Memoire Corrigé

‫الجمهورية الجزائرية الديمقراطية الشعبية‬
REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE
Ministère de l’Enseignement Supérieur ‫وزارة التعليم العالي و البحث العلمي‬

et de la Recherche Scientifique
Université Mouloud Mammeri ‫جامعة مولود معمري‬

FACULTE DE MEDECINE ‫كلية الطب‬
TIZI OUZOU ‫تيزي وزو‬
ⵜⴰⵙⴻⴷⴷⴰⵡⵉⵜⵎⵓⵍⵓⴷⴰⵜⵎⵄⴻⵎⵎⴻⵕ
Département de Pharmacie
N° D’ORDRE :
MEMOIRE DE FIN D’ETUDES

Présenté et soutenu publiquement
Le 19 JUILLET 2017
En vue de l’obtention du Diplôme de Docteur en Pharmacie
Thème :
Validation de nettoyage d’une centrale de pesée :

Cas d’un site multi produits
Réalisé par :
Melle BOUBEKER Roza Melle BOUAGGAR Khadidja
Encadré par :
Dr MAMOU Marzouk
Co-promoteur : Dr BOURSOUTI Mourad
Membres du jury :
Dr. KESSAL Fetta MAHU Faculté de Médecine UMMTO Présidente de jury

Dr. MAMOU Marzouk MAHU Faculté de Médecine UMMTO Promoteur
Dr. HADHOUM Nadia MAHU Faculté de Médecine UMMTO Examinatrice
ANNEE UNIVERSITAIRE : 2016/2017

REMERCIEMENTS
Nous tenons à remercier en premier lieu le bon Dieu de nous avoir donné la santé,
la volonté et Le courage pour réaliser ce travail.
Nous remercions particulièrement notre promoteur Dr. MAMOU. M, maitre-assistant

en chimie analytique et vice doyen de la faculté de médecine
de Tizi Ouzou pour son aide, son encouragement,
sa générosité et ses efforts qu’il a faits pour nous faciliter le travail.
Nous tenons à remercier également notre Co-promoteur Dr. BOURSOUTI. M,

résident en chimie analytique pour ses précieux conseils, son soutien moral,
la confiance qu’il nous a accordé durant toute la période de ce travail.
Nos profonds remerciements aux membres de jury Dr. KESSAL. F et Dr. HADHOUM. N qui
nous ont fait le grand honneur de juger ce travail.
Au personnel de BIOPHARM pour nous avoir recueilli et nous avoir facilité la réalisation de
notre mémoire.
En fin, nous remercions toute personne ayant contribué de près ou de loin

à l’élaboration de ce travail.
Khadidja & Roza

DÉDICACES
Je dédie ce modeste travail
A celle qui m’a donné la vie, la confiance, le vrai amour avec beaucoup de tendresse, l’exemple de
dévouement qui n’a pas cessé de m’encourager et de prier pour moi, à ma très chère mère Fatima.
A celui qui m’a donné la force et qui m’a offert tout le soutien dont j’ai besoin, mon très cher père
Djamel.
Mes chers parents vraiment aucune dédicace ne pourrait exprimer l’amour, le respect que j’ai
toujours eu pour vous, que dieu vous garde et vous protège, vous procure santé, bonheur et longue
vie.
A celle qui a toujours su être présente pour moi, ma chère sœur Zineb.
A mes chers frères : Fares et Ayoub.
A tous les membres de ma famille.
C’est avec un énorme plaisir et une immense joie, que je dédie ce travail à mon très cher binôme qui
a partagé ce travail avec moi, je te remercie pour tous les moments d’amitié, de joie qu’on a passée
ensemble.
A tous mes amies, qui je suis sûre se reconnaitront sans que j’aie à les citer tous, merci pour votre
soutien, votre amitié et vos encouragements.
KHADIDJA
Je dédie ce modeste travail à l’être le plus chère pour moi dans cette vie, ma mère et,
à l’être que je respecte le plus dans ce monde, mon père, pour leur amour et leur
sacrifice et leur encouragement pour finir ce travail ; que dieu leur prêtent longue vie.
À ma très chère sœur Amira ainsi que mes frères Sami et Rayane
À mes chères cousines Ibtissam, Lydia et Sarah
À tous les membres de ma famille
À tous mes amis qui n’ont pas cessé de m’encourager
À mon très cher binôme Khadidja pour sa patience et sa compréhension.
ROZA
TABLE DES MATIÈRES
TABLE DES MATIÈRES
TABLE DES MATIÈRES

LISTE DES ABRÉVIATIONS
LISTE DES FIGURES
LISTE DES TABLEAUX
INTRODUCTION…………………………………………………………………………….1
PARTIE THEORIQUE : REVUE DE LA LITTERATURE AU SUJET DE LA
VALIDATION DE NETTOYAGE.
CHAPITRE I : LA CONTAMINATION ET LES MOYENS DE LUTTE
1. La Contamination ............................................................................................................... 2
1.1. Types de contamination ............................................................................................... 2
1.1.1. Contamination particulaire ................................................................................... 2
1.1.2. Contamination microbiologique ........................................................................... 2
1.1.3. Contamination chimique ...................................................................................... 2
1.1.4. Contamination croisée .......................................................................................... 3
1.2. Types de contaminants ................................................................................................ 3
1.2.1. Particules inertes .................................................................................................. 3
1.2.2. Contaminants chimiques ...................................................................................... 4
1.2.3. Contaminants microbiologiques ........................................................................... 5
1.3. Sources et vecteurs de la contamination ...................................................................... 5
1.4. Les récepteurs de la contamination ............................................................................. 6
2. Maitrise de la contamination .............................................................................................. 6
2.1. Maitrise préventive de la contamination : Approche des 5M ...................................... 6
2.1.1. Main-d’œuvre ....................................................................................................... 6
2.1.2. Locaux et Matériel ............................................................................................... 7
2.1.3. Quelques règles essentielles ................................................................................. 7
2.2. Maitrise curative de la contamination : Le nettoyage .................................................. 8
2.2.1. Définition ............................................................................................................. 8
2.2.2. Types de nettoyage ............................................................................................... 8
2.2.2.1. Nettoyage manuel ......................................................................................... 8
2.2.2.2. Nettoyage semi-automatique......................................................................... 9
i
TABLE DES MATIÈRES
2.2.2.3. Nettoyage automatique ................................................................................. 9

2.2.3. Mécanisme de nettoyage ...................................................................................... 9
2.2.4. Les 10 principes du nettoyage ............................................................................ 10
2.2.5. Paramètres influençant le nettoyage ................................................................... 11
2.2.5.1. Action chimique .......................................................................................... 11
2.2.5.2. L’action mécanique ..................................................................................... 11
2.2.5.3. Température de lavage ................................................................................ 12
2.2.5.4. Le temps : .................................................................................................... 12
2.2.6. Choix des agents de nettoyage : ......................................................................... 13
2.2.6.1. Détergents ................................................................................................... 13
2.2.6.2. Désinfectants ............................................................................................... 14
CHAPITRE II : LA VALIDATION DE NETTOYAGE
1. Définitions ........................................................................................................................ 16
1.1. Le nettoyage .............................................................................................................. 16
1.2. La validation .............................................................................................................. 16
1.3. La validation de nettoyage ........................................................................................ 16
2. Pré-requis à la validation de nettoyage ............................................................................ 16
3. Contexte réglementaire de la validation de nettoyage...................................................... 17
4. Différents types de la validation de nettoyage ................................................................. 18
4.1. Validation prospective ............................................................................................... 18
4.2. Validation concomitante ............................................................................................ 18
4.3. La validation rétrospective ........................................................................................ 18
5. Les acteurs de validation .................................................................................................. 19
CHAPITRE III: DEMARCHE A SUIVRE POUR UNE VALIDATION DE NETTOYAGE

1. Sélection de contaminant à rechercher ............................................................................. 21
1.1. Méthode de groupage ................................................................................................ 22
1.2. Worst case ................................................................................................................. 22
1.2.1. Nature de la matière première principe actif ou excipient . ............................... 23
1.2.2. Etat physique de la matière première. ................................................................ 23
1.2.3. Solubilité dans l’alcool ...................................................................................... 23
ii
TABLE DES MATIÈRES
1.2.4. Nettoyabilité ...................................................................................................... 24

1.2.5. Toxicité .............................................................................................................. 24
1.2.6. Volatilité et pulvérulence .................................................................................. 25
1.2.7. Score de criticité ................................................................................................. 25
1.3. Avantages et inconvénients de la méthode de groupage ........................................... 26
2. Sélection des critères d’acceptation ................................................................................. 27
2.1. Dose thérapeutique .................................................................................................... 27
2.2. Présence de traces (approche des 10 ppm) ................................................................ 28
2.3. Critères organoleptiques ............................................................................................ 28
2.4. Données de toxicité ................................................................................................... 29
3. Sélection et validation des méthodes de prélèvement ...................................................... 30
3.1. Sélections des points de prélèvement ........................................................................ 31
3.2. Nombre de points à prélever ...................................................................................... 31
3.3. Différents types de prélèvements ............................................................................. 31
3.3.1. Prélèvements directs .......................................................................................... 31
3.3.2. Prélèvement indirect ........................................................................................... 32
3.3.3. Méthode par placebo .......................................................................................... 32
3.4. Validation de la méthode de prélèvement ................................................................. 35
4. Sélection et validation des méthodes d’analyse .............................................................. 35
4.1. Méthodes utilisées ..................................................................................................... 36
4.1.1. Analyse physico-chimique ................................................................................. 36
4.1.2. Analyse microbiologique ................................................................................... 37
4.2. Choix de la méthode .................................................................................................. 37
4.3. Validation analytique ................................................................................................. 38
4.3.1. Spécificité ........................................................................................................... 39
4.3.2. Linéarité ............................................................................................................. 39
4.3.3. Exactitude ........................................................................................................... 39
4.3.4. Fidélité ................................................................................................................ 40
4.3.5. Sensibilité ........................................................................................................... 40
4.3.6. Seuil de détection et de quantification ............................................................... 40
iii
TABLE DES MATIÈRES
4.3.7. Robustesse .......................................................................................................... 41

5. Reproductibilité du procédé de nettoyage : ...................................................................... 42
6. Durée de validité du nettoyage et revalidation ................................................................. 42
6.1. Temps de latence entre la fin de la production et le nettoyage .................................. 42
6.2. Temps de latence entre la fin du nettoyage et le début de la production ................... 42
6.3. Revalidation ............................................................................................................... 42
7. Documentation de la validation de nettoyage .................................................................. 43
7.1. La procédure de validation de nettoyage ................................................................... 43
7.2. Les fiches de tests ..................................................................................................... 44
7.3. Le rapport de validation ............................................................................................ 44
PARTIE PRATIQUE : APPLICATION AU CAS D’UNE CENTRALE DE PESEE

I. MATERIEL ET METHODES
1. Choix dutraceur………………………………………………………………………...46
1.1. Méthodes et Matériels……………………………………………………………….46
2. Définition des critères et des limites d’acceptation…………………………………….47
3. Validation des méthodes analytiques……………………………………………….….48
3.1. Protocole analytique…………………………………………………………….…..48
3.1.1. Préparation des solutions……………….…………………..............………….48
3.2. Spécificité……………………………………………………………………….…..50
3.3. Linéarité……………………………………………………………………………..51
3.4. Fidélité………………………………………………………………………………52
3.5. Limite de détection et de quantification…………………………………………….55
4. Validation des méthodes de prélèvement………………………………………………57
4.1. Méthode de prélèvement……………………………………………………………57
4.2. L’outil de prélèvement……………………………………………………………...57
4.3. Technique de prélèvement………………………………………………………..…57
4.4. Principe de validation de la méthode de prélèvement par écouvillonnage……….....58
iv
TABLE DES MATIÈRES
5. Validation de la reproductibilité du procédé de nettoyage………………………..……59
II. RESULTATS ET DISCUSSIONS
1. Résultats et discussions…………………………………………………………….…..60
2. Détermination de la limite d’acceptation : Calcul du MACO………………………....64
3. Résultat de la validation de la méthode de dosage du kétoprofene par HPLC……..….64
3.1. Spécificité……………………………………………………………………….…..64
3.2. Linéarité………………………………………………………………………….....66
3.3. Fidélité…………………………………………………………………………....…67
3.4. Limite de détection et de quantification………………………………………….…69
4. Validation de la méthode de prélèvement…………………………………………...…70
CONCLUSION…………………………………………………………………………......74
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
ANNEXES
RESUME
v
Atm atmosphere
ATNC Agents Transmissibles Non Conventionnels.
BPF Bonnes Pratiques de Fabrication.
C Colonne.
CA Critère d’Acceptation.
CCM Chromatographie sur couche mince.
CDP Centrale De Pesée.
CEFIRA Centre de Formation pour l’Industrie et la Recherche Appliquée.
CEHT Cleaned Equipment Hold Time.
CIP Clean In Place.
Cm Centimètre.
COT Carbone Organique Total.
CPG Chromatographie en phase gazeuse.
CV Coefficient de Variation.
DEHT Dirty Equipment Hold Time.
DIB Déchet Industriel Banal.
DID Déchet Industriel Dangereux.
DIS Déchet Industriel Spécifique.
DL50 Dose Létale médiane.
EPI L’Equipement de Protection Individuel.
EPA Environmental Protection Agency.
FDA Food and drug administration.
G Gramme.
GMP Good Manufacturing Practices.
H Heure.
HEPA High Efficiency Particulate Air.
HPLC Chromatographie liquide à haute performance.
HSE Service Hygiène, Sécurité, Environnement.
Kg Kilogramme.
LOD Limit Of Detection
vi
LOQ Limite Of Quantification.

MACO Maximum Allowable Carry Over.
MG Milligramme.
Min Minute.
ml millilitre.
mm H2O millimeter of water.
nm nanomètre.
NOEL No Observed Effect Level.
OGM Organismes Génétiquement Modifiés.
OSHA Occupational Safety and Health Administration.
PA Principe Actif.
Ppm Part per million.
RSD Relative Standard Deviation.
SFSTP Société Française des Sciences Techniques et Pharmaceutiques.
UV Ultra-violet.
µg microgramme.
µm micromètre.
µl microlitre.
vii
LISTE DES FIGURES
LISTE DES FIGURES
Figure 01 Dimensions de particules contaminants.

