Production Industrielle D'un Émulsifiant

Devoir Maison 2021 10 MGF
1. Production industrielle par Aa d’un émulsifiant : l’EPSAa1.
La souche Aa est capable de sécréter un exopolysaccharide de surface (EPS) à activité émulsifiante appelé
EPSAa1, lorsqu’elle est cultivée sur un milieu à l’éthanol en bioréacteur fed-batch.
La souche Aa est une bactérie diderme (Gram négative), de type respiratoire aérobie stricte, oxydase négative et
non exigeante.
1.1. Définir les EPS et citer un rôle physiologique des EPS.

1.2. Nommer le composant principal de la paroi bactérienne ainsi que les différentes molécules qui le
composent. Préciser leur organisation.
Conditions du processus.
La culture d’Aa dans le but de produire EPSAa1 se fait en bioréacteur de 15 L, (volume utile 10 L) en procédé
fed-batch selon les conditions décrites dans le document 1.
1.3. Analyser la composition du milieu de culture fourni sur le document 2 en précisant le rôle de chaque
constituant. Qualifier ce milieu.
1.4. Justifier le choix des valeurs d’agitations et de débit d’air pour cette culture.
1.5. Calculer le débit d’air à t = 16 heures et à t = 88 heures. Conclure.
1.6. Proposer en justifiant un type de pale adapté à ce micro-organisme.
1.7. Reporter les numéros du document 3 sur la copie et donner les légendes correspondantes.
Analyse de la croissance.
Le document 4 présente les valeurs obtenues pour la croissance et la concentration d’activité émulsifiante.
1.8. Reproduire le tableau en faisant apparaître en plus le ln(DO 600 nm) et l’activité émulsifiante totale du
bioréacteur.
1.9. Tracer sur le même graphique le ln(DO600 nm) et l’activité émulsifiante totale.
1.10. Délimiter et nommer sur le graphique les différentes phases de la croissance.
1.11. Définir et estimer les paramètres cinétiques de la croissance : µexpo (heure-1) et G (minutes). Justifier la
démarche et les étapes du raisonnement.
Analyse de la production
1.12. Décrire brièvement la courbe de l’évolution de l’activité émulsifiante au cours du temps.
1.13. Sachant que l’activité émulsifiante est uniquement due à l’EPSAa1, préciser à quel type de métabolite
appartient ce produit. Justifier.
1.14. En fonction des conditions d’alimentation en fed-batch données dans le document 1, justifier l’emploi de
ce procédé de production. Préciser quelle en est alors la contrainte majeure.
1.15. Déterminer la productivité horaire finale en EPSAa1 (en unité d’activité émulsifante·heure -1)
Mise au point de la production

La mise au point a nécessité des ajustements préalables, notamment au niveau de la température de croissance.
Plusieurs températures ont été testées et les résultats sont présentés dans le document 5.
1.16. Analyser le document et justifier la température choisie pour la production.
1.17. Qualifier cette souche vis-à-vis de cette température.
Au cours de la culture, on observe des variations du pH du milieu pouvant avoir des répercussions sur la
productivité finale.
1.18. Expliquer comment on pourrait réguler ce paramètre.
1.19. Schématiser la boucle de régulation mise en jeu.
L’amélioration des souches permet d’augmenter la productivité.
1.20. Citer une méthode utilisée pour améliorer les souches d’intérêt industriel.
NF : 2022 12 DM MGF Aa.odt 1/3 mer. 14 déc. 22

Document 1 : production de l’émulsifiant « EPSAa1 » en bioréacteur fed-batch, par Aa.

Condition de production :
Milieu à l’éthanol (cf. document 2)
Volume initial du milieu 4,5 L
Inoculum 0,5 L d’une préculture de 24 heures à 30 °C en milieu de culture de même
composition
Alimentation du milieu aucune alimentation jusqu’à 30 heures puis ajout de milieu selon le tableau
ci-dessous (colonne « volume de culture »)
Volume final du milieu 10 L
Agitation 500 rpm
débit d’air 1 VVM (volume d’air par volume de milieu et par minute)
Température 30 °C
pH initial 7,0 (non régulé au cours du processus)
durée du processus 100 h
Document 2 : composition du milieu fed-batch.

Éthanol 5,0 mL La solution ionique comprend pour 10 mL les éléments suivants :
urée 1,8 g CaCl2 , 2 H2O (3,68 mg), CuSO4, 5 H2O (6,24 mg), FeSO2, 7 H2O
Na2HPO4 13,7 g (6,04 mg), MnSO4, 4 H2O (5,94 mg), ZnSO4, 7 H2O (4,22 mg), CoCl2, 6
KH2PO4 7,3 g H2O (7,88 mg), Na2MoO4, (6,96 mg).
MgSO4, 7 H2O 0,4 g
solution ionique 1,0 mL
H2O désionisée qsp 1L
Document 4 : Suivi de la croissance et évolution de l’activité émulsifiante de EPSAa1.

Activité émulsifiante Volume de culture
temps (h) DO600 nm
volumique (U.L-1) (L)
0 0,01 2 5
8 0,14 5 5
16 1,49 12 5
24 9,97 19 5
28 14,15 23 5
32 18,1 36 5,5
40 21,12 58 6,1
48 22,2 85 6,6
56 22,2 128 6,6
64 24,05 135 8
72 25,28 185 8,6
88 29,96 240 9,5
100 34,12 271 10
Document 5 : variation du temps de génération d’Aa à différentes températures.

température (°C) 10 14 18 22 26 30 34 38 42 44
temps de génération (h) 69 46 12 4 3 2 4 14 69 69

Document 3 :

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1. Production industrielle par Aa d’un émulsifiant : l’EPSAa1.

1.1. Définir les EPS et citer un rôle physiologique des EPS.

Mise au point de la production

NF : 2022 12 DM MGF Aa.odt 1/3 mer. 14 déc. 22

Document 1 : production de l’émulsifiant « EPSAa1 » en bioréacteur fed-batch, par Aa.

Document 2 : composition du milieu fed-batch.

Document 4 : Suivi de la croissance et évolution de l’activité émulsifiante de EPSAa1.

Document 5 : variation du temps de génération d’Aa à différentes températures.

NF : 2022 12 DM MGF Aa.odt 2/3 mer. 14 déc. 22

NF : 2022 12 DM MGF Aa.odt 3/3 mer. 14 déc. 22

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