juga membawa promotor kuatnya sendiri, sehingga, keempat produk gen virus
disinkronisasi dalam jumlah besar. Gen src bertanggung jawab atas kemampuan virus sarkoma
Rous untuk menyebabkan kanker, penghapusan gen yang satu ini menghasilkan virus yang
menginfeksi dan bereplikasi seperti virus yang mengandung src, tetapi yang sepenuhnya non-
genetik.

Diversity of Retroviral Oncogenes

Studies of other retroviruses of several different animal spesies soon led to identification
of other retroviral oncogenes. Over 20 different retroviral oncogenes (table 17.1) have been
described to date, and more undoubtedly remain to be discovered. However, recent studies have
shown that different retroviruses that induce sililar types of cancers often carry the same or a
closely related oncogense. Thus, there may be only a relatively small number of unique retroviral
oncogenes yet to be discovered. In total, including oncogenes of DNA viruses and of cellular
origin, over 40 distinct genes have been identified that fit the definition of an oncogene.
However, more information is available for the retroviral oncogenes and the related oncogenes of
cellular origin, thus the discussion that follow in this chapter will be restricted to retroviral
oncogenes and their homologs
Studi retrovirus lain dari beberapa spesies hewan yang berbeda segera mengarah pada
identifikasi onkogen retroviral lainnya. Lebih dari 20 onkogen retroviral yang berbeda (tabel
17.1) telah dideskripsikan hingga saat ini, dan lebih banyak lagi masih harus ditemukan. Namun,
penelitian terbaru menunjukkan bahwa retrovirus berbeda yang menginduksi jenis kanker sililar
sering membawa oncogense yang sama atau terkait erat. Dengan demikian, mungkin hanya ada
sejumlah kecil onkogen retroviral unik yang belum ditemukan. Secara total, termasuk onkogen
virus DNA dan asal sel, lebih dari 40 gen yang berbeda telah diidentifikasi yang sesuai dengan
definisi onkogen. Namun, lebih banyak informasi tersedia untuk onkogen retroviral dan onkogen
asal seluler yang terkait, sehingga pembahasan yang mengikuti dalam bab ini akan dibatasi untuk
onkogen retroviral dan homolognya.

Zakiyah
Oncogene Products as Regulators of Cell Division
Considering that oncogenes induce uncontrolled cell growth resulting in tumors, one
might well anticipate that the products of these genes would act by stimulating cell division in
some manner. Indeed, it is now clear that the products of these oncogenes play various roles in
regulating cell division in one or more cell types. For example, the product of the v-sis oncogene
of simian sarcoma virus is closely related to a polypeptide growth hormone called platelet-
derived growth factor (PDGF). PDGF is produced by platelet cells as the name indicates; it
promotes wound healing by stimulating the growth of cells at the wound site. Simian sarcoma
viruses carrying the v-sis gene induce sarcomas when the injected into woolly monkeys; they
also transform fibroblasts growing in culture to a neoplastic or tumorous state. Presumably, this
cellular transformation to the cancerous state occurs by a mechanism that is related to the effect
of normal PDGF on cells at a wound site.
Mempertimbangkan bahwa onkogen menginduksi pertumbuhan sel yang tidak terkendali
yang menghasilkan tumor, orang mungkin mengantisipasi bahwa produk- gen ini akan bertindak
dengan merangsang pembelahan sel dalam beberapa cara. Memang, jelas bahwa produk dari
onkogen ini memainkan berbagai peran dalam mengatur pembelahan sel dalam satu atau lebih
jenis sel. Sebagai contoh, produk onkogen v-sis dari virus sarkoma simian berkaitan erat dengan
hormon pertumbuhan polipeptida yang disebut platelet-derived growth factor (PDGF). PDGF
diproduksi oleh sel-sel platelet; itu mempromosikan penyembuhan luka dengan merangsang
pertumbuhan sel di lokasi luka. Virus sarkoma Simian yang membawa gen v-sis menginduksi
sarkoma ketika disuntikkan ke monyet-monyet berbulu; mereka juga mengubah fibroblas yang
tumbuh dalam kultur ke keadaan neoplastik atau tumor. Agaknya, transformasi seluler ini ke
keadaan kanker terjadi oleh mekanisme yang terkait dengan efek PDGF normal pada sel-sel di
lokasi luka.
Other oncogenes encode products that are similar to growth-factor and hormone
receptors. Oncogenes erbB and fms encode proteins that are closely related to the receptors for
epidermal growth jactor and CSF-1 growth factor, respectively, CSF-I is a growth factor that
stimulates growth and differentiation of macrophages. Both of these growth-factor receptors are
transmembrane proteins with growth factor bind kinase domains on the inside of the cell. These
receptors are key components in transmembrane signaling pathways. Finally, the ertA gene
product is an analog of the nuclear receptor for the thyroid bormone T3. Thus, all of these gene-
products are undoubtedly in volved in the intercellular communication circuitry that regulates
cell division during the growth and development of highly differentiated tissues and or gans in
multicellular animals.
Onkogen lain menyandikan produk yang mirip dengan faktor pertumbuhan dan reseptor
hormon. Oncogenes erbB dan fms mengkode protein yang terkait erat dengan reseptor untuk
faktor pertumbuhan epidermal dan faktor pertumbuhan CSF-1, masing-masing, CSF-I adalah
faktor pertumbuhan yang merangsang pertumbuhan dan diferensiasi makrofag. Kedua reseptor
faktor pertumbuhan ini adalah protein transmembran dengan faktor pertumbuhan mengikat
domain kinase di bagian dalam sel. Reseptor ini adalah komponen kunci dalam jalur pensinyalan
transmembran. Akhirnya, produk gen ertA adalah analog dari reseptor nuklir untuk T3 hormon
tiroid. Dengan demikian, semua produk-gen ini tidak diragukan lagi dimasukkan dalam sirkuit
komunikasi antar sel yang mengatur pembelahan sel selama pertumbuhan dan perkembangan
jaringan yang sangat berbeda dan atau kelenjar pada hewan multisel.
Because these transmembrane receptor protein tyrosine kinases are capable of
transmitting a mitogenic signal (a signal telling a cell to divide), it is not surprising that
alterations in the structure and function of these proteins will sometimes be oncogenic. If they
malfunction and transmit a signal telling the cell to divide when it normally should not divide,
the result will be tumor formation.
Karena protein reseptor transmembran tirosin kinase ini mampu mentransmisikan sinyal
mitogenik (sinyal yang memerintahkan sel untuk membelah), tidak mengherankan bahwa
perubahan dalam struktur dan fungsi protein ini kadang-kadang akan bersifat onkogenik. Jika
mereka tidak berfungsi dan mengirimkan sinyal yang memerintahkan sel untuk membelah
padahal seharusnya tidak membelah, hasilnya adalah pembentukan tumor.
The largest group of tie oncogenes (including src) enccde protein kinases that
phosphorylate tyrosine residues Some of these may well be analogous to the receptors for
epidermal growth factor and CSF 1 growth factors, but contain receptors for mitogenic factors
that have not yet been identified. However, the src tyrosine kinase is not a transmembrane
protein, but rather is tightly associated with the inner face of the plasma membrane. Although the
src protein is a very active protein kinase that phosphorylates specific tyrosine residues in
proteins, we still do not understand the molecular basis of its oncogenicity or what proteins are
the important regulatory factors that are subject to its action.
Kelompok onkogen terbesar (termasuk src) menyandikan protein kinase yang
memfosforilasi residu tirosin. Beberapa di antaranya mungkin analog dengan reseptor untuk
faktor pertumbuhan epidermis dan faktor pertumbuhan CSF 1, tetapi mengandung reseptor untuk
faktor mitogenik yang belum diidentifikasi. Namun, src tirosin kinase bukanlah protein
transmembran, tetapi lebih terkait erat dengan permukaan bagian dalam membran plasma.
Meskipun protein src adalah protein kinase yang sangat aktif yang memfosforilasi residu tirosin
spesifik dalam protein, kita masih tidak memahami dasar molekuler onkogenisitasnya atau
protein apa yang merupakan faktor pengatur penting yang menjadi sasaran aksinya.
The ras oncogenes encode proteins that bind GTP and exhibit GTPase activity. They may
be analogous to proteins called G proteins that have GTPase activity and play a role in the
regulation of the enzyme adenylcyclase and, thus, the levels of cyclic AMP in cells. The
function(s) of the ras gene-products is (are) of particular interest because considerable evidence
implicates the involvement of mutant rus products in several distict types of human cancer.
Oncogen ras mengkode protein yang mengikat GTP dan menunjukkan aktivitas GTPase.
Mereka mungkin analog dengan protein yang disebut protein G yang memiliki aktivitas GTPase
dan berperan dalam regulasi enzim adenylcyclase dan, dengan demikian, tingkat AMP siklik
dalam sel. Fungsi produk gen ras menarik karena bukti yang cukup banyak melibatkan
keterlibatan produk-produk mutan rus dalam beberapa jenis kanker manusia yang berbeda.
Lastly, other oncogenes such as jun, fos, erbA, and myc encode nuclear transcription
factors that activate the expression of specific genes. Undoubtedły, some of the genes that they
activate will prove to encode products that function as positive regulators of cell division.
Terakhir, onkogen lain seperti jun, fos, erbA, dan myc mengkodekan faktor transkripsi
nuklir yang mengaktifkan ekspresi gen tertentu. Tidak diragukan lagi, beberapa gen yang
diaktifkan akan terbukti menyandikan produk yang berfungsi sebagai pengatur positif
pembelahan sel
In summary, oncogene products are simply proteins that play central roles in stimulating
cell division in one or more cell types. In some cases, these oncogene products are probably
altered or "mutant" proteins that trigger the division of cells that should normally not divide
under the existing conditions. In other cases, the oncogene products stimulate abnormal ceil
division by being overproduced-being synthesized in much larger amounts than in normal cells.
Singkatnya, produk onkogen hanyalah protein yang memainkan peran sentral dalam
merangsang pembelahan sel dalam satu atau lebih jenis sel. Dalam beberapa kasus, produk-
produk onkogen ini mungkin diubah atau protein "mutan" yang memicu pembelahan sel yang
biasanya tidak membelah dalam kondisi yang ada. Dalam kasus lain, produk onkogen
menstimulasi pembelahan langit-langit yang tidak normal dengan diproduksi berlebih yang
disintesis dalam jumlah yang jauh lebih besar daripada dalam sel normal.

PROTOONCOGENES AND CELLULAR ONCOGENES

Genes with DNA sequences that are very similar to the retroviral uncogenes and that
encode proteins with similar properties have been idenified in the genomes of higher animals
including humans by the use of distinct experimental approaches. (1) One approach involved
loolking for celullar DNA sequences it would cross-hybridize with the oncogenes of animimal
viruses. (2) The second approach insolved locking direcly for cancer-causing genes in the
genomes of cancer cells by tranfection experiments, experiments in which the DNA of tumor
cells is isolated and added to normal tissue culture cells to see if it will convert any of them to the
cancerous state. Both approaches have been successful and, in some cases, both have resulted in
the identification of the samecellular oncogenes. Genes homologous to some of the viral
oncogenes are even present in lower eukaryotes such as the yeasts.
Gen dengan sekuens DNA yang sangat mirip dengan onkogen retroviral dan yang
menyandikan protein dengan sifat serupa telah diidentifikasi dalam genom hewan yang lebih
tinggi termasuk manusia dengan menggunakan pendekatan eksperimental yang berbeda. (1)
Salah satu pendekatan yang terlibat dalam mencari sekuens DNA seluler yang akan di-hibridisasi
dengan onkogen virus animimal. (2) Pendekatan kedua mengunci secara langsung untuk gen
penyebab kanker dalam genom sel kanker melalui eksperimen tranfeksi, eksperimen di mana
DNA sel tumor diisolasi dan ditambahkan ke sel kultur jaringan normal untuk melihat apakah itu
akan mengubah salah satunya ke kondisi kanker. Kedua pendekatan telah berhasil dan, dalam
beberapa kasus, keduanya menghasilkan identifikasi onkogen samecellular. Gen yang homolog
dengan beberapa onkogen virus bahkan ada pada eukariota yang lebih rendah seperti ragi.

