La chromatographie est une technique permettant de séparer les constituants d'un mélange en faisant migrer ceux-ci à l'aide de phases mobiles et stationnaires. Il existe différents types de chromatographie qui diffèrent par la nature des phases en présence et les interactions mises en jeu, permettant de séparer des molécules selon leurs propriétés.
0 évaluation0% ont trouvé ce document utile (0 vote)
41 vues17 pages
La chromatographie est une technique permettant de séparer les constituants d'un mélange en faisant migrer ceux-ci à l'aide de phases mobiles et stationnaires. Il existe différents types de chromatographie qui diffèrent par la nature des phases en présence et les interactions mises en jeu, permettant de séparer des molécules selon leurs propriétés.
La chromatographie est une technique permettant de séparer les constituants d'un mélange en faisant migrer ceux-ci à l'aide de phases mobiles et stationnaires. Il existe différents types de chromatographie qui diffèrent par la nature des phases en présence et les interactions mises en jeu, permettant de séparer des molécules selon leurs propriétés.
La chromatographie est une technique permettant de séparer les constituants d'un mélange en faisant migrer ceux-ci à l'aide de phases mobiles et stationnaires. Il existe différents types de chromatographie qui diffèrent par la nature des phases en présence et les interactions mises en jeu, permettant de séparer des molécules selon leurs propriétés.
Téléchargez comme DOCX, PDF, TXT ou lisez en ligne sur Scribd
Télécharger au format docx, pdf ou txt
Vous êtes sur la page 1/ 17
La chromatographie est une technique permettant de séparer plusieurs constituants
d'un mélange en les faisant migrer, sur une phase immobile, par une phase liquide ou gazeuse. Cet article présente les principaux types de chromatographie, avec leur principe de séparation et leurs principales indications. Il propose, en dernière partie, une comparaison de ces différentes techniques. La chromatographie est une technique séparative analytique et/ou préparative. Elle consiste à faire migrer les constituants à séparer sur une phase stationnaire immobile, à l’aide d’une phase mobile, liquide ou gazeuse, de nature différente. Chaque molécule sera plus ou moins rapidement entraînée selon son affinité pour, respectivement, la phase stationnaire et la phase mobile, permettant la séparation des différents constituants présents.
À partir de ce principe très général, il existe de très nombreux types de
chromatographie en fonction de la nature de la phase stationnaire, de la nature de la phase mobile, et de la nature des interactions entre ces phases et les molécules à purifier. En effet, selon les cas, les facteurs physico-chimiques qui interviennent comme critère de séparation sont totalement différents : ce peut être la masse moléculaire, la charge, l’hydrophilie/hydrophobicité, la structure tridimensionnelle, etc. Évidemment, le choix est effectué au cas par cas en fonction des besoins. Il n’est d’ailleurs pas rare d’utiliser successivement plusieurs types de chromatographies différentes au cours d’une même purification. A l’aide d’une pipette pasteur, déposer une microgoutte ( inutile d’en mettre trop) les produits à analyser. Faire attention à laisser suffisamment d’espace entre les différents produits déposés.
Verser l’éluant dans la cuve.
Tremper verticalement le papier dans l’éluant, en faisant bien attention à ce que
la ligne de dépôt soit au-dessus du niveau de l’éluant.
Fermer la cuve et ne pas la déplacer.
Observer attentivement.
Quand l’éluant a fini de migrer, sortir le papier de la cuve et repérer le niveau
atteint par ce dernier (appelé front de l’éluant) à l'aide d'un crayon puis laissez sécher le papier.
Expression des résultats :
1. Une chromatographie sert a la séparation et la purification des constitutions 2. La difference de migration est du a la polarisation des solvants tel que le solvant qui passede h le plus important (hv1) est le plus elué donc il et le plus polaire 3. H=7cm hv1=6,8cm hv2=5,5cm hB=5,6cm hT= 6,9cm 4. On calcule, pour chaque constituant, sa « vitesse de déplacement » ou « rapport frontal Rf » 5. d’après la relation suivante : Rf=h\H • Rf1=hv1\H= 6,9\7=0,98 • Rf3=hv2\H=5,5\7=0,78 • Rf2=hB\H= 5,6\7=0,8 • Rf4=hT\H=6,9\7=0,98
6. Oui Rf depend de l’eluant plus le h est importante plus l’effet de solvant est important plus Rf est grande Conclusion
Nous avons vu que la technique de CCM est une technique fiable et
rapide. Ceci explique son emploi très fréquent dans les laboratoires. Notons cependant qu'il est parfois indispensable d'utiliser d'autres méthodes de révélation.
