Synthèse Des Nanoparticules D'argent Par Méthode Biologique Pour Des Applications Antibactériennes Et Photocatalytiques
Synthèse Des Nanoparticules D'argent Par Méthode Biologique Pour Des Applications Antibactériennes Et Photocatalytiques
Synthèse Des Nanoparticules D'argent Par Méthode Biologique Pour Des Applications Antibactériennes Et Photocatalytiques
ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
Mémoire
MASTER ACADEMIQUE
Thème:
Kenza
Dédicace
Je dédie ce travail modeste:
À mon très cher père
À ma très chère mère lumière de ma vie, source d’amour et de qui
grâce à luit je suis arrivé à ce stade
Soutien éternel
À ma grand-mère deuxième maman
À mon frère : Fares
À ma sœur : Louiza
À mes ami(e)s
A vous toutes/tous, et plus spécialement Kenza, ma copine au travail,
Amina, Isra et Anfel
Comme signe de notre profonde amitié
Firdous
Liste des tableaux
Tableau I. 1: Quelques avantages et inconvénients des nanoparticules. ..................................... 13
Tableau I. 2: Quelques recherches sur la synthèse de nanoparticules à l'aide des plantes. ......... 18
Tableau I. 3: Quelques recherches sur la synthèse des nanoparticules à l'aide de
microorganismes. .......................................................................................................................... 19
Tableau I. 4: Avantages et inconvénients des différentes techniques de synthèse des
nanoparticules................................................................................................................................ 24
Tableau I. 5: Applications des nanoparticules d‘argent dans des différents secteurs. ................. 28
Tableau I. 6: Propriétés physiques et chimiques du colorant de bleu de méthylène. .................. 32
Tableau II. 1: Taxonomie de Pseudomonas aeruginosa. ............................................................ 59
Tableau II. 2: Taxonomie de Listeria monocytogenes. ............................................................... 60
Tableau II. 3: Taxonomie d‘Escherichia coli. ............................................................................. 61
Tableau II. 4: Taxonomie de Bacillus subtilis . ........................................................................... 62
Tableau II. 5: Sensibilité des souches microbiennes en fonction des zones d‘inhibition............ 63
Tableau III. 1: Zone d'inhibition des nanoparticules d‘argent contre diverses bactéries
pathogènes. .................................................................................................................................... 79
I
Liste des figures
Figure I. 1: Différentes tailles de matière. ..................................................................................... 8
Figure I. 2: Exemples de matériaux naturels et biologiques contenant des particules
nanoscopiques. .............................................................................................................................. 11
Figure I. 3: Synthèse des nanomatériaux (NPs) VIA approches top-down et bottom-up............ 14
Figure I. 4: Différentes méthodes de synthèse des nanoparticules. ............................................. 15
Figure I. 5: Synthèse de nanoparticules à partir d'extrait végétal . .............................................. 17
Figure I. 6: Voie écologique et bon marché pour la synthèse verte de nanoparticules à l'aide
d'extraits de plantes. ...................................................................................................................... 18
Figure I. 7: a) Tableau périodique des éléments qui ont été synthétisés par des bactéries ; b)
Représentation schématique de la synthèse bactérienne des NPs ; les processus intracellulaire et
extracellulaire sont inclus. ............................................................................................................. 21
Figure I. 8: Schéma général de synthèse de nanoparticules de métaux par des micro-organismes.
....................................................................................................................................................... 24
Figure I. 9: Pépite d'argent. .......................................................................................................... 26
Figure I. 10: a) Résonance plasmonique de surface (SPR) pour les AgNPs à une longueur d'onde
spécifique ; b) Image de microscopie en champ noir des AgNPs. ................................................ 27
Figure I. 11: Différents semi-conducteurs avec leur valeur de potentiel redox. .......................... 30
Figure I. 12: Mécanisme global de la photocatalyse par photocatalyseur à semi-conducteur. .... 31
Figure I. 13: Structure chimique du bleu de méthylène. .............................................................. 32
Figure I. 14: Système d'oxydoréduction réversible du bleu de méthylène et du bleu de
leucométhylène.............................................................................................................................. 32
Figure I. 15: Mécanismes de l'activité antibactérienne des nanoparticules. ................................ 35
Figure I. 16: Mécanismes de résistance aux antimicrobiens et actions des nanoparticules. ........ 36
Figure II. 1: Etapes de synthèse de nanoparticules d‘argent. ...................................................... 54
Figure II. 2: Etapes de séchage de nanoparticules d‘argent. ........................................................ 55
Figure II. 3: Pseudomonas aeruginosa sous microscope électronique........................................ 58
Figure II. 4: Image de Listeria monocytogenes: (A) Observation de Listeria monocytogenes par
microscope optique, (B) Observation de Listeria monocytogenes par microscope électronique. 59
Figure II. 5: Escherichia coli sous microscope électronique. ...................................................... 60
Figure II. 6: a) Coloration de Gram de Bacillus subtilis ; b) B. subtilis vue sous microscopie
électronique. .................................................................................................................................. 61
Figure II. 7: Etapes de l‘activité antibactérienne des nanoparticules d‘argent. ........................... 63
II
Figure III. 1: a) Intensité de couleur des nanoparticules d'argent synthétisées par Pseudomonas
aeruginosa ; b) Spectre UV-visible de nanoparticules d'argent synthétisées................................ 68
Figure III. 2: Représentation schématique de la synthèse de nanoparticules d'argent à partir
d'ions argent en forme réduite d'atome d'argent par l'activité de l'enzyme nitrate réductase. ....... 69
Figure III. 3: Poudre de nanoparticules d‘argent. ........................................................................ 69
Figure III. 4: a) Changement de couleur en fonction de pH ; b) Effet du pH sur la synthèse des
nanoparticules d‘argent. ................................................................................................................ 70
Figure III. 5: a) Changement de couleur en fonction de concentration de nitrate d‘argent ; b)
Effet de la concentration en ions nitrate d‘argent sur la biosynthèse des nanoparticules d'argent.
....................................................................................................................................................... 71
Figure III. 6: a) Changement de couleur en fonction de temps d‘incubation ; b) Effet du temps
d‘incubation sur la biosynthèse des nanoparticules d'argent. ........................................................ 72
Figure III. 7: a) Changement de couleur en fonction du rapport de volume ; b) Effet du rapport
de volume sur la biosynthèse des nanoparticules d'argent. ........................................................... 73
Figure III. 8: a) Changement de couleur en fonction de l‘agitation ; b) Spectre UV-vis des
AgNPs en fonction de l‘agitation et sans agitation. ...................................................................... 74
Figure III. 9: a) Changement de couleur en fonction de lumière et l‘obscurité ; b) Spectre UV-
vis des nanoparticules d‘argent en fonction de lumière et l‘obscurité. ......................................... 75
Figure III. 10: Changement de couleur en fonction d‘aération. .................................................. 76
Figure III. 11: a) Observation visuelle du changement de couleur du bleu de méthylène à
l'incolore à différents intervalles de temps ; b) Spectres d'absorption d'une solution aqueuse de
bleu de méthylène traitée avec 10 mg de nanoparticules d'argent synthétisées en utilisant P.
aeruginosa à différents intervalles de temps. ................................................................................ 77
Figure III. 12: Dégradation du bleu de méthylène (%) par des nanoparticules d'argent
synthétisées (30 mg). ..................................................................................................................... 78
Figure III. 13: Activité antibactérienne des nanoparticules d'argent contre diverses souches
bactériennes pathogènes. ............................................................................................................... 79
III
Liste des abréviations
Ag Argent
Ag+ Ion d‘argent
AgNO3 Nitrate d‘argent
AgNPs Nanoparticules d‘argent
Au Or
h Heure
IR Infrarouge
mg Milligramme
mM Milimolaire
NADH Nicotinamide adénine dinucléotide (NAD) + hydrogène (H)
nm Nanomètre
NPs Nanoparticules
pH potentiel d‘Hydrogène
PUF Particules ultrafines
SPR Résonance plasmonique de surface
tr Tour
UV Ultra-violet
Vis Visible
ZnO Oxyde de zinc
°C Degré Celsius
μ Micro
μl Microlitre
µm Micromètre
% Pourcentage
IV
Table des matières
Chapitre I. Généralités
I.1. Nanomètre ............................................................................................................................... 7
V
I.7. Nanoparticules d’argent ....................................................................................................... 25
Annexes
Résumé
VII
Introduction générale
Introduction générale
Introduction générale
Les nanosciences et les nanotechnologies ont suscité un grand intérêt au cours des
dernières années en raison de leur impact potentiel sur de nombreux domaines scientifiques tels
que l'énergie, la médecine, les industries pharmaceutiques, l'électronique et les industries
spatiales…etc. Cette technologie traite de petites structures et de matériaux de petite taille de
dimensions allant de quelques nanomètres à moins de 100 nanomètres [1]. Les nanoparticules
(NPs) présentent des propriétés chimiques, physiques, biologiques, diélectriques, électriques,
thermique, optique [2], électronique, magnétique, mécanique [3] et photocatalytique [4] uniques
qui sont significativement différentes de la matière [5-6-7]. Ces propriétés spéciales et uniques
pourraient être liées à leurs petites dimensions, leurs grandes surfaces [8], leur forme, et leur
taille (1 à 100 nm) [9].