Homology with Viral Oncogenes

As was mentioned earlier, the src oncogere was first identified in the genome of Rous
sarcoma viruses (RSV) isolated from chickens. When reverse transcriptase was used to convert
the src oncogene of RSV to a cDNA form (see Fig. 13.3 for an illustration of the action of
reverse transcriptase) and this cDNA was labeled with 32P and used as a probe in Southern blot
hybridization experiments (Chapter 13) with genomic DNA from normal chickens, the src
cDNA hybridized with specific restriction fragments of genomic DNA in every experiment. This
was tru regardless of the source of the chicken genomic DNA. Moreover, similar genomic DNA
sequences that hybridize with the viral Src cDNA probe have been identified in all vertebrate
animals and even in the fruit fly Drosophilla melanogaster.
Seperti yang disebutkan sebelumnya, oncogere src pertama kali diidentifikasi dalam
genom Rous sarcoma viruses (RSV) yang diisolasi dari ayam. Ketika reverse transcriptase
digunakan untuk mengubah onkogen src dari RSV ke bentuk cDNA (lihat Gambar 13.3 untuk
ilustrasi aksi reverse transcriptase) dan cDNA ini diberi label dengan 32P dan digunakan sebagai
probe dalam eksperimen hibridisasi blot Southern (Bab 13) dengan DNA genom dari ayam
normal, cDNA src dihibridisasi dengan fragmen restriksi spesifik dari genom DNA dalam setiap
percobaan. Ini benar terlepas dari sumber DNA genomik ayam. Selain itu, sekuens DNA genom
yang serupa yang berhibridisasi dengan virus Src cDNA telah diidentifikasi pada semua hewan
vertebrata dan bahkan pada lalat buah Drosophilla melanogaster.
Subsequent experiments have demonstrated that genomic DNAs from normal
(noncancerous) cells of all higher animals contain DNA sequences that hybridize with essetially
all the retroviral oncogene sequences. In some cases, sequences homologous to retroviral
oncogenes (e.g, ras) are even found in lowe eikaryates such as Saccaromyces cereviceae.
Eksperimen berikutnya telah menunjukkan bahwa DNA genom dari sel-sel normal (non-
kanker) dari semua hewan mengandung sekuens DNA yang berhibridisasi dengan semua
sekuens onkogen retroviral. Dalam beberapa kasus, sekuens yang homolog dengan onkogen
retroviral (mis. Ras) bahkan ditemukan pada eikariate rendah seperti Saccaromyces cereviceae.
One might initially guess that these genomic DNA sequcnces that hybridize with the
oncogenes are simply present on integrated proviruses. However, this has proven not to be the
case Instead. Instated, when these sequences were isolated from genomic libraries and
characterized, they were found to be normal cellular genes with structures that distinguish them
from the homologous viral oncogenes. These normal celullar genes with homology to oncogenes
are now called protooncogenes . In some cases, these protooncogenes can mutate to forms that
are capable of inducing oncogenesis -the ability to transform cells to a neoplastic or cancerlike
state (see the following section). In the later form they are called cellular oncogenes (abbreviated
c-onc, e.g., c-src, c-sis, c-myc) to distinguish then from their viral counterparts. This means thar
we must now denote the viral uncoenes more precisely as v-onc's, for example, v-sre, v-myc.
Awalnya Orang menduga bahwa urutan DNA genomik ini yang berhibridisasi dengan
onkogen hanya ada pada provirus terintegrasi. Namun, ini terbukti bukan masalahnya.
Dimaksudkan, ketika urutan ini diisolasi dari perpustakaan genom dan dikarakterisasi, mereka
ditemukan sebagai gen seluler normal dengan struktur yang membedakan mereka dari onkogen
virus yang homolog. Gen seluler normal ini dengan homologi pada onkogen sekarang disebut
protoonkogen. Dalam beberapa kasus, protooncogenes ini dapat bermutasi menjadi bentuk yang
mampu mendorong onkogenesis - kemampuan untuk mengubah sel menjadi keadaan neoplastik
atau mirip kanker (lihat bagian berikut). Dalam bentuk selanjutnya mereka disebut onkogen
seluler (disingkat c-onc, mis., C-src, c-sis, c-myc) untuk membedakannya dari rekan virusnya. Ini
berarti bahwa kita sekarang harus menunjukkan uncoenes virus lebih tepat sebagai v-onc,
misalnya, v-sre, v-myc.
Interestingly, some of the same cellular onco-genes that were identified by their cross
hybridization to viral oncogene sequences have also been identified on the basis of their ability
to transform cells growing in culture to neoplastic or tumorlike sates in direct DNA transfer
studies called transfection experiments.
Menariknya, beberapa onco-gen seluler yang sama yang diidentifikasi dengan hibridisasi
silangnya ke sekuens onkogen virus juga telah diidentifikasi berdasarkan kemampuan mereka
untuk mengubah sel yang tumbuh dalam kultur menjadi neoplastik atau sate mirip tumor dalam
studi transfer DNA langsung yang disebut eksperimen transfeksi

Transfection Experiments
The detection of cellular oncogenes by transfection experiments is based on the ability of
the oncogenes to convert non cancerous cells (characterized by controlled cell division) growing
in culture to the cancereous state (characterized by uncontrolled cell division). This phenomenon
is called cell transformation or with the recombination process in bateria called transformation
(discussed in Chapters 5 and 8), the two phenomena are totally different processes.
Deteksi onkogen seluler dengan eksperimen transfeksi didasarkan pada kemampuan
onkogen untuk mengubah sel non kanker (ditandai dengan pembelahan sel yang dikendalikan)
yang tumbuh dalam kultur menjadi keadaan kanker (ditandai dengan pembelahan sel yang tidak
terkontrol). Fenomena ini disebut transformasi sel atau dengan proses rekombinasi dalam bateria
yang disebut transformasi (dibahas dalam Bab 5 dan 8), kedua fenomena tersebut adalah proses
yang sama sekali berbeda
Normal (nontransformed) cells growing in culture will stop dividing when they make
contact with neighboring cells (a phenomenon called contact inbibition); they will thus form a
monolayer of cells on the surface of the culture flask or petri dish in which they are growing.
Transformed cells do not exhibit contact inhibition. They will keep on dividing despite contact
with their neighbors and will form piles of cells or tumors" on the surface of the culture flask
(Fig. 173).
Sel-sel normal (tidak ditransformasi) yang tumbuh dalam kultur akan berhenti membelah
ketika mereka melakukan kontak dengan sel-sel tetangga (sebuah fenomena yang disebut kontak
inbibition); dengan demikian mereka akan membentuk lapisan tunggal sel pada permukaan labu
kultur atau cawan petri tempat mereka tumbuh. Sel yang ditransformasi tidak menunjukkan
penghambatan kontak. Mereka akan terus membelah meskipun kontak dengan tetangga mereka
dan akan membentuk tumpukan sel atau tumor "pada permukaan labu kultur (Gbr. 173)
When DNA from normal cells is used in transfection experiments, a very low, but
detectable, level of cell transformation is observed. When the DNA from the transformed cells is
used in a second round of transfections, a higher frequency of transformation is sometimes
observed. That is, higher frequencies of transformation are observed using DNA isolated from
certain transformed cell clones, but not using DNA isolated from other transformed cell clones.
This indicates that genetic changes are respon sible for the transformed state in the first group of
cell clones, but that epigenetic changes (noninherited developmental changes) are responsible for
the trans formed state in the second group of cell clones.
Ketika DNA dari sel normal digunakan dalam percobaan transfeksi, tingkat transformasi
sel yang sangat rendah, tetapi dapat terdeteksi diamati. Ketika DNA dari sel yang ditransformasi
digunakan dalam putaran kedua transfeksi, frekuensi transformasi yang lebih tinggi kadang-
kadang diamati. Artinya, frekuensi transformasi yang lebih tinggi diamati menggunakan DNA
yang diisolasi dari klon sel yang ditransformasikan tertentu, tetapi tidak menggunakan DNA
yang diisolasi dari klon sel yang ditransformasikan lainnya. Ini menunjukkan bahwa perubahan
genetik bertanggung jawab atas keadaan yang ditransformasikan dalam kelompok klon sel
pertama, tetapi perubahan epigenetik (perubahan perkembangan yang tidak diwariskan)
bertanggung jawab atas keadaan trans yang terbentuk pada kelompok kedua klon sel.
Transfection experiments have alsc been used to demonstrate the presence of cellular
oncogenes in cell culture lines derived from various spontaneously occurring and chemically
induced animal tumors. Most of the cellular oncogenes detected by transfection experiments
have been isolated using recombinant DNA and gene cloning techniques. When these isolated
cellular oncogenes were compared with the oncogenes of retroviruses by various procedures (eg
DNA hybridization, restriction enzyme analysis, DN sequencing), many of them were found to
be homologous to one ofthe retroviral oncogenes. For example the c-H-ras oncogene identified
by transfection experiments in DNA from human bladder carcinoma cells turned out to be
homologous to the v-H-ras oncogenc of Harvey sarcoma virus.
Eksperimen transfeksi juga telah digunakan untuk menunjukkan keberadaan onkogen
seluler dalam garis kultur sel yang berasal dari berbagai tumor hewan yang terjadi secara spontan
dan diinduksi secara kimia. Sebagian besar onkogen seluler yang terdeteksi oleh eksperimen
transfeksi telah diisolasi menggunakan teknik DNA dan kloning gen rekombinan. Ketika
onkogen seluler yang terisolasi ini dibandingkan dengan onkogen retrovirus dengan berbagai
prosedur (misalnya hibridisasi DNA, analisis enzim restriksi, sekuensing DN), banyak dari
mereka yang ditemukan homolog dengan salah satu onkogen retroviral. Misalnya onkogen c-H-
ras yang diidentifikasi oleh eksperimen transfeksi dalam DNA dari sel-sel kandung kemih
manusia ternyata homolog dengan onkogen v-H-ras dari virus Harvey sarkoma.

Cellular Oncogenes Contain Introns Their Viral Homologs Are Single Exons
As mentioned earlier, when viral oncogenes such as src are cloned by recombinant DNA
techniques and are used as hybridization probes to search for homologous sequences in normal
host cells, such sequences are almost always found. These homologous sequences present in the
chromosomes of normal cells of normal animals are not integrated viral oncogenes because they
differ from the viral cncogenes in having interrupted coding sequences, like most other
eukaryotic genes. That is, the cellular oncogenes and protooncogenes have multiple exons
separated by introns (see Chapter 13, pp. 356-359), whereas the viral oncogenes are single exons
For example, the chicken cellular src protooncogene contains II introns separating 12 coding
sequences whereas the RSY v-src gere bas a single, uninterrupted coding sequence (fig. 17.4)
Seperti disebutkan sebelumnya, ketika onkogen virus seperti src diklon dengan teknik
DNA rekombinan dan digunakan sebagai probe hibridisasi untuk mencari sekuens homolog
dalam sel host normal, sekuens semacam itu hampir selalu ditemukan. Urutan homolog ini hadir
dalam kromosom sel-sel normal hewan normal tidak onkogen virus terintegrasi karena mereka
berbeda dari virus cncogenes dalam memiliki urutan kode yang terputus, seperti kebanyakan gen
eukariotik lainnya. Yaitu, onkogen seluler dan protoonkogen memiliki beberapa ekson yang
dipisahkan oleh intron (lihat Bab 13, hal. 356-359), sedangkan onkogen virus adalah ekson
tunggal. Misalnya, protoonkogen seluler ayam mengandung II intron yang memisahkan 12
urutan pengkodean sedangkan RSY v-src mendapatkan urutan pengodean tunggal tanpa
gangguan (gbr. 17.4)
The v-src and c-src genes both code for protein kinases that phosphorylate tyrosine
residues. Moreover, these two protein kinases are the same size and have very similar structures.
In addition, both proteins react with antibodies prepared using the v-src protein as antigen.
Comparison of the nucleotide sequences of the chicken c-src gene and the v-src gene of one
strain (the Schmid-Ruppin strain) of RSV indicates that the two genes encode very similar
proteins. The c-sc protein is 533 amino acids long; the v-src protein is 526 amino acids long. The
major difference between these two proteins occurs at the COOH terminus, where the last 12
amino acids of the v-src protein are replaced by 19 completely different amino acids at the
terminus of the c-src protein. in addition, their are 18 single nucleotide-pair differerces betwween
the coing sequences of v-src and csrcthat result in 8 anino acid charges in the otein products.
These 8 amino acid changes in v-sro protein of the Schmid-Ruppin strain of RSV do not appear
to be involved in the cncogenicity of the v-src protein since none of them is found in common in
the v-src oncogenes that have been sequerced from other RSV strains. Clearly, the major
difference between these two geres is the presence of the 11 introns in C-s-c and their ahsence in
v-src (Fig, 17.4)
Gen v-src dan c-src keduanya mengkode protein kinase yang memfosforilasi residu
tirosin. Selain itu, kedua protein kinase ini memiliki ukuran yang sama dan memiliki struktur
yang sangat mirip. Selain itu, kedua protein bereaksi dengan antibodi yang disiapkan
menggunakan protein v-src sebagai antigen. Perbandingan urutan nukleotida dari gen c-src ayam
dan gen v-src dari satu strain (strain Schmid-Ruppin) dari RSV menunjukkan bahwa kedua gen
menyandikan protein yang sangat mirip. Protein c-scr adalah 533 asam amino; protein v-src
memiliki panjang 526 asam amino. Perbedaan utama antara kedua protein ini terjadi pada
terminal COOH, di mana 12 asam amino terakhir dari protein v-src digantikan oleh 19 asam
amino yang sangat berbeda di ujung protein c-src. selain itu, ada 18 perbedaan nukleotida-
pasangan tunggal antara sekuens ikatan v-src dan csrc yang menghasilkan 8 muatan asam anino
dalam produk otein. 8 perubahan asam amino ini dalam protein v-sro dari strain Schmid-Ruppin
dari RSV tampaknya tidak terlibat dalam cncogenisitas protein v-src karena tidak satupun dari
mereka yang ditemukan secara umum dalam onkogen v-src yang telah diurutkan dari strain RSV
lainnya. Jelas, perbedaan utama antara kedua geres ini adalah adanya 11 intron dalam C-s-c dan
perbedaannya dalam v-src (Gbr, 17.4)
We do not yet know how the proteni kinases encoded by these viral oncogenes cause
tumors, but the mecanism probably relates to the large quantities of these enzymes made it
retrovirus-infected cells. There is 100 times as much v-src protein kinase per cell in chicken
tumors induced with Rous sarcoma virus as there is c-src prorein kinase in normal chicken cels
Kita belum tahu bagaimana proteni kinase yang dikodekan oleh onkogen virus ini
menyebabkan tumor, tetapi mekanisme ini mungkin berhubungan dengan sejumlah besar enzim
yang membuatnya menjadi sel yang terinfeksi retrovirus. Ada 100 kali lebih banyak protein
kinase v-src per sel dalam tumor ayam yang diinduksi dengan virus sarkoma Rous karena ada c-
src prorein kinase dalam sel ayam normal

