Salud Mental 2008;31:229-237

Epigentica y estudios en gemelos en psiquiatra

La epigentica y los estudios en gemelos en el campo de la psiquiatra

Adriana Estrella Gonzlez Ramrez1, Alejandro Daz Martnez2, Adriana Daz-Anzalda1
Actualizacin por temas

SUMMARY
The sequence of the human genome integrates the keystone of our life. Part of it is transcribed to RNA, which in turn provides the information required by our cells to produce proteins. Discoveries in the genetics field have been essential to medicine and have been used to develop strategies to modify, prevent and propose new therapeutic approaches for human diseases. In the 19th Century, Gregor Johann Mendel developed a theoretical model which was able to predict in an accurate way hereditary mechanisms; indeed, his laws still explain the basis of human inheritance. Almost ninety years later, James Watson and Francis Crick announced their double-helix model of the DNA molecule. Then, positional cloning and the polymerase chain reaction (PCR) were introduced; more recently, almost 99% of the sequence of our genome was made public. The current period of time is known as the post-genomic era, due to the fact that researchers are not only obtaining the complete sequences of thousands of genomes, but are also searching for clues that may help understand the mechanisms that affect gene activation and deactivation, in which epigenetic factors are also involved. In medical domains, twins constitute a suitable group to study inherited disorders. Dizygotic or fraternal twins are produced by different egg and sperm cells, and even when these two fertilization events occur simultaneously, dizygotic twins share approximately the same percentage of genetic material than any pair of siblings, that is, around 50%. Some authors have suggested that the tendency for spontaneous dizygotic twinning could be attributed to a double ovulation which is genetically determined in an autosomal dominant manner. Monozygotic, as opposed to dizygotic twins, are produced by a single zygote whose cells are dissociated and originate two independent organisms; approximately a third of monozygotic twins are separated before the 5th day after fertilization, and the rest between the 5th and the 15th day. Most monozygotic twins are very similar; nevertheless, some few exceptions prove that in fact they actually do not have to be identical. Relatives of a person with a mental disorder tend to share traits associated with this disease, especially if the patient and the relative are monozygotic twins. However, important differences may be detected even between each pair of identical twins.

Parameters such as concordance and heritability have shown that a monozygotic twin can develop an inherited disorder while his or her co-twin will always be disease-free. In addition to differences in susceptibility to inherited diseases, this kind of twins can display dissimilarities in somatic cell mutations (more overtly noticeable when ageing), their set of antibodies and T cell receptors, their number of mitochondrial DNA molecules, and chromosome X inactivation patterns in women, all of which are the main subject of many ongoing studies. A recent report shows that from 160 monozygotic twin pairs who were 3 to 74 years old, epigenetic patterns were identical early in life, but differences were more obvious at older ages, especially if twins were raised apart or if they had different medical history. Medical conditions, but also environmental factors such as pregnancy tobacco exposure, physical activity, and diet could contribute to differences in epigenetic patterns. It has been shown that epigenetic modifications (or epi-mutations) are more frequent than the ones that modify DNA sequence, so they are part of the fundamental causes of biological diversity, and they show how environment can modulate gene expression and contribute to our phenotype. Even when twin studies are sometimes considered purely genetic, they also give information about the influence of environmental factors. However, it is important to consider with caution the results from this type of studies. Heritability estimates are not unchangeable facts. They depend on the sample being analyzed, the genes involved in the specific sample, the characteristics of the environmental factors which members of this group were exposed to, and the precise moment the study was done. Epigenetics refers to changes that do not alter the DNA sequence but affect gene function due to chemical modifications which mainly occur in DNA cytosines and in chromatin-related histones. Epigenetic processes are covalent modifications which include the addition of functional groups (methyl, acetyl, phosphate, etc.) or proteins (ubiquitin, SUMO, etc.) to the DNA molecule or to associated proteins. These modifications contribute to the activation or inhibition of transcription, which leads to changes in messenger ARN expression that can ultimately influence the onset of disease. Pseudogenes are still being excluded while new genes are being confirmed in our genome sequence, but the current estimates indicate that each one of our nucleated cells contains almost 22000 genes (excluding mitochondrial DNA) which encode for polypeptides and more than 4,000 whose final product is RNA.

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Departamento de Gentica, Instituto Nacional de Psiquiatra Ramn de la Fuente. Departamento de Psicologa Mdica, Psiquiatra y Salud Mental, Facultad de Medicina, UNAM

Correspondencia: Adriana Daz-Anzalda. Departamento de Gentica. Instituto Nacional de Psiquiatra Ramn de la Fuente. Calz. Mxico-Xochimilco 101, San Lorenzo Huipulco, Tlalpan, 14370, Mxico, D.F. E-mail: [email protected] Fax: 52 (55) 5513-3722. Recibido: 9 de octubre de 2007. Aceptado: 5 de diciembre de 2007.

