Centro universitário das américas - FAM

TÉCNICAS DE IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS

ANTI-ERITROCITÁRIOS

AUTORES

Amanda Sanches Carvalho¹

Carlos Israel Bernardo Marinho¹
Ivan Barbosa de Lima Junior¹
Jennyfer Victoria Moreira Muniz da Silva¹
Joana Pereira Macena¹
Maiara Cândida Alves da Silva¹

ORIENTADORES

Andréia Ramos de Jesus do Val²

Camila Accardo²

¹ Discente do curso biomedicina do centro universitário das américas

² Docente do curso biomedicina do centro universitário das américas

São Paulo
2023
 SUMÁRIO

RESUMO..........................................................................................................................3
INTRODUÇÃO...............................................................................................................4
OBJETIVOS....................................................................................................................5
MATERIAIS E MÉTODOS..........................................................................................5

DISCUSSÃO....................................................................................................................5
CONCLUSSÃO...............................................................................................................7
REFERÊNCIAS...............................................................................................................7

RESUMO
Os anticorpos anti-eritrocitários são produzidos contra epítopos presentes nas
superfícies das hemácias e são classificados como irregulares, quando aparecem no
plasma após sensibilização por gestação ou transfusão incompatíveis, também ditos
aloanticorpos, e como regulares, quando a sua presença não requer exposição prévia ao
antígeno eritrocitário, como acontece com os anticorpos naturais do sistema ABO. A
transfusão de sangue é uma medida terapêutica bastante utilizada na prática clínica, em
especial nos pacientes com doença falciforme, talassemias, leucemias, dentre outras
doenças hematológicas e visa melhorar a qualidade de vida dos indivíduos que dela
necessitam, reduzindo a morbidade e mortalidade dessas doenças. Entretanto, assim
como outras intervenções terapêuticas, pode levar a complicações como reações
hemolíticas, aloimunização, risco de transmissão de agentes infecciosos, dentre outras.
(Nathalia Caroline Lopes, 2019)
O objetivo do estudo e identificação de anticorpos irregulares (PAI) é garantir a
segurança das terapias sanguíneas, reduzir a taxa de aloimunização e oferecer a
possibilidade de identificação de fenótipos raros. O Teste de Anticorpos Irregulares
(PAI) é um exame realizado em laboratório onde o plasma do paciente é incubado com
reagentes de hemácias e, caso haja ligação antígeno-anticorpo, é adicionado soro de
Coombs, desta forma, é determinado que ocorreu uma imunização alogênica.
Palavras-chave: Coombs, anticorpo, transfusão

ABSTRATC
Anti-erythrocyte antibodies are produced against epitopes present on the
surfaces of red blood cells and are classified as irregular, when they appear in plasma
after sensitization due to incompatible pregnancy or transfusion, also known as
alloantibodies, and as regular, when their presence does not require prior exposure to
the antigen. erythrocyte, as happens with the natural antibodies of the ABO system.
Blood transfusion is a therapeutic measure widely used in clinical practice, especially in
patients with sickle cell disease, thalassemia, leukemia, among other hematological
diseases, and aims to improve the quality of life of individuals who need it, reducing
morbidity and mortality from these diseases. However, like other therapeutic
interventions, it can lead to complications such as hemolytic reactions,
alloimmunization, risk of transmission of infectious agents, among others.
The objective of studying and identifying irregular antibodies (IAT) is to
guarantee the safety of blood therapies, reduce the rate of alloimmunization and offer
the possibility of identifying rare phenotypes. The Irregular Antibody Test (IAT) is an
exam carried out in a laboratory where the patient's plasma is incubated with red blood
cell reagents and, if there is an antigen-antibody connection, Coombs serum is added, in
this way, it is determined that an allogeneic immunization has occurred.
Keywords: Coombs, antibody, transfusion

