Zahra 3
Zahra 3
Zahra 3
Département : Microbiologie
Intitulé :
Le : 23.09.2021
Jury d’évaluation :
ensemble.
●Nous remercions en fin tous ceux qui n’ont pas été cités dans
●Mes très chers parents qui m’ont offert leur amour, leur soutien et qui
n’ont cessé de m’encourager et m’enseigner persévérance durant
toutes mes années d’études.
●Mes sœurs INES et SIRINE, mon petit frère Raouf ceux qui ont
partagé avec moi tous les moments d’émotion lors de la réalisation de ce
travail, ils m’ont chaleureusement supporté et encouragé tout au long de
mon cursus .
●A ma famille, mes proches, mes cousins et à ceux qui me donnent de
l’amour et de la vivacité.
●A tous mes amis et mes camarades qui m’ont toujours encouragé, et à
qui je souhaite plus de succès.
●Mes enseignants durant tous mon parcours qui m’ont beaucoup appris.
●A mes binômes Samiha et Racha merci pour tous les beaux moments de
joie, de rires, de soutien, et mêmes dans les moments difficiles.
Vous êtes les meilleurs amies et le meilleur support.
●A tous ceux que j’aime.
Rym
Dédicaces
KHz Kilohertz.
PTZ Pentylènetétrazole
Tr Tour
DMSO Diméthylsulfoxyde.
i i
Liste des figures
Figure 1 : Aspect général de Crocus sativus L. ………………………………. 07
ii
ii
Liste des tableaux
Tableau 1 : Les différentes espèces de crocus automnal………………......... 08
iii
iii
Résumé
La culture de la plante de Crocus sativus L. ; dont le safran, est extrait a fait le tour du
monde et commence à prendre de l’ampleur en Algérie. La structure chimique des
stigmates du Crocus sativus L. a fait l'objet de plusieurs études au cours des dernières
années car elle comprend trois métabolites principaux : la crocine, la picrocrocine et
le safranal responsables de la couleur, la saveur et l’arôme respectivement.
L’obtention de tous ingrédients précieux de cette plante fait appel à différentes
techniques d’extractions et de purifications ainsi que des processus de caractérisations
afin de garder l’intégrité des substances bioactives. Cette composition riche du safran
en molécules bioactives lui confère plusieurs propriétés bénéfiques dans le domaine
thérapeutique à savoir, les activités anti-oxydantes, anticancéreuses, anti-
inflammatoires, antitussives, anti-convulsivantes…, mais aussi, elle a pu franchir le
domaine cosmétique d’une manière fructueuse pour contribuer à la protection de la
peau contre différents facteurs.
Mots clés : Crocus sativus L., crocine, picrocrocine, safranal, méthodes d’extraction,
antimicrobien.
iiii iiii
Abstract
The cultivation of the Crocus sativus L ; plant from which saffron, is extracted has
gone around the world and is beginning to grow in Algeria. The chemical structure of
the stigmas of Crocus sativus L. has been the subject of several studies in recent years
as it includes three main metabolites: crocine, picrocrocine and saffranal responsible
for colour, flavour and aroma respectively. Obtaining all the precious ingredients of
this plant requires different extraction and purification techniques as well as
characterization processes in order to maintain the integrity of the bioactive
substances. This rich composition of saffron in bioactive molecules gives it several
beneficial properties in the therapeutic field, namely, anti-oxidant, anticancerous, anti-
inflammatory, antitussive, anti-convulsant ..., but olso, it has been able to cross the
cosmetic field in a fruitful way to contribute to the protection of the skin against
various factors.
iiii iiii
الملخص
اَتشزث سراعت َببث Crocus sativus L.انذي ٌُستخزج يُّ انشعفزاٌ فً خًٍع أَحبء انعبنى ٔبذأث تكتسب
سخ ًًب فً اندشائز .كبٌ انتزكٍب انكًٍٍبئً نٕطًبث Crocus sativus L.يٕضٕعًب نهعذٌذ يٍ انذراسبث فً
انسُٕاث األخٍزة ألَّ ٌتضًٍ ثالثت َٕاتح رئٍسٍت ًْ :انكزٔسٍٍ ٔانبٍكزٔكزٔسٍٍ ٔانظفزاَبل انًسؤٔنت عٍ
انهٌٕ ٔانُكٓت ٔانزائحت عهى انتٕانًٌ .تطهب انحظٕل عهى خًٍع انًكَٕبث انثًٍُت يٍ ْذا انُببث تقٍُبث
استخزاج ٔتُقٍت يختهفت ببإلضبفت إنى عًهٍبث تٕطٍف يٍ أخم انحفبظ عهى ساليت انًٕاد انُشطت بٍٕنٕخًٍبْ .ذِ
انتزكٍبت انغٍُت يٍ انشعفزاٌ فً اندشٌئبث انُشطت بٍٕنٕخًٍب تًُحّ انعذٌذ يٍ انخظبئض انًفٍذة فً انًدبل
انعالخً :ًْٔ ،يضبداث األكسذة ٔ ،يضبدة نهسزطبٌ ٔ ،يضبدة نالنتٓبببث ٔ ،يضبدة نهسعبل ٔ ،يضبدة
نهتشُح ٔ ، ...نكٍ ،كبٌ قبدر أيضا عهى عبٕر يدبل انتدًٍم بطزٌقت يثًزة نهًسبعذة فً حًبٌت انبشزة يٍ
انعٕايم انًختهفت.
