UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS

INSTITUTO DE CINCIAS BIOLGICAS

DEPARTAMENTO DE CINCIAS FISIOLGICAS
Disciplina: Bioqumica Celular e Metablica Medicina

RELATRIOS DE AULAS PRTICAS: CARACTERIZAO DE

CARBOIDRATOS REAO DE FEHLING E REAO DE SELIWANOFF.

Acadmicos:
1. INTRODUO:
Os carboidratos, tambm conhecidos como glicdios ou acares, so
molculas constituintes dos seres vivos, assim como protenas, lipdios e
cidos nuclicos. A combinao das diferentes funes bioqumicas de cada
uma dessas molculas permite a integridade da clula e de todos os
processos metablicos, fisiolgicos e genticos dos organismos vivos.
Antigamente, acreditava-se que os carboidratos estavam envolvidos apenas
com funes estruturais e energticas. Isso decorria da dificuldade tcnica no
estudo qumico e biolgico desses compostos.
A histria dos carboidratos est associada a seu efeito adoante, mas
hoje sabemos que a maioria desses compostos no apresenta essa
propriedade. A anlise da glicose revelou sua frmula qumica bsica que
apresenta a proporo de um tomo de carbono para uma molcula de gua.
Da vem o nome carboidrato (ou hidrato de carbono).
Tal proporo mantm-se em todos os compostos desse grupo. Os
mais simples, chamados de monossacardeos, podem ter de trs a sete
tomos de carbono, e os mais conhecidos - glicose, frutose e galactose tm
seis. A frmula desses trs acares a mesma, C6H12O6, mas eles diferem
no arranjo dos tomos de carbono, hidrognio e oxignio em suas molculas.
Os monossacardeos, principalmente as hexoses, podem se unir em cadeia,
formando desde dissacardeos at polissacardeos .
Embora muitos polissacardeos sejam formados pela mesma unidade (glicose,
no caso do amido e da celulose), as diferenas em suas estruturas, como
presena ou no de ramificaes e variedade nas ligaes entre as unidades,
conferem a eles propriedades fsico-qumicas muito diversas. (Pomin,Mouro)

Essas biomolculas podem ser divididas em trs classes principais de acordo

com o nmero de ligaes glicosdicas, podendo ser: monossacardeos,
oligossacardeos e polissacardeos.
1.1. MONOSSACARDEOS
Os monossacardeos, ou acares simples, so constitudos de apenas
uma unidade de poli-hidroxialdedos ou poli-hidroxicetonas. Muitos dos
carbonos aos quais a hidroxila encontra-se ligada so assimtricos (com
exceo da di-hidroxicetona), o que lhes caracteriza como centros quirais e
lhes confere uma propriedade estereoisomrica. Isso garante a
estereoespecificidade que as enzimas necessitam para agir corretamente.
Devido alta polaridade, os carboidratos so slidos cristalinos em
temperatura ambiente, solveis em gua e insolveis em solventes no
polares. Suas estruturas so formadas por uma cadeia de carbonos no
ramificada, na qual um dos tomos de carbono apresenta uma ligao dupla
com um tomo de oxignio, constituindo assim um grupo carbonila e, o
restante, possui um grupo hidroxila. Quando o grupo carbonila est na
extremidade da cadeia, o monossacardeo uma aldose. Caso o grupo
carbonila esteja em outra posio qualquer, o monossacardeo uma cetose.
(JUNIOR (2008))
As aldotetroses (aldoses com quatro carbonos) e todos os
monossacardeos com cinco ou mais tomos de carbono apresentam, em sua
maioria, como estruturas cclicas em meio aquoso. Uma importante
caracterstica dos monossacardeos a capacidade de serem oxidados por
ons cpricos ( Cu +2 ) e frricos ( Fe+3 ) e, portanto, so chamados de
acares redutores. O grupo carbonila oxidado a carboxila ao mesmo tempo
em que ocorre a reduo, por exemplo, do on cprico ( Cu +2 ) a cuproso (