1. INTRODUÇÃO

Os anticorpos são glicoproteínas (Imunoglobulina – Ig) produzidas pelas células

B em uma forma ligada à membrana, funcionando como receptor de célula B (BCR)
para os Ag. A maneira mais simples e direta de os Ac protegerem o hospedeiro contra
agentes patogênicos ou seus produtos tóxicos é através da neutralização. (MURO, Luis
Fernando Ferreira e autores, 2009)
 A descoberta dos antígenos eritrocitários foi considerada um dos avanços mais
importantes nas pesquisas da área médica, na primeira metade do século XX. Desde que
o sistema ABO foi descoberto, em 1900, foram descritos mais de 250 antígenos
eritrocitários, organizados em sistemas, séries e coleções. Os anticorpos
antieritrocitários classificam-se em regulares e irregulares. Os primeiros se desenvolvem
naturalmente após o nascimento, como anti-A, anti-B e anti-AB, todos do sistema ABO.
Os irregulares (sistemas Rh, Kell, MNS, Lewis, Duffy, Kidd e outros) se desenvolvem
em decorrência de transfusões ou gestações incompatíveis, não sendo encontrados
normalmente. (PAULO ROBERTO, 2008). Existe uma grande diferença entre
anticorpos do sistema do grupo sanguíneo ABO e anticorpos irregulares, os anticorpos
irregulares são anticorpos produzidos contra antígenos eritrocitários, em razão de
exposição a um antígeno não próprio devido a gestação ou transfusão sanguínea.
O teste de Coombs Indireto tem seu princípio baseado em colocar as hemácias
fenotipadas em contato com soro da gestante ou do transfusionado, buscando evidenciar
a presença de anticorpos na amostra analisada. No método em tubo, a técnica deve
incluir três fases a primeira é a fase TA (temperatura ambiente), caso não apareça
aglutinações deve-se passar para a fase de incubação a 37° e assim lavar as hemácias
com soro fisiológico centrifuga-las e fazer o último teste de antiglobulina humana (fase
de AGH). Pequenas variações da técnica em tubo podem ocorrer, dependendo do
emprego de substâncias potencializadoras, como a adição de albumina, polietilenoglicol
(PEG) ou enzimas proteolíticas. Na metodologia em gel centrifugação, a leitura é
realizada diretamente na fase antiglobulina humana.
O método de gel-teste é realizado com a adição de hemácias comerciais diluídas
aproximadamente a 0,8% ao cartão gel contendo o soro de AGH e, geralmente não há
necessidade de lavagem prévia das hemácias teste (3,5,7). Entretanto, resultados falso-
positivos por este método podem ser elucidados se o teste for repetido com a utilização
de cartão monoclonal ou células previamente lavadas com salina ou ID-Diluente 2 pré-
aquecidos a 40°C (8). A aglutinação ocorre nos microtubos durante o estágio de
centrifugação. As hemácias, que são mais densas que o gel, tendem a passar através
dele. Quando as hemácias não são aglutinadas por anticorpos, sedimentam-se no fundo
da coluna. Quando formam aglutinados, pela ação dos anticorpos, as hemácias são
retidas pelo gel durante a centrifugação, podendo apresentar padrões de intensidade de 1
a 4 cruzes quando positivas. (Alexandre Gomes Vizzon e Flavia Regina Medeiros da
Silva, 2015)
A presença de aglutinação em qualquer uma das fases pelo método em tubo, ou
na fase de antiglobulina pelo método em gel centrifugação, revela a presença de
anticorpos irregulares. Uma vez detectada a presença de anticorpos irregulares, o
mesmo deverá ser identificado utilizando-se do diagrama de antígenos que acompanha o
painel de hemácias, através de comparações dos resultados obtidos no teste, com a
presença e ausência do antígeno no diagrama. Este diagrama contém a composição
antigênica de cada célula onde (+) representa a presença do antígeno especificado na
superfície de glóbulos vermelhos e (0) a sua ausência, bem como o modo usual de
reações dos anticorpos irregulares contra os antígenos representados. A presença de
reação positiva no autocontrole em qualquer fase de identificação pode indicar
existência de uma anormalidade no soro do paciente que deverá ser resolvida antes da
interpretação do teste, ou pode indicar a presença de auto-anticorpo. (Instrução de Uso
212110100, 2015)

2. OBJETIVO
O presente trabalho tem como objetivo geral especialmente mostrar a
importância da triagem e identificação evitar a incompatibilidade transfusional e a
doenças hemolítica, aumentando a segurança de gestantes, bebês, doadores e receptores
que possam desenvolver anticorpos anti-eritrocitários, Medidas devem ser tomadas
precocemente para prevenção clínica e o tratamento com o intuito de garantir segurança
a todos.

3. MATERIAIS E MÉTODOS
Este trabalho baseou-se em revisão de literatura científica acerca dos principais
anticorpos irregulares encontrados em pacientes politransfundidos. Foram realizadas
pesquisas nas bases de dados científicas: Pubmed, Google acadêmico e INI/Fiocruz.

4. DISCUSSÃO
Os anticorpos anti-eritrocitários são produzidos contra epítopos presentes na
superfície das hemácias, são classificados como irregulares. Os anticorpos irregulares
pode aparecer no plasma depois de uma gestação ou transfusão sanguínea incompatível,
a transfusão de sangue é uma medida terapêutica muito usada na prática clínica para
pacientes com Doenças falciforme, talassemia e leucemias, na transfusão sanguínea os
grupos sanguíneos mais relevantes são ABO/RH/KELL/DUFFY/KIDD/ LEWIS/MNS/
DIEGO, a pesquisa e identificação de anticorpo irregular visa garantir segurança no
procedimento terapêutico, quando o indivíduo é exposto a antígeno eritrocitário não
próprio ocorre uma resposta imunológica, que leva a produção de anticorpo irregular
voltados contra o antígeno processo é chamado de aloimunização eritrocitária, a
pesquisa de anticorpo irregular é fundamental pois a falha de um anticorpo pode
provocar reações transfusionais e doença perinatal. (Nathalia Caroline Lopes, 2019)
A sensibilização é muito rara durante a primeira gravidez, ocorrendo somente
em torno de 0,8 a 1,5% das vezes, respondendo o contingente de primigestas
aloimunizadas por 5 a 6% dos casos, demonstrando que precedendo a aloimunização,
quase sempre há uma gestação de concepto positivo para o antígeno sensibilizante (feto
imunizante), ou evento transfusional incompatível. Ao ser cruzada a placenta, a partir da
décima semana de gestação, os anticorpos IgG maternos dirigidos contra antígenos
eritrocitários desencadeiam um processo de hemólise imunomediada que resulta em
anemia fetal. (Baiochi Eduardo, 2009)