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Gene expression is partially controlled by DNA coiling around globular proteins called histones, which constitute a structure known as chromatin, a DNA-protein complex that represents the packaging of 3.25 billion base pairs of our genetic information. Physical and chemical chromatin modifications can also affect gene expression by changing DNA-protein interactions; in general terms, genes are inhibited when chromatin is packed and they are active when it is free. These dynamic states are controlled by epigenetic reversible modifications on DNA methylation or by changes in histones. It has been shown that subtle epigenetic differences between any two human beings are associated with dissimilar final chromatin remodeling, as well as expression/repression of genes. In order to explain how DNA methylation controls transcription, two mechanisms have been proposed. First, the presence of a methyl group on specific sites could simply prevent transcription factors from binding the DNA. Second, some proteins contain a specific domain that recognizes and binds methylated DNA, and works as a transcription repressor. Regarding histone modifications, acetyl group addition occurs on the amino acid lysine; there are reports that indicate that almost 14% of lysines are susceptible to acetylation. On the other hand, methyl groups bind arginines and lysines. Different combinations of covalent modifications lead to what is known as the histone code. This review gathers information about the possible involvement of epigenetics in some mental disorders and attempts to explain how it can account for differences observed between identical twins. Some examples of a plausible link between epigenetic modifications and mental disorders are discussed. Regarding bipolar disorder, valproate efficacy has been linked to its inhibitory activity, suggesting that an epigenetic modification (that represses transcription of a gene) may play a role in the onset of some of the symptoms of the disease. Perhaps one of the most studied aspects regarding schizophrenia is the hypermethylation of Reelin (RELN) and GAD67 genes in the prefrontal cortex, due to the over-expression of DNMT1 (DNA methyl-trasferase 1) in GABAergic cortical interneurons. Reelin is an important protein during prenatal development of the Central Nervous System and it is relevant for the expression of cortical pyramidal neurons in the adult brain; it regulates the migration of neurons during brain development and it is essential for the correct organization and plasticity of the cerebral cortex. GAD67 is one of two molecular forms of GABA synthetizing enzymes, being GABA the main inhibitory neurotransmitter in humans. Hypermethylation of these genes leads to transcription repression either by interference of transcription promoters by methyl groups or by MBD protein binding. The final outcome is a low production of Reelin and GAD67, a typical feature found in brains of shchizophrenic patients. Epigenetic analyses of autism are sometimes with Rett and Angelmans syndromes. The latter are pathological conditions that share clinical features with autism, such as development retardation, language impairments and stereotypic behaviors. Rett syndrome is caused by mutations at the MECP2 gene, and Angelmans syndrome by a maternal deficiency on chromosome 15 q11-q13 region, impaired methylation of DNA or maternal mutation of the ubiquitinprotein ligase E3A (UBE3A). However, there have also been reports of patients with Angelmans syndrome or autism who have mutations at MECP2. In conclusion, the onset of mental disorders is influenced both by environmental and genetic factors. Concordance and heritability

estimates are just two of the many ways of analyzing differences between monozygotic twins. Part of the reported disparity between monozygotic twins could be caused by epigenetic factors. Epigenetic modifications could partially explain the etiology of mental disorders. Key words: Twins, epigenetics, heritability, concordance, mental disorders.

RESUMEN
La secuencia de ADN genmico que caracteriza a nuestra especie constituye la piedra fundamental de la vida humana; parte de ella se refleja en la secuencia del ARN y a travs de ste se dicta la informacin necesaria para que nuestras clulas produzcan protenas. La gentica contribuye de manera importante a los avances en el campo mdico. Los descubrimientos genticos han permitido desarrollar estrategias para modificar, prevenir y proponer nuevas terapias para diversas enfermedades. En el siglo XIX, Gregor Johann Mendel desarroll un modelo terico capaz de predecir la naturaleza y propiedades de los mecanismos de la herencia, que sigue siendo indispensable para explicar la base de la herencia humana. Otro suceso determinante en la historia de la Medicina se dio a conocer casi nueve dcadas despus cuando James Watson y Francis Crick describieron su modelo estructural para el ADN. Posteriormente se introdujeron la clonacin posicional y la reaccin en cadena de la polimerasa; ms recientemente se public cerca del 99% de la secuencia del genoma humano. El perodo actual se conoce como la era post-genmica, ya que adems de descifrar genomas completos, los investigadores pretenden, entre otras cosas, esclarecer los mecanismos que influyen en la activacin e inactivacin de los genes, lo cual en parte involucra un nivel epigentico. En las ciencias mdicas los gemelos constituyen un grupo idneo para abordar el estudio de las enfermedades hereditarias. En este tipo de padecimientos suelen observarse similitudes entre parientes, en especial si se trata de gemelos monocigticos. Sin embargo, aun en este tipo de hermanos se detectan diferencias importantes. Parmetros como los grados de concordancia y porcentajes de heredabilidad han puesto de manifiesto que un gemelo monocigtico puede presentar trastornos hereditarios que su co-gemelo nunca tendr. La epigentica es el estudio de los cambios en la funcin de los genes que no afectan la secuencia del ADN, por modificaciones que tienen lugar principalmente en las citosinas de ste y en las histonas de la cromatina. Se ha determinado que las modificaciones epigenticas son mucho ms frecuentes que aquellas que modifican la secuencia del ADN, por lo que constituyen uno de los fundamentos de la diversidad biolgica, muestran la manera en que el ambiente puede modular la expresin gentica y contribuyen as a nuestro fenotipo. Esta revisin rene datos sobre la posible relevancia de la epigentica en el estudio de los trastornos mentales y como posible explicacin parcial de las diferencias observadas entre gemelos idnticos. Un conocimiento ms profundo de los patrones epigenticos podra contribuir a identificar factores de riesgo para estos trastornos. Palabras clave: Gemelos, epigentica, heredabilidad, concordancia, trastornos mentales.

