CENTRIFUGATION

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Centrifugation :

La centrifugation est un processus qui implique l'utilisation de la force centrifuge (1)


pour la sédimentation de mélanges à l'aide d'une centrifugeuse. Ce processus est
utilisé pour séparer deux liquides non miscibles, les composants plus denses du
mélange migrant loin de l'axe de la centrifugeuse, tandis que les composants moins
denses du mélange migrent vers l'axe. La centrifugation modifie la force
gravitationnelle effective sur le tube/la bouteille de manière à provoquer plus
rapidement et plus complètement l'accumulation du précipité (« pastille ») au fond du
tube. La solution restante est proprement « surnageant». Le liquide surnageant est
rapidement décanté du tube/flacon sans perturber le précipité (2)

La force centrifuge est créée par un mouvement de rotation très rapide dans une
centrifugeuse (3)

L'appareil utilisé est une machine tournante à grande vitesse appelée centrifugeuse
(4) .

Materail de centrifugation :

En fonction des exigences expérimentales, notamment en ce qui concerne les


accélérations nécessaires, les volumes de matériel à centrifuger, la température de
travail, etc., on a créé une variété d'appareils.

 Centrifugeuses de table :

Les modèles les plus simples, souvent appelées centrifugeuses cliniques permettent
d'atteindre de faibles accélérations (1000 à 3000 xg) à des vitesses de rotation
relativement basses (moins de 3000 RPM). Certains modèles sont réfrigérés,
certains d'autres non. (5)

Figure1 : centrifugation de table


 Centrifugeuses au sol :

Ces appareils sont un peu plus complexes. Elles


permettent d'obtenir des vitesses derotation de l'ordre de
30 000 RPM, donnant pour les plus petits rotors des
accélérations d'environ 20 000 xg. Tous les modèles sont
réfrigérés. Ces centrifugeuses permettent de centrifuger
des relativement gros volumes. Certains rotors peuvent
même contenir quatre ou six bouteilles de 250 mL.

Figure2 : centrifugeuses de sol

 Ultracentrifugeuses :

Ce sont des appareils complexes et coûteux qui permettent d'atteindre des


accélérations très élevées (jusqu'à 300 000 xg) en faisant tourner des rotors très
rapidement (50-85 000 RPM). De telles vitesses de
rotation ne peuvent s'obtenir que sous pression très
réduite. Les faibles pressions permettent aussi d'éviter la
surchauffe du rotor et de l'échantillon. Tous les modèles
sont réfrigérés. Ces appareils doivent donc être munis de
pompe à vide et de systèmes de réfrigération. Les
volumes sont quelque peu limités, généralement on ne
trouve pas de rotors pouvant contenir plus d'une dizaine
de tubes de 40 mL Figure
3 :ultrecentrifugeuses

 Micro-centrifugeuses :

On a aussi développé des centrifugeuses spécialement


conçues pour les micro-volumes très souvent employés en
biochimie moderne. Les microtubes à centrifuger sont des
petits tubes coniques généralement de 1.5 mL fait de
polypropylène et assez peu dispendieux. Les centrifugeuses
de ce type peuvent être réfrigérées et atteindre des
accélérations de l'ordre de 12-15 000 x g. Les modèles les
moins couteux n'ont pas de contrôle de vitesse et ne sont pas réfrigérés.
Figure 4 :Microcentrifugeuses

 Ultracentrifugeuses analytiques :

Ce sont des appareils de moins en moins utilisés. Ces centrifugeuses servent surtout
à analyser la taille et la masse des particules et des protéines. D'autres techniques
beaucoup moins coûteuses sont utilisées de nos jours : électrophorèse, filtration sur
gel...

Figure 5:Ultracentrifugeuses
analytiques

Les différents types de centrifugation :

 Centrifugation différentielle :

Elle facilite la séparation d'un homogénat en fonction de la taille et de la densité de


ses constituants grâce à une série de centrifugations à des intervalles de temps et
des accélérations de plus en plus élevées.

 Centrifugation par gradient de densité :

La séparation des substances par centrifugation en gradient de densité consiste à


concentrer les particules dans des solutions de sels de césium ou de saccharose.
Cette méthode permet de fractionner les particules en fonction de leur densité de
flottabilité. On désigne la solution de sels de césium ou de saccharose utilisée
comme gradient de densité. Les deux types de centrifugation en gradient de densité
sont la centrifugation zonale et la centrifugation isopycnique.
L’infiltration-centrifugation :

La méthode d'infiltration-centrifugation est largement reconnue comme une


technique robuste pour l'analyse de la composition des apoplastes solubles de
différentes espèces végétales. Le liquide obtenu par cette méthode est couramment
désigné sous le nom de liquide de lavage des apoplastes.

., la technique d'infiltration-centrifugation est une méthode en deux étapes qui


implique essentiellement le remplacement de l'espace aérien apoplasique par un
fluide d'infiltration aqueux, qui se mélange au fluide apoplastique natif, suivi de la
récupération du mélange fluide infiltration/apoplastique. Comme le liquide récupéré
est dilué et ne contient pas tous les composés présents dans l'apoplaste , ce liquide
est communément appelé liquide de lavage de l'apoplaste (AWF), ou parfois liquide
de lavage intercellulaire, plutôt que liquide apoplastique

Reference

(1) FT-Centrifugation.pdf
(2) https://www.legarrec.com/entreprise/centrifugation/#:~:text=La%20force
%20centrifuge%20est%20cr%C3%A9%C3%A9e,de%20centrifugation
%20%C3%A0%20acc%C3%A9l%C3%A9ration%20croissante.
(3)
(4) GCH2100_DSP_BGAG.pdf
(5) Ttechnique de separation par dr semmame .o

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