LE

LE NUCLEOLE
NUCLEOLE
 Plan
Plan de
de présentation
présentation


 Caractères
Caractères fondamentaux
fondamentaux ((Nombre,
Nombre, forme,
forme, taille
taille etc..)
etc..)


 Structure
Structure microscopique
microscopique et
et fonctions
fonctions cellulaires
cellulaires


 Méthodes
Méthodes d'étude
d'étude de
de lala cellule
cellule
 OBJECTIFS
OBJECTIFS DU
DU COURS
COURS

 Décrire
Décrire le
le nucléole
nucléole en
en microscopie
microscopie optique
optique et
et
électronique
électronique

 Décrire
Décrire la
la biochimie
biochimie et
et le
le rôle
rôle du
du nucléole
nucléole
 DEFINITION
DEFINITION

Le
Le nucléole
nucléole est
est un
un organite
organite responsable
responsable dede lala synthèse
synthèse des
des
acides
acides ribonucléiques
ribonucléiques (ARN)
(ARN) des
des ribosomes,
ribosomes, IlIl est
est présent
présent
dans
dans lele noyau
noyau au
au cours
cours des
des phases
phases G1,
G1, S,
S, G2
G2 etet disparait
disparait
pendant
pendant lala mitose.
mitose.
STRUCTURE DU NUCLEOLE EN M.O
 NUCLEOLE
NUCLEOLE EN
EN MICROSCOPIE
MICROSCOPIE OPTIQUE
OPTIQUE

Petites
Petitessphères de11àà22 de
sphèresde deØØtrès
trèsréfringentes
réfringentesde deposition
positionvariable
variableetetdont
dont
lelenombre
nombreestestgénéralement
généralementfixe
fixepour
pourununtype
typecellulaire
cellulairedonné.
donné.IlIlcomprend:
comprend:
 La
 Lachromatine
chromatinepérinucléolaire
périnucléolairelelecalcium
calciumdurcit
durcitcette
cettezone
zonedede
chromatine.
chromatine.

 Le
 Lecorps
corpsnucléolaire
nucléolaire::Partie
Partiedu
dunucléole
nucléoleentourée
entouréepar
parlalachromatine
chromatine
périnucléolaire,
périnucléolaire,constituée
constituéed´une
d´unesubstance
substancefilamenteuse
filamenteuse..LeLe
nucléolonéma
nucléolonémaenroulé
enrouléirrégulièrement
irrégulièrementau
ausein
seind´une
d´unesubstance
substance
amorphe
amorpheou oupars
parsamorpha
amorpha
 NUCLEOLE
NUCLEOLE EN
EN MICROSCOPIE
MICROSCOPIE ELECTRONIQUE
ELECTRONIQUE

Les
Les nucléoles
nucléoles ne
ne présentent
présentent pas pas de
de membrane
membrane limitante
limitante et
et offrent
offrent
un
un aspect
aspect spongieux,
spongieux, oùoù lele nucléolonéma
nucléolonéma apparait
apparait enen un
un réseau
réseau
de
de filament
filament avec
avec des
des granules
granules nombreux
nombreux arrondis
arrondis dede 150Ao
150Ao
(ribosomes
(ribosomes nucléolaires)
nucléolaires) associés
associés àà des
des fibrilles
fibrilles de
de 400
400 Ao
Ao

 Les
 Les fibrilles
fibrilles ont
ont une
une longueur
longueur variable
variable de
de 20
20 àà 40nm
40nm sur
sur 44 àà
8nm
8nm de
de diamètre.
diamètre. Leur
Leur densité
densité est
est égale
égale àà celle
celle des
des fibres
fibres de
de
chromatine.
chromatine.
 NUCLEOLE
NUCLEOLE EN
EN MICROSCOPIE
MICROSCOPIE ELECTRONIQUE
ELECTRONIQUE


 Les
Lesgranules.
granules.Ils
Ilssont
sontdede15nm
15nmde
dediamètre
diamètreavec
avecles
lesmêmes
mêmesaffinités
affinités
tinctoriales
tinctorialesetetmême
mêmepolymorphisme
polymorphismeque
queles
lesribosomes.
ribosomes.