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INTRODUCCIN
Uno de los principales objetivos de la gentica es descifrar el orden exacto en que las cuatro letras del alfabeto del ADN se suceden en los cromosomas humanos, tanto en ausencia como en presencia de patologa heredable. La combinacin de adeninas (A), citocinas (C), guaninas (G) y timinas (T) caracterstica de nuestra especie, constituye la piedra fundamental de nuestra vida y est ntimamente relacionada con la secuencia del ARN mensajero, emisario que transmite la informacin necesaria para que la clula produzca protenas. La gran cantidad de investigaciones sobre los cidos nucleicos y las protenas, que da con da se lleva a cabo en diversas disciplinas mdicas, ejemplifica la manera en que la gentica ha modificado el punto de vista de la humanidad acerca de s misma y acerca de su relacin con el resto del planeta. Los conocimientos obtenidos a partir de la gentica han permitido desarrollar estrategias para modificar, prevenir y proponer nuevas terapias para las enfermedades humanas.1 Hace 143 aos, Gregor Johann Mendel, fraile de la Orden de San Agustn, propuso las leyes que permiten entender la base de la herencia humana, basndose en anlisis matemticos y casi una dcada de minuciosa observacin de variantes puras e hbridas del chcharo.2 El merecidamente considerado padre de la gentica desarroll un modelo terico que predeca con total exactitud la naturaleza y propiedades de los mecanismos de la herencia. La gentica ha sido parte integral de la medicina moderna desde que en 1953 James Watson y Francis Crick, influenciados por estudios previos, describieron su modelo estructural de doble hlice para el cido Desoxirribonucleico (ADN).3 A mediados de la dcada de 1980, dos avances en la gentica fueron considerados entre los ms determinantes en la historia de la medicina: la clonacin posicional, que permite identificar genes relacionados con enfermedades, aun sin conocer su funcin, slo por su posicin cromosmica, y el descubrimiento del mtodo de reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), que facilit el anlisis del ADN en distintas disciplinas.4 Asimismo, la publicacin en 2003 de cerca del 99% de la secuencia de nuestro genoma constituye otro gran avance. El periodo cientfico actual se conoce como la era post-genmica. Dicho trmino se refiere al hecho de que los cientficos han llegado ms all del puro desciframiento de ms de miles de genomas completos de virus y de especies de todos los reinos. En el momento actual, se ha incrementado adems el inters por esclarecer las razones por las que una misma informacin genmica puede ser regulada para producir distintos tipos celulares en un mismo individuo o distintas caractersticas aun en individuos genticamente idnticos. Aunado a la secuencia nucleotdica unidimensional del ADN, se ha demostrado que hay un nivel epigentico que afecta la morfologa y la funcin celulares, es decir, su

