Aula de Bioeletrogenese Marcos Viana

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA
COMPLEXO HUPES – ESCOLA POLITÉCNICA

Curso de Especialização em Engenharia Clínica
CONDUTÂNCIA ELÉTRICA
NA MEMBRANA
Prof. Ms. Marcos Viana Bomfim
Depto. De Ciências da Vida
UNEB – Campus I – Salvador
Endereço eletrônico: [email protected]
Salvador – Bahia
agosto/2013
PRINCÍPIO DA HOMEOSTASE
Bioeletrogênese – Prof. Marcos Viana

CONDUTÂNCIA ELÉTRICA NA MEMBRANA
Transportes de Membrana
 Introdução
 Tipos:
- Difusão
- Transporte Ativo
 Difusão (Depende basicamente do gradiente de concentração)
X
Migração (Depende do gradiente eletroquímico)

PROTEÍNAS INTRÍNSECAS

PROTEÍNAS EXTRÍNSECAS

DISPOSIÇÃO DOS FOSFOLIPÍDEOS NA
MEMBRANA CELULAR

FOSFOLIPÍDEOS

Categorias de Difusão
1- Difusão no estado dissolvido através da porção

lipídica da membrana.
Ex: O2 , CO2, Etanol, Ácidos Graxos de cadeia
curta.
2- Difusão por poros da membrana.
Ex: Transporte de íons.
3- Difusão facilitada ou mediada por carreador.
Ex: Glicose, carbohidratos e aminoácidos.

Fatores relacionados com a Difusão:
1- Diferença de concentração da substância

entre os dois lados da membrana (dC);
2- Espessura da membrana (dX);
3- Coeficiente de difusão (D);
4- Área de secção da membrana (S);
5- Temperatura ambiente (K)

Migração
 Velocidade de migração de um íon
(Vm)
Vm = E x F = ddp x F/dX
Difusão X Migração
* Sentidos opostos (Predomínio)
* Mesmos sentidos (Eletrodifusão)

Determinação da ddp entre os lados da

membrana
Equação de Nernst
ddp = (RT/zF) x log n C1/C2
Equação de Nernst Simplificada
ddp = - 61,5 log (Ci/Ce)

COMPLEXO HUPES – ESCOLA POLITÉCNICA - FMB
POTENCIAL TRANSMEMBRANA

Salvador – Bahia
agosto/2013
POTENCIAL DE REPOUSO
Histórico:
• Teoria Iônica de Bernstein: “A membrana
celular seria seletivamente permeável ao
Potássio. O íon Potássio tenderia a se
difundir para fora da célula.
• Equação de Nernst E = RT log [i]a
zF [e]b
• Equaçãode Goldman:
ddp = RT log P [K+]e + P [Na+]e + P [Cl-]e
zF P [K+]i + P [Na+]i + P [Cl-]i

Histórico:
ESTUDOS APURADOS APÓS A DÉCADA DE 40:
1- Desenvolvimento de microeletrodos capazes de
serem introduzidos através da membrana celular,
sem lesar a célula;
2- Preparados obtidos de invertebrados (axônio
gigante de lula - 0,5 a 1 mm de diâmetro.
CONCLUSÃO:
PR significativamente menor que o valor calculado
pela Equação de Goldman.

Histórico:
•[ ] extracelular (água do mar)
x
[ ] intracelular (axoplasma)
* Força intrínseca de origem metabólica????
* Métodos Isotópicos -
Temperaturas entre 0 e 5oC
Venenos metabólicos (cianeto, dinitrofenol);
BOMBA IÔNICA DE
SÓDIO/POTÁSSIO ATPase
(Bomba Eletrogênica)

EQUAÇÃO DE GOLDMAN MODIFICADA
ddp = RT log P [K+}e + P [Na+]e + P [Cl-]e + RTIbF2/E

zF P [K+}i + P [Na+]i + P [Cl-]i + RTIb/F2E

COMPOSIÇÃO IÔNICA NOS COMPARTIMENTOS
INTRA E EXTRACELULARES

Músculo Cardíaco
Íon [ ] extracelular [ ] intracelular Relação e / i

e (mM) i (mM)
K+ 4 150 0,027
Na+ 145 15 9,7
Cl- 120 5 24
Ca++ 2 10-4 2 x 104
Fonte: DE SPERELAKYS (1979) - In: GARCIA, E.A.C. Biofísica,1998.

