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    Spermoculture Et AMP

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    Audrey Lyli
    Ce document traite de la spermoculture, de ses indications, de sa réalisation et de son interprétation. Il détaille les conditions pré-analytiques, les examens réalisés, les germes pouvant être identifiés et leur pouvoir pathogène. Il aborde également les situations nécessitant un traitement antibiotique.

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    Spermoculture Et AMP

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    Document sur la spermoculture

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    Spermoculture et AMP

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    SPERMOCULTURE

    et AMP

    Dr Florence BOITRELLE
    Spermiologie et Biologie de la Reproduction – CHIPS Poissy
    I) QUAND PRESCRIRE une spermoculture ?

     Ne devrait pas être prescrite en 1ère intention


    (recommandations CNGOF 2010) ???
    Pas d’étude de niveau de preuve élevée

     Indiquée
    – Avant toute AMP +++ (JO bonnes pratiques
    2008 et 2010)
    de moins 6 mois avant IIU
    et en FIV, ICSI ? récente ???
    – Bilan d’altérations spermatiques
    – Suspicion d’IGAM
    II) COMMENT réaliser une spermoculture ?
     Conditions pré-analytiques rigoureuses +++

     2 à 5 j d’abstinence sexuelle (prescrite avec le spermogramme)


     Boire beaucoup d’eau la veille du recueil
     Recueil au laboratoire
     Information claire sur les consignes de recueil
    – Miction préalable
    – Lavage des mains
    – Nettoyage du gland avec une solution antiseptique +rinçage +++
    – Recueil du sperme par masturbation dans un réceptacle évasé

    Réduction de moitié des


    bactériospermies positives

    D’après le service de spermiologie-BDR du CHU de Lyon


     Interrogatoire

    - antécédents :
    d’infections génito urinaires aigües ? chroniques ? type de germe ?

    - facteurs favorisants:
    diabète ? Sondages ? Malformations urogénitales ? toxiques ?
    Antibiothérapie récente ?

     Acheminement rapide au laboratoire +++

    - fragilité de certains germes : Neisseria gonorrhoeae


    - milieu de transport ?
     Examen cyto bactériologique proprement dit
    (cf. bactériologie, REMIC 2010)

    en bactériologie
    - le sperme est « stérile » physiologiquement
    - examen direct à l’état frais
    - examen cytologique
    - ensemencement de divers milieux (germes banaux)
    - galeries pour les mycoplasmes (à prescrire)
    - PCR pour chlamydia

    en spermiologie diagnostique
    - leucospermie (> 1M/ml) associée et test à la péroxydase
    - asthénozoospermie ? nécrozoospermie ?
    - morphologie spermatique: flagelles enroulés ?
    III) COMMENT INTERPRETER ?
     Connaître les modes d’infection du sperme

     Connaître le pouvoir pathogène des bactéries et des


    médiateurs de l’inflammation sur les spermatozoïdes

     Interprétation délicate ++, rechercher des signes cliques


    ou bio de retentissement spermatique associés
    – Leucospermie?
    – Asthénozoospermie? Necrozoospermie? Flagelles enroulés?

     Différencier :
    contamination ≠ Bactériospermie ≠ IGAM
    Pb des Seuil ≥ 103 – 104 UFC pour germes pathogènes…mais…ils dépendent
    du germe, des circonstances cliniques

     Recontrôler +++
     Connaître les modes d’infection du sperme

    - Endogène par voie lymphatique et tissulaire


    Intestin, vessie : coliformes, streptocoques, Haemophilus, mycoplasmes
    Surface : corynéformes, straphylocoques

    - Exogène par voie uréthrale ascendante (IST)


    Neisseria gonorrheae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis

    – Endogène de la partenaire :
    Hemophilus, Mycoplasmes
    Streptocoques B, Lactobacilles
    Candida albicans, Gardnerella vaginalis
    Anaérobies (Mobilincus,Actinomyces...)
     Pouvoir pathogène des bactéries et des médiateurs de
    l’inflammation sur les spermatozoïdes
    Escherichia coli
    Bien décrits in Adhésion-agglutination
    vitro : divers mécanismes (attachement, germe
    spz-asthénospermie
    intracellulaire, action desd’immobilisation
    +/- facteur ROS par ex) spermatique
    Altération des membranes
    - Altération des fonctions
    Altération de migratrices
    la fonction acrosomale
    par les germes (immobilisation, agglutination par ex) ou les ROS avec
    Nécrospermie
    enroulement flagellaire par
    Fragmentation de peroxydation des lipides membranaires
    l’ADN spermatique
    - Fragmentation ADN, anomalie condensation de la chromatine avec
    altération de l’implantation embryonnaire
    - Nécrospermie
    - Atteinte des glandes annexes si chronicité
    altération de la maturation spermatique, diminution du volume de
    l’éjaculat, avec à terme une éventuelle obstruction
    - Rupture de la barrière hémato testiculaire si chronicité
    auto-immunisation anti-spz

    Conséquences in vivo mal précisées


    - Études contradictoires, pas d’études de niveau de preuve élevé
    - Effets plus délétères si oligospermie et temps de contact long
    Une étude récente non publiée: Laboratoire d’Eylau
    P. Cohen Bacrie et al. ASRM 2012