Ces dernières années, les nanoparticules sont impliquées dans de nombreuses applications
dans des domaines tels que les technologies de l'information et de la communication, l'ingénierie
électrique, l'ingénierie industrielle, la médecine [10], et la photocatalyse [11]. La synthèse des
nanoparticules est la véritable division dans le domaine des nanotechnologies et nanosciences
pertinentes [12] et en raison de l'importance de leurs applications dans les progrès de la
nanotechnologie, les scientifiques ont les synthétisées par plusieurs méthodes [13]. La synthèse
des nanoparticules a attiré de plus en plus d'attention ces dernières années parce que les
particules dont la taille de l'ordre de quelques nanomètres se comportent différemment que les
particules les plus grosses [14].
La synthèse de nanoparticules peut être effectuée par diverses méthodes telles que les
approches physiques, chimiques et biologiques. En général, les méthodes physiques et chimiques
sont considérées comme les meilleures pour obtenir des nanoparticules de taille uniforme avec
une stabilité à long terme. Cependant, ces approches sont coûteuses et libèrent des matières
toxiques et dangereuses dans l'environnement. Les produits chimiques toxiques utilisés pour la
synthèse des nanoparticules dans les méthodes chimiques rendent les nanoparticules obtenues
moins adaptées aux applications médicales, cosmétiques ou alimentaires. Étant donné que
plusieurs nanoparticules ont été largement utilisées dans les produits médicaux, le diagnostic des
maladies et la cosmétique, il est très important d'améliorer la biocompatibilité des nanoparticules
[15]. Par conséquent, une synthèse verte ou synthèse biologique des nanoparticules en utilisant
les micro-organismes et les extraits des plantes [16] est souhaitable pour fournir une voie de
synthèse économique, écologique [17], facilement disponible et plus propre [18]. La synthèse
biogénique a non seulement un impact environnemental réduit, mais peut également produire de
1
Introduction générale
grandes quantités de nanoparticules qui sont exemptes de contamination et ont une taille et une
morphologie bien définies. Les voies de biosynthèse peuvent en fait fournir des nanoparticules
d'une taille et d'une morphologie mieux définies que certaines des méthodes physico-chimiques
de production. En raison de leur aptitude à la fonctionnalisation biologique, les nanoparticules
biologiques trouvent des applications importantes dans le domaine de la médecine [16]. Parmi
diverses nanoparticules, les nanoparticules d'argent (AgNPs) ont été l'un des objets d'étude les
plus populaires au cours des dernières décennies années [19] en raison de leur potentiel [8-13].
Les bactéries sont une bonne alternative pour les études car elles peuvent s'adapter à diverses
conditions telles que la température, l'aération et le temps d'incubation. Les bactéries sont
également à croissance rapide et peu coûteuses [20]. Parmi ces bactéries se trouvent Escherichia
coli [21-22], Staphylococcus aureus [23], Klebsiella pneumoniae [24], Salmonella typhi [25],
Lactobacillus plantarum [26] et Pseudomonas aeruginosa [27].
Le bleu de méthylène (BM) est l'un des colorants utilisés dans le papier à colorier, la
teinture des cotons, des laines, etc. Il a des effets très nocifs sur les êtres vivants provoquant des
difficultés respiratoires, des vomissements, de la diarrhée et des nausées [28]. Pour éviter les
problèmes potentiels de pollution par les colorants, les nanoparticules ont été largement étudiées
comme photocatalyseurs en les employant pour la décoloration de ces polluants [29]. Parmi ces
nanoparticules les nanoparticules d‘argent jouent un rôle important dans la photocatalyse [30].
Plusieurs études ont fourni des preuves directes que l'utilisation généralisée des
antibiotiques a conduites à l'émergence de souches bactériennes multirésistantes. La plupart des
mécanismes de résistance aux antibiotiques sont sans intérêt pour les NPs car le mode d'action
des NPs est un contact direct avec la paroi cellulaire bactérienne, sans nécessité de pénétrer dans
la cellule; cela laisse espérer que les NPs seraient moins susceptibles de favoriser la résistance
des bactéries que les antibiotiques. Par conséquent, l'attention s'est concentrée sur de nouveaux
matériaux passionnants à base de NPs ayant une activité antibactérienne [31]. Les nanoparticules
d'Ag sont attrayantes car elles ne sont pas toxiques pour le corps humain à faible concentration et
elles ont une efficacité antimicrobienne puissante contre divers micro-organismes pathogènes
[32].
Le chapitre I est consacré aux généralités sur les nanoparticules et plus particulièrement
les nanoparticules d‘argent, la photocatalyse et l‘activité antibactérienne.
2
Introduction générale
3
Introduction générale
Références bibliographiques
[1] Iravani, S., 2014. Bacteria in Nanoparticle Synthesis: Current Status and Future Prospects.
International Scholarly Research Notices, 2014, pp.1-18.
[2] Chaudhary, P., Fatima, F. and Kumar, A., 2020. Relevance of nanomaterials in food
packaging and its advanced future prospects. Journal of Inorganic and Organometallic
Polymers and Materials, 30(12), pp.5180-5192.
[3] Akbari, B., Tavandashti, M.P. and Zandrahimi, M., 2011. Particle size characterization of
nanoparticles–a practicalapproach. Iranian Journal of Materials Science and
Engineering, 8(2), pp.48-56.
[4] Huynh, K.H., Pham, X.H., Kim, J., Lee, S.H., Chang, H., Rho, W.Y. and Jun, B.H., 2020.
Synthesis, Properties, and Biological Applications of Metallic Alloy
Nanoparticles. International Journal of Molecular Sciences, 21(14), p.5174.
[5] Ju-Nam, Y., & Lead, J. R., 2008. Manufactured nanoparticles: An overview of their
chemistry, interactions and potential environmental implications. Science of The Total
Environment, 400(1-3), pp.396-414.
[6] Firdhouse, M.J. and Lalitha, P., 2015. Biosynthesis of silver nanoparticles and its
applications. Journal of Nanotechnology, 2015, pp.1-8.
[7] Nithya, M., & Kalyanasundharam, S., 2018. Effect of chemically synthesis compared to
biosynthesized ZnO nanoparticles using aqueous extract of C .halicacabum and their
antibacterial activity. OpenNano. 4, p.100024.
[8] Rostami Charati, F., Asadi, S., Akbari, R., Razavi, S A., 2018. Green synthesis of silver
nanoparticles using Taxus baccata Leaves extract and identify its specifications. Journal of
Materials and Environmental Sciences, 9(10), pp.2798-2803.
[9] Kareem, M.A., Bello, I.T., Shittu, H.A., Awodele, M.K., Adedokun, O. and Sanusi, Y.K.,
2020, March. Green synthesis of silver nanoparticles (AgNPs) for optical and photocatalytic
applications: a review. In IOP Conference Series: Materials Science and Engineering, 805
(1), p. 012020. IOP Publishing.
[10] S. Shanmugam., P. Heera., 2015. Nanoparticle Characterization and Application: An
Overview. International Journal Current Microbiology And Applied sciences, 4(8), 379-386.
[11] Beydoun, D., Amal, R., Low, G., & McEvoy, S., 1999. Role of nanoparticles in
photocatalysis. Journal of Nanoparticle Research, 1(4), pp.439-458.
[12] Ayesha Arshad., 2017. Bacterial Synthesis and Applications of Nanoparticles. Nano
Science & Nano Technology: an Indian Journal, 11(2), p.119.