 La
Lapars
parsamorpha.
amorpha.Elle
Elleest
estformée
forméepar
parlelenucléoplasme
nucléoplasmecontenant
contenantdes
des
protéines
protéinesnucléolaires.
nucléolaires.


 Les
Lescentres
centresfibrillaires.
fibrillaires.IlIls´agit
s´agitde
dezones
zonescontenant
contenantlelerDNA
rDNA(ADN
(ADN
ribosomal)
ribosomal)ououfractions
fractionsde del´organisateur
l´organisateurnucléolaire
nucléolaireresponsables
responsablesde
delala
transcription
transcriptionen
enrRNA
rRNA(ARN(ARNribosomal)
ribosomal)
NUCLÉOLE
NUCLÉOLE RÉTICULÉ
RÉTICULÉ EN
EN MICROSCOPIE
MICROSCOPIE ÉLECTRONIQUE
ÉLECTRONIQUE
CLASSIFICATION
CLASSIFICATION DES
DES NUCLÉOLES
NUCLÉOLES

 Des
 Des nucléoles
nucléoles réticulés
réticulés

 Des
 Des nucléoles
nucléoles compacts
compacts

 Des
 Des nucléoles
nucléoles annulaires
annulaires
 BIOCHIMIE
BIOCHIMIE DU
DU NUCLÉOLE
NUCLÉOLE

L’ADN
L’ADNnucléolaire:
nucléolaire:se
seprésente
présentesoit
soit::
 sous
 sousune
uneforme
formecondensée:
condensée:zones
zoneschromatiniennes
chromatiniennespérinucléolaires
périnucléolaires
ou
ousous
sousune
uneforme
formedispersée.
dispersée.

Pas
Pasdededifférences
différencessignificatives
significativesentre
entrelalaquantité
quantitédes
desbases
basespuriques
puriquesetet
pyrimidiques
pyrimidiquesduduDNA
DNAnucléolaire
nucléolaireetetcelle
celledu
duDNA
DNAnucléaire.
nucléaire.

La
Laréplication
réplicationduduDNA
DNAnucléolaire
nucléolaires´effectue
s´effectueau
aucours
coursde
delalaphase
phaseSSdu
ducycle
cycle
cellulaire.
cellulaire.La
Laréplication
réplicationdu
duDNADNApérinucléolaire
périnucléolaireest
estplus
plusprécoce
précoceetetplus
plus
rapide
rapideque
quecelle
celledu
duDNA
DNAintra-nucléolaire.
intra-nucléolaire.
 BIOCHIMIE
BIOCHIMIE DU
DU NUCLÉOLE
NUCLÉOLE
L’ARN
L’ARN nucléolaire:
nucléolaire:
IlIl existe
existe dans
dans lele nucléole
nucléole divers
divers types
types d´ARN
d´ARN classés
classés selon
selon
leur
leur coefficient
coefficient dede sédimentation
sédimentation exprimé
exprimé en en unité
unité SVEDBERG
SVEDBERG ..
Dans
Dans les les nucléoles
nucléoles desdes cellules
cellules hépatiques
hépatiques on on trouve
trouve les
les ARN
ARN
suivants:
suivants:
ARN
ARN 45S,
45S, 35S,
35S, 28S,
28S, 88 àà 16S,
16S, 44 àà 7S.
7S. L´ARN
L´ARN 18S18S aa été
été isolé
isolé
du
du nucléoplasme.
nucléoplasme.

Ces
Ces différents
différents ARN
ARN correspondent
correspondent àà des
des étapes
étapes de
de maturation.
maturation.
 BIOCHIMIE
BIOCHIMIE DU
DU NUCLÉOLE
NUCLÉOLE

LES PROTÉINES::
LESPROTÉINES
Le
Lenucléole
nucléolecontient
contientdes
desprotéines
protéinesacides
acidesetetdes
deshistones
histones(rôle
(rôlede
de
protection
protectioncontre
contreARNases
ARNasesou ouutilisées
utiliséescome
comedesdessous
sousunités
unitésassociées
associéesaux
aux
ARN).
ARN).

