Embriologia e histofisiologia do tecido sseo: reviso de literatura e bases histofisiolgicas das principais doenas sseas metablicas

Embriology and histophisiology of bone: literature review and histophisiologic basis of the metabolic bone diseases
Ado Felipe de Castro Junior* Bruno Koplewski de Castro* Limiro Luiz da Silveira Neto* Natanael Loureno Mota* Beatriz Julio V. Aarestrup**
MOTA, N. L.; CASTRO JNIOR, A. F.; CASTRO, B. K.; SILVEIRA NETO, L. L.; AARESTRup, B. J. V. Embriologia e histofisiologia do tecido sseo: reviso de literatura e bases histofisiolgiaos das principais doenas sseas metablicas. Boletim do Centro de Biologia da Reproduo, Jui de Fora, v. , n. , 1/, p. -3, 008.

Resumo: apresentada reviso de literatura envolvendo origem embrionria e histofisiologia do tecido sseo, bem como as principais modificaes fisiopatolgicas sofridas por este tecido nas principais doenas metablicas. Palavras-chave: Tecido sseo. Histofisiologia ssea. Embriologia ssea. Doenas sseas metablicas.

EMBRioLogiA E hiStoFiSioLogiA do tECido SSEo

Os ossos constituem aproximadamente 0% do peso corporal, formando estruturalmente o esqueleto. Funcionalmente, esto associados ao suporte de tecidos moles, proteo anatmica do sistema nervoso central e caixa torxica, contm o tecido mielide, armaena ons e, associados aos msculos estriados compem o sistema msculo-esqueltico, participando da coordenao de movimentos voluntrios e ampliao da fora muscular.

As clulas do tecido sseo provm da clula indiferenciada do mesnquima embrionrio capa de originar tambm os demais tecidos mesenquimais conjuntivo propriamente dito, cartilaginoso, adiposo, muscular, mucoso e hematopoitico. As clulas de origem mesenquimal, j comprometidas geneticamente com suas linhagens, so chamadas de clulas-fonte ou auto-regenerativas e permanecem no organismo aps o nascimento como nichos celulares. No tecido sseo, estas clulas so denominadas clulas osteoprogenitoras e so estimuladas proliferao e diferenciao quando as clulas maduras chegam ao trmino de sua vida-til ou quando estimuladas bioquimicamente

* **

Acadmicos. Faculdade de Medicina FAME-uNIpAC/Jui de Fora/MG. Doutora em patologia uFF-RJ. Faculdade de Odontologia uFJF; Centro de Biologia da Reproduo.

