TRIGLYCERIDES -LQ

Triglycerides-LQ
GPO-POD. Liquid

Quantitative determination of triglycerides 4. Mix and incubate for 5 min at 37C or 10 min at 15-25C.
IVD 5. Read the absorbance (A) of the samples and standard, against the
Store at 2-8C Blank. The colour is stable for at least 30 minutes.
PRINCIPLE OF THE METHOD
CALCULATIONS
Sample triglycerides incubated with lipoproteinlipase (LPL), liberate
glycerol and free fatty acids. Glycerol is converted to glycerol-3- (A) Sample (A)Blank
x Standard conc.= mg/dL triglycerides in the sample
phosphate (G3P) and adenosine-5-diphosphate (ADP) by glycerol (A) S tandard (A)Blank
kinase and ATP. Glycerol-3-phosphate (G3P) is then converted by
glycerol phosphate dehydrogenase (GPO) to dihydroxyacetone Conversion factor: mg/dL x 0,0113= mmol/L.
phosphate (DAP) and hydrogen peroxide (H2O2). QUALITY CONTROL
In the last reaction, hydrogen peroxide (H2O2) reacts with 4- Control Sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
aminophenazone (4-AP) and p-chlorophenol in presence of SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
peroxidase (POD) to give a red colored dye: If control values are found outside the defined range, check the instrument,
LPL reagent and calibration material.
Triglycerides + H2O Glycerol + free fatty acids Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
Gly cerol kinase actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
Glycerol + ATP
G3P+ ADP
GPO REFERENCE VALUES
G3P + O2
DAP + H2O2
Men 40 160 mg/dL
POD
H2O2 + 4-AP + p-Chlorophenol Quinone + H2O Women 35 135 mg/dL
The intensity of the color formed is proportional to the triglycerides
concentration in the sample1,2,3. These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its
own reference range.
CLINICAL SIGNIFICANCE
Triglycerides are fats that provide energy for the cell. PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Like cholesterol, they are delivered to the bodys cells by lipoproteins Measuring range: From detection limit 0,000 mg/dL to linearity limit 1600
in the blood. A diet with a lot of saturated fats or carbohydrates will mg/dL.
raise the triglyceride levels. The increases in serum triglycerides are If the concentration is greater than linearity limit dilute 1/2 the sample with
relatively non-specific. For example liver dysfunction resulting from ClNa 9 g/L and multiply the result by 2.
hepatitis, extra hepatic biliary obstruction or cirrhosis, diabetes Precision:
mellitus is associated with the increase3,6,7. Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should Mean (mg/dL) 109 224 111 224
integrate clinical and other laboratory data. SD 0,64 1,01 3,74 7,90
CV (%) 0,58 0,45 3,38 3,52
REAGENTS Sensitivity: 1 mg/dL = 0,0013 (A).
GOOD pH 6.3 50 mmol/L Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
p-Chlorophenol 2 mmol/L
systematic differences when compared with other commercial reagent (x).
Lipoprotein lipase (LPL) 150000 U/L
Glycerol kinase (GK) 500 U/L The results obtained using 50 samples were the following:
R (Note 2) Correlation coefficient (r): 0,99810.
Glycerol-3-oxidasa (GPO) 3500 U/L
Peroxidase (POD) 440 U/L Regression equation: y= 0,9178x - 0,5426
4 Aminophenazone (4-AP) 0,1 mmol/L The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
ATP 0,1 mmol/L INTERFERENCES
TRIGLYCERIDES CAL Aqueous primary standard 200 mg/dL
No interferences were observed with bilirubin < 170 mol/L,
PREPARATION
hemoglobin < 10 g/L2.
Reagent and standard provided are ready to use. A list of drugs and other interfering substances with cholesterol
determination has been reported 4,5.
STORAGE AND STABILITY
All the components of the kit are stable until the expiration date on the NOTES
label when stored tightly closed at 2-8C, protected from light and 1. TRIGLYCERIDES CAL: Proceed carefully with this product because
contaminations prevented during their use. due its nature it can get contaminated easily.
Do not use reagents over the expiration date. 2. LCF (Lipid Clearing Factor) is integrated in the reagent.
Signs of reagent deterioration: 3. Calibration with the aqueous Standard may cause a systematic error in
- Presence of particles and turbidity. automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a
- Blank absorbance (A) at 505 nm > 0,26. serum Calibrator.
4. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
ADDITIONAL EQUIPMENT 5. SPINREACT has instruction sheets for several automatic
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 505 nm. analyzers.
- Matched cuvettes 1,0 cm light path.
- General laboratory equipment. BIBLIOGRAPHY
1. Buccolo G et al. Quantitative determination of serum triglycerides by use of
SAMPLES enzimes. Clin Chem 1973; 19 (5): 476-482.
Serum or plasma1. 2. Fossati P et al. Clin. Chem 1982; 28(10): 2077-2080.
Stability of the sample: 5 days at 2-8C . 3. Kaplan A et al. Tryglycerides. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.
Princeton 1984; 437 and Lipids 1194-1206.
PROCEDURE 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
1. Assay conditions: 6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 505 nm (490-550) 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm light path
Temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C PACKAGING
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. Ref: 41030 R:1 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
3. Pipette into a cuvette: Ref. 41031 R:2 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
Ref. 41032 Cont. R:1 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
Blank Standard Sample Ref. 41033 . R:1 x 500 mL, CAL: 1 x 5 mL
R (mL) 1,0 1,0 1,0 Ref. 41034 R:1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
Standard(Note 1,3,4) (L) -- 10 --
Sample (L) -- -- 10
BSIS49-I 01/10/14 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: [email protected]
 TRIGLYCERIDES -LQ

Triglicridos-LQ
GPO-POD. Lquido
Determinacin cuantitativa de triglicridos 5. Leer la absorbancia (A) del patrn y la muestra, frente al Blanco de
IVD reactivo. El color es estable como mnimo 30 minutos.