الكلمات المفتاحية
، ،Crocus sativus L.كزٔسٍٍ ،بٍكزٔكزٔسٍٍ ،سبفزاَبل ،طزق االستخالص.
iiii iiii
Table des matières
Liste d’abréviation…………………………………………………………...…...i
Résumé……………………………………………………………….iiii
Introduction ……………………………………………………..…… 01
Ⅰ-1- Etymologie………………………………………………………... 04
Ⅲ-Taxonomie et classification…………………………………………………... 05
Ⅵ- Culture du safran…………………………………………………………… 08
1- La culture………………………………………………………………... 09
1-1 La plantation…………………………………………………………... 09
1-2 La floraison……………………………………………………………. 09
2-La récolte……………………………………………………………………… 10
2-1-Emondage……………………………………………………………… 11
2-2-Séchage…………………………………………………………………. 11
2-3-Stockage et conditionnement…………………………………………. 11
Ⅱ-1-définition……………………………………………………………... 16
Ⅲ-1-L’hydro-distillation………………………………………………..... 17
Ⅲ-2-Extraction par macération………………………………………….. 17
Ⅲ-6-Autres techniques…………………………………………………… 19
Ⅴ-1-Culinaire……………………………………………………………………20
Ⅴ-2-Cosmétique………………………………………………………………20
Ⅴ-3-Médical…..………………………………………………………..…21
Chapitre Ⅲ : Le pouvoir du safran
1- Matériels et méthodes………………………………………………………. 30
1-1-Collecte d'échantillons……………………………………………… 30
1-2-Préparation de l'extrait brut………………………………………. 30
1-3-Organismes d'essai pour l'évaluation de l'activité antimicrobienne.30
1-4-Activité anti-microbienne…………………………………………… 31
1-5-Concentration minimale inhibitrice……………………………...…. 31
1-6-Détermination de la concentration minimale bactéricide/fongicide...31
2-Analyse statistique……………………………………………………………… 32
3-Résultats et discussion……………………………………………………..…… 32
3-1-Activité antimicrobienne des extraits de C. sativus …………..……. 32
3-2-Concentration minimale inhibitrice ……………………………...… 34
3.3. Détermination de MBC et MFC……………………………………. 36
4-Conclusion………………………………………………………………………. 37
Introduction
Introduction
Crocus sativus L. peut supporter des conditions climatiques très sévères du fait
de sa morphologie et physiologie; ceci dit, le bulbe de safran est très fragile, craignant
les sols très argileux. Pour qu’il pousse, sa culture doit se faire à différentes altitudes
au-dessus de 650 m et les sols doivent être bien drainants avec des niveaux élevés
d'argile; par conséquent, les sols très légers ne conviennent pas à la culture en effet sa
culture exigeante fait du safran une ressource à haute valeur ajoutée permettant la
création d’emplois et l’amélioration du revenu familial, notamment, en zones rurales
L'importance de cette espèce est due à l'origine des propriétés de ses stigmates
secs, tels que : couleur jaune or, saveur amère et arôme fascinant; ces trois
caractéristiques sont attribuées, respectivement, à trois molécules chimiques
essentielles : la crocine, la picrocrocine et le safranal. Les différents bienfaits du
safran sont dus à sa composition riche en substances bioactives. Énormément de
chercheurs se sont intéressés à cette épice, en vue d’apprendre d’avantage sur sa
composition, dans le but d’identifier le maximum de vertus à exploiter et à valoriser.
Ils se sont aussi intéressés aux autres parties du Crocus sativus L., à savoir le bulbe,
les feuilles et la fleur, afin de déterminer les bienfaits qu’ils puissent y avoir
(Palomares, 2015).
1
Introduction
Dans le premier chapitre, nous allons nous pencher sur l’origine, l’histoire et ces
déférentes espèces, Nous établirons ensuite les étapes essentielles pour l’obtention du
safran bio et l’étude du marché mondiale de Crocus sativus L.
2
Chapitre I
La plante du safran
3
Chapitre Ⅰ la plante du safran
Ⅰ- Historique du safran
Le safran est connu dans la culture et les coutumes humaines date de plus de
3000 ans (Deo, 2003), il est présent dans de nombreuses cultures, continents et
civilisations. C’est un géophyte herbacé pérenne dans la famille Iridacée, il se
propage par voie végétative par corme, sa reproduction ne peut se multiplier sans la
main de l’homme (Chahine, 2014).
