10

A via central de todo

metabolismo precisa

AULA
ser regulada
Andrea Da Poian/Debora Foguel/Marilvia Dansa
de Alencar Petretski/Olga Lima Tavares Machado

Meta da aula
Apresentar a energética e a regulação do ciclo
do ácido cítrico, o seu papel como via central
do metabolismo, sua função anfibólica e
vias alternativas que usam intermediários
do ciclo do ácido cítrico.
objetivos

Esperamos que, ao final desta aula, você seja

capaz de:
1. relacionar os ∆Gºs das reações do CAC e sítios
de regulação da via;
2. listar os ativadores e os inibidores das enzimas-
chave do CAC;
3. reconhecer o CAC redutivo (CACr) como uma
via derivada do ciclo do ácido cítrico e sua
importância evolutiva;
4. diferenciar o papel catabólico e o papel
anabólico do ciclo do ácido cítrico;
5. reconhecer o CAC redutivo (CACr) como uma
via derivada do ciclo do ácido cítrico e sua
importância evolutiva;
6. definir a importância do ciclo do glioxilato.

Pré-requisitos
Para acompanhar esta aula, é fundamental
ter claros os conceitos de oxidação e redução
(Aula 3), saber reconhecer os mecanismos de
regulação enzimática (Aula 3) e identificar as
reações do CAC (Aula 9).
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

O CICLO DO ÁCIDO CÍTRICO É A VIA CENTRAL DE TODO O

METABOLISMO

Na aula passada, falamos das oito reações que com-

põem o ciclo do ácido cítrico (CAC), os intermediários, as
enzimas e os produtos desta importante via metabólica.
O CAC é uma via central do metabolismo. Você verá, ao
longo da disciplina, que o CAC aparece várias vezes e será
fundamental na integração do metabolismo. Por isso, você
precisa saber bem o ciclo do ácido cítrico, suas funções,
seus produtos e sua regulação.
O CAC é um ponto de convergência de todo o
metabolismo energético. É nesta via que a maior parte
das moléculas combustíveis termina sua degradação. Por enquanto
estamos falando da degradação da molécula de glicose, mas ouviremos
falar do CAC quando estivermos vendo a degradação de ácidos graxos
e de aminoácidos. Portanto, saber como o CAC funciona, o que produz
e como produz é fundamental para se entender os caminhos pelos quais
a célula obtém energia.

O CAMINHO É AERÓBICO, MAS OXIGÊNIO NÃO SE VÊ POR

AQUI

Pra relembrar a aula passada, vamos começar com a Figura 10.1,

que representa o ciclo do ácido cítrico completo. Volte a ele sempre que
precisar no decorrer desta aula. A figura apresenta as oito etapas do
CAC, com as estruturas dos compostos formados. Podemos observar
o grupo com dois carbonos (acetil), que entra no ciclo por combinação
com o oxaloacetato. Você se lembra de que este acetil está associado à
coenzima A e, portanto, chama-se acetil-CoA, certo? Os dois carbonos
saem do ciclo, na forma de CO2, em duas reações consecutivas: na des-
carboxilação do isocitrato e na descarboxilação do α-cetoglutarato. A
energia liberada dessas descarboxilações é conservada na redução de três
NAD+ (NADH.H+) e um FAD (FADH2) e na produção de um ATP ou
GTP. No final do ciclo, uma molécula de oxaloacetato foi regenerada.
Embora somente um ATP tenha sido formado no nível de substrato,
as coenzimas reduzidas – três NADH.H+ e um FADH2 – fornecem um

228  CEDERJ
fluxo de elétrons na cadeia de transporte de elétrons. Este fluxo de

10 
elétrons possibilita a formação de um grande número de moléculas de

AULA 
ATP durante a fosforilação oxidativa, como veremos com mais detalhes
nas Aulas 11 e 12.

Figura 10.1: O ciclo do ácido cítrico (CAC) com o nome e a estrutura de todos os
intermediários, as enzimas e os produtos. Note que, quando um intermediário perde
um carbono, este sai na forma de CO2.

!
Reveja as enzimas do CAC que pertencem ao grupo das desidrogenases e
as reações catalisadas por elas. Isto será muito importante nesta aula.

Repare que, no CAC, o oxigênio não é utilizado em nenhuma

das reações e em nenhuma das reações aparece água como produto. Se
voltarmos à equação geral da respiração celular (Esquema 10.1), veremos
que, desta equação, o CAC é responsável apenas pela produção de CO2.

CEDERJ  229
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

É claro que, além do CO2, uma parte da energia liberada até aqui é con-
vertida em ATP. Mas o principal produto do ciclo do ácido cítrico, que
permitirá a síntese de ATP em etapas posteriores da respiração celular,
está conservada em elétrons de alta energia, associados aos NADH.H+
e ao FADH2.

