See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/336986284

Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak n-Heksana, Etil Asetat, Metanol Daun dan
Akar Bakau Merah (Rhyzophora stylosa) dengan Metode DPPH

Article · March 2019

DOI: 10.18860/al.v7i1.7934

CITATIONS READS

0 230

3 authors, including:

Ahmad Ghanaim Fasya

Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang
36 PUBLICATIONS   58 CITATIONS   

SEE PROFILE

Some of the authors of this publication are also working on these related projects:

Monolith organic View project

Phytoremediation by Hydrilla verticillata (L.f.) Royle Ranu Grati Lake Pasuruan with Lead Concentration Variations View project

All content following this page was uploaded by Ahmad Ghanaim Fasya on 23 December 2019.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

ALCHEMY : JOURNAL OF CHEMISTRY

Artikel Penelitian

Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak n-Heksana, Etil Asetat, Metanol Daun dan Akar Bakau
Merah (Rhyzophora stylosa) dengan Metode DPPH
Ahmad Hanapi, A. Ghanaim Fasya*, Abdan Syakuro

Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim, Malang, Indonesia, 65144

INFO ARTIKEL ABSTRAK

Riwayat Artikel Red mangrove (Rhizophora stylosa) is one of the mangrove species which is
Diterima 15 Mei 2019 abundance in the coast of Java. The mangrove contains a lot of active
Direvisi 10 Juni 2019 compounds that is potent as antioxidant. The objective of this study was to
Tersedia online 30 Agustus 2019 determine antioxidant activity of n-hexane, ethyl acetate, and methanol extract of
red mangrove leaves and roots using DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)
method. Active compound extraction of red mangrove is conducted by gradual
maceration. According to phytochemical analysis, crude root extract showed the
presence of flavonoids, tannins, and steroids/triterpenoids, while crude leave
* Email penulis korespondensi: extract showed the presence of alkaloids, flavonoids, tannins, saponins, and
steroids/triterpenoids. EC50 value of methanol extract from red mangrove leaves
[email protected]
and roots was 5.01 and 2.55 ppm, respectively, whilst of ethyl acetate extracts
from red mangrove leaves and roots was 89.94 and 8.51 ppm, respectively.
Crude extract n-hexane has antioxidant activity 33.14 ppm (EC50). Roots and
leaves extracts have high activity of antioxidant.

Keywords: Antioxidant, red mangrove, DPPH method

Bakau merah (Rhizophora stylosa) merupakan salah satu spesies bakau yang
keberadaannya sangat melimpah di pesisir pantai Pulau Jawa dan mengandung
banyak senyawa aktif yang berpotensi sebagai antioksidan. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui aktifitas antioksidan ekstrak n-heksana, etil-asetat,
metanol pada akar dan daun bakau merah menggunakan metode DPPH.
Ekstraksi senyawa aktif pada akar dan daun dilakukan dengan metode maserasi
bertingkat menggunakan n-heksana, etil asetat dan metanol. Ekstrak kasar
dilakukan uji fitokimia dan aktivitas antioksidannya menggunakan metode DPPH
(1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Hasil pengujian fitokimia dari ekstrak kasar akar
menunjukkan adanya senyawa flavonoid, tanin, dan steroid/triterpenoid,
sedangkan ekstrak kasar daun menunjukkan adanya alkaloid, flavonoid, tanin,
saponin, dan steroid/triterpenoid. Nilai EC50 (Efficient Concentration) ekstrak
metanol daun dan akar berturut-turut sebesar 5,01 dan 2,55 ppm, sedangkan
ekstrak etil-asetat daun dan akar berturut-turut sebesar 89,94 dan 8,51 ppm.
Adapun ekstrak n-heksana daun menghasilkan nilai EC50 sebesar 33,14 ppm.
Ekstrak akar dan daun bakau merah memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi.

