DOI: http://dx.doi.org/10.17969/jtipi.v6i3.

2315

http://Jurnal.Unsyiah.ac.id/TIPI

Jurnal Teknologi dan Industri Pertanian Indonesia

Open Access Journal

PRODUKSI DAN KARAKTERISASI ENZIM SELULASE EKSTRAK KASAR DARI BAKTERI YANG
DIISOLASI DARI LIMBAH RUMPUT LAUT

PRODUCTION AND CHARACTERIZATION CELLULOSE ENZYME CRUDE EXTRACT FROM

BACTERIA ISOLATED FROM SEAWEED WASTE

Isna Rahma Dini1*, Ifah Munifah2

INFO ARTIKEL
ABSTRACT
Submit: 1 Agustus 2014
Seaweed waste is a source of bacteria that can produce cellulase enzyme. PMP 0126w isolate is one
Perbaikan: 4 September 2014
Diterima: 9 September 2014 collection isolate of BBP4BKP obtained from seaweed Glacilaria sp waste from Pameungpeuk area,
Garut, West Java. The aims of this research were to produce and characterize the cellulase enzyme.
PMP 0126w isolate was a Gram-positive rod shape bacteria. The isolate had 0.8 cellulolytic index
Keywords:
on Carboxymethyl Cellulose (CMC) agar medium. The highest cellulase activity obtained on the
cellulose, characterization, third day of fermentation time with a cellulase activity of 0,074 U/mL and specific activity of 0.092
production, seaweed waste
U/mg. Optimum activity of the cellulase enzyme crude extract was pH 5 and 30 0C. The activity of
the cellulase was increased by addition of 5 mM CaCl2 and 10 mM FeCl3 ions and decreased by the
addition of 10 mM ZnCl2 ions. The cellulase with the highest activity of 0.237 U/mL was obtained
from Glacilaria sp. seaweed waste treated with NaOH 6%.

Peningkatan pengolahan rumput laut

1. PENDAHULUAN
Glacilaria sp. menjadi agar-agar dapat
Perkembangan industri berbasis hayati dengan menimbulkan masalah pencemaran karena limbah
memanfaatkan senyawa biologi seperti enzim selulosa tersebut sangat sulit larut dalam air. Salah
yang berasal dari mikroorganisme seperti bakteri satu alternatif yang dapat dilakukan ialah dengan
dan kapang terus ditingkatkan di berbagai negara. mengisolasi bakteri dari limbah rumput laut.
Salah satu sumber isolat bakteri penghasil enzim Bakteri yang hidup pada limbah ini diduga dapat
yaitu limbah hasil pengolahan rumput laut. menghasilkan enzim yang dapat menguraikan
Pengolahan agar-agar memanfaatkan rumput laut limbah selulosa menjadi sumber nutrisi untuk
jenis Glacilaria sp., sedangkan karagenan pertumbuhannya. Enzim yang dihasilkan oleh
menggunakan rumput laut jenis Eucheuma sp. bakteri tersebut diharapkan dapat menghidrolisis
Berbagai industri rumput laut yang dilakukan limbah selulosa menjadi glukosa. Glukosa
menghasilkan limbah sekitar 65-75% dari bahan merupakan bahan untuk fermentasi dalam
baku segar yang diolah (Kim et al., 2008). memproduksi bioetanol, sehingga pemanfaatan
limbah selulosa dan bakteri penghasil enzim
penghidrolisis selulosa dapat memberikan
1)Program
peluang pada pengembangan bioenergi.
Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Riau,
Kampus Bina Widya, Pekanbaru, Indonesia Enzim selulase adalah suatu sistem enzim yang
2)Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Pengolahan Produk dan terdiri atas tiga tipe enzim utama yaitu kompleks
Bioteknologi Kelautan dan Perikanan (BBP4BKP) endo--1,4-glukanase (CMCase, Cx selulase
*email: [email protected]
endoselulase, atau carboxymethylcellulase),
kompleks ekso--1,4-glukanase (aviselase,