Figure 02 Diagramme des 5M représentant les sources de contamination
Figure 03 Schématisation de l'action du détergent sur une souillure
Figure 04 Cercle de SINNER
Figure 05 Plan de la CDP
Figure 06 HPLC
Figure 07 Ecouvillon
Figure 08 Plaque d’aluminium
Figure 09 Gamme des solutions standards
Figure 10 Gamme des solutions écouvillons
Figure 11 Agitation au vortex
Figure 12 Droite de régression : Hauteur = fonction de concentration
Figure 13 Outil de prélèvement
Figure 14 Plaque en aluminium
Figure 15 Droite d’étalonnage sur le standard A=f(C)
viii
LISTE DES TABLEAUX
LISTE DES TABLEAUX
Tableau 01 Classification des PA selon la nature

Tableau 02 Classification des PA selon l’état physique
Tableau 03 Classification des PA selon la solubilité
Tableau 04 Classification des PA selon la nettoyabilité
Tableau 05 Classification des PA selon la toxicité
Tableau 06 Classification des PA selon la volatilité
Tableau 07 Score final de criticité
Tableau 08 Avantages et inconvénients des différentes méthodes de groupage
Tableau 09 Avantages et inconvénients des différentes méthodes de prélèvement
Tableau 10 Caractéristiques des différentes méthodes analytiques
Tableau 11 Les caractéristiques des différentes méthodes de prélèvement
Tableau 12 Matrice pour le choix de « worst case »
Tableau 13 Equipements utilisés
Tableau 14 Scores et caractéristiques des produits pesés
Tableau 15 Données brutes pour l’étude de la linéarité sur les solutions standards
Tableau 16 Détermination des rendements d’extraction et de recouvrement
Tableau 17 Détermination des rendements d’extraction
Tableau 18 Détermination des rendements de récupérât
ix
INTRODUCTION
INTRODUCTION
Historiquement, la validation de nettoyage est née dans le domaine de l’industrie chimique dans
un souci de sécurité et afin de diminuer les risques toxicologiques qui peuvent être provoqués par
le passage d'un produit dans un autre. Par la suite, elle s'est étendue à l'industrie pharmaceutique.
Il est primordial pour l’industrie pharmaceutique d’optimiser ses propres procédés de nettoyage.
Tout procédé de nettoyage non maîtrisé est source de contamination et par conséquent de non-
conformité, ce qui entraîne inévitablement des pertes et une augmentation des coûts de
production.
L’un des sites où peut se produire la contamination est la centrale de pesée ou s’effectue le
prélèvement et la pesée des matières premières.
Le nettoyage efficace d'une centrale de pesée occupe une position clef dans la lutte contre les
risques de contamination croisée de médicaments fabriqués.
Comme tout autre processus pharmaceutique, l’opération de nettoyage, qu’elle concerne la

centrale de pesée, les locaux, les installations ou les équipements de production, doit faire l’objet
d’une validation, dans le cadre d’une politique d’assurance de la qualité, et ce conformément aux
exigences réglementaires nationales, européennes et mondiales de plus en plus strictes.
Notre travail a pour objectif de proposer une stratégie globale de validation de nettoyage et de
valider le nettoyage d’une centrale de pesée.
Le manuscrit est structuré en trois parties :

 La première partie il s’agit d’une revue de la littérature au sujet de la validation de
nettoyage. Elle est subdivisée trois chapitres ;
Le chapitre I : Décrit la contamination et les moyens de lutte.
Le chapitre II : Documente le nettoyage et la validation du nettoyage
Le Chapitre III : Illustre la démarche à suivre pour une validation de nettoyage d’une
centrale de pesée.
 La seconde partie correspond à la pratique de ce travail, elle traite un cas de validation de
nettoyage d’une centrale de pesée dans une entreprise pharmaceutique multi produits
BIOPHARM industrie.
1
PARTIE THEORIQUE
REVUE DE LA LITTERATURE AU SUJET
DE LA VALIDATION DE NETTOYAGE
CHAPITRE I
LA CONTAMINATION ET LES MOYENS
DE LUTTE
CHAPITRE ILA CONTAMINATION ET LES MOYENS DE LUTTE
1. La Contamination
On entend par contamination ''l'introduction non intentionnelle d'impuretés de nature chimiques

ou microbiologique, ou de matière étrangère, à l'intérieur ou à la surface d'une matière première,
d'un intermédiaire, ou d'une substance active, pendant la production, l'échantillonnage, le
conditionnement ou le reconditionnement, le stockage ou le transport'' [1]
Afin d’éviter cette contamination, des moyens de lutte sont aujourd'hui mise en place par
l'industrie pharmaceutique pour garantir la qualité des médicaments fabriqués.
1.1. Types de contaminations
1.1.1. Contamination particulaire

La contamination particulaire représente toutes les substances qui n’entrant pas dans la
composition de produits fabriqués (toutes substances différente des principes actifs ou des
excipients). Ces contaminants proviennent des équipements eux-mêmes (mauvais nettoyage des
résidus de produit précèdent…), du personnel, de l’air ambiant, du procédé de fabrication… [2].
1.1.2. Contamination microbiologique
La biocontamination est due à l’introduction des microorganismes (virus, bactéries, levures ou

moisissures) dans le produit fabriqué, cette contamination provient du personnel (cheveux,
mains,…), de machine ou d’équipement de fabrication (recoins non nettoyés et qui peuvent
favoriser la prolifération microbienne).
Cette contamination est quantifiée à la suite du dénombrement de germes totaux et / ou spécifiés

[2].
1.1.3. Contamination chimique
C’est une contamination par les principes actifs, résidus des excipients, lubrifiants, produits de
maintenance, produits intermédiaires ou produits finis, résidus des agents de nettoyage, produits
de dégradation des médicaments ou agents de nettoyage,…
Ces contaminants proviennent donc des équipements eux-mêmes, des équipements annexes, du
personnel,…
PREMIÈRE PARTIEREVUE DE LA LITTERATURE AU SUJET DE LA VALIDATION DE NETTOYAGE 2

Très souvent, la contamination chimique considère seulement les contaminations par les produits
médicamenteux et les agents de nettoyage [2].
1.1.4. Contamination croisée
La contamination croisée est le transfert des contaminants par un produit vers un autre au moyen
d’un ou plusieurs vecteurs tels que mains des opérateurs, eau, surface contaminée, Ce type de
contamination est la plus redoutée par les industriels.
Selon les Bonnes pratiques de fabrication, la contamination croisée est définie comme :
«La contamination d’un produit par un autre », ou encore «La contamination d’une matière ou
d’un produit par une autre matière ou par un autre produit ».
Dans la contamination croisée, deux cas figurent :
 Contamination « successive » : lorsque les deux produits A et B sont fabriqués dans les
mêmes équipements et dans les mêmes locaux.
 Contamination « simultanée » : lorsque les deux produits A et B sont fabriqués en même
temps mais dans des équipements et locaux différents [2.3].
1.2. Types de contaminants
Traditionnellement, les contaminants sont classés en trois grandes catégories :
1.2.1. Particules inertes
Ces contaminants ont plusieurs origines : tellurique, usure des équipements et des machines,
vêtements (fibres…), renouvellement de la peau, procédés de fabrication (opérations mécaniques,
chimiques…)… Les particules sont, en première approche, caractérisées par leur diamètre
exprimé en micromètre (µm).
Le seuil de visibilité des particules en lumière intense est d'environ 30 µm. Ce seuil est nettement
supérieur aux tailles des contaminants habituellement présents dans l'air et donc aux tailles de
référence utilisées pour la classification des zones à contamination maîtrisée ou salles propres
(figure 01) [4].

Figure 01 : Dimensions de particules contaminants.
1.2.2. Contaminants chimiques
Il s’agit de résidus de principes actifs, de produits de dégradation ou d’agent de nettoyage. Ce

sont des contaminants qui font l’objet d’un suivi quantitatif car il est possible de calculer des
critères d’acceptation pour chaque type de contaminants chimiques.
Certains contaminants sont parfois classés de façon spécifique en fonction de leurs

caractéristiques, propriétés ou pathogénicité, comme par exemple les prions ou ATNC (Agents
Transmissibles Non Conventionnels), les OGM (Organismes Génétiquement Modifiés), les
allergènes (substances chimiques d'origine animale, végétale ou autre, susceptibles de provoquer
une allergie ou réponse immunitaire) [5].

1.2.3. Contaminants microbiologiques
Il s’agit de la contamination de produits par des micros organismes : bactéries, virus, levures et
moisissures. Dans des conditions favorables de température et d’humidité, les microorganismes
se développent et colonisent les surfaces et les produits. Ces microorganismes sont fixés sur des
particules qui peuvent se déposer sur les surfaces des équipements et locaux. C’est pourquoi la
contamination particulaire doit être maîtrisée. En effet, plus un environnement a une
contamination particulaire élevée, plus il présente un risque élevé de contamination
microbiologique [3].
1.3. Sources et vecteurs de la contamination
Il est possible de résumer les différentes sources de contamination par la méthode 5M. Cette
méthode permet de rechercher et de présenter de manière simple les différentes causes possibles
d’un problème. Cette méthode est très utilisée en production pour la résolution de problèmes afin
de trouver les root cause et de proposer les solutions adaptées pour éviter la récurrence des
problèmes.
Figure 02 : Diagramme des 5 M représentant les sources de contamination

1.4. Les récepteurs de la contamination
Les récepteurs sont, selon les BPF, «essentiellement constitués par les composants et les
différentes présentations pharmaceutiques en cours de préparation, en vue d’en faire un
médicament administrable ». Il s’agit donc :
 Des matières premières ;

 Des articles de conditionnement primaire ;
 Des produits intermédiaires semi-finis ;
 Des produits fini ou produit vrac [6] .
2. Maitrise de la contamination
2.1. Maitrise préventive de la contamination : Approche des 5M
A partir du diagramme d’Ishikawa, il est relativement facile d’imaginer des moyens de

prévention pouvant être mis en place pour lutter contre la contamination.
2.1.1. Main-d’œuvre
80% des contaminations sont dues au personnel. Une hygiène stricte du personnel est donc
nécessaire. C’est pourquoi une formation des opérateurs est indispensable.
« Le fabricant doit assurer la formation de tout le personnel appelé à pénétrer dans les zones de
production et de stockage, ou dans les laboratoires de contrôle (personnel technique, d'entretien et
de nettoyage inclus), de même que de toute autre personne dont les activités pourraient présenter
une influence sur la qualité des produits » [5].
Celle-ci doit permettre de les sensibiliser afin d’appliquer correctement les consignes et de
comprendre les causes et les démarches de l’assurance qualité entreprises pour maitriser la qualité
de la fabrication des produits.
Il convient de donner, par cette formation, des notions d’hygiène individuelle (lavage des mains,
visite médicale, port de tenues adaptées au poste de travail, pas de bijoux)
Et collective (maintien en bon état de propreté des endroits de rassemblements et de passage).

2.1.2. Locaux et Matériel
Le matériel et les locaux doivent être conçus de façon à être facilement nettoyés, désinfectés voir
stérilisés. On doit s’assurer qu’aucun produit utilisé pour l’entretien ne puisse souiller le
médicament.
Le nettoyage et la désinfection ne font l’objet d’aucune norme. Les BPF ne donnent que les
directives et il convient donc à chacun d’établir des procédures adaptés et validées. Des
prélèvements et des dosages sont effectués afin de vérifier l’absence de traces du produit
précédent ou des agents de nettoyage utilisés.
2.1.3. Quelques règles essentielles
 L’équipement de protection individuel (EPI) est obligatoire : le personnel doit porter

blouse, masque (anti-poussières, anti-vapeurs toxiques), lunettes, gants, charlottes, sur-
chausses, stop bruits, casque, voire scaphandre intégral. Il ne doit pas y avoir de contact
entre le produit et la peau.
 Il est interdit de manger, de fumer, de boire dans les ateliers de production, stockage et
contrôle.
 Le matériel ne doit pas être monté, démonté ou nettoyé sous tension ; les outils ne doivent
pas être laissés en désordre ; vérifier les fils électriques avant mettre en marche un
appareil.
 Les produits dangereux : les produits toxiques et les solvants doivent être rangés dans des
armoires dédiées fermées à clé et ventilées.
 Les matières premières doivent être rangées sitôt utilisation.
 Les déchets doivent êtres triés et classés selon 2categories : DIB, déchet industriel banal
et DIS, déchet industriel spécifique ou DID, déchet industriel dangereux, ces déchets ne
présentant pas le même danger.
 Les affichages de sécurité mis à jour doivent être clairs et incitatifs [7].

2.2. Maitrise curative de la contamination : Le nettoyage

Le nettoyage est l’élément principal du traitement curatif afin de limiter les risques de
contamination, il constitue une étape clef et obligatoire de tout procédé de fabrication.
Les locaux et les matériels, en contact direct avec les produits en cours de fabrication, doivent
être nettoyés et désinfectés selon des procédures écrites détaillées afin de limiter le risque de la
contamination croisée.
Le matériel doit être nettoyé, étiqueté « nettoyé » ou « non nettoyé », et rangé dans un endroit
approprié.
La figure suivante décrit les méthodes de lutte contre la contamination dans un site industriel
pharmaceutique.
2.2.1. Définition
Le nettoyage est une opération qui consiste à séparer et éliminer des éléments de souillures sur
une surface donnée.
L’objectif du nettoyage est d’éliminer toutes traces de souillures ou de contaminants afin de

maitriser du mieux possible le risque de contamination croisée.
Quelques points sont importants à souligner en termes de nettoyage
- Plus la souillure est petite plus l’adhésion à la surface sera forte.
- Plus l’étape de nettoyage intervient dans un délai important après la production plus la
souillure est difficile à éliminer.
- La rugosité du matériel a un impact important sur la difficulté à réaliser le nettoyage [2.5].
2.2.2. Types de nettoyage
On distingue trois types de nettoyage : manuel, semi-automatique, et automatique.
2.2.2.1.Nettoyage manuel

Le nettoyage manuel consiste en une élimination des résidus par une action mécanique couplée
ou non à l’action chimique des produits, Il nécessite l’implication du personnel, les opérateurs
doivent être formés et habilités à réaliser le nettoyage.
L’avantage de ce type de nettoyage est le ciblage des zones critiques du matériel difficilement
atteignables avec d’autres types de nettoyage, le principal inconvénient est le manque de
reproductibilité de la méthode. Pour cela, le mode opératoire doit être le plus détaillé possible, De
plus, il faut s’assurer que les opérateurs appliquent bien la procédure de nettoyage où sont décrits
la concentration de la solution de lavage, la température de l’eau de lavage, solution de lavage et
le temps de nettoyage [5.6].
2.2.2.2.Nettoyage semi-automatique
Ce nettoyage permet de limiter l’intervention de l’opérateur (réduction du risque d’accident

lors de la manipulation du détergent).Il s’agit d’une succession d’opérations manuelles et
automatiques (préparation de solutions détergentes, démontage partiel pour la mise en place de
système de lavage, pré rinçage manuel...) [5].
2.2.2.3.Nettoyage automatique
Ce type de nettoyage consiste à nettoyer un équipement, sans démontage préalable, par aspersion
ou circulation de fluide. L’opérateur n’intervient pas dans ce type de nettoyage mais il surveille
le bon déroulement du nettoyage et vérifie les données brutes enregistrées. Le terme de Clean In
Place (CIP) est couramment employé pour désigner ce type de nettoyage.
Les méthodes de nettoyage automatisées se basent sur l’utilisation des techniques d’aspersion
(pression par les fluides circulants) et d’ultrasons (alternance de surpression et de dépression)
bien qu’elles soient innovantes, ces méthodes requièrent des installations lourdes et sont
couteuses dans l’utilisation au quotidien et également en termes de maintenance[8].
2.2.3. Mécanisme de nettoyage
Le nettoyage est un processus durant lequel les salissures ou souillures sont séparées d’une
surface solide à l’aide d’une solution de nettoyage ou d’un détergent, ce qui permet leurs mises
en dispersion ou en solution.
On constate qu’au cours d’un nettoyage, trois interactions surviennent entre :

 Surface ↔ Souillure.
 Souillure ↔ Détergent.
 Détergent ↔ Surface.
Dans tout type de nettoyage, il existe trois phases :
 Une phase solide présentée par la surface à nettoyer.

 Une phase liquide ou solide correspond à la souillure.
 Une phase liquide correspond à la solution de nettoyage.
Les trois phénomènes essentiels du nettoyage sont le mouillage, le déplacement de la souillure et

son anti-redéposition [2.5].
Mouillage Décollement de la souillure Anti-redéposition
Figure 03 : Schématisation de l'action du détergent sur une souillure
2.2.4. Les 10 principes du nettoyage

Il existe 10 principes à respecter pour garantir la bonne efficacité du procédé de nettoyage :
1. Le processus de nettoyage doit être compatible avec les activités de production et avec la
classe d’air de la zone de production (choix et qualification des moyens matériels en fonction).
2. Le processus de nettoyage doit respecter les surfaces à nettoyer (limiter l’abrasivité du

procédé de nettoyage, compatibilité des détergents avec les matériaux à nettoyer).
3. Le nettoyage ne doit pas diluer ou étaler la souillure sur les surfaces.
4. Le nettoyage ne doit pas apporter de contamination supplémentaire.

5. Le nettoyage ne doit pas transférer de contamination d’une zone vers une autre.
6. Le procédé de nettoyage doit commencer dans la zone la plus critique (qui est la plus
sensible à la contamination) pour se terminer dans la zone la moins critique.
7. Le procédé de nettoyage doit se dérouler de la zone la plus sale vers la zone la moins sale
(cependant, si ce principe est en contradiction avec le principe 6, le principe 6 est prioritaire).
8. Il faut réaliser le nettoyage d’une zone dans le sens des flux d’air.
9. Le personnel doit être formé et habilité à réaliser les opérations de nettoyage et les
équipements doivent être qualifiés. L’opérateur en charge du nettoyage est tenu de respecter le
plus justement possible le mode opératoire.
10. Il faut toujours respecter les règles de sécurité lors des opérations de nettoyage pour
limiter les risques pour l’opérateur, les risques pour le médicament et les risques pour
l’environnement [2.6].
2.2.5. Paramètres influençant le nettoyage

Le nettoyage est définit par l’interaction de 4 facteurs qui permettent d’obtenir un équipement
visuellement propre et sec et répondant aux limites fixées pour les résidus de principe actif, agent
de nettoyage et en terme de contamination microbienne.
Les 4 facteurs clés du nettoyage sont :
2.2.5.1.L’action chimique
Fait le plus souvent intervenir un détergent. Cette action sera dépendante du détergent choisi et de
son dosage. Dans certains cas, on peut nettoyer sans détergent.
2.2.5.2.L’action mécanique
C’est un facteur très important, il intervient à tous les stades de nettoyage pour mettre la surface à
nettoyer constamment en contact avec la solution détergente et pour créer les forces nécessaires à
l’arrachage des souillures.
L’action mécanique apportée par l’opérateur (force physique) est un paramètre non négligeable
et particulièrement dans le nettoyage manuel, d’où la nécessité de programmer des formations
convenables aux opérateurs pour s’assurer de la réussite des opérations de nettoyage.