LES
LESENZYMES
ENZYMESNUCLÉOLAIRES:
NUCLÉOLAIRES:
Elles
Ellesinterviennent
interviennentdans
dansles
lesréactions
réactionsde
desynthèse
synthèseou
oude
dematuration
maturationdu
du
RNA.
RNA.

Le
Lenucléole
nucléolecontient
contient::
-une
-uneARNARNpolymérase-DNA
polymérase-DNAdépendante
dépendantequi
quicatalyse
catalyselalasynthèse
synthèsede
del´ARN
l´ARN
--etetune
uneNAD
NADpyrophosphorylase
pyrophosphorylase(ou
(ouNAD
NADsynthétase)
synthétase)ààrôlerôlemal
malconnu.
connu.
Enzymes
Enzymes de
de Maturation
Maturation de
de l’ARN:
l’ARN:


 lalaconvertase
convertasetransforme
transformeARN
ARN45S
45Sen
enrRNA
rRNA32S
32Setet28S
28S


 les
lesméthylases:
méthylases:fixation
fixationd'un
d'ungroupement
groupementCH3
CH3sur
surARN
ARN(méthylation)
(méthylation)


 Ribonucléase:
Ribonucléase:Scission
Scissiondes
desliaisons
liaisonsphosphodiester
phosphodiesterdes
desARN.
ARN.


 La
Lapolyriboadénylique
polyriboadényliquesynthétase
synthétaseacide
acidecatalyse
catalysedans
danslelenucléole
nucléolelala
synthèse
synthèsededel´acide
l´acidepolyriboadénylique
polyriboadényliquequi
quiest
estun
unpolymère
polymèrededel´Adénosine
l´Adénosine
diphosphate ribose..
diphosphateribose
 ROLE
ROLE DU
DU NUCLEOLE
NUCLEOLE

 Transcription
Transcription de
de l´ARN
l´ARN ribosomal
ribosomal

 Expérience
Expérience de de physiologie
physiologie sur
sur crapaud
crapaud africain
africain ((Xenopus
Xenopus
laevis)
laevis),, qui
qui possède
possède 22 nucléoles,
nucléoles, mais
mais ilil existe
existe une
une souche
souche
avec
avec un
un nucléole.
nucléole.
-- LaLa présence
présence d’un d’un seul
seul nucléole
nucléole est
est un
un phénomène
phénomène
héréditaire.
héréditaire. Si
Si l’on
l’on croise
croise deux
deux crapauds
crapauds dont
dont les
les cellules
cellules ne
ne
possèdent
possèdent qu’unqu’un seul
seul nucléole,
nucléole, les
les têtards
têtards obtenus
obtenus
constitueront
constitueront une une population
population dont
dont 25
25 %% possèdent
possèdent des
des
noyaux
noyaux àà 22 nucléoles,
nucléoles, 50
50 %% des
des noyaux
noyaux àà 11 nucléole
nucléole et
et 25
25 %
%
des
des noyaux
noyaux àà 00 nucléole
nucléole ..
 ROLE DU NUCLEOLE

Crapauds 1N x 1N ------25% 2N; + 50% 1N; +25% à 0N.

Si on place les trois types de têtards dans les milieux contenant des
précurseurs marqués de l'ARN, les têtards à 1 à 2 nucléoles
synthétisent les ARNm, ARNt et les ARNr par contre les têtards sans
nucléoles synthétisent uniquement ARNm et ARNt.

Le nucléole est indispensable à la synthèse de l'ARNr. Les zones

fibrillaires du nucléole sont le site de synthèse de l'ARN ribosomale.
 ROLE
ROLE DU
DU NUCLEOLE
NUCLEOLE
--MATURATION
MATURATIONDE DEl’ARNr
l’ARNr
Le
LerADN
rADNest
estresponsable
responsablede
delalasynthèse
synthèsedu
durARN
rARN45S
45S(rADN
(rADNprovient
provienten
en
partie
partiede
del’ADN
l’ADNd'un
d'unchromosome
chromosomelocalisée
localiséedans
dansl'organisateur
l'organisateur
nucléolaire
nucléolaireetetSituée
Situéedans
dansles
lescentres
centresfibrillaires).
fibrillaires).

