Regulação da Expressão Gênica por LED Iluminação

S. Dutta Gupta e S. Pradhan

10.1 Introdução

A luz desempenha um papel importante no crescimento e desenvolvimento das plantas,

como fonte de energia predominante para a fotossíntese e como indutor de sinalização
essencial para várias respostas fotomorfogênicas (Lee et al. 2007; Lau e Deng 2010).
Em particular, sabe-se que a qualidade espectral e a densidade de fluxo de fótons
fotossintéticos (PPFD) de fontes de luz usadas para irradiar plantas afetam tanto a
fotossíntese quanto a fotomorfogênese. As plantas possuem um sistema especializado
de detecção de luz, os fotorreceptores que absorvem a energia luminosa e estimulam a
rede de sinalização para influenciar o crescimento e desenvolvimento das plantas
(Fraikin et al. 2013; Hayes et al. 2014). A distribuição espectral da radiação solar
pertence a uma ampla faixa de comprimentos de onda (cerca de 300–1000 nm), e
apenas 50% da radiação que atinge a superfície terrestre é radiação fotossinteticamente
ativa (PAR). Os espectros da luz solar que incluem comprimentos de onda vermelhos e
azuis são importantes para a fotossíntese. Os outros comprimentos de onda, como o
ultravioleta e o vermelho extremo, que são absorvidos por fotorreceptores específicos,
atuam como indutores de sinalização para várias vias de desenvolvimento. Devido à
natureza específica dos fotorreceptores das plantas, a fim de reconhecer comprimentos
de onda específicos da luz, a irradiância emitida pelo sol é incapaz de regular processos
biológicos específicos de forma controlada. Assim, o uso de luz artificial é uma prática
comum para substituir ou compensar a baixa disponibilidade de luz natural para cultivar
uma variedade de espécies de plantas em ambiente agrícola controlado (Dorais e
Gosselin 2002; Heuvelink et al. 2006). A qualidade espectral bem como a intensidade
da radiação adotada nos sistemas de produção vegetal impulsionam o crescimento e
desenvolvimento das culturas. As fontes de luz convencionais não podem ser
controladas com a saída espectral desejada devido à utilização limitada e ineficiente de
filtros adicionais, e também propensas à falta de capacidade de controle inteligente dos
regimes de iluminação. Portanto, os diodos emissores de luz (LEDs) e a iluminação de
estado sólido (SSL) relacionada emergiram como uma fonte de luz artificial promissora
para sistemas controlados de produção vegetal.
Os LED são a escolha inteligente para fonte de iluminação da próxima geração, devido
às suas vantagens significativas em termos de eficiência energética, compacidade,
durabilidade, longa vida útil, zero mercúrio, baixo CO2 e baixas emissões de calor
(Massa et al. 2008; Kami et al. 2010). ; Nelson e Bugbee 2014; ver Capítulos 1 e 5 para
mais detalhes sobre iluminação LED). Considerando os impactos econômicos e
ecológicos, as luminárias LED trouxeram novas oportunidades no sistema de produção
vegetal. Os LEDs podem fornecer entrega precisa de fótons na copa das culturas e,
assim, fornecer uma opção para iluminação artificial exclusiva ou suplementar com
eficiência energética em estufas ou fábricas (Nelson e Bugbee 2014).

Os sensores de luz das plantas podem ser ajustados com radiação específica conforme
instruções guiadas, a fim de regular o crescimento e desenvolvimento das plantas e a
produção de metabólitos bioativos. Com efeito, o controlo coordenado do tratamento da
luz permite aos investigadores e produtores produzirem essencialmente os seus produtos
desejáveis nas plantas (Chen et al. 2004). Embora tenha havido muitas discussões sobre
a morfogênese das plantas reguladas por LED, floração, qualidade nutricional,
qualidade pós-colheita, etc. (descritas em outros capítulos deste livro), apenas alguns
relatos descrevem o efeito dos LEDs na expressão gênica de diferentes vias metabólicas
de plantas. No presente capítulo, resumimos as descobertas básicas relacionadas à
doença induzida por LED expressão gênica em plantas, com foco em genes que regulam
o metabolismo de carotenóides, flavonóides e ascorbato. Genes envolvidos na
sinalização luminosa, fatores responsivos às auxinas e defesa das plantas e resistência a
doenças também foram discutidos.