JURNAL TEKNOLOGI DAN INDUSTRI PERTANIAN INDONESIA Vol. 06 , No. 03 , 2014

Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Syiah Kuala
selobiohidrolase, C1 selulase), dan -1,4- suhu rendah (Beckman Coulter TM Microfuge
glukosidase atau selobiase (Crueger and Crueger, 22 R Centrifuge), timbangan analitik (Mettler
1984). Selanjutnya Kulp (1984) menambahkan Toledo Model : ML204/02 Type New Classic MF),
bahwa enzim selulase adalah enzim yang dapat timbangan digital (Mettler PE 360 Deltra
menghidrolisis selulosa dengan memutus ikatan Range), pemanas air kompor listrik (Maspion),
glikosidik -1,4 dalam selulosa, selodektrin, vorteks (Thermolyne maxi mix plus), tabung
selobiosa, dan turunan selulosa lainnya menjadi mikro, autoklaf (Hirayama Tokyo Japan), oven
gula sederhana atau glukosa. (Sanyo), inkubator (GallenKamp), inkubator
Selain dalam bidang industri, pemanfaatan statis/goyang (Shel Lab), mikropipet 10 mL, 1 mL,
enzim selulase dari bakteri dapat memberikan 200 L, dan 20 L (NICHIRYO Tokyo Japan),
solusi dalam masalah pencemaran yakni lemari pendingin, dan batang pengaduk.
mengurangi jumlah limbah selulosa seperti
rumput laut serta dapat menjadi nilai tambah B. Peremajaan dan Pengamatan Morfologi
terhadap pemanfaatan limbah rumput laut Isolat PMP 0126w
tersebut. Pada akhirnya beberapa isolat bakteri Isolat PMP 0126w diremajakan dalam media
yang memiliki aktivitas selulase ekstraseluler nutrien agar (NA) dan diinkubasi pada suhu 37 0C
salah satunya isolat PMP 0126w berhasil diisolasi selama 1 x 24 jam. Kemudian, dilakukan
dari limbah pengolahan agar-agar rumput laut pewarnaan Gram untuk mengetahui morfologi
Glacilaria sp. dari daerah Pameungpeuk, Subang isolat PMP 0126w.
Jawa Barat (Munifah et al., 2011). Oleh sebab itu,
penelitian ini bertujuan untuk memproduksi dan C. Uji Kualitatif Enzim Selulase
mengkarakterisasi enzim selulase dari isolat Uji kualitatif selulase dilakukan
bakteri PMP 0126w. berdasarkan metode dari Kader dan Omar (1998),
di mana :
Indeks selulolitik =
2. MATERIAL DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium
Bioteknologi Balai Besar Penelitian dan
Pengembangan Pengolahan Produk dan D. Penentuan Waktu Optimum Aktivitas Enzim
Bioteknologi Kelautan dan Perikanan (BBP4BKP), Selulase
dari bulan Februari 2011-Februari 2012. Penentuan waktu optimum produksi enzim
selulase diawali dengan penentuan waktu
A. Bahan dan Alat penuangan inokulum. Hal ini dilakukan agar dapat
Bahan yang digunakan pada penelitian ini diketahui waktu pertumbuhan eksponensial
antara lain ialah isolat PMP 0126w koleksi dari bakteri pada inokulum yang akan digunakan.
BBP4BKP hasil isolasi dari limbah pengolahan Penentuan waktu inokulum dilakukan dengan
rumput laut Glacilaria sp. dari daerah mengkultur 2 lup isolat di dalam 10 mL kaldu
Pameungpeuk Jawa Barat. Beberapa bahan kimia nutrien dan diinkubasi selama 12-14 jam,
yang digunakan dalam penelitian ini yaitu agar- kemudian dituang ke dalam 50 mL media cair
agar nutrien (NA), kaldu nutrien (NB), CMC. Kultur diinkubasi pada suhu 30 0C di dalam
Carboxymethyl Cellulose (CMC), MgSO4.7H2O, penangas goyang dengan kecepatan agitasi 150
K2HPO4, FeSO4.7H2O, CaCl2.2H2O, ekstrak khamir, rpm. Pengambilan sampel dilakukan selama 27
NH4NO3, KH2PO4, glukosa. Bahan kimia lain yang jam inkubasi dengan rentang waktu sampling 3
digunakan antara lain yaitu bovine serum albumin jam untuk diukur nilai Optical Density (OD) pada
(BSA) standar, sodium tartarat, asam panjang gelombang 600 nm. Setelah itu, dibuat
dinitrosalisilat (DNS), bufer sitrat-fosfat, bufer kurva pertumbuhan bakteri untuk menentukan
asetat, bufer tris-HCl, NaCl, etanol, merah kongo. waktu yang terbaik pada penuangan inokulum
Alat yang digunakan antara lain : pada media produksi.
laminar/transfer box (Labconco), jarum tanam Selanjutnya dilakukan penentuan waktu
bulat (ose), jarum tanam tajam, marker OHP optimum aktivitas enzim selulase. Sebanyak 5 mL
permanen, penggaris, gunting, pemantik api kaldu nutrien yang telah mengandung biakan sel
mekanik, cawan petri steril, tabung reaksi, tabung diinokulasikan ke dalam 25 mL media inokulum
erlenmeyer, gelas beaker, gelas ukur, pembakar yang mengandung glukosa 0,1%. Inokulum
spritus, botol alkohol, spatel Drygalski, Colony tersebut dituang ke dalam 250 mL media produksi
counter (Chiltern), spektrofotometer UV tanpa glukosa (sebanyak 10% dari media
(Spectronic 20 Genesys TM), sentrifus mikro produksi). Waktu penuangan inokulum dilihat