Tout supplément d’énergie mécanique apportée permet de réduire la température de

fonctionnement ainsi que la durée du cycle de nettoyage.
L’action mécanique peut être provoquée de différentes manières : Agitation de la pièce lorsqu’on
nettoie par trempée, agitation de la souillure, vitesse de circulation de la solution et pression avec
laquelle la solution est projetée sur la surface à nettoyer.
2.2.5.3.Température de lavage
La température joue un rôle très important au cours de nettoyage, elle permet de :
- Abaisser la tension superficielle en améliorant l’adsorption des tensioactifs aux interfaces.
- Accélérer la cinétique des réactions chimiques telles que la saponification et l’hydrolyse.
- Ramollir les huiles, graisses, cires et faciliter la pénétration du détergent.
- Faciliter l’action séquestrant de certains adjuvants notamment les phosphates.
La température d’opération de nettoyage se situe de façon typique, selon les procédés utilisés
entre 40 et 80 °C.
2.2.5.4.Le temps :
Il paraît évident que l’efficacité du nettoyage dépend du temps alloué au contact entre la surface
et la solution de nettoyage, mais on doit signaler que dans certain cas une durée de nettoyage trop
importante peut favoriser la corrosion de la surface à nettoyer, c’est pourquoi, les industriels
pharmaceutiques déterminent un temps de séjour maximal à l’étape de nettoyage.
- Ces quatre paramètres sont réunis dans le cercle de SINNER (figure 8). Ces paramètres sont
interdépendants et sont la clé d’un nettoyage réussi. Il faut donc trouver le meilleur équilibre
possible entre ces quatre facteurs [2.5].

Figure 04: Cercle de Sinner
2.2.6. Choix des agents de nettoyage :
2.2.6.1.Détergents
Détergence : processus selon lequel les salissures (souillures) sont détachées de leur substrat et
mises en solution ou en dispersion. Au sens ordinaire, la détergence a pour effet le nettoyage des
surfaces. Elle est la résultante de la mise en œuvre de plusieurs phénomènes physicochimiques
(NF EN ISO 862).
Il existe plusieurs types de détergents :
 Des agents à caractère alcalin, qui permettent d’éliminer les souillures organiques huile,
graisse, protéine et carbohydrates ex: Hydroxyde de sodium, Hydroxyde de potassium,
phosphate trisodique, métasilicate sodique.

 Des agents à caractère acide contre les souillures inorganiques : dureté de l’eau et autres films
minéraux (calcium, magnésium, fer….). Il s’agit de solutions d’acide nitrique, phosphorique,
citrique ou des mélanges d’acides pouvant être renforcés avec des tensioactifs compatibles.
 Les tensioactifs ou détergents neutres composés organiques utiles tant dans les formulations
alcalines comme dans les formulations acides pour fournir de la détergence. Ces molécules
présentent au moins deux parties d'affinité différente, l'une est hydrophile (affinité pour l'eau) et
l'autre lipophile (affinité pour les graisses) ; de telles substances sont dites amphiphiles. On
distingue les tensioactifs anioniques, cationiques et amphotères et les tensioactifs « non ioniques
» qui ne s’ionisent pas dans l’eau.
Le Choix du produit détergent dépendra :
 De la nature et de l’état des souillures et de leur degré d’incrustation dans le matériel, de la

qualité de l’eau utilisée : dureté, caractère corrosif et éventuellement qualité microbiologique.
 De la nature du support et de son état de surface : l’efficacité du nettoyage est d’autant plus
importante que la rugosité du matériau est faible. Le détergent ne doit pas présenter de caractère
agressif vis-à-vis des surfaces à nettoyer. La liste des matériaux destinés à être en contact avec le
produit doit être établie et leur compatibilité avec l’agent de nettoyage vérifiée.
 Du mode de nettoyage mis en œuvre : on utilisera :
 Des produits peu moussants en cas de nettoyage manuel, ou des
produits moussants pour les canons à mousse.
 Des produits non moussants pour les nettoyages en place.
 De son efficacité: Si l’installation est multi-produits, on cherchera le produit ayant la plus
haute efficacité pour nettoyer la souillure la plus difficile à éliminer.
 Le produit doit avoir un coût de mise en œuvre avantageux (temps de cycle, temps de contact,
et temps de rinçage ne devront pas être trop élevés afin de ne pas immobiliser les équipements
pendant une durée trop importante.
2.2.6.2.Désinfectants
Désinfection : opération, au résultat momentané, permettant d’éliminer ou de tuer les

microorganismes et/ou d’inactiver les virus indésirables portés par des milieux inertes
contaminés (norme NF T72-101).

Stérilisation: opération permettant d’éliminer ou de tuer les microorganismes portés par des
milieux inertes contaminés, le résultat de cette opération étant la stérilité (norme NF T72-101).
Stérilité: état de ce qui est exempt de microorganismes viables (Pharmacopée Européenne

5édition).
Les désinfectants les plus utilisés : chlore, alcools, phénols, aldéhydes, ammoniums
quaternaires, alkylamines, biguanides.
Les critères de choix d’un désinfectant sont les mêmes que pour un détergent. S’y ajoutent ceux
spécifiques aux désinfectants : En fonction des besoins, le produit doit présenter une activité
bactéricide, fongicide, virucide, sporicide en fonction des objectifs fixés
Les BPF recommandent de mettre en place une alternance entre plusieurs désinfectants de
formulations différentes afin d’éviter les phénomènes de résistance dans les zones à
atmosphère contrôlée. Tous les désinfectants retenus devront alors être qualifiés [9.10].

CHAPITRE II
LA VALIDATION DE NÉTTOYAGE
C CHAPITRE II VALIDATION DE NÉTTOYAGE
1. Définitions
1.1. Le nettoyage
Le nettoyage est l’action de séparer et d’éliminer des souillures généralement visibles d’une
surface. L’objectif à atteindre est du domaine de la propreté (visuelle).
Le nettoyage est également défini comme l’ensemble des : « mesures prises pour l’élimination
d’un produit dont la présence à l’état de traces dans un autre produit présente un risque mineur. »
[11].
1.2. La validation
La définition de validation selon les GMPs est «Établir des preuves documentées qui fournit un
degré élevé d'assurance qu'un processus spécifique sera constamment un produit conforme à ses
spécifications prédéterminées et les attributs de qualité."
1.3. La validation de nettoyage
La validation de nettoyage est la procédure par laquelle on obtient des preuves documentées
qu’une procédure de nettoyage approuvé, réduit, constamment, la teneur en résidus dans
l’équipement et les installations au-dessus d’un niveau acceptable établi a l’avance
La validation des procédés de nettoyage a pour objectif de vérifier si ces procédés permettent
d'éliminer efficacement les résidus de produits, les produits de dégradation, les excipients et/ou
les agents de nettoyage, ainsi que le contrôle de contaminants microbiens potentiels. En outre, on
doit s'assurer qu'il n'y a aucun risque de contamination croisée entre les ingrédients actifs [12].
Il n'est pas nécessaire de valider chaque procédé de nettoyage s'appliquant à des produits et à
des procédés très semblables. À ce sujet, il faut déterminer l'équipement et les surfaces qui sont
communs, une matrice englobant tout l'équipement venant en contact direct avec les produits.
2. Pré-requis à la validation de nettoyage
Afin de préparer au mieux la validation de nettoyage, certaines étapes doivent avoir été
effectuées, il s’agit de :
 Rédaction de la procédure de nettoyage.
PARTIE THEORIQUE REVUE DE LA LITTERATURE AU SUJET DE LA VALIDATION DE NETTOYAGE 16

 Qualification du matériel et des agents de nettoyage.

 Qualification des locaux et des équipements à nettoyer.
 Habilitation du personnel chargé du nettoyage.
3. Contexte réglementaire de la validation de nettoyage
Les BPF exigent que les opérations de nettoyage soient « validées en vue de confirmer
l’efficacité de la procédure de nettoyage. Les teneurs limites en résidus, produits de nettoyage et
contamination microbienne doivent logiquement être fixées en fonction des matériaux et des
produits utilisés. Ces limites doivent pouvoir être atteintes et vérifiées.»
La validation de nettoyage est considérée comme un point critique et fait presque

systématiquement l’objet des questions lors d’audits par des clients ou d’inspections par des
agences européennes ou américaines [5.9].
 Les BPF
Constituent des recommandations d’application obligatoire
La validation
5.23. Les études de validation doivent conforter les bonnes pratiques de fabrication ; elles
doivent être menées conformément à des procédures définies. Les résultats et les conclusions
doivent être consignés.
5.24. Lors de l'adoption d'une nouvelle formule de fabrication ou d'une nouvelle méthode de
préparation, il convient de démontrer qu'elle satisfait à la production de routine et que le
processus choisi, avec les produits et le matériel prévus, donne systématiquement un produit de
la qualité requise.
5.25. Il convient de valider toute modification importante du processus de fabrication, y compris

au niveau du matériel ou des produits, lorsque cette modification peut affecter la qualité du
produit ou la reproductibilité du processus.
5.26. Les procédés et les procédures doivent être périodiquement soumis à une nouvelle
validation critique en vue de confirmer leur aptitude à conduire aux résultats escomptés.

 Les GMPs
Les Good Manufacturing Practices sont l’équivalent de BPF aux états unis. Concernant le
nettoyage les GMP exigent que : « le matériel et les ustensiles doivent être nettoyés, entretenus et
en fonction de la nature du médicament désinfectés et ou stérilisés à des intervalles de temps
appropriés à fin de prévenir les dysfonctionnements ou contaminations qui modifieraient la
sécurité, la force, l’identité, la qualité ou la pureté du produit médicamenteux au-delàs d’autres
exigences établis ».
4. Différents types de la validation de nettoyage
La validation de nettoyage est une exigence réglementaire pour assurer la qualité de médicament
et bien sur la santé du patient, il existe 3 types de validation :
4.1. Validation prospective

L'établissement des preuves documentées que une pièce d'équipement / processus ou du système
va faire ce qu'il prétend faire, basé sur une série de pré-planifiée de tests scientifiques tels que
définis dans le Plan de validation. Elle est effectuée lorsque le procédé de fabrication a été
modifié et que ces modifications peuvent influer sur les caractéristiques finales du produit.
4.2. Validation concomitante
Est occupée lorsqu'un processus existant peut être localisée à être dans un état de commande en
appliquant des tests sur des échantillons à des points stratégiques à travers un processus, et à la
fin du processus. Toutes les données sont collectées en même temps que la mise en œuvre de la
procédure jusqu'à ce que l'information disponible soit suffisante pour démontrer la
reproductibilité du procédé. Pour la plupart des cas, c’est dans cette situation qu’est réalisée la
validation de nettoyage. En effet, les procédures de nettoyage sont déjà existantes mais pas
encore validées lors de la réalisation des essais de validation de nettoyage.
4.3. La validation rétrospective
L'établissement des preuves documentées que le processus fait ce qu'il prétend faire, fondé sur
l'examen et l'analyse des données historiques. Pour réaliser une telle validation, les données
doivent être suffisamment nombreuses et représentatives des lots fabriqués pour être pertinentes.

Cette validation est applicable pour les procédés de fabrication mais n’est pas applicable à la
validation des procédés de nettoyage [5.13].
• validation prospective (avant la production)

1
• validation simultanée (au cours de production)

2
• validation rétrospective (basée sur l'historique)

3
5. Les acteurs de validation
La validation de nettoyage est un processus qui implique l’ensemble de département et de

service de l’industrie pharmaceutique.
Les principaux services impliqués sont l’assurance qualité, la production, le service de

qualification/validation et le laboratoire de contrôle analytique et microbiologique. A ces
services, il faut rajouter l’implication de la maintenance et de la logistique.
 L’assurance qualité tient un rôle central car elle se charge d’approuver toute la
documentation nécessaire à la validation de nettoyage : modes opératoires de nettoyage,
protocoles et rapports de la validation de nettoyage.
 La production possède les équipements et s’occupe de leur fonctionnement. Du
responsable de production à l’opérateur, toute l’unité de production est impliquée dans la
validation de nettoyage. Elle doit veiller à la formation des opérateurs de production aux
procédures de nettoyage, au respect des procédures, à la réalisation du nettoyage et à
l’inspection visuelle après chaque nettoyage. La production s’occupe également de la
rédaction des modes opératoires de nettoyage des équipements et du matériel.
 Le service de qualification/validation s’occupe comme son nom l’indique de la
réalisation des qualifications des équipements du site et de la validation des procédés de
fabrication et de nettoyage. Son rôle est de rédiger les protocoles et les rapports en lien

avec la validation de nettoyage. Il s’assure de l’état qualifié des équipements avant la

réalisation de la validation de nettoyage.
 Le laboratoire de contrôle analytique et microbiologique s’occupe de valider les
méthodes de prélèvements et d’analyser des échantillons. Il participe à la rédaction des
rapports de validation en compilant les données analytiques conformément aux protocoles
d’analyses.
 Le service HSE va également être impliqué pour vérifier que tous les moyens sont mis en
œuvre pour ne pas soumettre les opérateurs de nettoyage à des risques sécurité Lors des
démontages et lavages des pièces des équipements, l’ergonomie du poste de travail doit
être adaptée. De même, ils sont en charge de s’assurer de la disponibilité des EPI
nécessaires.
A cela, il faut ajouter la maintenance qui apporte son soutien à la production en s’occupant du
maintien en bon état des équipements de nettoyage.
La logistique est aussi impliquée dans la validation de nettoyage : il faut organiser les plannings
de production pour réaliser la validation de nettoyage en fonction des délais fixés dans le plan de
validation. Il faut donc que la validation de nettoyage n’impacte pas négativement engagements
pris pour mettre les produits sur le marché [5].

CHAPITRE III
DÉMARCHE Á SUIVRE POUR UNE
VALIDATION DE NÉTTOYAGE D’UNE
CENTRALE DE PESÉE
CHAPITRE III DÉMARCHE Á SUIVRE POUR LA VALIDATION DE
NÉTTOYAGE D’UNE CENTRALE DE PESÉE
Les opérations de nettoyage doivent être validées en vue de confirmer l’efficacité de la procédure
de nettoyage. Les teneurs limites en résidus, produit de nettoyage et contamination microbienne
doivent logiquement être fixées en fonction des matériaux et des produits utilisés. Ces limites
doivent pouvoir attendre et vérifiées [1].
Principe de base de nettoyage est de minimiser la contamination entre les médicaments fabriqués
sur le même équipement.
Avant d’entamer la validation de nettoyage l’industrie devra effectuer ses choix: sélection du ou
des contaminant(s) à rechercher, des surfaces générales et des équipements, des critères
d'acceptation, des méthodes de prélèvement et sélection des méthodes analytiques.
Pour atteindre les résultats estimés il faut suivre les étapes suivantes [14] :
- Sélection du contaminant à rechercher

- Détermination des critères d’acceptation
- Choix et validation des méthodes de prélèvement
- Choix et validation des méthodes d’analyse de traces de contaminant
- Expérimentation sur terrain et reproductibilité du procédé de nettoyage.
- Suivi, maîtrise des changements et revalidations
La rédaction de la procédure de validation de nettoyage est un élément clé au centre de cette

démarche. Il est nécessaire de mettre en place des moyens adaptés (matériel, opérateurs,
encadrement ...) de définir les tâches de chaque participant de nommer un responsable de projet
pour la mise en place et le suivi.
1. Sélection de contaminant à rechercher
Le choix du contaminant à rechercher dépend de la nature et du niveau de risque des produits

fabriqués et de leur environnement.
Comme a été cité précédemment le contaminant peut être de nature [8] :
 Chimiques : les principes actifs, les excipients, les agents de nettoyage, leurs produits de
neutralisation ou leurs produits de dégradation.

 Microbiologiques: bactéries, micro-organismes, pouvant se développer sur le matériel. Cette

contamination est appréciée selon les cas par le dénombrement des germes totaux et/ou des
germes spécifiés.
 Particulaires : filaments provenant des tissus d'essuyage, des poils de brosse, poussière.
1.1. Méthode de groupage

La validation de nettoyage peut être simplifiée par la méthodologie de groupage. Ce concept est
basé sur une réflexion préliminaire qui consiste en la détermination d’un ou plusieurs « pire(s)
des cas » puis la validation de nettoyage est effectuée sur ce « pire des cas ». La réalisation de la
validation de nettoyage est ensuite considérablement allégée du fait que tous les produits
concernés par la même procédure de nettoyage et n’était pas le « pires de cas » sont
implicitement validés. Il est important de noter que cette démarche n’est acceptée par les autorités
que dans la mesure où chaque choix est justifié et documenté.
1.2. Worst case
Il est présumé que si un équipement devient propre dans les conditions défavorables, il sera aussi
nettoyé dans les conditions plus favorables.
Il faut créer un tableau récapitulatif de tous les produits fabriqués sur le site avec les critères
suivants afin de déterminer le produit « worst-case »:
- Nature de la matière première principe actif ou excipient

- Etat physique de la matière première
- Solubilité dans l’alcool
- Nettoyabilité
- Toxicité
- Volatilité et pulvérulence
Chacun de ces critères est quantifié et un coefficient indiquant son importance lui est attribué.
Un score final résulte de la multiplication des coefficients précédents. Le produit pire cas
correspond à celui ayant le score le plus élevé.