Ⅰ-1-Etymologie
Nous pouvons comprendre de part leur écriture et leur prononciation que les
mots Crocus sativus et safran proviennent d’origines différentes. En effet « Crocus
sativus», nom adopté par le scientifique Linné en 1754 serait une transcription en
latin du mot grec « krokos » qui signifie filament, poil, en référence à la forme des
stigmates qui donneront une fois séchés, cette fameuse épice (Aucante, 2000).
Quant au mot safran, celui-ci a une origine latine : « safranum », tiré de l’arabo-
persan «za’faran » dérivant « d’asfar » signifiant jaune (fleur jaune) (Crozet, 2012).
L’origine arabo-persane est donc incontestable et nous pouvons de plus mentionner
l’existence d’un village existant sur les bords de l’Euphrate, il y a plus de 4 300 ans,
nommé Azupirano signifiant « ville du safran ».
Le terme « sativus » signifie « cultivé », car Crocus sativus est peu connu pour se
développer à l’état sauvage, mais est cultivé depuis très longtemps pour ses stigmates
On retrouve une origine mythologique commune dans les dénominations
internationales du mot safran (Favre, 2008):
Français : safran
Anglais : saffron
Allemand : Safran
Espagnol : azafrán
Italien : zafferano
Arabe : za’faran
Polonais : szafran
Grec : zafora
Chinois : fan huong hua (épice), Xi hong hua (remède)
Russe : schafran
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Chapitre Ⅰ la plante du safran
Ⅲ-Taxonomie et classification
Selon la classification botanique de Cronquist de 1981, qui est basée sur des
critères anatomiques, morphologiques et chimiques dans le but de différencier les
angiospermes, Crocus sativus L. appartient à :
▪Règne : plantae.
▪Embranchement : Spermatophyte
▪Sous-embranchement : Angiospermes (Magnoliophyta)
▪Classe : Monocotylédones (Liliopsida)
▪Sous-classe : Liliidae
▪Ordre : Liliales
▪Famille : Iridaceae
▪Sous-famille : Crocoïdeae
▪Genre : Crocus
▪Espèce : Crocus sativus L.
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Chapitre Ⅰ la plante du safran
Le Crocus domestique (Crocus sativus L.) est une espèce de plante bulbeuse (ou à
corne de 5 cm de diamètre entouré d'un réseau de fibres brunes) et vivaces, géophytes de 10 à
30 cm de long émergent du sol, glabrescente à floraison automnale (de septembre à
novembre), inexistance à l’état sauvage (Chevalier, 1926). Triploïde, stérile et peu rustique
orange de réserve ressemblant à un bulbe (Arvy et Galouin, 2003). La fleur de safran en
forme de coupe ou entonnoir dressé, odorantes, de couleur violette clair ou foncé, aux
nervures violet sombre et aux taches sombres à la base, possède de longues et fines feuilles
varient de 5 à11 par bourgeon et se développeront avec ou après la fleur, avec 6 tépales (trois
pétales et trois sépales pétaloïdes). (Abbara, 2017). Les 3 étamines jaunes de long de 22 mm
et d’un pistil de 10 cm de long se compose d'un style mince, jaune orange et se divise en 3
longs stigmates de couleur rouge orangé ou rouge. (Abbara, 2017) d’une longueur de 3 à 4
cm (Crozet, 2012). Ces stigmates ont la forme d’une corne et très étroit .Ils ont un aspect
brillant à l’ouverture de la fleur, fins à la base et plus larges à l’extrémité, les styles aussi
appelé les tiges reliant un stigmate avec le reste de la plante (Rau, 1997 ; Hill, 2004) (Figure
1) et les parties utilisées de la plante sont Les stigmates (trois stigmates rouges foncés).
6
Chapitre Ⅰ la plante du safran
7
Chapitre Ⅰ la plante du safran
Ⅵ- Culture du safran
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Chapitre Ⅰ la plante du safran
Janv. Fév. Mar Avr. Mai Juin Juil. Août Sept. Oct. Nov. Déc.
Pour obtenir le safran, différentes étapes sont nécessaires : (Ursat, 1913 ; Algrech, 2001),
● Plantation et floraison
● Récolte manuelle de la fleur dans des paniers
● Émondage (récupération des stigmates)
● Séchage des stigmates
C’est une culture d'altitude variant entre 650 et 1200 m Avec des besoins en eau
relativement moyens (600 à 700 mm/an), (Fellah, 2021). Requiert un sol léger et bien
drainé (Jardins de l'écoumène, 2021)
1-1 La plantation : Il faut respecter plusieurs critères pour l'identification du milieu favorable
pour la plantation, avec une préparation des bulbes de diamètre inférieur à 2.5 cm, (Fellah,
2021).
Elle peut se faire soit par groupage de 3 à 4 bulbes par trou ou d’un seul bulbe par trou d’une
distants de 10 à 15 cm et de profondeur.
1-2 La floraison : Vers fin août, le bulbe «se réveille» et son activité métabolique augmente.
Ce processus fini par la sortie de la fleur (figure 2), de l’état végétatif à un état floral
(Lazérat, 2009).
9
Chapitre Ⅰ la plante du safran
2- La récolte
Procéder à la récolte sans délai, idéalement le matin après que la rosée se soit
évaporée.