GLICOSE + 6O2   6CO2 + 6H2O + ENERGIA

Esquema 10.1: Equação geral da respiração celular, em que uma molécula de glicose
é degradada totalmente. A energia liberada será disponibilizada na forma de ATP.
As 6 moléculas de CO2 são liberadas nas etapas da PDH (2 CO2) e no CAC (4CO2).

ENERGIA DE OXIDAÇÃO DO CAC É CONSERVADA

EFICIENTEMENTE: BALANÇO ENERGÉTICO

Até aqui, vimos o envolvimento de duas vias metabólicas na degra-

dação completa da molécula de glicose: a glicólise e o CAC. A glicólise
tem como produtos finais duas moléculas de ATP e duas moléculas de
NADH.H+. O CAC tem como produtos finais: 2 moléculas de CO2, 3
NADH.H+, 1 FADH2 e 1 ATP (GTP).
Além desses produtos, não podemos nos esquecer daqueles gera-
dos na reação catalisada pelo complexo PDH, que são NADH.H+ e CO2
(para lembrar, ver Aula 8). Estes produtos finais têm destinos específicos
na célula. O CO2, por exemplo, sai da célula e cai na circulação para
ser expelido pelos pulmões. Os ATPs, gerados por fosforilação no nível
do substrato, podem ser diretamente utilizados pela célula em suas ati-
vidades dependentes de energia. Restam para a célula os aceptores de
elétrons reduzidos, NADH.H+ e FADH2. Estes aceptores de elétrons serão
utilizados na cadeia transportadora de elétrons, promovendo a síntese
de ATP por fosforilação oxidativa, como veremos na Aula 12.
Nas próximas aulas (Aulas 11 e 12), veremos o destino dos
NADH.H+ e dos FADH2 na célula e o processo pelo qual a energia
conservada nestas moléculas é convertida em ATP. Só para se ter ideia
da importância deste processo, basta adiantarmos que cada NADH.H+
,que transfere seus elétrons para a cadeia transportadora de elétrons,
possibilita com isso a síntese de 2,5 moléculas de ATP; e cada FADH2,
a síntese de 1,5 molécula de ATP. O balanço total do número de ATPs
produzidos neste processo pode ser visto na Tabela 10.1.

230  CEDERJ
Tabela 10.1: Balanço da formação de ATP na oxidação aeróbica de uma molécula de

10 
glicose por fosforilação no nível do substrato (FSu) e por fosforilação oxidativa (FOx)

AULA 
Número de coen-
zimas reduzidas
Número final de
Reação ou ATPs produzi-
ATPs formados
dos diretamente
na reação
Glicose glicose-6P -1 -1
Frutose-6P F1, 6BP -1 -1
(2) G3P  > (2) 1,3bPG 2 NADH.H+ 3-5 * (FOx)
(2) 1,3bPG  > (2) 3PG 2ATP 2 (FSu)
(2) PEP  (2) piruvato 2ATP 2 (FSu)
(2) piruvato  (2) acetil-CoA 2 NADH. H +
5 (FOx)
(2) isocitrato  (2) α-cetoglutarato 2 NADH. H +
5 (FOx)
(2) α-cetoglutarato  (2) succinil-CoA 2 NADH. H+ 5 (FOx)
(2) succinil-CoA  (2) succinato 2ATP 2 (FSu)
(2) succinato  (2) fumarato 2 FADH2 3 (FOx)
(2) malato  (2) axoloacetato 2 NADH. H+ 5 (FOx)
Total (FSu + FOx) 30-32* ATPs

!
Se você prestou atenção à nossa tabela,
verificou que o número total de ATPs
formados por molécula de glicose que-
brada na respiração celular varia de 30 a
32. Isso está em discordância com o que
encontramos em muitos livros didáticos,
principalmente nos livros do Ensino Médio
e Fundamental. O que encontramos com
frequência é que 38 moléculas de ATP são produzidas por molécula de
glicose quebrada na respiração celular. Esta discrepância se deve ao fato
de que, antes dos anos 1990, se assumia que, durante o transporte de
elétrons, uma molécula de NADH.H+ gerava energia para a síntese de 3
ATPs e a molécula de FADH2 gerava energia para a síntese de 2 ATPs. Hoje
se sabe que estes números não estão corretos. O transporte de elétrons
do NADH.H+ gera energia para a síntese de 2,5 ATPs e o transporte dos
elétrons do FADH2 gera energia para a síntese de 1,5 molécula de ATP.
Portanto, aqui vamos utilizar os valores corretos. O processo pelo qual
isso acontece você verá nas próximas aulas.