+
Cu ). Estes princpios so observados tanto no Experimento 1 quanto no 2,
por meio da identificao de acares redutores com o teste de Fehling e o
teste de Seliwanoff para distino de aldoses e cetoses.
Os dois monossacardeos mais abundantes na natureza so a glicose
(dextrose), que a principal fonte de energia do corpo humano, e a frutose, o
acar das frutas, representados na Figura 1.
Figura 1. Frmula estrutural da glicose e da frutose.
 Fonte:
http://www.medicinadoestilodevida.com.br/frutose/
1.2. OLIGOSSACARDEOS
Os oligossacardeos so definidos como cadeias curtas de
monossacardeos. Os mais comuns so os dissacardeos, formados pela unio
de dois monossacardeos, por meio de uma ligao glicosdica, que se d entre
uma das hidroxilas de um acar e o carbono anomrico de outro. A reao
que ocorre para a formao da ligao glicosdica tem como produto um acetal
a partir de um hemiacetal e um lcool, resultando num composto denominado
glicosdeo. Esse processo pode ser revertido pois os cidos hidrolisam as
ligaes glicosdicas.
Os exemplos mais conhecidos de dissacardeos so a sacarose (acar
de mesa, a lactose (acar do leite) e maltose (acar de malte dos cereais),
ilustrados na Figura 2.
Figura 2. Frmula estrutural dos dissacardeos mais conhecidos.
 Fonte: http://slideplayer.com.br/slide/381883/
A sacarose um acar muito utilizado na indstria, tanto para a
produo de lcool combustvel (pelo processo de fermentao) quanto para
fins culinrios. Ele obtido por meio da combinao de dois monossacardeos:
a glicose e a frutose.
2.3. POLISSACARDEOS
Os acares que contm mais de 20 unidades de monossacardeos so
denominados polissacardeos (ou glicanos), podendo chegar a possuir at
mesmo milhares de monossacardeos. A diferenciao desses carboidratos
dada pela unidade monomrica, comprimento e ramificao das cadeias.
Quando estes contm apenas um tipo de monossacardeo, so denominados
homopolissacardeo, diferentemente dos heteropolissacardeos que podem
conter dois ou mais tipos de monossacardeos.
Os polissacardeos no tm massas moleculares definidas, devido a sua
sntese ser realizada dependentemente das enzimas que catalisam sua
polimerizao e, portanto, no h um ponto final para esse processo e por
isso que estas molculas podem variar tanto no tamanho.
O amido (Figura 3) e o glicognio so homopolissacardeos muito
conhecidos devido sua capacidade de armazenamento de energia. Outros,
como a celulose e a quitina exercem funes estruturais em plantas e animais.
Alguns heteropolissacardeos que se destacam, so os peptideoglicanos,
presentes no envelope celular de procariontes, e os glicosaminoglicanos
(Figura 4) que se encontram na matriz extracelular de animais multicelulares.
Figura 3. Frmula estrutural do amido.
 Fonte: https://br.answers.yahoo.com/question/index?
qid=20160407131011AAQRciN

Figura 4. Representao de glicosaminoglicanos, presentes nos

proteoglicanos.

Fonte: http://www.biowiki.com.br/doku.php?id=glicosaminoglicano

2. OBJETIVOS:

- Realizar anlise em solues de carboidrato e suas reaes a partir do o

processo reativo de Fehling, na presena de acares redutores;
- Reconhecer e classificar os carboidratos como aldose e cetose, por meio da
presena de cido e composto fenlico.

