La Tuberculose

dépistage et analyse
Réalisé par OURAG Rim

INTRODUCTION
 La Tuberculose, une infection dont

l’origine est une bactérie connue sous
le nom de la bactérie de koch
découverte par Robert Koch en 1882.
 Cette maladie peut toucher

plusieurs organes à la fois.
 En recrudescence depuis une

quinzaine d'années, on enregistre
environ 10 millions de nouveaux cas
par an dans le monde.
Épidémiologie
 Tuberculose = fléau mondial
 1/3 de la population mondiale est infecté
 8,8 millions de nouveaux cas de TB maladie/2010 : faible baisse du
nombre de malades depuis 2005 (9 millions). (OMS)
 Mortalité : 1,35 millions en 2010 (OMS)
 15% des tuberculeux dans le monde sont des Africains.
 En Tunisie
 La Tunisie est un pays à endémicité intermédiaire avec une prévalence de 40,5

cas pour 100 mille habitants
 Ces dernières années, l’incidence de la maladie a diminué jusqu’à atteindre 28
cas pour 100 000 habitants.
 L’incidence a augmenté et s’est située à 20.6/100 000 en 2009, soit une
augmentation de 9.6% par rapport à 2002.
 La répartition de l’incidence selon les gouvernorats montre des différences
allant de 38.7/100 000 à 9.9/100 000
REPARTITION EN FONCTION DEL'AGE
30
21,10% 28.8
25 22.5
HOMM 20 16.9
ES % 15 10.6 11.6
10
4.6 4
5
78,90% 0
1
0
0
Ans
Généralités sur les mycobactéries
 Taxonomie
• Ordre des Actinomycétales, Famille des Mycobacteriaceae
• Un seul genre : Mycobacterium
 Caractéristiques générales
• Bacilles immobiles, non sporulés, non capsulés
• Croissance Lente (division toutes les 20h)
• Aérobie stricte (affinité apex pulmonaire)
• Exigeante (croissance impossible dans le milieu extérieur)
• Composants spécifiques : acides mycoliques
Acido-alcoolo-résistance
(pas ou peu de
coloration au Gram)
Résistance aux agents
chimiques
Cibles des antibiotiques
spécifiques
3 espèces toujours pathogènes
 M. tuberculosis (bacille de Koch, BK)

 Réservoir principal : homme
 Contamination pulmonaire interhumaine
(contamination animale possible)
 M. africanum
 Réservoir principal: homme
 Majoritairement en Afrique Noire, rares cas européens
 M. bovis
 Réservoir : bovins, animaux domestiques ou sauvages
 Contamination digestive (lait ou viande cru infecté)
Physiopathologie
 Pouvoir pathogène de M. tuberculosis
– Multiplication lente → Infection latente .

– Multiplication en milieu bien oxygéné → Poumon +++
Maladie contagieuse à transmission interhumaine

(respiratoire / toux, parole, éternuement) gouttelettes de
1 à 5µ en suspension (patient bacillifère)
Tuberculose maladie
 5 à 10 % des cas : réactivation bacillaire et extension des lésions
 Localisation pulmonaire la plus fréquente (3/4 cas) :

o Fièvre prolongée assez discrète (38°C) avec sudations profuses nocturnes,
perte de poids, asthénie
o Toux précoce, constante, productive, avec des quintes :
expectorations blanchâtres et muqueuses
o Contagiosité +++
 Autres localisations :
o rénale, urogénitale, ostéo-articulaire, ganglionnaire,
péricardique…
o Tuberculose généralisée (ID)
o Méningite tuberculeuse (enfants, vieillards)
 Facteurs aggravants : âges extrêmes, malnutrition, alcoolisme, diabète,

Immunodépression ++
Exposition aux particules infectieuses
70 % Pas d’infection 30 % Tuberculose Infection
95 % Infection non 5 % Maladie

maladie tuberculeuse précoce
(forme sévère)
Tuberculose
latente
90-95 % Infection 5-10 % Tuberculose

contenue Réactivation maladie
endogène tardive
Diagnostic biologique
de la tuberculose maladie
Diagnostic de tuberculose maladie
1 - Prélèvements
2 - Examen direct (+/- PCR)
3 - Culture
4 - Identification :
– Tests immuno-chromatographiques
– Tests génomiques: PCR/sondes
5 - Antibiogramme
Déclaration obligatoire
Prélèvements
 Excrétion des BK intermittente → répétition des prélèvements 3 jours

de suite +++
 Prélèvements plurimicrobiens
 Respiratoires : le matin, au réveil, à jeun