1.2.1. Nature de la matière première principe actif ou excipient

une contamination croisée par un PA peut entrainer un effet néfaste pour la santé humaine alors
que les excipients sont pharmacologiquement inactifs à l’exception des excipients à effet notoire
qui peuvent entrainer certaines intolérances individuelles.
Tableau 01 Classification des PA selon la nature
Nature de la matière première (N) Coefficient attribué
Excipient sans effet notoire N=1
Excipient à effet notoire N=2
Principe actif N=4
1.2.2. Etat physique de la matière première

l’état physique de la matière solide ou liquide est directement lié à la difficulté de nettoyage des
composantes de la centrale de pesée. Les matières à l’état solide sont généralement plus difficiles
à nettoyer par rapport aux matières à l’état liquide.
Tableau 02 Classification des PA selon l’état physique
Etat physique de la matière première (E) Coefficient attribué
Liquide E=1
semi solide (pâteux) E=2
Solide E=3
1.2.3. Solubilité dans l’alcool

S’agissant d’une centrale de pesée, le seul solvant qui peut être utilisé à part l’eau est l’alcool
(essuyage final), un produit a plus de chance d’être présent après nettoyage s’il est peu soluble ou
insoluble dans l’alcool.

Tableau 03 Classification des PA selon la solubilité
Solubilité dans l’alcool (critère décrits dans la pharmacopée européenne) (S) Coefficient attribué
Très soluble, facilement soluble et soluble 1
assez soluble et peu soluble 2
très peu soluble et pratiquement insoluble. 3
1.2.4. Nettoyabilité
Il s’agit de la facilité ou de la difficulté de nettoyabilité des surfaces de la CDP. Ces données sont
recueillies auprès d’un opérateur qualifié et ayant une expérience suffisante en matière de
nettoyage des surfaces de la CDP après pesée de chaque matière.
Tableau 04 Classification des PA selon la nettoyabilité
Nettoyabilité Coefficient attribué
Facile à nettoyer S=1
Moyennement facile à nettoyer S=2
Difficile à nettoyer S=3
1.2.5. Toxicité
La toxicité évalue le risque de contamination croisée sur la santé humaine, elle est chiffrée par la
dose létale 50 (DL50), c’est la dose d’une substance qui cause la mort de 50% d’une population
d’animal soumise à l’étude de toxicité aiguë par voie orale. Elle est exprimée en quantité de la
substance par unité de poids de l’animal (en Kg).

Tableau 05 Classification des PA selon la toxicité
Toxicité (T) DL 50 Coefficient attribué
Légèrement toxique 5 – 15 g / Kg T=1
Moyennement toxique 0,5 – 5 g / Kg T=2
Très toxique 50 – 500 mg / Kg T=3
Super toxique < 50 mg / Kg T=4
1.2.6. Volatilité et pulvérulence

Une matière première volatile peu se propager dans le box de pesée et se déposer sur des surfaces
difficilement accessibles au nettoyage (angles, joints…). Ces surfaces constituent une source de
contamination pour tout le box e y compris les matières à peser.
Tableau 06 Classification des PA selon la volatilité
Volatilité (V) Coefficient attribué
Non volatile V=1
Volatile V=2
1.2.7. Score de criticité
Le produit P des coefficients des critères de sélection le plus élevée correspond au PA pire
cas.
P = N x E x S x T x V x Ne
Au cas d’égalité des valeurs de P (plus élevée), la hiérarchie des critères est donnée comme
suit ;
Nature > Toxicité > Solubilité >Nettoyabilité> Volatilité > Etat physique
Matrice : critère de sélection / choix du pire cas

Tableau 07 Score final de criticité
Matière Nature Toxicité Solubilité Nettoyabilité Volatilité Etat Produit P

première physique
PA 01
PA 02
……….
PA n
1.3. Avantages et inconvénients de la méthode de groupage
Tableau 8 Avantages et inconvénients des différentes méthodes de groupage
Avantages Inconvénients
Réduit le nombre d’essais à réaliser lors des Risque de surnettoyage des produits non
validations worst case
Meilleure connaissance des procédés du site

(la méthodologie de groupage oblige à faire un
état des lieux précis des produits)
Diminution du nombre des recettes de Si introduction d’un nouveau produit« worst-

nettoyage case», nécessité de refaire l’ensemble du
travail de groupage (scoring, calcul du critère
d’acceptation)

Gain de temps si introduction d’un nouveau Groupage parfois difficile à effectuer

produit sans validation nécessaire si couvert
par le produit
« worst-case »
2. Sélection des critères d’acceptation
Le critère d'acceptation est défini comme étant la concentration du produit A se trouvant

éventuellement dans la masse opératoire du produit B fabriqué à la suite du produit A dans le
même équipement après nettoyage.
Il existe quatre méthodes pour calculer les limites d’acceptation admis :
 Dose thérapeutique
 Présence de traces
 Critère organoleptique
 Données de toxicité
2.1. Dose thérapeutique

La dose thérapeutique est utilisée quand le principe actif ou un autre composant de A (produit
antérieur) est considéré comme contaminant.
On part de la prémisse que la quantité du contaminant A présente dans la dose quotidienne du

produit B qui sera fabriqué ensuite dans l’équipement, doit être inférieure à une fraction
déterminée de la dose thérapeutique du contaminant (1/1000)
Cette valeur du 1/1000 a trois fractions de 10 obtenues par le raisonnement suivant; une fraction
parle du fait qu’il est considéré qu’une spécialité pharmaceutique ne présente pas d’effets nocifs
au 10% de sa dose thérapeutique, la deuxième est un facteur correcteur et la troisième est ajoutée
pour que le processus de validation soit considéré robuste.
Calcul de la dose thérapeutique : elle est calculée selon la formule de MACO

𝑆𝑓 × 𝐷𝑠 × 𝐵𝑠
𝑀𝐴𝐶𝑂 =
𝐷𝑙 × 𝑆

MACO est le seuil maximal de produit résiduel en mg/cm²
SFest le facteur de sécurité, dont la valeur est fonction de la forme galénique du produit :
 Pour les formes topiques : SF = 0,01

 Pour les formes destinées à la voie orale : SF = 0,001
 Pour les formes destinées à la voie injectable: SF =0,0001
DSest la plus petite dose thérapeutique du produit recherché (mg/jour)
BSest la plus petite taille de lot de tous les produits étudiés (mg)
DLest la plus grande dose journalière de produit passant par ce matériel (mg/jour)
S est la surface totale de l’équipement.
2.2. Présence de traces (approche des 10 ppm)

Le contaminant doit être présent dans les quantités normalement appelées «traces».
Dans l’actualité, beaucoup de méthodes analytiques permettant la détection de quantités très

petites, sont disponibles.
En général, une limite de 1 -10 ppm (non plus de 1-10 ppm de contaminant A présent dans le
produit ultérieur B) est acceptée.
Formule de calcul :
T
Qd= 10 ppm
S
Qd: Quantité de contaminant admise dans le produit (mg/cm2ou ml)
T: Taille du lot de produit B
S: Aire de l’équipement (lorsque réalisé par de l’eau de divisée rinçage, elle est par le volume de
l’équipement)
2.3. Critères organoleptiques

Le contaminant provenant de la production antérieure A, ne doit pas être détecté dans un examen
organoleptique réalisé avant la production du produit ultérieur B.
Les quantités pouvant être détectées par l’observation visuelle des surfaces intérieures de
l’équipement sont de l’ordre de 1-20 µg/cm2
À l’aide d’une illumination visible ou UV à 340-380 nm, la sensibilité est multipliée par 3 à 4
fois.
2.4. Données de toxicité
Elle est utilisée lorsque le détergent utilisé dans le nettoyage ou les désinfectants, les dissolvants
ou bien les produits de dégradation sont considérés comme contaminants.
Elle peut aussi être utilisée avec des produits nouveaux, pour lesquels la valeur de la dose
thérapeutique n’a encore été établie (produits en phase de développement).
Cette méthode est souvent assez incorrecte et requiert un effort de recherche dans des sources
d’information telles que:
 Données des fournisseurs sur la sécurité (agents de nettoyage, désinfectants, dissolvants,

etc…)
 Limites établies par les organismes officiels (EPA, OSHA, etc.)
La dose toxique ou la dose provoquant quelque effet nocif est, en général, une fraction de la DL
50 par voie orale en rats ou de DL50 par voie cutanée en lapins.
Elle calculé par les formules suivantes:
ADI = NOEL ´ AAW ´SF

NOEL =LD50 / Facteur empirique
AAW : average adult weight (70kg) le poids moyen d’un être humain
ADI : acceptable daily intake soit le niveau acceptable administré par jour (eng/kg de poids
corporel/ jour)
LD50 : dose létale 50

NOEL : no observed effect level, soit le niveau où aucun effet n’est observé (eng/kg de poids
corporel/jour)
SF : a safety factor estimé comme précédemment
2000 : facteur empirique
On peut ensuite calculer MACO :
𝐴𝐷𝐼×𝐵𝑆 𝐿𝐷50×𝐴𝐴𝑊×𝑆𝐹×𝐵𝑆
MACO= =
𝐿𝐷𝐷 𝐿𝐷𝐷×2000
LDD : largest daily dose of any product made in the same equipment soit la dose journalière
maximale de produit fabriqué dans le même équipement.
En général, on réalise le calcul pour ces trois et puis on choisit le plus défavorable.
3. Sélection et validation des méthodes de prélèvement
La méthode de prélèvement est choisie en fonction de contaminant recherché de l’équipement ou

de la surface générale considérée, de sa facilité de mise en œuvre et de rendement de prélèvement
[15].
La validation de la méthode de prélèvement doit être effectuée en parallèle à la

validation analytique de la méthode sélectionnée. Les résultats de ces validations doivent être
exploités conjointement et non séquentiellement afin d’adapter au mieux les conditions de
prélèvement et d’analyse.
3.1. Sélections des points de prélèvement

La stratégie de groupage des produits doit rester simple à réaliser. Il faut bien s’assurer que le
groupage des produits est possible, il faut définir un produit worst-case pour chaque méthode de
nettoyage existante.
En toute rigueur, l'ensemble des surfaces liées à la totalité du procédé de fabrication doit être
pris en compte. La validation du nettoyage pour l'élément d'un groupe entraîne celle de
l'ensemble des éléments de ce groupe (CEFIRA)
 Pour chaque procédure de nettoyage, identifier et lister tous les équipements nettoyés
selon cette procédure.
 Déterminer la facilité de nettoyage selon le design, l’accessibilité, le fonctionnement, les
matériaux de l’équipement, déterminer la probabilité d’accumulation de produit dans
chaque équipement.
3.2. Nombre de points à prélever
Le nombre de points de prélèvement et leurs localisations doivent suivre les règles suivantes :
- Plus de prélèvement sur les points en contact directe avec le produit.

- Les prélèvements doivent couvrir géographiquement l’ensemble de l’équipement sans laisser
de zones d’ombre
- Les points de prélèvements doivent être effectués sur différents matériaux (Verre, inox,
joints…).
NB : Les prélèvements devront être effectués au niveau des surfaces les plus critiques.
3.3. Différents types de prélèvements
3.3.1. Prélèvements « directs »
Le prélèvement direct est possible uniquement sur une unité de surface bien définie (nature et
taille) soit par contact, essuyage ou swab, écouvillonnage. Ces 3 techniques peuvent être menées
à sec ou en imprégnation avec un solvant ou en combinaison selon les cas.
Le prélèvement direct nécessite la définition et la justification des points de prélèvement avec

l’élaboration d’un plan d’échantillonnage [16].
3.3.2. Prélèvement « indirect »

La méthode indirecte de prélèvement se fait par les eaux de rinçage. On prélève à un certain point
de l’équipement un volume défini de la dernière eau de rinçage (le volume doit être déterminé par
avance en fonction de la méthode d’analyse qui sera utilisée par la suite). Cette méthode est
utilisée quand il n’est pas possible d’aller réaliser les prélèvements par méthodes directes dans
l’équipement ou que la surface de l’équipement est trop petite.
On distingue deux types de prélèvements par rinçage :
 Rinçage supplémentaire : est réalisé après un procédé complet de nettoyage. Il s’effectue par
aspiration trempage ou circulation avec ou sans agitation. Il est parfois réalisé à une température
différente du procédé de nettoyage pour ne pas favoriser le développement microbien.
 Rinçage final : correspond à un prélèvement dans le solvant de rinçage ou de trempage. Il est
utile pour la recherche des résidus de détergent. Ce mode de prélèvement est à prioriser par
rapport au rinçage supplémentaire.
Plus désirable est une combinaison des deux méthodes directe et indirecte.
3.3.3. Méthode par placebo
Cette méthode consiste à réaliser des prélèvements sur un placebo sans principe actif préparé
dans les mêmes conditions et les mêmes équipements nettoyé selon la méthode à valider.
Tableau 09 Avantages et inconvénients des différentes méthodes de prélèvement [17.18]

AVANTAGES INCONVENIENTS
Prélèvement direct
Conformité aux exigences de la FDA et aux.
recommandations des BPF Le plan d’échantillonnage doit être
Meilleure connaissance de la répartition de la représentatif
contamination dans l’équipement
Possibilité de modélisation au laboratoire du taux Difficulté de réalisation sur le terrain
de récupération (accessibilité, reproductibilité,…)
Concentration importante de l’échantillon Validation de la méthode analytique lourde
permettant une détection analytique plus facile
que dans le cas des eaux de rinçage
Possibilité de récupérer des résidus qui nécessitent Nécessité de valider les critères suivants :
une action physique et mécanique (résidus séchés ✍ Taux de recouvrement
sur les surfaces) ✍ Calculs des surfaces des équipements
Possibilité d’évaluer la contamination des endroits
✍ Rendement d’extraction des échantillons
difficiles à nettoyer
Adapté à de nombreux équipements
Prélèvement indirect
Permet l’échantillonnage de surfaces non La contamination résiduelle ne peut pas être
accessibles cartographiée
Calcul de la surface de chaque équipement non Non utilisable sur tous les équipements
nécessaire
Augmentation du taux de récupération possible Problèmes de sécurité et coût de mise en œuvre
par évaporation du solvant pour les autres solvants que l’eau
Contamination plus représentative de l’ensemble Connaître le volume total de fluide de rinçage
des surfaces à évaluer
Prélèvement par rinçage supplémentaire

Volume réduit permettant une grande sensibilité Un rinçage de plus peut être nécessaire en cas
de la méthode d’utilisation de solvant n’entrant pas dans le
procédé de production
Choix du solvant permettant une meilleure
solubilisation du traceur par rapport au rinçage
final
Prélèvement par rinçage final
Rinçage reproductible dans le cas des nettoyages Critère d’acceptation insuffisant : le dernier
automatisés rinçage donne le résultat de la contamination
éliminée et non de la contamination résiduelle
Dilution importante du contaminant
Insuffisant seul pour la FDA
Méthode placebo
Simulation des conditions réelles de fabrication Utilisable seulement lorsque la contamination
est récupérée de façon homogène dans le
placebo, donc non applicable pour les formes
solides, plutôt applicable pour les formes
liquides
Mise en œuvre facile Temps d’immobilisation des équipements et
donc cout élevé
Impossible d’effectuer une cartographie de la
Pas de développement de nouvelle méthode contamination résiduelle
analytique lorsque la sensibilité le permet Le risque de trop grande dilution peut poser des
problèmes de seuil de détection de la méthode
analytique
L’interférence des excipients diminue la
sensibilité de la méthode analytique
3.4. Validation de la méthode de prélèvement

La validation de la méthode de prélèvement est une étape obligatoire. Elle a pour but de s’assurer
que cette méthode de prélèvement permet de récupérer de façon adéquate le résidu contaminant
présent sur les surfaces. Ceci est démontré par une étude des taux derecouvrement.
Le taux de recouvrement est défini comme le rendement obtenu après contamination d’une
surface déterminée par une quantité connue de traceur.
Les études des taux de recouvrement consistent à déposer une quantité connue de traceur sur un
support de prélèvement. La surface est échantillonnée par la méthode que l’on cherche à valider
et l’échantillon est analysé par la méthode analytique validée.
𝐪𝐮𝐚𝐧𝐭𝐢𝐭é𝐝𝐞𝐫𝐞𝐬𝐢𝐝𝐮𝐫𝐞𝐭𝐫𝐨𝐮𝐯é𝐞 𝐚𝐩𝐫𝐞𝐬𝐞𝐜𝐡𝐚𝐧𝐭𝐢𝐥𝐥𝐨𝐧𝐧𝐚𝐠𝐞
R (%) = ×100
𝐪𝐮𝐚𝐧𝐭𝐢𝐭é𝐝𝐞𝐫𝐞𝐬𝐢𝐝𝐮𝐝𝐞𝐩𝐨𝐬é
Il doit être utilisé pour ajuster les résultats analytiques obtenus afin de compenser le recueil
incomplet des résidus et refléter ainsi la contamination potentielle.
Les études de taux de recouvrement sont réalisées dans des conditions identiques ou aussi
proches que possible des conditions normales de prélèvement définis lors de la mise au point. Il
est aussi réalisé sur au moins 3 concentrations.
Des taux de récupération acceptables doivent être supérieurs à 70%.
Le coefficient de variation: il peut être calculé globalement ou pour chaque concentration
 Si le CV > 10% : le taux de récupération le plus faible est retenu et confirmé par des essais
complémentaires si nécessaire
 Si CV <10% : le taux de récupération est choisi entre la moyenne et le pire des cas [19].
4. Sélection et validation des méthodes d’analyse
La méthode d’analyse doit être validée et suffisamment sensible. Le choix sera fait entre des
méthodes qualitatives et des méthodes quantitatives, ces dernières seront privilégiées dans tous
les cas où cela sera possible.