4
Introduction générale
[13] Partila, A.M. and El-Hadedy, D.E., 2020. Effect of green silver nanoparticles embedded
in irradiated sodium alginate/poly acrylamide on removal of dye wastes. Journal of
Radiation Research and Applied Sciences, 13(1), pp.586-593.
[14] Sosa, Y.D., Rabelero, M., Treviño, M.E., Saade, H. and López, R.G., 2010. High-yield
synthesis of silver nanoparticles by precipitation in a high-aqueous phase content reverse
microemulsion. Journal of Nanomaterials, 2010, pp.1-6.
[15] Augustine, R., & Hasan, A., 2020. Multimodal applications of phytonanoparticles.
Phytonanotechnology, pp.195-219.
[16] Bonnia, N.N., Kamaruddin, M.S., Nawawi, M.H., Ratim, S., Azlina, H.N. and Ali, E.S.,
2016. Green biosynthesis of silver nanoparticles using ‗Polygonum Hydropiper‘and study its
catalytic degradation of methylene blue. Procedia Chemistry, 19, pp.594-602.
[17] Ali, Z.A., Yahya, R., Sekaran, S.D. and Puteh, R., 2016. Green synthesis of silver
nanoparticles using apple extract and its antibacterial properties. Advances in Materials
Science and Engineering, 2016, pp.1-6.
[18] Jose, Sr & Thomas, Femy., 2020. Photocatalytic degradation of methylene blue using
iron oxide nanoparticles synthesized using Annona muricata leaf extract. International
Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 12, pp.46-51.
[19] Yin, I. X., Zhang, J., Zhao, I. S., Mei, M. L., Li, Q., & Chu, C. H., 2020. The
Antibacterial Mechanism of Silver Nanoparticles and Its Application in Dentistry.
International Journal of Nanomedicine, 15, pp.2555-2562.
[20] He, S., Guo, Z., Zhang, Y., Zhang, S., Wang, J., & Gu, N., 2007. Biosynthesis of gold
nanoparticles using the bacteria Rhodopseudomonas capsulata. Materials Letters, 61(18),
pp.3984-3987.
[21] Baltazar-Encarnación, E., Escárcega-González, C. E., Vasto-Anzaldo, X. G., Cantú-
Cárdenas, M. E., & Morones-Ramírez, J. R., 2019. Silver Nanoparticles Synthesized through
Green Methods Using Escherichia coli Top 10 (Ec-Ts) Growth Culture Medium Exhibit
Antimicrobial Properties against Nongrowing Bacterial Strains. Journal of Nanomaterials,
2019, pp.1-8.
[22] El-Shanshoury, A. E.-R. R., ElSilk, S. E., & Ebeid, M. E., 2011. Extracellular
Biosynthesis of Silver Nanoparticles Using Escherichia coli ATCC 8739, Bacillus subtilis
ATCC 6633, and Streptococcus thermophilus ESh1 and Their Antimicrobial Activities. ISRN
Nanotechnology, 2011, pp.1-7.
5
Introduction générale
[23] Nanda, A., & Saravanan, M., 2009. Biosynthesis of silver nanoparticles from
Staphylococcus aureus and its antimicrobial activity against MRSA and MRSE.
Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine, 5(4), pp.452-456.
[24] Singh, P.K. and Goyal, M., 2020, December. Green Synthesis Using Klebsiella
pneumoniae as well as its Execution onto Textiles for Microbe Resistance. In IOP
Conference Series: Materials Science and Engineering, 988 (1), p.012071. IOP Publishing.
[25] Ghorbani, H. R., 2013. Biosynthesis of silver nanoparticles using Salmonella typhirium.
Journal of Nanostructure in Chemistry, 3(1), pp.1-4.
[26] Mohd Yusof, H., Rahman, A., Mohamad, R. and Zaidan, U.H., 2020. Microbial Mediated
Synthesis of Silver Nanoparticles by Lactobacillus Plantarum TA4 and its Antibacterial and
Antioxidant Activity. Applied Sciences, 10(19), p.6973.
[27] Busi, S., Rajkumari, J., Karuganti, S., & Ranjan, B., 2014. Green rapid biogenic synthesis
of bioactive silver nanoparticles (AgNPs) using Pseudomonas aeruginosa. IET
Nanobiotechnology, 8(4), pp.267-274.
[28] Devi, T.A., Ananthi, N. and Amaladhas, T.P., 2016. Photobiological synthesis of noble
metal nanoparticles using Hydrocotyle asiatica and application as catalyst for the
photodegradation of cationic dyes. Journal of Nanostructure in Chemistry, 6(1), pp.75-92.
[29] Mullamuri, B., Mosali, V.S.S., Maseed, H., Majety, S.S. and Chandu, B., 2021.
Photocatalytic Activity of Heavy Metal Doped CdS Nanoparticles Synthesized by Using
Ocimum sanctum Leaf Extract. Biointerface Research in Applied Chemistry, 11(5), pp.
12547-12559.
[30] Fairuzi, A.A., Bonnia, N.N., Akhir, R.M., Abrani, M.A. and Akil, H.M., 2018.
Degradation of methylene blue using silver nanoparticles synthesized from imperata
cylindrica aqueous extract. In IOP Conference Series: Earth and Environmental Science,
105(1), p.012018. IOP Publishing.
[31] Wang, L., Hu, C., & Shao, L., 2017. The antimicrobial activity of nanoparticles: present
situation and prospects for the future. International Journal of Nanomedicine, 12, pp.1227-
1249.
[32] Rahimi, G., Alizadeh, F. and Khodavandi, A., 2016. Mycosynthesis of silver
nanoparticles from Candida albicans and its antibacterial activity against Escherichia coli and
Staphylococcus aureus. Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 15(2), pp.371-375.
6
Chapitre I
Généralités
Chapitre I Généralités
Chapitre I. Généralités
Dans ce chapitre se trouve la présentation des généralités sur les nanoparticules, leurs
sources d‘origine, les différentes méthodes de synthèse utilisées pour leurs obtention et leurs
avantages et inconvénients, suivie par des informations sur les nanoparticules d‘argent, leurs
applications dans des différents domaines et leurs utilisations dans la photocatalyse comme des
photocatalyseurs et dans l‘activité antibactérienne comme des agents antibactériens.
I.1. Nanomètre
Le préfixe «nano» signifie très petit, il vient du mot grec « nanos ». Ce préfixe est
également utilisé pour indiquer la taille dans la série kilomètre, millimètre, micromètre et
nanomètre [1]. Le terme nano ne désigne pas toujours un objet très petit. Par exemple, en
astronomie, une nanostar est une étoile ayant une masse comparable à notre soleil ou même
moins [2].
Le nanomètre (de symbole nm) est une unité du système international d'unités (SI), il est
considéré comme une unité de longueur à l‘échelle nanométrique et il est équivalent à 10-9
mètres (m) [3]. L‘échelle nanométrique est considérée comme l‘échelle de longueur s'étendant
approximativement de 1 nm à 100 nm [4-5-6].
Tant que c'est difficile d'imaginer à quel point le nanomètre est petit voici quelques
exemples:
7
Chapitre I Généralités
I.2. Nanomonde
I.3. Nanoscience
I.4. Nanotechnologie
I.5. Nanomatériaux
pour 50% ou plus des particules dans la distribution de taille en nombre, une ou plusieurs
dimensions externes sont dans la plage de tailles de 1 nm à 100 nm [24-25].
- Il a des structurations internes ou de surface avec au moins une dimension dans la gamme
1-100 nanomètres.
- Il est composé de particules avec au moins une dimension dans la gamme 1-100
nanomètres, pour au moins 1% d‘entre elles.
- Il a une surface spécifique de plus de 60 m2 /cm3, en excluant les matériaux formés de
particules de tailles inférieures au nanomètre [26].
Deux grandes familles de nanomatériaux sont ainsi distinguées : les nano-objets et les
matériaux nanostructurés [27-28-29].
I.6. Nanoparticules
- NPs à base de carbone : tels que les fullerènes, les nanofeuillets de graphène, les
nanofibres de carbone, le noir de carbone, les nanomousses de carbone.
- Les métaux tels que l‘argent, l‘or, le cuivre et le fer et les oxydes métalliques tels que les
oxydes de fer, de zinc, et de cuivre.
- NPs organiques tels que les polymères organiques.
- NPs d‘origine biologique [33].
