Teste de Coombs

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O teste de Coombs (nome dado em homenagem a um dos investigadores que desenvolveram o teste para uso laboratorial, Coombs, 1945),

embora o princpio tenha sido descrito muito antes, em 1908, por Moreschi. Se baseia no princpio de que anticorpos especficos antiglobulina humana atuam como uma ponte que induz a aglutinao de eritrcitos revestidos com imunoglobina humana ou complemento.

Robin Coombs graduou-se em medicina veterinria na universidade De Edimburgo.Em 1947 obteve O doutorado no Kings College,em Cambridge. Foi durante o doutorado que desenvolveu e publicou o mtodo de deteco de anticorpos. A Reao de Coombs (ou Teste da Antiglobulina) foi introduzida por meio de um estudo sobre anemias hemolticas em 1945, com a finalidade de detectar tanto autoanticorpos quanto aloanticorpos antieritrocitrios

O soro antiglobulina humana pode ser produzido atravs de hiperimunizao animal, usualmente coelhos, com imunoglobina purificada ou complemento para produzir ttulos elevados de anticorpos IgG com avidez alta.

Atualmente, os reagentes poliespecficos usualmente so uma mistura de anticorpos IgG policlonais contra o espectro de subclasses de IgG humana e anticorpos moniclonais contra os componentes do complemento C3b e C3d

Estima-se que 100 a 500 IgG ou molculas de C3 ligadas por eritrcitos so necessrias para a deteco de anticorpos antiglobulina (Harmening, 1994); um nmero menor de molculas ligadas pro eritrcitos do uma reao negativa.

Dois tipos de clulas para o controle de qualidade so normalmente utilizados: as revestidas com IgG e as revestidas com C3b iu C3d. As clulas para o controle de qualidade do teste de Coombs frequentemente so denominadas clulas de checagem, clulas controle de Coombs ou clulas sensibilizadas.

Teste de Coombs direto: amostras de sangue devem ser coletadas em EDTA para prevenir a sensibilizao de clulas com complemento in vitro. Uma suspenso salina a 3% at 5% de eritrcitos do paciente preparada para a testagem. Uma gota dessa suspenso celular posteriormente lavada pelo menos quatro vezes com soluo salina, e em seguida, deve ser adicionada AHG poliespecfica contendo anti-IgG e anti-C3d de modo que a sensibilizao in vitro, seja para a IgG ou para o complemento, possa ser detectada.

Teste de Coombs direto: Eritrcitos do paciente, do doador e reagente incuba-se com o soro apropriado ou anti-soros preparados comercialmente, usualmente a 37C, durante o perodo de tempo indicado no procedimento de operao padro para o ensaio participar que estiver sendo realizado. Dependendo do mtodo, os tubos podem ser centrifugados e ento examinados em busca de hemlise ou de aglutinao, o passo seguinte deve ser lavar os eritrcitos pelo menos quatro vezes para remover todas as globulinas sricas livres ou protenas estranhas.

Ajuntamento de antgenos particulados tais como bactrias ou eritrcitos pela ao de anticorpos que pode resultar num precipitado visvel a olho nu,sendo uma reao altamente especfica em que cada antgeno reage com seu anticorpo.

Investigao de reaes homolticas transfusionais Doenas hemolticas do recm-nato Investigao de auto-anticorpos Anticorpos induzidos por medicamentos

Deteco e identificao de anticorpos eritrocitrios no soro Tipagem de antgenos eritrocitrios Prova cruzada

http://www.uftm.edu.br/patolo/cpgp/imagem/Tese_VitorMAlvesME.pdf

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