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    Milieux Culture Microbiologie

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    Ce document décrit différents types de milieux et méthodes d'ensemencement utilisés en microbiologie pour identifier des bactéries. Il explique les milieux solides, liquides et leurs compositions, ainsi que les techniques d'ensemencement sur boîtes, tubes et en milieu liquide.

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    milieux de culture

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    I Les diffrents milieux

    A Dfinition
    B Les milieux solides
    C Les milieux liquides

    II Les diffrents types densemencements


    A Ensemencements sur milieux solides
    1 Les botes de ptri
    II Les milieux en tubes
    B Les ensemencements en milieux liquides

    En microbiologie, il existe diffrents moyens didentifier


    des bactries.
    On utilise diffrents milieux, avec des compositions et
    aspects divers, que ensuite nous ensemenons avec
    plusieurs mthodes.

    Milieu BCP avant et aprs ensemencement

    Les milieux solides sont obtenus partir de milieux


    liquides, auxquels on ajoute un glifiant: le plus souvent
    de lagar ou de la glose.
    Parmi ces milieux, certains sont couls en botes de
    Ptri ou en tube avec une teneur en glose denviron 15
    g/L, alors que les gloses molles ou semi-solides, ont
    une teneur de 3 5 g/L et prsentent une consistance
    intermdiaire.
    Bote GNO

    Tube Citrate
    de Simmons

    Ces milieux sont la plupart du temps des bouillons


    nutritifs ordinaires. Ils ont trois composants principaux:
    les peptones, les extraits de viandes et les extraits de
    levures.
    Les peptones sont des hydrolysats enzymatiques de
    protines animales ou vgtales riches en acides
    amins et en peptides.
    Les extraits de viandes apportent des sels minraux,
    des vitamines, des protines peu dgrades et des
    glucides.
    Les extraits de levure eux reprsentent une source
    dacides amins et des vitamines hydrosolubles.

    On peut aussi utiliser des billes de verres que lon dpose


    sur le milieux avec des gouttes de suspension. Puis, on
    agite la bote et on enlve les billes.

    Il existe aussi lensemencement laide dun rteau, qui


    consiste faire un beurrage du milieu. On dpose un
    volume dfini sur la glose, et avec ce quon appelle un
    rteau, on tale toute la suspension sur la glose.

    Enfin, souvent utilis pour le dnombrement des colonies,


    on peut faire un ensemencement en masse. On dpose
    une goutte de suspension dans une bote de ptri vide, et
    ensuite, on coule la glose par-dessus. Il faut agiter pour
    bien que la suspension se rpartisse.

    La plupart des ensemencements solides en tubes, se


    font part des stries en surfaces le long de la glose.
    Pour certains milieux soit il suffit juste dune piqre
    centrale dans la glose, ou alors, en plus des stries, il
    faut ajouter une piqre centrale pour complter
    lensemencement.
    Certains milieux, on les ensemence avec une piqre
    centrale, et on remonte ensuite en tournant dans tout le
    tube ( Viande Foie, Mevag).
    Milieu Mannitol
    Mobilit Nitrat avant
    et aprs ensemencement

    Il existe deux types d'ensemencement en milieu liquide :


    Soit on ralise d'abord une suspension, c'est dire que
    l'on prlve des colonies sur une glose que l'on place
    dans de l'eau distille puis on prend quelque goutte de
    cette suspension que l'on met dans notre milieu
    ensemencer l'aide d'une psipette.
    Soit on a dj un bouillon nutritif ordinaire,
    cette fois la suspension na pas tre faite, on prend
    directement des gouttes du bouillon.

    Milieu hypersal

    En somme, il existe donc diffrents types de milieux


    avec leur diffrents ensemencements, mais ce sont
    les plus couramment utilis. En effet, il y a de
    nombreux types de milieux avec des
    ensemencement divers.
    Il existe par exemples diffrentes galeries API, qui
    sont plusieurs micro cupules avec chacune un
    caractre pouvant permettre lidentification dune
    bactrie.
    Pour pouvoir identifier une bactrie, il faut connatre
    ses exigences, pour connaitre les milieux
    ensemencer, car parmi les diffrents milieux solides
    et liquides, chacun on leurs propres proprits:
    synthtique, empirique, slectif,

    www.dmipfmv.ulg.ac.be/bacvet/m/cours3VMB/TP/m
    ilieux.doc
    http://pedagogie.actoulouse.fr/svt/serveur/labo/techniques/5steril.html
    http://books.google.fr/books?id=MQheAQlLRVAC&
    pg=PA14&lpg=PA14&dq=bouillon+nutritif+ordinaire
    &source=bl&ots=BcidHi1qlB&sig=Gm-6_9xUzFjaQ2MiS4w3cES0E&hl=fr&ei=sRG1SfLyDuTSjAeY17z
    YBQ&sa=X&oi=book_result&resnum=1&ct=result

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