fenotipo, al influir en la activacin e inactivacin de genes.5 Este nivel epigentico puede variar incluso entre gemelos idnticos. En nuestra especie, los gemelos representan una forma singular de las relaciones fraternas. No slo comparten familia y ambiente social durante por lo menos la primera etapa de sus vidas, sino que tambin tienen altos niveles de proximidad en cuanto a nmero de aos que pasan juntos antes de abandonar el hogar familiar y hay mayor frecuencia de contacto despus de ello.6 Los gemelos dicigticos (DC) o mellizos se originan a partir de distintos vulos y espermatozoides y aunque estos dos eventos de fecundacin son simultneos, los mellizos comparten el mismo porcentaje de material hereditario que cualquier par de hermanos de distintas gestaciones, es decir aproximadamente 50%. Algunos reportes indican que la tendencia a tener gemelos DC de manera espontnea podra atribuirse a una ovulacin doble genticamente determinada,7 tendencia que podra transmitirse de manera autosmica dominante.8 Los gemelos monocigticos (MC), en cambio, se forman a partir de un solo cigoto cuyas clulas se disocian dando origen a dos organismos independientes;9 aproximadamente un tercio de las parejas gemelares MC se separan antes del da cinco de la gestacin y el resto entre el da cinco y el quince. La mayora de los gemelos MC son notoriamente parecidos, pero algunas excepciones muestran que no tienen que ser idnticos. Se ha observado que pueden diferir en mutaciones en clulas somticas, sobre todo a largo plazo,10 en su conjunto de anticuerpos y receptores de clulas T, en el nmero de molculas de ADN mitocondrial, en el esquema de inactivacin del cromosoma X en las mujeres11 e incluso en el grado de susceptibilidad a enfermedades, lo cual en nuestros das es objeto de numerosos estudios. Parte de estas diferencias podran relacionarse con cambios epigenticos, ya que tanto en animales clonados como en gemelos humanos MC se han encontrado discrepancias epigenticas que se asocian con diferencias en ciertos rasgos.12 En un estudio reciente se compararon las diferencias epigenticas del genoma de 160 pares de gemelos monocigticos de tres a 74 aos de edad; los perfiles epigenticos eran idnticos entre hermanos a temprana edad, pero a medida que sta avanzaba aumentaban las diferencias epigenticas.9 Estas diferencias son an ms notorias cuando los gemelos crecen en ambientes separados o cuando tienen antecedentes mdicos distintos, lo que sugiere que los factores ambientales como la exposicin al tabaco durante el embarazo, la actividad fsica, la dieta y las afecciones mdicas podran contribuir a la diferenciacin de los perfiles epigenticos. De esta manera, los gemelos MC representan un modelo excelente para estudiar la contribucin epigentica a la susceptibilidad de ciertas enfermedades como las psiquitricas, las tumorales o las metablicas.13 Se ha determinado que las modificaciones epigenticas (o epimutaciones) son mucho ms frecuentes

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que las mutaciones que modifican la secuencia del ADN y de esta forma constituyen uno de los fundamentos de la diversidad biolgica, muestran la manera en que el ambiente puede modular la expresin de nuestro patrimonio hereditario y contribuir as a nuestro fenotipo. En esta revisin exponemos aspectos tericos sobre la epigentica y resumimos algunos de los reportes de los ltimos seis aos sobre la relacin de la epigentica con los trastornos mentales, para facilitar la nocin de que todos los seres humanos somos distintos, incluso los llamados idnticos.

dinmicos se controlan por medio de modificaciones epigenticas reversibles en la metilacin del ADN o en los cambios en las histonas3 con sus correspondientes enzimas y grupos de protenas reguladoras.15 Entre cualquier par de personas las diferencias sutiles en el nmero, sitio y combinacin de modificaciones epigenticas determinan en cada una el remodelamiento final de la cromatina y por ende la expresin/represin de los genes.14

METILACIN DEL ADN

La metilacin del ADN generalmente consiste en la adicin de un grupo metilo en la posicin C5 de las citosinas que se encuentran enlazadas con guaninas (CpG) en una de las cadenas de la molcula de ADN, resultando en lo que se conoce como 5-metil-citosina (5mC), o en la posicin N6 de adeninas, resultando en 6mA. La donacin de los tomos de carbono para la metilacin se obtiene por medio de la dieta y posteriormente, a travs de la va del folato. Adems estn involucrados otros micronutrientes importantes como la vitamina B12, la vitamina B6 y la colina. Todos estos elementos son requeridos directa o indirectamente para la conversin de homocistena a metionina, que es el precursor inmediato de S-adenosil metionina (SAM), el principal donador de metilos para el ADN. Despus de donar el grupo metilo, SAM se convierte en Sadenosilhomocistena (SAH), la cual pierde la adenosina y llega a ser nuevamente homocistena (figura 1). La presencia de polimorfismos genticos que afectan la funcin de las molculas de transporte y de enzimas necesarias en el ciclo de folato/homocistena predisponen a una inestabilidad genmica, por recombinacin alterada o segregacin anormal. Sin embargo, los efectos de estas variantes dependen del estado nutricional de cada individuo. Por ejemplo, los polimorfismos que disminuyen la disponibilidad de folato/homocistena antes o durante el embarazo asociados a una baja ingesta de los nutrientes necesarios, podran contribuir a anormalidades en el feto como falla en el cierre del tubo neural, paladar hendido y a trastornos como el sndrome de Down y la trisoma 18.16 Agentes ambientales tales como los metales y los hidrocarburos aromticos, encontrados en emisiones de combustible fsil, aguas contaminadas y humo de cigarro, influyen en el contenido de grupos metilo que pueden unirse al ADN, desestabilizando el genoma o el metabolismo celular. La metilacin es una modificacin post-sinttica, es decir, se lleva a cabo despus de que se han incorporado los nucletidos en la nueva cadena de ADN.3 En nuestro genoma, la metilacin es comn en regiones cortas que se conocen como islotes CpG, presentes especialmente en los promotores, secuencias que preceden a los genes y que propician la transcripcin del ADN a ARN, o en el primer exn de ms de 60% de los genes.5 Los