A utilização do que resta da molécula de glicose pelo CAC

transforma energia química, que ainda permanece associada a ela, em
ATP, NADH.H+ e FADH2. Estas moléculas são a base para a produção
de 30-32 ATP. Isso só é possível porque o CAC é uma via altamente

CEDERJ  231
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

exergônica. Assim, a liberação de energia que ocorre durante o CAC

é a base para as etapas posteriores da respiração celular. Isto significa
que o somatório dos ∆G0s das reações que compõem o CAC é bastante
negativo. Na aula passada (Aula 9), apresentamos todas as reações do
CAC e seus respectivos ∆G0s. Note, a seguir, a lista de reações e ∆G0s. A
localização das reações cujos ∆G0s são mais negativos permite a locali-
zação das enzimas candidatas à regulação.
1. citrato sintase, ∆G0s = - 32,2
2. aconitase, ∆G0s = 13,3
3. isocitrato desidrogenase, ∆G0s = - 20,9
4. α-cetoglutarato desidrogenase, ∆G0s = - 33,5
5. succinil-CoA sintetase, ∆G0s = - 2,9
6. succinato desidrogenase, ∆G0s = 0,0
7. fumarase, ∆G0s = - 3,8
8. malato desidrogenase, ∆G0s = 29,7

ATIVIDADE

Atende ao Objetivo 1

1. Com base nos ∆G0s fornecidos, identifique os prováveis sítios de regu-

lação do ciclo do ácido cítrico. Discuta as consequências do ∆G0 da malato
desidrogenase.

232  CEDERJ
 10 
RESPOSTA COMENTADA

AULA 
Os prováveis pontos de regulação do CAC são as enzimas que
catalisam as reações com ∆Gº mais negativos: citrato sintase (∆Gº
-32.2), isocitrato desidrogenase (∆Gº -20,9) e a α-cetoglutarato
desidrogenase (∆Gº = -33,5). A enzima malato desidrogenase
catalisa uma reação com ∆Gº bastante positiva (+29,7), ou seja, a
direção favorável da reação é no sentido inverso ao que ela ocorre
no CAC. Entretanto, nós já vimos que a alta concentração de um
substrato (no caso o malato, gerado pelas reações anteriores) e
a baixa concentração do produto (oxaloacetato, que está sendo
utilizado nas reações posteriores) muda o ∆G da reação e garante
o fluxo do CAC em direção à formação de oxaloacetato.

VOCÊ LEMBRA COMO UMA VIA METABÓLICA É

REGULADA?

A Lei da Máxima Economia propõe que as vias metabólicas fun-

cionem de acordo com as necessidades da célula. Para que isso aconteça,
é necessário que exista a coordenação das atividades das diferentes vias
metabólicas. Isso ocorre através da regulação das enzimas-chave de cada
via metabólica, através da ação de efetores alostéricos e por modulação Efetores
alostéricos
covalente. Isto assegura a produção de intermediários e de produtos na
Este termo você
velocidade requerida para manter a célula em um estado de equilíbrio certamente viu em
dinâmico. Desta forma, a célula evita a superprodução dos produtos. No Bioquímica I, nas
aulas de enzimas. Ele
caso específico do CAC, três fatores determinam sua regulação: se refere a moléculas
que atuam como
• disponibilidade de substratos; ativadores ou inibi-
dores não competiti-
• inibição por acúmulo de produtos;
vos das enzimas. Em
• inibição alostérica das enzimas. outras palavras, são
moléculas que ligam
Nesta aula, vamos explorar preferencialmente a regulação da via no sítio regulador
das enzimas e não no
por modulação alostérica das enzimas. sítio catalítico.
Lembre-se de que existem três reações altamente exergônicas no
CAC. Estas reações são catalisadas pela citrato sintase, isocitrato desi-
drogenase e α-cetoglutarato desidrogenase. Além disso, parte do controle
do CAC ocorre pelo controle do complexo piruvato desidrogenase.

CEDERJ  233
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

Embora esta não seja uma reação do CAC, a velocidade desta reação
determina a velocidade de produção de acetil-CoA. Como o acetil-CoA é
o substrato do CAC, sua concentração é um dos fatores preponderantes
na velocidade desta via.

A REGULAÇÃO DO CICLO DO ÁCIDO CÍTRICO

A primeira enzima do ciclo propriamente dito a sofrer regulação

é a citrato sintase, enzima que catalisa a reação de condensação do
oxaloacetato (OAA) com acetil-CoA (R1). A citrato sintase é inibida
por ATP, e esta inibição é revertida por ADP, um ativador alostérico da
enzima. A enzima também é inibida pelo produto, citrato, por succinil-
CoA e por NADH.H+.

Além do controle sobre a PDH e a citrato sintase, a velocidade da

via é determinada ainda através da regulação das enzimas que catalisam
as duas reações de descarboxilação oxidativa: isocitrato desidrogenase
(R2) e α-cetoglutarato desidrogenase (R3). O principal fator que con-
trola a velocidade das reações catalisadas por estas enzimas é o balanço
[NADH.H+]/[NAD+], ou seja, o poder redutor da célula. As duas reações
são inibidas por NADH.H+ pela ação das massas. Isto significa que o
NADH.H+ inibe a enzima porque o NAD+ é substrato das reações e, por
isso, é fundamental para que elas ocorram.