Músculo Esquelético de Rã

e (mM) i (mM)
K+ 2,25 124,0 0,018
Ca++ 2,1 4,9 0,43
Na + 109,0 10,4 10,5
Cl- 77,5 1,5 51,7
Fonte: DE CONWAY (1957) - In: GARCIA, E.A.C. Biofísica,1998.

Axônio gigante de lula

e (mM) i (mM)
K+ 20,0 400,0 0,05
Na+ 440,0 50,0 8,8
Cl- 560,0 40 - 150 14 - 3,7
Ca++ 10,0 0,4 25,0
Fonte: DE HODGKIN (1958) - In: GARCIA, E.A.C. Biofísica,1998.

Distribuição Iônica intracelular e
mEq/L Extracelular
300 Meio Meio
250 extracelular intracelular
200 C
C A A
150 HCO3 HCO3
K
100 Na
Cl HPO4
PO4
SO4
50 K
Ác. Org.
Ca
Prot. Mg
Mg Prot.
Na

Equilíbrio de Gibbs-Donan: Estado de disposição dos
íons, para os quais a membrana seja ou não
permeável.
Fatores que contribuem para a gênese do

Potencial de Repouso
 Permeabilidade da membrana aos íons e
formação de baterias;
 A ação da Bomba de Na+/ K +/ATPase;
 Existência de maior quantidade de substâncias
com carga negativa no interior da célula

Fatores que contribuem para a gênese
do Potencial de Repouso
Permeabilidade da membrana aos íons e formação de baterias
* Na+ ( ddp de +86 mV - corrente de dentro para fora,
ou Seja, do polo negativo para o positivo);
* K+ ( ddp de - 100 mV - corrente de fora para dentro,
ou seja, do polo negativo para o positivo);
* Cl- ( ddp de - 89 a - 96 mV - corrente de fora para
dentro, ou seja, do polo negativo para o positivo).

 Permeabilidade da membrana aos íons e

formação de baterias.
Obs: Fenômeno responsável por 75 a 90% do Potencial

de Repouso.
Equação de Goldman: Associa os diversos íon
envolvidos na gênese do potencial de equilíbrio.

Fatores que contribuem para a gênese do
Potencial de Repouso
 A ação da Na+/ K+ ATPase

Tipos: - P (Intermediário fosforilado)
E1 - Na+, Mg++ e ATP
E2P - K+
* 10 a 20% do Potencial de Ação
* 3 Na+ para fora e 2 K+ para dentro

 A ação da Na+/ K+ ATPase
Tipos: - V (H+ ATPases)

Membranas de vacúolos citoplasmáticos
F (ATP sintetase)
Membrana interna das mitocôndrias
F0 (mais externa) = Passagem de H+
F1 (mais interna) = Síntese de ATP

Existência de maior quantidade de substâncias com

carga negativa no interior da célula.
* Proteínas com carga negativa (Aminoácidos com

cadeia lateral polar e iônica de carga negativa -
aminoácidos ácidos, como aspartato, glutamato,
tirosina, cisteína).

TRANSMEMBRANA
- + - +
+ + +
-
- -
+ +
- - -
+
-- - - -
+ + + - - -
+ +
+ + + +
0 0
- 90
VOLTAGEM TRANSMEMBRANA

POTENCIAL TRANSMEMBRANA- EXPERIMENTO

COMPLEXO HUPES – ESCOLA POLITÉCNICA - FMB
POTENCIAL DE AÇÃO
Salvador – Bahia
agosto/2013
POTENCIAL DE AÇÃO
Introdução:
 Células capazes de responder a

diversos estímulos:
* Hormônios;
* Neurotransmissores;
* Físicos.

POTENCIAL DE AÇÃO
2- Canais Iônicos:
 Tipos de canais:
a) Canais de vazamento (“leakage channels”);
b) Canais dependentes:
- Quimiodependentes (Receptores de Ach);
- Voltagem-dependentes (Canais de Na+ e K+);

POTENCIAL DE AÇÃO
 “Para adentrar no canal, o íon hidratado deve

perder grande parte de suas moléculas de
solvatação, cujos dipolos elétricos devem ser
substituídos por grupamentos de átomos de
Oxigênio da própria parede interna do canal.
O íon vai continuar, dessa maneira, envolto
numa atmosfera”polar”.