Conservation of Protooncogenes during Evolution

One argument for the importance of the protooncogenes and the products that hey encode
in normal cell growth and/or cell division is that the protooncogenes have been higly conserved
during evolution. c-sro genes are found not only in chickens, but in other birds, in mammals
(including humans), in fish, and even in insects such as Drosophila melanogaster Moreover, this
picture of the conservaion of protooncogenes across a wide range of species is observed for most
of the other protooncogenes as well. All vertebrate aninals contain protooncogenes that are
homologous to essentially all the oncogenes listed in Table 17.1. The fruit fly Drosophila
melanogaster contains normal cellalar genes that exbibt: strong homology to the vertebrate
cellular oncogenes c-abl, c-erbB, с-fps, c-raf, c-ras, and c-myb, in addition to the c-csr homolog
In fact, the genome of DNA melanogaster contains two genes with homology to src and three
genes with homolog to ras, just like the genomes of vertebrates. In the case of the ras
protooncogenes, the genome of the yeast Saccaromyces cerevisiae has even been found to
contain two homologous sequences. Clearly, then, the various protooncogenes have been widely
conserved during the course of evolutio.
Salah satu argumen untuk pentingnya protooncogenes dan produk yang disandikan dalam
pertumbuhan sel normal dan / atau pembelahan sel adalah bahwa protooncogenes telah
dikonservasi selama evolusi. gen c-sro ditemukan tidak hanya pada ayam, tetapi pada burung
lain, pada mamalia (termasuk manusia), pada ikan, dan bahkan pada serangga seperti Drosophila
melanogaster. Selain itu, gambaran konservasi protoonkogen di berbagai spesies adalah diamati
untuk sebagian besar protooncogenes lainnya juga. Semua anakan vertebrata mengandung
protoonkogen yang homolog pada dasarnya semua onkogen yang tercantum dalam Tabel 17.1.
Lalat buah Drosophila melanogaster mengandung gen cellalar normal yang menunjukkan:
homologi kuat terhadap onkogen seluler vertebrata c-abl, c-erbB, с-fps, c-raf, c-ras, dan c-myb,
di samping c- csr homolog Faktanya, genom DNA melanogaster berisi dua gen dengan homologi
untuk src dan tiga gen dengan homolog untuk ras, seperti genom vertebrata. Dalam kasus ras
protooncogenes, genom ragi Saccaromyces cerevisiae bahkan telah ditemukan mengandung dua
sekuens homolog. Maka jelaslah bahwa berbagai protoonkogen telah dilestarikan secara luas
selama evolusi.
When the sequences of the homologous protooncogenes of afferent species are compared
the sequences are almost always very bighly conserved often differing by less than 15 percent in
nucleotide pair sequence. Even in the case of the relatively distandy related yeast and vertebrate
ras protooncogenes the prediaed amino acid sequences (predicted from the nuceotide sequences)
of the corserved amino terminal two-thirds of the protein products are identical at 75 percent of
the amino acid positions. Presumably, the highly conserved domains of these homologous
protooncogeie products carry out the same or very similar functions in all the different species
that contain these genes. This high degree of conservation of protooncogene structure in all
vertebrate animals and even in many invertebrate species argues strongly that these genes encode
important products, and that the sequences of these gepes have been conserved by natural
selection acting to maintain thc functional integrity of the important genes producs that are
encoded by these genes. Although we do not yet understand the exact roles that these
protooncugene products perform in normal cells, it seems certain that they are directly involved
in the control of cell division.
Ketika sekuens protoonkogenes homolog dari spesies aferen dibandingkan, sekuens-
sekuens tersebut hampir selalu sangat terawetkan sering berbeda dengan kurang dari 15 persen
dalam sekuens pasangan nukleotida. Bahkan dalam kasus ras protooncogen yang terkait dengan
ragi dan vertebrata yang relatif jauh, sekuens asam amino prediaed (diprediksi dari sekuens
nuceotide) dari terminal amino corserved, dua pertiga produk protein identik pada 75 persen
posisi asam amino. Agaknya, domain yang sangat lestari dari produk protooncogeie homolog ini
menjalankan fungsi yang sama atau sangat mirip di semua spesies berbeda yang mengandung
gen-gen ini. Tingkat konservasi struktur protooncogen yang tinggi ini pada semua hewan
vertebrata dan bahkan pada banyak spesies invertebrata berargumen kuat bahwa gen-gen ini
menyandikan produk-produk penting, dan bahwa urutan gepes ini telah dilestarikan dengan
seleksi alam yang berfungsi menjaga integritas fungsional gen-gen penting tersebut. produksi
yang dikodekan oleh gen-gen ini. Meskipun kami belum memahami peran pasti dari produk-
produk protooncugene ini dalam sel-sel normal, tampaknya mereka terlibat langsung dalam
kontrol pembelahan sel.

PUJO
Protooncogen Products: Key Regulators of Cell Division
During the last few years, á wealth of information has accumulated regarding the
structure and functicn of the various protooncogenes. It now seems clear that the only property
that unites these genes as a group is that they all play central roles in the control of cell division.
When classified according to function, the different protooncogenes appear to fit into four
groups: (1) those that encode growh factors (c-sis) or grown-factor recepiors (c-fms and c-errb5),
(2) those that encode GTP-binding proteins with GTPase acuvity (c-H-ras, c-K-ras, and N-ras),
(3) those that encode proein kinases, either tyrosine-specific proxein ki nases (c-ahl cfes, efgr
cfps cros, csrt, and c-yes) or serine/thrconine-specific protein kinases (c-mil, c-mos and c-raf,
and (4) those that encode transcriptional regulators (e-fos, c-jun, cerbA, c-myc, and possibly c-
myb and c-ets).
Produk Protooncogen: Regulator Kunci Divisi Sel
Selama beberapa tahun terakhir, á kekayaan informasi telah terakumulasi berkenaan
dengan struktur dan fungsi berbagai protoonkogen. Sekarang tampak jelas bahwa satu-satunya
sifat yang menyatukan gen-gen ini sebagai suatu kelompok adalah bahwa mereka semua
memainkan peran sentral dalam pengendalian pembelahan sel. Ketika diklasifikasikan menurut
fungsinya, protoonkogen yang berbeda tampak cocok menjadi empat kelompok: (1) yang
mengkode faktor pertumbuhan (c-sis) atau reseptor faktor tumbuh (c-fms dan c-errb5), (2) yang
menyandikan Protein pengikat GTP dengan ketajaman GTPase (cH-ras, cK-ras, dan N-ras), (3)
protein yang menyandikan proein kinases, baik nase proksein ki spesifik tirosin (c-ahl cfes, efgr
cfps cros, csrt, dan c-ya) atau protein kinase spesifik serin / thrconine (c-mil, c-mos dan c-raf,
dan (4) yang menyandikan regulator transkripsional (e-fos, c-juni, cerbA, c-myc, dan mungkin c-
myb and c-ets).
 We probably know the most about the function of the protooncogene products that are
growh factors or growth-factor receptors because they were studied long before we knew of the
exisience of protooncogenes. For example, consider the growth-factor receptors encoded by c-
erbB and c-fms. The prototype structure of such growh-factor receptors that have intracellular
tyrosine-specific protein kinase activities is shown in Fig. 17.5. Although we still do not know
exactly how these proteins function, it seems quite clear that they are involved in the transfer of
signals from the cell surface to the cell nucleus. They bind growh factors at their extracellular
binding sites and transmit a signal, presumably via an allosteric tansition, to the intracellular
tyrosine kinase site. Thus, in turn, must activate the kinase and induce phosphorylations of key
intracellular proteins. Activation of the tyrosine kinase site may involve autphosphorylation
because these receptor protein kinases have been shown to undergo reversible autophosporilation
specific tyrosine residues near the intracellular COOH termini of the proteins. The epidermal
growth factor receptor is also known to undergo phosphorylation by other cellular protein
kinases (eg, protein kinase C) and to interact with other protein factors that modulate its activity
Thus, an accurate picture of the mode of action of these key regulatory proteins in signal
transduction must await the results of further studies. When available, this picture will almost
certainly depend on an understanding of the three-dimensional structur and function of the
receptor molecule plus all the other macromolecules with which it interacts.
Kita mungkin tahu paling banyak tentang fungsi produk protooncogene yang merupakan
faktor pertumbuhan atau reseptor faktor pertumbuhan karena mereka dipelajari jauh sebelum kita
mengetahui keberadaan protooncogenes. Sebagai contoh, perhatikan reseptor faktor
pertumbuhan yang dikodekan oleh c-erbB dan c-fms. Struktur prototipe reseptor faktor
pertumbuhan yang memiliki aktivitas protein kinase spesifik tirosin intraseluler ditunjukkan pada
Gambar. 17.5. Meskipun kita masih tidak tahu persis bagaimana fungsi protein ini, tampaknya
cukup jelas bahwa mereka terlibat dalam transfer sinyal dari permukaan sel ke inti sel. Mereka
mengikat faktor pertumbuhan di situs pengikatan ekstraseluler mereka dan mengirimkan sinyal,
mungkin melalui tansition alosterik, ke situs tirosin kinase intraseluler. Jadi, pada gilirannya,
harus mengaktifkan kinase dan menginduksi fosforilasi protein intraseluler kunci. Aktivasi situs
tirosin kinase dapat melibatkan autosforilasi karena kinase protein reseptor ini telah terbukti
mengalami residu tirosin autofosporilasi spesifik yang dapat dibalikan dekat terminiin COOH
intraseluler dari protein. Reseptor faktor pertumbuhan epidermal juga diketahui menjalani
fosforilasi oleh protein seluler kinase lain (misalnya, protein kinase C) dan untuk berinteraksi
dengan faktor protein lain yang memodulasi aktivitasnya. Dengan demikian, gambaran akurat
tentang cara kerja protein pengatur utama ini dalam transduksi sinyal harus menunggu hasil
penelitian lebih lanjut. Bila tersedia, gambar ini hampir pasti akan tergantung pada pemahaman
tentang struktur tiga dimensi dan fungsi molekul reseptor ditambah semua makromolekul lain
yang berinteraksi.
The c-src protein and the products of several of the related protooncogenes also have
tyrosine-specific protein kinase acivities. However, these protein kinases are not transmembrane
proteins, but rather are associated with the cytoplasmic face of the plasma membrane.
Presumably, these protein kinases also are involved in signal transduction, but we do not know
what signal(s) they respond to or how this signal is transmitted As a working model, it seems
reasonable to assume that phosphorylation of key intracellular protein targets is the most likely
mode of action of these protoonogenes products. Clearly, the mechanisms of action of the cras
gene-products and the protoonogene products that function as transcription activators are totally
distinct from those of the protooncogene products just discussed. The available information
about the modes of action of the c-ras, c-jos, and c-jun gene-products is discussed in the next two
sections of this chapter.
Protein c-src dan produk dari beberapa protooncogen yang terkait juga memiliki aktivitas
protein kinase spesifik tirosin. Namun, protein kinase ini bukan protein transmembran, tetapi
lebih terkait dengan permukaan sitoplasma membran plasma. Agaknya, protein kinase ini juga
terlibat dalam transduksi sinyal, tetapi kita tidak tahu sinyal apa yang mereka respons atau
bagaimana sinyal ini ditransmisikan Sebagai model yang berfungsi, tampaknya masuk akal untuk
menganggap bahwa fosforilasi target protein intraseluler utama adalah kemungkinan besar aksi
produk protoonogen ini. Jelas, mekanisme aksi produk gen cras dan produk protoonogen yang
berfungsi sebagai aktivator transkripsi benar-benar berbeda dari produk protoonkogen yang baru
saja dibahas. Informasi yang tersedia tentang mode aksi gen-c-ras, c-jos, dan c-jun dibahas dalam
dua bagian selanjutnya dari bab ini.
p-jun and p-fos as Activators of Gene Transcription
The products of two protooncogenes, c-jun and c-fos, have recently been shown to be
identical to proteins that had previously been demonstrated to be components of nuclear
complexes that activated the transcription of specific genes. The product of c-jun is now known
to be transcription factor AP1, which was first identified as a nuclear factor required for
transcription induced by certain tumor-promoting compounds. Transcription factor AP-1 (p-jun)
had been shown to bind specifically to enhancer elements in the simian virus 40 genome and in
the shuman metallothionein IIA gene. The DNA-binding sites for AP-1 (pjun) have a core
consensus sequence of TGACTCA. Even more recently, the product of the c-fos protooncogene
bas been shown to form a tight complex with the c-jun gene.-product. Both protooncogenes
proteins contain leucine-rich motifs that have the potential to form α-helical regions with leucine
side chains projecting from the same face of the helix at regular intervals. Such proteins are
proposed to interact by forming so-called "leucine zippers" with the leucine side chains of the
two proteins interdigi-tied. Whether the "leucine zipper" model is correct or not remains to be
determined. However, in any case, it is clear that the c-jun and cfos products form a tight
complex that functions as a trans-activator of transcrip-tion from enhancer/promoter regions that
contain the TGACTCA consensus binding sequence A model for the mode of action of the
complex containing the protein products of c-jun and c-fos is shown in Fig. 17.6. Note that the
products cf these protooncogenes are commonly designated simply c-Jun and c-Fos (the
corresponding genes are c-jun and c-fos). The trans-activation of the transcription of responder
genes by the c-jun/c-Fos complex has now been demonstrated in several laboratories. Present
research is directed at identifying more of the genes that are regulated by this c-Jun/c-Fos
complex and at determining what factors regulate the expression of the c-jun and c-fas
protooncogenes themselves. This c-Jun/c-Fos story is unfolding very rapidly, and our discussion
of it promises to be out-of-date long before this texbook is in print.
p-juni dan p-fos sebagai Aktivator Transkripsi Gene
Produk dari dua protooncogenes, c-jun dan c-fos, baru-baru ini terbukti identik dengan
protein yang sebelumnya telah diperlihatkan sebagai komponen kompleks nuklir yang
mengaktifkan transkripsi gen spesifik. Produk dari c-jun sekarang dikenal sebagai faktor
transkripsi AP1, yang pertama kali diidentifikasi sebagai faktor nuklir yang diperlukan untuk
transkripsi yang diinduksi oleh senyawa pemicu tumor tertentu. Faktor transkripsi AP-1 (p-juni)
telah terbukti berikatan secara khusus dengan unsur-unsur penambah dalam genom virus simian
40 dan pada gen IIA shuman metallothionein. Situs pengikatan DNA untuk AP-1 (pjun)
memiliki urutan konsensus inti dari TGACTCA. Bahkan lebih baru-baru ini, produk dari bas c-
fos protooncogene telah terbukti membentuk kompleks yang ketat dengan produk-gen c-jun.
Kedua protein protooncogenes mengandung motif kaya leusin yang berpotensi membentuk
daerah heliks α dengan rantai samping leusin yang diproyeksikan dari permukaan heliks yang
sama secara berkala. Protein semacam itu diusulkan untuk berinteraksi dengan membentuk apa
yang disebut "leucine ritsleting" dengan rantai samping leusin dari dua protein yang saling
terikat. Apakah model "leucine zipper" sudah benar atau belum, masih harus ditentukan. Namun,
dalam kasus apa pun, jelas bahwa produk c-jun dan cfos membentuk kompleks ketat yang
berfungsi sebagai trans-aktivator transkrip dari daerah penambah / promotor yang berisi urutan
pengikatan konsensus TGACTCA Model untuk mode aksi kompleks yang mengandung produk
protein c-jun dan c-fos ditunjukkan pada Gambar. 17.6. Perhatikan bahwa produk cf
protoonkogen ini biasanya hanya disebut c-Jun dan c-Fos (gen yang sesuai adalah c-jun dan c-
fos). Trans-aktivasi dari transkripsi gen responden oleh kompleks c-jun / c-Fos sekarang telah
ditunjukkan di beberapa laboratorium. Penelitian saat ini diarahkan untuk mengidentifikasi lebih
banyak gen yang diatur oleh kompleks c-Jun / c-Fos ini dan untuk menentukan faktor-faktor apa
yang mengatur ekspresi protooncogenes c-jun dan c-fas sendiri. Kisah c-Jun / c-Fos ini
berlangsung sangat cepat, dan diskusi kita tentang itu berjanji akan ketinggalan zaman jauh
sebelum cetak buku ini dicetak.