10.2 Expressão Gênica Regulada por LED

Apesar das inúmeras conquistas na fotorregulação do desenvolvimento das plantas,

muito pouca informação está disponível sobre o efeito específico da qualidade da luz
fornecida pela fonte de LED que regula a expressão gênica. A expressão gênica
regulada por LED foi estudada em relação a fotorreceptores e fatores responsivos a
auxinas, via de biossíntese de carotenóides, via de flavonóides, metabolismo de
ascorbato e genes relacionados à defesa (Fig. 10.1). Especificamente, os LEDs azuis,
vermelhos e brancos, individualmente e/ou em combinação, regulam a expressão dos
principais genes reguladores envolvidos em várias vias metabólicas das plantas. A
Tabela 10.1 resume o efeito de várias irradiações de LED na expressão de genes
envolvidos nas vias biossintéticas de carotenóides, flavonóides e metabolismo do
ascorbato, juntamente com seu envolvimento na modulação de genes fotorreceptores,
fatores responsivos a auxinas e genes relacionados à defesa.
10.2.1 Expressão gênica de fotorreceptores e fatores responsivos a auxina regulada
por LED

Os fotorreceptores, as moléculas sensíveis à luz, são responsáveis pelo início de

respostas fisiológicas selecionadas através de redes de sinalização específicas. Pelo
menos quatro famílias diversas de fotorreceptores foram elucidadas no sistema vegetal.
Estes são fitocromos - que detectam luz vermelha / vermelha distante (Li et al. 2011),
criptocromos e fototropinas - que detectam luz azul / UV-A (Briggs e Christie 2002;
Kharshiing e Sinha 2015) e UVR absorvente de UV-B -8 (Heijde e Ulm 2012).
Geralmente, esses fotorreceptores consistem em mais de um membro em cada grupo.
Existem cinco membros no fitocromo (PHYA a PHYE), três no criptocromo (CRY1,
CRY2 e CRY3), dois membros na fototropina (PHOT1 e PHOT2) e um fotorreceptor
UVR8 (Wu 2014). Cada fotorreceptor individual é codificado por um gene individual e
compartilha um alto grau de similaridade entre os fotorreceptores individuais da mesma
família. PHYA, PHYB, CRY1 e CRY2 regulam o florescimento em resposta à luz em
Arabidopsis (Mockler et al. 2003; Exner et al. 2010). Em outras plantas cultivadas, os
fotorreceptores desempenham diferentes funções nos processos celulares, como
regulação dos fotoperíodos, floração, tuberização e amadurecimento dos frutos. A
manipulação de genes envolvidos em diferentes fotorreceptores influencia
extremamente as vias moleculares relacionadas à fotossíntese, fotorrespiração, estresse
biótico/abiótico, bem como o metabolismo secundário, como a biossíntese de fenólicos,
fenilpropanóides e flavonóides/antocianinas (Lopez et al. 2012). As fototropinas
medeiam o alongamento dos hipocótilos ou hastes em direção à luz nos comprimentos
de onda entre 315 e 500 nm.

As fototropinas também desempenham papéis importantes na relocação dos cloroplastos

(Wada et al. 2003; Kasahara et al. 2004) e no movimento estomático (Kinoshita et al.
2001), resultando em respostas muito robustas das plantas ao ambiente luminoso
circundante. A iniciação floral fotoperiódica é controlada por um indutor de
florescimento sistêmico (florigen) e um inibidor (antiflorigen), como os genes do locus
de florescimento T (FTL) e da proteína antiflorigênica da família FT/TFL1 (AFT),
respectivamente, que são produzidos nas folhas ( Higuchi e outros 2013). Uma grande
quantidade de dados estabeleceu a relação entre a regulação luminosa e hormonal nas
plantas (Folta et al. 2003; Alabadi e Blazquez 2009). Os reguladores de crescimento
vegetal em conjunto com os fatores de transcrição expressam diferentes genes de acordo
com a recepção de luz pelas plantas (Lau e Deng 2010). Assim, existe interação
fotomorfogênica e fototrópica, via sinalização hormonal. A auxina pode modular a
fotomorfogênese, bem como o fototropismo, regulando a expressão gênica dos
fotorreceptores, AUX/IAA e fatores de resposta à auxina (ARF) (Molas e Kiss 2009;
Singh et al. 2015). O ARF liga-se às regiões promotoras dos genes sensíveis à auxina e
desencadeia sua ativação e repressão. Entre a família ARF, ARF5-8 e ARF19
desempenham um papel importante na ativação dos genes sinalizadores de auxina,
enquanto ARF1 e ARF2 suprimem a atividade desses genes (Okushima et al. 2005;
Guilfoyle e Hagen 2007). O envolvimento de tais proteínas reguladoras na transdução
de sinais luminosos é um aspecto importante da investigação.