Coupez alors le pistil avec ses trois stigmates à l’aide d’un petit ciseau ou avec vos ongles
(figure 10) (Jardins de l'écoumène, 2021).
10
Chapitre Ⅰ la plante du safran
2-1-Emondage
l’emondage conseillé le même jour de récolte. Avec des conditions très hygiéniques
(Figure 4) (Fellah, 2021).
2-2- Séchage
C’est une opération délicate, une fois les stigmates sont isolés, ils sont séchés à
l'ombre ou sur le feu (Fellah, 2021).
2-3-Stockage et conditionnement
La meilleure façon de conserver tout l’arôme de «l’or rouge » est de l’entreposer dans
un bocal de verre (Figure 5) à l’abri de la lumière et de l’humidité, (Jardins de l'écoumène,
2021).
11
Chapitre Ⅰ la plante du safran
Ce résultat encourage le couple pour lancer une seconde expérience l’année suivante. Les
succès se suivent, et le couple exposera les résultats de son expérience et lui commercialisé
sous le nom Safran Tariki (Safran, ma route).
Le couple organise des formations sur la culture du safran et des journées d’information
dans des salons nationaux et encadrer ceux qui souhaitent entrer sur le terrain. Car cette
opportunité pourra générer des ressources financières importantes pour l’Algérie et permettra
aussi d’offrir des postes d’emplois aux jeunes.
Depuis 10 ans sur le sol Algérien, Le couple a créé 90 safranières dans plusieurs Willayas :
Constantine, Oum El Bouaghi, Oran, Biskra, Khanchela et Tizi Ouzou, Djelfa et Sétif.
12
Chapitre Ⅰ la plante du safran
13
Chapitre II
Propriétés phytochimiques du safran
14
Chapitre II Propriétés phytochimiques du safran
● 10 % d’eau.
15
Chapitre II Propriétés phytochimiques du safran
Les flavonoïdes
Ils sont aussi présents dans le safran. Nous pouvons nommer des flavonols, plus
précisément des kaempférols tels :
- le kaempferol 3-O-sophoroside.
- le kaempferol 3-O-sophoroside 7-O-glucoside.
- le kaempferol 3,7,4'-O-triglucoside http://phenol-explorer.eu/contents/food/814
D’autres flavonols, en plus des kaempférols, ont été identifiés dans les tépales de Crocus
sativus comme la quercétine et l’isorhamnétine (Abert-vian et al., 2013).
Ⅱ-1-définition
16
Chapitre II Propriétés phytochimiques du safran
L'huile de safran est préparée à partir du stigmate d'une fleur par différentes méthodes
d’extraction. Il s’agit d’un extrait pur et naturel provenant de plante (Roulier, 1990),
(Wegrzyn et Lamendnh, 2005), il a presque les mêmes caractéristiques que l'épice (Nafees
et Mohamed, 2016).
Ⅲ-1- L’hydro-distillation
Cette technique est utilisée pour extraire le safranal et récupérer les huiles essentielles.
L’hydro-distillation de l’huile essentielle est un processus d'extraction de composants volatils
dans lequel la vapeur d'eau pénètre dans les cellules végétales et agit comme un transporteur
de composés volatils. Dans cette méthode, les stigmates de safran séchés sont trempés dans de
l'eau (ou un mélange d'eau et d'alcool) pendant un certain temps, puis en chauffant le
mélange jusqu'au point d'ébullition, les substances volatiles sont transportées dans la vapeur
vers un condensateur refroidi par un courant d'eau, ce qui liquéfie les composés pour la
collecte (El Asbahani et al., 2015).
Un large spectre de molécules spécifiques du safran a été extrait par macération, cette
technique est initiée en mélangeant une quantité appropriée de safran et de solvant, une
agitation est effectuée pendant un temps, à une vitesse prédéterminée et se termine par la
filtration (Sarfarazi et al., 2015).
17
Chapitre II Propriétés phytochimiques du safran
Cette extraction par macération de stigmates de fleurs de safran dans le liquide, comprend
une concentration en poids de stigmates dans ce liquide étant supérieure ou égale à 0,55 g/L,
et la macération étant réalisée sous vide à une température comprise entre 45°C et 55°C
pendant une durée comprise entre 40 heures et 52 heures. De préférence, les stigmates sont
retirés du liquide après l’étape d’extraction.
Ce procédé permet d’obtenir, sans intervention d’un agent chimique extérieur, un extrait de
safran ayant une concentration en picrocrocine et en safranal compris dans les stigmates de
fleurs de safran utilisés pour la macération
(file:///C:/Users/DELL/Downloads/Documents/EP19212460NWA1.pdf)
L’extraction assistée par ultrasons (EAU) est utilisée pour l’extraction des crocetines,
crocines, safranal, picrocrocines et les glycosides présents dans le safran en utilisant des
solvants aqueux et/ou organiques tels que l'éther diéthylique et du cyclohexane, dans la
gamme de fréquences allant de 20 à 60 kHz (Farhad et said , 2019). L’EAU a été développée
pour libérer les composants organiques et inorganiques piégés des matières végétales en
exacerbant les transferts massiques et en accélérant le contact entre le solvant et les composés
cibles (Garavand et al., 2017).