Kata kunci: Antioksidan, bakau merah, metode DPPH

 Hanapi dkk. / ALCHEMY: JOURNAL OF CHEMISTRY, 7 : 1 (2019) 20-24

1. Pendahuluan
Indonesia memiliki ekosistem bakau (mangrove forest) yang luas yaitu ± 2,5 juta ha melebihi Brazil (±1,3 juta ha),
Nigeria (± 1,1 juta ha) dan Australia (± 0,97 juta ha) [1]. Jenis bakau yang banyak ditemukan antara lain api-api
(Avicennia sp.), bakau (Rhyzophora sp.), tancang (Bruguiera sp.) dan bogem/pedada (Sonneratia sp.) [2]. Tanaman
bakau yang telah lama dimanfaatkan dan dibudidayakan adalah bakau merah (Rhyzophora stylosa). Hal ini dikarenakan
banyak kandungan metabolit sekunder yang bermanfaat didalamnya yang berpotensi sebagai obat. Senyawa metabolit
sekunder yang ada pada bakau merah adalah asam karboksilat alifatik, asam lemak, flavoglycans, hidrokarbon, garam-
garam anorganik, inositol, dan steroid [3].
Penelitian Vadlapudi dan Naidu [4] menunjukkan bahwa daun bakau api-api putih yang merupakan kerabat dekat
bakau merah memiliki aktivitas antioksidan. Priyanto [5] juga mengemukakan ekstrak metanol bakau kurap (Rhizophora
mucronata Lamck.) berpotensi sebagai antioksidan alami dengan nilai IC50 sebesar 0,72 ppm dan mengandung senyawa
aktif berupa flavonoid, tanin, fenol, hidrokuinon, dan saponin. Pada penelitian ini, ekstraksi senyawa aktif bakau merah
dilakukan dengan maserasi bertingkat menggunakan tiga pelarut yaitu n-heksana, etil asetat, dan metanol. Hutabarat [6]
menjelaskan bahwa rendemen ekstrak buah bakau merah dengan pelarut n-heksana, etil asetat, metanol berturut-turut
sebesar 3,45; 0,36 dan 0,13 %.
Bakau merah adalah salah satu jenis bakau yang menyerap air tetapi mampu mencegah masuknya garam melalui
saringan yang terdapat pada akar. Menurut Basyuni dkk. [7], senyawa triterpenoid memainkan peranan penting untuk
melindungi bakau merah dari pengaruh garam. Selain itu, daun bakau merah yang menjadi tempat terjadinya fotosintesis
juga mengandung banyak metabolit sekunder. Hal ini dikuatkan oleh pernyataan Hardiningtyas dkk. [8] bahwa kerabat
dekat Rhyzophora yaitu bakau api-api putih mengandung steroid/triterpenoid pada daunnya. Adanya kandungan
steroid/terpenoid pada bakau merah ini yang mendasari untuk dilakukan pengujian antioksidan.
Antioksidan didefinisikan sebagai suatu substansi yang dapat menunda, mencegah atau menghilangkan kerusakan
oksidatif pada molekul target. Molyneux [9] mengemukakan bahwa metode uji DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil)
merupakan salah satu metode yang paling banyak digunakan untuk memperkirakan efisiensi kinerja dari substansi yang
berperan sebagai antioksidan. Antioksidan berdasarkan sumbernya terdiri dari dua golongan yaitu antioksidan sintetik
dan antioksidan alami yang merupakan hasil isolasi bahan alam [10].
Hutabarat [6] menyatakan ekstrak kasar etil asetat buah bakau merah memiliki IC50 sebesar 79,71 ppm dan ekstrak
metanol kulit batang Sonneratia alba (kerabat dekat Rhyzoporaceae) memiliki IC50 sebesar 12,2 ppm. Nilai aktivitas
ekstrak metanol tersebut lebih tinggi dibandingkan asam askorbat (kontrol positif) dengan IC 50 sebesar 17,64 ppm. Pada
penelitian ini dilakukan uji aktivitas antioksidan ekstrak akar dan daun bakau merah menggunakan pelarut n-heksana, etil
asetat dan metanol dengan metode DPPH.

2. Bahan dan Metode

2.1. Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah akar dan daun bakau merah (Rhyzophora stylosa) yand diambil
dari Kawasan Ekowisata Bakau Surabaya. Bahan kimia yang digunakan diantaranya n-heksana 98% (Merck), etil asetat
p.a. (Merck), metanol 99,9% (Merck), etanol 96% (Merck), BHT (butil hidroksil toluena) dan DPPH (1,1-difenil-2-
pikrilhidrazil) (Merck).
2.2. Uji Taksonomi
Identifikasi sampel bakau merah dilakukan secara kualitatif dengan menggunakan kajian pustaka di Laboratorium
Fisiologi tumbuhan Jurusan Biologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.
2.3. Preparasi Sampel
Akar dan daun bakau merah sebanyak 5 kilogram dibersihkan, diiris kecil-kecil, dan dikeringkan dengan freeze
dryer selama 24 jam. Sampel yang sudah kering dihaluskan hingga didapatkan serbuk akar dan daun bakau merah [11].
2.4. Uji Kadar Air
Sampel akar dan daun bakau merah sebanyak 5 gram dimasukkan dalam cawan porselen yang sudah diketahui
berat konstannya, kemudian dioven pada suhu 100-105°C dan didinginkan dalam desikator. Perlakuan ini diulangi
sampai berat konstan. Kadar air pada akar dan daun bakau merah ditentukan menggunakan Persamaan (1) [12].
B-C
Kadar air = x 100% (1)
B-A
21
 Hanapi dkk. / ALCHEMY: JOURNAL OF CHEMISTRY, 7 : 1 (2019) 20-24

