Cours Génétiquemoléculaire

Cours de Génétique Moléculaire
Pr. HADDIOUI Abdelmajid
Chapitre 1 : Support de l’information génétique
Chapitre 2 : Expression de l’information génétique
Chapitre 3 : Mutation génétique
Chapitre 4 : Génie Génétique

Chapitre 1 : Support de l’information génétique
1- Introduction
La variété des organismes vivants est très importante (plus de 10
millions d'espèces). Chaque espèce est différente des autres. Cette
différence est due au contenu en information génétique de chaque
espèce. Les généticiens ont envisagé que des molécules spécifiques
étaient porteuses de cette information génétique.
2- Acide désoxyribonucléique (ADN) comme matériel génétique
2-1- La découverte de l’ADN

Expérience de Frederick Griffith (1928) :
Conclusion :
Le caractère virulence a été transféré d’une souche à une

autre. Griffith en a déduit l'existence d'un "principe
transformant" appelé transformation.
Expérience d’Avery, McLeod et McCarty (1944) :
Ces chercheurs ont repris les expériences effectués en 1928

par Griffith.
- Ils ont extrait l’ADN de la souche virulente tuée par la
chaleur et ont éliminé le plus de protéines possibles et l’ont
ajouté aux bactéries non-virulentes. Ces dernières ont été
transformées de façon permanente en des bactéries
virulentes. L’agent transformant est donc l’ADN.
- Aucune des autres fractions cellulaires, protéines, lipides

ou glucides, n’a pu aboutir à cette transformation.
Conclusion : Ils en déduiront grâce à cette expérience que

l'ADN est le porteur de l'information génétique.
Donc l’ADN représente l’information génétique qui
englobe les gènes.
Un gène est un segment d’ADN qui contient l’information
nécessaire pour la synthèse d’un produit biologique
fonctionnel, une protéine ou un ARN.
ADN a une double fonction :

* Assure sa propre réplication → base de l’hérédité.
* Synthèse les différentes protéines cellulaires →
caractères de l’individu.
3- Composition chimique de l’ADN
La molécule d’ADN est formée de plusieurs unités
appelées les nucléotides.
Chaque nucléotide est composé de trois composantes
moléculaires :
* un pentose : désoxyribose
* un groupement phosphate
* une base azotée purique (Adénine et Guanine) ou
pyrimidique (Cytosine et Thymine).
Pentose + Base azotée —► Nucléoside
Pentose + Base azotée + Phosphate —► Nucléotide
ADN est enchaînements de nucléosides 5'-phosphates

dont l'assemblage est réalisé par une liaison
phosphodiester
Purines :
Adénine Guanine
Pyrimidines :
Cytosine Thymine
Nucléoside
Nucléotide
4- Structure de l'ADN
La structure de l’ADN a été mise en évidence en 1953 par
James Watson et Francis Crick : très grande molécule
composées de deux chaines polynucléotidiques enroulées
l'une autour de l'autre pour former une double hélice.
Les bases s'apparient grâce à des liaisons H (hydrogène).
✓ 3 liaisons H entre C et G
✓ 2 liaisons H entre A et T
Remarque :
* Les 2 brins sont dits anti-parallèle, car leur
polarité est inversée.:
Dans une double hélice d'ADN, un brin est dans le sens
5'—►3' alors que le brin complémentaire est en sens
3'—►5'.
* La quantité totale des pyrimidines (T+C) est toujours

égale à la quantité totale des purines (A+G).
5- Propriétés physico-chimiques de l'ADN
Les liaisons hydrogène et les interactions hydrophobes

qui maintiennent la structure en double hélice sont
des forces faibles et des quantités relativement petites
d'énergie peuvent séparer les deux brins, un processus
appelé dénaturation.
5-1- Température de fusion
L’ADN peut subir une fusion réversible après chauffage à 98°C