• Crachats / expectorations
• Tubage gastrique
• Prélèvement sous fibroscopie (aspiration, brossage, LBA)
 Urinaires : sur la totalité des urines du matin
 Prélèvements monomicrobiens
• Liquide pleural
• LCR
• Pus de collection interne
• Biopsies (ganglionnaire, pulmonaire ou autre)
• Hémocultures / Myélocultures (infections disséminées)
Examen direct
 Colorations spécifiques des BAAR :
 Ziehl- Neelsen à chaud ou à froid (référence)
- Fuschine + phénol + acide + bleu de

méthylène
- Lecture à l’objectif 100 à immersion
- BAAR roses sur fond bleu
 Agent fluo (auramine)

- Auramine + acide/alcool + rouge thiazine
- Lecture à l’objectif 40 en fluorescence
- BAAR vert fluo sur fond rouge
! En pratique :
Dépistage avec auramine
Confirmation avec Ziehl-Neelsen
Lecture quantitative
Le produit pathologique examiné doit contenir au moins 10 000 bacilles

par millilitre pour être positif à l'examen direct. Sensibilité médiocre
 Une telle quantité de bacilles n'est présente que dans les lésions des
malades atteints de tuberculoses pulmonaires cavitaires.
 L'examen microscopique permet de détecter rapidement les tuberculeux

les plus contagieux.
Il constitue l'examen clef dans le diagnostic de la tuberculose pulmonaire.

Détection du complexe tuberculosis par biologie
moléculaire
 Contexte
• Examen direct peu sensible (50 % sur plvts pulmonaires)
• PCR directement sur échantillon apporte un gain
 Objectifs
• Confirmation du diagnostic de TB pulmonaire si ED positif
• Argument supplémentaire de diagnostic de TB pulmonaire si ED négatif
mais contexte évocateur
 Méthodes
• PCR sur échantillon homogénéisé et décontaminé
 Trousses commercialisées
• TMA (transcription Mediated Amplification) Gen Probe/ Biomérieux®
• PCR Amplicor, Roche Diagnostics®
• LCR (ligase chain réaction) Test LCx Probe Abott®
• SDA (Strand Displacement Amplification) BD ProbeTec®
Mise en culture
 Milieu solide
o Lowenstein-Jensen
• Milieu à l’œuf (vit, neutralisation, décontaminant)
• Vert malachite (inhibition des bactéries contaminantes)
• Bonne sensibilité
o Conditions de culture
• Incubation 90 jours à 37°C (résultat - rendu à 4 semaines)
• Détection moyenne en 21 à 28 jours
Mise en culture
 Milieux liquides
o Middle-Brooke (7H9, 7H12)

• Milieu semi-synthétique et transparent
• Pas d’œuf (utilisation limitée pour certains décontaminants)
o MGIT (Mycobacterial Growth Indicator Tube)

• Indicateur de pousse fluorescent
• Coût élevé
• Automatisation: Bactec MGIT 960®
Identification
Aspect macroscopique (milieu solide)
 Lecture visuelle régulière
 Contrôle de toute culture suspecte par Ziehl puis identification
Pigmentation intense Aspect Croissance

M. tuberculosis et Non
Colonies rugueuses en
3 semaines
BCG chou-fleur
M. africanum Non Colonies rugueuses plates > 4 semaines
M. bovis Non Colonies lisses > 4 semaines

Diagnostic indirect tuberculose latente
 But : Identification des personnes infectées.
 Moyens :
* Intra-dermoréaction (IDR)
Mauvaises spécificité (BCG, atypiques)
Mauvaise sensibilité
Nécessité de 2 visites
Difficultés de lecture
* Tests immunologiques : IGRA (Interferon Gamma Releasing

Assay)
Traitement
 Toujours association de molécules !!!
 Avec un traitement adapté et correctement suivi, la TB devrait guérir

dans presque tous les cas !!!
 Schéma thérapeutique classique (TB pulm et extra-pulm)

