Rapport de TP Le Phenotypage Rhesus

I- LE PHENOTYPAGE RHESUS
1- Généralités
Le système rhésus s’est avéré plus complexe que le
système ABO qui repose sur deux antigènes A et B. Le système
rhésus comporte six gènes qui sont appelés C, c, D, d, E et e et
de cinq antigènes C, c, D, E, et e. Le gène d ne produit pas
d’antigène. Les gènes rhésus comportent deux groupes de trois
gènes ; chaque groupe provenant d’un parent.
Lors des TP d’immunologie du 29/ 10/ 2024 nous avions
effectué le phénotype rhésus de l’échantillon (…) comme suite.
2- Matériel et réactifs
a- Matériels
- Plaque de groupage ;
- Pipette pasteur ;
- Bécher ;
- Tube à hémolyse
b- Réactifs
- Anti-E , anti-e, anti-D, anti-C, anti-c
- Serum physiologique ,
3- Mode opératoire
Sur une plaque d’opaline nous avions:
- Deposer une goutte de chaque réactif
- Deposer à coté de chaque réactif une goutte de sang total,
- Mélanger les deux (sang et réactifs) aves le fond d’un tube
à hémolyse ;
- Attendu 2 min pendant lesquelles on a soumis la plaque à
un mouvement lent de bascule autour de son axe.
- Lire la réaction
4- Résultats
Après avoir mis notre échantillon de sang O
positif en contact avec nos différents réactifs
anti-e, anti-E, anti-c, anti-C nous constatons
qu’il n’y pas de réaction d’agglutination .
5- Interprétation des résultats
La non agglutination de l’échantillon de de sang avec nos

différents réactifs conclus qu’il pas de présence d’antigène anti-
E, anti-e, anti-C, anti-c à la surface des hématies, seul
l’antigène anti-D est présent à la surface de ses hématies.
II- LA RECHERCHE D’ANTIGÈNE D FAIBLE
La recherche de l'antigène D faible est une procédure

importante dans le domaine de la transfusion sanguine et de la
médecine transfusionnelle. Cet antigène est une variante du
système Rhésus et sa présence ou absence peut avoir des
implications significatives pour les patients, en particulier lors
des transfusions ou des grossesses.
Les individus avec un antigène D faible peuvent parfois être

classés à tort comme Rhésus négatif, ce qui peut conduire à
des complications si un patient reçoit du sang incompatible. La
détection de cet antigène nécessite souvent des tests
spécifiques, comme l'utilisation d'anticorps anti-D, pour
s'assurer que les patients reçoivent le bon type de sang.
Ainsi, la recherche de l'antigène D faible est cruciale pour éviter

des réactions transfusionnelles indésirables et pour garantir la
sécurité des patients.
Pendant les TP immunologie nous avons faire la recherche de

l’antigène D faible par la technique de l’antiglobuline de
l’échantillon (…) pour confirmer le résultat du groupage sanguin
qui a donné un rhésus négatif.
1- Principe
La recherche de l’antigène D faible par la l’antiglobuline

comprend deux phases :
- La PHASE DE SENSIBILISATION, qui consiste à mettre en
contact l’anti-D avec les hématies supposées porter les
antigènes D faible.
- LA PHASE DE REVELATION, qui consiste à ajouter après un
cycle de lavage, l’antiglobuline qui va servir de pont pour
produire l’agglutination des hématies si l’anticorps anti-D a
été fixé sur les hématies.
2- Matériel et réactifs
a- Matériel
- Centrifugeuse ;
- Pipette pasteur ;
- Bécher ;
- Tubes à hémolyse.
b- Réactifs
- Antiglobuline polyvalente ;
- Anti-D (IgG) ;
- Sérum physiologique.
3- Mode opératoire
Nos réactions de recherche de l’antigène d faible ont été

encadrées par deux témoins (un témoin O positif et un témoin
O négatif) donc les résultats sont connus. Nous avons
techniquer comme suite :
- Faire 3 lavages à 3000 tr/mn pendant 3 mn des hématies à tester
- Réaliser une suspension à 5% des hématies à tester.
o Phase de sensibilisation
- Mettre une goutte de cette suspension dans un tube de Kahn:
- Ajouter une goutte d'anti-D (lgG)
- Homogénéiser et mettre le tube au bain marie à 37°C pendant 45 mn
- Effectuer 3 autres lavages à 3000 tr/mn pendant 1 mn: après le dernier
lavage renverser le tube et l'agiter énergiquement pour enlever toute trace
d'eau.
o Phase de révélation
- Ajouter une goutte d'antiglobuline; agiter le tube pour mettre les hématies
en suspension ;
- Centrifuger à 1000 tr/mn pendant l mn ou 3000 tr/mn pendant 20
secondes ;
- Faire la lecture.
4- Lecture
Nous avons faire la lecture en regardant le tube devant une source de
lumière
NB : En cas de difficulté de lecture, on utilise un miroir de Kahn comme
suit :
- Poser le tube incliner sur la face concave du miroir ;
- Lever légèrement le tube tout en regardant son image dans le miroir ;
- Agiter légèrement le tube au-dessus du miroir et observer.
 Résultats
( ……..)
 Interprétation

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La non agglutination de l’échantillon de de sang avec nos

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