EPIGENTICA
La epigentica estudia las variaciones hereditarias que ocurren sin que cambie la secuencia del ADN,3 es decir, sin que se altere la lectura de las bases nitrogenadas A, C, G y T. Los procesos epigenticos son modificaciones covalentes por adicin de grupos funcionales (metilos, acetilos, fosfatos, etc.) o protenas (ubiquitina, modificador relacionado a la ubiquitina SUMO, etc.) al ADN o a algunas de sus protenas asociadas. Estas modificaciones contribuyen a activar o inhibir los procesos de transcripcin, afectando as el grado de expresin del ARN mensajero, lo cual puede influir en el desarrollo de patologa.14 Sin olvidar que el anlisis fino de la secuencia de nuestro genoma permite aun excluir pseudogenes y agregar genes confirmados, se estima que en cada una de nuestras clulas nucleadas hay cerca de 22000 genes (excluyendo el ADN de las mitocondrias) que codifican para polipptidos y ms de 4000 que codifican nicamente para ARN. La expresin de los genes se controla en parte por el enrollamiento del ADN alrededor de grupos de protenas globulares llamadas histonas,3 lo cual a su vez conforma una estructura compacta conocida como cromatina,14 un complejo ADN-protena que representa el empaquetamiento de aproximadamente tres mil doscientos cincuenta millones de pares de bases de material gentico.15 Los cambios fsicos y qumicos de la estructura de la cromatina tambin influyen en la expresin de los genes al alterar las interacciones ADNprotena; los genes se inactivan cuando la cromatina est condensada y se activan cuando est libre. Estos estados

NH2 N

SAM

SAH CH3

N DNMT

N Citosina

N 5 -metilcitosina

Figura 1. La metilacin del ADN ocurre sobre el carbono 5 de la citosina. (SAM: S-adenosil-metionina, donador del grupo metilo; SAH: S-adenosil-homocistena; DNMT: ADN metiltransferasa).14

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genomas de los espermatozoides y los ovocitos, como el de las clulas somticas diferenciadas, presentan un grado relativamente importante de metilacin. Despus de la fecundacin y la formacin del cigoto, durante el desarrollo previo a la implantacin, se presentan cambios drsticos en los niveles de metilacin. As, el desarrollo embrionario comienza con una oleada que suprime casi todas las marcas epigenticas que estaban presentes en los genomas de los gametos, exceptuando las de la impronta parental, que se conservan. En el genoma paterno (proporcionado por el espermatozoide), esta oleada de desmetilacin es un proceso activo que elimina del genoma casi todas las metilaciones a pocas horas de la fecundacin,17 mientras que en el genoma materno (proveniente del ovocito) el proceso es pasivo y se produce durante las divisiones de los blastmeros. Despus de la implantacin, el genoma de los tejidos embrionarios se metila durante los procesos de diferenciacin celular que definen las caractersticas de los nuevos tejidos, con perfiles de metilacin especficos, mientras que el ADN de la placenta y otros anexos embrionarios permanece hipometilado. Tales modificaciones se heredan de clulas madres a clulas hijas.10 Como resultado, cada tipo celular tiene su propio esquema epigentico que debe cuidarse para mantener la funcin de los genes. Si este patrn es afectado (cuadro 1), los resultados pueden ser la aparicin de trastornos congnitos o la predisposicin para adquirir determinados estados patolgicos como cncer y trastornos neurodegenerativos.3 En general, a mayor metilacin en los islotes CpG presentes en las regiones reguladoras de un gen, ms baja es la tasa de transcripcin de ste. Las enzimas involucradas en este proceso epigentico son las ADN metiltransferasas (DNMTs, por sus siglas en ingls) y se clasifican como DNMTs de novo, que adicionan grupos metilo a molculas de ADN que no poseen ninguno de estos grupos, y DNMTs de mantenimiento, que tienen gran afinidad por molculas semimetiladas, es decir, cuando slo una cadena se encuentra modificada.5 De igual forma se presentan desmetilasas que retiran los grupos metilo durante el desarrollo celular; estas enzimas incluyen, por un lado, glicosilasas cuya actividad asemeja la reparacin del ADN por excisin de bases donde se eliminan las citosinas metiladas. Por otra parte, puede ocurrir desmetilacin del ADN por intervencin de la protena MBD2, de la que se ha reportado actividad tanto represora

Cuadro 1. Anormalidades en el proceso epigentico de metilacin Hipermetilacin de ADN Hipometilacin de ADN Mutaciones en citosinas metiladas Defectos de impronta Cromatina condensada y silenciamiento de genes supresores de tumores Activacin de oncogenes, inestabilidad de la cromatina y activacin de transposones Expresin inadecuada de genes Prdida de identidad parental