JURNAL TEKNOLOGI DAN INDUSTRI PERTANIAN INDONESIA Vol. 06, No. 03 , 2014
70 Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Syiah Kuala
 dari waktu pertumbuhan eksponensial bakteri E. Produksi dan Karakterisasi Enzim Ekstrak
(fase pertumbuhan logaritmik) yang telah Kasar Selulase
diketahui dari kurva pertumbuhan bakteri. Produksi enzim selulase dilakukan dengan
Pengambilan sampel dilakukan setiap hari selama kondisi dan tahapan yang sama dengan penetuan
6 hari waktu inkubasi dilakukan. waktu optimum enzim. Enzim selulase dipanen
Supernatan yang dihasilkan kemudian diuji pada hari optimum aktivitas selulase tertinggi.
aktivitas enzimnya dengan menggunakan metode Enzim selulase ekstrak kasar dipisahkan dari pelet
Miller yang dimodifikasi berdasarkan absorbansi bakteri dengan sentrifugasi 10.000 x g selama 15
maksimum larutan pereaksi (Wood and Saddler menit pada suhu 4 0C. Kemudian, enzim selulase
1988). Larutan sampel disentrifugasi pada suhu 4 dikarakterisasi meliputi pH optimum
0C dengan kecepatan 9000 x g selama 10 menit. menggunakan bufer asetat (pH 3-5), sitrat posfat
Sebanyak 1,8 mL substrat (selulosa 1%) yang (pH 5-7), dan tris-HCl (pH 7-9). Selain itu juga
dilarutkan dalam 0,1 M bufer sitrat fosfat pH 5, dilakukan karakterisasi suhu optimum (20-90 0C),
kemudian ditambah dengan 0,2 mL enzim selulase, pengaruh ion logam, dan substrat spesifik.
dikocok kuat dengan vortex, selanjutnya Pengukuran aktivitas enzim dilakukan sesuai
diinkubasi selama 30 menit pada suhu 30 0C, dan dengan metode pengukuran aktivitas enzim untuk
reaksi enzim dihentikan dengan pendidihan pada penentuan waktu optimum aktivitas enzim
suhu 100 0C selama 15 menit. Setelah itu, diambil selulase.
sebanyak 1 mL dari campuran reaksi dan
ditambah dengan 1 mL DNS, dididihkan pada suhu F. Pengukuran Kadar Protein
100 0C selama 15 menit. Enzim merupakan suatu protein di mana
Setelah larutan dingin absorbansi diukur pada sangat diperlukan dalam pengukuran enzim juga
575 nm. Perlakuan kontrol dan blanko dilakukan diketahui aktivitas spesifiknya untuk mengetahui
secara bersamaan dengan metode dan tahapan berapa aktivitas enzim sesungguhnya yang
yang sama. Pada kontrol, enzim yang akan dihasilkan oleh protein enzim tersebut. Oleh sebab
direaksikan dengan substrat telah diinaktivasi itu, diperlukan pengukuran kadar protein enzim
terlebih dahulu dengan memanaskan enzim yang dihasilkan dengan mensubstitusikan nilai
selama 15 menit dalam air mendidih. Pada blanko, absorbansi yang diperoleh ke dalam kurva standar
larutan enzim diganti dengan akuades untuk protein. Pengukuran kadar protein enzim selulase
direaksikan dengan substrat. Aktivitas enzim yang dihasilkan menggunakan metode Bradford
diukur pada setiap pengambilan sampel yang (1976). Pembuatan kurva standar menggunakan
dilakukan sehingga dapat diketahui waktu bovine serum albumin (BSA) pada kisaran 0,1-1,0
optimum produksi enzim selulase. mg/mL dengan absorbansi 280 nm.
Aktivitas selulase dinyatakan dalam satuan
internasional yaitu U/mL. Satu unit merupakan
3. HASIL DAN PEMBAHASAN
jumlah enzim yang dibutuhkan untuk memecah 1
mol selulosa menjadi gula pereduksi per menit Isolat PMP 0126w merupakan salah satu isolat
pada kondisi pengujian. Kadar glukosa yang koleksi dari BBP4BKP yang diisolasi dari limbah
dihasilkan dari hidrolisis selulosa dengan enzim pengolahan rumput laut menjadi agar-agar di
selulase berdasarkan nilai absorbansi pada 575 daerah Pameungpeuk, Garut Jawa Barat. Secara
nm. morfologi, isolat ini memiliki bentuk koloni putih.
Setelah dilakukan pewarnaan gram dan dilihat di
Kadar glukosa = ((As - Ab) - (Ak - Ab)) bawah mikroskop dengan perbesaran 1000x,
isolat ini tergolong ke dalam bakteri Gram positif
Aktivitas selulase (U/mL) = dan berbentuk batang (Gambar 1).
Kadar glukosa x faktor pengenceran x 1000 Isolat PMP 0126w diketahui memiliki aktivitas
V x t x BM selulase yang terlihat dari uji kualitatif bakteri
pada media agar yang mengandung media CMC
Keterangan : 1%. Setelah dilakukan inkubasi selama 5 hari,
As = Absorbansi sampel terbentuk zona bening di sekitar koloni bakteri.
Ab = Absorbansi blanko Berdasarkan hasil pengukuran, indeks selulolitik
Ak = Absorbansi kontrol yang dihasilkan sebesar 0,8. Menurut Hankin dan
V = volume enzim(0,2 mL) Anagnostakis (1997), luas zona bening yang
t = waktu inkubasi (30 menit) dihasilkan bergantung pada konsentrasi CMC dan
BM = BM glukosa (180 dalton) agar-agar yang digunakan. Semakin banyak CMC
dan agar-agar yang diberikan maka akan