234  CEDERJ
 10 
AULA 

A lei da ação das massas controla também outra desidrogenase

dependente de NAD+, a enzima malato desidrogenase. Um resumo dos
ativadores e inibidores do ciclo do ácido cítrico pode ser visto na Figura
10.2. Note que os principais fatores que influenciam a velocidade da via
são os balanços:
→ [NADH.H+]/[NAD+]
→ [ATP]/[ADP]
→ [Acetil-CoA]/[CoA-SH]
Em última análise, estes são indicativos do estado energético
da célula.

CEDERJ  235
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

Figura 10.2: Regulação do CAC. Esta inclui a regulação do complexo piruvato desi-
drogenase, além da regulação de três enzimas do próprio ciclo: a citrato sintase,
a isocitrato desidrogenase e a α-cetoglutarato desidrogenase. Adicionalmente a
malato desidrogenase também sofre controle pela disponibilidade de NAD+. O
símbolo significa inibição e o símbolo significa ativação.

236  CEDERJ
ATIVIDADE

10 
AULA 
Atende ao Objetivo 2

2. Na presença de uma quantidade

Atividade (% de Vmax)
saturante de oxaloacetato, a atividade
da citrato sintase do tecido cardíaco
de porco mostra uma dependência
sigmoidal da concentração de acetil-
CoA, como mostrado no gráfico.
Quando o succinil-CoA é adicionado,
a curva sofre um desvio para a direita [Acetil-CoA] (µM)
e a dependência sigmoidal do acetil-
CoA é mais pronunciada.
Com base nestas observações:

a. Sugira como o succinil-CoA regula a atividade da citrato sintase.

b. Por que o succinil-CoA é um sinal apropriado para a regulação do

CAC?

c. Como a regulação da citrato sintase controla a taxa de respiração celular

no tecido cardíaco do porco?

RESPOSTAS COMENTADAS
a. Succinil-CoA é um inibidor da enzima citrato sintase. Sua ação
resulta em um aumento do Km da enzima pelo substrato acetil-
CoA. Isto significa uma diminuição na afinidade da enzima por seu
substrato.
b. O succinil-CoA é o primeiro intermediário após as etapas de des-
carboxilação oxidativa. Se este intermediário se acumula, significa
que o ciclo como um todo não está sendo capaz de utilizá-lo nas
etapas subsequentes, com a mesma velocidade em que este está
sendo produzido. Assim, este tipo de regulação é adequado para con-
trolar o fluxo dos intermediários através do ciclo do ácido cítrico.
c. A velocidade da enzima citrato sintase influencia diretamente a
velocidade do ciclo do ácido cítrico e consequentemente na veloci-
dade de redução dos aceptores de elétrons, NAD e FAD. Estes, no
seu estado reduzido, serão os substratos da cadeia transportadora
de elétrons. Isto significa que a atividade desta enzima é um fator
importante da taxa de respiração celular.

CEDERJ  237
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

ATIVIDADE

Atende aos Objetivos 2 e 3

3. Estudamos como o CAC é regulado. Sabemos que a regulação de uma via

metabólica está diretamente relacionada ao seu papel no metabolismo.

a) Descreva o sentido fisiológico da regulação das enzimas do ciclo do ácido

cítrico e relacione com o seu papel no metabolismo energético.

b) Circule as enzimas reguladoras da via no quadro a seguir. Depois,

escreva o ativador e o inibidor de cada uma delas no quadro. Você pode
consultar a lista ao lado.

Enzima Ativador(es) Inibidor(es) 1. ATP

2. AMP
Citrato sintase
3. ADP
Isocitrato desidrogenase
4. CoA
Aconitase
5. acetil-CoA
α-cetoglutarato desidrogenase
6. Succinil-CoA
Fumarase
7. Citrato
Succinil-CoA sintetase 8. ácidos graxos
Succinato desidrogenase 9. NAD+
Malato desidrogenase 10. NADH.H+

RESPOSTA COMENTADA
a) O papel do CAC no metabolismo energético é finalizar a oxidação
completa de moléculas biológicas, como a glicose, por exemplo. Este
processo gera principalmente poder redutor na forma de NADH.
H+ e FADH2. A regulação do CAC é feita, sobretudo, pelo balanço
NADH.H+/NAD+. Esta regulação é uma resposta ao funcionamento
da via, aumentando sua velocidade quando mais NAD+ que NADH.
H+ está presente, e diminuindo sua velocidade quando há altas
concentrações de NADH.H+ dentro da célula.
b) Esta regulação se dá sobre as enzimas citrato sintase, isocitrato
desidrogenase e α-cetoglutarato desidrogenase.

