TD4 - Production de Protéase

TD 4 :Production de Protéase
1. Les enzymes
 Les enzymes sont des protéines de hautes masses moléculaires (10 000 à 100 000 daltons) et
sont constituées de longues chaînes d'acides aminés unis par des liens peptidiques. Ce sont
des macromolécules qui appartiennent à la classe des protéines globulaires.
 Elles sont présentes dans les cellules de tous les organismes vivants où elles jouent un rôle
essentiel en contrôlant les procédés métaboliques permettant aux nutriments d'être
transformés en énergie et en matériaux cellulaires.
 Les enzymes agissent comme catalyseurs de plusieurs réactions chimiques.
Lyase vs ligase
1. Lyase
Les lyases sont des enzymes qui catalysent la rupture de liaisons chimiques dans les molécules
organiques, sans nécessiter l'hydrolyse de l'eau.
2. Ligase
Les ligases sont des enzymes qui catalysent la formation de liaisons covalentes entre deux molécules,
souvent en consommant de l'énergie sous forme d'ATP.
 Au niveau industriel, la classe d'enzyme la plus importante est la classe des hydrolases ou
enzymes hydrolytiques.
2. Les proteases
Ou enzymes protéolytiques, font partie de cette classe.
 Les protéases sont des enzymes qui catalysent 1 'hydrolyse des protéines, en scindant la
liaison peptidique qui lie deux acides aminés dans une chaîne peptidique.
 Les protéases sont divisées en deux groupes selon leur site d'action, soit les protéases
intracellulaires et extracellulaires.
 Les peptidases (ou protéases ou enzymes protéolytiques) sont des enzymes qui brisent les
liaisons peptidiques des protéines. On parle alors de coupure protéolytique ou de protéolyse.
Ce processus implique l'utilisation d'une molécule d'eau ce qui les classe parmi les
hydrolases.
3. Les fonctions biologiques des protéases sont variées :

 La maturation des protéines
 La digestion des aliments
 La coagulation sanguine
 Le remodelage des tissus au cours du développement de l'organisme
 La cicatrisation.
 Certaines protéases sont des toxines, comme la toxine botulique
4. Classification des protéases :

A. Les protéases intracellulaires:
Sont importantes pour une variété de processus cellulaires et métaboliques comme la sporulation et
la différentiation, la maturation d'hormones et d'enzymes, et la maintenance du pool de protéines
cellulaires. Ce type de protéase est moins intéressant à utiliser en industrie car ces enzymes
nécessitent une étape de lyse cellulaire pour en faire l'extraction.
B. Les protéases extracellulaires
Excrétées à l'extérieur de la cellule, sont importantes pour l'hydrolyse des protéines dans
l'environnement extérieur de la cellule et aident ainsi la cellule à absorber et à utiliser les produits de
cette hydrolyse .
5. Classification fonctionnelle
 Les protéases se différencient également selon leur mode d'action: les endopeptidases et les
exopeptidases. Les deux types de protéases sont divisés en plusieurs classes et sous-classes.
Le Tableau présente les classes et sous-classes de protéases
 Sont classées en fonction de la position où a lieu la coupure dans la chaîne peptidique :
 Les exopeptidases (ou exoprotéases) :

 Les aminopeptidases qui coupent entre le premier acide aminé et le second acide
aminé de la chaîne, libère donc l'acide aminé N-terminal
 Les carboxypeptidases qui coupent entre l'avant dernier et le dernier acide
aminé de la chaîne, libère donc l'acide aminé C-terminal
 Les endopeptidases (ou endoprotéases) qui peuvent couper à l'intérieur de la chaîne
peptidique comme la kératinase qui morcèle la kératine par les ponts bisulfures.
Origine des protéases

 Microbienne
 Animale : la pepsine
 Végétale
 Synthétique : des protéases synthétiques peuvent également être produites par génie
génétique ou par des méthodes de biologie synthétique.
Protéase d’origine microbienne:
Parmi les diverses protéases, les protéases bactériennes sont plus importantes que les protéases
animales et fongiques.
protéase des moisissures

Les enzymes fongiques représentent 40% du marché mondiale des enzymes industrielle. Les
protéases constituent les enzymes les plus importantes qui peuvent être produites par genres
fongique, Aspergillus, Penicillium Actuellement elles sont de plus en plus utilisées en boulangerie,
dans industrie alimentaire humaine et animale
Protéase des levures

Certaines levures produisent aussi des enzymes protéolytiques, ils s’agissent essentiellement des
genres Saccharomyces
Protéase des bactéries

Il s’agit essentiellement de la subtilisine ou subtilase, une protéase produite par Bacillus subtilis et
quelques genres apparentes, celles-ci sont très stable et résiste bien à l’action des détergents, par
ailleurs, elle est naturellement excrétée dans le milieu, ce qui facilite sa purification .
La quasi-totalité des protéases extracellulaires du genre Bacillus sont :
Les protéases alcalines (sérines protéases) :

Leur appellation est due à leur pH optimum d’action compris entre 9 et 11. Les sérines protéases ont
un poids moléculaire compris entre 25 000 et 30 000 et sont caractérisées par la présence d’un
résidu sérine au niveau de leur site actif.
Les protéases neutres (métallo protéases)

Les métallo protéases représentent le groupe du métallo endopeptidases ayant une activité
maximale à un pH neutre ou se rapprochant de la neutralité. Les protéases neutres ne présentent
aucune activité estérasique. L’insertion de l’ion de zinc au niveau de la molécule enzymatique est
primordiale pour son activité

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3. Les fonctions biologiques des protéases sont variées :

4. Classification des protéases :

B. Les protéases extracellulaires

 Sont classées en fonction de la position où a lieu la coupure dans la chaîne peptidique :

 Les exopeptidases (ou exoprotéases) :

Origine des protéases

protéase des moisissures

Protéase des levures

Protéase des bactéries

La quasi-totalité des protéases extracellulaires du genre Bacillus sont :

Les protéases alcalines (sérines protéases) :

Les protéases neutres (métallo protéases)

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