POTENCIAL DE AÇÃO
A) Canais Quimiodependentes:
- Ligação da Ach na membrana
 Condutância de Na+ e K+;
- A Ach abre um único tipo de canal catiônico
(quase igualmente permeável ao Na+ e K+);
- A alteração na permeabilidade é feita pelo receptor
nicotínico.
-  [ ] de Ach  Abertura do canal
- Fluorofosfatos orgânicos (pesticidas e gases
neurotóxicos)
 Inibe Ach-esterase (fosforil-enzima estável).
POTENCIAL DE AÇÃO
B) Canais Voltagem dependentes:
1) Canais de Sódio;
2) Canais de Potássio;
3) Canais de Cálcio.

POTENCIAL DE AÇÃO
Canais de Sódio
- Abertura dos canais (portões ou “gates);

- Possuem 3 x 5 nm / P = 0,04  P = 20
- Permite a passagem de outros cátions orgânicos
e inorgânicos (íon amônio, amino-guanidina,
inclusive o Potássio)
Portão de ativação: Abre-se quando se inicia a
despolarização.
Portão de inativação: Fecha-se no fim da fase de
ultrapassagem (início da repolarização).

GRADIENTE DE VOLTAGEM

DIREÇÃO DO GRADIENTE DE VOLTAGEM

VETOR DIRECIONAL ELÉTRICO DE UM CÁTION

VETOR DIRECIONAL ELÉTRICO DE UM ÂNION

POTENCIAL DE AÇÃO
Bloqueadores dos Canais de Sódio
• Tetrodotoxina (Veneno extraido do peixe baiacu, o

qual pode levar a paralisia respiratória);
• Saxitonina (produzido por um dinoflagelado)


Lamelibrânquios contaminados
Um mexilhão  morte de 50 seres humanos

POTENCIAL DE AÇÃO
Canais de Potássio
 Cem vezes mais permeáveis ao Potássio que ao
Sódio;
 A inativação desse canal se dá pela oclusão do poro
pelo modelo “bola e cadeia”.
Canais de Cálcio
 Canais do tipo L (lento): Só completam a sua
abertura tardiamente ao início do potencial de ação
(presentes nos músculos e coração);
 Canais do tipo N (neuronal) e T: (sistema condutor
cardíaco, musculatura lisa dos vasos sangüíneos e
adrenais).
POTENCIAL DE AÇÃO
(Células de Resposta Lenta)
mV
+ 30 3 Overshoot
0
Desplarizaçào
inicial 4 Repolarização
- 30 2
- 70
PRTM
- 90
1 5
- 120 Repouso Recuperação
Tempo
POTENCIAL DE AÇÃO
Início
1- Ligação de um neurotransmissor;
2- Ativação em “efeito dominó” dos canais voltagem-
dependentes;
Fase 1 (Despolarização)
1- Abertura dos canais de Sódio( alteração da ddp);
2- Avalanche de íons Na+ penetram no interior da célula;
3- O potencial de repouso sobe de - 90 para 0 mV;
4- Ocorre em menos de 1 ms

POTENCIAL DE AÇÃO
Fase 2(“Overshoot”)
1- Potencial continua subindo (vai de 0 a + 30 mV);
2- Continuidade do influxo de Na+;
3- Ao final desta fase o portão de inativação se fecha em
resposta a voltagem máxima alcançada;
Fase 3(Repolarização)
1- Potencial vai de + 30 até +40 mV até uma descida de
-30/-35 mV;
2- Fenômenos:
a) Fechamento dos portões de inativação
b) Abertura completa dos canais de K+
POTENCIAL DE AÇÃO
Fase 4 (Recuperação)
1- Vai de -30/-35 mV até -90 mV;
2- Queda lenta do potencial até o seu retorno ao valor
original;
3- Essa fase também é conhecida como pós potencial
negativo;
4- Saída mais lenta de K+.
Fase 5 (Hiperpolarização)
1- Permanência da abertura dos canais de K+;
2- O potencial cai ainda mais além do seu valor
original (-100mV);
3- É conhecida também como pós potencial positivo.
POTENCIAL DE AÇÃO
(Células de Resposta Rápida )
mV
+ 30
1
2 Pós-potencial
3
0 a precoce
- 30 P
0 Pós-potencial
R tardio
PSN
R
PL
- 70
PRTM PRE DD
- 90
b
4
- 120
Hiperpolarização