O efeito do LED azul (450 nm) foi investigado nas respostas fotomorfogênicas de
Arabidopsis thaliana Col-0 juntamente com as alterações associadas nos níveis de
transcrição de vários genes, incluindo fotorreceptores e IRA (Pashkovskiy et al. 2016).
Os LEDs azul (450 nm) e branco têm efeitos diferentes nos fotorreceptores e nos genes
ARF. Os níveis de mRNA de vários fitocromos (PHYA, PHYD) e criptocromos
(CRY1) foram significativamente reduzidos sob o led azul (120 ± 30 µmol m−2 s − 1),
enquanto os níveis de mRNA de PHYC, CRY2 e PHOT2 permaneceram inalterados,
em comparação com a lâmpada fluorescente compacta branca (WCFL). Uma
diminuição semelhante nos níveis de mRNA também foi observada com WL de mesma
intensidade. Foi encontrado um aumento no conteúdo de PHYC nas plantas tratadas
com WL, em comparação com as plantas cultivadas sob BL. O componente de luz
vermelha do WL pode regular a síntese de PHYC. Portanto, o conteúdo inalterado de
PHYC sob BL pode ser devido à natureza de banda estreita da fonte de luz, sem
qualquer espectro vermelho. A irradiação de WL não tem efeito na expressão dos genes
PHYB, PHYE, CRY2, PHOT1 e PHOT2. Tanto BL quanto WL regularam
negativamente o transcrito PHOT1, em comparação com WCFL. A regulação negativa
do PHOT1 foi explicada pela diminuição da necessidade de fototropinas durante a
senescência das folhas. Foi proposto que a redução da expressão do gene fotorreceptor
manifesta a sensibilidade reduzida da molécula sensível à luz e suas propriedades
reguladoras em relação à luz azul (Pashkovskiy et al. 2016). O estudo também sugere o
envolvimento de genes ARF na fotomorfogênese mediada pela luz azul.

Os ARFs têm um papel crítico no crescimento das plantas e nos processos de

desenvolvimento. Existem 22 genes ARF descobertos até o momento em Arabidopsis.
Sua função depende da senescência foliar e abscisão de órgãos florais, especificação da
polaridade foliar, determinação do meristema floral, etc. (Li et al. 2016). As expressões
dos genes ARF foram significativamente afetadas pelo LED azul em A. thaliana. O
LED azul aumentou significativamente o nível de transcritos dos genes ARF4 e ARF8,
enquanto os genes ARF3 e ARF6 foram moderadamente expressos, mas a expressão
gênica de ARF2 foi reduzida significativamente. A expressão do gene ARF não foi
significativamente influenciada pelo WLED, ao contrário da iluminação LED azul.
Além disso, o LED azul induziu significativamente o silenciamento do gene ARF
mediado por miRNA, que estava envolvido na ativação de genes dependentes de auxina.
Presumivelmente, os efeitos da luz azul em A. thaliana são mediados pela via de
sinalização de auxina envolvendo a regulação dependente de miRNA da expressão do
gene ARF (Pashkovskiy et al. 2016).

A maioria das plantas angiospérmicas depende de sinais luminosos para desencadear a

floração (Somers et al. 2004; Kim et al. 2005). A manipulação artificial das condições
fotoperiódicas pode induzir a floração precoce e pode reduzir o custo da horticultura
comercial, reduzindo o tempo de floração e melhorando a qualidade geral da colheita
(Warner e Erwin 2003). Foi bem demonstrado que a interrupção noturna (NP) após o
uso de fonte de luz artificial à noite pode regular o florescimento de plantas de dias
longos e de dias curtos (Leopold 1951; Lin 2000). Em particular, o uso de LEDs
noturnos (NI) pode regular a expressão de genes associados ao desenvolvimento floral e
fotorreceptores (Yamada et al. 2008). O impacto das mudanças na qualidade espectral
da luz na expressão gênica fotoperiódica foi investigado em Dendranthema
grandiflorum interrompendo os ritmos circadianos das plantas à noite usando LEDs
(Park et al. 2015). Os tratamentos de luz fotoperiódica foram fornecidos alterando a
qualidade da luz do NI com todas as combinações possíveis de azul (B; 450 nm),
vermelho (R; 660 nm), vermelho extremo (Fr; 730 nm) e branco (W; 400 nm). 750 nm,
com 28% de luz B, 37% de R e 15% de luz Fr. Entre os tratamentos NI, as plantas
expostas à luz Fr cresceram maiores que as plantas nos outros tratamentos e
especialmente a floração foi promovida nos tratamentos NI-BFr e NI-FrB. Os genes
indutores de florescimento PHYA e CRY1 apresentaram maior expressão no tratamento
NI-FrB. No entanto, foi observado um alto nível de expressão do gene PHYA sem
qualquer florescimento no tratamento NI-RW. Da mesma forma, o tratamento Ni-BR
não conseguiu induzir o florescimento, apesar dos altos níveis de expressão dos genes
CRY1 e FTL. No tratamento NI-RFr não houve floração no crisântemo. Isso aconteceu
devido à maior expressão de genes inibidores do florescimento, como PHYB e AFT.
Foi assumido que o NI com luz azul promoveu o florescimento após a estimulação da
expressão de CRY1 e FTL e a exposição à luz R suprimiu o florescimento ao estimular
a expressão do gene AFT (Park et al. 2015). Os padrões globais de expressão dos genes
fotoperiódicos sugerem o potencial da luz B para promover a floração em culturas
florícolas em vasos.