Mutational Origin of ras Cellular Oncogencs

The oncogenes present in cancer cells can sometimes be identified by thir ability to
uransform cells growing in culture (in particular, those of a mouse cell culture line called NIH
3T3) to a neoplastic state by means of transfection experiments as described in a preceding
section of this chapter. When such transfection experiments have been used to search for
oncogenes in the genomes of various types of human cancer cells, such oncogenes are frequently
found. Moreover, when these oncogenes from buman cancer ceils are cloned and characterized,
they are frequently found to be derivatives of c-ras protooncogenes. The genomes of all
vertebrates contain three distinct, but closely related ras protooncogenes. Two of these, c-H-ras
and c-K-ras, are closely related to the v-ras oncogenes of the Harvey and Kirsten strains,
respectively, of the murine sarcoma virus of the rat see Table 17.1). The third, designated N ras,
has no been found to have a homolog in any retroviral genom to date. All three of these cellular
ras protooncogenes bining proreint with GTPase acivity. Unfortunately the functions of these ras
proteins are still unknown.
Asal Muasal Onkogen Sel ras
Onkogen yang ada dalam sel kanker kadang-kadang dapat diidentifikasi dengan
kemampuannya untuk membentuk sel yang tumbuh dalam kultur (khususnya, garis kultur sel
tikus yang disebut NIH 3T3) ke keadaan neoplastik melalui eksperimen transfeksi seperti yang
dijelaskan dalam bagian sebelumnya dari Bab ini. Ketika eksperimen transfeksi semacam itu
telah digunakan untuk mencari onkogen dalam genom dari berbagai jenis sel kanker manusia,
onkogen semacam itu sering ditemukan. Terlebih lagi, ketika onkogen-kanker dari langit-langit
kanker manusia dikloning dan dikarakterisasi, mereka sering ditemukan sebagai turunan dari c-
ras protooncogenes. Genom dari semua vertebrata mengandung tiga ras protooncogen yang
berbeda, tetapi berkaitan erat. Dua di antaranya, c-H-ras dan c-K-ras, terkait erat dengan
onkogen v-ras dari strain Harvey dan Kirsten, masing-masing, dari virus sarkoma murine tikus,
lihat Tabel 17.1). Yang ketiga, ras N yang ditunjuk, belum ditemukan memiliki homolog dalam
genom retroviral apa pun hingga saat ini. Ketiga proreoncogenes ras seluler proreint bining ini
dengan aktivitas GTPase. Sayangnya fungsi protein ras ini masih belum diketahui.
All three of these cellular ras protooncogenes have been shown to undergo mutaion to
oncogenic derivatives that can be derected by transfection experiments by using the genomic
DNAs from spontaneous or carcinogen-induced tumor. In fact, the majority of the NIH 3T3 cell-
transforming oncogenes that have been detected in human, tumor cells have tuned out to be
variants of one of the three cellular ras protooncogenes. The first cellular oncogene to be
characterized in detail was derived from a human bladder carcinoma called Ej. When the rellular
oncogene present in these EJ bladder tumor cells was cloned and sequenced, it was found to he a
deriveative of tha c-h-ras protoncogene. Surprisingly, the oncogenic of the EJ c-H-ras mutant
gene was found to resuit from a single base pair subsiitution that is, a single base-pair difference
was shown to correlate with the ability or inability of the two genes to transform N 3T3 cel's
growing in culture. The oncogene as produced from its protonoocogene by a GC TA tranversion.
This mutation result c substitution of valine for the glycine present as the twelftb amino acid
(from the amino terminus) in the normal c-H-ras protein.
Ketiga ras protoonkogen seluler ini telah terbukti menjalani mutasi menjadi turunan
onkogenik yang dapat diturunkan dengan percobaan transfeksi dengan menggunakan DNA
genom dari tumor spontan atau yang diinduksi karsinogen. Faktanya, sebagian besar onkogen
pengubah sel NIH 3T3 yang telah terdeteksi pada manusia, sel-sel tumor telah berubah menjadi
varian dari salah satu dari tiga ras seluler protooncogenes. Onkogen seluler pertama yang
ditandai secara detail berasal dari karsinoma kandung kemih manusia yang disebut Ej. Ketika
onkogen rellular hadir dalam sel-sel tumor kandung kemih EJ ini diklon dan diurutkan,
ditemukan bahwa ia merupakan turunan dari protonogen c-h-ras. Secara mengejutkan, onkogenik
dari gen mutan EJ cH-ras ditemukan kembali dari subsiitusi pasangan basa tunggal, yaitu,
perbedaan pasangan basa tunggal terbukti berkorelasi dengan kemampuan atau ketidakmampuan
dua gen untuk mengubah pertumbuhan sel N 3T3 cel dalam budaya. Onkogen yang dihasilkan
dari protonokogennya oleh tranformasi TA GC. Mutasi ini menghasilkan c substitusi valin untuk
glisin yang hadir sebagai asam amino twelftb (dari terminal amino) dalam protein c-H-ras
normal.
In coutrast to many of the retroviral oncogenes the EJ c-H-ras oncogene from the human
bladder carcinoma does not result in the synthesis of abnormally large amounts of its protein
product. At present we don't know why such a small change in a protooncogene, a normal
cellular gene, should produce an oncogene capable of transforming cells to the cancer ous state.
Recent studies have indicated that both the normal cells and the tumor cells of some patients with
carcinomas are heterozygous for the c-h-ras oncogene and the c-H-ras protooncogene. These
results suggest that the oncogene causes a predisposition, rather than an immediate change, to the
cancerous state.
Subsequent to the characterization of the c-H-ras oncogene present in the EJ human
bladder carcinoma line, oncogenic varian's of the three c-ras protooncogenes have been detected
and characterized in a large number of different mammalian cancer cell lines. These have
included cells from a variety of lung colon, mammary, and bladder tumors plus neuro blastomas
fibrosarcomas a teratocarcinomaa melanoma and a promyelocytic leukemia. When the
oncogenes present in these cancer cells were cloned and sequenced, all were found to be variants
of one of the three c-ras protooncogenes. Moreover, all the variant ras alleles with oncogenic
potential as assayed by NIH 3T3 transfection experiments resulted in amino acid substitutions at
one of three amino acid positions in the ras gene-product. All the mutations that conferred
oncogenicity on the ras genes involved one or more of three codons: codons number 12,59, and
61. Some of the mutations that have been documented in c-ras genes in various cancer cells are
shown in Table 17.2. Note that the base substitutions that gave rise to the mutant ras alleles and
the amino acid changes that these mutations produce in the mutant ras proteins are given in
boldface type in Table 17.2. As would be expected, many of the mutant alleles result from
nucleotide-pair substitutions that produce changes of basic amino acids to neutral or acidic
amino acids or vice versa and thus change the charge of the mutant ras gene-product.
Berbeda dengan banyak dari onkogen retroviral, onkogen EJ c-H-ras dari karsinoma
kandung kemih manusia tidak menghasilkan sintesis sejumlah besar produk proteinnya yang
abnormal. Saat ini kita tidak tahu mengapa perubahan kecil pada protooncogene, gen seluler
yang normal, harus menghasilkan onkogen yang mampu mengubah sel menjadi kanker. Studi
terbaru menunjukkan bahwa baik sel normal maupun sel tumor pada beberapa pasien dengan
karsinoma bersifat heterozigot untuk onkogen c-h-ras dan protooncogene c-H-ras. Hasil ini
menunjukkan bahwa onkogen menyebabkan kecenderungan, daripada perubahan langsung, ke
keadaan kanker.
Setelah karakterisasi c-H-ras onkogen hadir dalam garis karsinoma kandung kemih
manusia EJ, varian onkogenik dari tiga c-ras protooncogenes telah terdeteksi dan ditandai dalam
sejumlah besar garis sel kanker mamalia yang berbeda. Ini telah termasuk sel-sel dari berbagai
usus, paru-paru, dan tumor kandung kemih paru-paru ditambah neuro blastomas fibrosarcomas
melanoma teratocarcinomaa dan leukemia promyelocytic. Ketika onkogen yang ada dalam sel
kanker ini diklon dan diurutkan, semuanya ditemukan sebagai varian salah satu dari tiga
protoonkogen c-ras. Selain itu, semua varian ras alel dengan potensi onkogenik seperti yang diuji
oleh eksperimen transfeksi NIH 3T3 menghasilkan substitusi asam amino pada salah satu dari
tiga posisi asam amino dalam produk gen ras. Semua mutasi yang memberikan onkogenitas pada
gen ras melibatkan satu atau lebih dari tiga kodon: kodon nomor 12,59, dan 61. Beberapa mutasi
yang telah didokumentasikan dalam gen c-ras dalam berbagai sel kanker ditunjukkan pada Tabel
17.2. Perhatikan bahwa substitusi basa yang memunculkan alel ras mutan dan perubahan asam
amino yang dihasilkan mutasi ini dalam protein ras mutan diberikan dalam huruf tebal pada
Tabel 17.2. Seperti yang diharapkan, banyak alel mutan dihasilkan dari substitusi pasangan
nukleotida yang menghasilkan perubahan asam amino basa menjadi asam amino netral atau asam
amino atau sebaliknya dan karenanya mengubah muatan produk gen ras mutan.

Figure 17.5 Schematic drawing of the protorype structure of transmembrane growth factor
receptors with protein tyrosine kinase activities. These receptor proteins play key roles in signal
transduction from the cell surface to the cell nucleus; details of the molecular mechanisms by
which they transmit these signals are still unknown.
Gambar 17.5 Gambar skematik dari struktur protoripe reseptor faktor pertumbuhan
transmembran dengan aktivitas protein tirosin kinase. Protein reseptor ini memainkan peran
penting dalam transduksi sinyal dari permukaan sel ke inti sel; rincian mekanisme molekuler
yang digunakan untuk mengirimkan sinyal-sinyal ini masih belum diketahui.

Rina
Although we do not know these mutations in the c-ras genes give rise to their
oncogenicity; we can be quite certain that it involves an activity that is dependent on the amino
acids present at positions 12, 59, and 61 in the ras polypeptides. Interestingly, these mutations do
not seem to alter the GTP-binding properties of the ras proteins, but they do reduce or eliminate
the GTPase activities of these proteins. This property of the mutant ras proteins suggests a
possible mode of action. Other GTP-binding proteins with GTPase activity,the so-called G
proteins, are known to interact with adenylate cyclase and alter the cAMP levels in cells and,
thus, modify the metabolic behavior of these cells. These G proteins are plasma membrane
proteins that are inactive except when stimulated by specific hormone-receptor interactions.
When stimulated, the G proteins bind GTP and modulate adenylate cyclase activity. However,
the GTP bound to G proteins is then hydrolyzed by the resident GTPase activity, returning the
protein to the inactive state. If the ras proteins act by a similar mechanism, the mutational loss of
the GTPase activity could lock the ras protein in the active form, which might trigger continual
cell division and tumor formation. Obviously, the results of further studies are needed to evaluate
the accuracy of this model and to identify the normal cellular functions of the c-ras
protoonccogene products.
 Meskipun kita tidak tahu mutasi ini pada gen c-ras memunculkan onkogenisitasnya; kita
bisa sangat yakin bahwa itu melibatkan suatu kegiatan yang tergantung pada asam amino yang
ada pada posisi 12, 59, dan 61 dalam ras polipeptida. Menariknya, mutasi ini tampaknya tidak
mengubah sifat pengikatan GTP protein ras, tetapi mereka mengurangi atau menghilangkan
aktivitas GTPase protein ini. Sifat protein ras mutan ini menunjukkan cara kerja yang
memungkinkan. Protein pengikat GTP lainnya dengan aktivitas GTPase, yang disebut protein G,
diketahui berinteraksi dengan adenilat siklase dan mengubah tingkat cAMP dalam sel dan,
dengan demikian, memodifikasi perilaku metabolisme sel-sel ini. Protein G ini adalah protein
membran plasma yang tidak aktif kecuali jika distimulasi oleh interaksi reseptor hormon tertentu.
Ketika distimulasi, protein G mengikat GTP dan memodulasi aktivitas adenilat siklase. Namun,
GTP terikat ke protein G kemudian dihidrolisis oleh aktivitas GTPase penduduk, mengembalikan
protein ke keadaan tidak aktif. Jika protein ras bertindak dengan mekanisme yang sama,
hilangnya aktivitas GTPase yang mutasional dapat mengunci protein ras dalam bentuk aktif,
yang dapat memicu pembelahan sel dan pembentukan tumor secara terus menerus. Jelas, hasil
penelitian lebih lanjut diperlukan untuk mengevaluasi keakuratan model ini dan untuk
mengidentifikasi fungsi seluler normal dari produk c-ras protoonccogene.
At present, it appears likely that the mutant oncogenic derivatives of the c-ras genes
present in cancer cells will provide important clues that lead to the discovery of the normal
cellular functions of the c-ras protooncogenes, once again illustrating the power of the
mutational dissection approach in investigating biological processes. Whatever these functions
are, it seems safe to conclude that the c-ras gene-products play key roles in the control of cell
division.
Saat ini, nampaknya turunan onkogenik mutan dari gen c-ras yang ada dalam sel kanker
akan memberikan petunjuk penting yang mengarah pada penemuan fungsi seluler normal dari c-
ras protooncogenes, sekali lagi menggambarkan kekuatan mutasi pendekatan diseksi dalam
menyelidiki proses biologis. Apa pun fungsi ini, tampaknya aman untuk menyimpulkan bahwa
produk gen c-ras memainkan peran kunci dalam kontrol pembelahan sel.