Le choix de la méthode analytique peut se porter soit sur des techniques spécifiques présentant
la particularité de ne rechercher que le seul traceur, ou des techniques globales rendant compte
de la contamination totale.
4.1. Méthodes utilisées
4.1.1. Analyse physico-chimique
Le tableau suivant décrit les caractéristiques et les applications des principales méthodes
analytiques utilisées pour le dosage des traces de contaminant [2].
Tableau 10 Caractéristiques des différentes méthodes analytiques [2]

Méthodes Caractéristiques Application
d’analyse Sensibilité Spécificité Simplicité Coût Résidus Agent de
chimiques nettoyage
Résistivité / ++ + +++ ++ Non Oui
Conductivité
Perte a la ++ + +++ ++ Oui Oui
dessiccation
Dosage acide ++ + +++ ++ Non Oui
base
Spectrophotomét +++ ++ +++ ++ Oui Non
rie UV-visible
CCM ++ +++ ++ ++ Oui Non
CLHP +++ +++ + +++ Oui Non
CPG +++ +++ + +++ Oui Oui
COT +++ _ ++ +++ Oui Oui
+ :faible, ++ : moyen, +++ : élevé.

4.1.2. Analyse microbiologique :
Tableau 11 : Caractéristiques des différentes méthodes de prélèvement [9]

Méthode Caractéristiques
d’analyse Méthodes de prélèvement Fiabilité Identification Rapidité Simplicité Cout
Contact Ecouvillonnage Rinçage
Incubation d’une
gélose
Boite de contact x +++ Oui 2-5 j +++ +
Film à réhydrater x X ++ Oui ++
Ensemencem
ent direct X x +++ Oui 14 j +++ +
Filtration sur X +++ Oui 7j +++ +
membrane
Atp_métrie x X + Non 3-5 h +++ ++
EPI x X ++ Oui* 1-2 j ++ +++
Fluorescence
Test LAL X +++ Non Qlqs h ++ ++
+ Faible ++ moyen +++ élevé * pour quelques germes
Test LAL = lysat d’amoebocytes de limule, permet la détection des endotoxines bactériennes
4.2. Choix de la méthode
Un grand nombre de méthodes analytiques sont utilisées pour analyser les échantillons prélevés
sur un équipement. Le choix d’une technique est souvent un compromis entre le coût de
l’appareil et de fonctionnement, le temps d’analyse, des paramètres tels que la résolution, la
sensibilité la spécificité et la limite de détection.

Certains industriels pensent qu’une méthode non spécifique ne peut pas être acceptable, et que
lors de l’utilisation de la mesure du COT, les résultats doivent être corrélés à ceux obtenus avec
une analyse par CLHP. Ces affirmations méritent d’être discutées :
Les méthodes non spécifiques sont souvent considérées comme moins fiables que les méthodes
spécifiques. En réalité, en raison de Cette non spécificité, les seuils d’acceptation sont bien
définis, le fait d’utiliser une méthode comme la mesure du COT rend encore plus difficile pour
l’industriel d’atteindre ses objectifs.
Les seules exigences de la FDA concernant l’utilisation de telles méthodes sont que l’oxydation
de l’échantillon et la mesure du CO2 soient appropriées. Il suffit donc de démontrer
l’applicabilité de la méthode au cas étudié. D’autre part, tout le carbone mesuré devra être
considéré comme provenant du traceur recherché, et le carbone présent au départ de l’analyse
devra être minimisé.
De plus, le fait de devoir relier les résultats de cette méthode à une méthode spécifique comme la
CLHP n’est en aucun cas une obligation.
En effet, si cela implique que les deux méthodes soient validées, compte tenu de la lourdeur de la
démarche, on peut se demander dans quelle mesure cela présente un intérêt. Si l’on dispose
d’une méthode de CLHP validée, il paraît inutile de développer une autre méthode. Ajoutons
qu’en utilisant une méthode spécifique, la probabilité d’atteindre les critères d’acceptation est
plus importante (elle présente moins d’interférence qu’une méthode non spécifique).
En conclusion, les deux types de méthodes peuvent être utilisés, à condition d’être utilisées
correctement [6].
4.3. Validation analytique
La validation d’une méthode analytique se fait selon des critères qui sont :
- La spécificité
- La linéarité
- L’exactitude
- La fidélité
- La robustesse

- La limite de détection
- La limite de quantification
4.3.1. Spécificité
La spécificité de la méthode analytique vis-à-vis du traceur doit être validée en prenant en

compte :
 Les autres produits entrant dans la composition du produit fini,

 Les autres produits passant sur le même équipement,
 Les produits de dégradation,
 Le ou les solvants utilisés,
 Le détergent,
 Le support d’essuyage (SWAB, ect),
 Le support à prélever.
4.3.2. Linéarité
La fourchette de linéarité à prendre en compte dépend du critère d’acceptation rapporté à la

méthode analytique.
Déférentesapprochessontpossibles :
- Si le critère est proche de la limite de quantification, linéarité autour de la LOQ.

- Si le critère est supérieur à la limite de quantification, la linéarité peut être réalisée entre 80 et
120 % du critère d’acceptation [16].
4.3.3. Exactitude
Elle exprime l’étroitesse de l’accord entre la valeur qui est acceptée soit comme une valeur
conventionnellement vraie, soit comme une valeur de référence acceptée, et la valeur trouvée
(valeur moyenne) obtenue en appliquant la procédure d’analyse un certain nombre de fois.
Dans le cadre de la validation de nettoyage, l’exactitude est assimilée à la mesure du taux de

recouvrement : elle mesure l’écart entre la valeur vraie, c’est-à-dire la quantité de traceur

effectivement déposée sur la surface, et la valeur trouvée, c’est-à-dire la quantité récupérée. On

tolèreuntaux de recouvrementsupérieur à 70 % [6].
4.3.4. Fidélité
La fidélité de la procédure représente la qualité de l’accord entre des mesures répétées effectuées
sur un même échantillon dans des conditions constantes et déterminées.
La fidélité rend compte de la variabilité des résultats effectués sur des produits identiques et dans
des conditions présumées identiques.
Cette variabilité peut provenir de différents facteurs :
 L’opérateur
 Matériel utilisé
 L’environnement (température, humidité …..)
 Réactifs utilisés (changement de lot………..)
La fidélité va varier entre deux valeurs extrêmes :
Une minimale ou répétabilité : un même operateur va refaire n fois la même détermination dans
des conditions de répétabilité : même matériel, même condition, même jour ….
L’autre maximale ou reproductibilité : (n) opérateurs refont la même détermination dans des
conditions de reproductibilité : opérateur diffèrent et/ou matériel différent et/ou jour d’analyse
différent… [20]
4.3.5. Sensibilité
Il s’agit de la capacité d’une méthode à enregistrer de faibles variations de la concentration. Elle

constitue en somme la variation minimale qu’il faut imposer à la grandeur X à déterminer pour
obtenir une variation significative du signal mesuré y.
4.3.6. Seuil de détection et de quantification

Le seuil de détection est la plus petite quantité d’une substance que l’on peut détecter sans
pouvoir la quantifier. De même, le seuil de quantification est la plus petite quantité d’une
substance que l’on peut quantifier [6].
Leur détermination est faite selon le protocole suivant :
On effectue n mesures indépendantes sur des échantillons contenant l’ensemble des constituants.
L’amplitude maximale du bruit de fond, notée h, est mesurée sur un intervalle d’environ 20 fois
la largeur du pic principal à mi- hauteur. H représente la hauteur du pic. Le rapport signal/bruit
(S/B) est déterminé par la formule suivante :
S/B = 2 x h / H
En fonction du rapport S/B obtenu lors de la première analyse, des dilutions de l’échantillon
sont préparées et analysées jusqu’à obtenir des valeurs de :
S/B = 3, correspondant au seuil de détection
S/B = 10, correspondant au seuil de quantification
Dans le cadre de la validation de nettoyage, les limites de détection et de quantification doivent

être déterminées sur le traceur, le seuil de quantification devra être inférieur au critère
d’acceptation affecté du taux de recouvrement.
Si tel n’est pas le cas, la méthode analytique devra être optimisée.
4.3.7. Robustesse
L’étude de la robustesse permet de définir les variations admissibles de chacun des paramètres
opératoires qui sont susceptibles de modifier le résultat de l’analyse (ex PH, débit, conditions
d’extraction……)
On applique la procédure d’analyse en faisant varier les paramètres retenus, pour diminuer le
nombre d’essais à réaliser on utilise un plan d’expérience factoriel [20].
5. Reproductibilité du procédé de nettoyage :

La validation de nettoyage doit être démontré après nettoyage majeur de trois lots fabriqués
successivement, tous les résultats d’analyses (physicochimiques et microbiologiques doivent être
conformes aux spécifications pré-établies.
6. Durée de validité du nettoyage et revalidation
6.1. Temps de latence entre la fin de la production et le nettoyage
Cette durée est aussi appelée DEHT (Dirty Equipment Hold Time).elle doit être définie et validée
car elle peut influer sur l’efficacité du nettoyage.
En effet, plus le temps est long, et plus les salissures peuvent coller sur les surfaces ce qui rend
plus difficile leur désincrustage. De plus, ce temps d’attente peut favoriser la croissance
microbienne [5].
6.2. Temps de latence entre la fin du nettoyage et le début de la production
Il s’agit du CEHT ou Cleaned Equipment Hold Time, c’est-à-dire le temps entre le nettoyage et la
reprise de la production. Ce temps correspond au temps de stockage des équipements propres
avant leur utilisation en production. En fonction des conditions de stockage (température,
humidité) et de la façon de stocker les équipements (en sache ou à l’air libre), il y a des risques
pour que l’équipement ne soit plus dans le même état de propreté qu’à la fin du nettoyage [5].
6.3. Revalidation
La validation du nettoyage est renouvelée périodiquement selon une fréquence qui tient compte
des spécificités de l'activité ou ponctuellement, lors d'un changement d'équipement, de surface
générale, d'agent de nettoyage ou de procédure de nettoyage. Lorsqu’aucun changement n’est
effectué la revalidation périodique sera suffisante.
En outre, lors de la fabrication d’un nouveau produit, l’intérêt de revalider la méthode de

nettoyage devra être réétudié : si la méthode de nettoyage à appliquer après la fabrication de ce
produit reste la même, il conviendra d’évaluer si le nouveau produit est couvert par le « Pire des
cas » déterminé lors du choix du traceur, ou s’il est plus critique que le traceur étudié.
Il faudra donc étudier sur le nouveau produit tous les critères étudiés lors de la sélection du
traceur. La méthode de calcul des scores de criticité trouve ici tout son intérêt : il suffira de

calculer le score du nouveau produit pour détermine si celui-ci est plus critique que le traceur
étudié [6].
Certains critères comme la nettoyabilité ou la probabilité de dépôt sur les surfaces ne pourront
être déterminés qu’après la fabrication d’un certain nombre de lots. Le score calculé sera donc
provisoire, puis définitif lorsque le recul sera suffisant.
Si le nouveau produit s’avère plus critique que le « pire des cas », la validation de nettoyage, avec
tous les prérequis qu’elle implique, devra être reconduite en choisissant ce produit comme
traceur.
7. Documentation de la validation de nettoyage
7.1. La procédure de validation de nettoyage

Pour chaque validation de nettoyage, un protocole est rédigé et approuvé. Il contient :
 L’objectif de la validation du procédé,
 Les responsabilités pour effectuer et approuver les études de validation,
 Une description de l'équipement utilisé,
 L’intervalle entre la fin de la production et le début du nettoyage,
 Le nombre de lot du même produit, qui peut être manufacturé durant une campagne avant
un nettoyage complet,
 Les méthodes détaillées de nettoyage utilisées pour chaque produit, chaque procédé de
fabrication ou chaque pièce d'équipement,
 Le nombre de cycles de nettoyage à être exécutés de façon consécutive.
 Toute exigence de surveillance routinière [14].
 Les méthodes d'échantillonnage accompagnées d'une justification expliquant pourquoi

une méthode d'échantillonnage particulière a été utilisée,
 Les endroits d'échantillonnage sont clairement définis,
 Des données sur les études de récupération au besoin,

 Des méthodes d'analyse validées, incluant la limite de détection et la limite de

quantification;
 Les critères d'acceptation avec les justifications pour l'établissement de certaines limites,
 Autres produits, procédés et équipements pour lesquels la validation prévue est valide
selon un concept de la méthode des extrêmes,
 Un système de contrôle / revalidation
7.2. Les fiches de tests
Les fiches de tests font partie des annexes au protocole de validation de nettoyage. Elles sont
remplies lors de la réalisation des essais et permettent, conformément aux BPF, de regrouper les
résultats en temps réel de façon manuscrite, lisible et indélébile, et d’éviter les retranscriptions
pouvant être sources d’erreurs. Elles comportent la date de l’opération et le visa de l’opérateur.
Ces fiches de test doivent être les plus précises possible, indiquer le matériel utilisé, chaque dérive
observée par rapport au protocole et tous les résultats obtenus. Elles permettent ainsi d’alléger
considérablement la rédaction du rapport.[6]
7.3. Le rapport de validation

Ce document a pour fonction d'analyser les données brutes dans le but de prendre une décision ou
de traduire une tendance.
Il est rédigé en rappelant le principe de la validation, les critères d'acceptation et en tenant compte
des éventuelles déviations par rapport au protocole initial. [11]

PARTIE PRATIQUE
APPLICATION AU CAS D’UNE
CENTRALE DE PESEE
MATÉRIEL ET MÉTHODES
Cette application a été réalisée dans le cadre d’un mémoire de fin d’études, dans une entreprise
nationale de production pharmaceutique BIOPHARM Industrie, située dans la zone industrielle
Oued Smar - Alger.
Notre travail a pour objectif de proposer une stratégie globale de validation de nettoyage d’une
centrale de pesée.
La centrale de pesées est nettoyée par un personnel qualifié, selon une procédure qui détaille les
opérations de nettoyage, entre deux lots d’un même produit, entre deux lots des produits
différents, après un arrêt dépassant 72 h, en fin de journée, en fin de semaine et en fin de mois.
C’est cette procédure de nettoyage qui fera l’objet d’une validation.
La CDP de BIOPHARM industrie est organisée en plusieurs zones ;
 Le magasin : où se trouvent les matières premières à peser pour la fabrication d’un nombre
de lots précis pour une journée
 Les box de pesée : deux box identiques où sont pesées les matières premières sous un flux
d’air laminaire à 15 mm H2O (1,45.10-3atm)
Chaque box contient 3 balances :
 Balance 1 : capacité 300 Kg ± 3g

 Balance 2 : capacité 420g ±1mg
 Balance 3 : capacité 64 Kg
 La zone de stockage intermédiaire : où sont regroupées les matières pesées dans des sacs
alimentaires étiquetés.
PARTIE PRATIQUE APPLICATION AU CAS D’UNE CENTRALE DE PESÉE 45