    - 3844 spermocultures
    - 5% de spermocultures positives vraies (contaminations exclues)
    - E. coli, E. faecalis, Proteus, Klebsiella pneumoniae : 90%
    - Mycoplasmes (surtout UU) : 4,5%

    Aucun effet sur les paramètres spermatiques de base


    Augmentation de la fragmentation de l’ADN (Klebsiella)
    Anomalie de condensation de la chromatine (mycoplasmes si ≥ 104 CFU/mL)

    Même conclusion en ce qui concerne les paramètres spermatiques et la


    fragmentation de l’ADN pour Domes et al. 2012 (7852 spc, 15% positives)
     Interprétation délicate : plusieurs éléments à prendre
    en compte
    Le germe
    E. Coli +++
    Enterococcus faecalis
    Ureaplasma urealyticum leucospermie
    Chlamydia trachomatis
    Corynebactéries séminales
    Candida albicans
    Gardnerella vaginalis ?

    Retentissement
    Sur les spz
    Aigue ou
    chronique

    Signes
    d’IGAM
    AMP envisagée
    Tractus
    défectueux ?
     Différencier : contamination ≠ Bactériospermie ≠ IGAM

    Présence d’une flore polymorphe


    Contamination
    (>3 espèces différentes)

    Germes pathogènes de par leur Chlamydia trachomatis


    présence Neisseria gonorrhoeae
    Escherichia coli
    Germes pathogènes au seuil de Contrôler
    ≥ ++ Proteus mirabilis
    Contrôler la négativation
    Klebsiella pneumoniae
    102 UFC/ml
    +++
    Morganella morganii
    Corynebacterium seminale
    Streptococcus pyogenes
    Au seuil de ≥ 5.103 UFC/ml Staphylococcus aureus
    Gardnerella vaginalis
    Candida albicans

    Mycoplasma Boitrelle
    hominis F et al. GOF, 2012
    Au seuil de ≥ 104 UFC/ml REMIC 2015
    IGAM

    1 facteur A + 1 facteur B
     OATS + 1 facteur A + 1 facteur C
    1 facteur B + 1 facteur C
    2 facteurs C

    Facteurs du groupe A Facteurs du groupe B Facteurs du groupe C


    (après massage
    prostatique)

    ATCD infection urinaire Fluide prostatique Culture spermatique


    et/ou IST et/ou epididymite anormal (bactério significative)

    Épididyme épaissi et/ou Urines anormales Hypospermie


    douloureux et/ou déférent et/ou viscosité
    sensible augmentée
    et/ou anomalies au TR et/ou anomalie du pH
    WHO manual for the standardized investigation and
    diagnosis of the infertile couple (Rowe et al., 1993)
    séminal
    et/ou perturbations de
    IV) POURQUOI et COMMENT TRAITER ?

     Si bactériospermie confirmée, il faut traiter:


    – si risque de transmission d’IST
    – si IGAM
    – si le recours à l’AMP est envisagé
    – « alléger » la prise en charge en AMP ?
    – Éviter contamination des milieux de culture ?
    – Eviter un risque d’échec des techniques d’AMP ?

    – Eviter le risque de contamination de la partenaire (oui en IIU)


    – Améliorer la qualité nucléaire des spermatozoïdes et donc le
    développement embryonnaire précoce et tardif
    – Améliorer l’implantation embryonnaire si PV positif au même germe
    Candida albicans, Ureaplasma urealyticum, Gardnerella vaginalis, Streptococcus B ou Escherichia
    coli
     Mesures hygiéno-diététiques : clairance +++
    – Cure hydrique+++, fréquence des éjaculations+++

     Antibiothérapie :
    – Adaptée au germe et à l’antibiogramme
    – Seuils cités précédemment
    – Des 2 partenaires (en fonction du germe, du PV)
    – Bonne pénétration dans le tissu uro-génital
    – Quinolones, cyclines, macrolides…
    – Effets délétères des ATB sur les spz ?
    – Durée:
    – 10 jours si bactériospermie asymptomatique
    – Au moins 21 jours si IGAM
    - Contrôle de la spermoculture +/- spg après tt +++

     AINS et anti-oxydants?
    à discuter si IGAM et/ou leucospermie associée

     Le gradient de densité (3 à 6 couches)


    – dernière barrière aux germes
    – efficace si résistance ATB ? A prouver
    Abeysundara et al. 2013
    CONCLUSION

     Examen de base du couple consultant pour


    infertilité

     Débat sur la réponse à la question: Quand la


    prescrire ? Ts les 6 mois, 1 an ? récente ?

     Interprétation délicate, notion de seuils

     Bénéfices du traitement ?
    – discutés à titre individuel +++
    – Oui si AMP !
    Service d’Histologie-Embryologie-Spermiologie-Biologie de la Reproduction-
    Cytogénétique- Génétique Médicale CHI de POISSY
    Pr Jacqueline SELVA

    SPERMIOLOGIE et BDR AMP CLINIQUE


    Dr Marianne BERGERE Dr Bob WAINER
    Dr Florence BOITRELLE Dr Marc BAILLY
    Dr Laura ALTER Dr Céline MURATORIO
    Dr Céline MEYNANT
    Cécile LE ROUX Dr Bénédicte PAILLUSSON
    Myriam GOMBAULT
    Coraline MARCHAND
    Vincent DELABROYE
    Romain VILLENEUVE

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