10.2.2 Expressão Gênica da Biossíntese de Carotenóides Induzida por LED

Os carotenóides são o segundo maior grupo de pigmentos da natureza, consistindo em

mais de 700 membros, cada um com 40 moléculas de carbono (Britton 1998; Nisar et al.
2015). Nas plantas, os carotenóides desempenham um papel crítico na regulação da
coloração das flores e dos frutos e desempenham várias funções essenciais em vários
processos fisiológicos, como a proteção do fotossistema contra danos fotooxidativos e a
estabilização das membranas (Frank e Cogdell 1996; Havaux 1998). Como precursores
da vitamina A, os carotenóides também são importantes para a saúde e nutrição humana
(Al-Delaimy et al. 2005). Um elevado nível de carotenóides no plasma humano reduz o
risco de doenças cardiovasculares, cancros e doenças relacionadas com a idade
(Khachik et al. 2006; Pouchieu et al. 2014). Devido a tal importância, a via biossintética
dos carotenóides tem sido bem investigada em plantas (Cunningham e Gantt 1998;
Hannoufa e Hossain 2012). Além disso, a caracterização molecular de genes envolvidos
nas principais etapas da biossíntese de carotenóides tem sido bem investigada (Alquézar
et al. 2009; Kato et al. 2004; Kato 2012). Esforços também foram feitos para aumentar o
acúmulo de carotenóides nas plantas por meio da metabolômica. Foi relatado que a
aplicação de luz com qualidade espectral diferente afeta a biossíntese de carotenóides
(Zhang et al. 2012, 2015). Não é apenas a qualidade espectral, a intensidade e a duração
da luz também influenciaram significativamente o acúmulo de carotenóides. Nas folhas
e caules de mudas de ervilha, o teor de b-caroteno foi muito maior nos grupos tratados
com luz vermelha do que nos grupos tratados com luz azul (Wu et al. 2007). Nos
tomates, o tratamento com luz vermelha aumentou o acúmulo de licopeno (Liu et al.
2012). O aumento do conteúdo de carotenóides mediado pela luz vermelha,
especialmente a b criptoxantina, foi registrado em frutas cítricas, enquanto o acúmulo de
conteúdo de carotenóides não foi afetado pela exposição ao LED azul no flavedo da
tangerina Satsuma (Ma et al. 2012). As diferenças no conteúdo de carotenóides foram
atribuídas à expressão gênica diferencial durante a biossíntese de carotenóides.

Tuan et al. (2013) investigaram a expressão regulada por LED de genes biossintéticos
de carotenóides juntamente com o acúmulo de carotenóides em brotos de trigo
sarraceno tartário (Fagopyrum tataricum). Os brotos foram irradiados com LEDs
brancos (380 nm), azuis (470 nm) e vermelhos (660 nm) com intensidade de 50 µmol
m−2 s −1 por 10 dias, e alterações nos níveis de expressão de genes biossintéticos de
carotenóides foram determinados em intervalos de dois dias. Os níveis de expressão de
FtPSY, FtLCYB, FtLCYe, FtCHXB, FtCHXE e FtZEP foram notavelmente maiores em
brotos cultivados sob LEDs brancos do que naqueles sob LEDs azuis e vermelhos,
particularmente aos 8 DAS (dias após a semeadura). O tratamento com LED vermelho
reduziu os níveis de mRNA de FtLCYe e FtCHXB durante o desenvolvimento do broto
(Fig. 10.2). No entanto, não houve diferença significativa nos níveis de expressão dos
genes sob os tratamentos LED branco, azul e vermelho de 2 a 6 DAS. A produção
máxima de carotenóides totais foi observada aos 10 DAS sob LEDs brancos.

O LED azul regulou o acúmulo diferencial de vários carotenóides, e sua expressão de

genes relacionada foi estudada por Zhang et al. (2015) nos sacos de suco de duas
variedades cítricas, tangerina Satsuma e laranja Valência. Os sacos de suco de duas
variedades cítricas foram expostos em LEDs azuis durante quatro semanas em duas
intensidades diferentes, viz. 50 µmol m−2 s −1 (50B) e 100 µmol m−2 s −1 (100B).