Translocation Breakpoints at Protooncogene Loci

For years, cytogeneticists have documented correlations between certain types of cancer
and specific changes in chromosome structure. In particular, translocations (the breakage and
transfer of parts of chromosomes to nonhomologous chromosomes; see chapter 18, p. 495) and
deletion or deficiencies (the breakage and loss of parts of chromosomes; see chapter 18, p. 490)
involving specific chromosomes, and, more importantly, often breakpoints at the same positions
on these chromosomes, were repeatedly observed in certain types of cancer cells. The best-
known example of this is the so-called “Philadelphia” chromosome, an altered chromosome 22
that has lost a large segment of its long arm. This abnormal chromosome has been found in
various studies in up to 90 percent of the patients-suffering from a specific type of cancer called
chronic myelogenous leukemia.
 Selama bertahun-tahun, cytogeneticists telah mendokumentasikan korelasi antara jenis
kanker tertentu dan perubahan spesifik dalam struktur kromosom. Secara khusus, translokasi
(kerusakan dan transfer bagian kromosom ke kromosom nonhomolog; lihat bab 18, hlm. 495)
dan penghapusan atau defisiensi (kerusakan dan hilangnya bagian kromosom; lihat bab 18, hlm.
490) yang melibatkan kromosom spesifik , dan, yang lebih penting, sering breakpoint pada posisi
yang sama pada kromosom ini, berulang kali diamati pada beberapa jenis sel kanker. Contoh
paling terkenal dari hal ini adalah apa yang disebut kromosom "Philadelphia", sebuah
kromosom 22 yang telah diubah yang telah kehilangan sebagian besar lengan panjangnya.
Kromosom abnormal ini telah ditemukan dalam berbagai penelitian hingga 90 persen dari
pasien-menderita kanker jenis tertentu yang disebut leukemia myelogenous kronis.
Now that the chromosomal locations of several human cellular proto-oncogenes have
been determined (Fig. 17.7), a striking correlation is evident between their locations and the
chromosomal breakpoints of translocations and deficiencies observed in specific types of cancer
cells. These results have led to speculations that the observed chromosome breaks and
rearrangements may have caused altered expression of proto-oncogenes or other important
regulatory genes present in the vicinity of the breakpoints.
Sekarang setelah lokasi kromosom dari beberapa proto-onkogen seluler manusia telah
ditentukan (Gbr. 17.7), korelasi yang mencolok terbukti antara lokasi mereka dan breakpoint
kromosom dari translokasi dan defisiensi yang diamati pada jenis sel kanker tertentu. Hasil ini
telah menimbulkan spekulasi bahwa kerusakan kromosom yang diamati dan penataan ulang
mungkin telah menyebabkan perubahan ekspresi proto-onkogen atau gen pengatur penting
lainnya yang ada di sekitar breakpoints.
The Philadelphia chromosome (named after the city in which it was discovered) was first
detected in patients with chronic myelogenous leukemia in 1960. Initially, the Philadelphia
chromosome was thought to be a simple deletion of the distal portion of the long arm of
chromosome 22. Subsequently, the Philadelphia chromosome was shown to have been produced
by a reciprocal translocation involving the end of the long arms of chromosomes 9 and 22 (Fig.
17.8). The breakpoints on chromosome 9 that give rise to these translocations occur very close to
the c-abl proto-oncogene, and the exchange transfer the c-abl gene to chromosome 22. In some
patients, abnormal c-abl transcripts are produced; in other patients, the breakpoints occur farther
from, but always 5’ (relative to the direction of transcription) to c-abl. Although we still do not
know what is caused and what is effect I this oncogenic pathway, it seems likely that the
abnormal expression of c-abl resulting from the translocation event is involved in one step of the
pathway.
Kromosom Philadelphia (dinamai berdasarkan kota tempat ditemukannya) pertama kali
terdeteksi pada pasien dengan leukemia myelogenous kronis pada tahun 1960. Awalnya,
kromosom Philadelphia dianggap sebagai penghapusan sederhana dari bagian distal lengan
panjang kromosom 22. Selanjutnya, kromosom Philadelphia terbukti diproduksi oleh translokasi
resiprokal yang melibatkan ujung lengan panjang kromosom 9 dan 22 (Gambar 17.8).
Breakpoint pada kromosom 9 yang menimbulkan translokasi ini terjadi sangat dekat dengan c-
abl proto-onkogen, dan pertukaran mentransfer gen c-abl ke kromosom 22. Pada beberapa
pasien, transkrip c-abl abnormal diproduksi; pada pasien lain, breakpoint terjadi lebih jauh dari,
tetapi selalu 5 '(relatif terhadap arah transkripsi) ke c-abl. Meskipun kita masih belum tahu apa
yang menyebabkan dan apa efeknya pada jalur onkogenik ini, sepertinya ekspresi abnormal c-abl
yang dihasilkan dari peristiwa translokasi terlibat dalam satu langkah dari jalur tersebut.
Another type of cancer that is consistently (>80 percent) associated with specific kinds of
translocations is Burkitt’s lymphoma, a cancer of the antibody producing B lymphocytes. This
lymphoma is very common in certain regions of Africa and frequently develops in individuals
infected with Epstein-Barr virus. The translocations observed in B cells of patients with Burkitt’s
lymphoma invariably involve chromosome δ and one of the three chromosomes (2, 14, and 22)
that carry genes encoding antibody chains (see chapter 16). Translocations involving
chromosomes 8 and 14 are by far the most common; chromosome 14 carries the heavy chain
antibody genes. These B cell lymphomas generally secrete antibodies, thus the heavy chain
antibody genes are being expressed in these tumor cells.
Jenis kanker lain yang secara konsisten (> 80 persen) terkait dengan jenis translokasi
tertentu adalah limfoma Burkitt, kanker antibodi yang memproduksi limfosit B. Limfoma ini
sangat umum di daerah tertentu di Afrika dan sering berkembang pada orang yang terinfeksi
virus Epstein-Barr. Translokasi diamati dalam sel B pasien dengan limfoma Burkitt selalu
melibatkan kromosom δ dan salah satu dari tiga kromosom (2, 14, dan 22) yang membawa gen
yang mengkodekan rantai antibodi (lihat bab 16). Translokasi yang melibatkan kromosom 8 dan
14 sejauh ini adalah yang paling umum; kromosom 14 membawa gen antibodi rantai berat.
Limfoma sel B ini umumnya mengeluarkan antibodi, sehingga gen antibodi rantai berat
diekspresikan dalam sel tumor ini.
The most common sites of the chromosome breaks that gives rise to the translocations
between chromosomes 8 and 14 in Burkitt’s lymphoma cells are in bands q24 and q32,
respectively (Fig. 17.9). the c-myc proto-oncogene is located in band q24 on chromosome 8 and
c-myc is transferred adjacent to the heavy chain antibody genes on chromosome 14 by the
translocation events. Again, as for the Philadelphia chromosome, we do not understand the
consequences of translocating the c-myc proto-oncogene to chromosome 14 next to the antibody
genes. However, it is generally assumed that the c-myc is expressed abnormally in the new
location, and that this abnormal expression somehow contributes to the oncogenic
transformations of Burkitt’s lymphoma cells.
Situs yang paling umum dari istirahat kromosom yang menimbulkan translokasi antara
kromosom 8 dan 14 dalam sel limfoma Burkitt masing-masing adalah dalam pita q24 dan q32,
masing-masing (Gambar 17.9). Proto-onkogen c-myc terletak di pita q24 pada kromosom 8 dan
c-myc ditransfer berdampingan dengan gen antibodi rantai berat pada kromosom 14 melalui
peristiwa translokasi. Sekali lagi, seperti untuk kromosom Philadelphia, kita tidak mengerti
konsekuensi dari mentranslokasi proto-onkogen c-myc ke kromosom 14 di samping gen
antibodi. Namun, secara umum diasumsikan bahwa c-myc diekspresikan secara abnormal di
lokasi baru, dan bahwa ekspresi abnormal ini berkontribusi pada transformasi onkogenik sel
limfoma Burkitt.
 Other chromosomal translocation events have been detected with high frequencies in
other types of cancer cells as well, although none with as high an incidence as the translocations
associated with chronic myelogenous leukemia and Burkitt’s lymphoma. For a discussion of the
chromosome aberrations detected in various types of cancer cells, the reader is referred to an
excellent review by Le Beau and Rowley (see references).
Kejadian translokasi kromosom lain telah terdeteksi dengan frekuensi tinggi pada jenis
sel kanker lainnya, walaupun tidak ada yang memiliki insiden setinggi translokasi yang terkait
dengan leukemia myelogenous kronis dan limfoma Burkitt. Untuk diskusi tentang penyimpangan
kromosom terdeteksi dalam berbagai jenis sel kanker, pembaca dirujuk ke review yang sangat
baik oleh Le Beau dan Rowley (lihat referensi).

Figure 17.7 Chromosomal locations of fifteen human proto-oncogenes and of breakpoints

(arrows to the right of the chromosomes) observed in translocations found to be consistently
associated with specific types of cancer (see text). The symbols for the various proto-oncogenes
are derived from the names of the retroviruses that carry the homologous viral oncogenes (see
Table 17.1). (Based on data summarized in Fig.1 of M. M. Le Beau and J. D. Rowley, adv. In
Hum. Genet. 15: 1-54, 1986)
Gambar 17.7 Lokasi kromosom lima belas proto-onkogen manusia dan breakpoint (panah ke
kanan kromosom) yang diamati dalam translokasi ditemukan secara konsisten terkait dengan
jenis kanker tertentu (lihat teks). Simbol untuk berbagai proto-onkogen berasal dari nama
retrovirus yang membawa onkogen virus homolog (lihat Tabel 17.1). (Berdasarkan data yang
diringkas dalam Gambar 1 M. M. Le Beau dan J. D. Rowley, adv. Dalam Hum. Genet. 15: 1-54,
1986)

Figure 17.8 Diagram of the reciprocal translocations between chromosomes 9 and 22 that give
rise to the Philadelphia chromosomes found in about 90 percent of the patients with chronic
myelogenous leukemia. The breakpoints on chromosome 9 occur near the location of the c-abl
proto-oncogene, and the resulting translocations transfer the c-abl gene to the Philadelphia
chromosome (translocation chromosome 22). (After M. M. Le Beau and J. D. Rowley, Adv. In
Hum. Genet. 15: 1-54, 1986.)
Gambar 17.8 Diagram translokasi resiprokal antara kromosom 9 dan 22 yang menimbulkan
kromosom Philadelphia ditemukan pada sekitar 90 persen pasien dengan leukemia myelogenous
kronis. Breakpoint pada kromosom 9 terjadi di dekat lokasi c-abl proto-oncogene, dan
translokasi yang dihasilkan mentransfer gen c-abl ke kromosom Philadelphia (kromosom
translokasi 22). (Setelah M. M. Le Beau dan J. D. Rowley, Adv. In Hum. Genet. 15: 1-54, 1986.)

Insertional Activation of Proto-oncogenes

Scientists have known for over a decade that the RNA tumor viruses are of two distinct
types: (1) the acute transforming viruses like Rous sarcoma virus that carry oncogenes such as v-
src and (2) the slow transforming viruses that do not carry oncogenes and induce transformations
of cells to the neoplastic state only after extended latent periods (usually several months). The
key question was how these retroviruses that do not carry oncogenes could induce neoplastic
transformations. Extensive evidence now indicates that the slow transforming viruses most
frequently induce cancers by integrating as proviruses adjacent to proto-oncogenes and , in so
doing, activating these proto-oncogenes to an “overexpressed” state (Fig. 17.10). the long
terminal repeats (LTRs) of the DNA proviral forms of RNA tumor viruses (see Chapter 9, Fig.
9.13) contain very strong enhancer/promoter elements, and integration of these proviruses can
lead to increased rates of transcription of adjacent genes.