238  CEDERJ
 10 
Enzima Ativador(es) Inibidor(es)

AULA 
Citrato sintase ADP NADH.H+,
citrato, ATP,
succinil-CoA
Isocitrato desidrogenase ADP, Ca++ ATP
Aconitase
α-cetoglutarato desidrogenase Ca++ NADH.H+,
succinil-CoA
Fumarase
Succinil-CoA sintetase
Succinato desidrogenase
Malato desidrogenase NADH.H+

UM CICLO TÃO COMPLEXO DEVE SERVIR PARA MAIS

ALGUMA COISA

Um processo cíclico, com oito etapas, parece ser, à primeira vista,

uma via muito complexa apenas para a oxidação de uma molécula de dois
carbonos (acetato) em CO2. Já sabemos que este acetato se encontra na
forma de acetil-CoA e pode ser obtido a partir do metabolismo de car-
boidratos (glicose), ácidos graxos ou aminoácidos. No entanto, o papel
do ciclo do ácido cítrico não está limitado à oxidação do acetato. Essa
via desempenha um papel central no metabolismo: seus intermediários
de quatro e cinco carbonos, em determinadas circunstâncias metabólicas,
servem como substratos para outras vias. Por outro lado, estes mesmos
intermediários podem também ser pontos de entrada de moléculas
formadas em outras vias de degradação; por exemplo, oxaloacetato e
a α-cetoglutarato são produzidos a partir do aspartato e do glutamato,
respectivamente, quando proteínas são degradadas (Figura 10.3). Da
mesma forma como observamos na glicólise, o CAC também tem um
papel anabólico. Por isso, dizemos que o ciclo do ácido cítrico é uma
via anfibólica, ou seja, pode funcionar catabolicamente, participando Via anfibólica

da degradação da glicose (ou outras moléculas combustíveis) ou pode É uma via que tem
papel anabólico e
funcionar anabolicamente, fornecendo intermediários que participam catabólico. O prefixo
anfi significa duplo,
de vias biossintéticas. A Figura 10.3 mostra o fluxo metabólico do dúbio.
CAC, destacando as moléculas que podem ser formadas a partir dos

CEDERJ  239
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

seus intermediários. Como exemplo, podemos destacar o citrato, que é

utilizado na biossíntese de ácidos graxos, e esteroides; o succinil-CoA,
que pode ser utilizado na biossíntese de porfirinas (por exemplo: o grupo
heme e clorofilas); além dos intermediários envolvidos com a síntese de
aminoácidos glicogênicos, como o oxaloacetato e o α-cetoglutarato.
Uma palavra que veremos com frequência quando falarmos de
CAC é reação anaplerótica. Palavra estranha, não é mesmo? Na sua
origem latina, a palavra anaplerose significa “encher de”. Reações ana-
pleróticas, então, são reações para a reposição de intermediários do ciclo
que são removidos para vias biossintéticas. Em mamíferos, a reação
mais importante para reposição de intermediários do CAC é a reação
catalisada pela piruvato carboxilase, que transforma piruvato em oxa-
loacetato. Ela ocorre no fígado e nos rins. Outras reações anapleróticas
importantes você pode observar na Figura 10.3 e na Tabela 10.2.

Figura 10.3: Caminhos biossintéticos dos quais participam intermediários do ciclo

do ácido cítrico. Note o intenso fluxo metabólico dos intermediários desta via. Eles
podem ser utilizados na síntese de ácidos graxos (citrato), na síntese de porfirinas
(succinil-CoA) e na síntese de diversos aminoácidos (α-cetoglutarato e oxaloacetato).
Note as reações anapleróticas catalisadas pela piruvato carboxilase, PEP carboxiqui-
nase, PEP carboxilase e enzima málica.

240  CEDERJ
Tabela 10.2: Reações anapleróticas do Ciclo do ácido cítrico.

10 
Reações Anapleróticas

AULA 
Reação Tecido/organismo
-
Piruvato + HCO3 + ATP  OAA* + ADP + Pi Fígado e rim
Piruvato carboxilase

PEP + CO2 + GDP    OAA* + GTP Coração e músculo

PEP carboxiquinase esquelético
PEP + HCO3    OAA* + Pi Plantas, leveduras
PEP carboxilase e bactérias
Largamente
- distribuídos em
Piruvato + HCO3 = NAD(P)H    Malato + NAD (P)
+

Enzima málica eucariontes e

procariontes
A coluna da direita indica o tecido ou organismo em que a reação acontece. A coluna
da esquerda mostra a reação, a enzima que a catalisa e, em negrito, o intermediário
do CAC produzido pela reação.
*OAA = oxaloacetato

ATIVIDADE

Atende ao Objetivo 4

4. Complete o texto com as palavras dadas no quadro.

ATP NADH.H+
CO2 Porfirinas
Aminoácidos Ácidos graxos
Glicose

O ciclo do ácido cítrico é uma via anfibólica. Ela é uma via com “1001
utilidades”. Quando a célula precisa de energia, ela funciona produzindo
_______________________, _______________________ e ________________
num processo de degradação de _______________. Quando a célula pre-
cisa de _________________, ________________ ou ______________, o ciclo
funciona fornecendo seus intermediários para as vias de biossíntese dessas
biomoléculas.