Dimana A adalah bobot cawan kosong, B adalah bobot sampel dan cawan sebelum dikeringkan, dan C adalah bobot
sampel dan cawan yang telah dikeringkan.
2.5. Ekstraksi Maserasi
Sampel akar dan daun bakau merah sebanyak 50 gram diekstraksi secara maserasi bertingkat menggunakan
pelarut n-heksana selama 24 jam disertai pengocokan dan penyaringan. Perbandingan antara sampel dan pelarut
berbeda untuk setiap sampel, yakni 1:10 untuk sampel akar dan 1:5 untuk sampel daun. Ampas yang telah diperoleh
selanjutnya dimaserasi dengan menggunakan pelarut etil asetat dengan perlakuan yang sama. Ampas hasil ekstraksi
dengan etil asetat dimaserasi kembali menggunakan metanol. Ketiga filtrat yang diperoleh hasil penyaringan dipekatkan
menggunakan rotary evaporator [6]. Ekstrak pekat yang diperoleh ditentukan nilai rendemennya dengan Persamaan (2).

Berat ekstrak
Rendemen (%) = x 100% (2)
Berat sampel

2.5. Uji Fitokimia

Uji kandungan senyawa aktif dilakukan dengan uji fitokimia. Pengujian ini dilakukan untuk mengetahui ada tidaknya
komponen-komponen bioaktif yang terdapat pada ekstrak kasar akar dan daun bakau merah. Uji fitokimia dilakukan pada
senyawa alkaloid, steroid/triterpenoid, flavonoid, saponin dan tanin [13].
2.6. Uji Aktivitas Antioksidan
Pengujian aktivitas antioksidan diawali dengan menentukan panjang gelombang maksimum. Larutan DPPH 0,1 mM
sebanyak 6 mL didiamkan selama ± 10 menit. Larutan kemudian ditentukan panjang gelombang maksimumnya. Nilai
panjang gelombang ini akan digunakan untuk tahap selanjutnya [14].
Pengukuran aktivitas antioksidan pada semua ekstrak dilakukan dengan variasi konsentrasi 5, 10, 15, 20, 25, 30
ppm, terkecuali pada ekstrak etil asetat daun. Variasi konsentrasi ekstrak etil asetat daun adalah 1, 10, 50, 100, dan 200
ppm. Sampel sebanyak 6,75 mL dari masing-masing konsentrasi dan ditambahkan 2,25 mL DPPH 0,1 mM. Kemudian,
sampel diinkubasi pada suhu 37ºC selama 30 menit untuk selanjutnya diukur absorbansinya pada panjang gelombang
maksimum. BHT digunakan sebagai kontrol positif pada penelitian ini.
Kapasitas antioksidan ditentukan menggunakan nilai EC50 (Efficient Concentration). Nilai ini menyatakan besarnya
konsentrasi larutan sampel yang dibutuhkan untuk mereduksi radikal bebas DPPH sebesar 50%. Nilai EC 50 diperoleh
dengan menghubungkan antara konsentrasi sampel dan aktivitas antioksidan menggunakan program GraphPad Prism 6
[9, 15, 16].