JURNAL TEKNOLOGI DAN INDUSTRI PERTANIAN INDONESIA Vol. 06, No. 03 , 2014
Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Syiah Kuala 71
menyebabkan pori-pori mengecil sehingga enzim
selulase yang disekresikan lebih sulit melewati
pori-pori tersebut dan mengakibatkan
terhambatnya proses degradasi. Zverlova et al.
(2003) menambahkan bahwa diameter zona
bening umumnya berukuran lebih besar
dibandingkan dengan diameter koloni, karena
enzim selulase disekresikan ke lingkungan
sekitarnya oleh bakteri pendegradasi selulosa.

Gambar 2. Kurva pertumbuhan isolat PMP 0126w

A. Optimasi Enzim Selulase PMP 0126w

Optimasi produksi enzim selulase yang
dihasilkan oleh isolat PMP 0126w diperoleh
aktivitas selulase tertinggi pada hari ketiga waktu
fermentasi yaitu sebesar 0,074 U/mL dengan
aktivitas spesifik 0,092 U/mg dan kadar protein
sebesar 0,802 mg/mL. Hasil pengukuran aktivitas
selulase dan aktivitas spesifik dapat dilihat pada
Gambar 3.

Gambar 1. Isolat PMP 0126w dari Pameungpeuk,

Garut Jawa Barat merupakan Gram positif
berbentuk batang (pembesaran 1000x)