Aktivasi Penyisipan Proto-onkogen

Para ilmuwan telah mengetahui selama lebih dari satu dekade bahwa virus tumor RNA
terdiri dari dua jenis berbeda: (1) virus pengubah akut seperti virus Rous sarcoma yang
membawa onkogen seperti v-src dan (2) virus pengubah lambat yang tidak membawa onkogen.
dan menginduksi transformasi sel ke keadaan neoplastik hanya setelah periode laten yang
panjang (biasanya beberapa bulan). Pertanyaan kuncinya adalah bagaimana retrovirus yang tidak
membawa onkogen ini dapat memicu transformasi neoplastik. Bukti luas sekarang menunjukkan
bahwa virus yang mentransformasikan lambat paling sering memicu kanker dengan
mengintegrasikan sebagai provirus yang berdekatan dengan proto-onkogen dan, dengan
demikian, mengaktifkan proto-onkogen ini ke keadaan "diekspresikan" (Gbr. 17.10). long
terminal repeat (LTRs) dari bentuk proviral DNA virus tumor RNA (lihat Bab 9, Gambar 9.13)
mengandung unsur penambah / promotor yang sangat kuat, dan integrasi provirus ini dapat
menyebabkan peningkatan tingkat transkripsi gen yang berdekatan.
One of the best-known examples of retroviral activation of a normal cellular proto-
oncogene involves B cell lymphomas induced by the avian leukosis virus (ALV). The ALV
genome does not contain an oncogene. However, ALV is a serious pathogen of chickens; it
results in many types of cancers in infected flock, with lymphomas being the most common.
Molecular analysis of genomic DNA in these lymphomas showed that in many cases an ALV
provirus bad integrate adjacent to the c-myc proto-oncogene and had activated transcription such
that c-myc transcript levels were 30- to 100—fold higher than in normal cells. Moreover, these
transcripts were shown to contain an ALV LTR sequence at the 5’ terminus, indicating that
transcription was initiated from the proviral LTR promoter (Fig. 17.10). These results strongly
suggest that the lymphomas resulted from the overexpression of c-myc caused by the integration
of the proviral LTRs with their strong enhancer/promoters adjacent to c-myc.
Salah satu contoh paling terkenal dari aktivasi retroviral proto-onkogen seluler normal
melibatkan limfoma sel B yang diinduksi oleh avian leucosis virus (ALV). Genom ALV tidak
mengandung onkogen. Namun, ALV adalah patogen serius pada ayam; itu menghasilkan banyak
jenis kanker pada kawanan yang terinfeksi, dengan limfoma yang paling umum. Analisis
molekuler DNA genomik dalam limfoma ini menunjukkan bahwa dalam banyak kasus, provirus
ALV buruk berintegrasi berdekatan dengan c-myc proto-oncogene dan telah mengaktifkan
transkripsi sehingga tingkat transkrip c-myc adalah 30- hingga 100 — lipat lebih tinggi dari pada
sel normal . Selain itu, transkrip ini terbukti mengandung urutan ALV LTR di terminal 5 ',
menunjukkan bahwa transkripsi dimulai dari promotor LTR proviral (Gbr. 17.10). Hasil ini
sangat menunjukkan bahwa limfoma dihasilkan dari ekspresi berlebih dari c-myc yang
disebabkan oleh integrasi LTR proviral dengan enhancer kuat / promotor yang berdekatan
dengan c-myc.
Many similar examples of activation of proto-oncogenes by the insertion of either intact
proviruses or just proviral LTRs have now been described. Early examples that were defined in
detail by molecular analyses involved the proto-oncogenes c-myc, c-myb, and c-erbB.
Interestingly, activation may occur by proviral integrations on either side of the proto-oncogene
of within introns of the proto-oncogene. These results suggest that the enhancer elements present
within the proviral LTRs are often responsible for the observed transcriptional activation.
Banyak contoh serupa dari aktivasi proto-onkogen dengan penyisipan provirus utuh atau
hanya LTR proviral sekarang telah dijelaskan. Contoh awal yang didefinisikan secara rinci oleh
analisis molekuler melibatkan proto-onkogen c-myc, c-myb, dan c-erbB. Menariknya, aktivasi
dapat terjadi dengan integrasi proviral di kedua sisi proto-onkogen dalam intron proto-onkogen.
Hasil ini menunjukkan bahwa unsur-unsur enhancer hadir dalam LTR proviral sering
bertanggung jawab untuk aktivasi transkripsi yang diamati.