• 2 mois avec Isoniazide + Rifampicine + Ethambutol + Pyrazinamide
• (4 à 10) mois avec Isoniazide + Rifampicine (durée variable selon

localisation )
Possibilité de traitement long: 12 mois

Prophylaxie
 Vaccin vivant atténué :
BCG (bacille de Calmette et Guérin) = souche de M. bovis atténuée par

nombreuses subcultures
o 75 à 85 % contre formes graves (méningite et miliaire)

o 50 à 75 % contre autres formes
Protection limitée
 Autres moyens de prévention :

o Programme national de lutte contre la tuberculose (juillet 2007)
o Stratégie « Halte à la tuberculose » (OMS, 2015)
1.Eviter la transmission du BK: protection contact « air »
 Isolement du patient :
• Chambre seule, ventilation, visites réduites
• Chambre à pression négative si multi résistance
• Limiter les sorties du patient, sortie avec masque
 Protection respiratoire du personnel
• Masque de protection respiratoire
2. Rechercher les cas “contact”

 Maladie à déclaration obligatoire
 déclenchement
 d’un enquête autour d’un cas
CONCLUSION
 Comme la tuberculose reste une maladie de grande

persistance, il est impératif qu’il faut multiplier les efforts et
continuer à rechercher de nouveaux moyens pour combattre
cette épidémie.
 Deux principales menaces subsistent cependant: Près de trois

millions de personnes (soit l’équivalent d’un malade de la
tuberculose sur trois) échappent actuellement aux systèmes de
santé.
 La crise de la tuberculose pharmacorésistante – les efforts

déployés pour dépister et traiter toutes les personnes touchées
par la tuberculose multirésistante (tuberculose MR).
Merci !

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 La Tuberculose, une infection dont

 Cette maladie peut toucher

 En recrudescence depuis une

 La Tunisie est un pays à endémicité intermédiaire avec une prévalence de 40,5

REPARTITION EN FONCTION DEL'AGE

 M. tuberculosis (bacille de Koch, BK)

– Multiplication lente → Infection latente .

Maladie contagieuse à transmission interhumaine

 5 à 10 % des cas : réactivation bacillaire et extension des lésions

 Localisation pulmonaire la plus fréquente (3/4 cas) :

 Facteurs aggravants : âges extrêmes, malnutrition, alcoolisme, diabète,

70 % Pas d’infection 30 % Tuberculose Infection

95 % Infection non 5 % Maladie

90-95 % Infection 5-10 % Tuberculose

2 - Examen direct (+/- PCR)

 Excrétion des BK intermittente → répétition des prélèvements 3 jours

 Respiratoires : le matin, au réveil, à jeun

 Urinaires : sur la totalité des urines du matin

 Colorations spécifiques des BAAR :

 Ziehl- Neelsen à chaud ou à froid (référence)

- Fuschine + phénol + acide + bleu de

 Agent fluo (auramine)

Le produit pathologique examiné doit contenir au moins 10 000 bacilles

 L'examen microscopique permet de détecter rapidement les tuberculeux

Il constitue l'examen clef dans le diagnostic de la tuberculose pulmonaire.

o Middle-Brooke (7H9, 7H12)

o MGIT (Mycobacterial Growth Indicator Tube)

 Contrôle de toute culture suspecte par Ziehl puis identification

Pigmentation intense Aspect Croissance

M. africanum Non Colonies rugueuses plates > 4 semaines

M. bovis Non Colonies lisses > 4 semaines

 But : Identification des personnes infectées.

* Tests immunologiques : IGRA (Interferon Gamma Releasing

 Avec un traitement adapté et correctement suivi, la TB devrait guérir

 Schéma thérapeutique classique (TB pulm et extra-pulm)

• (4 à 10) mois avec Isoniazide + Rifampicine (durée variable selon

Possibilité de traitement long: 12 mois

 Vaccin vivant atténué :

BCG (bacille de Calmette et Guérin) = souche de M. bovis atténuée par

o 75 à 85 % contre formes graves (méningite et miliaire)

 Autres moyens de prévention :

2. Rechercher les cas “contact”

 Comme la tuberculose reste une maladie de grande

 Deux principales menaces subsistent cependant: Près de trois

 La crise de la tuberculose pharmacorésistante – les efforts

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