como desmetilante; sin embargo, el mecanismo de accin de esta ltima no ha sido completamente esclarecido.5 Se han propuesto dos mecanismos para explicar cmo la metilacin del ADN controla la transcripcin. El primero de ellos se basa en la presencia de grupos metilo en sitios especficos, lo que simplemente no permite la unin de los factores de transcripcin por impedimento estrico.5 El otro mecanismo se relaciona con una familia de protenas que poseen un dominio de reconocimiento y unin al ADN metilado y que fungen como represoras de la transcripcin.14 En los mamferos, esta familia comprende cinco protenas, MBD 1 a 4 y MeCP2; todas comparten el dominio de unin a los sitios 5mC, excepto la MBD3 que tiene dos sustituciones de aminocidos. La MBD4 es la nica que no est involucrada en la regulacin transcripcional sino en la reduccin del riesgo mutacional en genomas con altos niveles de mutilacin.5 La MeCP2 fue la primera de estas protenas en ser clonada, cuenta con 486 aminocidos y dos dominios: el izquierdo, de unin al grupo metilo, y el derecho, de represin transcripcional de aproximadamente 100 aminocidos, localizado a la mitad de la protena.5,15 Esta se expresa ms abundantemente en el cerebro que en otros rganos, preferentemente en el ncleo de las neuronas, aunque en el caso de las postsinpticas tambin en el citoplasma. En el ncleo, la MeCP2 forma un complejo correpresor junto con las histona-deacetilasas y las protenas remodeladoras de la cromatina.15 Se le ha asociado tambin con una actividad metiladora de histonas, especficamente de la H3 en la lisina 9, lo que significa nuevamente una seal represora de la transcripcin. As mismo, participa indirectamente en la supresin del proceso de transcripcin, favoreciendo una estructura ms densa de la cromatina, lo que impide la unin de los factores que activan este proceso. Las mutaciones en el gen para MeCP2 estn relacionadas con fenotipos clnicos tales como retraso mental asociado al cromosoma X, sndrome de Angelman y autismo.5 Es relativamente reciente la propuesta de que las variaciones en la metilacin de CpG pueden explicar parte de la etiologa de los trastornos mentales. Algunos de los descubrimientos que sugieren este vnculo son los siguientes: 1). Mltiples mutaciones en el gen que codifica para la protena MeCP2 estn involucrados en sndromes relacionados con el neurodesarrollo, como el de Rett. 2). Se han encontrado en estudios postmortem deficiencias en la expresin del gen MECP2 en cerebros de personas que padecieron autismo.3 3). La regulacin de los genes RELN y GAD67 (reelina y GAD67 respectivamente), relevantes en trastornos psiquitricos, est influenciada por cambios en la metilacin del promotor y por modificaciones en las histonas. 4). Se ha encontrado que la expresin de DNMT1 est significativamente incrementada en interneuronas GABArgicas en cerebros de pacientes con esquizofrenia y trastorno bipolar.15,18

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MODIFICACIONES DE LAS HISTONAS Y EL CDIGO DE LAS HISTONAS

Como se mencion anteriormente, las histonas son las protenas alrededor de las cuales el ADN se enrolla para su empaquetamiento. Las modificaciones epigenticas que se llevan a cabo en ellas incluyen modificaciones covalentes por acetilacin, metilacin, fosforilacin y adicin de grupos ADP-ribosilos o molculas pequeas como ubiquitina o SUMO.5,19 La adicin de grupos acetilo ocurre sobre el aminocido lisina: se ha detectado que aproximadamente 14% de las lisinas son susceptibles de acetilacin.14 Los grupos metilo se unen en argininas y lisinas. Las distintas combinaciones de modificaciones covalentes son las que dan lugar a lo que se conoce como el Cdigo de las histonas (cuadro 2).15

CONTRIBUCIN DE LOS ESTUDIOS EN GEMELOS AL REA PSIQUITRICA

La gentica psiquitrica es una disciplina cuyas estrategias no slo estn enfocadas a estudiar los factores hereditarios que predisponen a padecer trastornos mentales, sino tambin a comprender las interacciones gentico-ambientales tomando como ncleo de estudio a la poblacin, a la familia y en algunas ocasiones a los gemelos. Desde hace ms de 20 aos, numerosos estudios realizados con pares de gemelos MC y DC han mostrado que, para la mayora de los trastornos mentales, una persona puede no presentar una enfermedad mientras que su gemelo idntico o fraterno la padece.20 La bsqueda de explicaciones para estas diferencias ha sido el propsito central de muchas investigaciones; actualmente se cuenta con tiles herramientas como la gentica molecular cuyo objetivo es identificar el o los cambios en la funcin de los genes, y la epidemiologa psiquitrica, que cuantifica el grado en el cual las diferencias individuales en el desarrollo de las enfermedades resultan de factores genticos.21 Dos conceptos cobran importancia en los estudios genticos con grupos de gemelos: la vulnerabilidad y la

Cuadro 2. Cdigo de las histonas Histona Modificacin H2B H3 H3 H3 H3 H4 H4 Ubiquitinacin Fosforilacin Acetilacin Dimetilacin Metilacin Sumoilacin Acetilacin Sitios Lys 123 Ser 10 Lys 14 Lys 4 Lys 79 ? Lys 12 Efecto Metilacin de Lys 4 y 79 de H3 Acetilacin de Lys 14 de H3 Activacin gnica Actividad gnica potencial Silenciamiento telomrico Represin gnica Silenciamiento