Bol. Cent. Biol. Reprod., Jui de Fora. v. , n. 1/, p. -3, jan./de., 008 , na consolidao de fissuras ou fraturas ou em condies patolgicas como neoplasias ou hiperplasias sseas reacionais (Wu, 00). Como os demais conjuntivos, o tecido sseo de maneira mais fcil e didtica, estudado histologicamente segundo a morfologia de suas clulas e particularidades do material extracelular. Os componentes celulares provm de duas linhagens, ambas mesenquimais a clula osteoprogenitora, que origina osteoblastos e osteoclastos. Diretamente partir das clulas mesenquimais indiferenciadas se originam as clulas osteoprogenitoras, chamadas clulas tronco do adulto ou clulas-fonte, como citadas acima, que persistem como clulas sseas de revestimento no peristeo e, segundo alguns autores no endsteo. As clulas osteoprogenitoras surgem, morfologicamente, partir da contrao dos prolongamentos citoplasmticos da clula mesenquimal e diminuio de volume total celular; geneticamente, nesta fase, ocorre a transcrio de genes especficos, como o CBFA1 (expresso induida fisiologicamente e sinteticamente pela protena morfogentica osteoindutora-) e RUNx-2, sendo este o primeiro passo para que a clula mesenquimal indiferenciada seja, futuramente, uma clula osteoprogenitora e no qualquer outra da linhagem mesenquimal, como fibroblastos, condroblastos ou lipoblastos. Ainda, fatores de crescimento como a leptina, o IGF (Fator Semelhante Insulina), o TGF- (Fator de Transformao - e o pDGF (Fator Derivado de plaquetas) participam, isolados ou combinados, do estmulo para diferenciao das clulas mesenquimais em clulas osteoprogenitoras e destas para osteoblastos ativos ou em repouso (clulas sseas de revestimento) (DATTA, 008; JuNQuEIRA; CARNEIRO, 008). Tambm partir das clulas indiferenciadas do mesnquima, surgem os hemocitoblastos. Estas clulas se originam partir da formao de aglomerados celulares no saco vitelino chamados Ilhotas de Wolf, onde as clulas situadas na poro mais externa do origem s clulas epiteliais de revestimento pavimentosas simples formadoras do endotlio vascular, enquanto que aquelas situadas na rea central do origem aos hemocitoblastos, formadores de todos os elementos celulares do sangue, dentre os quais destacamos neste contexto os moncitos, responsveis pelo sistema fagocitrio mononuclear (SFM). partir do surgimento dos primeiros osteoblastos, tem incio a atividade de sntese proteica, a saber: osteide composto principalmente por feixes de colgeno Tipo I (formando a base estrutural do tecido), e um conjunto de protenas no-colagenosas osteonectina (possibilita a juno dos osteoblastos interface ssea), osteocalcina (quimiottica para ons clcio e fsforo sricos, com expresso controlada pela forma ativa da vitamina D), sialoprotena e osteopontina (ativam a mineraliao e inibem o metabolismo proteico), GM-CSF (indu a diferenciao das clulas indiferenciadas na medula ssea em clulas comprometidas geneticamente com a linhagem granuloctica ou mieloctica, originando o SFM), RANK e RANKr (possibilitam a ativao da osteoclastognese partir das clulas monocticas e estimulam o amadurecimento osteoclstico, bem como inibem a apoptose deste tipo celular), osteoprotegerina (controle antagnico de RANK), alm das protenas morfogenticas osteoindutoras (BMps) (TAKAHASHI, 1999). percebemos, a partir da observao da produo osteoblstica, que esta clula exerce controle metablico no tecido como um todo, controlando a mineraliao da matri, assim como a diferenciao, amadurecimento e atividade osteoclstica o que de grande valia na renovao tecidual fisiolgica e na osteognese embrionria ou associada a consolidao de fraturas. A interao destas duas clulas parenquimatosas osteoblastos e osteoclastos, depende tambm dos ostecitos osteoblastos em estgio final de amadurecimento, sem atividade sinttica, mas fundamental para a captao inica srica e remoo de catablitos teciduais. O aspecto microscpico, as funes e a localiao na matri das clulas sseas encontram-se esquematiadas no Quadro 1. A interao morfofuncional entre as clulas sseas possibilita a renovao tecidual e a manuteno da normocalcemia. Tal interao origina as atividades de modelamento e remodelamento, controladas por fatores intracelulares (desencadeados por osteoblastos), por hormnios e por estmulos locais extrnsecos, como aplicao de fora mecnica fisiolgica (KATAGIRI; TAKAHASHI, 00). O modelamento a atividade de deposio e reabsoro inicial que desencadeia bioquimicamente uma reao contnua, ou seja, ocorre primariamente no desenvolvimento do esqueleto. A ativao neste momento biolgico independente da formao / reaboro prvia. por outro lado, o remodelamento a modificao e/ou reestruturao de osso j existente em um fenmeno combinado, possibilitando a renovao do osso j formado. A durao dos ciclos de renovao chamada de sigma e em humanos tem

Bol. Cent. Biol. Reprod., Jui de Fora. v. , n. 1/, p. -3, jan./de., 008 ,
Quadro i

TIpO CELuLAR

MORFOLOGIA Em atividade apresentam ncleos intensamente basoflicos, arredondados e tendncia ao formato cbico ou cilndrico; em repouso assumem morfologia achatada.

FuNO Clula jovem, proveniente da linhagem osteoprogenitora, responsvel pela sntese proteica que determina a estrutura da matri, a ativao da captao inica e a renovao tecidual via controle do osteoclasto.