3. Hasil dan Pembahasan

3.1. Identifikasi Sampel
Hasil identifikasi sampel menunjukkan bahwa sampel termasuk dalam golongan keluarga Rhyzoporaceae dengan
spesies Rhyzophora stylosa Griff dan nama lokal bakau merah.
3.2. Uji Kadar Air
Kadar air bakau merah pada akar dan daun basah berturut-turut sebesar 33,81 dan 45,87%, sedangkan kadar air
pada akar dan daun kering berturut-turut sebesar 9,45% dan 4,27%. Nurmillah [17] mengungkapkan kadar air maksimum
untuk memenuhi syarat maserasi yaitu <10%. Sampel akar memiliki kadar air yang tinggi karena pada habitat tumbuhnya
akar terendam oleh air laut sehingga banyak menyerap air daripada daun yang tumbuhnya di atas permukaan air laut.
3.3. Ekstraksi Maserasi
Ekstrak metanol pada akar dan daun memiliki rendemen yang paling tinggi dibandingkan ekstrak n-heksana dan etil
asetat (Tabel 1). Hal ini terjadi karena senyawa metabolit sekunder berada dalam bentuk ikatan glikosida yang terikat
pada gugus gula sehingga cenderung untuk bersifat polar dan lebih mudah terekstrak dalam pelarut yang bersifat polar
pula.
3.4. Uji Fitokimia Bakau Merah
Berdasarkan uji fitokimia pada bakau merah diketahui bahwa ekstrak n-heksana daun mengandung senyawa
steroid/terpenoid, sedangkan ekstrak n-heksana akar tidak dilakukan pengujian. Ekstrak etil asetat baik pada akar
maupun daun masing-masing mengandung senyawa flavonoid dan steroid/terpenoid. Selain flavonoid dan
22
 Hanapi dkk. / ALCHEMY: JOURNAL OF CHEMISTRY, 7 : 1 (2019) 20-24

steroid/terpenoid, ekstrak etil asetat pada daun juga mengandung tanin. Pada akar, ekstrak metanol mengandung
flavonoid dan tanin, sedangkan pada daun ekstrak metanol mengandung semua metabolit sekunder yang meliputi
alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, dan steroid/terpenoid.

Tabel 1. Rendemen Ekstrak Akar dan Daun Bakau Merah

Rendemen (%)
Ekstrak
Akar Daun
n-Heksana 0,52 4,53
Etil asetat 1,02 7,09
Metanol 20,45 18,60
Perbandingan antara sampel dan pelarut untuk sampel akar adalah 1:10, sedangkan untuk
sampel daun adalah 1:5.

3.5. Uji Aktivitas Antioksidan

Pengujian kemampuan antioksidan ekstrak ditunjukkan dengan nilai EC50. Semakin kecil nilai EC50 maka semakin
besar ekstrak bakau merah sebagai antioksidan. Gambar 1 menunjukkan bahwa ekstrak metanol pada akar dan daun
menghasilkan EC50 masing-masing sebesar 2,55 dan 5,01 ppm. Nilai EC50 ekstrak etil asetat akar dan ekstrak n-heksana
daun berturut-turut adalah 8,51 dan 33,14 ppm.

Gambar 1. Aktivitas antioksidan pada ekstrak bakau merah dan BHT yang ditunjukkan dengan nilai EC 50. Panjang
gelombang maksimum yang digunakan adalah 514 nm.

Berbeda dengan ekstrak yang lainnya, ekstrak etil asetat pada daun menunjukkan nilai EC50 yang cukup tinggi yaitu
89,94 ppm. Pengujian kapasitas antioksidan tidak dilakukan pada ekstrak n-heksana akar karena jumlah ekstrak yang
diperoleh sedikit. Blois [18] menyebutkan suatu ekstrak dikatakan berpotensi sangat kuat sebagai antioksidan apabila
memiliki EC50 kurang dari 50 ppm dan berpotensi kuat sebagai antioksidan apabila memiliki EC 50 sebesar 50-100 ppm.
Berdasarkan pernyataan tersebut, empat ekstrak bakau merah (ekstrak metanol daun, metanol akar, etil asetat akar dan
n-heksana daun) memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat.
Pengujian aktivitas antioksidan ekstrak bakau merah dibandingkan dengan BHT sebagai kontrol positif bertujuan
untuk mengetahui efektifitas antioksidan alami (ekstrak bakau merah) terhadap antioksidan sintetik (BHT). Ekstrak
metanol pada akar dan daun memiliki nilai EC50 yang lebih kecil dibandingkan dengan BHT. Ekstrak bakau merah baik
akar maupun daun dapat digunakan sebagai antioksidan alternatif dari bahan alam.

23
 Hanapi dkk. / ALCHEMY: JOURNAL OF CHEMISTRY, 7 : 1 (2019) 20-24

4. Kesimpulan
Aktivitas antioksidan ekstrak metanol dan etil asetat akar bakau merah (Rhyzophora stylosa) dengan nilai EC50
berturut-turut sebesar 2,55 dan 8,51 ppm, sedangkan ekstrak metanol, etil-asetat, dan n-heksana daun berturut-turut
sebesar 5,01; 89,94 dan 33,14 ppm. Berdasarkan nilai EC50 yang diperoleh, ekstrak bakau merah berpotensi kuat
sebagai antioksidan alami.