L’extraction par un fluide supercritique (SFE) est une technique qui utilise des
fluides supercritiques comme solvants d'extraction tell que le dioxyde de carbone (CO2). Le
taux élevé de l’affinité du (CO2) supercritique avec les composants non polaires permet la
récupération considérable de safranal par rapport aux crocines.
18
Chapitre II Propriétés phytochimiques du safran
Ⅲ-6-Autres techniques
Des études ont été effectuées afin de développer une extraction des anthocyanes
présents dans le safran par solvant à médiation enzymatique. Pour ceci, l’utilisation de
cellulase, d'hémicellulase et de péctinase à différents niveaux a révélé une augmentation de
40% du taux des anthocyanines obtenue par l’extraction assistée par des enzymes (EAE).
Cette méthode a été optimisée par rapport à l’extraction par l’éthanol considéré comme
solvant de référence, sachant que la qualité de l’extrait assistée par enzyme était plus stable et
la couleur était distincte (Lotfi et al., 2015).
Ⅲ-6-2-Extraction au soxhlet
Dans cette méthode, le safran séché est placé dans une cartouche d'extraction et est extrait à
l'aide d'un solvant approprié (Goleroudbary et Ghoreishi, 2016).
Des effets toxiques sont rapportés à partir de 5 g, avec une dose semi-létale DL50
(dose provoquant 50% de mortalité dans la population étudiée, pendant un temps donné, par
administration unique) d’approximativement 20,7 g/kg de poids vif (Abdulaev et Espinosa-
Aguirre, 2004). Par comparaison, la dose semi-létale du sel de table sur le rat, par voie orale
est de 3,3 g/kg http://omnilogie.fr/O/DL_50.
19
Chapitre II Propriétés phytochimiques du safran
Il semble qu’à des doses de plus de 10 g, le safran peut induire l'avortement avec des effets
secondaires comprenant un appétit diminué, un état de somnolence, des nausées et des
vomissements, des hémorragies utérines, des hématuries, des épistaxis, des saignements de
la muqueuse gastro-intestinale et des vertiges. Le tissu conjonctif, la peau et les muqueuses
peuvent se colorer en jaune et imiter ainsi un ictère.
Des descriptions d’effets secondaires sont en grande partie exposées dans une littérature plus
ancienne (avant 1925). Selon ces sources, des nausées ont été observées pour des doses
comprises entre 1,2 et 2 g suivies de vomissements, de diarrhées et de saignements.
Apparemment, il n'y avait aucune corrélation entre la posologie et les effets secondaires.
Dans certains cas, l'ingestion quotidienne de 4 g de safran pendant plusieurs jours n'a pas
causé de désagréments, même chez les femmes enceintes, tandis que cette même dose a été
spécifiée comme mortelle dans d'autres cas. Cette anomalie étonnante ne serait pas due au
safran mais plutôt à une substitution telle que le « safran des prés », Colchicum autumnale. De
plus, de nombreux cas similaires ont été signalés en Allemagne, où le safran n'est pas une
culture typique, tandis que le colchique d’automne est relativement abondant. Le colchique
d’automne, également surnommé « safran bâtard » se distingue de Crocus sativus de par ses
styles blanchâtres et ses six étamines. Toutes les parties de cette plante sont toxiques.
Comparé aux essais humains, les études in vivo chez les animaux indiquent une toxicité très
basse voire même inexistante du safran et de ses extraits. Dans seulement de très rares cas,
l’extrait de safran est la cause de réactions allergiques (Melnyk et al., 2010) (Betti et al.,
2007).
Ⅴ-Usage de safran
Ⅴ-1-Culinaire
Le safran est très apprécié dans les recettes en tant qu’épice. Il parfume avec subtilité
les aliments, comme il agit avec d’autres aromes donc un exhausteur de goût. (Chahine,
2014).
Ⅴ-2-Cosmétique
Le safran, dans les traditions des populations locales, est un produit qui incarne les à
la fois les signes de beauté et les vertus de protection contre les mauvais esprits, il est utilisé
comme tache histologique, c'est-à-dire en tant que colorant pour le tissu conjonctif
20
Chapitre II Propriétés phytochimiques du safran
(Srivastava et al., 2010).Et actuellement dans les produits cosmétiques pour ses effets
adoucissants et antioxydant comme les crèmes
hydratentes (http://www.festivalinternationalsafran.com/utilisations-du-safran/).
Des extraits secs de safran ont été utilisés comme ingrédients dans une crème
hydratante. Les propriétés de cette formulation ont été examinées à l’aide de tests épicutanés
sur divers sujets âgés de 18 à 28 ans. Les résultats ont montré une augmentation de la
brillance et de l’éclaircissement de la peau par rapport à cette crème à base de safran.