Na tangerina Satsuma, a exposição à luz azul durante quatro semanas na intensidade de

100B induziu o acúmulo de carotenóides, especialmente b-criptoxantina. Em contraste,
descobriu-se que a irradiação de LED azul a 50B aumenta o conteúdo de toda
transviolaxantina e 9-cis-violaxantina. A regulação positiva dos genes biossintéticos de
carotenóides (CitPSY, CitPDS, CitZDS, CitLCYb1, CitLCYb2 e CitCHYb) abaixo de
100B levou ao aumento do conteúdo de b criptoxantina na tangerina Satsuma (Fig.
10.2), enquanto em Valência o tratamento com laranja 50B foi eficaz para induzindo o
acúmulo de carotenóides com níveis semelhantes de expressão gênica. Um aumento na
expressão dos genes CitPSY, CitPDS, CitZDS, CitLCYb2 e CitCHYb na quarta semana
da laranja Valência cultivada foi bem correlacionado com o acúmulo de todas as trans
violaxantina e 9-cis-violaxantina. Além disso, o aumento da intensidade da luz azul de
50B para 100B alterou a proporção de b, carotenóides e b-carotenoides em ambas as
espécies cítricas. As descobertas sugerem o papel estimulador do tratamento com 100B
na mudança da via do ramo b, b para o ramo b,. Concluindo, o estudo de Zhang et al.
(2015) sugere o papel diferencial da intensidade da luz azul no mecanismo regulador do
acúmulo de carotenóides.

Os efeitos da luz LED vermelha isoladamente ou em combinação com etileno no

acúmulo de carotenóides e na expressão gênica relacionada também foram estudados no
flavedo de frutas cítricas (Ma et al. 2015). O tratamento com LED vermelho regulou
positivamente a expressão dos genes citPSY, citCRTISO, citLCYb2, citLCYe e citVDE
(Fig. 10.2). No entanto, a combinação de luz LED vermelha e tratamento com etileno
aumenta a expressão de citPSY, citPDS, citZDS, citCRTISO, citLCYb1, citLCYb2,
citLCye, citCHYb e citZEP, o que finalmente levou ao acúmulo de b-criptoxantina, toda
transviolaxantina e luteína . Com o tratamento apenas com etileno, os conteúdos de
luteína, todas as transviolaxantinas e 9-cis-violaxantina diminuíram. O tratamento com
etileno regulou negativamente a expressão de citLCYe, que foi associada à diminuição
da luteína. O efeito negativo do etileno no acúmulo de luteína foi contornado pela
irradiação com LED vermelho. Estes resultados sugerem o papel potencial do
tratamento com LED vermelho, juntamente com a aplicação pós-colheita de etileno, na
melhoria do valor nutricional das frutas cítricas.
Expressão gênica induzida por LED na via biossintética de carotenóides. Diferentes
bandas de onda de LEDs são marcadas com suas respectivas cores. A variação na
largura da banda indica a extensão do nível de expressão genética. A mancha verde
indica tratamento com etileno juntamente com exposição ao LED vermelho

10.2.3 Regulação da expressão gênica envolvida na biossíntese de flavonóides por

iluminação LED

As antocianinas, os pigmentos solúveis em água, são membros do grupo dos

flavonóides. Uma riqueza de informações atribui vários papéis biológicos às
antocianinas. Muitos deles estão associados a respostas ao estresse, sinais defensivos
aposemáticos contra herbivoria, proteção de compostos de defesa fotolábeis como a
tiarrubina, proteção contra danos fotooxidativos, proteção contra radiação ultravioleta,
atração de predadores para dispersão de sementes e eliminação de radicais livres. (Long
et al. 1994; Page e Towers 2002; Gould 2004; Takahama 2004). Além disso, as
antocianinas têm uma ampla gama de efeitos benéficos na saúde humana, incluindo:
benefícios antimicrobianos, antiinflamatórios, antivirais, anticancerígenos e
neuroprotetores (Bitsch et al. 2004; Jing et al. 2008; De Pascual-Teresa e Sanchez-
Ballesta 2008 ). A cor brilhante, a alta solubilidade em água e as valiosas propriedades
biológicas fazem das antocianinas um dos pigmentos naturais com maior potencial, que
pode substituir os corantes sintéticos em diferentes tipos de alimentos (Camire et al.
2002).