O teste do coombs indireto (PAI- TCI) ou antiglobulina pode ser utilizado na

detecção de hemácias sensibilizadas por aloanticorpos, autoanticorpos e/ou
componentes do complemento. A sensibilização pode ocorrer in vitro. A detecção da
sensibilização das hemácias in vitro é determinada pela técnica de antiglobulina indireta
ou coombs indireto, podendo ser aplicada para os testes de compatibilidade, triagem de
anticorpos irregulares, identificação de anticorpos irregulares, fenotipagem eritrocitária
e estudos de titulação de anticorpos. A interpretação de um teste de antiglobulina
positivo exige o conhecimento do diagnóstico do paciente, avaliação das medicações em
uso, gravidez e história transfusional, assim como a informação de presença de anemia
hemolítica autoimune. Vizzon, Alexandre Gomes Silva, Flávia Regina Medeiros, 2015)
Em 1945, Coombs, Mourant e Race produziram o soro de antiglobulina humana
a partir da injeção de soro humano ou seus componentes purificados em coelhos e
cabras. Embora tais estudos tenham sido fundamentais para a introdução do teste de
antiglobulina à sorologia de grupos sanguíneos, o princípio do teste já tinha sido
descrito por Moreschi, em 1908, não tendo sido divulgado na época. (Flavia Regina
Medeiros da Silva e autores, 2015)

Figura 1: Teste do coombs indireto

5. CONCLUSÃO
Os anticorpos irregulares são anticorpos que tem como alvo os epítopos das
hemácias sendo produzidos após incompatibilidade transfusional ou gestação, em que a
mãe produziu anticorpos contra antígenos da membrana eritrocitaria do bebê, os
resultados dos testes PAI são objetivos e extremamente importantes, visão identificar
anticorpos anti eritrócitos para que não ocorra incompatibilidade transfusional e
identificar e tratar a doença hemolítica do recém-nascido. O teste de antiglobulina
contribui para o diagnóstico da anemia autoimune o diagnóstico diferencial com outras
anemias hemolíticas, como as causadas por alterações da hemoglobina ou da estrutura da
hemácia. É importante também no diagnóstico das anemias hemolíticas do recém-nascido
e das anemias induzidas por drogas.

6. REFERÊNCIAS
PAULO ROBERTO J, MARTINS; VICTOR M. ALVES; GILBERTO A. PEREIRA;
HELIO MORAES-SOUZA Frequência de anticorpos irregulares em politransfundidos no
Hemocentro Regional de Uberaba-MG, de 1997 a 2005 Revista Brasileira de
Hematologia e Hemoterapia

ALEXANDRE GOMES VIZZONI; FLAVIA REGINA MEDEIROS DA SILVA Teste

da antiglobulina humana: uma revisão de literatura Revista eletrônica de farmácia

NATHALIA CAROLINE LOPES FERREIRA Principais anticorpos irregulares em

politransfundidos: Uma revisão de literatura Universidade Federal do Rio Grande do
Norte

SIMPSON, P. P.; HALL, P. E. Teste de antiglobulina. In: HARMENING, D. M. Técnicas

modernas de banco de
sangue e transfusão. 4. ed. Rio de Janeiro: Revinter, 2006.

Klein HG, Anstee DJ. Mollison’s blood transfusion in clinical medicine. 12th ed. Oxford:
Wiley-Blackwell, 2014.

EDUARDO BAIOCHI Aloimunização Revista Brasileira de Ginecologia e Obstetrícia

MURO, Luis Fernando Ferreira FERREIRA, Letícia Lemos GONZAGA, Priscila de
Almeida Lanzi, PEREIRA, Rose Elisabeth Peres REVISTA CIENTÍFICA
ELETRÔNICA DE MEDICINA VETERINÁRIA – ISSN: 1679-7353

Flavia Regina Medeiros da Silva Tecnologista do IPEC/FIOCRUZ Natalício Rocha da

Silva Roberto Pereira Neto Alexandre Gomes Vizzoni TESTE DA ANTIGLOBULINA
HUMANA NA ROTINA LABORATORIAL

Figura 1: Teste do coombs indireto

Fonte: https://portal.dzp.pl/nhk/teste-de-coombs-direto-e-indireto.html