10
Chapitre I Généralités
Les NPs sont abondantes dans la nature, car elles sont produites dans de nombreux
processus naturels, y compris les réactions photochimiques, les incendies de forêt les éruptions
volcaniques et l'érosion simple, et par les plantes et les animaux, comme le perdre de la peau et
les cheveux [35], les embruns, les nuages, et la tempête de poussière [36].
Les NPs biologiques naturelles comprennent les bactéries, les champignons [37], les virus
(qui sont de tailles diverses mais nanoparticulaires) les protéines (BSA, insuline, etc.), les
lipides, les glucides (glucose, fructose, etc.) et d'autres biomolécules inorganiques qui sont de
niveau nanoparticulaire [38].
11
Chapitre I Généralités
Dans cette catégorie nous retrouvons les particules atmosphériques « ultrafines » (PUF)
[40]. Ces particules, sont émises notamment par les véhicules diesel, les véhicules à essence et
les chauffages urbains.
Mis à part les PUF, d‘autres NPs sont produites par l‘homme de façon accidentelle, non
intentionnelle ou non manufacturées. Dans cette classe, il existe principalement les particules
présentes dans la fumée de soudage [41]. Les NPs sont générées également par des activités
intérieures courantes, telles que: la cuisine, le tabagisme, le nettoyage et la combustion (par
exemple, bougies, cheminées) [42]. Parmi les NPs produites par des activités intérieures se
trouvent: les fibres textiles, les particules de peau, les spores, les excréments d'acariens, les
produits chimiques, la fumée des bougies, la cuisine et les cigarettes [43].
Les principales caractéristiques des NPs artificielles ont une surface spécifique élevée,
une transformation de phase inhabituelle en raison de leur nature artificielle, une stabilisation
inhabituelle des défauts, une déformation de surface élevée et une agrégation contrôlée par
cristallographie [44]. Cette source de NPs incluent les fullerènes, les nanotubes de carbone, les
dendrimères, les points quantiques, le TiO2, les NPs d'or et d'argent [45].
Des différences existent entre les PUF et les NPs manufacturées (NPsM), les PUF ont
généralement une assez large distribution de taille et une composition chimique complexe tandis
que les NPsM ont souvent une distribution étroite et une composition chimique définie. Très
schématiquement, il existe des NPsM métalliques (dioxyde de titane et de zinc, par exemple) et
des NPsM carbonées. Parmi celles-ci, les nanotubes de carbone qui occupent une place
importante [41].
12
Chapitre I Généralités
Avantages Inconvénients
Améliorer la diffusion Rayleigh Les NPs peuvent subir une transformation,
Diffusion Raman améliorée en car elles sont thermodynamiquement
surface. instables et se situent dans la région des
Forte absorption plasmatique. minima locaux à haute énergie. Cela
Imagerie du système biologique. conduit à une détérioration de la qualité,
Déterminer les informations une mauvaise résistance à la corrosion, et
chimiques sur un substrat métallique le principal souci est que la conservation
à l'échelle nanométrique [46]. de la structure devient difficile.
L'augmentation de la surface Lors de la synthèse de NPs, la formation
spécifique entraîne une dissolution peut être aggravée par l'environnement
plus rapide de l'agent actif dans un impur. Comme les NPs sont très réactives,
environnement aqueux, tel que le il peut également y avoir de fortes chances
corps humain [47]. d'impureté.
Les NPs ont été signalées comme toxiques,
cancérigènes et irritants car elles
deviennent transparentes pour le derme
cellulaire.
La combustion exothermique peut
entraîner une explosion, car les fines
particules métalliques agissent comme des
explosifs puissants.
Lors de la synthèse de NPs, il faut
l'encapsuler, car il est extrêmement difficile
de conserver la taille des nanoparticules
sous forme de solution [46].
Les NPs en raison de leur petite taille
peuvent causer des problèmes d'inhalation
et de nombreuses autres maladies
mortelles en inhalant simplement pendant
60 secondes dans l'air contenant des
nanoparticules peuvent facilement
endommager les poumons.
Les NPs augmentent la pollution [48].
Il a été démontré que les NPs, qui
pénètrent dans le foie, peuvent induire
localement un stress oxydatif [49].
13
Chapitre I Généralités
Il existe deux approches différentes utilisées pour synthétiser les NPs, l'approche
descendante «top-down», qui est basée sur des méthodes physiques, et l'approche ascendante
«bottom-up», qui est basée sur des méthodes chimiques [51-52-53].
L'approche descendante part d'un matériau en vrac qui incorpore des détails
nanométriques critiques. Dans cette approche, un biomatériau est conçu en réduisant une entité
complexe en ses composants, comme la création de petits cristaux à partir d'un tissu dur
minéralisé en vrac par gravure à l'acide. En revanche, l'approche ascendante assemble des
matériaux à l'échelle nanoscopique, tels que des molécules et des atomes, pour former des
structures plus grandes (Figure I.3) [54].
Figure I. 3: Synthèse des nanomatériaux (NPs) VIA approches top-down et bottom-up [52].
14
Chapitre I Généralités
La réduction chimique, qui est la réduction d'un sel ionique dans un milieu approprié en
présence de tensioactif à l'aide d'agents réducteurs. Certains des agents réducteurs
couramment utilisés sont le borohydrure de sodium, l'hydrate d'hydrazine, le chlorate
d'aura de potassium et le citrate de sodium.
La synthèse solvothermique, qui est une voie polyvalente à basse température dans
laquelle des solvants polaires sous pression et à des températures supérieures à leur point
d'ébullition sont utilisés. Dans des conditions solvothermiques, la solubilité des réactifs
augmente de manière significative, permettant à la réaction d'avoir lieu à une température
plus basse.
15
Chapitre I Généralités
La technique sol-gel, qui est une technique chimique par voie humide utilisée pour la
fabrication d'oxydes métalliques à partir d'une solution chimique qui agit comme un
précurseur pour un réseau intégré (gel) de particules discrètes ou de polymères. Le sol
précurseur peut être soit déposé sur le substrat pour former un film, soit coulé dans un
récipient approprié avec la forme souhaitée pour synthétiser des poudres.
L'ablation au laser, qui consiste à retirer le matériau d'une surface solide par irradiation
avec un faisceau laser. Le matériau est chauffé par l'énergie laser absorbée et s'évapore
ou se sublime à faible flux laser. À flux plus élevé, le matériau est converti en plasma. La
quantité de matière éliminée par une seule impulsion laser et la profondeur sur laquelle
l'énergie laser est absorbée dépend des propriétés optiques du matériau et de la longueur
d'onde du laser. Des nanotubes de carbone peuvent être produits par cette méthode.
La condensation de gaz inerte, où différents métaux sont évaporés dans des creusets
séparés à l'intérieur d'une chambre à ultra-vide rempli d'hélium ou d'argon gazeux à une
pression typique de quelques 100 pascals. À la suite de collisions inter-atomiques avec
des atomes de gaz dans la chambre, les atomes métalliques évaporés perdent leur énergie
cinétique et se condensent sous la forme de petits cristaux qui s'accumulent sur un doigt
froid rempli d'azote liquide. Par exemple, des nanoparticules d'or ont été synthétisées à
partir de fils d'or [56].
I.6.3.2.1. Plantes
L'utilisation d'extraits de plantes offre certains avantages par rapport à ses homologues,
comme la facilité de se procurer et la sécurité à manipuler. Le processus de synthèse verte des
NPs à l'aide d'extraits végétaux implique généralement la réaction entre l'extrait végétal et les
précurseurs à base de métaux. Dans cette réaction, l'extrait végétal agit comme un agent
réducteur et coiffant qui réduit le précurseur à base de métal qui agit comme un agent oxydant
pour former des NPs à base de métal [58-59].
Des extraits de plantes ont été produits à partir de différentes parties, les graines, les
feuilles et les fleurs, pour étudier leurs capacités à synthétiser les NPs [60-61]. La capacité d'un
16
Chapitre I Généralités
extrait végétal à synthétiser les NPs réside sur la présence des composés phytochimiques dans la
plante qui sont responsables de ses capacités de synthèse [62]. Ces composés phytochimiques
comprennent les flavonoïdes, les saponines, les terpénoïdes, les glucides, les protéines et les
alcaloïdes [63]. Ils sont des agents d'extinction d'oxygène, des agents réducteurs et stabilisants,
des agents chélateurs de métaux et des donneurs d'hydrogène. La réduction des ions métalliques
par ces substances dans les extraits végétaux conduit à la formation de nanomatériaux respectifs
[64].