O acúmulo de antocianinas, a identificação de flavonóides e a expressão gênica

relacionada sob iluminação LED têm sido objeto de interesse de pesquisa nos últimos
anos (Kondo et al. 2014; Rodyoung et al. 2016). Foi demonstrado que a luz pode afetar
a expressão genética de enzimas-chave envolvidas na biossíntese de flavonóides e no
conteúdo de antocianinas. Os flavonóides são sintetizados pela via fenilpropanóide, na
qual a fenil amônia liase (PAL) catalisa a primeira reação (Chang et al. 2009). As outras
principais enzimas intermediárias na biossíntese de flavonóides são chalcona sintase
(CHS), flavanona-3-hidroxilase (F3H), diidroflavonol redutase (DFR), antocianidina
sintase (ANS) e antocianidina redutase (ANR). Uma estreita relação entre o
metabolismo do ABA e a síntese de antocianinas foi encontrada em frutos de maçãs,
uvas e cerejas doces no pintor (Wheeler et al. 1998; Kobayashi 2009). Kondo et al.
(2014) examinaram os efeitos da irradiação LED azul e vermelha no metabolismo do
ácido abscísico e na síntese de antocianinas em uvas. As concentrações endógenas de
ABA foram maiores na casca de uva tratada com LED vermelho (660 nm) do que
aquelas na pele de controle tratada com LED azul (450 nm) ou não tratada.
Simultaneamente, a irradiação com LED vermelho (50 µmol m − 2 s −1 ) aumenta a
expressão de 9-cis epoxicarotenóide dioxigenase (VvNCED1) e ABA 8′-hidroxilase
(VvCYP707A1), enzimas a montante na via de síntese de ABA. Em contraste, as
concentrações endógenas de ABA foram mais baixas nas bagas tratadas com LED azul,
que tinham concentrações mais elevadas de antocianina do que as bagas tratadas com
LED vermelho (Kondo et al. 2014). Os resultados não conseguiram estabelecer uma
relação direta entre as concentrações endógenas de ABA e a síntese de antocianinas e
sugerem o possível envolvimento de outro fator que pode regular mais a biossíntese de
antocianinas do que o ABA endógeno. As expressões de VlMYBA1-2 e VvUFGT
foram aumentadas nos tratamentos com LED vermelho e azul. No entanto, a expressão
destes genes não se correlacionou com as concentrações de antocianinas. Assim, a
expressão genética relacionada ao myb pode não regular o acúmulo de antocianinas na
casca da uva. O padrão de expressão de VvUFGT no pintor indica sua influência na
síntese de antocianinas.
Os efeitos dos díodos emissores de luz na síntese de ABA e nas concentrações de
antocianinas também foram estudados em vinhas em duas épocas diferentes (Rodyoung
et al. 2016). A concentração endógena de ABA varia com as estações de cultivo, bem
como com os tratamentos LED. A irradiação com LED azul durante o início da cultura
de aquecimento aumentou as concentrações de ABA, enquanto o aumento do conteúdo
de ABA foi observado sob LED vermelho na estação de crescimento normal. Os genes
VvNCED1 e VvCYP707A1 altamente expressos em cada tratamento (LED vermelho
ou azul) no pintor, independentemente da estação de crescimento. Em ambas as
estações, as concentrações de antocianinas foram mais altas no tratamento com LED
azul, seguido pelo tratamento com LED vermelho, e as expressões de VlMYBA1-2,
VlMYBA2 e VvUFGT coincidiram com as concentrações de antocianinas (Rodyoung et
al. 2016). Em geral, estudos em uvas sugerem o papel promotor da irradiação LED azul
no acúmulo de antocianinas. A influência do LED azul na síntese de antocianinas
também foi demonstrada em morangos, mas através de um FaPHOT2 de fototropina 2
(Kadomura-Ishikawa et al. 2013).

O acúmulo de compostos fenilpropanóides juntamente com os níveis de expressão

gênica para as principais enzimas sob iluminação LED foram estudados em brotos de
trigo sarraceno (F. tataricum) (Thwe et al. 2014). Os brotos foram expostos sob
diferentes LEDs com bandas de onda vermelha (660 nm), azul (450 nm) e branca (380
nm). Os níveis transcritos dos principais genes fenilpropanóides foram estudados 2, 4,
6, 8 e 10 dias após a exposição ao LED. Os níveis de expressão para todos os genes
atingiram o pico dois dias após a exposição ao LED. Porém, foi observada variabilidade
nos níveis de expressão dos genes envolvidos na via dos flavonóides entre os
tratamentos. Níveis de expressão mais elevados de FtPAL e FtF3′H foram observados
em brotos cultivados sob LEDs azuis e brancos do que em brotos tratados com LED
vermelho (Fig. 10.3). Os níveis de expressão dos genes FtC4H, FtCHI, FtFLS-2 e
FtANS foram maiores sob LED azul do que sob exposição a LED vermelho e branco
(Fig. 10.3). Comparado à exposição ao LED azul e vermelho, o LED branco aumenta a
expressão do FtDFR. No geral, os brotos cultivados sob LEDs azuis e brancos tiveram
números de transcritos maiores do que os brotos tratados com LED vermelho (Thwe et
al. 2014). O estudo recomendou o uso de LED azul para aumentar o acúmulo de
antocianinas nos brotos de trigo sarraceno tartário.