POTENCIAL DE AÇÃO
FASE ZERO (Despolarização rápida):

 Abertura rápida dos canais de sódio (< 1 ms);
 O potencial sobe de -90 para 0 mV (anilação da carga
interna negativa);
 Potencial sobe de 0 a +30 mV ( “Overshoot”, ultrapassagem
ou potencial em ponta).
 Resposta rápida (600 V/s) - Determina diretamente a
condutividade de uma célula ( quanto mais rápido a
velocidade de ascensão da fase zero, mais facilidade a célula
terá de transmitir o potencial de ação para outra célula;

POTENCIAL DE AÇÃO
FASE ZERO (Despolarização rápida):
 Fechamento rápido dos canais de sódio-

Portões de Inativação (proteção da célula
contra sobrecarga de sódio, bem como evitar a
penetração de água);
Obs: Já nessa fase a Bomba de sódio começa a
atuar.

POTENCIAL DE AÇÃO
FASE 1 (Repolarização rápida precoce):
 Fechamento dos canais de sódio;

 Conduz a curva para próximo de zero milivolt;
 Abertura completa dos canais de potássio, com
saída rápida (interior da célula volta a ficar
negativo);
 Mobilização de íons de fácil trânsito (K+ para fora; Cl-
para dentro);

POTENCIAL DE AÇÃO
FASE 2 (Repolarização lenta ou platô):
- Abertura dos canais de cácio

- A condutância a todos os íons é baixa:
Na+ (Inativação dos canais)
K+ (Sai da célula em pequena quantidade)
Cl- (Pequeno influxo)
- Bomba de sódio age intensamente;

POTENCIAL DE AÇÃO
FASE 3 (Repolarização rápida final):
- Sai bastante K + e entra bastante Cl - (lentamente);

- Mecanismo ativo da bomba
Íons Ca++ e Na+ são expulsos da célula

- Término do Período Refratário Efetivo;
- ,Início do Período Refratário Relativo (A célula vai
respondendo com curvas gradativamente normais
de PA a estímulos supraliminares;

POTENCIAL DE AÇÃO
FASE 3 (Repolarização rápida final):
 Recuperação dos canais de Cálcio e Sódio (Período

vulnerável de Wiggers (40 ms antes da onda “T”:
Fibrilação Ventricular/Parada cardíaca)
 No final da Fase 3:
- PeríodoSupra-normal (PSN) - Caracterizado pelo fato
de produzir respostas normais (curvas normais de
Potencial de Ação), mesmo em células doentes,
quando sobre ele cai um estímulo despolarizante.
POTENCIAL DE AÇÃO
FASE 4 (Repouso elétrico):
 A célula está repolarizada;

 Concentrações iônicas reestabelecidas
 A permeabilidade ao Potássio pode aumentar:
(Hiperpolarização ou Potencial Pós Positivo)

POTENCIAL DE AÇÃO
Período Refratário Absoluto ou Efetivo :

Aquele no qual a célula não responde a nenhum
outro estímulo. Vai desde o início da Despolarização
até a metade da fase de Repolarização rápida final .
Período Refratário Relativo :
Aquele no qual a célula se torna pouco responsiva
(só vai responder a estímulos mais fortes). Vai desde
o início da Repolarização até antes do início de uma
nova despolarização.

THE END

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1- Diferença de concentração da substância

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Determinação da ddp entre os lados da

ddp = (RT/zF) x log n C1/C2

Equação de Nernst Simplificada

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ddp = RT log P [K+}e + P [Na+]e + P [Cl-]e + RTIbF2/E

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Íon [ ] extracelular [ ] intracelular Relação e / i

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Íon [ ] extracelular [ ] intracelular Relação e / i

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Axônio gigante de lula

Íon [ ] extracelular [ ] intracelular Relação e / i

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Fatores que contribuem para a gênese do

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 Permeabilidade da membrana aos íons e

Obs: Fenômeno responsável por 75 a 90% do Potencial

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 A ação da Na+/ K+ ATPase

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 A ação da Na+/ K+ ATPase

Tipos: - V (H+ ATPases)

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Existência de maior quantidade de substâncias com

* Proteínas com carga negativa (Aminoácidos com

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 Células capazes de responder a

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 “Para adentrar no canal, o íon hidratado deve

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- Abertura dos canais (portões ou “gates);

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