3. MATERIAL E MTODO
3.1. EXPERIMENTO 1:
3.1.1. MATERIAL:
REAGENTES E SOLUO VIDRARIA E INSTRUMENTAL

Reativo de Fehling A e B Pipetas de vidro 5ml (8)

Soluo de glicose (1%) Tubos de ensaio (8)
Soluo de frutose (1%) Pra de borracha
Soluo de maltose (1%) Cronmetro

Soluo de lactose (1% leite) Banho-maria

Soluo de sacarose (1%) Ponteiras
Soluo de arabinose (1%)
Soluo de amido (1%)

gua destilada

3.1.2. METODOLOGIA:
Pipetou-se 1 ml da soluo previamente preparada com os reativos de Fehling
A e B em cada um dos sete tubos de ensaio. Em seguida, adicionou-se, em
tubos de ensaio, numerados previamente de 1 a 8, 1 ml das solues listadaa a
seguir:
TUBO 1: 1,0ml da soluo de gua destilada
TUBO 2: 1,0ml da soluo de glicose (1%)
TUBO 3: 1,0ml da soluo de frutose (1%)
TUBO 4: 1,0ml da soluo de maltose (1%)
TUBO 5: 1,0ml da soluo de lactose (1% leite)
TUBO 6: 1,0ml da soluo de sacarose (1%)
TUBO 7: 1,0ml da soluo de arabinose (1%)
TUBO 8: 1,0ml da soluo de amido (1%)

As solues foram aquecidas at a fervura em banho-maria. Realizado tal

processo, a grade com as solues foi retirada do aquecimento e passou -se a
analisar o contedo presente em cada tubo de ensaio.

3.2. EXPERIMENTO 2:
3.2.2. MATERIAL:
REAGENTES E SOLUES VIDRARIA E INSTRUMENTAL

Soluo de frutose (1%) Tubos de ensaio (3)

Soluo de glicose (1%) Conta-gotas (2)

gua destilada Pipeta 1ml

Reagente de Seliwanoff Banho-maria

3.2.3. METODOLOGIA:
I. Enumerar os trs tubos de ensaio, adicionando:
(1) 1ml de Seliwanoff + 3 gotas de gua destilada
(2) 1ml de Seliwanoff + 3 gotas da soluo de frutose
(3) 1ml de Seliwanoff + 16 gotas da soluo de glicose
II. Aquecer todos os tubos em banho-maria fervente por um minuto e observar
a colorao desenvolvida;
III. Ferver por mais 5 minutos e anotar a colorao desenvolvida;
IV. Comparar os resultados.

4. RESULTADOS E DISCUSSO:
4.1. EXPERIMENTO 1: REAO DE FEHLING - IDENTIFICAO DE
ACARES REDUTORES
Aps a adio da soluo dos reativos de Fehling, a colorao das
solues em todos os tubos de ensaio era homognea e azul .
Os tubos que continham em suas solues 1,0ml de gua destilada,
sacarose ou amido no apresentaram mudana de colorao, mantendo-se,
portanto, azulados.
Por outro lado, as demais solues, glicose, frutose, maltose, lactose e
arabinose, apresentaram diferentes tons de vermelho tijolo na presena de
xido cuproso, sendo que a lactose, que, por advir do leite, apresenta aspecto
turvo, foi a soluo que obteve diferena mais notvel no tom da colorao .
Essas modificaes so decorrentes do fato de que na reao de Fehling, o
cobre presente em soluo reduzido pela ao de acares redutores. A
extremidade redutora do acar reduz o in cprico-trtaro de sdio potssio a
tartarato de sdio e potssio + xido cuproso. O composto xido cuproso se
precipita em soluo dando origem a colorao avermelhada, que pde ser
observada nos tubos contendo glicose, frutose, maltose, lactose e arabinose.
A glicose, caracteriza-se por sua capacidade redutora e apresenta o
grupo carbonila livre. Por ser uma aldose, sofre oxidao, tornando-se cido
carboxlico, doando ento eltrons para o on cprico Cu 2+ ,que reduzido a
on cuproso Cu+ , o que faz com que haja mudana na colorao da soluo,
tornando-a avermelhada.
A frutose, apresenta um grupo cetnico livre, onde o processo de reduo
semelhante ao da glicose; a maltose, um dissacardeo formado pela unio de
duas molculas de glicose, possui, um grupo aldedico livre, que lhe d
propriedades redutoras; a lactose, que tambm um dissacardeo, formada por
glicose e galactose, unidos por uma ligao glicosdica e, a arabinose, uma
aldopenttose, tambm apresentaram colorao avermelhada.
Pelo fato de no ser um carboidrato ou apresentar grupos orgnicos que
podem ser oxidados, a gua destilada no reduziu o on cprico mantendo a
colorao da prp ria soluo do reagente de Fehling. O reagente de Fehling
tambm se apresentou com colorao azulada na soluo de sacarose,
decorrente da ligao glicosdica entre os grupos funcionais redutores dos
monossacardeos pelos quais formada (glicose e frutose), o que impede a
doao de eltrons para o Cu2+.. Da mesma maneira, no ocorreu mudana
de colorao na soluo de amido. O amido um polmero formado por
milhares de molculas de glicose. Embora sendo um acar redutor, os grupos
funcionais que conferem a glicose essas caractersticas esto realizando
ligaes glicosdicas impedindo que haja oxidao desses grupos por parte dos
ons do reagente de Fehling.