; la chaleur rompt les liaisons hydrogènes entre les bases, ce
qui se manifeste par la séparation des deux brins. On parle
de fusion de l'ADN caractérisée par la température de fusion
(Tm : melting temperature).
Tm est la température pour parvenir à 50% de séparation des

deux brins.
Si l’ADN est riche en GC, Tm augmente. Si par contre il est

riche en AT, Tm diminue.
5-2- Absorption de la lumière ultraviolette
La propriété d'absorption des purines et pyrimidines dans

l'UV à des longueurs d’onde de 260nm et les protéines à
280nm permet de doser les acides nucléiques (C:
concentration), et aussi bien d'estimer la contamination
par les protéines lors de la purification des acides
nucléiques.
C = A260 * DF * 100 (unité: µg/µl A: Absorbance, DF: facteur
de dilution)
P (pureté) = A260 /A280 (Une solution d'ADN est considérée

pure si 1.7 ≤ P ≤ 2)
6- Mécanisme général de la biosynthèse de l’ADN :
la réplication.
Watson et Crick ont proposé un modèle de réplication de
l’ADN semi-conservative. Une des chaînes filles de l’ADN est
nouvellement synthétisée à partir d’une des chaînes
parentales qui s’est séparée de l’autre chaîne.
Dans la cellule, l'ADN se séparé en deux brins sur une

certaine longueur par l'hélicase.
L'ADN polymérase assemble alors, au fur et à mesure que la
molécule se sépare, le brin complémentaire 5' - 3' (qui
s'apparie au brin d'origine 3' - 5').
Lorsqu'une certaine longueur d'ADN est séparée en deux
brins, une autre ADN polymérase commence à assembler,
dans le sens contraire, le brin complémentaire de l'autre
partie.
Schéma général de la fourche de réplication de l'ADN
Réplication de l’ADN semi-conservative :
Lorsque l'information est transmise, d'une cellule à deux
cellules filles, les 2 copies sont représentées dans les deux
cellules.
ADN polymérase :
- La synthèse de la nouvelle copie se fait grâce à une
enzyme qu’on appelle ADN polymérase,
- La synthèse se fait dans la direction 5' → 3'.
L’ADN polymérase a besoin de 4 ingrédients :

* Les 4 dNTPs qui sont les précurseurs activés des
nucléotides.
* Un fragment d’ADN qui représente une amorce ayant une
extrémité 3’OH libre.
* Une matrice de l’ADN simple brin

Cours Génétiquemoléculaire

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Cours Génétiquemoléculaire

Transféré par

Informations du document

Titre original

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Cours Génétiquemoléculaire

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Cours de Génétique Moléculaire

Pr. HADDIOUI Abdelmajid

Chapitre 1 : Support de l’information génétique

Chapitre 2 : Expression de l’information génétique

Chapitre 3 : Mutation génétique

Chapitre 4 : Génie Génétique

2- Acide désoxyribonucléique (ADN) comme matériel génétique

2-1- La découverte de l’ADN

Le caractère virulence a été transféré d’une souche à une

Ces chercheurs ont repris les expériences effectués en 1928

- Aucune des autres fractions cellulaires, protéines, lipides

Conclusion : Ils en déduiront grâce à cette expérience que

ADN a une double fonction :

ADN est enchaînements de nucléosides 5'-phosphates

* La quantité totale des pyrimidines (T+C) est toujours

Les liaisons hydrogène et les interactions hydrophobes

L’ADN peut subir une fusion réversible après chauffage à 98°C

Tm est la température pour parvenir à 50% de séparation des

Si l’ADN est riche en GC, Tm augmente. Si par contre il est

La propriété d'absorption des purines et pyrimidines dans

P (pureté) = A260 /A280 (Une solution d'ADN est considérée

Dans la cellule, l'ADN se séparé en deux brins sur une

L’ADN polymérase a besoin de 4 ingrédients :

Vous aimerez peut-être aussi