* Slo se muestran algunos ejemplos. Los efectos pueden ser dependientes de la especie. Lys: lisina; Ser: serina.

heredabilidad. El primero se refiere a la predisposicin causada por un grupo de factores de riesgo gentico y ambiental, cuya interaccin determina si algn trastorno mental se presenta o no en un individuo. La heredabilidad es la proporcin de varianza en la vulnerabilidad para el desarrollo de un trastorno que es debida a la influencia de los genes. Un valor de heredabilidad de cero (0%) indica que la vulnerabilidad se debe a factores ambientales; un valor de 1 (100%) indica que el desarrollo de un trastorno se puede explicar completamente por accin de los genes. Los gemelos representan un grupo de estudio experimental natural muy til sobre todo cuando se trata de un trastorno propiciado por variaciones en la funcin de los genes. Si los gemelos MC comparten 100% de la secuencia gentica y los gemelos DC comparten 50%, entonces se espera que entre gemelos MC exista una mayor concordancia para un trastorno que entre los DC. Esto es justamente lo que se ha encontrado en las investigaciones que se han llevado a cabo. Aunque los estudios en gemelos suelen catalogarse como genticos, tambin nos dicen mucho acerca de las influencias de factores ambientales. No obstante, es importante considerar con cierta cautela los resultados de stos, ya que las estimaciones de heredabilidad no representan hechos inmutables. El clculo de heredabilidad en un trastorno depende de la muestra que se estudie, los genes involucrados en esa muestra y la naturaleza de los factores ambientales a los que los miembros de la muestra estn expuestos en el momento determinado de la investigacin. El xito de un estudio en gemelos comienza desde la correcta determinacin de la cigocidad entre un hermano y otro, es decir, definir si stos son MC o DC. Si la cigocidad es determinada errneamente, los resultados carecern de significado. Adems, las inferencias que se hagan de resultados obtenidos en gemelos pueden ser inapropiadas para la poblacin de no gemelos si los factores biolgicos o psicosociales asociados especficamente con los gemelos son parte importante en el desarrollo del trastorno mental; por ejemplo, los gemelos presentan pesos ms bajos al nacer y las madres sufren ms frecuentemente complicaciones durante el embarazo. Por lo tanto, ya que hay diferencias sistemticas entre los gemelos y los no gemelos, las estimaciones de heredabilidad en los primeros podran no ser generalizables a los segundos. Sin embargo, la mayora de los genetistas psiquitricos consideran que los grupos de gemelos, junto con las personas dadas en adopcin, pueden ser la mejor fuente de informacin para obtener evidencia de la importancia de los factores genticos en los trastornos psiquitricos.20 El cuadro 3 es una recopilacin de datos de investigaciones realizadas en diferentes tiempos y por diferentes autores para algunos trastornos mentales, y muestra los grados de concordancia y/o los porcentajes de heredabilidad calculados en grupos de gemelos monocigticos y dicigticos.

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Como puede observarse, las heredabilidades estimadas para estos trastornos indican la importante influencia de los genes. As mismo, los grados de concordancia entre gemelos MC son ms altos que entre los DC, lo que refrenda lo anteriormente mencionado.

LA EPIGENTICA Y LAS EPIMUTACIONES EN LOS TRASTORNOS MENTALES

En esta seccin presentamos tres ejemplos de trastornos mentales en los que se explican las formas en las que modificaciones epigenticas podran participan en su fisiopatologa. Trastorno bipolar. Se sabe que uno de los frmacos estabilizadores del nimo, el valproato, es un inhibidor de la enzima HDAC, y que las histonas desacetiladas, en conjunto con el ADN no metilado, conllevan a la expresin de los genes. Se ha relacionado la eficacia del frmaco en el tratamiento del TBP con la actividad inhibitoria que ejerce, sugiriendo por tanto que una modificacin epigentica (que reprime la transcripcin de un gen) juega un papel importante en la manifestacin de algunos sntomas del trastorno.12

Cuadro 3. Grados de concordancia y/o heredabilidad en estudios con gemelos MC y DC Concordancia Concepto del estudio Contribucin de 1 o ms genes al TBP22 TBP , entrevistas estructuradas, investigacin de factores ambientales23 Efectos genticos no aditivos y discordancia fraterna en TDAH24 Hbito de fumar y embarazo en el TDAH25 TDAH y problemas de conducta26 Relacin entre DM y deterioro de funciones en esquemas etiolgicos27 DM28 Autismo, variabilidad del comportamiento29 Rasgos relacionados al autismo30 Modelo biomtrico para relacionar factores de riesgo genticos en ESQ31 60% 50% H 85-89% MC 40% DC 5.4%

93%

42.9%

5.6%

72% 73-74% 80% 74.79%a 47.54%a

35% 37% 17%

10.2%

8.8%

H: heredabilidad estimada; MC: monocigticos; DC: dicigticos; TBP: Trastorno bipolar; TDAH: Trastorno por dficit de atencin e hiperactividad; DM: Depresin mayor; ESQ: Esquizofrenia. a modelos amplio y estricto, respectivamente.