Setelah dilakukan uji kualitatif selulase pada

media agar, maka dilanjutkan dengan pengukuran
kurva pertumbuhan isolat PMP 0126w pada media
CMC 1%. Kurva pertumbuhan bakteri yang
dilakukan digunakan untuk menentukan waktu
terbaik untuk penuangan media starter ke dalam
media produksi. Berdasarkan hasil pengamatan, Gambar 3. Kurva aktivitas selulase, aktivitas
waktu terbaik penuangan starter ke dalam media spesifik, dan jumlah sel bakteri PMP 0126w
produksi yaitu setelah waktu inkubasi 3-6 jam.
Pada waktu inkubasi tersebut merupakan fase Pada Gambar 3 dapat juga dilihat bahwa isolat
logaritmik isolat PMP 0126w yang menghasilkan PMP 0126w mengalami pertumbuhan
sebesar 9,4-9,8 log10 CFU/mL pada (Gambar 2). eksponensial pada media produksi pada hari
Penuangan starter sebaiknya dilakukan pada saat pertama dan kedua yaitu sebesar sebesar 9,3-9,6
pertumbuhan logaritmik di mana menurut log10 CFU/mL, dan pada hari ketiga bakteri
Dwijoseputro (2010) menyatakan bahwa fase mengalami fase stasioner (jumlah bakteri hidup
logaritmik pembiakan bakteri berlangsung sangat dan mati sebanding). Hal ini diduga sumber
cepat sehingga bakteri yang berada dalam fase ini karbon pada media mulai berkurang atau habis
baik sekali untuk dijadikan inokulum. sehingga isolat PMP 0126w mulai memanfaatkan
Laju pertumbuhan bakteri pada fase logaritmik CMC sebagai sumber karbon dengan enzim
(antara 3-6 jam waktu inkubasi) digunakan selulase yang dihasilkannya sehingga diperoleh
sebagai penentuan waktu terbaik untuk aktivitas selulase tertinggi pada hari ketiga
penuangan media inokulum ke media produksi. inkubasi.
Hal ini dilakukan agar isolat tidak membutuhkan
waktu lama untuk fase adaptasi di dalam media B. Karakterisasi Enzim Ekstrak Kasar Selulase
produksi sehingga diharapkan produksi enzim PMP 0126w
selulase pada media produksi lebih cepat. Setiap isolat bakteri memiliki karakteristik pH
dan suhu optimum yang berbeda. Aktivitas enzim
dipengaruhi oleh pH karena sifat ionik gugus
JURNAL TEKNOLOGI DAN INDUSTRI PERTANIAN INDONESIA Vol. 06, No. 03 , 2014
72 Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Syiah Kuala
 karboksil dan gugus amino mudah dipengaruhi Pengaruh ion logam terhadap aktivitas enzim
oleh pH sehingga apabila terjadi perubahan pH selulase yang dihasilkan oleh isolat PMP 0126w
maka akan menyebabkan denaturasi enzim dan diketahui bahwa aktivitas enzim selulase dapat
menghilangkan aktivitas enzim. Enzim selulase meningkat pada penambahan ion logam 5 mM
PMP 0126w ekstrak kasar menghasilkan aktivitas dari CaCl2 dan FeCl3 dan menurun akibat
optimum pada bufer asetat 0,05 mM pH 5 dengan penambahan 10 mM ion logam ZnCl2 secara
aktivitas selulase masing-masing 0,128 U/mL berturut-turut menghasilkan aktivitas sebesar
(Gambar 4). Daya katalis enzim akan menjadi 0,085 U/mL; 0,079 U/mL; dan 0,042 U/ml jika
rendah maupun tinggi karena terjadinya dibandingkan dengan aktivitas selulase kontrol
denaturasi protein. Enzim mempunyai gugus aktif sebesar 0,064 U/mL (Gambar 6). Scopes (1987)
yang bermuatan positif dan negatif. Aktivitas menyatakan bahwa ion Ca2+ merupakan
enzim akan optimum jika terdapat keseimbangan modelator positif yang menyebabkan perubahan
antara kedua muatannya. Pada keadaan asam, konformasi sisi katalitik enzim, yang akan
muatannya cenderung positif dan pada keadaan mempermudah interaksi antara enzim dengan
basa muatannya cenderung negatif sehingga substrat sehingga meningkatkan aktivitas katalitik
aktivitas enzimnya menjadi berkurang dan bahkan enzim.
menjadi tidak aktif.