LOCALIZAO Formam monocamada na superfcie da matri, onde podemos observar nas reas de clulas ativas pequena faixa de deposio de osteide ligeiramente menos eosinoflica do que a matri extracelular madura.

OSTEOBLASTO

OSTECITO

Ncleos basoflicos com formato oval e finssimos prolongamentos celulares que tornam o aspecto da clula estrelada.

Clula madura, proveniente da linhagem osteoprogenitora, captao e manuteno inica atravs de seus numerosos prolongamentos citoplasticos

Localiam-se dentro de lacunas no interior da matri extracelular mineraliada, por onde seus prolongamentos percorrem inmeros canalculos que permitem a intercomunicao entre estas clulas, bem como com o sangue. Localiam-se na superfcie da matri extracelular mineraliada, geralmente prximos s reas de osteoblastos inativos, em depresses correspondentes area de reabsoro, denominadas lacunas de Howship.

OSTEOCLASTO

Clula gigante multinucleada (sinscio), com citoplasma volumoso intensamente eosinoflico e formato irregular.

Realia reabsoro da matri orgnica via produo de colagenases e catepsinas e da poro mineral, via produo de cidos (pH prximo a 3,5), com reaproveitamento das unidades quebradas. Atravs do reaproveitamento inico, controla a normocalcemia.

Quadro I: Caracteriao das clulas do parnquima seo. Fonte: Autores.

a durao de 1 semanas e envolve as seguintes fases (MISCH, 00). Ativao perodo associado reabsoro osteoclstica com formao de um cone cortante de 30m/dia h a dias; Repouso mecanismos de sntese e reabsoro quase ausentes; 10 a 180 m/dia Quiescncia perodo de maior atividade osteoctica para manuteno e troca inica 1 a semanas Formao intensa atividade osteoblstica 13 semanas A interao celular possibilitando o metabolismo sseo normal, econtra-se esquematiado na Figura :

Figura : Interao morfofisiolgica entre as clulas do tecido sseo. Osteoblastos (seta dupla), ostecitos (seta), osteoclastos (seta longa), canais vasculares (asterisco e matri mineraliada (pontilhado). Colorao HE. Aumento original da micrografia 40X. Fonte: dos autores.

As propriedades do tecido sseo tambm dependem das caractersticas da matri extracelular, composta por poro orgnica (35% composta por protenas colagenosas das quais 90% so representadas por colgeno Tipo I e aproximadamente 10% por proteoglicanas, e protenas no colagenosas osteoblsticas tpicas, como especificado anteriormente). O componente proteico da matri responsvel pela resistncia a fratura, compresso e tenso, conferindo certa maleabilidade ao tecido sem que o mesmo perca clinicamente sua durea. Os componentes inorgnicos, responsveis pela resistncia a deformao, constituem 65% da matri extracelular e apresentam fosfato de clcio organiados em cristais de hidroxiapatita, alm de magnsio, bicarbonato, sdio e potssio, em menor quantidade. Estes se associam a protenas estruturais e se encontram distribudos entre as fibras de colgeno formando, assim, feixes impregnados por partculas inicas. Tais conhecimentos se tornam importantes dada as possibilidades de manipulao in vitro e in vivo do tecido sseo, a partir dos princpios da engenharia de tecidos. A engenharia de tecidos ou bioengenharia, foi definida oficialmente no 4. Congresso de Osseointegrao ApCD/004 como sendo uma conjunto de atitudes teraputicas que visam a reparao de tecidos/rgos uti-