Tabela 1. Resumo geral dos resultados do experimento

CARBOIDRATO REAGENTES OBSERVAO

1 mL de soluo de reativos de
gua destilada (1ml) Colorao azul escura
Fehling A e B
1 mL de soluo de reativos de
Glicose (1ml) Colorao avermelhada
Fehling A e B
1 mL de soluo de reativos de
Frutose( 1ml) Colorao avermelhada
Fehling A e B
1 mL de soluo de reativos de
Maltose (1ml) Colorao avermelhada
Fehling A e B
1 mL de soluo de reativos de
Lactose( 1ml) Colorao avermelhada
Fehling A e B
1 mL de soluo de reativos de
Sacarose (1ml) Colorao azul escura
Fehling A e B
1 mL de soluo de reativos de
Arabinose (1ml) Colorao avermelhada
Fehling A e B
1 mL de soluo de reativos de
Amido (1ml) Colorao azul escura
Fehling A e B
Fonte: Elaborao dos autores.
4.2. EXPERIMENTO 2: REAO DE SELIWANOFF DIFERENCIAO DE
ALDOSE E CETOSE
Para a realizao desse experimento, foram separados 3 tubos de
ensaio, numerados de 1 a 3. Foi adicionado 1 ml de soluo de Seliwanoff em
cada um e em seguida 3 gotas de gua destilada no tubo 1, 3 gotas de soluo
de frutose (uma cetose) no tubo 2 e 16 gotas de soluo de glicose (uma
aldose) no tubo 3. Em seguida, os tubos foram colocados em banho maria
fervente por 1 minuto, retirados e observados (figura 5); e retornaram por mais
5 minutos (figura 6).
Os monossacardeos fazem parte do grupo mais simples de
carboidratos, so exemplos deles a frutose e a glicose. Todos eles apresentam
em sua composio o grupamento carbonila (-C=O), quando est presente na
extremidade, caracteriza o grupo funcional adedo e o acar passa ser
chamado de aldose; se estiver no meio da cadeia, entre carbonos, caracteriza
uma cetona e o acar denominado cetose.
Por possurem uma grande quantidade de grupamentos hidroxilas (-OH),
os monossacardeos podem ser facilmente desidratados pela ao de cidos
fortes; eles quebram as ligaes glicosdicas e desidratam, tendo como
produto, o furfural, no caso de uma pentose (frutose), e o hidroximetilfurfural
(HMF) nas hexoses (glicose). Ambos os produtos so incolores, e para se
tornarem visveis necessria adio de um composto fenlico. A formao
do furfural mais fcil que a do hidroximetilfurfural, logo, a reao com a
cetose (frutose) mais rpida e mais intensa.
A reao de Seliwanoff um teste qumico que vai distinguir aldoses de
cetoses. Tem como reagentes: o cido que causar a desidratao do
carboidrato, que o cido clordrico (HCl), e o ressorcinol, cujo fenol reage
como o furfural e HMF. A reao positiva dada pelo aparecimento da
colorao avermelhada.
Aps 1 minuto em banho maria fervente (figura 5), o tubo 1, com gua
destilada, apresentou colorao inalterada, pois no forma os compostos
necessrios para reagir com o fenol. O tubo 2, com frutose, apresentou a
colorao levemente avermelhada em decorrncia da ao do ressorcinol em
seus compostos furfricos. O tubo 3 com glicose no apresentou mudanas na
colorao.
Passados mais 5 minutos em banho maria fervente (figura 6), o tubo 1
permaneceu com colorao inalterada. O tubo 2 apresentou colorao ainda
mais avermelhada. E o tubo 3 comeou a apresentar colorao rosada, devido
menor velocidade de reao.