À cette fin les cosmétologues de la société L’Oréal ont examiné les effets antioxydants et anti-
inflammatoire des crocines sur les kératinocytes et les fibroblastes humains normaux in vitro.
Ils ont découvert que la production de pro-inflammatoires est inhibée en présence de l’ester de
crocétine, tandis que la défense antioxydante est augmentée. Sur la base de leur conclusion,
ils ont suggéré que l’ester de crocétine pourrait être exploité comme un agent cosmétique
prometteur pour la prévention du vieillissement de la peau (Fagot et al., 2018).
Les huiles essentielles sont extraites par la technique d’hydroditillation des stigmates
de Crocus sativus L. Grâce à sa molécule bioactive qui est le safranal.
Les effets protecteurs du safran contre les UV ont été en surbrillance. En particulier, les
émulsions huile essentiel de safran dans l’eau préparée, ont été examinés pour leur activité
antisolaire en mesurant leur facteur de protection solaire (SPF) et ont montrés que le safran est
utilisé comme agent naturel absorbant les UV dans les produits de protection solaire
(Ntohogian et al., 2018).
Le safran est très réputé par ses propriétés médicinales depuis longtemps. Il est
utilisé par les populations locales pour se soigner de certains problèmes de santé : antidote aux
poisons, apaiser les maux relatifs aux rhumes et aux problèmes respiratoires, calmer les
douleurs de l’accouchement et de la première dentition ainsi que pour traiter les cicatrices du
nouveaux circoncis.
21
Chapitre II Propriétés phytochimiques du safran
Pour la nouvelle médecine, les résultats de 14 travaux de recherche sur les effets du safran sur
la santé ont confirmé ces connaissances empiriques mais aussi que le safran peut être utilisé
Pour: la dépression, l’Alzheimer, le syndrome prémenstruel, les problèmes oculaires et le
régime (http://www.festivalinternationalsafran.com)
La science médicale moderne reconnaît au safran seulement ses propriétés de stimulant du
système nerveux et digestif à dose de (0,20 à 2 g), mais à forte dose, le safran peut être très
dangereux : délire, vertiges, pesanteur de tête, hypotonie musculaire, somnolence, pâleur,
bradycardie et la mort (https://www.aly-
abbara.com/museum/photographie/Iridaceae/Crocus/Safran-Crocus-sativus-02.html)
22
Chapitre Ⅲ
Le pouvoir de safran
23
Chapitre Ⅲ Le pouvoir de safran
Cette expérience est basée sur des extraits et des fractions de tépales et d'étamines
isolées de crocus par imprégnation au méthanol. Après séchage, l'extrait brut a été extrait
avec du chloroforme, de l'acétate d'éthyle, du méthanol et de l'eau. Le solvant de l'extrait et
24
Chapitre Ⅲ Le pouvoir de safran
les fractions ont été éliminés sous pression réduite dans un évaporateur rotatif jusqu'à ce qu'ils
soient complètement secs.
Les résultats montrent que l'extrait au méthanol du morceau de périanthe a une activité
antibactérienne significative contre Escherichia coli, Staphylococcus aureus et le bacille
typhoïde. Le diamètre de la zone d'inhibition de Bacillus cereus et Streptococcus dysenteriae
varie de 13 à 22 mm, et le composant acétate d'éthyle a la meilleure activité antibactérienne
contre Bacillus cereus, avec un diamètre de 15 mm. La partie eau et chloroforme a un faible
effet sur les souches étudiées. La partie acétate d'éthyle des étamines de safran a la meilleure
activité antibactérienne contre Salmonella typhimurium, Escherichia coli et la dysenterie à
Salmonella .Le diamètre de la zone d'inhibition varie de 14 à 21 mm. L'extrait le plus actif est
l'extrait total (Nouioua et Sofiane, 2019).
25
Chapitre Ⅲ Le pouvoir de safran
La toxicité plus élevée de la partie externe vis-à-vis des champignons a conduit les chercheurs
à étudier l'influence de la saponine (molécules produites naturellement à partir de plantes ou
d'animaux caractérisées par une propriété de toxicité), qui ne sont détectées qu'à la partie
externe du bulbe, principale influence de ces composés. sur la toxicité était contre F.
oxysporum, l'agent pathogène le plus commun dans les bulbes de safran, suivi de B. spicifera
et A. niger. L'inhibition de la croissance de P. raistriicki et R. nigricans est presque
négligeable. Cependant, d'autres composés tels que les composés phénoliques peuvent
également être responsables de l'activité fongicide détectée (Rubio-Moraga et al., 2013).
La crocine, dérivée du safran dispose d’un effet inhibiteur puissant sur la formation des
colonies cellulaires tumorales (Abdullaev et al., 2003).
● Activité antitussive
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Chapitre Ⅲ Le pouvoir de safran
● Antidépresseur
Grâce au safranal contenu dans ses parties volatiles, le safran agit sur le système
nerveux. Il traite les insomnies, car il est légèrement sédatif, tout en étant précieux en cas de
dépression légère, de stress, d'anxiété et de fragilité émotionnelle. (Fleurentin, 2013).