Amplification of Proto-oncogenes in Cancer Cells

One mechanism that can lead to increased levels of a particular gene-product in a cell is
to amplify the number of copies of the gene encoding that product. Sometimes such an
amplification event will occur as normal component of the process of development as in the case
of the amplification of the rRNA genes during oogenesis in animals (see chapter 15, p. 425). In
other cases, amplification can be induced to occur by selecting for increased tolerance to an
inhibitor of an essential enzyme. Finally, extensive evidence now indicates that specific proto-
oncogenes are frequently amplified in particular types of cancers. Although we still do not have
proof that these amplification events play causative role in the oncogenic processes that give rise
to these cancer cells, it seems likely that the amplification of a proto-oncogene and the resulting
overexpression of the proto-oncogene product might well be involved in oncogenesis since these
gene products are known to play a role in the control of cell division.
Amplifikasi Proto-onkogen dalam Sel Kanker
Salah satu mekanisme yang dapat menyebabkan peningkatan kadar produk gen tertentu
dalam sel adalah memperkuat jumlah salinan gen yang mengkode produk itu. Kadang-kadang
peristiwa amplifikasi seperti itu akan terjadi sebagai komponen normal dari proses
perkembangan seperti dalam kasus amplifikasi gen rRNA selama oogenesis pada hewan (lihat
bab 15, hal. 425). Dalam kasus lain, amplifikasi dapat diinduksi terjadi dengan memilih untuk
meningkatkan toleransi terhadap suatu penghambat enzim esensial. Akhirnya, bukti luas
sekarang menunjukkan bahwa proto-onkogen spesifik sering diperkuat pada jenis kanker
tertentu. Meskipun kami masih belum memiliki bukti bahwa peristiwa amplifikasi ini
memainkan peran kausatif dalam proses onkogenik yang memunculkan sel-sel kanker ini,
tampaknya ada kemungkinan bahwa amplifikasi proto-onkogen dan kemungkinan hasil berlebih
dari produk proto-onkogen mungkin terlibat dalam onkogenesis karena produk gen ini diketahui
berperan dalam kontrol pembelahan sel.
The best-known example of induced gene amplification involves the tolerance of animal
cells growing in culture to the drug methotrexate. Methotrexate inhibits the enzyme
dihydrofolate reductase, an enzyme that catalyzes an essential step in dTMP synthesis (and, thus,
in DNA synthesis). Methotrexate binds to the active site of dihydrofolate reductase and prevents
it from binding its normal substrate. If one selects for cells with tolerance to gradually increasing
concentration of methotrexate, some of the cells will become tolerant by amplifying the gene that
encodes dihydrofolate reductase. The methotrexate-tolerant cells contain more copies of this
gene and synthesize more dihydrofolate reductase than normal cells. As a result. They can
tolerate higher levels of methotrexate without being killed. Some of the enzyme molecules will
bind methotrexate and be inhibited, but with more enzyme, enough ree enzyme molecules will
exist to allow the cells to survive and grow. The more gene copies that are present (the greater
the degree of amplification), the more enzyme that will be synthesized, and the higher the
concentration of methotrexate that the cells can “tolerate” and still servive. In some
methotrexate-tolerant cell lines, the dihydrofolate reductase gene is highly amplified with over
1000 copies per cell.
Contoh amplifikasi gen terinduksi yang paling terkenal melibatkan toleransi sel-sel
hewan yang tumbuh dalam kultur terhadap metotreksat obat. Metotreksat menghambat enzim
dihidrofolat reduktase, enzim yang mengkatalisasi langkah penting dalam sintesis dTMP (dan,
dengan demikian, dalam sintesis DNA). Metotreksat berikatan dengan situs aktif reduktase
dihydrofolate dan mencegahnya dari mengikat substrat normalnya. Jika seseorang memilih sel-
sel dengan toleransi untuk secara bertahap meningkatkan konsentrasi metotreksat, beberapa sel
akan menjadi toleran dengan memperkuat gen yang mengkode dihydrofolate reductase. Sel-sel
yang toleran terhadap metotreksat mengandung lebih banyak salinan gen ini dan mensintesis
lebih banyak dihidrofolat reduktase daripada sel normal. Hasil dari. Mereka dapat mentoleransi
tingkat metotreksat yang lebih tinggi tanpa terbunuh. Beberapa molekul enzim akan mengikat
metotreksat dan dihambat, tetapi dengan lebih banyak enzim, molekul enzim ree yang cukup
akan ada untuk memungkinkan sel untuk bertahan hidup dan tumbuh. Semakin banyak salinan
gen yang ada (semakin besar tingkat amplifikasi), semakin banyak enzim yang akan disintesis,
dan semakin tinggi konsentrasi metotreksat sehingga sel-sel dapat "mentolerir" dan masih
diservis. Pada beberapa garis sel yang toleran terhadap metotreksat, gen dihidrofolat reduktase
sangat diperkuat dengan lebih dari 1000 salinan per sel.
The extra copies of the dihydrofolate reductase gene in these methotrexate-tolerant cell
lines are present either (1) on extra very small chromosomes called “double minutes” or DMs
(Fig. 17.11a) or (2) as tandemly repeated sequences within so-called “homogeneously staining
region” or HSRs (Fig. 17.11b) of otherwise normal chromosomes in the genome. The double-
minute chromosomes are supernumerary chromosomes that contain the amplified gene and
adjacent chromosomal DNA on extra-chromosomal circular molecules of DNA. They contain
the circular molecules of DNA packaged in nucleosomes and chromatin fibers just like normal
chromosomes. These small chromosomes look like two small dots in chromosome spreads (thus
the name “double minute”). The circular DNA molecules in these DM chromosomes are
predominantly in a post-replication state with the two DNA circles still attached to each other;
this explains their bipartite structure. The DNA molecules present in the DM chromosomes range
in size from about 50 kilobase-pairs (kb) to several hundred kb. The unit of the chromosome that
undergoes the amplification process is often referred to as an amplicon. In all cases studied to
date, the size of the amplicon has been much larger than the size of the gene encoding the
enzyme target of the drug used in the selection process. The same amplicon unit that is present in
DMs is often present as the tandemly repeated unit within the HSR regions of chromosomes
containing amplified genes. A general model of the amplification process is shown in Fig. 17.12;
this model has been shown to be accurate on a gross level for the amplification of the
dihydrofolate reductase gene in response to selection for tolerance to methotrexate in the
protozoan Leishmania tropica. Whether or not it provides an accurate picture of the
amplification process in higher animals and plants is still uncertain. In no case do we understand
the molecular mechanism by which the amplification process occurs.
Salinan tambahan dari gen reduktase dihydrofolate dalam garis sel toleran-metotreksat ini
hadir baik (1) pada kromosom ekstra sangat kecil yang disebut "menit ganda" atau DM (Gambar
17.11a) atau (2) sebagai urutan berulang berulang dalam disebut "daerah pewarnaan homogen"
atau HSR (Gambar 17.11b) dari kromosom yang normal dalam genom. Kromosom dua menit
adalah kromosom supernumerary yang mengandung gen yang diamplifikasi dan DNA
kromosom yang berdekatan pada molekul melingkar ekstra-kromosom DNA. Mereka
mengandung molekul melingkar DNA yang dikemas dalam nukleosom dan serat kromatin
seperti kromosom normal. Kromosom kecil ini terlihat seperti dua titik kecil dalam penyebaran
kromosom (dengan demikian nama "menit ganda"). Molekul DNA sirkular dalam kromosom
DM ini sebagian besar dalam keadaan pasca-replikasi dengan dua lingkaran DNA masih saling
menempel; ini menjelaskan struktur bipartit mereka. Molekul DNA yang ada dalam kromosom
DM memiliki ukuran mulai dari sekitar 50 kilobase-pasang (kb) hingga beberapa ratus kb. Unit
kromosom yang mengalami proses amplifikasi sering disebut sebagai amplikon. Dalam semua
kasus yang diteliti hingga saat ini, ukuran amplikon telah jauh lebih besar dari ukuran gen yang
mengkode target enzim obat yang digunakan dalam proses seleksi. Unit amplikon yang sama
yang ada dalam DM sering hadir sebagai unit berulang secara tandem di dalam wilayah HSR
dari kromosom yang mengandung gen yang diamplifikasi. Model umum dari proses amplifikasi
ditunjukkan pada Gambar 17.12; model ini telah terbukti akurat pada tingkat bruto untuk
amplifikasi gen reduktase dihydrofolate dalam menanggapi seleksi untuk toleransi terhadap
metotreksat dalam protozoa Leishmania tropica. Apakah itu memberikan gambaran yang akurat
tentang proses amplifikasi pada hewan dan tumbuhan tingkat tinggi masih belum pasti. Dalam
kasus apa pun kita tidak memahami mekanisme molekuler yang dengannya proses amplifikasi
terjadi.
Vilda
There is no considerable evidence indicating that the amplification of cellular
protooncogenes may be directly involved in the progression of oncogenesis in certain types of
human cancers. In some cases, the amplified protooncogene is present on DM chromosomes, in
other cases, the amplified protooncogene is part of a tandemly repeated amplicon present in an
HSR of a chromosome. In a few cases, the cancer cells contain both DMs and HSRs. In
particular, c-myc is found to be amplified with a very high frequency in small cell carcinomas of
the lung and with lower frequencies in some other types of cancer. In an early study, Alitalo and
colleagues used in situ hybridization and autoradiography to demonstrate the presence of
multiple copies of c-myc in an HSR on an abnormal X chromosome in malignant cells of a
patient with a carcinoma of the colon. The malignant cells of this patient also contained DM
chromosomes, and these DMs probably carried amplified copies of c-myc as well. However, the
sensitivity of the autoradiography was not sufficient to establish for certain that the DM
chromosomes carried copies of c myc. Many other studies have yielded similar results and
demonstrated the amplification of c-myc in several different types of human cancer cells,
particularly carcinomas of the lung. In addition, two cellular genes that are closely related to c-
myc, namely, L-myc and N-myc, are frequently found to be amplified in lung carcinomas and
neuroblastomas, respectively. Finally, c-erbß is often present in the amplified state in squamous
cell carcinomas and glioblastomas.
Tidak ada bukti yang cukup yang menunjukkan bahwa amplifikasi protooncogenes
selular mungkin terlibat langsung dalam perkembangan oncogenesis dalam beberapa jenis
kanker pada manusia. Dalam beberapa kasus, protoonkogen diperkuat hadir pada kromosom
DM, dalam kasus-kasus lain, protoonkogen diperkuat merupakan bagian dari tandem berulang
amplikon hadir dalam HSR dari kromosom. Dalam beberapa kasus, sel-sel kanker mengandung
DMS dan reaksi hiperpeka. Secara khusus, c-myc ditemukan diperkuat dengan frekuensi sangat
tinggi pada karsinoma sel kecil paru-paru dan dengan frekuensi yang lebih rendah dalam
beberapa jenis kanker lainnya. Dalam sebuah studi awal, Alitalo dan rekan digunakan dalam
hibridisasi in situ dan autoradiografi untuk menunjukkan kehadiran beberapa salinan dari c-myc
dalam HSR pada kromosom X abnormal pada sel-sel ganas dari pasien dengan karsinoma usus
besar. Sel-sel ganas dari pasien ini juga mengandung kromosom DM, dan DMS ini mungkin
dilakukan salinan diperkuat dari c-myc juga. Namun, sensitivitas autoradiografi itu tidak cukup
untuk menetapkan secara pasti bahwa kromosom DM dilakukan salinan c myc. Banyak
penelitian lain telah menghasilkan hasil yang sama dan menunjukkan amplifikasi c-myc dalam
beberapa jenis sel kanker manusia, terutama karsinoma paru-paru. Selain itu, dua gen seluler
yang berkaitan erat dengan c-myc, yaitu, L-myc dan N-myc, sering ditemukan untuk diperkuat
dalam karsinoma paru-paru dan neuroblastoma, masing-masing. Akhirnya, c-erbß sering hadir di
negara diperkuat pada karsinoma sel skuamosa dan glioblastomas.
Presumably, the effect (if induced there is an effect) of amplification of these cellular
protooncogenes results from the overproduction of the protooncogene product. The amplification
events probably are not involved in the initiation of oncogenesis but may contribute at
subsequent steps in the oncogenic pathway. However, we should hasten to add that there is no
solid evidence demonstrating that the amplification of any protooncogene plays a causative role
in oncogenesis. The amplification events could be more than secondary effects of other steps in
oncogenic pathways. Further evidence will be needed before the putative role of protooncogene
amplification in oncogenesis can be evaluated. Nevertheless, the recurrent amplification of
specific proto-oncogenes in particular types of cancers suggests that this correlation may be more
than chance and certainly warrants further study. Moreover, given the known central roles of the
products of some proto-oncogenes in the intercellular communications circuitry, it seems likely
that the overproducion of certain protooncogene products might well contribute to oncogenesis.
Agaknya, efek (jika diinduksi ada efek) dari amplifikasi protooncogenes selular ini hasil
dari kelebihan produksi produk protoonkogen. Peristiwa amplifikasi mungkin tidak terlibat
dalam inisiasi oncogenesis tetapi dapat berkontribusi pada langkah-langkah berikutnya dalam
jalur onkogenik. Namun, kita harus segera menambahkan bahwa tidak ada bukti kuat yang
menunjukkan bahwa amplifikasi protoonkogen setiap memainkan peran penyebab dalam
oncogenesis. Peristiwa amplifikasi bisa lebih dari efek sekunder dari langkah-langkah lain dalam
jalur onkogenik. Bukti lebih lanjut akan diperlukan sebelum peran diduga dari protoonkogen
amplifikasi di oncogenesis dapat dievaluasi. Namun, amplifikasi berulang proto-onkogen
tertentu khususnya jenis kanker menunjukkan bahwa korelasi ini mungkin lebih dari kesempatan
dan tentu menjamin studi lebih lanjut. Selain itu, mengingat peran sentral dikenal dari produk-
produk dari beberapa proto-onkogen di sirkuit komunikasi antar, tampaknya mungkin bahwa
produk berlebih protoonkogen tertentu mungkin juga berkontribusi oncogenesis.
Origin of Viral Oncogenes
Regardless of how oncogenes induce cancers, it now seems clear that retroviral
oncogenes have evolved from normal cellular protooncogenes Originally, it was thought that the
cellular homologs of viral oncogenes might be relics of integrated retroviral proviruses.
However, this is clearly not the case. Comparisons of the nucleotide sequences of viral
oncogenes and the homologous cellular protooncogenes have shown that these genes share major
regions of sequence identity. The key difference is that the cellular protooncogenes contain
introns whereas viral oncogenes are single exons This is not consistent with the idea that cellular
protooncogenes have evolved from v-oncogenes on integrated proviruses. Instead, it strongly
suggests that v-oncogenes are derived from ancestral cellular protooncogenes This difference is
to be expected if the v-oncogenes evolved from cellular protoconcogenes. The retroviral
genomes are RNA, and the intron sequences of RNA transcripts of protooncogenes should be
spliced out during RNA processing (Chapter 10). All that needs to occur is for an mRNA copy of
a protooncogene to be ligated into the RNA genome of a retrovirus by a recombination
mechanism that preserves the LTR regions of the viral genome. (The viral LTR sequences are
required for proviral integration.) The viral reverse transcriptase will then convert the mRNA-
viral RNA hybrid into homologous DNA for integration into the host genome. What could be of
greater value to a virus than to have a new gene that stimulates increased growth of its host,
while its integrated genome goes along for the ride?.
Asal Viral Onkogen
Terlepas dari bagaimana onkogen menginduksi kanker, sekarang tampak jelas bahwa
onkogen retroviral telah berevolusi dari protooncogenes sel normal Awalnya, ia berpikir bahwa
homolog selular onkogen virus mungkin peninggalan dari provirus retrovirus yang terintegrasi.
Namun, ini jelas tidak terjadi. Perbandingan urutan nukleotida onkogen virus dan
protooncogenes selular homolog telah menunjukkan bahwa gen ini berbagi wilayah utama urutan
identitas. Perbedaan utama adalah bahwa protooncogenes selular mengandung intron sedangkan
onkogen virus yang ekson tunggal ini tidak konsisten dengan ide bahwa protooncogenes seluler
telah berevolusi dari v-onkogen pada provirus terintegrasi. Sebagai gantinya, itu sangat
menunjukkan bahwa v-onkogen yang berasal dari protooncogenes seluler leluhur Perbedaan ini
diharapkan jika v-onkogen berevolusi dari protoconcogenes seluler. Genom retroviral yang
RNA, dan urutan intron transkrip RNA dari protooncogenes harus disambung keluar selama
pemrosesan RNA (Bab 10). Semua yang perlu terjadi adalah untuk salinan mRNA dari
protoonkogen yang akan diligasi ke dalam genom RNA dari retrovirus dengan mekanisme
rekombinasi yang melindungi daerah LTR dari genom virus. (urutan virus LTR yang diperlukan
untuk integrasi provirus.) reverse transcriptase virus maka akan mengkonversi mRNA-virus
RNA hybrid ke dalam DNA homolog untuk integrasi ke dalam genom inang. Apa yang bisa
menjadi nilai yang lebih besar untuk virus daripada memiliki gen baru yang merangsang
peningkatan pertumbuhan inangnya?
In some cases, different retroviruses that infect distantly related species have acquired
copies of the same cellular protooncogene. For example, the simian sarcoma virus of the monkey
and the P1 feline sarcoma virus of the cat both carry viral oncogenes derived from the c-sis
protooncogene. In other cases, closely related viruses contain oncogenes derived from
completely unrelated cellular proto-oncogenes.
Dalam beberapa kasus, retrovirus yang berbeda yang menginfeksi spesies jauh terkait
telah memperoleh salinan dari protoonkogen selular yang sama. Sebagai contoh, virus sarkoma
simian dari monyet dan virus sarkoma P1 kucing kucing baik membawa onkogen virus berasal
dari protoonkogen c-sis. Dalam kasus lain, virus terkait erat mengandung onkogen berasal dari
sama sekali tidak berhubungan seluler proto-onkogen
By comparing the nudeotide sequences of the v-oncogenes and the homologous c-
protooncogenes, the sites of breakage and joining in the recombination events that gave rise to
the v-oncogenes can sometimes be identified. In other cases, extensive rearrangements have
occurred, making it impossible to identify the sites of recombination involved in the acquisition
of the oncogene by the retrovirus. In several cases, the viral oncogenes encode fusion proteins
containing of the gag protein and the oncogene product. In most cases (Rous sarcoma virus being
the best-known exception), the retroviral acquisition of an oncogene has been accompanied by
the loss of viral genetic material required for replication. Such defective viruses can integrate
normally as proviruses, but can only produce progeny viruses in the presence of a “helper virus"
that provides the missing function(s). These defective retroviruses are analogous to the phage
lambda defective transducing particles discussed in detail in Chapter 8. Moreover, their ability to
transfer cellular genes from one cell (a donor cell) to another cell (a recipient cell) is formally
equivalent to transduction in bacteria (see Chapter 8)
Dengan membandingkan urutan nudeotide dari v-onkogen dan homolog c-
protooncogenes, situs kerusakan dan bergabung dalam peristiwa rekombinasi yang