Esquizofrenia. Quiz el ejemplo ms estudiado en la esquizofrenia es la hipermetilacin en los genes RELN y GAD67 en la corteza prefrontal, debida a la sobreexpresin de la DNMT1 en las interneuronas corticales GABArgicas. RELN codifica para la reelina, que es una protena importante en el desarrollo prenatal del Sistema Nervioso Central y en la modulacin de la expresin de las neuronas piramidales corticales en el cerebro adulto.18 Regula la migracin de las neuronas durante el desarrollo del encfalo, resultando esencial para la correcta organizacin y plasticidad de la corteza cerebral.32 GAD67 es una de las dos formas moleculares de las enzimas sintetizadoras de GABA, el principal neurotransmisor inhibitorio en humanos. La hipermetilacin de estos genes favorece la represin de la transcripcin, ya sea por interferencia de los grupos metilo a los promotores de la transcripcin o por unin de alguna protena MBD. El resultado es la baja produccin de reelina y de GAD67, caracterstica tpica que se ha encontrado en cerebros de pacientes con esquizofrenia.18 Autismo. La epigentica se refleja en este trastorno gentico complejo junto con el sndrome de Rett (RTT) y el sndrome de Angelman (AS); estos dos ltimos estados patolgicos comparten caractersticas clnicas con el autismo, como retraso en el desarrollo, problemas de lenguaje y comportamientos estereotpicos. El RTT es causado por mutaciones en el gen MECP2 y el AS por deficiencia materna del cromosoma 15q11-q13, defectos en la metilacin del ADN o mutacin materna de la ligasa de ubiquitina-protena E3A (UBE3A). Sin embargo, se han encontrado pacientes con AS y autismo que presentan mutaciones en MECP2; incluso para estos mismos trastornos se han demostrado defectos en la expresin de MeCP2 mediante el mtodo de inmunofluorescencia cuantitativa en muestras de cerebro. La proteina MeCP2 es esencial para el desarrollo postnatal del cerebro en los mamferos, de ah que al disminuir su actividad baja el nivel de represin en la transcripcin de ciertos genes y se conduce al desarrollo de RTT, AS o autismo.33 La participacin de la epigentica en trastornos mentales se ejemplifica con los casos anteriormente citados, sin embargo es importante considerar un aspecto ms. Durante la divisin mittica, los cambios epigenticos se transmiten de clula a clula (proceso conocido como sistema hereditario epigentico),34 pero en la gametognesis estas modificaciones desaparecen aparentemente. Dicho lo anterior, se entiende el desarrollo de un trastorno psiquitrico como el resultado, entre otros factores, de una serie de eventos epigenticos desfavorables que se determinan cuando hay un error en la lnea germinal durante la reprogramacin epigentica. Estos errores se conocen como epimutaciones e incrementan el riesgo para padecer una enfermedad, pero no necesariamente la definen como inevitable. Pueden no causar ninguna manifestacin clnica durante mucho tiempo, provocar cambios menores en el desarrollo cerebral y estar sujetas a variaciones posteriores

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probablemente durante la embriognesis, la niez o la adolescencia; incluso en la etapa de envejecimiento pueden volver a su estado normal y aparentar una disminucin en la psicopatologa o una recuperacin parcial.35

CONCLUSIN
Cada trastorno mental tiene su propio esquema tanto etiolgico como en cuanto a sus y caractersticas. La manifestacin de alguno de ellos en una persona obedece a diversos factores ambientales y hereditarios. Los grados de concordancia y los porcentajes de heredabilidad son slo dos de los muchos indicios en la amplia gama de explicaciones ante las diferencias entre individuos idnticos. Nos hemos valido de la epigentica, de las muchas combinaciones de los estados metilados y/o acetilados en la molcula del ADN, de las epimutaciones y de los estudios en gemelos para presentarla como una explicacin probable de parte de las diferencias en la susceptibilidad a los trastornos mentales, de la misma manera en que lo hizo Esteller y su equipo en el 200536 al referirse al cdigo epigenmico como el cdigo fsico y qumico que proporciona las respuestas a las interrogantes en lo que a enfermedades en gemelos se refiere. Todo esto sin dejar de lado, por supuesto, la influencia ambiental de la que tambin existen numerosos estudios que sustentan su participacin,25,37 sin embargo, quiz no est fuera de lugar considerar que en algunos casos lo hacen en menor medida. En la actualidad, con el proyecto del Epigenoma Humano se pretende catalogar e interpretar por medio de una colaboracin internacional los patrones de metilacin a lo largo de todo el genoma, es decir, comprendiendo todos los genes humanos, en los principales tejidos. El futuro conocimiento de los patrones epigenticos podra contribuir a identificar factores de riesgo para los trastornos mentales.38 REFERENCIAS
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