● Activité anti-convulsivante
Le Crocus sativus et son constituant safranal ont montré effets préventifs sur les
marqueurs inflammatoires (Gholamnezhad et al., 2013).
Il a soigné les otites, les douleurs anales, la goutte, les gonflements, les douleurs dentaires et
lombaires ainsi que les abcès (Hosseinzadeh et Nassiri-Ask, 2013).
Les caroténoïdes, dont font partie les crocines et les crocétines, jouent un rôle
important sur la santé en agissant en tant qu'antioxydants naturels. Ils protègent les cellules et
les tissus des radicaux libres et des espèces réactives de l’oxygène qui sont les facteurs les
plus importants des dommages oxydatifs dans le corps humain (Palomares, 2015).
● Hypocholestérolémiant
Le safran permet de lutter contre l'excès de cholestérol. Il participe à la prévention
des accidents cardio-vasculaires (Minker, 2013).
● Anti Alzheimer
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Chapitre Ⅲ Le pouvoir de safran
L’effet de l'extrait de pétale de Crocus sativus a été étudié sur la pression artérielle
chez le rat anesthésié (Fatehi et al., 2003).
28
Chapitre Ⅳ
Analyse d’un article scientifique
29
Chapitre Ⅳ Analyse d’un article scientifique
Cet article consiste en une étude de l’activité antimicrobienne des extraits méthanoïque
et éthers de pétrole des stigmates de Crocus sativus L. qui ont été testés contre diverses
souches bactériennes (Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa,
Staphylococcus aureus et Escherichia coli) et des champignons (Candida albicans,
Aspergillus niger et Aspergillus fumigatus) par la méthode de diffusion en puits d'agar (Syed
et al., 2016)
1- Matériels et méthodes
Des échantillons (Crocus sativus L.) ont été collectés à Pampore Pulwama, Cachemire,
Inde au cours d’octobre à novembre 2014. Les stigmates frais ont été séparés manuellement
des fleurs entières de safran par la procédure traditionnelle. Les échantillons ont été séchés
sous vide et conservés à 4°C à l'abri de la lumière jusqu'à leur analyse. Tous les solvants
utilisés ont été achetés auprès de Hi Media, Pvt. Ltd. Mumbai, Inde.
Dix grammes de stigmates frais de C. sativus de matériel végétal ont été extraits avec
200 ml de méthanol dans un agitateur incubateur (100 tr/min) pendant une nuit à température
ambiante. Les extraits méthanoïques ont été filtrés en utilisant du papier filtre Whatman n°1.
De même, 10 g de stigmates de C. sativus ont été utilisés pour l'éther de pétrole extraction au
soxhlet (6 h pour chaque solvant). Les extraits ont été évaporés sous une pression réduite et
séché à l'évaporateur rotatif. Les extraits séchés ont été conservés dans des flacons stériles
étiquetés avec bouchon à -vis à - 20°C.
Les micro-organismes d'essai utilisés dans cette étude étaient des bactéries ssp.
(Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus
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Chapitre Ⅳ Analyse d’un article scientifique
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Chapitre Ⅳ Analyse d’un article scientifique
contenant le milieu de croissance et les inoculums. Le MBC et le MFC ont été déterminés en
repiquant le test de dilution sur milieu gélosé nutritif /gélose dextrose de pomme de terre et
incubation supplémentaire pendant 24 h. La dilution la plus élevée qui n'a donné aucune
colonie bactérienne unique a été prise comme concentration bactéricide minimale (Akinyemi,
et al., 2005).
2- Analyse statistique
Toutes les expériences ont été réalisées en triple. Valeurs moyennes, écart type et
analyse de la variance a été calculée à l'aide d'un logiciel statistique commercial SPSS 16
(USA). Les données ont ensuite été comparées à l'aide des tests de gammes multiples de
Duncan à des niveaux de signification de 5 %.
3- Résultats et discussion
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Chapitre Ⅳ Analyse d’un article scientifique
niger et A. fumigatus par éther de pétrole et contre C. albicans et A. niger par des extraits
méthanoïques au dosage niveau 500 μg/disque. Les composés antimicrobiens standards ont
montré une zone d'inhibition significativement plus élevée contre micro-organisme testé (p <
0,05). Dans d'autres études, les extraits méthanoïques de divers Crocus spp. Mais sont avérés
avoir un effet antimicrobien significatif contre différentes bactéries (Acar, et al., 2010). Les
activités antimicrobiennes des extraits de safran ont été rapportées par le safranal et les
composés de crocine (Carmona et al., 2007). Ces composés peuvent facilement atteindre les
micro-organismes contaminants en raison de leur volatilité et/ou de leur solubilité dans l'eau
et contribuent à la destruction des microbes (Pintado et al., 2011). Par conséquent, l'activité
antimicrobienne des extraits de stigmate de C. sativus décrite représente ici une valeur ajoutée
pour le safran comme moyen d'utilisation dans l'industrie pharmaceutique et alimentaire.