Bol. Cent. Biol. Reprod., Jui de Fora. v. , n. 1/, p. -3, jan./de., 008 , liando componentes teciduais, mediadores qumicos e biolgicos, matries biodegradveis e clulas em cultura. As primeiras publicaes sobre possveis estratgias de regenerao ssea foram publicadas em 190 e em meados dos anos 90 surgiram os primeiros enxertos sseos clinicamente viveis (autgenos, algenos e xengenos). Atualmente, so manipuladas amostras de origem celular (parenquimatosas autlogas do osso ou da medula ssea, bem como elementos de reconstituio da matri extracelular (cido poligliclico, colgenos, fibrina, osso inorgnico, politetrafluoroetileno, fosfato de clcio) e agentes mitgenos (fatores de crescimento artificiais ou isolados, como a BMp-) (BAuM; MOONEY, 000). Tal disponibilidade abre um leque de opes atuais e futuras na reposio ou aumento do volume sseo local bem como ganho de massa ssea total atravs de controle endcrino e da manipulao gentica (BAuM; MOONEY, 000). reabsortiva normal, ocorrendo associada ao sedentarismo e idade avanada; Secundria: ocorre em consequencia de condio patolgica anterior, primria, como por exemplo: hipercortisolismo (endgeno ou exgeno); hiperparatireoidismo, hipertireoidismo, hipotireoidismo, neoplasias do sistema hematopotico, cirrose heptica e biliar, doenas inflamatrias intestinais, ps-gastrectomia, doenas reumticas inflamatrias (IKEO, 00; INAGAKI, 00). Quanto associao do metabolismo do tecido sseo e a obesidade, destacam-se atualmente estudos envolvendo a leptina e enolase-. A leptina associada por diversos autores ao gene da obesidade que controla a densidade dos ossos. Sua produo ocorre nos adipcitos uniloculares e a maior concentrao de seus receptores encontra-se no hipotlamo e o mediador de ao perifrica foi identificado como pertencente ao sistema nervoso autnomo simptico, dados estes que possibilitam conexo entre leptinacrebro-osso e interao entre o sistema nervoso central e o perifrico na ao remodeladora ssea (TAKEDA, 005; TSENG, 008; LEE et al, 008). Conforme trabalho de Lee e colaboradores (008), os efeitos da leptina sobre o controle da massa ssea e a influncia dos tecidos adiposo e nervoso no remodelamento indiscutvel. porm, seus mecanismos de ao merecem mais pesquisas, incluindo sua ao diversa no osso trabeculado e no cortical, influencia de outros fatores endcrinos e neuroendcrinos e polimorfismos genticos individuais no receptor para leptina A enolase (ENO) uma isoenima associada principalmente a neurnios e, em menor expresso, em clulas endcrinas difusas (ApuD) localiadas no trato digestivo e respiratrio. Segundo Ishiora e colaboradores (1984), o papel da ENO no est perfeitamente esclarecido, mas funcionalmente vem sendo apontada como uma das possveis vias de interao entre sistema nervoso central tecido adiposo tecido sseo, assim como a leptina. Segundo Rowe (008), camundongos transgnicos apresentando super expresso do gene DeltaFosB e do fator de transcrio AP-1, controlados pela ENO apresentaram aumento na densidade ssea e diminuio do ndice de gordura. Devido a seu possve potencial anorexgeno via controle do apetite e aumento da liplise, associado a aumento da densidade ssea, como demonstrado em diversos estudos experimentais in vivo, o controle de DeltaFosB um alvo potencial na terapia gentica contra osteoporose, obesidade e controle da diabetes.

BASES hiStoFiSioLgiCAS dAS PRiNCiPAiS ALtERAES SSEAS MEtABLiCAS

A obesidade, a osteoporose e a diabetes so doenas, dentre vrias, que recebem grande destaque como srios problemas de sade pblica devido sua alta incidncia e grande morbidade e mortalidade. Autores tm estabelecido interao entre estas condies e o metabolismo sseo. A manuteno da massa ssea atravs do processo de remodelamento via controle endcrino tem sido alvo de diversos estudos. A osteoporose uma doena esqueltica sistmica caracteriada por baixa densidade de massa ssea total com deteriorao da microarquitetura do tecido levando a um aumento da fragilidade ssea e risco de fraturas (CONSENSUS DEVELOPMENT CONFERENCE, 1991). CONFERENCE De acordo com sua fisiopatologia a osteoporose pode ser: primria Tipo I considerada de alto turn over, onde h aumento do recrutamento de osteoclastos na medula ssea, como observado no perodo ps-menopausa, por exemplo, onde citocinas como IL-1, IL-6, TNF, GSF-M, associadas osteoclastognese, encontram-se aumentadas; primria Tipo de baixo turn over, onde osteoblastos apresentam sua atividade de sntese proteica diminuda, embora osteoclastos mantenham atividade

