FARMÁCIA

INTRODUÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS (ICF)

POSTAGEM 1
ATIVIDADE 1 – PROJETO

FERNANDA GOMES DE OLIVEIRA SANTANA - RA 2082330

ROSANGELA SILVA AMORIM – RA 2089050
TANIA LUCIANE DA SILVA ALVES – RA 2090851
TATIANE CRISTINA DOS SANTOS CAMARGO – RA 2098445

POLO UNIP TAQUARAL

CAMPINAS
2021
 2

1. RESUMO

A espectrofotometria é um método de estudo da interação entre a luz e a

matéria, partindo desse princípio, várias análises podem ser realizadas. Cada
composto absorve, transmite ou reflete a luz em uma faixa de comprimento de onda
específica. A espectrofotometria pode ser usada para identificar e quantificar
substâncias químicas medindo a absorção e a transmissão da luz que passa pela
amostra. O dispositivo mede e compara a quantidade de luz absorvida por uma
substância. Portanto, análises quantitativas e qualitativas podem ser realizadas para
identificar e determinar a concentração de uma substância com base na interação da
substância com a luz. Esta técnica espectrofotométrica de absorção molecular
envolve a passagem de luz por uma amostra e a medição da fração que é absorvida.
O método mais utilizado em laboratórios é o de espectrofotometria UV-Visível
onde determina a intensidade de absorção de luz ultravioleta e visível que
atravessa uma determinada amostra, através deste método que será realizado neste
estudo a quantificação do paracetamol.
O paracetamol (acetaminofeno, N-acetil-p-aminofenol) é um fármaco que tem
ação analgésico e antitérmico utilizados para combater dor e febre, sendo ele um dos
fármacos mais comercializados no Brasil devido ao seu preço acessível de venda e
por ter vários laboratórios que o produz.

Palavra-chave: Espectrofotometria, Paracetamol, Doseamento.

 3

2. INTRODUÇÃO

A espectrofotometria é uma das técnicas analíticas mais comumente utilizadas

para a determinação quantitativa de substâncias químicas. A tecnologia é baseada na
absorção de certos comprimentos de onda de radiação por moléculas e íons. Quando
um feixe de luz monocromática passa por uma cubeta de vidro cheia de líquido, a
intensidade da radiação que aparece diminui, porque parte dela será absorvida e
poderá se relacionar de três maneiras sendo elas, espectrofotometria de absorção
onde conecta a energia absorvida com o comprimento de onda da luz incidente.
Espectrofotometria de espelhamento indica a energia dispersa em incumbência do
comprimento de onda, ângulo de incidência e de polarização da luz incidente.
Espectrofotometria de emissão onde é verificada a quantidade de energia transmitida
por um material com vinculação ao comprimento de onda da radiação absorvida.
O método mais utilizado em laboratórios é o de espectrofotometria UV-Visível
onde determina a intensidade de absorção de luz ultravioleta e visível que
atravessa uma determinada amostra, através deste método que será realizado neste
estudo a quantificação do paracetamol.
O Paracetamol se apresenta em um pó cristalino branco. Solubilidade.
Ligeiramente solúvel em água, solúvel em água fervente, facilmente solúvel em álcool
etílico. Solúvel em hidróxido de sódio M.
Segundo Aniceto e Fetibello-Filho (2002), “O paracetamol é um antipirético e
analgésico, que pertence à classe dos derivados do p-aminofenol. Como resultado de
pesquisas voltadas para alternativas no século passado Acetanilida ". A fenacetina e
a acetanilida têm efeitos analgésicos e antipiréticos, mas produzem metemoglobina,
o que não é transportando oxigênio devido à formação de precursores da anilina.
Paracetamol é Metabólitos ativos de acetanilida e fenacetina, devido à sua baixa
toxicidade em relação a eles, passou a substituí-los de várias formulações e sendo
administrada com dose diária variando de 0,3 a 1 grama.
O paracetamol (acetaminofeno, N-acetil-p-aminofenol) é um fármaco que tem
ação analgésico e antitérmico utilizados para combater dor e febre, sendo ele um dos
fármacos mais comercializados no Brasil devido ao seu preço acessível de venda e
por ter vários laboratórios que o produz.
 4

3. OBJETIVO

Este trabalho tem como objetivo apresentar o processo de validação de método

analítico em doseamento, utilizando o fármaco paracetamol. Seguindo as
regulamentações da RDC 166/2017 e a Farmacopeia Brasileira 6º Edição.
Apresentando assim resultados por meio do preparo de amostras com medicamento
paracetamol em concentrações entre 80% a 120% em curva de calibração e com
auxílio de equipamento espectrofotômetro. Desta forma possibilitando o
aprofundamento dos alunos nos conhecimentos em validação de métodos analíticos
e seus parâmetros.

4. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS

Tabela 1: Tabela de materiais e equipamentos utilizados para o Doseamento

Comprimidos de paracetamol Almofariz e pistilo

Água destilada Balança Analítica
Solução de Hidróxido de Sódio 0,1N Papel Manteiga
Béquer Agitador Mecânico
Balão volumétrico Cubeta de Quartzo
Pipeta Espectrofotometro UV/Vis
Proveta

5. MÉTODO
Pesar e pulverizar 20 comprimidos de Paracetamol. Transferir a quantidade do
pó equivalente a 0,15 g de paracetamol para balão volumétrico de 200 mL. Adicionar
50 mL de hidróxido de sódio 0,1 M, 100 mL de água, agitar mecanicamente por 15
minutos e completar o volume com água. Homogeneizar, filtrar e diluir 10 mL do
filtrado para 100 ml com água. Transferir 10 ml da solução resultante para balão
volumétrico de 100 mL, adicionar 10 mL de hidróxido de sódio 0,1 M e completar o
volume com água. Preparar solução padrão na mesma concentração, com solução de
hidróxido de sódio 0,01 M. Medir as absorbâncias das soluções resultantes em 257
nm, utilizando solução de hidróxido de sódio 0,01 M para ajuste do zero. 8 Calcular a
quantidade de Paracetamol C8H9NO2 (Ativo) nos comprimidos a partir das leituras
obtidas. Alternativamente, realizar os cálculos considerando A (1%, 1cm) = 715, em
257 nm, em solução de hidróxido de sódio 0,01 M. A validação será verificada através
 5

da construção da curva de calibração, com cinco concentrações diferentes, numa

faixa de 80% a 120% do ativo.

6. DESENVOLVIMENTO

A validação garante que processo de análise e os procedimentos analíticos,

produzem resultados confiáveis, adequados e exatos.
Segundo a RDC Nº 166/2017 (ANVISA), validação é um ato documentado que
atesta que qualquer procedimento, processo, equipamento, material, operação, ou
sistema realmente conduz aos resultados esperados. A validação tem como objetivo
principal assegurar que determinado procedimento analítico forneça resultados
reprodutíveis e confiáveis, que sejam adequados aos fins para os quais tenha sido
planejado (Matioli et al., 2004)
Toda validação de método deve apresentar parâmetros cujo eles são
Seletividade, linearidade, faixa de trabalho, precisão, exatidão, limite de detecção,
quantificação e robustez.
Os resultados da validação do método analítico de Doseamento referente ao
medicamento Paracetamol (C8H9NO2) estão descritos no contexto deste relatório.

6.1 Seletividade

O parâmetro de seletividade permite que o analito possa ser quantificado e

identificado, independentemente de interferentes na amostra, como impurezas e
componentes da matriz.
O parâmetro de seletividade é o primeiro a ser analisado durante a validação,
pois se o método não for seletivo os parâmetros como precisão, exatidão e linearidade
podem ser comprometidos.
 6

Tabela 2 -Dados da Média de Absorbância obtida para o Doseamento de

Paracetamol em 5 amostras de solução contendo apenas Paracetamol (Solução A) e
solução de Paracetamol na presença de ácido cítrico (Solução B) em método
espectrofotométrico (leitura em comprimento da onda (I) = 257nm).

Absorbância (A)
Amostra
Média Desvio
A (Paracetamol) A = 0,660 -----
B (Amostra + Ácido Cítrico) AC = 0,663 0,08

tcalculado = 0,0663 - 0,660

0,08
√2.236 = 0,035
tcalculado = 0,035

6.2 Linearidade

Linearidade é a forma de uma metodologia analítica obter resultados

diretamente proporcionais à concentração do analito na amostra, dentro de um
período específico, a obtenção se dá através da padronização externa e montagem
de curva de calibração para o método de doseamento de Paracetamol por
espectrofotômetro em comprimento de onda (l) = 257 nm.
Montagem de Curva de Calibração para Análise do Paracetamol (Avaliação da
Linearidade do Método)
Foram preparadas cinco concentrações diferentes de Paracetamol em água,
conforme demonstrado na Tabela 3 a seguir:
Tabela 3:Resultados de Absorbância (A) para a triplicata de diferentes
concentrações de Paracetamol. Leitura realizada em espectrofotômetro UV/Vis no
comprimento de onda (l) = 257 nm.