10.2.4 Efeitos do LED na expressão gênica associada ao metabolismo do ascorbato

O ascorbato (AsA), um antioxidante forte e ativo, desempenha um papel importante na
saúde humana, prevenindo diferentes doenças associadas ao tecido conjuntivo (por
exemplo, escorbuto). Também atua como antioxidante, removendo radicais livres que
podem induzir câncer e senescência (Iqbal et al. 2009). O AsA tem influências
benéficas em vários processos fisiológicos das plantas. Regula a expansão e divisão
celular, controla o início da senescência e desempenha um papel importante na defesa
das plantas contra o estresse mediado por espécies reativas de oxigênio (ROS)
(Smirnoff 1996; Mittler 2002). AsA também pode modular o crescimento das plantas
através da expressão gênica mediada por fitohormônios (Pastori et al. 2003).

Frutas e vegetais são as principais fontes de AsA na dieta humana. A senescência

durante o armazenamento pós-colheita diminui rapidamente o teor de AsA (Nishikawa
et al. 2003). Uma variedade de abordagens de manejo pós-colheita, como
armazenamento/embalagem em atmosfera controlada, tratamentos com produtos
químicos, citocininas e vapores de etileno, foram adotadas para retardar a senescência
pós-colheita (Sharma et al. 2009; Lee et al. 2012).

Nos últimos anos, foi demonstrado que a luz pode prolongar a vida útil e preservar a
qualidade nutricional, regulando o metabolismo do ascorbato de brócolis minimamente
processados (Zhan et al. 2012; Ma et al. 2014). Os efeitos da iluminação LED no
metabolismo do AsA e na senescência associada foram investigados em brócolis
(Brassica oleracea L. var. itálico) após a colheita (Ma et al. 2014). A exposição ao LED
vermelho (660 nm) não só atrasou a senescência, mas também retardou a redução do
conteúdo de AsA. Em contraste, o processo de senescência não foi afetado pelo
tratamento com luz LED azul e o conteúdo de AsA foi semelhante ao do controle.
Apesar do efeito positivo da exposição ao LED vermelho em retardar a senescência e
manter o valor nutricional, não foi recomendado para armazenamento pós-colheita
devido à sua restrição prática. Para resolver o problema, Ma et al. (2014) projetaram um
tipo de luminária LED branca modificada (430–730 nm), na qual a proporção de luz
vermelha foi aumentada, enquanto a proporção de luz azul foi diminuída. Sob luz LED
branca modificada (50 µmol m−2 s −1 ), o teor de AsA foi superior ao controle no
primeiro e segundo dias de colheita. Nos brócolis, o metabolismo do AsA é controlado
pela regulação de genes que estão envolvidos na síntese, degradação e regeneração. Os
genes relacionados ao metabolismo do AsA foram clonados e bem caracterizados
(Nishikawa et al. 2003; Ma et al. 2012). A supressão tardia da redução de AsA no
primeiro e segundo dias após a colheita de brócolis, sob LED branco, foi atribuída à
regulação positiva dos genes biossintéticos de AsA (BO VTC2 e BOGLDH) e genes de
regeneração de AsA (BO-MDAR1 e BO- MDAR2) (Fig. 10.4; Ma et al. 2014). A
expressão do gene de degradação de AsA BO-APX1 foi regulada positivamente no
primeiro e segundo dia de colheita, enquanto BO-APX2 e BO-sAPX foram reguladas
negativamente apenas no primeiro dia. Os níveis de expressão destes genes não foram
bem correlacionados com o conteúdo de AsA. Assim, o seu papel na supressão da
redução de AsA em resposta ao tratamento com luz LED branca modificada foi
descartado e o mesmo aconteceu com a expressão do gene de regeneração de AsA BO-
DHAR.