Tableau 3 : Activités antimicrobiennes (diamètre des zones d'inhibition) des extraits d'éther
de pétrole et de méthanol de stigmates de C. sativus en utilisant la méthode de diffusion par
puits d'agar.
Toutes les valeurs sont des moyennes ± écart-type de trois répétitions. Les moyennes
dans la même ligne (A–D) et colonne (a–d) avec des exposants différents diffèrent
significativement :
*p < 0,05. Diamètre en mm de la zone d'inhibition ;
ND : Non déterminé,
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Chapitre Ⅳ Analyse d’un article scientifique
Certaines des utilisations du safran en médecine traditionnelle ont été liées à son
activité antimicrobienne en raison de à la présence des composants tels que le safranal et la
crocine (Pintado et al., 2011 ; Soureshjan & Heidari, 2014). Dans la présente étude, la CMI
des extraits de stigmate de C. sativus a été testée contre six espèces de bactéries et de trois
espèces de champignons. Le CMI de l'éther de pétrole brut et l’extrait méthanoïque est
présenté dans (Tableau 4). La CMI de l'extrait d'éther de pétrole variait de 0,4 à 0,66 mg/ml
pour les souches bactériennes et de 2,13 à 3,2 mg/ml pour les souches fongiques,
respectivement. De même, le CMI des extraits méthanoïques allaient de 0,40 à 0,80 mg/ml
pour les souches bactériennes et de 3,13 à 3,2 mg/ml pour les souches fongiques,
respectivement. Les résultats indiquent que les extraits d'éther de pétrole à montrer les valeurs
de CMI les plus efficaces pour P. vulgaris et Pseudomonas aeurogenosa et les extraits
méthanoïques ont montré pour les souches bactériennes E. coli et S. aureus. Cependant, les
deux extraits ont montré des valeurs de CMI significativement plus élevées que le
chloramphénicol antibactérien standard (p < 0,05). Dans le cas ou les valeurs de CMI
d’extraits de C. sativus pour les souches fongiques, l'extrait d'éther de pétrole a montré la
valeur CMI la plus efficace pour C. albicans et l’extrait méthanoïque a montré la valeur la
plus efficace pour les fumigates d'Aspergillus (p < 0,05). Les valeurs de CMI étaient
significativement plus élevées que l'amphotéricine B antifongique standard (p < 0,05). Dans
notre étude, l'éther de pétrole et les extraits méthanoïques ont montré les valeurs de CMI les
plus efficaces que les premiers chercheurs (Vahidi, Kamalinejad et Sedaghati, 2002) qui
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Chapitre Ⅳ Analyse d’un article scientifique
utilisaient des extraits d'acétate d'éthyle de différents Parties de C. sativus contre les souches
bactériennes et fongiques.
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Chapitre Ⅳ Analyse d’un article scientifique
ND : non déterminé (ne montrant aucun effet bactéricide jusqu'à 12,8 mg/ml, la concentration
la plus élevée testée).
P.v. : Proteus vulgaris.
K.p. : Klebsiella pneumonia.
B.s. : Bacillus subtilis.
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Chapitre Ⅳ Analyse d’un article scientifique
4-Conclusion
Les résultats ont conclu que les extraits à l'éther de pétrole et au méthanol des
stigmates de C. sativus ont grand potentiel en tant que composés antimicrobiens contre les
bactéries et les champignons. Cependant, les résultats ont montré que les extraits présentaient
de forts effets bactéricides que fongicides. Ainsi, ils peuvent être utilisés dans le traitement
des maladies infectieuses causées par des microbes résistants et peut avoir de larges
applications dans domaines pharmaceutique, alimentaire et médical.
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Conclusion générale
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Conclusion générale
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Références bibliographiques
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Mémoire présenté en vue de l’obtention du Diplôme de Master
Titre
Résumé
La culture de la plante de Crocus sativus L. dont le safran est extrait a fait le tour du monde et commence à
prendre de l’ampleur en Algérie. La structure chimique des stigmates du Crocus sativus L. a fait l'objet de
plusieurs études au cours des dernières années car elle comprend trois métabolites principaux : la crocine, la
picrocrocine et le safranal responsables de la couleur, la saveur et l’arôme respectivement. L’obtention de
tous ingrédients précieux de cette plante fait appel à différentes techniques d’extractions et de purifications
ainsi que des processus de caractérisations afin de garder l’intégrité des substances bioactives. Cette
composition riche du safran en molécules bioactives lui confère plusieurs propriétés bénéfiques dans le
domaine thérapeutique à savoir, les activités anti-oxydantes, anticancéreuses, anti-inflammatoires,
antitussives, anti-convulsivantes…, mais pas seulement, elle a pu franchir le domaine cosmétique d’une
manière fructueuse pour contribuer à la protection de la peau contre différents facteurs.
Mot clés : Crocus sativus L., picrocrocine, , crocine, safranal, méthodes d’extractions
Membre du jury :
Président : Mme ABDELAZIZ. W
Rapporteur : Mr CHABBI.R
Examinateur : Mme BOUZERIAB .L
Présentée par :
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50