Figure 05 Plan de la CDP
Protocole de validation de nettoyage : La validation de nettoyage de la centrale de pesée s’article

sur cinq (05) éléments ;
 Choix du traceur.
 Détermination des critères d’acceptation.
 Validation de la méthode analytique de dosage du traceur à l’état de traces.
 Validation de la méthode de prélèvement.
 Répétabilité du procédé de nettoyage.
1. Choix du traceur
1.1. Méthodes et Matériel
La procédure de nettoyage est validée pour le cas le plus défavorable en matière de risque de
contamination. Cette condition implique le choix d’un produit dit « pires cas » parmi la totalité
des produits pesés au niveau de la centrale de pesée. Une méthode de groupage des produits est
nécessaire quand un nombre important de produits est pesés.
Comme a été énoncé dans la partie théorique, le choix d’un produit « worst case » représentatif
de l’ensemble des produits a pour objectif de réduire le nombre d’essai à mettre en œuvre pour

valider la centrale de pesée après son nettoyage. On ne validera que le produit pire des cas, les
produits moins critiques sont alors validés.
Les caractéristiques de chaque produit sont cotées et un score global résultant du produit des
indices de chaque caractéristique est calculée. Ces caractéristiques sont : nature des principes
actifs et/ou excipients, Etat physique de la matière première, solubilité dans l’alcool,
nettoyabilité, toxicité et volatilité.
Le tableau 12, décrit les paramètres pour chaque produit étudié.
Tableau 12 Matrice pour le choix de « worst case »
Matière Nature Toxicité Solubilité Nettoyabilité Volatilité Etat Produit P

première physique
PA 01
PA 02
……….
PA n
2. Définition des critères et des limites d’acceptation

Méthode
Les limites d’acceptation ne peuvent être reposées sur des données pharmacologiques (doses
thérapeutiques) mais plutôt sur des données toxicologiques. La limite choisie est le MACO
(Maximum AllowableCarryover) calculée à partir de la NOEL de la substance, s’agissant de
matière première et non pas de produit finis.
𝑨𝑫𝑰 × 𝑳𝑩 × 𝟕𝟎
𝑴𝑨𝑪𝑶 = 𝐞𝐧𝐦𝐠 /𝐜𝐦²
𝑻𝑩 × 𝑺
Avec
ADI=NOEL x Fs
NOEL : No Observed Effet Level (NOEL = DL50 x 0,0005) et DL50 en mg/Kg

Fs : Facteur de sécurité (0,01 pour les formes topiques, 0,001 pour les formes parentérales et
0,0001 pour les collyres et les formes injectables.
TB : Dose thérapeutique (g/jour) la plus élevée des produits fabriqués dans l’entreprise.
LB: Plus petite taille du lot fabriqué dans l’entreprise (exprimée en g)
S : Surface totale des surfaces de contamination dans la centrale de pesée)
70 : Poids corporel d’un individu moyen.
3. Validation des méthodes analytiques
La validation de la méthode de dosage de Kétoprofène à l’état de traces est réalisée par

chromatographie Liquide à Haute Performance HPLC au niveau de laboratoire de chimie
analytique de la faculté de médecine Tizi Ouzou, les paramètres suivants sont étudiés :
 Spécificité
 Linéarité
 Fidélité
 Limite de détection. LOD
 Limite de quantification LOQ.
3.1. Protocole analytique

3.1.1. Préparation des solutions
Phase mobile : la phase mobile est préparée selon une procédure interne du laboratoire de
contrôle qualité de Biopharm industrie.
Diluant : Mélange Eau/Acétonitrile
Solution standard 100% : (concentration de Ketoprofèneà 3.88μg/ml) correspondant au

MACO exprimé en µg/ml)
Dans une fiole de 50 ml peser 19,4 mg de ketoprofene standard. Dissoudre dans un volume
suffisant de l’éthanol et compléter au trait de jauge avec le même solvant.
Diluer cette solution au 1/200eme dans le diluant

Conditions chromatographiques :
- Colonne : Discovery C18 : L=150mm, Ø=4.6mm, taille des particules=5µm.

- Débit : 1.5 ml/min.
- Longueur d’onde : 256 nm
- Volume d’injection : 50 µl
- Durée de l’analyse : 08 min
- Four (éventuellement) : 30°C
Matériels
Tableau 13 Equipements utilisés

N° Equipement Utilisation Paramètres
Balance Pesée Portée : 210 g

1
Précision : 0,01 mg
HPLC (Shimadzu) Identification, séparation Aire de pic

2
et dosage chromatographique
Figure 06 HPLC

3.2. Spécificité
Méthodes et matériels
La spécificité de la méthode analytique vis-à-vis de Kétoprofène doit être démontrée en étudiant

l’interférence des éléments ci-après :
- Solvant de dilution : Mélange Eau : Acétonitrile
Figure 07 Ecouvillon
- Le support d’essuyage : écouvillons de marque clin tip en polypropylène.

- Le support à prélever : plaque en inox de même qualité pharmaceutique.
- La comparaison est faite par rapport à une solution standard de Kétoprofène à 100% de la
limite d’acceptation.
L’interférence est réalisée en préparant et analysant les solutions suivantes ;
Blanc solvant : correspondant au diluant.
Blanc écouvillon : dans un tube à vis, mettre 10 ml de diluant. Plonger 3 écouvillons (deux
humectés avec le solvant de récupération éthanol et le troisième est sec). Agiter au vortex
pendant une minute, mettre aux ultrasons pendant 5 minutes, laisser pendant 1 heure à l’abri de la
lumière.
Blanc plaque : Sur une plaque en inox de 10 cm x 10 cm. Déposer 1 ml du diluant. Sécher à
l’aide d’un séchoir.

Figure 08 Plaque d’aluminium
Prélever la surface de la plaque à l’aide de deux écouvillons mouillés avec le solvant

récupération éthanol suivi d’un écouvillon sec. Récupérer les 03 écouvillons dans le même tube à
vis rempli de 10 ml de diluant. Agiter au vortex pendant une minute, mettre aux ultrasons
pendant 5 minutes et pendant 1 heure à l’abri de la lumière.
Solution standard à 100% de la limite d’acceptation : Dans une fiole de 50 ml peser 19.4 mg
de Kétoprofène. Dissoudre dans un volume suffisant de l’éthanol et compléter au trait de jauge
avec le même solvant. Diluer cette solution au 1/100eme dans le diluant.
Ces échantillons sont analysés et observés pour la présence d’interférence au même temps de
rétention du que celui de kétoprofène obtenue avec la solution standard 100%.
3.3. Linéarité
Matériels et méthodes
La linéarité de la réponse de Kétoprofèneest démontrée en préparant de 5 solutions standards de
Kétoprofène sur un intervalle de 60,0 % à 140,0 % de la limite d’acceptation avec un pas de
20%. Ces solutions sont injectées 5 fois chacune et les surfaces des pics de Kétoprofène sont
enregistrées.
La droite de régression : Aire du pic en fonction de la concentration (ou en %) de Kétoprofène est

tracée. La pente a, l’ordonnée à l’origine b de la droite ainsi que le coefficient de corrélation sont
calculés et l’équation de la droite de régression est établie.
Equation de la droite de régression : Y = a X + b avec :
Y : aire du pic de Kétoprofène .
X : concentration de Kétoprofène en µg/ml (ou en % en tenant 100% = 3,88 µg/ml)

R : Coefficient de corrélation (Aires ; Concentrations)

3.4. Fidélité
L’étude de fidélité est réalisée au même temps que la validation de la méthode de recouvrement.
Méthodes et Matériels
La contamination des plaques en inox par des quantités connues de kétoprofène est suivie d’un
prélèvement à l’aide d’écouvillons.
La détermination de la quantité de kétoprofène récupérée en analysant les prélèvements permettra

de déterminer le taux de recouvrement.
 Gamme des solutions standards :
Solution mère : dans une fiole de 50 ml, peser 19.4 mg de Kétoprofène, dissoudre et compléter
au trait de jauge avec l’éthanol.
Solution standard 50% du MACO : Correspond à une dilution 1/200ème de la solution mère
dans le solvant de dilution.
Figure 09 Gamme des solutions standards

 Gamme solutions écouvillons :
Blanc écouvillon : dans un tube à vis, mettre 10 ml de diluant. Plonger 3 écouvillons (deux
humectés avec le solvant de récupération et le troisième est sec). Agiter au vortex pendant une
minute, mettre aux ultrasons pendant 5 minutes, laisser pendant 1 heure à l’abri de la lumière.
Figure 10 Gamme des solutions écouvillons
Solution écouvillon à 50% du MACO : dans un tube à vis, mettre 10 ml de la solution standard
50%, plonger les têtes de 3 écouvillons (deux humectés avec le solvant de récupération et le
troisième est sec). Agiter au vortex pendant une minute, mettre aux ultrasons pendant 5 minutes,
laisser pendant 1 heure à l’abri de la lumière.
Solution écouvillon à 100% du MACO : dans un tube à vis, mettre 10 ml de la solution

standard 100%, plonger les têtes de 3 écouvillons (deux humectés avec le solvant de récupération
et le troisième est sec). Agiter au vortex pendant une minute, mettre aux ultrasons pendant 5
minutes, laisser pendant 1 heure à l’abri de la lumière.
Solution écouvillon à 200% du MACO : dans un tube à vis, mettre 10 ml de la solution

standard 200%, plonger les têtes des 3 écouvillons (deux humectés avec le solvant de
récupération et le troisième est sec). Agiter au vortex pendant une minute, mettre aux ultrasons
pendant 5 minutes, laisser pendant 1 heure à l’abri de la lumière.

 Gamme des solutions plaques
Blanc plaque :
Sur une plaque en inox de 10 cm x 10 cm. Déposer 1 ml du diluant. Sécher à l’aide d’un séchoir.

récupération suivi d’un écouvillon sec. Récupérer les 03 écouvillons dans le même tube à vis
rempli de 10 ml de diluant. Agiter au vortex pendant une minute, mettre aux ultrasons pendant 5
minutes et laisser pendant 1 heure à l’abri de la lumière.
Figure 11 Agitation au vortex
Solution Plaque 50% :
Sur une plaque en inox de 10 cm x 10 cm. Déposer 1 ml de la solution mère diluée au 1/20 dans
l’éthanol. Sécher à l’aide d’un séchoir.

Solution plaque 100% :


Solution plaque 200% :

 Rendement d’extraction : Correspond à la quantité de Kétoprofènerelarguée par

l’écouvillon dans le diluant. il est calculé pour chaque niveau de concentration à partir des
aires de pic de Kétoprofène obtenues à partir les chromatogrammes des solutions standards et
solutions écouvillons :
Aire solutionecouvillon
Rendememen t d' extraction  100
Aire solution standard
 Rendement de recouvrement : Correspond à la quantité de Kétoprofène récupéréepar les
trois écouvillons. Il est calculé pour chaque niveau de concentration à partir des aires de pic
de Kétoprofène obtenuesà partir les chromatogrammes des solutions standards et solutions
plaques :
Aire solution plaque
Rendememen t de recouvreme nt  100
Aire solutionstandard
3.5. Limite de détection et de quantification
La limite de détection (Limit Of Detection LOD) est la plus petite quantité ou concentration de
substance à doser pouvant être détectée mais non quantifiée comme valeur exacte.
La limite de quantification (Limit Of Quantification LOQ) est la plus petite quantité ou

concentration de substance à analyser pouvant être dosée dans les conditions expérimentales
décrites avec une fidélité et une exactitude définies

Méthode
A partir de la gamme d’étalonnage du paramètre linéarité, tracer la droite de régression Hauteur

du pic de Kétoprofène en fonction de la concentration (exprimée en µg/ml)
Figure 12 Droite de régression : Hauteur = fonction de concentration
Sur Excel ou un logiciel statistique adéquat (origin 6.0) ;
Déterminer la droite de régression : Hauteur = Fonction de concentration : H = B x + A
Calculer la pente B, l’ordonnée à l’origine A et l’erreur 𝜎A.
Calculer la limite de détection LOD
Calculer la limite de quantification LOQ.
3.3 A 10 A
LOD  . LOQ 
B B
Si les critères d’acceptation sont satisfaits pour tous les paramètres étudiés, la méthode sera dite
valide pour le dosage de Kétoprofèneà l’état de traces.

4. Validation des méthodes de prélèvement

4.1. Méthode de prélèvement
Le prélèvement à l’intérieur de la CDP concerne des surfaces bien déterminées donc la meilleure
méthode de prélèvement est le prélèvement direct.
4.2. L’outil de prélèvement

L’écouvillon permet d’accéder la totalité de la surface à prélevé son taux de récupération est
important.
Figure 13 Outil de prélèvement
4.3. Technique de prélèvement
A B C
Le prélèvement est réalisé en appliquant des écouvillons, déjà imbibés dans le solvant de
récupération, sur la surface de prélèvement au niveau de l’angle supérieur gauche et en allant
vers la droite, puis de la même façon en descendant vers le bas de la plaque de manière à ne pas
laisser d’espace non écouvillonné. Les écouvillons sont ensuite mis dans des tubes à vis remplis

du solvant d’extraction pendant le temps nécessaire pour l’extraction, les solutions obtenues sont
analysées pour déterminer la quantité résiduelle.
Blanc plaque
Réaliser un blanc en imbibant de solvant de récupération un écouvillon identique à celui utilisé

pour le prélèvement. Couper les têtes d’écouvillons et les récupérer dans tube à essais.
4.4. Principe de validation de la méthode de prélèvement par écouvillonnage

Consiste à la détermination du taux de recouvrement et sa reproductibilité à 3 niveau de
concentration et à sur 3 séries indépendante.
Les taux de recouvrement sont déterminés au laboratoire sur des plaques du même matériau que
celui du matériel d’une surface à nettoyer.
Figure 14 Plaque en aluminium
La détermination du taux de recouvrement est réalisée sur au moins 3 concentrations : la limite

d’acceptation et deux autres supérieur et inférieur à cette limite (ex : 50% et 200 % du Limite
d’acceptation)
Le taux de recouvrement moyen doit être > 70% (exigence SFSTP) ou > 50% (exigence
FDA)
Parallèlement à la détermination du rendement de récupération, un rendement dit d’extraction

doit être déterminé à fin de quantifier la fraction de la substance prélevée mais non libérée par
l’écouvillon dans le milieu d’extraction

5. Validation de la reproductibilité du procédé de nettoyage
Afin de valider l’efficacité et la reproductibilité de la méthode de nettoyage de la centrale de

pesée. L’étude de validation doit être démontrée à 3 reprises consécutives en donnant à chaque
reprise des résultats satisfaisant.
L’étude consiste à :
 Programmer par les services de planifications 03 lots successifs de kétoprofène

suppositoire ou gel.
 Peser la quantité de la matière première « pire cas » pour son usage habituel pour chaque
lot.
 Nettoyer la surface à prélever selon la méthode de nettoyage à valider.
 Rechercher les traces de la substance pire cas dans les échantillons de prélèvement
(écouvillonnages) selon la méthode d’analyse validée.