RESPOSTA COMENTADA
O ciclo do ácido cítrico é uma via anfibólica. Ela é uma via com
“1001 utilidades”. Quando a célula precisa de energia, ela funciona
produzindo ATP, NADH.H+ e CO2 num processo de degradação de
glicose. Quando a célula precisa de aminoácidos, ácidos graxos ou
porfirinas, o ciclo funciona fornecendo seus intermediários para as
vias de biossíntese dessas biomoléculas.

CEDERJ  241
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

VARIAÇÕES DO MESMO TEMA: O CAC É A BASE DE

OUTRAS VIAS METABÓLICAS

O ácido cítrico presente em grande parte dos organismos de hoje

é produto de um processo evolutivo, durante o qual muita coisa aconte-
ceu antes do surgimento dos organismos aeróbicos. Esta via metabólica
não é certamente o caminho mais curto do acetato até CO2, mas é a via
que confere maior vantagem seletiva. Além desse papel catabólico, já
vimos que o CAC pode funcionar como uma via anabólica, fornecendo
intermediários para vias biossintéticas. Agora veremos algumas outras
variações do ciclo do ácido cítrico que podem ser encontradas nos dias
de hoje, mas que certamente tiveram um papel evolutivo importante.

O REVERSO DO CICLO DO ÁCIDO CÍTRICO OU CAC REDUTIVO

(CACR)

Alguns seres anaeróbicos usaram algumas das reações do CAC

em processos biossintéticos. Alguns micro-organismos modernos ainda
usam o ciclo de Krebs de modo incompleto, não como via de obtenção
de energia, mas como um caminho metabólico de fixação de CO2 menos
complexo que a fotossíntese. Os exemplos mais bem conhecidos de
organismos que apresentam esta variação do CAC são: uma bactéria
verde sulfurosa chamada Chlorobium limicola (Figura 10.4); algumas
bactérias termófilas que crescem em ambientes ricos em hidrogênio,
como Hydrogenobacter thermophilus; e certas bactérias que crescem em
ambientes ricos em sulfato, como Desulfobacter hydrogenophilus.
Nestas espécies, o CAC é usado no sentido inverso e, por isso, é
chamado de ciclo do ácido cítrico redutivo ou reverso (CACr) (Figura
10.4). Este pode ter sido o primeiro caminho metabólico que permitiu a
síntese de moléculas orgânicas a partir de compostos inorgânicos como
o CO2, antes do surgimento dos organismos fotossintetizantes.

242  CEDERJ
 10 
AULA 
Figura 10.4: O reverso do CAC ou CACr. Nesta via presente em algumas bactérias,
as reações são revertidas de maneira que a via caminhe em direção à utilização de
CO2, para a construção de moléculas orgânicas. Ferred indica a reação de carboxilação
que requer ferredoxina reduzida.

Grande parte das reações do CACr é exatamente igual àquelas

encontradas no CAC. Repare nas duas reações de fixação de CO2 no
CACr: elas são as reações de descarboxilação oxidativa do CAC. No
CACr, o succinil-CoA ganha um CO2 e forma α-cetoglutarato. Este ganha
outro CO2, gerando um isocitrato. Este processo permite a estes orga-
nismos sintetizarem moléculas orgânicas como a glicose, por exemplo,
a partir destes intermediários.
Enzimas-chave do CACr incluem uma ATP citrato liase e duas
enzimas fixadoras de CO2: α-cetoglutarato:ferredoxina oxidorredutase
e uma piruvato:ferredoxina oxidorredutase. Estas enzimas catalisam
reações que permitem que o CACr aconteça tornando possível a inver-
são das reações irreversíveis do CAC. Por exemplo, a ATP citrato liase
catalisa a clivagem do citrato em acetil-CoA e oxaloacetato numa reação
dependente de CoA-SH e ATP.

CEDERJ  243
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

!
As vias catabólicas liberam energia que é utilizada na síntese de ATP
ou coenzimas reduzidas. Nas vias biossintéticas, como no caso do CAC
redutivo, a energia é necessária para que as reações aconteçam. O CAC
como via catabólica libera energia na forma de ATP, NADH.H+ e FADH2.
O CAC redutivo requer energia na forma de ATP e elétrons fornecidos
pela ferredoxina reduzida.

ATIVIDADE

Atende ao Objetivo 5

5. Você já conhece o ciclo do ácido cítrico e já leu sobre a regulação desta

via, que etapas são reversíveis e que etapas são irreversíveis. Com base
nestas informações, aponte que enzimas do CAC são mantidas no CAC
redutivo e que reações necessitam um caminho enzimático alternativo.