memunculkan v-onkogen kadang-kadang dapat diidentifikasi. Dalam kasus lain, penyusunan
ulang luas telah terjadi, sehingga mustahil untuk mengidentifikasi situs rekombinasi yang terlibat
dalam akuisisi onkogen oleh retrovirus. Dalam beberapa kasus, virus protein onkogen encode
fusi yang mengandung protein gag dan produk onkogen. Dalam kebanyakan kasus (virus
sarcoma Rous menjadi pengecualian paling terkenal), akuisisi retroviral dari onkogen telah
disertai dengan hilangnya materi genetik virus diperlukan untuk replikasi. virus yang rusak
tersebut dapat mengintegrasikan normal seperti provirus, tetapi hanya dapat menghasilkan virus
progeni di hadapan sebuah “virus pembantu" yang menyediakan fungsi yang hilang. Ini
retrovirus yang rusak analog dengan fag lambda partikel yang rusak transducing dibahas secara
rinci dalam Bab 8. Selain itu, kemampuan mereka untuk mentransfer gen seluler dari satu sel (sel
donor) ke sel lain (sel penerima) secara resmi setara dengan transduksi pada bakteri (lihat Bab 8)
CANCER AS THE END PRODUCT OF A MULTISTEP PROCESS
Finally, we should emphasize that a large amount of data indicates that the cancerous
state is the end product of a multistep process The cell lines used in transfection experiments are
probably already at some intermediate stage in this pathway, possibly simply due to the selection
for the ability to grow under cell culture conditions. The oncogene-induced transformation
observed in cell cultures is undoubtedly only one part of a more complex pathway.
KANKER SEBAGAI PRODUK AKHIR PROSES MULTI LANGKAH/ TAHAP
Akhirnya, kita harus menekankan bahwa sejumlah besar data menunjukkan bahwa negara
kanker adalah produk akhir dari proses multi jalur sel yang digunakan dalam percobaan
transfeksi mungkin sudah pada tahap menengah dalam jalur ini, mungkin hanya karena seleksi
untuk kemampuan untuk tumbuh di bawah kondisi kultur sel. Transformasi onkogen-diinduksi
diamati pada kultur sel tidak diragukan lagi hanya salah satu bagian dari jalur yang lebih
kompleks.
In fact, there is considerable evidence indicating that certain oncogenes may have
cooperative effects in promoting neoplastic transformations. Moreover, different oncogenes
seem to play different roles in oncogenic pathways in different cell types. Finally, it seems likely
that different molecular events are involved in the acquisition of the enhanced proliferative
capacity of cells, in the ability of tumors to invade adjacent tissues, and in the capacity for
metastasis. To what extent and in what roles protooncogenes and oncogenes are involved in
these processes in human cancers remain to be determined. Regardless of the extent of their
involvement in the formation of malignant tumors, the ongoing and future investigations of
protooncogenes and oncogenes promise to yield important information about the molecular
circuitry that controls cell proliferation in higher eukaryotes such as humans.
 Bahkan, ada bukti yang cukup yang menunjukkan bahwa onkogen tertentu mungkin
memiliki efek koperasi dalam mempromosikan transformasi neoplastik. Selain itu, onkogen yang
berbeda tampaknya memainkan peran yang berbeda di jalur onkogenik di jenis sel yang berbeda.
Akhirnya, tampaknya mungkin bahwa peristiwa molekul yang berbeda yang terlibat dalam
akuisisi kapasitas proliferasi ditingkatkan sel, dalam kemampuan tumor untuk menyerang
jaringan yang berdekatan, dan dalam kapasitas untuk metastasis. Sejauh mana dan apa peran
protooncogenes dan onkogen terlibat dalam proses ini pada kanker manusia tetap ditentukan.
Terlepas dari sejauh mana keterlibatan mereka dalam pembentukan tumor ganas
SUMMARY
As cells proceed through the cell cycle, DNA replication and the chromosome
condensation and chromatid separation events of M phase take place in a precise, coordinate
manner. Cells make commitments to proceed through the cell cycle at two points: (1). Start, late
in G1 at which the decision is made to initiate DNA synthesis at the beginning of the subsequent
S phase, and (2) the onset of M phase, at which cells become committed to the ensuing
chromosome condensations and chromatid disjunctions of mitosis. Athough the complete
regulatory circuitry controlling the passage of cells through the cell cycle is still unknown, some
of the key components have been identified. Proteins called cyclins are synthesized and
accumulate during Interphase and are degraded during M phase. A special class of cyclins called
G1-cyclins also appear to be degraded after the Start commitment.
RINGKASAN
Seperti sel-sel dilanjutkan melalui siklus sel, replikasi DNA dan kromosom kondensasi
dan pemisahan kromatid peristiwa fase M terjadi dalam yang tepat, koordinat cara. Sel-sel
membuat komitmen untuk melanjutkan melalui siklus sel pada dua titik: (1). Mulai, akhir G1 di
mana keputusan dibuat untuk memulai sintesis DNA pada awal fase S berikutnya, dan (2)
timbulnya fase M, di mana sel-sel menjadi berkomitmen untuk kondensasi kromosom berikutnya
dan disjunctions kromatid mitosis. Athough sirkuit peraturan lengkap mengendalikan bagian dari
sel melalui siklus sel masih belum diketahui, beberapa komponen utama telah diidentifikasi.
Protein yang disebut siklin disintesis dan menumpuk selama Interphasa dan terdegradasi selama
fase M.
The protein kinase designated pp34 is a key cell cycle regulator, pp34 forms a complex
with cyclins that acts as a amitosis promoting factor (MPF).Protein kinase pp34 may also control
the Start commitment by means of an Interaction with the G1-cyclins, The pp34 regulatory
protein undergoes inactivation/activation cycles controlled by the phosphorylation/
dephosphorylation of a specific tyrosine residue tyrosine 15. A yeast mutant with a
phenylalanine residue (not subject to phosphorylation) at position 15 of pp34 exhibits abnormal
cell cycle regulation. This mutant initiates cell division prematurely; its phenotypes suggest that
its cell cycle regulator is locked in the “on” or "divide" state.
PP34 protein kinase yang ditunjuk adalah regulator siklus sel kunci, PP34 membentuk
kompleks dengan siklin yang bertindak sebagai amitosis mempromosikan faktor (MPF) .Protein
kinase PP34 juga dapat mengontrol komitmen Mulai melalui suatu Interaksi dengan G1-siklin,
Protein regulator PP34 mengalami siklus inaktivasi / aktivasi dikendalikan oleh fosforilasi /
defosforilasi dari spesifik residu tirosin tirosin 15. sebuah ragi mutan dengan residu fenilalanin
(tidak tunduk pada fosforilasi) pada posisi 15 dari pameran PP34 regulasi siklus sel abnormal.
mutan ini memulai pembelahan sel secara prematur; fenotipe yang menunjukkan bahwa
regulator siklus sel yang terkunci di “on” atau "membagi" state.
The regulation of cell division in multicellular eukaryotes requires even more complex
control mechanisms because each tissue within an organ and each organ in the body must grow
to the proper size in the proper position and coordinate its activities with those of the other
tissues and organs of the body. Thus, intercellular communication is of paramount importance in
multicellular organisms. Although details of the molecular signals involved in intercellular
communication and their modes of action remain poorly understood, a specific set of genes,
called protooncogenes is known to encode proteins that function in various pathways of
intercellular communication.
Peraturan pembelahan sel pada eukariota multiselular membutuhkan mekanisme kontrol
lebih kompleks karena masing-masing jaringan dalam suatu organ dan setiap organ dalam tubuh
harus tumbuh dengan ukuran yang tepat di posisi yang tepat dan mengkoordinasikan kegiatannya
dengan orang-orang dari jaringan dan organ lain dari tubuh. Dengan demikian, komunikasi antar
adalah sangat penting dalam organisme multisel. Meskipun rincian dari sinyal molekul yang
terlibat dalam komunikasi antar dan mode aksi mereka tetap kurang dipahami, satu set khusus
dari gen, yang disebut protooncogenes dikenal untuk mengkodekan protein yang berfungsi dalam
berbagai jalur komunikasi.
Retroviral oncogenes code for products that somehow cause normal cells to undergo
transformation to the cancerous state. Genes that are homologous to the viral oncogenes are
found as normal components of the chromosomes of all higher animals. These genes, the
protooncogenes can be converted to cellular oncogenrs (1) by mutation, (2) by becoming
associated with new regulatory sequences for example, by the insertion of a retroviral provirus
nearby (3) by amplification resulting in overproduction of the protooncogene product.
Retroviral onkogen mengkode untuk produk yang entah bagaimana menyebabkan sel-sel
normal untuk menjalani transformasi ke negara kanker. Gen yang homolog dengan onkogen
virus ditemukan sebagai komponen normal dari kromosom dari semua hewan yang lebih tinggi.
gen ini, protooncogenes dapat dikonversi ke oncogenrs selular (1) oleh mutasi, (2) dengan
menjadi terkait dengan urutan peraturan baru misalnya, dengan menyisipkan sebuah provirus
retroviral terdekat (3) oleh amplifikasi mengakibatkan kelebihan produksi produk protoonkogen
Cellular protooncogenes can be detected by cross hybridization to retroviral oncogene
probes. Oncogenic derivatives of cellular protooncogenes can be identified in transfection
experiments on the basis of their ability to cause cells growing in culture to undergo
transformation to a neoplastic state in which the cells exhibit a loss of contact inhibition and
form "tumors" in vitro instead of growing as cellular monolayers.
protooncogenes seluler dapat dideteksi dengan lintas hibridisasi probe onkogen retroviral.
derivatif onkogenik dari protooncogenes seluler dapat diidentifikasi dalam percobaan transfeksi
atas dasar kemampuan mereka untuk menyebabkan sel tumbuh dalam budaya untuk menjalani
transformasi ke keadaan neoplastik di mana sel-sel menunjukkan hilangnya inhibisi kontak dan
membentuk "tumor" in vitro bukannya tumbuh monolayers sebagai selular.
Over 20 different retroviral oncogenes and their homologous cellular protooncogenes
have been identified and studied. The protooncogenes are highly conserved in all higher animals.
Genes with strong homology to several of the protooncogenes are present in Drosophila, and
homologs to some protooncogenes are even present in the yeast Saccharomyces cerevisiae. This
conservation of protooncogene structure indicates that these genes encode products that play
important roles in the life cycles of a wide variety of species.
Lebih dari 20 onkogen retroviral yang berbeda dan protooncogenes seluler homolog
mereka telah diidentifikasi dan dipelajari. protooncogenes sangat dilestarikan di semua hewan
yang lebih tinggi. Gen dengan homologi kuat untuk beberapa protooncogenes hadir di
Drosophila, dan homolognya beberapa protooncogenes bahkan hadir dalam ragi Saccharomyces
cerevisiae. konservasi ini struktur protoonkogen menunjukkan bahwa gen ini mengkodekan
produk yang memainkan peran penting dalam siklus kehidupan berbagai spesies.
The products of some of the cellular protooncogenes have been identified and shown to
be wellknown growth factors or growth-factor receptors. In addition, the product of one
protconcogene, c-erbA, has now been shown to be a thyroid hormone receptor protein Finally,
the products of two protooncogenes, c-jun and c-fos, have recently been shown to form a
complex that is equivalent to a previously characterized trans-acting transcriptional activator
have been found to be transmembrane proteins with GTP binding and GTPase activities Finally,
the products of the majority of the protooncogenes are protein kinases with either tyrosine-
specific or serine/ threonine-specific kinase activity. Although the functions of these proteins are
still unknown, they are believed to play central roles in signal transduction, that is, in
transmitting signals from the cell surface to machinery within the cell nucleus.
Produk-produk dari beberapa protooncogenes selular telah diidentifikasi dan terbukti
faktor pertumbuhan wellknown atau reseptor pertumbuhan-faktor. Selain itu, produk dari satu
protconcogene, c-Erba, kini telah terbukti menjadi protein hormon tiroid reseptor Akhirnya,
produk-produk dari dua protooncogenes, c-jun dan c-fos, baru-baru ini telah ditunjukkan untuk
membentuk kompleks yang setara dengan aktivator transkripsi sebelumnya ditandai trans-acting
telah ditemukan untuk menjadi protein transmembran dengan GTP mengikat dan kegiatan
GTPase Akhirnya, produk-produk dari mayoritas protooncogenes yang kinase protein dengan
baik tirosin spesifik atau serin / aktivitas kinase treonin spesifik. Meskipun fungsi protein ini
masih belum diketahui, mereka diyakini memainkan peran sentral dalam transduksi sinyal, yaitu,
The three members of the c-ras protooncogene family (c-K-ras, C-H-ras, and N-ras) have
been shown to mutate to allelic cellular oncogenic variants in a variety of different human
cancers. In almost every case, the c-ras oncogene was produced by a single nucleotide pair
substitution in one of three triplets in the gene, specifically, the triplets specifying codons
number 12, 59, and 61 in the mRNA. Changes in amino acids at positions 12, 59, and 61 in the c-
ras proteins often seem to result in a loss of the GTPase activity of the gene-product. This loss of
GTPase activity, in turn, is believed to cause a loss of the normal regulation of c-ras protein
activity and, thus, the oncogenicity of the mutant c-ras allele.
Tiga anggota c-ras protoonkogen keluarga (cK-ras, CH-ras, dan N-ras) telah terbukti
bermutasi ke alel varian onkogenik seluler di berbagai kanker pada manusia yang berbeda.
Dalam hampir setiap kasus, onkogen c-ras diproduksi oleh nukleotida pasangan substitusi satu di
salah satu dari tiga kembar tiga di gen, khususnya, si kembar tiga menentukan kodon nomor 12,
59, dan 61 di mRNA. Perubahan asam amino pada posisi 12, 59, dan 61 dalam protein c-ras
sering tampak mengakibatkan hilangnya aktivitas GTPase dari gen-produk. Hilangnya aktivitas
GTPase, pada gilirannya, diyakini menyebabkan hilangnya regulasi normal dari aktivitas protein
c-ras dan, dengan demikian, oncogenicity dari mutan c-ras alel.
Cellular protooncogenes contain interrupted coding sequences with exons and introns like
most other normal cellular genes. In contrast, retroviral oncogenes are single exons.
Comparisons of the nucleotide sequences of homologous cellular protooncogenes and viral
oncogene, indicate that the retroviral oncogene, have originated from processed transcripts of the
cellular protooncogenes.
protooncogenes seluler berisi sela coding urutan dengan ekson dan intron seperti gen
seluler yang paling normal lainnya. Sebaliknya, onkogen retroviral yang ekson tunggal.
Perbandingan urutan nukleotida protooncogenes seluler homolog dan onkogen virus,
menunjukkan bahwa onkogen retroviral, berasal dari transkrip diproses dari protooncogenes
selular.
The malignant phenotype of a cancer cell is the end product of a multistep process. The
evidence available at present indicates that oncogenes may be involved in promoting certain
steps in this pathway, although the exact roles of these oncogenes remain to be determined. One
point is very clear: studies on the functions of protooncogene products are beginning to provide a
wealth of information about the molecular circuitry that regulates cell division in higher
eukaryotes.
Fenotip ganas dari sel kanker adalah produk akhir dari proses multi langkah. Bukti-bukti
yang tersedia saat ini menunjukkan bahwa onkogen mungkin terlibat dalam mempromosikan
langkah-langkah tertentu dalam jalur ini, meskipun peran yang tepat dari onkogen ini tetap akan
ditentukan. Satu titik sangat jelas: studi tentang fungsi produk protoonkogen mulai memberikan
banyak informasi tentang sirkuit molekul yang mengatur pembelahan sel pada eukariota lebih
tinggi.
Figure 17.11 Photomicrographs showing the morphology of (a) double-minute chromosomes
(DMs) and (b) homogeneously staining regions (HSRs, arrow) of chromosomes carrying
amplified genes. The DMs contain circular DNA molecules carrying the amplified gene and
adjacent segments of chromosomal DNA, and the HSRs contain tandemly repeated copies of the
amplified gene and adjacent chromosomal DNA. The segment of chromosomal DNA that
undergoes the amplification process, sometimes called the amplicon, usually is several hundred
kilobase -pairs in length; the amplified unit is thus much larger than a single gene (a) DM
chromosomes present in an abdominal solid tumor- a stage IV neuroblastoma Photograph
courtesy of R. Streifel and D. Arthur, Dept of Laboratory Medicine and Pathology. University of
Minnesota (b) HSR region (arrow) on the long arm of the X chromosome detected by replication
banding on the mitotic chromosomes from cell line COLO-320 derived from a human colon
carcinoma. Photograph
Courtesy of Jaroslav Cervenka, Division of Cytogenics and cell Genetics, Health Sciences,
University of Minnesota.]
Gambar 17.11 Photomicrographs menunjukkan morfologi (a) kromosom dua menit (DM) dan (b)
daerah pewarnaan homogen (HSR, panah) dari kromosom yang membawa gen yang
diamplifikasi. DM mengandung molekul DNA sirkular yang membawa gen yang diperkuat dan
segmen DNA kromosom yang berdekatan, dan HSR mengandung salinan berulang dari gen yang
diamplifikasi dan DNA kromosom yang berdekatan. Segmen DNA kromosom yang mengalami
proses amplifikasi, kadang-kadang disebut amplikon, biasanya panjangnya beberapa ratus
kilobase; unit yang diamplifikasi dengan demikian jauh lebih besar daripada satu gen (a)
kromosom DM yang ada dalam tumor padat abdominal - neuroblastoma stadium IV. Foto milik
R. Streifel dan D. Arthur, Departemen Kedokteran Laboratorium dan Patologi. University of
Minnesota (b) Wilayah HSR (panah) pada lengan panjang kromosom X yang terdeteksi dengan
pita replikasi pada kromosom mitosis dari garis sel COLO-320 yang berasal dari karsinoma usus
manusia. Photograph Courtesy of Jaroslav Cervenka, Division of Cytogenics and cell Genetics,
Health Sciences, University of Minnesota.]
Figure 17.12 Schematic drawing of the mechanism of gene amplification. The model presented
here has been shown to be accurate in gross details in the case of the amplification of the
dihydrofolate reductase gene of the protozoa Leshmania tropica in response to selection for
tolerance to the drug methotrexate. Methotrexate specifically inhibits the enzyme dihydrofolate
reductase, an essential enzyme in DNA precursor biosynthesis. The structures of the DMs and
HSRs that contain amplified copies of protooncogenes (most frequently, c-myc) in particular
types of human cancer cells appear to be very similar (see Figure 17.11) although molecular
details of the structures of the amplicons are not yet available in the latter cases. (After S. M.
Beveriey, JA Coderre, D. V. San, and R. T. Schimke, Cell 38: 431-4359).
Gambar 17.12 Gambar skematis dari mekanisme amplifikasi gen. Model yang disajikan di sini
telah terbukti akurat dalam detail kotor dalam kasus amplifikasi gen reduktase dihydrofolate dari
protozoa Leshmania tropica sebagai respons terhadap seleksi untuk toleransi terhadap
methotrexate obat. Metotreksat secara khusus menghambat enzim dihidrofolat reduktase, enzim
esensial dalam biosintesis prekursor DNA. Struktur DM dan HSR yang mengandung salinan
protoonkogen yang diamplifikasi (paling sering, c-myc) khususnya jenis sel kanker manusia
tampak sangat mirip (lihat Gambar 17.11) walaupun rincian molekuler dari struktur amplikon
belum tersedia dalam kasus-kasus terakhir.