30

Bol. Cent. Biol. Reprod., Jui de Fora. v. , n. 1/, p. -3, jan./de., 008 , A diabetes mellitus (DM), desordem metablica no metabolismo dos carbohidratos, causada principalmente por produo diminuda de insulina ou resistncia perifrica insulina, tem como consequencia direta a hiperglicemia. Segundo sua etiopatogenia temos a DM insulino-dependente, Tipo I ou juvenil ( a 10% dos pacientes) apresentando hiperglicemia intensa e constante, e a DM no insulino-dependente, Tipo II ou do adulto, com produo relativa de insulina endgena e necessidade de uso de insulina ocasional, acomete em sua maioria pacientes adultos, idosos e obesos. Ambas as variedades possuem em comum a carter hereditrio e clinicamente esto associadas poliria levando polidipsia, devido inibio do hormnio anti-diurtico (ADH), polifagia e perda de peso, assim como microangiopatia e acmulos intracelulares de glicognio, que levam deficincia cicatricial, maior risco de infeces e reas focais e perifricas de isquemia (Real et al., 008). Especificamente em relao ao metabolismo sseo, vm sendo relatadas na literatura efeitos associados terapia anti-diabetes. A tiaolidinediona (TZD) promove diferenciao de lipoblastos partir de clulas tronco da medula ssea mesma origem de osteoclastos via clulas do SFM e de osteoblstos. In vitro foi observada inibio da diferenciao de osteoclastos sob influncia da TZD, porm no de osteoblastos. Os mecanismos pelos quais ocorre menor osteoclastognese sem associao a metabolismo osteoblstico proprocional ainda permanem desconhecidos (OKAZAKI, 000) Mais recentemente, Gray (008), relatou evidncias demonstrando potencialiao do risco de fraturas em pacientes com com diabetes Tipo devido ao uso da TZD, que pareceu diminuir a expresso de marcadores de formao ssea no remodelamento, mas no afetar a atividade de reabsoro. Ainda, ressaltamos a importante influncia da vitamina D sobre a manuteno e renovao da massa ssea. Esta interao dependente de diversos fatores como a influncia dos hormnios da tireide devido calcitonina, e da paratireide visto que o pTH estimula aumento da osteoclastognese e da ativao da reabsoro da matri ssea em situaes de hipocalcemia secundria. Ainda, o metabolismo geral do remodelamento e da mineraliao sseas afetado por distrbios gastro-intestinais e por nefropatias sistemas diretamente associados absoro de clcio, fosfato e magnsio adquiridos atravs da dieta e ao metabolismo de precursores sricos da vitamina D e formao de sua forma ativa que possibilita a captao inica srica para mineraliao da matri orgnica do osso. De acordo com Roberts (1991), a mineraliao normal do osteide produido pelos osteoblastos ocorre quando h, no mnimo, 800mg/dia de clcio disponveis para adultos jovens e pelo menos 1000mg / dia para idosos devido menor absoro intestinal. porm, tal absoro, mesmo que as quantidades de ons sricos disponveis estejam normais, s ocorre se associada a nveis normais da forma ativa da vitamina D (1,5 dihidroxilase) (KLEIN, 008). Ressaltamos neste trabalho, de forma sucinta, as principais correlaes entre a histofisiologia do tecido sseo e as principais doenas sseas metablicas ou condies metablicas que podem alterar o metabolismo deste tecido exemplificando como a fisiopatologia e a patognese modificam os parmetros de normalidade. Acreditamos que somente a partir destes conhecimentos, estratgias preventivas possam ser estabelecidas ou aperfeioadas, assim como novos tratamentos possam ser desenvolvidos.
MOTA, N. L.; CASTRO JNIOR, A. F.; CASTRO, B. K.; SILVEIRA NETO, L. L.; AARESTRup, B. J. V. Embriology and histophisiology of bone: literature review and histophisiologic basis of the metabolic bone diseases. Boletim do Centro de Biologia da Reproduo. universidade Federal de Jui de Fora, v. , p. -3, 008.