RÉSULTATS ET DISCUSSIONS
1. Choix du traceur
Le traceur choisi est le kétoprofène utilisé pour la formulation de profénid suppoitoire ou

profénid gel.il possède le score le plus élevé.
Le tableau ci-dessous résume les caractéristiques des produits pesés avec calcul des scores.
Tableau 14 Scores et caractéristiques des produits pesés
Toxicité
Solubilité
Le PA Forme Nature volatilité Nettoyabilité DL50 chez Score
mg/mL
les souris
Diclofenac sodium 3 4 2 1 1 3 (95 mg/kg) 72
Trimebutine 3 4 2 1 1 1(>5000 24
mg/kg)
Ruscogenines 1 4 1 1 1 2(3000 8
mg/kg)
Métoclopramide 3 4 3 1 1 3(280 mg/kg) 108
Piroxicam 3 4 2 2 2 3(317 mg/kg) 288
Paracetamolpulvérisé fin 3 4 1 2 1 2(2400 48
mg/kg)
Lévomenthol 3 4 1 1 1 2(3400 24
mg/kg)
Hydrochlorothiazide 3 4 2 1 3 2(1175 144
mg/kg)
Phenobarbital 3 4 1 1 1 3(137 mg/kg) 36
Pseudoephedrine 3 4 1 1 3(371 mg/kg) 36
chlorhydrate
Acétyl salicylate de DL 3 4 1 2 1 2(3270mg/kg) 48
lysine avec glycine
Métronidazole benzoate 3 4 2 1 1 2(3000mg/K) 48
Rat
Alginate de sodium 3 4 3 2 1 1(>5000 72
mg/kg)
Rat
Bicarbonate de sodium 3 4 3 2 1 2(3360mg/kg) 144
Metronidazole 3 4 2 1 3 2(3800 144
Micronisé mg/kg)
Acebutolol 3 4 1 1 1 2(4050 24
hydrochloride mg/kg)
Benzoate de 3 4 1 1 1 1 12
Meglumine
Polysorbate 20 1 4 1 1 1(33000 4
mg/kg)

Toxicité
Solubilité
mg/mL
les souris
Osmoderm 3 4 1 1 1 1 12
Chlorhydrate de 3 4 1 1 1 3(380 36
lévomépromazine mg/kg)
Mésilate de 3 4 1 1 1 3 36
trimipramine (465mg/kg)
Chlorhydrate de 3 4 1 2 3 3(135 216
chlorpromazine mg/kg)
Paracétamol 3 4 1 2 1 2(2400 48
mg/kg)
Paracétamolmicronisé 3 4 1 1 1 2(2400 24
mg/kg)
Trimipraminemaléate 3 4 1 2 1 3(425mg/kg 72
)
Métronidazole(EP) 3 4 2 1 3 2(3800 144
mg/kg)
Maléate de 3 4 1 2 1 3(300 72
lévomépromazine mg/kg)
Diclofenac de sodium 3 4 2 2 1 3(95mg/kg) 144
Betaméthasone base 3 4 1 2 1 2(1607mg/K 48
g)
Irbesartan 3 4 2 2 3 2(>2000 288
mg/kg)
Citrate de 3 4 2 1 1 3(230 72
pentoxyverine mg/kg)
Clobétasol propionate 3 4 2 1 2 2(>3000 96
mg/kg)
Diclofenacdiéthylamine 3 4 1 1 1 3(300 36
mg/kg)
Terbinafine 3 4 1 2 2 2(>4000 96
chlorhydrate mg/kg)
Micronisé
Desonidemicronisé 3 4 1 1 1 2(3710 24
mg/kg)
Alendronate de sodium 3 4 2 1 1 2(966 48
mg/kg)
Carbonate de calcium 3 4 3 1 1 1(6450 36
mg/kg)
Acide acetyl salicylique 3 4 1 2 1 2(1100 48
mg/kg)
Acide salicylate de DL 3 4 1 1 1 2(3270mg/k 24
lysine g)
Spiramycine 3 4 1 2 3 2(2900 144
mg/kg)

Toxicité
Solubilité
mg/mL
les souris
Rispéridone 3 4 1 2 1 3(63.1 72
mg/kg)
Paracétamolpulverisé 3 4 1 2 1 2(2400 48
dense mg/kg)
Kétoprofene 3 4 2 2 3 3 (62,4 432
mg/kg) rat
Omeprazole 3 4 1 1 1 2(>4000 24
mg/kg)
Carbamazépine 3 4 1 1 1 2(1957 24
mg/kg)
Nitrate de sertaconazole 3 4 2 2 1 1(>8000mg/ 48
Kg)
Rat
Acidefusidique 3 4 1 2 1 2(840.5 48
mg/kg)
Fusidate de sodium 3 4 1 2 1 2(975mg/kg 48
)
Repaglinide 3 4 1 2 1 3(>1000 72
mg/kg)
Rat
Tramadolhydrochloride 3 4 1 1 1 2(350 24
mg/kg)
Dompéridone 3 4 2 1 1 1(8000 24
mg/kg)
Dihydroergotaminemesil 3 4 1 2 1 2(2000 48
atemethanesulfanate mg/kg)
Diclofenac de 3 4 1 1 1 3(390 36
Potassium mg/kg)
Olanzapine micronisé 3 4 1 1 1 3(210mg/kg 36
)
Citicolineselsodique 3 4 1 1 1 3(300 36
mg/kg)
Spiramycine 3 4 1 2 3 2(2900 144
mg/kg)
Vératrole 3 4 1 1 1 2(890 24
mg/kg)
Resorcinol 1 4 1 1 1 3(200 12
mg/kg)
Acidesalicylique 3 4 1 2 1 3(480 76
mg/kg)
Haloperidol 3 4 2 2 1 3(71 mg/kg) 144
Bisoprolol 3 4 1 1 1 2(678 24
Fumarate mg/kg)
Terbinafine 3 4 1 1 1 2(>4000 24
chlorhydrate mg/kg)

Toxicité
Solubilité
mg/mL
les souris
Donepezil 3 4 2 1 1 4(45.2 96
hydrochlorique mg/kg)
Rivastigminehydrogen 3 4 1 1 1 4(2 mg/kg) 48
tartrate
Mg carbonate ;heavy 3 4 3 1 1 1(7000 36
mg/kg)
Hydrochlorothiazide 3 4 2 2 3 2(1175 288
(polpharma) mg/kg)
Amphotéricine B 3 4 3 1 1 3(280 108
mg/kg)
Paracetamolpoudre fine 3 4 1 2 1 2(2400 48
mg/kg)
mg/Kg)
Pregabalin 3 4 2 2 2 1 96
(5050mg /kg
)
Sildenafil citrate 3 4 1 2 1 4(5mg /kg) 96
Ezetimibe 3 4 1 1 1 1(>5000 12
mg/kg)
Rececadotril 3 4 1 1 1 3(300mg/Kg 36
)
Calcium carbonate 3 4 3 1 1 1(6450 36
(grinded) powder mg/kg)
Gliclazide 3 4 2 1 1 2 (3000 48
mg/kg)
mg/Kg)
Montelukast sodium 3 4 1 1 1 3 (300 36
mg/Kg)
Dexpanthénol 1 4 1 1 1 1 4
(15000mg/K
g)
Metformine 3 4 2 1 1 4 96
hydrochloride (1,450mg/K
g)
Lidocaine base 3 4 1 1 1 3(220 36
mg/Kg)
Prilocaine base 3 4 1 1 1 1 12
Lévomenthol 3 4 1 1 1 2(3400 24
mg/Kg)
Azélastine 3 4 3 1 1 3(143mg/kg 108
hydrochloride )
Rasa gilinemesylate 3 4 1 1 1 3 36
(300mg/kg)

2. Détermination de la limite d’acceptation :

Calcul du MACO
𝑨𝑫𝑰 × 𝑳𝑩 × 𝟕𝟎
𝑴𝑨𝑪𝑶 = 𝐞𝐧 𝐦𝐠 /𝐜𝐦²
𝑻𝑩 × 𝑺
DL 50=62.4mg/kg
FS=10-3
ADI=NOEL x Fs= DL50×0,0005×10-3
LB=80 kg
TB=3000 mg
S=15 m2
𝑨𝑫𝑰×𝑳𝑩 ×𝟕𝟎
𝑴𝑨𝑪𝑶 = =38.8.10-5 mg/cm2
𝑻𝑩 ×𝑺
MACO =38,8.10-5 mg/cm2 = 38,8 µg/100 cm2

Ou 3,88µg/ml
 Discussion :
La limite d’acceptation de notre méthode égale à 3,88µg/ml donc une contamination

est de 38,8µg par 2100 cm² de la surface prélevée.
mgmgmmmg/cm
maximale acceptée
3. Résultat de la validation de la méthode de dosage du kétoprofene par

HPLC
3.1. Spécificité
Les chromatogrammes obtenus à partir des solutions, blanc solvant, blanc écouvillon, blanc
plaque et standard 100% sont présentés dans les figures ci-dessous ;

Discussion : l’étude a montré l’absence d’un pic chromatographique au même temps de

rétention que celui de kétoprofène dans les solution préparées à partir du blanc solvant, blanc
écouvillon et blanc plaque. La méthode est donc jugée spécifique.
3.2. Linéarité

Tableau 15 Données brutes pour l’étude de la linéarité sur les solutions standards
Concentration en µg/ml Aire du pic Hauteur du pic

2,3 322136 31372
2,3 321747 31354
2,3 321456 31367
2,3 321656 31738
2,3 322196 31950
3,06 436980 43212
3,06 437728 42355
3,06 438641 42870
3,06 441451 43142
3,06 441393 42733
3,88 525716 54586
3,88 524702 53759
3,88 524821 53194
3,88 525125 53441
3,88 525487 54191
4,656 696485 71490
4,656 697030 71146
4,656 696802 69824
4,656 697950 71096
4,656 698193 72515
5,432 788748 81825
5,432 789675 83698
5,432 789521 84354
5,432 790281 84274
5,432 790588 83304
A partir des données précédentes (aires des pics et concentration), nous avons tracé la droite
de régression et nous avons calculé la pente, l’ordonnée à l’origine et le coefficient de
corrélation.

Dosage du kétoprofène par HPLC : Linéarité de la méthode : Aire du pic = f(concentration)
[06/07/2017 14:48 "/Graph1" (2457940)]

Linear Regression for Data1_B:
800000 Y=A+B*X
Parameter Value Error

------------------------------------------------------------
A -32230,13214 13490,58096
700000 B 151823,89594 3353,97863
------------------------------------------------------------
Aire du pic de Kétoprofène
R SD N P
------------------------------------------------------------
600000 0,99443 18641,97201 25 <0.0001
------------------------------------------------------------
500000
400000
300000
Concentration du Kétoprofène en µg/ml
2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 5,5
Figure 15 : Droite d’étalonnage sur le standard A=f(C)
Discussion
L’étude démontre que l’aire du pic de Kétoprofène est linéaire dans l’intervalle de 60,0 % à
140,0 % de la concentration étudiée avec une équation de la courbe y =151823,896 –
32230,131 et un coefficient de corrélation R = 0,99443.
3.3. Fidélité
L’étude de fidélité de la méthode analytique permet la détermination du taux de recouvrement

et d’extraction par écouvillonnage
 Rendementd’extraction :
Aire solutionecouvillon
Rendememen t d' extraction  100
 Rendement de recouvrement :

Aire solution plaque

Rendememen t de recouvreme nt  100
Les résultats sont présentés dans les tableaux suivants
Tableau 16 Détermination des rendements d’extraction et de recouvrement

VALIDATION DU PRELEVEMENT DE VALIDATION DU PRELEVEMENT DE
KETOPRFENE / CONTAMINATION DES KETOPRFENE / CONTAMINATION DES
ECOUVILLONS PLAQUES
CONCENTRATION RENDEMENT CONCENTRATION TAUX DE

EN % D'EXTRACTION EN % EN % RECOUVREMENT EN
%
RENDEMENTS OBTENUS RENDEMENTS
OBTENUS
50% Essai 1 94,7 50% Essai 1 90,3
Essai 2 95,3 Essai 2 93,6
Moyenne 95,11 Moyenne 92,0
Ecart type 0,37 Ecart type 1,7
% RSD 0,39 % RSD 1,8
100% Essai 1 95,3 100% Essai 1 90,8
% RSD 0,50 % RSD 1,0
200% Essai 1 95,0 200% Essai 1 90,7
% RSD 0,72 % RSD 1,2
Moyenne des troisséries 94,9 Moyenne des troisséries 91,5
Discussion
Les coefficients de variation intra-série et inter-série des deux rendements d’extraction et

d’écouvillonnage sont inférieur à 5,0 %, la méthode est jugée fidèle.

3.4. Limite de détection et de quantification
A partir de la droite de régression Hauteur en fonction de la concentration dessinée à partir de

la gamme d’étalonnage du paramètre linéarité, on peut calculer la limite d’acceptation suivant
les étapes suivantes :
 Déterminer la droite de régression : Hauteur = Fonction de concentration : H = B x + A

 Calculer la pente B, l’ordonnée à l’origine A et l’erreur σA.
 Calculer la limite de détection LOD
 Calculer la limite de quantification LOQ.
Dosage du kétoprofène par HPLC : Linéarité de la méthode : Hauteur du pic = f(concentration)
90000
[06/07/2017 14:53 "/Graph2" (2457940)]
Linear Regression for Data1_C:
Y=A+B*X
80000
Parameter Value Error
------------------------------------------------------------
A -8417,8467 1297,03277
70000 B 16817,42723 322,46352
------------------------------------------------------------
Hauteur du pic
R SD N P
60000 ------------------------------------------------------------
0,9958 1792,30595 25 <0.0001
50000
40000
30000 Concentration du Kétoprofène en µg/ml
2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 5,5
3.3 A 10 A
LOD  . LOQ 
B B
3,3 × 1297,03
LOD = = 0,2545µg/ml
16817,42
10 × 1297,03
LOQ = = 0.7712µg/ml
16817,42

Limite d’acceptation : MACO = 3,88 µg/ml
 Discussion :
D’après les résultats trouvés : LOQ < Limite d’acceptation, la méthode peut donc doser le
kétoprofène à l’état de traces.
Conclusion pour la validation analytique : La validation de la méthode de dosage de

Kétoprofène à l’état de traces est réalisée par HPLC, tous les paramètres sont contrôlés.
4. Validation de la méthode de prélèvement
Les données butes pour l’étude des rendements d’extraction et de prélèvement sont annexées
au présent travail (annexe 3)
Les valeurs des rendements intra-série et inter-série sont calculées présentées dans les
tableaux ci-dessous

Tableau17 Détermination des rendements d’extraction.
Série 01 Surface Surface Rendeme Serie 02 Surface Surface rendementd' Série 02 Rurfaceessa Rurface Rendementd'e
essai référence ntd'extra essai reference extraction i reference xtraction en %
ction en en %
%
C1 251890 266024 94,69 C1 253261 265829 95,3 C1 253185 265481,0 95,37
(50%) (50%) (50%) 0
251890 266024 94,69 253261 265829 95,3 253185 265481,0 95,37
0
251890 266024 94,69 253261 265829 95,3 253185 265481,0 95,37
0
moyenne 251890 266024 94,7 moyenne 253261 265829 95,3 moyenne 253185 265481 95,4
C2 500424 524845 95,35 C2 501251 523801 95,7 C2 496553,00 524010 94,76
(100%) (100%) (100%)
500424 524845 95,35 501251 523801 95,7 496553,00 524010 94,76
500424 524845 95,35 501251 523801 95,7 496553,00 524010 94,76
moyenne 500424,0 524845,0 95,3 moyenne 501251, 523801,0 95,7 moyenne 496553,0 524010,0 94,8
0
C3 1004845 1057849 94,99 C3 991732 1059052 93,6 C3 998689 1057970 94,40
(200%) (200%) (200%)
1004845 1057849 94,99 991732 1059052 93,6 998689 1057970 94,40
1004845 1057849 94,99 991732 1059052 93,6 998689 1057970 94,40

moyenne 1004845,0 1057849 95,0 moyenne 991732, 1059052,0 93,6 moyenne 998689,0 1057970, 94,4
0 0

Tableau 18 Détermination des rendements de récupération
serie 01 surface surface rendement Série 02 surface surface rendement de serie 02 surface surface rendement
essai référence de essai référence récupération essai référence de
récupération en % récupération
en % en %
C1 240239 266024 90,31 C1 248917 265829 93,6 C1 244303 265481,00 92,02
(50%) (50%) (50%)
240239 266024 90,31 248917 265829 93,6 244303 265481,00 92,02
240239 266024 90,31 248917 265829 93,6 244303 265481,00 92,02
moyenne 240239 266024 90,3 moyenne 248917 265829 93,6 moyenne 244303 265481 92,0
C2 476560 524845 90,80 C2 481805 523801 92,0 C2 472683,00 524010 90,20
(100%) (100%) (100%)
476560 524845 90,80 481805 523801 92,0 472683,00 524010 90,20
476560 524845 90,80 481805 523801 92,0 472683,00 524010 90,20
moyenne 476560,0 524845,0 90,8 moyenne 481805,0 523801,0 92,0 moyenne 472683,0 524010,0 90,2
C3 959930 1057849 90,74 C3 963607 1059052 91,0 C3 981304 1057970 92,75
(200%) (200%) (200%)
959930 1057849 90,74 963607 1059052 91,0 981304 1057970 92,75
959930 1057849 90,74 963607 1059052 91,0 981304 1057970 92,75
moyenne 959930,0 1057849 90,7 moyenne 963607,0 1059052,0 91,0 moyenne 981304,0 1057970,0 92,8

RESULTATS ET DISCUSSIONS
 Discussion
Le taux de recouvrement moyen est de 91,5% avec un coefficient de variation inter-série de

0,72%, il répond à l’exigence de la SFSTP, la méthode de prélèvement est jugée valide.
La validation de nettoyage de la CD à démontrer de manière scientifique et documenté que les

différentes étapes de procédé de nettoyage conduisent à obtenir une surface ne comportant pas de
contaminants supérieurs à une limite préalablement fixé et ceci de manière reproductible.
DEUXIEME PARTIEAPPLICATION AU CAS D’UNE CENTRALE DE PESEE73