RESPOSTA COMENTADA
As reações que apresentam ∆G negativos no sentido do CAC são irre-
versíveis (citrato sintase, isocitrato desidrogenase e α-cetoglutarato
desidrogenase) e, portanto, requerem um caminho alternativo para
que a reação inversa ocorra. Todas as outras podem ser mantidas
(malato desidrogenase, fumarase, succinato desidrogenase, succinil-
-CoA sintetase).

Se observarmos com atenção o ciclo do ácido cítrico, podemos

concluir que se o ciclo libera CO2, o inverso do ciclo (CACr) poderia
assimilar CO2. No sentido inverso, o CAC poderia ter sido utilizado com
via de síntese de glicose antes mesmo do advento da fotossíntese (Aulas
13 a 17). Mas se o ciclo é uma via de geração de energia na forma de
ATP, NADH.H+ e FADH2, o inverso deveria requerer energia. No CACr
dos organismos que existem hoje, vimos que a ferredoxina pode doar
elétrons para as reações de carboxilação. Na Terra primitiva, supõe-se

244  CEDERJ
que esta energia tenha sido obtida de reações envolvendo FeS com H2S,

10 
formando FeS2 (pirrita de ferro). A pirrita de ferro era abundante na

AULA 
Terra primitiva e pode ter sido uma versão antiga dos agregados ferro-
enxofre. Um modelo geral do caminho metabólico que provavelmente
compôs o CACr ancestral está mostrado na Figura 10.5. Nesta figura,
estão indicadas as reações em que poder redutor (XH2) seria necessário
para as reações e os prováveis pontos de carboxilação no CACr.

Figura 10.5: O reverso do CAC. No ciclo redutivo, as reações se iniciam no oxaloa-

cetato e vão no caminho oposto fixando CO2. Note que os aceptores de elétrons
reduzidos (XH2) teriam sido essenciais para fornecer elétrons para as reações.

INTERMEDIÁRIOS DO CAC SÃO USADOS NO CICLO DO

GLIOXILATO

Outra via metabólica que usa os intermediários e enzimas do

CAC é a via do glioxilato. Este é um caminho metabólico presente em
plantas, certos invertebrados e alguns micro-organismos. Nesta via, a
célula converte acetato a succinato e outros intermediários de 4 carbonos
do CAC (Esquema 10.2).

2 Acetil-CoA + NAD+ + 2 H2O  Succinato + 2 CoA-SH + NADH.H+

Esquema 10.2: Resumo do ciclo do glioxilato, que usa 2 moléculas de acetil-CoA na

construção de moléculas de 4 carbonos.

CEDERJ  245
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

A via do glioxilato utiliza acetil-CoA como fonte de carbonos e

permite a sintase de carboidratos a partir destes. Isto é possível porque
as enzimas do ciclo do glioxilato “pulam” as reações em que o dióxido
de carbono é liberado, mantendo os carbonos que entram na forma de
acetil-CoA nos intermediários subsequentes. O ciclo do glioxilato ocorre
em tecidos ricos em lipídeos, como as sementes em germinação, porque
a degradação de lipídeos gera acetil-CoA em grande quantidade. A via
do glioxilato é mostrada na Figura 10.6. Note que as etapas iniciais do
ciclo do glioxilato são exatamente iguais às reações iniciais do CAC, com
a formação de citrato e isocitrato. Entretanto, a partir daí, a via forma
glioxilato e succinato e, então, regenera o oxaloacetato. As etapas de
descarboxilação oxidativa do CAC não existem no ciclo do glioxilato.

Figura 10.6: Via do glioxilato, presente em bactérias e plantas, permite a síntese

de glicose a partir de acetil-CoA. Esta via utiliza vários intermediários do CAC,
mas “pula” as descarboxilações oxidativas (em cinza). Portanto, o ciclo mantém
os carbonos carreados pela coenzima A, como parte integrante de suas moléculas
(Fonte: modificado de: http://www.chemistry.uoguelph.ca/educmat/Chm452/gif/
glycycle.gif).

Sumário do ciclo do glicoxilato:

1. acetil-CoA + OAA + H2O  citrato + CoASH + H+ (citrato
sintase, ∆G0= - 32,2 kJ/mol)

246  CEDERJ
 2. citrato  cis-aconitato + H2O  isocitrato (aconitase,

10 
∆G0= + 6,3 kJ/mol)

AULA 
3. isocitrato  succinato + glicoxilato (isocitrato liase)
4. glicoxilato + acetil-CoA  malato + CoA-SH + H+ ( malato
sintase)
5. succinato + FAD  fumarato + FADH2 (succinato desidro-
genase, ∆G0= 0 kJ/mol)
6. fumarato + H2O  malato (fumarato hidratase, ∆G0 = - 3,8 kJ/
mol)
7. malato + NAD+  oxaloacetato + NADH.H+ (malato desi-
drogenase, ∆G0= + 29,7 kJ/mol)

ATIVIDADE

Atende ao Objetivo 6

6. Acetil-CoA, substrato do CAC, pode ser obtido a partir da degradação

de glicose ou de ácidos graxos. Mamíferos não podem transformar ácidos
graxos em glicose, porque a reação de formação do acetil-CoA, a partir de
piruvato, não é reversível. Mamíferos não têm outro caminho metabólico
através do qual possam reverter essa reação. Além disso, a energia neces-
sária para reverter as duas reações de descarboxilação oxidativa seria muito
grande. Como, a partir do ciclo do glioxilato, isso é possível?