Daftar Pustaka
[1] Y. R. Noor, M. Khazali, & I. N. N. Suryadiputra, Panduan Pengenalan Mangrove di Indonesia. Bogor: Wetlands
International Indonesia Programme, 1999.
[2] D. G. Bengen, Pedoman Teknis Pengenalan dan Pengelolaan Ekosistem Mangrove Cetakan ke-2. Bogor: Pusat
Kajian Sumberdaya Pesisir dan Lautan, Institut Pertanian Bogor, 2000.
[3] W. M. Bandaranayake, “Bioactivities, Bioactive Compounds and Chemical Constituents of Mangrove Plants,”
Wetlands Ecology and Management, vol. 10, pp. 421–452, 2002.
[4] V. Vadlapudi, & K. C. Naidu, “Evaluation of Antioxidant Potential of Selected Mangrove Plants,” Journal of Pharmacy
Research, vol. 2, no. 11, pp. 1742-1745, 2009.
[5] R. A. Priyanto, “Aktivitas Antioksidan dan Komponen Bioaktif pada Buah Bakau (Rhizophora mucronata Lamk.),”
Skripsi, Institut Pertanian Bogor, Bogor, 2012.
[6] R. H. Hutabarat, “Aktivitas Antihiperglikemik dan Antioksidan Buah Bakau Merah (Rhizophora stylosa Griff.),”
Skripsi, Institut Pertanian Bogor, Bogor, 2014.
[7] M. Basyuni, S. Baba, Y. Kinjo, & H. Oku, “Salinity Increases the Triterpenoid Content of a Salt Secretor and a Non
Secretor Mangrove, Aquatic Botany, vol. 97, no. 1, pp. 17-23, 2012.
[8] S. D. Hardiningtyas, S. Purwaningsih, & E. Handaryani, “Aktivitas Antioksidan dan Efek Hepatoprotektif Daun Bakau
Api-Api Putih,” Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia, vol. 17, no. 1, 2014.
[9] P. Molyneux, “The Use of the Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant
Activity,” Songklanakarin Journal of Science and Technology, vol. 26, no. 2, pp. 211-219, 2003.
[10] D. Rohdiana, “Aktivitas Daya Tangkap Radikal Polifenol dalam Daun Teh”, Majalah Jurnal Indonesia, vol. 12, pp.
53-58, 2001.
[11] L. E. Garcia-Amezquita, J. Welti-Chanes, F. T. Vergara-Balderas, & D. Bermúdez-Aguirre, “Freeze-Drying: The
Basic Process,” Encyclopedia of Food and Health, pp. 104-109, 2016.
[12] AOAC, Official Methods of Analysis. Washington: Association of Official Analytical Chemists, 1995.
[13] J. B. Harbone, Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Bandung: Penerbit ITB, 1987.
[14] D. Rahayu & S. D. Hastuti, “Stabilitas Saponin Sebagai Antioksidan Alami Hasil Isolasi Gel Daun Aloe barbadensis
Miller pada Variasi Suhu dan Lama Simpan,” Jurnal Farmasi, vol. 1, no. 1, pp. 1-15, 2009.
[15] S. K. Bariyyah, “Uji Aktivitas Antioksidan terhadap DPPH dan Identifikasi Golongan Senyawa Aktif Ekstrak Kasar
Mikroalga Chlorella sp. Hasil Kultivasi dalam Medium Ekstrak Tauge,” Skripsi, Universitas Islam Negeri Maulana
Malik Ibrahim, Malang, 2013.
[16] Ernawati, “Identifikasi Awal dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Teripang Pasir (Holothuira scabra) Pesisir
Pamekasan dengan Metode DPPH,” Skripsi, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim, Malang, 2013.
[17] O. Y. Nurmillah, “Kajian Aktivitas Antioksidan dan Antimikroba Ekstrak Biji, Kulit Buah, Batang dan Daun Tanaman
Jarak Pagar (Jatropha curcas L.),” Skripsi, Institut Pertanian Bogor, Bogor, 2009.
[18] S. M. Blois, “Antioxidant Determination by the Use of Stable Free Radicals,” Nature, vol. 181, pp. 1199-2000, 1958.

24

View publication stats