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bacill
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uléetnoncapsulé.
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érieuresà10
° C.
Mil
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2•
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ne:
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leà
croûtefl
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e,tel
squelecamember t,
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croûtehumideetporeusequipermetàlabactéri
edesedév elopper.Lesfr
omagesà
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telsquelemor bier
,lereblochonoulesai
nt-
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res,desnausées, desv omissementsetdeladi
arr
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l
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finage,contribuentàl apréser
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antàl adégr adation.Lesalageper metder édui
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l
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cour
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omage.Lesfromagesdoi
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l
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aplus
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ionduf r
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fr
omage, i
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demoi nsde500gr ammes.Av antdecongelerlefromage, il
estégalementi mportant
del'embal
lerherméti
quementpourév it
erqu'
ilnepr ennelegoûtdesaut resaliments.
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ondufromageàtempér
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nsf romages,
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Parmigi
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Reggi
anooulaMozzar
ell
a,peuv
entêtreconservésàtempérat
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s.Cesfromagesontunet eneurél
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togenesdansl
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mentsàt eneurenhumidit
éélevée.Lesfr
omagesàpât emol l
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elsquel
a
mozzarel
la,l
ebrieetlecamembert,ontuneteneurenhumidit
éélevée,cequi
fav
ori
selacroissancedelabactér
ie.
Fr
omageàpât
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l
e
Fr
omageàpât
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•Lapr ésencedenichesenv
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orables:l
aLister
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il
ms, cequicontribueégalementàsaper si
stancedansl e
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omage.Lesbi ofil
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ulesbactér
iennesaggl omér ées
quisontentouréesd'unematri
ceextracell
ulair
e.Lesbiofi
lmssontpl usrésistantsaux
désinf
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oti
quesquel escel l
ulesbact
ériennesl
ibres,cequi lesrend
plusdif
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cil
esàcont rôl
er.
•Syst
èmedecommuni cati
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eri
amonocy togenespossèdeunsystèmede
communi cati
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uipermetdepersi
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envi
ronnement
Lesmét
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iamonocy
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I
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smét
hodesdedét
ect
iondeL.monocy
togenesdansl
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romages.
1.I
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icat
ionbact
éri
ologi
quecl
assi
que:
A-Enr
ichi
ssement
-Unenri
chi
ssementpr
imai
reauj
our0av
ec25gdans225cm3deboui
l
lonsoi
tune
di
lut
ionau1/10.
-Unenri
chi
ssementsecondai
reaujour1avec0,1cm3deboui
l
lond'
enr
ichi
ssement
pr
imai
redans10cm3deboui l
lonsoitunedi
lut
ionau1/
100.
B-I
sol
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Lesmil
ieuxd'i
solementuti
li
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ennentdenombr euxinhi
bit
eurspouréli
minerun
maximum desger mesprésentsengrandequantit
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nit
ial
.(Fr
omage,
vi
ande,…).Cesinhi
bit
eurssontsouventdesantibi
oti
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bactér
iensou
ant
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ongiques,ai
nsiquelechlorur
edelit
hium etl'
acr
if
lav
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Gél
oseOXFORD-
CURTI
S
Gél
osePALCAM
Gél
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Gél
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fi
éeaumoxal
act
am)
C-I
dent
if
icat
ion
L'i
dentif
icati
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eriareposesurl escaract
èresmor phologiques,
surla
recherchedel acatalase,surlamobi l
i
téà25° C(étudiéeenensemençantdeux
bouil
lonsnut ri
ti
fsincubéspendantenv iron4heur es,l
'unà25° Cetl '
autreà37° Cou
étudiéeengél osemobi li
técequi permetd'observerl'
imagecaractéristi
queensapin
renversé),surl'
hydrol
ysedel '
escul i
ne( hydroly
serapideobservéeen2à3heur es)
,
surl'
acidif
icati
onduD- gl
ucose, suruner éponseposi t
iveauxtestsRM etVPetsur
l
'absencedepr oducti
ond' H2S.Ilestpossi bledeconfondreuneLi steri
asp.avecune
soucheappar t
enantàunaut r
egenr ebactérien
2.Mét
hodesmoder
nes:
2.
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Rapi
d'
L.
Mono"
:
Cettet
echni queuti
li
seunmi l
ieugélosésél ecti
fpermettantuneidenti
fi
cat
ionen24-
48heur esaprèsl'
étapedepré-enr
ichissement .Lemili
euRapi d'
L.Monopermetl
a
détect
ionchr omogéniqued'
unephosphol ipaseCpr oduiteparLister
ia
monocy togenesetLister
iai
vanovi
i etunedi ff
érenci
ati
ondecesdeuxespèces
baséessurl acapacit
éd'aci
dif
icat
ionduxy l
ose.
Schéma:
Mét
hodeRapi
dL’
mono
2.