Conservar a 2-8C CLCULOS

(A) Muestra (A)Blanco x Conc. Patrn = mg/dL de triglicridos en la muestra
PRINCIPIO DEL MTODO (A) Patrn (A)Blanco
Los triglicridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y
Factor de conversin: mg/dL x 0,0113 = mmol/L.
cidos grasos libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato
deshidrogenasa (GPO) y ATP en presencia de glicerol quinasa (GK) para CONTROL DE CALIDAD
producir glicerol-3-fosfato (G3P) y adenosina-5-difosfato (ADP). El G3P Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
es entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) y perxido de SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
hidrogeno (H2O2) por GPO. Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
Al final, el perxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4-aminofenazona revisar el instrumento, el reactivo y el material de calibracin.
(4-AF) y p-clorofenol, reaccin catalizada por la peroxidasa (POD) dando Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
una coloracin roja: correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
LPL
Triglicridos + H2O Glicerol + cidos grasos libres VALORES DE REFERENCIA
Glicerol quinasa
Glicerol + ATP G3P+ ADP Hombres: 40 160 mg/dL
GPO Mujeres: 35 135 mg/dL
G3P + O2 DAP + H2O2
POD Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
H2O2 + 4-AF + p-Clorofenol Quinona + H2O
establezca sus propios valores de referencia.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de
triglicridos presentes en la muestra ensayada1,2,3. CARACTERSTICAS DEL MTODO
Rango de medida: Desde el lmite de deteccin 0,000 mg/dL hasta el lmite de
SIGNIFICADO CLNICO linealidad 1600 mg/dL.
Los triglicridos son grasas que suministran energa a la clula. Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir 1/2 con
Al igual que el colesterol, son transportados a las clulas del organismo ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
por las lipoprotenas en la sangre. Precisin:
Una dieta alta en grasas saturadas o carbohidratos puede elevar los
niveles de triglicridos. Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Su aumento es relativamente inespecfico. Diversas dolencias, como Media (mg/dL) 109 224 111 224
ciertas disfunciones hepticas (cirrosis, hepatitis, obstruccin biliar) o SD 0,64 1,01 3,74 7,91
diabetes mellitus, pueden estar asociadas con su elevacin3,6,7,. CV (%) 0,58 0,45 3,38 3,52
El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,0013 (A).
clnicos y de laboratorio. Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
REACTIVOS
Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
GOOD pH 6.3 50 mmol/L Coeficiente de correlacin (r): 0,99810.
p-Clorofenol 2 mmol/L Ecuacin de la recta de regresin: y= 0,9178x 0,5426
Lipoprotena lipasa (LPL) 150000U/L Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
Glicerol quinasa (GK) 500 U/L
R (Nota 2)
Glicerol-3-oxidasa (GPO) 3500 U/L INTERFERENCIAS
Peroxidasa (POD) 440 U/L No se han observado interferencias con bilirrubina < 170 mol/L, hemoglobin <
4 - Aminofenazona (4-AF) 0,1 mmol/L 10 g/L2.
ATP 0,1 mmol/L Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
TRIGLYCERIDES CAL Patrn primario acuoso 200mg/dL determinacin de los trigliceridos4,5.
PREPARACIN NOTAS
El reactivo y el patrn estn listos para su uso. 1. TRIGLYCERIDES CAL: Debido a la naturaleza del producto, es
aconsejable tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD facilidad.
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad 2. LCF(Lipid Clearing Factor) est integrado en el reactivo.
indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien 3. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores sistemticos
cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. en mtodos automticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. sricos.
Deterioro de los reactivos 4. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
- Presencia de partculas y turbidez. 5. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de
- Absorbancia (A) del blanco a 505 nm 0,26. este reactivo en distintos analizadores.
BIBLIOGRAFA
MATERIAL ADICIONAL
1. Buccolo G et al. Quantitative determination of serum triglycerides by use of
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 505 nm.
enzimes. Clin Chem 1973; 19 (5): 476-482.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
2. Fossati P et al. Clin. Chem 1982; 28(10): 2077-2080.
- Equipamiento habitual de laboratorio.
3. Kaplan A et al. Tryglycerides. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Toronto. Princeton 1984; 437 and Lipids 1194-1206.
MUESTRAS
4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
Suero y plasma1.
1995.
Estabilidad de la muestra: 5 das a 2-8C.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
PROCEDIMIENTO 6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
1. Condiciones del ensayo: 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . 505 (490-550) nm
PRESENTACIN
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm paso de luz
Ref: 41030 R:1 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C
Ref. 41031 R:2 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada.
Ref. 41032 Cont. R:1 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
3. Pipetear en una cubeta:
Ref. 41033 . R:1 x 500 mL, CAL: 1 x 5 mL
Ref. 41034 R:1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
Blanco Patrn Muestra
R (mL) 1,0 1,0 1,0
Patrn (Nota1,3,4) (L) -- 10 --
Muestra (L) -- -- 10
4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37C o 10 min. a 15-25C.

BSIS49-E 01/10/14 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: [email protected]