Gambar 6. Pengaruh penambahan logam 5 mM

dan 10 mM terhadap aktivitas selulase PMP
0126w

Uji aktivitas enzim selulase pada berbagai

Gambar 4. pH optimum aktivitas selulase PMP substrat diketahui bahwa enzim selulase yang
0126w dihasilkan oleh isolat PMP 0126w dapat
menghidrolisis substrat limbah rumput laut
Selain pH, suhu sangat berpengaruh terhadap Glacilaria sp. dari limbah Pameungpeuk NaOH 6%
aktivitas enzim selulase. Maka selanjutnya dengan aktivitas tertinggi sebesar 0,237 U/mL.
dilakukan pengujian karakterisasi suhu untuk Limbah tersebut dilakukan delignifikasi dengan
mencari suhu optimum. Suhu optimum yaitu suhu basa NaOH 6% (w/w). Proses delignifikasi
yang menyebabkan terjadinya reaksi kimia dengan merupakan suatu proses dalam menghilangkan
kecepatan paling besar. Bila suhu yang digunakan lignin dari lignoselulosa yang dilakukan dengan
melebihi suhu optimum akan terjadi kerusakan menggunakan bahan kimia asam atau basa
struktur enzim (Mutia et al., 2013). Diketahui (Ahmed et al. 2001). Akan tetapi, limbah agar yang
bahwa suhu optimum aktivitas selulase PMP diperlakukan awal dengan asam pekat H2SO4 1%
0126w yaitu pada suhu 30 0C yang menghasilkan (v/w) aktivitas selulase hanya sebesar 0,048
aktivitas enzim sebesar 0,068 U/ml. U/mL.
Substrat CMC merupakan substrat selulosa
murni yang berbentuk amorphous sehingga
aktivitas enzim selulase pada substrat CMC
merupakan aktivitas enzim endo-1,4--glukanase
dimana enzim ini bekerja pada rantai dalam CMC
menghasilkan oligosakarida atau rantai selulosa
yang lebih pendek (Lynd et al., 2002). CMC yang
digunakan dalam pegujian terbagi menjadi dua
yaitu CMC murni dan CMC teknis, dimana aktivitas
enzim selulase pada CMC murni lebih besar yaitu
Gambar 5. Suhu optimum aktivitas selulase PMP sebesar 0,157 U/mL dibandingkan dengan
0126w aktivitas selulase pada CMC teknis sebesar 0,153
U/mL.
JURNAL TEKNOLOGI DAN INDUSTRI PERTANIAN INDONESIA Vol. 06, No. 03 , 2014
Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Syiah Kuala 73
 oleh penambahan ZnCl2 10 mM yang
menghasilkan 0,042 U/ml.
Penelitian selanjutnya dapat dilakukan dengan
memurnikan enzim selulase yang dihasilkan oleh
isolat PMP 0126w agar dapat memisahkan enzim
dari non protein dan aktivitas enzim selulase yang
dihasilkan dapat ditingkatkan.