Figura 5. Tubos de ensaio1, 2 e 3 aps 1 minuto em banho maria fervente.

Fonte: Arquivo dos autores.

Figura 6. Tubos de ensaio 1, 2 e 3 aps 1 minuto mais 5 em banho maria

fervente.
 Fonte: Arquivo dos autores.
5. CONCLUSO:
Os experimentos realizados, ajudaram no entendimento do mecanismo
de reao dos carboidratos e das consequncias acarretadas pelas ligaes
glicosdicas.

No Experimento 1, os resultados mostraram que, um monossacardeo pode

reduzir o Cu+2 a Cu+1, adquirindo colorao em tom de vermelho tijolo,
enquanto dissacardeos e polissacardeos, que no possuem ao redutora,
decorrente do fato de seus grupos funcionais estarem tomados de ligaes
glicosdicas, no apresentaram mudanas em sua colorao inicial.
Sendo assim, para que um efeito positivo seja obtido em reaes com essas
duas ultimas moleculas, elas precisam ser hidrolisadas.

No Experimento 2, a diferena de aldoses e cetoses pde ser observada a

partir da condensao dos derivados do furfural juntamente ao resorcinol, que
resultou num composto avermelhado.
Os dois experimentos ocorreram dentro do tempoprevisto e os
resultados obtidos condizem com os resultados esperados.
Isto posto, foi possvel comprovar, na prtica, o que aprendemos na teoria e
assim, entender o comportamentos dos carboidratos expostos em ambientes
que facilitem a sua oxidao.

6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS:
1. NELSON, David L; COX, Michael M.. Princpios de Bioqumica de
Lehninger. 6. ed. Porto Alegre. Artmed, 2014.
2. JUNIOR, Wilmo. Carboidratos: Estrutura, Propriedades e Funes. Qumica
Nova na Escola, n 29, agosto/2008. Disponvel em:
http://qnesc.sbq.org.br/online/qnesc29/03-CCD-2907.pdf. Acesso em: 24/11/16 s 19:55
 3. Maltose. Disponvel em: https://pt.wikipedia.org/wiki/Maltose. Acesso em:
24/11/16 s 20:34
4. Relatrio Bioqumica - Anlise Qualitativa de Carboidratos. Disponvel em:
http://pt.slideshare.net/lariipuchima/pratica-6-15378215. Acesso em: 24/11/16 s 00:08
5. Prtica Disponvel em:
http://www.ebah.com.br/content/ABAAAfe9MAF/relatorio-bioquimica-analise-
qualitativa-carboidratos. Acesso em: 24/11/16 s 00:09
6. Introduo aos Carboidratos: Monossacardeos - Disponvel em:
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/introducao_carboidratos/introducao_ch.
htm. Acessado em:
7. Prtica: Reaco de Seliwanoff Disponvel em:
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_ch/seliwanoff.htm Acessado
em: 25/11/16 s 23:24
8. Prtica: Reao de Molish Disponvel em:
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_ch/molisch.htm Acessado em:
25/11/16 s 23:45
9. POMIN, Vitor Hugo; MOURO, P. A. S. Carboidratos. Cincia Hoje, v. 35, n. 233, p. 24-
35, 2006.

7. APNDICE A Fotografias dos experimentos:

Figura 7. Solues compostas incialmente com reativos de Fehling.

Fonte: Arquivo dos autores.

Figura 8. Solues de carboidratos aps banho Maria com reativos de Fehling.

Fonte: Arquivo dos autores.