Fig. 10.3 Influência da iluminação LED na via biossintética dos flavonóides. Diferentes
bandas de onda de LEDs são marcadas com suas respectivas cores. A variação na
largura da banda indica a extensão do nível de expressão genética. O nível inalterado de
expressão gênica, comparado ao controle aos 99 dias de plena floração, é representado
por um círculo cruzado
10.2.5 Defesa Induzida por LED e Transcrição de Genes de Defesa
O papel regulador da luz na resistência às doenças das plantas, além de muitos aspectos
do crescimento e desenvolvimento das plantas, foi relatado em uma ampla variedade de
espécies de plantas (Islam et al. 1998; Genoud et al. 2002; Khanam et al. 2005; Islam et
al. 2005; Islam et al. 2008; Kudo et al. 2011). Foi sugerido que as vias de sinalização
induzidas pela luz interagem com as vias de defesa das plantas, e existe uma conversa
cruzada entre a sinalização do fitocromo mediada pela luz, o desenvolvimento de
resposta de hipersensibilidade e a resistência adquirida sistemática (Genoud et al. 2002;
Griebel e Zeier 2008). Com o avanço da tecnologia LED, há um interesse crescente no
uso desta fonte de luz para o desenvolvimento de estratégias ecológicas para controlar o
desenvolvimento de doenças em plantas, em vez de usar fungicidas químicos
ambientalmente perigosos. Wang et al (2010) estudaram os efeitos da iluminação LED
monocromática na resistência ao oídio (Sphaerotheca fuliginea) em pepino (Cucumis
sativus). Os resultados mostraram que a incidência de oídio foi significativamente
reduzida pelo tratamento com LED vermelho (628,6 nm), enquanto os tratamentos
monocromáticos de branco; roxo (394,6 nm); azul (452,5nm); verde (522,5nm); e LEDs
amarelos (594,5 nm) aumentaram a incidência da doença. A exposição à luz vermelha
regulou positivamente os níveis de expressão dos genes PR-1 (um marcador molecular
da via SAR dependente do ácido salicílico), WRKY30 e WRKY6 (fator de transcrição
que codifica genes envolvidos na SAR), enquanto outras fontes de luz LED regularam
negativamente a expressão desses genes (Wang et al. 2010). Plantas cultivadas sob LED
roxo e azul apresentaram maior incidência de doenças e níveis mais elevados de
transcritos para CS, CAD e PAL do que aquelas sob LED vermelho. Os efeitos da luz
vermelha para induzir resistência a doenças foram relatados em vários estudos (Islam et
al. 2002; Rahman et al. 2003; Islam et al. 2008). O padrão de expressão indica que uma
barreira física melhorada ou acumulação de flavonóides e fenólicos totais pode não
desempenhar um papel decisivo na resistência induzida pela luz ao oídio no pepino. A
resistência aprimorada sob LED vermelho está correlacionada com a defesa mediada
por SA (Wang et al. 2010). O uso de LEDs para reduzir a incidência de incêndios
florestais causados por Pseudomonas syringae pv. tabaci foi demonstrado em Nicotiana
benthamiana (Ahn et al. 2013). O desenvolvimento de lesões de doenças nas folhas foi
reduzido em plantas irradiadas com luz roxa (380 nm), azul (440 nm) e vermelha (660
nm), em comparação com plantas expostas sob luz fluorescente. A irradiação LED
induziu a expressão de genes relacionados à defesa, como CHS, GST, TLP, PR Q,
PINII e TLP. No entanto, o efeito máximo de inibição foi obtido com tratamento com
luz azul e vermelha. A regulação positiva de PR Q, PINII e TLP sob LED antes da
infecção pelo patógeno sugere seu papel na inibição dos sintomas da doença. Além
disso, o aumento dos níveis de expressão de GST e TLP em plantas expostas à
irradiação LED inibiram o crescimento de P. syringae e suprimiu a incidência de
desenvolvimento de lesões (Ahn et al. 2013).

10.3 Conclusões

Os dados atualmente disponíveis revelam que os sistemas de iluminação LED

personalizados são capazes de regular vários genes valiosos de vias metabólicas, genes
de fotorreceptores e genes relacionados à defesa. Esse potencial do sistema de
iluminação LED abre novos caminhos para aumentar a produção de metabólitos
secundários importantes e para reduzir a incidência de doenças ou cargas de patógenos
em certas culturas, afetando a expressão gênica de vias celulares. A maioria dos estudos
de expressão gênica induzida por LED foram realizados por PCR quantitativo em tempo
real, utilizando diferentes bandas de onda de LEDs, principalmente azuis, vermelhos e
brancos, sozinhos ou em combinação. Os LEDs com bandas de ondas selecionadas
podem estimular a floração precoce ou uniforme em plantas ornamentais sazonais ou
gerar culturas específicas com níveis aumentados de vitaminas ou minerais, regulando
fatores genéticos. No entanto, outros fatores também estão envolvidos na expressão
gênica metabólica regulada pelo LED. No entanto, nenhum dos estudos examinou a
expressão genética limitante da taxa induzida por LED ou qualquer inibição de feedback
dos genes da via metabólica. É viável desencadear uma cascata de respostas positivas
através da irradiação de banda estreita de LEDs em determinados pontos-chave do ciclo
de vida da planta. As luminárias LED eficientes que estão sendo desenvolvidas
juntamente com os avanços em materiais semicondutores e melhorias no design de
emissores com alta eficácia luminosa trouxeram a capacidade de desenvolver sistemas
de iluminação com eficiência energética. Juntamente com avanços no controle genético
molecular do crescimento e desenvolvimento das plantas, um esforço coordenado no
projeto baseado em LED de sistemas de iluminação específicos para cada espécie pode
ajudar a maximizar a produtividade das plantas, aumentar a qualidade nutricional de
frutas e vegetais e melhorar os atributos farmacêuticos de plantas medicinais, limitando
ao mesmo tempo o custo de produção e os impactos ambientais do cultivo.