UCAPAN TERIMA KASIH

Penulis mengucapkan terima kasih kepada
Gambar 7. Substrat spesifik isolat PMP 0126W Balai Besar Penelitian dan Pengembangan
Keterangan: Pengolahan Produk dan Bioteknologi Kelautan dan
a) CMC murni, b) CMC teknis, c) Avicel, d) Limbah Perikanan (BBP4BKP) yang telah membiayai
agar-agar PT. Agarindo NaOH 6%, e) Limbah agar- penelitian ini sampai dengan selesai.
agar Pameungpeuk NaOH 4%, f) Limbah agar-agar
Pameungpeuk NaOH 6%, g) Limbah agar-agar
Pameungpeuk H2SO4 1%, h) Limbah agar-agar DAFTAR PUSTAKA
Pameungpeuk H2SO4 1,5%, i) Kertas Whatman Ahmed Z, Banu H, Rahman M. M Akhter F. dan Haque MS.
No.1, j) Limbah alginat sargassum. 2001. Microbial activity on the degradation lignocellulosic
polysaccharides. J Biol Sci 1: 993-997
Pada substrat avisel yang merupakan substrat Arifin H. 2006. Bacterial cellulase from a local isolate, Bacillus
pumilus EB3. [tesis]. Kuala Lumpur: Degree of Master
selulosa yang berbentuk kristalin (Kim dan Kim Science, Universiti Putra Malaysia.
1995), aktivitas selulase yang dihasilkan cukup Crueger W, Crueger A. 1984. Biotechnology T. D. Brock, editor.
tinggi yaitu sebesar 0,087 U/mL. Hal ini A Textbook of Industrial Microbiology. Sunderland:
menunjukkan bahwa enzim selulase yang Minuaer Associates. hlm 267-276.
Bradford MM. 1976. A Rapid and sensitive methode for the
dihasilkan oleh isolat PMP 0126w juga memiliki
quantitation of micogram quantitaties of protein in
aktivitas enzim ekso-1,4--glukanase yang utilizing the principle of protein-dye Binding. Anal
memotong ujung rantai oligosakarida menjadi Biochem 72:248-254.
selobiosa, yaitu dua molekul glukosa yang Dwijoseputro D. 2010. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta:
berikatan secara -1,4-glikosidik (Kim dan Kim Djambatan.
Hankin L, Anagnostakis SL. 1997. Solid media containing
1995). Mulcahy (1996) menambahkan bahwa carboxymethylcellulose to detect Cx cellulase activity of
bakteri pendegradasi selulosa baik aerob atau microorganisms. J Gen Microbiol 98: 109-115.
anaerob cenderung untuk mendegradasi selulosa Kader A J, Omar O. 1998. Isolation of cellulolytic fungi from
kristalin karena degradasi biasanya dilakukan Sayap-Kinabalu Park, Sabah. Serawak. ASEAN Review of
Biodiversity and Enviromental Conservation. hlm 1-6.
lebih dari satu enzim selulase.
Kim CH, Kim DS. 1995. Purification and specificity of specific
endo--D-glucanase (Avicelase II) resembling exo-
cellobiohydrolase from Bacillus circulans. Enzyme
4. KESIMPULAN
Microbial Technol, 17:248-254.
Isolat PMP 0126w merupakan isolat yang Kim GS, Myung KS, Kim YJ, Oh KK, Kim JS, Ryu HJ, Kim KH.
2008. Methode of Producing Biofuel Using Sea Algae.
diisolasi dari limbah pengolahan agar di daerah Seoul: World Intelectual Property Organization.
Pameungpeuk Garut, Jawa Barat. Isolat ini tumbuh Kulp K. 1984. Teknologi Pengolahan Jerami sebagai Makanan
pada suhu 30 0C, bersifat Gram positif berbentuk Ternak. Bandung: Yayasan Dian Grahita.
batang. Aktivitas enzim selulase tertinggi Lynd LR, Paul JW, Willem H, Isak SP. 2002. Microbiol Molecul.
dihasilkan pada hari ketiga waktu inkubasi dengan Bio Reviewers 66:506.
Mulcahy. 1996. An investigation of cellulose Binding Domain
aktivitas selulase sebesar 0,074 U/mL dan in non-cellulose binding domain in non-cellulolytic
aktivitas spesifik sebesar 0,092 U/mg. Aktivitas enzymes. Final year project university of Limerick.
selulase optimum pada bufer sitrat fosfat pH 5 dan Munifah I, Chasanah E, Fawzya YN. 2011. Screening of
suhu 30 0C. Penambahan substrat limbah cellulolytic bacteria from Indonesias marine
environment. Di dalam: Prosiding Seminar ISISM
pengolahan agar Pameungpeuk dengan (International Seminar of Indonesian Society for
perlakukan NaOH 6% pada pengujian substrat Microbiology); Bogor, 26 Juni 2011. Bogor: Perhimpunan
spesifik memberikan aktivitas selulase tertinggi Mikrobiologi Cabang Bogor.
sebesar 0,237 U/mL. Penambahan ion CaCl2 5 mM Mutia M, Seniwati D, Rugaiyah A, Firdaus Z. 2013. Isolasi dan
dan FeCl3 10 mM dapat meningkatkan aktivitas Karakterisasi Enzim Amilase dari Akar Rimpang Alang-
Alang (Imperata cylindrica).
selulase berturut-turut sebesar 0,085 dan 0,079
U/ml sedangkan penurunan aktivitas dipengaruhi

JURNAL TEKNOLOGI DAN INDUSTRI PERTANIAN INDONESIA Vol. 06 , No. 03 , 2014

74 Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Syiah Kuala
 Scopes RK. 1987. Protein Purification and Practice. Ed ke-2.
New York: Springer Verlag.
Wood TM, Saddler JN. 1988. Increasing the availability of
cellulose in biomass materials. In Wood WA and Kellog JA,
editor. Methode in Enzymology Cellulose and
Hemicellulose. Volume ke 160. New York: Academic press.
hlm 3-11.
Zverlova VV, Holl W, and Schwarz H. 2003. Enzymes for
digestion of cellulose and other polysaccharides in the gut
of longhorn beetle larvae, Rhagium inquisitor L. (Col.,
Cerambycidae). Inter Biodet Biodeg. 51:175179.

JURNAL TEKNOLOGI DAN INDUSTRI PERTANIAN INDONESIA Vol. 06, No. 03 , 2014
Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Syiah Kuala
75