L'utilisation des plantes dans la synthèse des NPs a attiré plus d'intérêt des travailleurs car
elle fournit un processus de biosynthèse en une seule étape de biosynthèse et possède un large
spectre de métabolites qui peuvent aider dans le processus de la réduction [65-66]. Les plantes
offrent une option supérieure pour la synthèse des NPs, car les protocoles impliquant des sources
végétales sont exempts de substances toxiques; en outre, les agents de coiffage naturels sont
facilement fournis par les plantes (Figure I.5).
Stirring recovery
Metal
Pour la synthèse des NPs, la partie de la plante qui doit être utilisée en synthèse est lavée
et bouillée avec de l'eau distillée. Après avoir pressé, filtré et ajouté les solutions respectives des
nanoparticules que nous voulons synthétiser, la couleur de la solution commence à changer,
dévoilant la formation de NPs et nous pouvons les séparer (Figure I.6) [68].
17
Chapitre I Généralités
Figure I. 6: Voie écologique et bon marché pour la synthèse verte de nanoparticules à l'aide
d'extraits de plantes [68].
18
Chapitre I Généralités
I.6.3.2.2. Microorganismes
Les bactéries procaryotes, les actinomycètes, les champignons, les algues et les levures
sont largement utilisés comme bio-réacteurs pour la synthèse des NPs. D'énormes efforts
scientifiques ont été déployés pour développer cette stratégie de production d'une variété de NPs
(Ag, Au, Pd, TiO2, CdS, etc.) [79].
La synthèse des NPs avec des bactéries et des champignons a gagné plus d'intérêt que la
synthèse avec des actinomycètes et des levures car la technologie bien mûre est disponible en
synthèse par des bactéries et des champignons que par des actinomycètes et des levures [80].
Quelques recherches récentes sur la synthèse des NPs à l'aide de microbes sont résumées dans le
tableau (I.3).
Bactéries
Klebsiella pneumonia Ag 26,84 - 44,42 [81]
E. coli Ag 20 - 50 [82]
Shewanella algae Pt Environ 5 [83]
Lactobacillus acidophilus Se 2 - 15 [84]
Staphylococcus aureus Ag 160 - 180 [85]
Bacillus subtilis ZnO 16 - 20 [86]
Pseudomonas aeruginosa Ag 30 à 75 [87]
Pseudomonas aeruginosa Au 30 [88]
Pseudomonas sp Ag 10 - 30 [89]
Champignons
Penicillium duclauxii Ag 13 [90]
Helminthosporum solani Au 2 - 70 [91]
P. rugulosum Au 20-80 [92]
Candida albicans Au 5 [93]
Aspergillus tubingensis P 28,2 [94]
Alternaria alternate Au 12 [95]
Phoma glomerata Ag 60 - 80 [96]
Levures
Yarrowia lipolytica Au 15 [97]
Actinomycètes Ag 10 - 20 [98]
Streptomyces sp. Au 10 [99]
19
Chapitre I Généralités
Algues
Caulerpa racemosa Ag 5 - 25 [100]
Spirulina platensis Au 20 - 30 [101]
Padina sp Ag 25 - 60 [102]
Sargassum latifolium Se 22,31 - 95,16 [103]
a) Bactéries
Parmi les méthodes biologiques, les bactéries sont un outil particulièrement important
pour fabriquer les NPs en raison de leur variété et de leur grande adaptabilité aux conditions
extrêmes [104]. À ce jour, de nombreuses études sur la biosynthèse des NPs par les bactéries, y
compris les substances et composés élémentaires (comme le montre la figure I.7), ont été
rapportées dans la littérature [105].
En outre, de nombreuses études ont montré que non seulement les bactéries vivantes,
mais également les entités mortes de certaines bactéries peuvent également être utilisées pour la
biosynthèse des NPs. Cependant, les mécanismes de ces processus sont différents. En général, le
processus métabolique peut être responsable de la bioréduction des NPs dans les bactéries
vivantes. Cependant, pour les entités mortes, les ions métalliques et métalloïdes sont liés aux
cellules bactériennes qui fournissent des sites de nucléation pour les NPs [104].
20
Chapitre I Généralités
Figure I. 7: a) Tableau périodique des éléments qui ont été synthétisés par des bactéries ; b)
Représentation schématique de la synthèse bactérienne des NPs ; les processus intracellulaire et
extracellulaire sont inclus [104].
b) Champignons
La facilité de mise à l'échelle des champignons est un privilège distinct de les utiliser
dans la synthèse de NPs (par exemple, en utilisant une technique de fermentation sur substrat
solide mince). Étant donné que les champignons sont des sécréteurs très efficaces d'enzymes
extracellulaires, il est donc possible de réaliser une vaste production d'enzymes [107].
Parmi les champignons, Fusarium spp joue un rôle important dans la synthèse des NPs et
21
Chapitre I Généralités
peut être considérée comme une nano-usine pour la fabrication de NPs. Parmi ceux-ci, F.
oxysporum a démontré un potentiel élevé pour la synthèse des AgNPs. On suppose que l'enzyme
nitrate réductase NADH-dépendante sécrétée par F. oxysporum est responsable de la réduction
des ions argent aqueux en AgNPs [108].
c) Levures
L'applicabilité possible des NPs formées par la levure a été démontrée par quelques
recherches. Pour la fabrication d'une diode cadmium, des NPs de sulfure synthétisées de façon
intracellulaire par S. pombe ont été appliqués, qui avaient un fonctionnement à basse tension et
une valeur de courant direct élevée. On suppose que ces propriétés peuvent former la structure
artificielle une diode parfaite [110].
Il a été démontré que les levures extrémophiles, isolées du drainage minier acide au
Portugal, sont capables de se développer en présence d'ions Ag et Au et peuvent être exploitées
pour produire des particules nanocristallines d'argent et d'or [111].
Pour la première fois, l'utilisation potentielle d'une souche de levure nouvellement isolée
(P. kudriavzevii) pour synthétiser des ZnO-NPs à l'aide d'une méthode verte est démontrée dans
l‘étude de Moghaddam et al. [112].
d) Algues
22
Chapitre I Généralités
e) Actinomycètes
23
Chapitre I Généralités
Produits chimiques /
Technique Avantages Inconvénients
micro-organismes utilisés
La production en une Jointure ferme, déconcertée
seule étape, dans les données et la note
précurseurs et d'efficacité étant des NPs
potentiel de Fournit l'expansion
Physique production à grande cristalline, synthèse des
échelle avec des particules
rendements élevés.
[116].
24
Chapitre I Généralités
L'argent est un élément chimique avec le symbole Ag [118] de couleur gris blanc [119].
C‘est un métal malléable, ductile et précieux qui a été connu depuis des temps anciens (ses
premiers débuts vers 5000 avant notre ère) et est situé dans le groupe 11 (Ib) et la période 5 du
tableau périodique. L'argent est largement distribué dans la nature. Mais son abondance dans la
croûte terrestre est très faible (0.05 ppm) par rapport aux autres métaux. L'argent a le numéro
atomique 47 et le poids atomique de 107.880, et sa configuration électronique à l'état
fondamental est [Kr] 4d105s1. La plupart du temps, l'argent peut exister dans un mélange
d'isotopes, 107Ag et 109Ag. L'Ag est visiblement diamagnétique et sa susceptibilité magnétique est
presque indépendante de la température de la température ambiante à juste en dessous du point
de fusion [120].
25
Chapitre I Généralités
Les nanoparticules d‘argent ou nano-argent sont des molécules ayant une taille de 20-40
nm, composées à 80% d‘atomes d‘argent et à 20% d‘ions argent. Elles sont, devant les nanotubes
de carbone et les NPs de titane, les NPs les plus vendues et relâchées dans l‘environnement. Les
AgNPs sont très prisés par l‘industrie pharmaceutique et agroalimentaire, de part notamment leur
propriété biocide. Néanmoins, l‘utilisation de ces NPs reste controversée de par leur risque sur la
santé et l‘environnement [122].
Étant donné que les AgNPs sont extrêmement efficaces pour absorber et diffuser la
lumière et contrairement à de nombreux colorants et pigments, ont une couleur qui dépend de la
taille et de la forme de la particule. La forte interaction du nano-argent avec la lumière se produit
parce que les électrons de conduction sur la surface du métal subissent une oscillation collective
lorsqu'ils sont excités par la lumière à des longueurs d'onde spécifiques connues sous le nom de
résonance plasmonique de surface (Figure I. 10 : a, b) et se traduit par des propriétés de diffusion
et d'absorption inhabituellement fortes [124].