2-Lamét
hodeder
out
ineAFNORNFV08055:
Lanor
meAFNORV08055( déc1993)estuneméthodederout
inederecher
chedeL.
monocytogenes:détect
ion, i
dent
if
icat
ion.Mét
hoderel
ati
vementlour
de,el
le
comprendlesétapessuivantes:
-Enr
ichi
ssementpr
imai
resurboui
l
lonFRASERau1/
2(24hà30°
C)
-I
sol
ementsurgél
osePALCAM ouOXFORD(
37°
C,24ou48heur
es)
-Enr
ichi
ssementsecondai
resurboui
l
lonFRASERi
ncubé24et48hà37°
C
-I
sol
ementsurgél
osePALCAM ouOXFORD(
37°
C,24ou48heur
es)
-Lescol
oniescar
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ée)
.Cetteméthodeestschémat i
séeci-
dessous:
Schéma:Méthodeder
out
ineAFNORV08055déc1993(
List
eri
a
monocyt
ogenes)
2.
3-L’
uti
l
isat
iondel
aPCR(
pol
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asechai
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ion)
:
Lesétapesdel
aPCR( réact
iondepol
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ect
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Li
ster
iamonocy
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omages:
1/Préparationdel'
échantil
lon:L'
échanti
ll
ondefromageestd'abordbr
oyéouhaché
pourlibérerlescel
lulesbactéri
ennes.L'
échant
il
lonestensui
tedil
uédansune
soluti
onsal inest
éril
epourf aci
li
terl
'
extr
acti
ondel '
ADN.
2/Extr
acti
ondel'
ADN: I
sol
erl'
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échanti
ll
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génér
alementen
uti
li
santdesméthodesd'
extr
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Cekituti
li
seunecombinai
sondemét hodesphysiquesetchimi
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l
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ll
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3/Ampl i
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il
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i
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sontajoutés.
4/
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urat
ion:
Chauf
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'
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'
ADNenbr
inssi
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es.
5/Hybri
dat
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ces:Ref
roi
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échant
il
lonpourper
met
tr
eauxamor
cesdese
l
ierspéci
fi
quementàl
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onci
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ADN.
6/Él
ongat
ion:Uti
li
seruneenzymepoursy
nthét
iserunenouv
ell
echaî
ned'
ADN
complémentai
reàlarégi
oncibl
e.
7/
Répét
it
ion:Répéterl
eprocessusdedenat
urat
ion,hybri
dati
onetélongat
ion
pl
usi
eur
sf oi
s(cy
cles)pourampli
fi
erl
'ADNdemani èreexponent
iel
l
e.
8/Détecti
on:Analy
serlespr oduitsdePCRpourl aprésencedel'ADNampl i
fi
éde
Li
steri
amonocy t
ogenes, souventàl '
ai
dedet echni
quescommel 'él
ectr
ophorèseou
desmét hodesdedétecti
onmol éculai
re.
(Parexempl edétectéàl '
aided'
un
i
nstrumentdePCRent empsr éel.Cetinstr
umentmesur el'
i
ntensitédela
fl
uorescenceémiseparlessondesTaqManut il
i
séespourlaPCR.Uneaugment ati
on
del'
intensi
tédel
af l
uorescencei ndi
quel aprésenced'ADNLi st
eriamonocytogenes.
)
2.
4-Lamét
hodeGen-
probeLi
ster
iamonocy
togenes:
estuntestd’
identi
fi
cationut
ili
santunesonded’ADNspécifi
queàmar quage
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uminescent,
compl émentair
edel’ARNribosomaldeListeri
amonocy t
ogenes:
l
eshy bri
desforméssontdét ect
ésaumoy end’
unluminomètr
e.Cet estnécessit
e
deuxphasesd’enri
chissement(bouil
lonFRASERau1/ 2puisgélosePALCAM) .Les
col
oniess’ydével
oppantsontsoumi sesàunehy bri
dat
ionmol écul
air
eaprèslyse
bactéri
enne.
Pr
inci
pe:
I
NTERPRÉTATI
ONDESRÉSULTATS:
Lesrésul
tatsduTestAccuProbeLister
iamonocy t
ogenessonti nt
erprétésen
fonct
iond’uneval
eurseuil
.Leséchanti
ll
onspr oduisantunsignallumineuxdev aleur
supéri
eureouégaleàceseuilsontconsidéréscommeposi ti
fs.Lessignauxlumi neux
i
nféri
eursàceseuilsontconsidér
éscommenégat i
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squel erésult
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En1987,uneépi
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,99(2)
,299-
310.
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nal
,15(12),
5221.
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m, H.
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6),
1288-1294.
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az,M.,Sanchez,M.,Gonzal
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M.,&Hernandez,M.(2021).
Dev
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,127,107570.
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Y.,Li
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,Zhang,Y.
,&Wang, X.(
2020).Det
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monocy t
ogenesi
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116,107480.
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