Abstract: The authors presented a literature review of embriology and histophisiology of the bone tissue and basis of metabolic bone diseases. Keywords: Bone tissue. Histology. Embriology. Metabolic bone diseases.

AgRAdECiMENto
Rede mineira de bioterismo. 84/05 FApEMIG. Rede mineira TOXIFAR. 8/05 FApEMIG.

REFERNCiAS
BAuM, B. J.; MOONEY, D. J. The impact of tissue engineering on dentistry. Journal of the American dental Association, Chicago, v. 131, n. 3, p. 309-18, 000. CONSENSuS DEVELOpMENT CONFERENCE. Am. J. Med., v. 90, p. 10, 1991.

31

Bol. Cent. Biol. Reprod., Jui de Fora. v. , n. 1/, p. -3, jan./de., 008 , DATTA, H. K. The cell biology of bone metabolism. Journal of Clinical Pathology, London, v. 61, n. 5, p. 5-8, 008. GREY, A. Skeletal consequences of thiaolidinedione therapy. osteoporosis international, London, v. 19, n. , p. 19-3, 008. IKEO, T. Osteoporosis and oral biology. Clinical Calcium, Tokyo, v. 1, n. , p. 150, 00. INAGAKI, K. Oral osteoporosis: a review and its dental implications. Clinical Calcium, Tokyo, v. 1, n. , p. 15-63, 00. ISHIORA, N. Large scale preparation and cristalliation of neuron-specific enolase. Journal of Biochemistry, Tokyo, v. 95, p. 611-, 1984. JuNQuEIRA, L. C., CARNEIRO, J. histologia bsica 11ed. Rio de Janeiro. 008. Guanabara Koogan. KATAGIRI, T.; TAKAHASHI, N. Regulatory mechanisms of osteoblast and osteoclast differentiation. oral diseases, Houndmills, v. 8, n. 3, p. 14-59, 00. KLEIN, G. L. The interaction between burn injury and vitamin D metabolism and consequences for the patient. Current Clinical Pharmacology, Chicago, v. 3, n. 3, p. 04-10, 008. LEE, N. J. Leptin as an endocrine signal in bone. Curr. osteoporos. Rep., v. 6, n. , p. 6-6, 008. MISCH, C. E. Contemporary implant dentistry. 13 ed. New York. 00. Mosby-Elsevier. OKAZAKI, R. Skeletal effects of thiaolidinediones. Nippon Rinsho., v. 58, n. , p. 456-60, 000. REAL, C. et al. Endothelial progenitors in vascular repair and angiogenesis: how many are needed and what to do? Cardiovasc. hematol. disord. drug targets., v. 8, n. 3, p. 185-93, 008. ROBERTS, W. E. What are the risk factors of osteoporosis? Assessing bone health. J. Am. dent. Assoc., v. 1, n. , p. 59-61, 1991. ROWE, G. C. Increased energy expenditure and insulin sensitivity in the high bone mass DeltaFosB transgenic mice. Endocrinology. v. 3, n. 3, p. 04-10, 008. TAKAHASHI, N. A new member of tumor necrosis factor ligand family, ODF/OPGL/TRANCE/RANKL, regulates osteoclast differentiation and function. Biochem. Biophys. Res Commun., v. 4, n. 3, p. 44955, 1999. TAKEDA, S. Central control of bone remodeling. Biochem. Biophys. Res. Commun., v. 18, n. 3, p. 69-9, 005. TSENG, Y. H. New role of bone morphogenetic protein in brown adipogenesis and energy expenditure. Nature, v. 1, n. 0, p. 94-8, 008. Wu, Y. et al. Bone marrow-derived stem cells in wound healing: a review. Wound Repair Regen., v. 1, n. 15, p. 18-6, 00.