26
Chapitre I Généralités
Figure I. 10: a) Résonance plasmonique de surface (SPR) pour les AgNPs à une longueur
d'onde spécifique ; b) Image de microscopie en champ noir des AgNPs [124].
La structure cristalline des AgNPs peut être dérivée des diagrammes de diffraction des
rayons X. Plusieurs études ont rapporté que les AgNPs ont la structure cubique, montrant des
pics à 38.06°, 44.22°, 64.48° et 77.32° correspondant à l'angle de diffusion 2θ des plans (1 1 1),
(2 0 0), (2 2 0 ), et (3 1 1), respectivement. De plus, le diagramme de diffraction des AgNPs se
produit à 38.5°, 44° et 64.5° (2θ). Ces modèles peuvent être indexés sur les plans (111), (200), et
(220) de l'argent cubique face centrée (fcc) [125].
Une propriété remarquable des NPs métalliques est leur faible température de fusion due
à l'effet de taille thermodynamique [125].
Les AgNPs ont été utilisées comme agents catalytiques efficaces pour la réduction de
divers colorants tels que le bleu de méthylène, le jaune-12, le 4-nitrophénol, le rose Bengale,
l'éosine et le méthyl-orange [125].
27
Chapitre I Généralités
Le tableau suivant montre les applications des AgNPs dans des divers domaines :
Tableau I. 5: Applications des nanoparticules d‘argent dans des différents secteurs [127].
I.8. Photocatalyse
Photocatalyse est un mot d‘origine grec, qui se compose de deux parties: la préfixe
«photo» signifie (Phos: lumière) et la «catalyse» traite (katalyo: briser, décomposer) [129]. La
photocatalyse est une réaction qui utilise la lumière pour activer une substance qui modifie la
vitesse d'une réaction chimique sans être elle-même impliquée [130]. Les exigences de
photocatalyse sont résumées comme suites:
La photocatalyse peut être comparée à la photosynthèse naturelle qui se produit chez les
plantes. La chlorophylle des plantes est le photocatalyseur naturel typique. La différence entre le
photocatalyseur de chlorophylle et le photocatalyseur à semi-conducteur artificiel; la
chlorophylle capte la lumière du soleil pour transformer l'eau et le dioxyde de carbone (CO 2) en
oxygène (O2) et glucose, mais au contraire, le photocatalyseur à semi-conducteur crée un
puissant agent d'oxydation et des trous électroniques pour décomposer la matière organique en
CO2 et en eau (H2O) en présence de photocatalyseur, de lumière et d'eau [130].
I.8.2. Photocatalyseurs
Un photocatalyseur idéal doit être stable, peu coûteux, non toxique et, bien sûr,
hautement photoactif. Un autre critère principal de dégradation des composés organiques est que
le potentiel redox du couple H2O / • OH (OH− → • OH + e− ; E 0 = −2. 8V) se situe dans la bande
interdite du semi-conducteur. Plusieurs semi-conducteurs ont des énergies de bande interdite
suffisantes pour catalyser une large gamme de réactions chimiques. Celles-ci incluent TiO2,
WO3, SrTiO3, α-Fe2O3, ZnO, ZnS [131].
29
Chapitre I Généralités
Figure I. 11: Différents semi-conducteurs avec leur valeur de potentiel redox [133].
Un matériau semi-conducteur est caractérisé par deux bandes d'énergie séparées par
l'énergie de la bande interdite, par exemple (Figure I.12). Un semi-conducteur à zéro absolu est
un isolant, car la bande de valence (niveau d'énergie inférieur) est complètement occupée et la
bande de conduction (niveau d'énergie supérieur) totalement vide. Pour devenir conducteur, des
porteurs de charge doivent être créés, généralement par photoexcitation via l'irradiation de la
lumière. Lorsqu'une surface semi-conductrice est irradiée par la lumière (hν ≥ Eg), un pair
d‘électron / trou (e− / h +) est générée en favorisant l'électron de la bande de valence (VB) à la
bande de conduction (CB). Le caractère oxydant des trous (h+) dans la bande de valence montre
que des radicaux OH étaient générés par l'oxydation des molécules H 2O ou des ions OH-
adsorbés à la surface du semi-conducteur, celle capable d'oxyder directement les molécules
organiques. La photoexcitation du photocatalyseur semi-conducteur, le mécanisme global peut
être vu sur la figure (I.12) [130].
30
Chapitre I Généralités
Cependant pour les nanoparticules métalliques par exemple, les NPs d'or et d‘argent les
mécanismes sont distincts de ceux des photocatalyseurs semi-conducteurs. L'énergie absorbée
par les électrons de conduction métallique et les champs électriques intenses à proximité
immédiate, créés par l'effet de résonance plasmonique de surface localisée (RPSL), contribuent
de manière cruciale à l'activation des molécules sur les nanoparticules métalliques, ce qui facilite
la transformation chimique [132].
Le BM apparaît comme un solide inodore à température ambiante. C'est une poudre verte
foncée et donne une solution bleue lorsqu'elle est dissoute dans l'eau. Il a une forte
caractéristique d'adsorption sur un solide avec une longueur d'onde d'absorption maximale de
668 nm [135].
31
Chapitre I Généralités
32
Chapitre I Généralités
Plusieurs caractéristiques des NPs en font des alternatives aux antibiotiques traditionnels.
Premièrement, le grand rapport surface / volume des NPs augmente la surface de contact avec les
organismes cibles. Les NPs peuvent agir comme des molécules à l'échelle nanométrique
interagissant avec les cellules bactériennes, régulant la pénétration de la membrane cellulaire et
interférant avec les voies moléculaires. Deuxièmement, les NPs peuvent renforcer les effets
inhibiteurs des antibiotiques. Enfin, les combinaisons d'antibiotiques et de NPs fournissent des
mécanismes antimicrobiens complexes pour surmonter la résistance aux antibiotiques [138].
Les NPs en particulier ont démontré des propriétés antibactériennes à large spectre contre
les bactéries à Gram positif et à Gram négatif [139]. De nombreuses études ont montré que les
bactéries Gram-positives sont plus résistantes aux mécanismes d'action du NPs. On émet
l'hypothèse que les parois cellulaires différentes sont la raison pour laquelle ce phénomène
existe. Dans le cas des bactéries à Gram négatif, comme l‘Escherichia coli, les cellules
bactériennes sont recouvertes d'une couche de lipopolysaccharides (1 à 3 µm d'épaisseur) et de
peptidoglycanes (~ 8 nm d'épaisseur). Cet agencement peut faciliter l'entrée des ions libérés des
NPs dans la cellule. D'autre part, les bactéries Gram-positives telles que Staphylococcus aureus
possèdent une couche de peptidoglycane beaucoup plus épaisse que les bactéries Gram-
négatives, s'étendant sur plus de 80 nm avec des acides teichoïque et teichuronique attachés de
manière covalente. La destruction de la paroi cellulaire résultant de l'interaction physique entre
les NPs et la paroi cellulaire est plus préjudiciable aux bactéries Gram-négatives car elles n'ont
pas l'épaisse couche de peptidoglycane trouvée dans les bactéries Gram-positives qui pourrait
éventuellement agir comme une couche protectrice. Une autre raison potentielle de la sensibilité
Gram-négative aux NPs est que les bactéries Gram-négatives sont recouvertes de molécules de
lipopolysaccharides, qui portent une charge négative. Ces molécules chargées négativement ont
une affinité plus élevée pour les ions positifs que la plupart des NPs libèrent, conduisant à une
accumulation et à une absorption accrue d'ions, qui provoquent alors des dommages
intracellulaires. D'autres facteurs peuvent inclure le processus de formulation, l'environnement,
le mécanisme de défense bactérienne et les caractéristiques physiques du NPs [140].
Il a été bien documenté dans la littérature que les NPs de plus petite taille présentaient des
activités antimicrobiennes plus élevées en raison d'une plus grande superficie [141]. Certaines
études ont montrés que les NPs plus grosses sont plus efficaces, ce qui indique que la taille seule
n'est pas le facteur le plus important de leur toxicité [142].