RESPOSTA COMENTADA
No ciclo do glioxilato, a célula não precisa reverter as duas reações
de descarboxilação oxidativa altamente exergônicas. A alternativa
metabólica é utilizar enzimas que convertem isocitrato em glioxilato
e succinato (isocitrato liase). Em seguida, a via converte o glicoxilato
em malato, pela ação da enzima malato sintase. Com isso, os car-
bonos que entram no ciclo na forma de acetil-CoA (2C) não saem
nas reações de descarboxilação, permanecendo como parte da
estrutura das moléculas intermediárias.

CEDERJ  247
Bioquímica II | A via central de todo metabolismo precisa ser regulada

ATIVIDADE

Atende ao Objetivo 4

7. O ciclo do ácido cítrico é uma via que compõe a respiração celular. Ela
faz parte do caminho aeróbico de utilização do piruvato, como vimos na
Aula 7 e, portanto, depende da presença de oxigênio. Com base no que
vimos até aqui, responda: organismos anaeróbicos podem apresentar um
ciclo do ácido cítrico funcional? Justifique sua resposta.

RESPOSTA COMENTADA
O CAC é uma via anfibólica e, como tal, pode ser usada quando
a célula precisa de energia, participando das reações que levam à
síntese de ATP (papel catabólico). Além deste papel, os intermediários
do ciclo podem participar de vias anabólicas, que não dependem
da presença de oxigênio. Por isso, vários organismos anaeróbicos
possuem e utilizam o CAC em seu metabolismo biossintético.
Qualquer dúvida ou dificuldade em responder qualquer uma das
atividades apresentadas, procure a tutoria a distância na plataforma
ou pelo 0800. Você pode e deve fazer isso sempre que precisar. Não
existe dúvida boba, sua dúvida é sempre muito importante!

CONCLUSÃO

O ciclo do ácido cítrico é parte do processo de respiração celular,

colaborando para a degradação completa da molécula de glicose. Além
disso, o CAC é uma via que integra o metabolismo de carboidratos,
lipídeos e aminoácidos. A partir dos intermediários do CAC, outras
vias como o CAC redutivo e o ciclo do glioxilato foram desenvolvidas
ao longo da evolução. Este panorama mostra a importância deste ciclo
para organismos aeróbicos e anaeróbicos. Portanto, vamos nos referir
muitas vezes ao CAC durante nossa disciplina. Certifique-se de não ter
dúvidas sobre esta via, antes de seguir adiante.

248  CEDERJ
 10 
RESUMO

AULA 
Nesta aula, estudamos a regulação do CAC e seu papel anabólico como base para
a construção de outras vias metabólicas. Entre as reações do CAC, 3 apresentam
∆G0s bastante negativos. São aquelas catalisadas pelas enzimas citrato sintase,
isocitrato desidrogenase e α-cetoglutarato desidrogenase. Estes são importantes
pontos de regulação do CAC. O ciclo é finamente regulado por: disponibilidade de
substrato, inibição por acúmulo de produtos e regulação alostérica das enzimas.
O último tipo de regulação é mediado pelo balanço [NADH.H+]/[NAD+], [ATP]/
[ADP] e [acetil-CoA]/[CoA-SH], que são, em última análise, indicativos do estado
energético da célula. Além do seu papel no metabolismo energético, o CAC tem
uma função fundamental de fornecer intermediários para vias biossintéticas, como
a síntese de porfirinas, aminoácidos e ácidos graxos. Embora o CAC seja parte
da respiração celular e, portanto, ocorra na presença de oxigênio, organismos
anaeróbicos também podem apresentar o CAC ou variações desta via, como o
CACr e o ciclo do glicoxilato.

INFORMAÇÃO SOBRE A PRÓXIMA AULA

Na próxima aula, veremos como as moléculas de NADH.H+ e FADH2, geradas

durante a glicólise, na reação catalisada pelo complexo piruvato desidrogenase
e, sobretudo, no CAC, são utilizadas na cadeia transportadora de elétrons. Neste
processo, veremos que os hidrogênios se combinam com o oxigênio molecular
que respiramos, para formar água. É isso mesmo. Água é o principal produto da
cadeia transportadora de elétrons! Vamos ver como isso acontece? Até lá!

CEDERJ  249