CONCLUSION
CONCLUSION
La propreté de la centrale de pesée fait partie intégrante des processus de productiondes

médicaments.
Le nettoyage est garant de la qualité du produit fabriqué. Il est présent depuis la peséedes
matières premières jusqu’au conditionnement et au contrôle du produit fini. Une perte de
maîtrise entraînera donc des baisses de productivité et une augmentation des coûts de
production. C’est pourquoi il ne doit pas être considéré comme un simple « lavage ».
Une connaissance approfondie des sources de contamination et des zones critiques de la

centrale de pesée engendrant de difficultés et complexités permet de diminuer très
sensiblement le risque de non qualité.
Comme toute autre opération pharmaceutique, l’opération de nettoyage doit faire l’objet
d’une validation, et ce conformément aux exigences réglementaires. Face aux multiples
réglementations applicables une étude approfondie a donc été nécessaire.
La validation de nettoyage doit être intégrée dans le cadre d’une politique globale de
validation des procédés de nettoyage, après avoir identifié les besoins et les attentes de
l’industrie pharmaceutique et s’assurer des moyens tant humains que financiers nécessaires à
sa bonne exécution.
Les trois étapes clefs sont à la réussite d’une validation de nettoyage sont :
- La définition d’une politique globale de validation.
- Une revue précise des conditions pré requises (qualification du matériel, procédure
de nettoyage et formation du personnel, validation des méthodes analytiques,..).
- L’élaboration de la stratégie basée sur le groupage et les pires des cas.
A fin de compléter ce projet des séances de travail doivent être programmé par l’entreprise
pour l’exécution des résultats trouvés.
74
RÉFÉRENCES
BIBLIOGRAPHIQUES
RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES
1. Partie III, Gestion du risque Qualité (ICH Q9) p.237-257, Bonnes Pratiques de Fabrication
(BPF), version 9, N° 2014/1 bis.
2. L.Laftine, validation de nettoyage des équipements de production dans l’industrie

pharmaceutique, Université Mohammed V, Faculté de médecine et de pharmacie,
RABAT.2010.
3. C.Trehel, Gestion du risque de contamination croisée en industrie pharmaceutique,

Université de Bordeaux, 2015.
4. Extrait du dossier technique, Dossier réalisé par BCMI - Guide de l'Ultra-Propreté,

disponible sur http://www.ultraproprete.com.
5. A.Baricault, Validation de nettoyage dans l’industrie pharmaceutique: cas pratique d’un

projet de changement d’agent de nettoyage, Université Bordeaux 2, 2014.
6. C.Bolzan, la validation de nettoyage en industrie pharmaceutique : validation des prérequis,

principe et application au cas particulier dune centrale de pesée, Université Henri Poincar
Nancy 1.2008.
7. P.Wehrlé, pharmacie galénique : formulation et technologie pharmaceutique, Maloine 27,

rue de l’école-de-médecine, 27500 Paris 2007.
8. L.Conte, Validation des procédés de nettoyage Application a un cas concret dans

l’industrie pharmaceutique, Université Henri Poincar Nancy 1.2003.
9. L.Chloé, analyse de risques appliquée à la validation du nettoyage des équipements de

fabrication de médicaments aérosols. Université de Rouen, 2014.
10. Types Of Cleaning Detergents disponible surhttps://www.gsa.gov/portal/content/113006
11. Guide Aspec, gestion du risque de contamination croisée dans l’industrie pharmaceutique.
12. Forum le point vert de la pharmacie et de la vie disponible sur le site

http://pointvert.ecoleforum.com/t1923-validation-du-nettoyage.
13. Extrait de l’EDUKRA disponible sur http://www.edukra.org/validation-pharmaceutique-

a02404112.htm.
I
RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES
14. Nassima hamdi, présentation Comment bâtir votre stratégie de validation de procédés de
nettoyage en milieu GMP..
15. Dr Mayteboya, SVS validation de nettoyage disponible sur [email protected] I

www.svshome.com.
16. F.Laban, Cauwet.M, Champauli.V, validation des procédés de nettoyage, rapport de la

commission SFSTP, STP pharma pratique 6(1) 5-40, 1996.
17. F.Laban,M.Bousquet-Bedu, J.Albadine, M.Barbu, M.N.Bonvarlet, M.Collard,

C.Goncalves, A.Leclerc, G.Lemeland, F.Morvan, M.H.Oursel, M.Perreau, M.Viguier-
Freeman. Méthodes de prélèvement et méthodes analytiques pour le contrôle et/ou la
validation de nettoyage, STP Pharma pratiques, volume 16 N°3, mai/juin 2003.
18. PDA Journal of Pharmaceutical science and technology, Points to consider for
cleaningvalidation, Volume 52, Technical report No 29 supplement number 6, November-
December 1998.
19. M.Mamou formation sur la validation de nettoyage, faculté de medecine Tizi ouzou ,2017.
20. M.Mamou, validation des méthodes analytiques, cours pharmacie industrielle5ème année
pharmacie 2015/2016.
II
ANNEXES
ANNEXE I
SPÉCIFICITÉ
Sample Information
Acquired by : Admin
Sample Name : Ketoprofene
Sample ID : Echantillons
Tray# : 1l
Vail# : 34
Injection Volume : 50 uL
Data Filename : Standard 50 - 1.lcd
Method Filename : Ketprofene.lcm
Batch Filename : Linearité Ketoprofene.lcb
Report Filename : Default.lcr
Date Acquired : 28/06/2017 09:11:32
Data Processed : 28/06/2017 09:18:05
Summary(Compound)
Blanc solvant.lcd
10000
uV Det.A Ch1
7500
5000
2500
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Blanc Ecouvillon.lcd
10000
uV Det.A Ch1
7500
5000
2500
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Blanc plaque.lcd
10000
uV Det.A Ch1
7500
5000
2500
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
<< Detector A >>

ID#1 Compound Name: Ketoprofene
Title Sample Name Sample ID Ret. Time Area Height Conc.
Blanc solvant.lcd Ketoprofene Echantillons 0.000 0 0 0.000
Blanc Ecouvillon.lcd Ketoprofene Echantillons 0.000 0 0 0.000
Blanc plaque.lcd Ketoprofene Echantillons 0.000 0 0 0.000
Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000
Standard Deviation 0.000 0 0 0.000
<< Detector B >>

ID#1 Compound Name: TYR
Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000
ID#2 Compound Name: PHE

Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000
ID#3 Compound Name: EI

Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000
ANNEXE II
LINEARITÉ LOD LOQ
Sample Information
Acquired by : Admin
Sample ID : STD
Tray# : 1l
Vail# :1
Data Filename : STD 60 - 1.lcd
Date Acquired : 28/06/2017 05:47:30
Data Processed : 28/06/2017 05:53:44
Summary(Compound)
STD 60 - 1.lcd
5.470 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 60 - 2.lcd
5.470 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 60 - 3.lcd
5.471 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 60 - 4.lcd
5.476 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 60 - 5.lcd 5.480 / Ketoprofene

uV Det.A Ch1
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 80 - 1.lcd
5.488 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
40000
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 80 - 2.lcd
5.497 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
40000
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 80 - 3.lcd
5.493 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
40000
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 80 - 4.lcd
5.493 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
40000
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 80 - 5.lcd
5.496 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
40000
30000
20000
10000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 120- 1.lcd

uV 75000 5.509 / Ketoprofene Det.A Ch1
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 120- 2.lcd
5.506 / Ketoprofene
uV 75000 Det.A Ch1
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 120- 3.lcd

uV 75000
5.500 / Ketoprofene
Det.A Ch1
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 120- 4.lcd

5.496 / Ketoprofene
uV 75000 Det.A Ch1
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 120- 5.lcd
5.488 / Ketoprofene
uV 75000 Det.A Ch1
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 140 - 1.lcd
5.497 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
75000
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 140 - 2.lcd

5.490 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
75000
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 140 - 3.lcd
5.483 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
75000
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 140 - 4.lcd
5.479 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
75000
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min

uV Det.A Ch1
75000
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 100 - 1.lcd
5.447 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
STD 100 - 2.lcd
5.440 / Ketoprofene
uV Det.A Ch1
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min

uV Det.A Ch1
50000
25000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
min
<< Detector A >>

STD 60 - 1.lcd Ketoprofene STD 5.470 322136 31372 0.000
STD 120- 1.lcd Ketoprofene STD 5.509 696485 71490 0.000
Average 5.482 557213 56833 0.000
%RSD 0.359 32.426 35.180 0.000
Maximum 5.509 790588 84354 0.000
Minimum 5.436 321456 31354 0.000
<< Detector B >>

Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000

Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000

Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000
ANNEXE III
TAUX DE RECOUVREMENT
Sample Information
Acquired by : Admin
Sample ID : Echantillons
Tray# : 1l
Vail# : 34
Data Filename : Standard 50 - 1.lcd
Date Acquired : 28/06/2017 09:11:32
Data Processed : 28/06/2017 09:18:05
Summary(Compound)
Blanc solvant.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Blanc Ecouvillon.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Blanc plaque.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Standard 50 - 1.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
100000 5.396 / Ketoprofene
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Standard 50 - 2.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.392 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Standard 50 - 3.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.390 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Standard 100-1.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Standard 100-2.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.383 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Standard 100-3.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.380 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Standard 150 - 1.lcd

300000
uV Det.A Ch1
5.383 / Ketoprofene
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min

300000
uV Det.A Ch1
5.375 / Ketoprofene
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
300000
uV Det.A Ch1
5.372 / Ketoprofene
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Ecouvillon 50 - 1.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.373 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.376 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min

300000
uV Det.A Ch1
200000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min

300000
uV Det.A Ch1
200000
5.395 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.410 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min

300000
uV Det.A Ch1
5.421 / Ketoprofene
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min

300000
uV Det.A Ch1
5.436 / Ketoprofene
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
300000
uV Det.A Ch1
5.450 / Ketoprofene
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Plaque 50-1.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Plaque 50-2.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.473 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Plaque 50-3.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.487 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Plaque 100-1.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Plaque 100-2.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.510 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Plaque 100-3.lcd
300000
uV Det.A Ch1
200000
5.520 / Ketoprofene
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Plaque 150-1.lcd
300000
uV Det.A Ch1
5.532 / Ketoprofene
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Plaque 150-2.lcd
300000
uV Det.A Ch1
5.543 / Ketoprofene
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
Plaque 150-3.lcd
300000
uV Det.A Ch1
5.555 / Ketoprofene
200000
100000
0 1 2 3 4 5 6 7 8
min
<< Detector A >>

Standard 50 - 1.lcd Ketoprofene Echantillons 5.396 266024 27348 0.000
Standard 100-1.lcd Ketoprofene Echantillons 5.386 524845 55331 0.000
Ecouvillon 50 - 1.lcd Ketoprofene Echantillons 5.370 251890 26063 0.000
Plaque 50-1.lcd Ketoprofene Echantillons 5.462 240239 25554 0.000
Average 5.432 587631 62451 0.000
%RSD 1.125 54.620 54.191 0.000
Maximum 5.555 1059052 111886 0.000
Minimum 5.370 240239 25554 0.000
<< Detector B >>

Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000

Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000

Average 0.000 0 0 0.000
%RSD 0.000 0.000 0.000 0.000
Maximum 0.000 0 0 0.000
Minimum 0.000 0 0 0.000
RÉSUMÉ
RÉSUMÉ
Lors de la production d’un médicament,l’industrie pharmaceutique doit garantir sa qualité, sa

sécurité et son efficacité. Il est donc important d’éliminer les contaminants qui sont apportés
par l’environnement, ou par le procédé de la fabrication lui-même.
Le nettoyage occupe une place capitale au sein des processus d’assurance qualité. C’est le
processus qui fiabilise l’absence de contamination et de ce fait garantit la qualité du
médicament.La validation du procédé de nettoyage permet de démontrer son efficacité et sa
reproductibilité. Cette validation constitue une étape clé de la maitrise de la contamination.
Ce travail présente des techniques d’application de la validation des procédés de nettoyage de

la centrale de pesée, elle traite cette validation depuis la stratégie, les prés requis, la
détermination des critères d’acceptation, le choix du traceur, les méthodes de prélèvement
jusqu'au choix de la méthode d’analyse. Une application à un cas réel complète les données
théoriques et montre la méthodologie entreprise par une industrie pharmaceutique.
MOTS CLES : Industrie pharmaceutique, contamination, nettoyage, centrale de pesée,

validation.
ABSTRACT
During the production of medicinal product, the pharmaceutical industry must guarantee its
quality, safety and efficacy. It is therefore important to eliminate the contaminants that are
brought by the environment or the manufacturing process itself.
Cleaning is a key part of quality assurance processes, it’s the one that makes reliability the
absence of contamination and thus guarantees the quality of the drug. The validation of the
cleaning process makes it possible to demonstrate its effectiveness and reproducibility. This
validation is a key step in controlling contamination.
This work presents techniques for applying the validation of the cleaning processes of the
weighing plant; it deals with this validation from the strategy, the prerequisites, the
determination of the acceptance criteria, the choice of the tracer, and the sampling methods
until the choice of the analysis method. An application to a real case completes the theoretical
data and shows the methodology undertaken by a pharmaceutical industry.
KEY WORDS: Pharmaceutical industry, contamination, cleaning, weighing center,

validation.

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‫الجمهورية الجزائرية الديمقراطية الشعبية‬

REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

Ministère de l’Enseignement Supérieur ‫وزارة التعليم العالي و البحث العلمي‬

Université Mouloud Mammeri ‫جامعة مولود معمري‬

MEMOIRE DE FIN D’ETUDES

Validation de nettoyage d’une centrale de pesée :

Dr. KESSAL Fetta MAHU Faculté de Médecine UMMTO Présidente de jury

ANNEE UNIVERSITAIRE : 2016/2017

Nous remercions particulièrement notre promoteur Dr. MAMOU. M, maitre-assistant

Nous tenons à remercier également notre Co-promoteur Dr. BOURSOUTI. M,

En fin, nous remercions toute personne ayant contribué de près ou de loin

Khadidja & Roza

À mes chères cousines Ibtissam, Lydia et Sarah

À tous les membres de ma famille

À tous mes amis qui n’ont pas cessé de m’encourager

À mon très cher binôme Khadidja pour sa patience et sa compréhension.

TABLE DES MATIÈRES

2.2.2.3. Nettoyage automatique ................................................................................. 9

CHAPITRE III: DEMARCHE A SUIVRE POUR UNE VALIDATION DE NETTOYAGE

1.2.4. Nettoyabilité ...................................................................................................... 24

4.3.7. Robustesse .......................................................................................................... 41

PARTIE PRATIQUE : APPLICATION AU CAS D’UNE CENTRALE DE PESEE

5. Validation de la reproductibilité du procédé de nettoyage………………………..……59

II. RESULTATS ET DISCUSSIONS

LOQ Limite Of Quantification.

Figure 01 Dimensions de particules contaminants.

Tableau 01 Classification des PA selon la nature

Comme tout autre processus pharmaceutique, l’opération de nettoyage, qu’elle concerne la

Le manuscrit est structuré en trois parties :

Le chapitre I : Décrit la contamination et les moyens de lutte.

Le chapitre II : Documente le nettoyage et la validation du nettoyage

On entend par contamination ''l'introduction non intentionnelle d'impuretés de nature chimiques

1.1. Types de contaminations

1.1.1. Contamination particulaire

1.1.2. Contamination microbiologique

La biocontamination est due à l’introduction des microorganismes (virus, bactéries, levures ou

Cette contamination est quantifiée à la suite du dénombrement de germes totaux et / ou spécifiés

1.1.3. Contamination chimique

PREMIÈRE PARTIEREVUE DE LA LITTERATURE AU SUJET DE LA VALIDATION DE NETTOYAGE 2

1.1.4. Contamination croisée

Dans la contamination croisée, deux cas figurent :

1.2. Types de contaminants

Traditionnellement, les contaminants sont classés en trois grandes catégories :

1.2.1. Particules inertes

PREMIÈRE PARTIEREVUE DE LA LITTERATURE AU SUJET DE LA VALIDATION DE NETTOYAGE 3

Figure 01 : Dimensions de particules contaminants.

1.2.2. Contaminants chimiques

Il s’agit de résidus de principes actifs, de produits de dégradation ou d’agent de nettoyage. Ce

Certains contaminants sont parfois classés de façon spécifique en fonction de leurs

PREMIÈRE PARTIEREVUE DE LA LITTERATURE AU SUJET DE LA VALIDATION DE NETTOYAGE 4

1.2.3. Contaminants microbiologiques

1.3. Sources et vecteurs de la contamination

Figure 02 : Diagramme des 5 M représentant les sources de contamination

PREMIÈRE PARTIEREVUE DE LA LITTERATURE AU SUJET DE LA VALIDATION DE NETTOYAGE 5

1.4. Les récepteurs de la contamination

 Des matières premières ;

2.1. Maitrise préventive de la contamination : Approche des 5M

A partir du diagramme d’Ishikawa, il est relativement facile d’imaginer des moyens de

Et collective (maintien en bon état de propreté des endroits de rassemblements et de passage).

PREMIÈRE PARTIEREVUE DE LA LITTERATURE AU SUJET DE LA VALIDATION DE NETTOYAGE 6