FT M17-BOUILLON BK012 v5

FICHE TECHNIQUE
BOUILLON M 17
ENRICHISSEMENT DES LACTOCOQUES
1 DOMAINE D’UTILISATION
Le bouillon M17 a été mis au point pour la culture et le dénombrement des lactocoques dans le lait et les produits
laitiers. Il favorise la culture des mutants incapables de fermenter le lactose. Il est bien adapté à la culture de
Lactococcus lactis qui est un microorganisme particulièrement exigeant.
2 HISTORIQUE
Terzaghi et Sandine ont montré que l’incorporation de ß-glycérophosphate de sodium à un milieu M16 permettait
d’accroître le pouvoir tampon du milieu. Le nouveau milieu obtenu, dénommé M 17, a permis d’augmenter le
développement des streptocoques lactiques qui sont des microorganismes produisant d’importantes quantités d’acide
par utilisation homofermentative du lactose.
3 PRINCIPES
Les peptones de caséine, de viande et de soja contiennent les sources de carbone et d’azote nécessaires à la culture
des lactocoques.
L’extrait de levure est une source de vitamines du groupe B.
L’acide ascorbique agit comme stimulateur de croissance.
Le lactose est fermenté en acide lactique. Celui-ci est progressivement neutralisé par le glycérophosphate de sodium
afin que soit stabilisé le pH du milieu.
4 FORMULE-TYPE
La composition peut être ajustée de façon à obtenir des performances optimales.
Pour 1 litre de milieu :

- Tryptone .................................................................................................................... 2,50 g
- Peptone pepsique de viande .................................................................................... 2,50 g
- Peptone papaïnique de soja ..................................................................................... 5,00 g
- Extrait autolytique de levure ...................................................................................... 2,50 g
- Extrait de viande ....................................................................................................... 5,00 g
- Lactose ...................................................................................................................... 5,00 g
- Glycérophosphate de sodium ................................................................................. 19,00 g
- Sulfate de magnésium .............................................................................................. 0,25 g
- Acide ascorbique ....................................................................................................... 0,50 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25 °C : 7,1 ± 0,2.
5 PREPARATION
 Mettre en solution 42,2 g de milieu déshydraté (BK012) dans 1 litre d’eau distillée  Reconstitution :
ou déminéralisée. 42,2 g/L
 Agiter lentement jusqu’à dissolution complète.
 Répartir en tubes de capacité appropriée, à raison de 20 mL par tube, ou en  Stérilisation :
flacons. 20 min à 115 °C
 Stériliser à l’autoclave à 115 °C pendant 20 minutes.
 Refroidir à température ambiante.
Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – 60002 Beauvais Cedex – France Page 1 sur 2
Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr
6 MODE D’EMPLOI
 Ensemencer chaque tube avec 1 mL d’inoculum ou de ses dilutions décimales  Ensemencement :

successives. 1 mL
 Incuber à
o 37 ± 1 °C pendant 48 heures pour la culture de Streptococcus  Incubation :
thermophilus. 48 h à 37 °C
o 30 ± 1 °C pendant 72 heures pour la culture des lactocoques mésophiles. 72 h à 30 °C
7 LECTURE
La croissance est mise en évidence par un trouble dans le milieu.
8 CONTROLE QUALITE
Milieu déshydraté : poudre crème, fluide et homogène.

Milieu préparé : solution brun-clair, limpide.
2
Réponse culturale après 48 heures d’incubation à 37 °C, inoculum ≤ 10 microorganismes :
Microorganismes Croissance
Streptococcus thermophilus ATCC 14485 Bonne, score 2
Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 11454 Bonne, score 2
9 CONSERVATION
Milieu déshydraté : 2-20 °C.

La date de péremption est mentionnée sur l’étiquette.
Milieu préparé en tubes ou en flacons (*) : 180 jours à 2-8 °C.

(*) Valeur indicative déterminée dans les conditions standards de préparation, suivant les instructions du fabricant.
10 PRESENTATION
Milieu déshydraté :
Flacon de 500 g ................................................................................................................................................... BK012HA
11 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
Terzaghi, B.E., and Sandine, W.E.. 1975. Improved medium for lactic streptococci and their bacteriophages. Applied
Microbiology, 29 : 807-813.
ISO 9232 / IDF 146. Février 2003. Yaourt. Identification des micro-organismes caractéristiques (Lactobacillus
delbrueckii subsp. bulgaricus et Streptococcus thermophilus).
12 AUTRES INFORMATIONS
Les mentions portées sur les étiquettes sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce
document et sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis.
Code document : BOUILLON M17_FR_V5.

Date création : 06-2003
Date de révision : 03-2016
Motif de révision : Révision générale.
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La composition peut être ajustée de façon à obtenir des performances optimales.

Pour 1 litre de milieu :

 Ensemencer chaque tube avec 1 mL d’inoculum ou de ses dilutions décimales  Ensemencement :

La croissance est mise en évidence par un trouble dans le milieu.

Milieu déshydraté : poudre crème, fluide et homogène.

Milieu déshydraté : 2-20 °C.

Milieu préparé en tubes ou en flacons (*) : 180 jours à 2-8 °C.

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