Le
LerRNA
rRNA45S
45Sforme
formeààlalasuite
suited'un
d'unprocessus
processusde
dematuration
maturationuneunemolécule
moléculede
deRNAr
RNAr
28S
28S etetRNAr
RNAr18S
18S,,toutes
toutesles
lesdeux
deuxméthylées
méthyléesetetincorporées
incorporéesààdesProtéines
desProtéines
ribosomales.
ribosomales.

-Formation
-Formationdes
desribosomes:
ribosomes:
Ces
Cesparticules
particulesde
deRNA
RNAribosomales
ribosomales(40S
(40Spour
pour leleRNA
RNA18S
18Setet65S
65Spour
pourlele
RNA
RNA28S)
28S)passent
passentdans
danslelecytoplasme
cytoplasmepar
parles
lespores
poresnucléaires
nucléairespour
pour
former
formeren
ens'associant
s'associantavec
avecleslesARN
ARN5S,
5S,les
lesribosomes
ribosomes(80S).
(80S).

-Transcription
-Transcriptionde
del’ARNr
l’ARNr
La
LaRégulation
Régulationde
delalatranscription
transcriptionde
del’ARNr
l’ARNrdépend
dépendde
delalaquantité
quantitéde
de
ribosomes
ribosomesprésents
présentsdans
danslelecytoplasme.
cytoplasme.
 RÔLE
RÔLE DU
DU NUCLÉOLE
NUCLÉOLE

--NUCLÉOLE
NUCLÉOLEET ETARNm
ARNm
La
Laprésence
présenced´un
d´unnucléole
nucléolefonctionnel
fonctionnelest
estnécessaire
nécessairepour
pourque
quel´ARNm
l´ARNm
passe
passedudunoyau
noyaudans
danslelecytoplasme.
cytoplasme.L´inactivation
L´inactivationdu
dunucléole
nucléolepar
partraitement
traitemen
traitemen
par
parununmicrofaisceau
microfaisceaude
delumière
lumièreUVUVinhibe
inhibelelepassage
passagededel´ARNm
l´ARNmdans
danslele
cytoplasme.
cytoplasme.

--RÔLE
RÔLEDU DUNUCLÉOLE
NUCLÉOLEDANS DANSLA LAPRÉPARATION
PRÉPARATIONDE DELA
LAMITOSE
MITOSE..
Les
Lesnucléoles
nucléolessont
sontindispensables
indispensablesààunundéroulement
déroulementnormal
normaldedelalamitose.
mitose.En
En
effet,
effet,des
desaltérations
altérationsimportantes
importantesdes
desnucléoles
nucléolesprovoquent
provoquentleleblocage
blocagedesdes
cellules
cellulesààlalaphase
phaseG2,
G2,phase
phasequi
quiprécède
précèdelalamitose
mitose(phase
(phaseM).
M).

L´irradiation
L´irradiationpar
parun
unmicrofaisceau
microfaisceaud´UV
d´UVdudunucléole
nucléoleinhibe
inhibelaladivision
division
cellulaire.
cellulaire.De
Demême
mêmesisilalasynthèse
synthèseprotéique
protéiqueest
estbloquée
bloquéepar
parl´actichrome
l´actichromeou
ou
lalacyclohéximide
cyclohéximidejuste
justeavant
avantlaladisparition
disparitiondu
dunucléole,
nucléole,au
aucours
coursde delala
prophase,
prophase,lalamitose
mitosese
sedéroule
déroulemais
maisles
lesnoyaux
noyauxne
nepeuvent
peuventse sereformer.
reformer.
 VARIATIONS
VARIATIONS MORPHOLOGIQUES
MORPHOLOGIQUES DU
DU
NUCLÉOLE
NUCLÉOLE

Le
Le nucléole
nucléole subit
subit des
des variations
variations morphologiques
morphologiques dont
dont certaines
certaines
sont
sont physiologiques
physiologiques (augmentation
(augmentation dede volume)
volume) et
et d´autres
d´autres
pathologiques
pathologiques (inactivation
(inactivation nucléolaire,
nucléolaire, ségrégation
ségrégation nucléolaire
nucléolaire
hypertrophie
hypertrophie nucléolaire).
nucléolaire).