Concentração (mg/L) Abs. média

3,0 0,173
4,5 0,380
6,0 0,504
7,5 0,670
9,0 0,800
 7

1 Absorbância y = 0,1029x - 0,1122

0,8 R² = 0,9929
0,800
0,670
0,6
0,504
0,4 0,…

0,2 0,173

0
0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 8,0 9,0 10,0

6.3 Limite de Detecção (LD)

Limite de detecção é definida a menor quantidade do analito que pode ser

detectada pelo método, sem precisar necessariamente ser quantificada.
Para esse método utilizam-se curva analítica, possivelmente definido como
concentração analítica que frequentemente determina um fator de confiança superior
ao desvio padrão de medidas do branco. O limite de detecção pode ser obtido a partir
da análise de uma triplicata da concentração mais baixa da curva, conforme dados da
tabela 4 a seguir:
Tabela 4: Resultados de Absorbância (A) para a triplicata da menor
concentração da curva de calibração do método de dosagem de Paracetamol (3,0
mg/L). Leitura realizada em espectrofotômetro UV/Vis no comprimento de onda (l) =
257 nm.

Absorbância (A)
Amostra (Paracetamol)
Média Desvio
3 mg/L 0,73 0,07

Para avaliar e determinar o limite de detecção do método espectrofotométrico

de doseamento de Paracetamol, é necessário realizar o cálculo com a seguinte
equação:

LD = 3,3x0,07 LD = 2,0625mg/L
0,112
 8

7. CONCLUSÃO

A validação deve demonstrar que o método analítico produz resultados

confiáveis e é adequado à finalidade a que se destina, de forma documentada e
mediante critérios objetivos. A validação do método é feita para garantir que a
metodologia analítica é exata, reprodutível e flexível sobre uma faixa específica que
uma substância será analisada. Este projeto está sendo realizado segundo as
diretrizes da ANVISA contidas na RDC Nº 166/2017 e Farmacopeia Brasileira, 6ª
edição.
Nas conjunções preceituadas conclui-se que o método aplicado para
determinação de teor (teste de doseamento) do medicamento Paracetamol manifesta-
se compreendido com os parâmetros de validação impostos pela legislação brasileira
vigente. Atendendo os critérios com adequabilidade garantindo confiança nas análises
analíticas, como resultado em seguimento a confiabilidade do produto analisado.
Podemos concluir que as análises realizadas obtiveram resultados
satisfatórios, sendo assim, são robustas, exatas e específicas.
 9

REFERÊNCIA

ANVISA. AGENCIA NACIONAL DE VIGILÂNCIA SANITÁRIA. Farmacopeia

Brasileira, volume 2. 6ª Ed. Brasília.site<https://www.gov.br/anvisa/pt-
br/assuntos/farmacopeia/farmacopeia-brasileira/arquivos/7987json-file-1>Acesso em
01 outubro 2021

Anvisa (Brasil) Resolução RDC Nº 166, 24 JULHO 2017

site:<http://antigo.anvisa.gov.br/documents/10181/2721567/RDC_166_2017_>
Acesso em: 01 outubro 2021.

ANVISA. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução RDC nº 210, de 04 de

agosto de 2003. Regulamento Técnico das Boas Práticas para a Fabricação de
Medicamentos. Diário Oficial da União, Brasília, DF, 14 de agosto de 2003b> Acesso
em: 04 outubro 2021
Filho, H. B., Krug, F. J., Zagatto, E. A., & Rocha, F. R. (2010).
ESPECTROFOTOMETRIA NO ULTRAVIOLETA E. Fonte:
https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/4275863/mod_resource/content/1/Apostila-
espectrofotometria.pdf > Acesso em: 05 outubro 2021

Orientações Gerais sobre requisitos da ABNT NBR ISO/IEC 17025

2017.site<http://www.inmetro.gov.br/credenciamento/eventos-cgcre/13-14-
15Workshop/00-DOQ-CGCRE-087_rev_00_-
_Orientacoes_gerais_sobre_os_requisitos_da_ABNT_NBR_ISO_IEC_17025_2017.p
df_>Acesso em 05 outubro 2021.

Orientação sobre validação de métodos analíticos DOC-CGCRE-008 revisão 5 –

agosto 2016.site<www.inmetro.gov.br/Sidoq/Arquivos/Cgcre/DOQ/DOQ-Cgcre-
8_05.pdf> Acesso em 16 maio 2021.> Acesso em: 06 outubro 2021.