33
Chapitre I Généralités
Parmi les nombreux NPs prometteurs, les NPs d‘Ag semblent être des agents
antibactériens potentiels en raison de leurs grands rapports surface-volume et de leurs cristaux
[143] ce qui permet un meilleur contact avec les micro-organismes [144]. Sondi et Salopek-
Sondia [145], ont démontrés l'activité antimicrobienne des Ag NPs contre Escherichia coli, dans
laquelle des cellules d'E. Coli traitées avec des Ag NPs ont montré l'accumulation de NPs d‘Ag
dans la paroi cellulaire et la formation de «fosses» dans la paroi cellulaire bactérienne,
conduisant éventuellement à la mort cellulaire.
Les NPs d‘Ag pourraient fréquemment libérer les ions argent (Ag+), ce qui pourrait être
considéré comme l'un des mécanismes à l'origine de l'activité bactéricide des NPs d‘Ag. Les Ag+
chargés positivement jouent un rôle vital pour présenter les activités antibactériennes ou de
toxicité de l'argent et pour maintenir ses activités antibactériennes ou de toxicité, l'Ag doit
essentiellement être dans son état ionisé. Les ions Ag+ forment des complexes avec les acides
nucléiques et que par rapport aux groupes phosphate, ils interagissent spécifiquement avec les
nucléosides des acides nucléiques.
En raison des attractions électrostatiques et de l'affinité envers les protéines de soufre, les
ions Ag+ adhèrent au cytoplasme et à la paroi cellulaire, et améliorent considérablement la
perméabilité, conduisant à des perturbations des enveloppes bactériennes. Dès que les ions Ag+
libres sont absorbés par les cellules, les enzymes respiratoires sont désactivées, entraînant la
production d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) et l'interruption de la libération d'adénosine
triphosphate (ATP) [146].
I.9.1. Mécanisme
Diverses théories et explications ont été proposées pour différentes nanoparticules pour
leur activité microbicide (Figure I.16) et ont été étudiées sur la base des changements
morphologiques et structurels des cellules bactériennes.
Il a été démontré que les NPs ont la capacité de s'ancrer à la paroi cellulaire
bactérienne et de la pénétrer par la suite, provoquant ainsi des changements
structurels dans la perméabilité de la membrane cellulaire conduisant à la mort
cellulaire [147-148].
Les NPs peuvent cibler la membrane bactérienne, conduisant à une dissipation de la
force motrice du proton qui à son tour provoque le blocage de la phosphorylation
oxydative [149].
34
Chapitre I Généralités
Figure I. 16: Mécanismes de résistance aux antimicrobiens et actions des nanoparticules [138].
En 2021, Ahamad et al. [151] ont fait une étude sur la synthèse des AgNPs par Anabaena
variabilis. Les conditions optimales pour la préparation de l'extrait étaient le chauffage du
mélange d'extraction à 100 °C pendant 5 min, tandis que pour la synthèse d'AgNPs, les
conditions optimales étaient de (extrait cellulaire: AgNO3 (1 mM)), pH 7.4 et températures de
réaction de 30°C. Les AgNPs synthétisées ont été caractérisées initialement par
spectrophotomètre UV-Vis et le pic d'absorbance maximum a été obtenu à 440 nm. La technique
DRX a confirmé leur nature cristalline. Le MEB avec EDX a montré 66% d'argent élémentaire
en poids, ce qui signifiait la pureté des AgNPs. L'étude de la diffusion de lumière dynamique
(Dynamic light scattering = DLS) a montré les natures presque monodispersées des AgNPs.
L'observation sur la microscopie électronique à transmission (MET) a confirmé la synthèse de
NPs sphériques de 11 à 15 nm. L'analyse FTIR des AgNPs synthétisés a montré les fractions
fonctionnelles responsables de leur bioactives. Les biomolécules d‘AgNPs ont été confirmées
par LCMS/MS. Les AgNPs synthétisées par Anabaena variabilis ont montré une bonne activité
antibactérienne et antifongique. En association avec des agents antibiotiques standards
(streptomycine) et antifongiques (amphotéricine B, fluconazole), les AgNPs ont montrées un
effet synergique significatif. Le mélange de propriétés antibactériennes et antifongiques, couplé à
36
Chapitre I Généralités
leur synthèse intrinsèque «verte» et facile, a rendu ces nanoparticules biogènes attractives en
nanomédecine.
Une autre étude [153] a montré une bonne activité catalytique des AgNPs sur la réduction
du bleu de méthylène. Au cours de ces travaux, le miel a été choisi pour la préparation de
nanoparticules d'argent. Par microscopie électronique à transmission (MET), la taille et la forme
des nanoparticules d'argent ont révélé que les particules sont sphériques et monodispersées sans
agglomération majeure, la taille des particules allant de 5 à 25 nm, en outre, les plus grands
niveaux de densité de particules sont de 5 à 10 nm. Le spectrophotomètre UV-Vis et la HPLC
ont été utilisés pour étudier et analyser les performances de dégradation des nanoparticules
d'argent sur le bleu de méthylène. Les résultats montrent que 92% du bleu de méthylène a été
dégradé après 72 h. De plus, plusieurs nouveaux pics sont apparus après le traitement des
échantillons par HPLC.
Des AgNPs ont été synthétisées [154] en utilisant une nouvelle bactérie de Pseudomonas.
Après incubation des cultures de Pseudomonas avec 1 mM d'AgNO3 à 22 °C, ils ont obtenu des
AgNPs en 24 h. La microscopie électronique à balayage électronique (MEB) et la microscopie
électronique à transmission (MET) ont révélé des AgNPs sphériques polydispersées dans la
gamme de tailles de 20 à 70 nm. La taille moyenne était d'environ 50 nm. La spectroscopie
infrarouge à transformée de Fourier (FTIR) a révélé la présence d'une grande quantité de
protéines et d'autres métabolites secondaires. La diffraction des rayons X (XRD) a révélé un
spectre de diffraction cubique à faces centrées de nature cristalline. Une étude comparative entre
les AgNPs synthétisées avec la méthode chimique et biologique (Pseudomonas) a révélé une
activité antibactérienne plus élevée de ce dernier contre les microorganismes pathogènes,
notamment l‘Escherichia coli, les Staphylococcus aureus et les Candida albicans. Cette étude
37
Chapitre I Généralités
rapporte une synthèse efficace, stable et rapide des nanoparticules d‘Ag par la méthode
biologique en utilisant la bactérie Pseudomonas.
38
Chapitre I Généralités
Références bibliographiques
[1] de Jong, W.H., Roszek, B. and Geertsma, R.E., 2005. Nanotechnology in medical
applications: possible risks for human health. RIVM report 265001002.
[2] Trotta, F., & Mele, A., 2019. Nanomaterials: Classification and Properties. Nanosponges,
pp.1-26.
[3] Jeevanandam, J., Barhoum, A., Chan, Y.S., Dufresne, A. and Danquah, M.K., 2018. Review
on nanoparticles and nanostructured materials: history, sources, toxicity and
regulations. Beilstein journal of nanotechnology, 9(1), pp.1050-1074.
[4] Boverhof, D. R., Bramante, C. M., Butala, J. H., Clancy, S. F., Lafranconi, M., West, J., &
Gordon, S. C., 2015. Comparative assessment of nanomaterial definitions and safety
evaluation considerations. Regulatory Toxicology and Pharmacology, 73(1), pp.137-150.
[5] ISO, 2017. International Organization for Standardization. Nanotechnologies-vocabulary-
part 1: Core Terms. ISO/TS 18401:2017.
[6] PUBLICLY AVAILABLE SPECIFICATION, 2007. Terminology for nanomaterials, British
Standards Institution, 36.
[7] Ersöz, M., Işıtan, A. and Balaban, M., 2018. Nanotechnology 1: fundamentals of
nanotechnology, p: 49.
[8] Bayda, S., Adeel, M., Tuccinardi, T., Cordani, M. and Rizzolio, F., 2020. The history of
nanoscience and nanotechnology: From chemical–physical applications to
nanomedicine. Molecules, 25(1), p.112.
[9] M. Alain Obadia, 2008. Les Nanotechnologies N°21 NOR : C.E.S. X08000121V, p: 9.
[10] Yousaf, A.S. and Ali, S., 2008. Why Nanoscience and Nanotechnology? What is there for
us?. Journal of Faculty of Engineering & Technology, 5, pp.11-20.
[11] Whatmore, R.W., 2006. Nanotechnology—what is it? Should we be
worried?. Occupational Medicine, 56(5), pp.295-299.
[12] Nanoscience and Nanotechnologies: Opportunities and Uncertainties, The Royal Society
and Royal Academy of Engineering, London, UK, 2004, p: 5.
[13] Roco, M.C., 2001. From vision to the implementation of the US National
Nanotechnology Initiative. Journal of Nanoparticle Research, 3(1), pp.5-11.
[14] Stylios, G.K., Giannoudis, P.V. and Wan, T., 2005. Applications of nanotechnologies in
medical practice. Injury, 36(4), pp.S6-S13.
39
Chapitre I Généralités
[15] Park, H., Cannizzaro, C., Vunjak-Novakovic, G., Langer, R., Vacanti, C.A. and
Farokhzad, O.C., 2007. Nanofabrication and microfabrication of functional materials for
tissue engineering. Tissue engineering, 13(8), pp.1867-1877.
[16] Ochekpe, N.A., Olorunfemi, P.O. and Ngwuluka, N.C., 2009. Nanotechnology and drug
delivery part 1: background and applications. Tropical journal of pharmaceutical
research, 8(3), pp.265-274.
[17] Nazeruddin, G.M., Prasad, S.R., Shaikh, Y.I. and Prasad, N.R., 2015. A Brief Review:
Science at Nanoscale. International Journal of Nanomaterials and Nanostructures, 1(1),
pp.16-32.
[18] Yamamoto, K., Nanomaterials. Review ⑧ Hitachi Chemical Technical, Report No.55.
[19] Ricaud, M., 2019. Nanomatériaux : définition, identification et caractérisation des
matériaux et des expositions professionnelles associées, Hygiène et sécurité du travail, INRS,
n°256.
[20] Whitesides, G.M., 2005. Nanoscience, nanotechnology, and chemistry. Small, 1(2),
pp.172-179.
[21] Boverhof, D. R., Bramante, C. M., Butala, J. H., Clancy, S. F., Lafranconi, M., West, J.,
& Gordon, S. C., 2015. Comparative assessment of nanomaterial definitions and safety
evaluation considerations. Regulatory Toxicology and Pharmacology, 73(1), pp.137-150.
[22] ISO, 2015. International Organization for Standardization. Nanotechnologies-
vocabulary-part 1: Core Terms. ISO/TS 80004-1:2015.
[23] Del Castillo, A.M.P., 2013. Nanomaterials and workplace health & safety: What are
the issues for workers?. European Trade Union Institute.
[24] Rauscher, H., Mech, A., Gibson, N., Gilliland, D., Held, A., Kestens, V., Koeber, R.,
Linsinger, T. and Stefaniak, E., 2019. Identification of nanomaterials through
measurements. Publications Office of the European Union: Luxembourg.
[25] EC. Commission Recommendation of 18 October 2011 on the Definition of
Nanomaterial (2011/696/EU). http:// eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=
OJ:L:2011:275:0038:0040:EN:PDF
[26] Gaffet, E., 2011. Nanomatériaux : Une revue des définitions, des applications et des
effets sur la santé. Comment implémenter un développement sûr. Comptes Rendus Physique,
12(7), pp.648-658.
[27] Krug, H. F., & Wick, P., 2011. Nanotoxicology: An Interdisciplinary Challenge.
Angewandte Chemie International Edition, 50(6), pp.1260-1278.
40
Chapitre I Généralités
[28] Bernard, D., 2021. Chapitre 9 : Production et utilisation des nanoobjets : évaluation
et gestion des risques. Chimie et expertise. Les Ulis: EDP Sciences, pp. 133-154.
https://doi.org/10.1051/978-2-7598-1996-6-012
[29] Gubala, V., Johnston, L. J., Liu, Z., Krug, H., Moore, C. J., Ober, C. K., Schwenk,
M., Vert, M., 2018. Engineered nanomaterials and human health: Part 1. Preparation,
functionalization and characterization (IUPAC Technical Report). Pure and Applied
Chemistry, 90(8), pp.1283-1324.
[30] Christian, P., Von der Kammer, F., Baalousha, M., & Hofmann, T.,
2008. Nanoparticles: structure, properties, preparation and behaviour in environmental
media. Ecotoxicology, 17(5), pp.326-343.
[31] Khan, I., Saeed, K., & Khan, I., 2017. Nanoparticles: Properties, applications and
toxicities. Arabian Journal of Chemistry. 12(7), pp.908-931.
[32] Zeyons, O., 2008. Etudes des interactions physicochimiques et biologiques entre des
nanoparticules manufacturées et des bactéries de l‘environnement. Thèse de doctorat :
Physicochimie. France : l‘université Paris VI - Pierre et Marie Curie, p: 21.
[33] Ostiguy, C., Roberge, B. and Woods, C., 2010. Les nanoparticules de synthèse:
connaissances actuelles sur les risques et les mesures de prévention en SST (2e édition).
Institut de recherche Robert-Sauvé en santé et en sécurité du travail.
[34] Remédios, C., Rosário, F., & Bastos, V., 2012. Environmental Nanoparticles Interactions
with Plants: Morphological, Physiological, and Genotoxic Aspects. Journal of Botany, 2012,
1-8.
[35] Buzea, C., Pacheco, I.I. and Robbie, K., 2007. Nanomaterials and nanoparticles: sources
and toxicity. Biointerphases, 2(4), pp.MR17-MR71.
[36] Naseer, B., Srivastava, G., Qadri, O. S., Faridi, S. A., Islam, R., & Younis, K.,
2018. Importance and Health Hazards of Nanoparticles Used in the Food Industry.
Nanotechnology Reviews, 7(6), pp. 623-641.
[37] Griffin, S., Masood, M.I., Nasim, M.J., Sarfraz, M., Ebokaiwe, A.P., Schäfer, K.H.,
Keck, C.M. and Jacob, C., 2018. Natural nanoparticles: A particular matter inspired by
nature. Antioxidants, 7(1), p.3.
[38] Dutta, R., & Brahmachary, R.L., 2009. Natural nanoparticles: an overview. Research
gate.
[39] Waychunas, G. A., 2009. Natural nanoparticle structure, properties and reactivity from X-
ray studies. Powder Diffraction, 24(02), pp.89-93.
41
Chapitre I Généralités
[40] Peters, A., Wichmann, H. E., Tuch, T., Heinrich, J., & Heyder, J., 1997. Respiratory
effects are associated with the number of ultrafine particles. American Journal of Respiratory
and Critical Care Medicine, 155(4), pp.1376-1383.
[41] Lanone, S. and Boczkowski, J., 2010. Les sources de nanoparticules. Revue française
d'allergologie, 50(3), pp.211-213.
[42] Kumar, N. and Kumbhat, S., 2016. Essentials in nanoscience and nanotechnology (Vol.
486). Hoboken: Wiley.
[43] Morales, R., 2018. Nanomaterials – Do the benefits outweigh their risks.
[44] Bakshi, S., He, Z. L., & Harris, W. G., 2014. Natural Nanoparticles: Implications for
Environment and Human Health. Critical Reviews in Environmental Science and
Technology, 45(8), pp.861-904.
[45] Sadik, O. A., 2013. Anthropogenic nanoparticles in the environment. Environ. Sci.:
Processes Impacts, 15(1), pp.19-20.
[46] Kumar, H., Venkatesh, N., Bhowmik, H. and Kuila, A., 2018. Metallic nanoparticle: a
review. Biomedical Journal of Scientific & Technical Research, 4(2), pp.3765-3775.
[47] Pal, S.L., Jana, U., Manna, P.K., Mohanta, G.P. and Manavalan, R., 2011. Nanoparticle:
An overview of preparation and characterization. Journal of applied pharmaceutical
science, 1(6), pp.228-234.
[48] Parveen, K., Banse, V. and Ledwani, L., 2016, April. Green synthesis of nanoparticles:
their advantages and disadvantages. In AIP conference proceedings. AIP Publishing LLC.
1724(1), p.020048.
[49] Hoet, P.H., Brüske-Hohlfeld, I. and Salata, O.V., 2004. Nanoparticles–known and
unknown health risks. Journal of nanobiotechnology, 2(1), pp.1-15.
[50] Dhand, C., Dwivedi, N., Loh, X.J., Ying, A.N.J., Verma, N.K., Beuerman, R.W.,
Lakshminarayanan, R. and Ramakrishna, S., 2015. Methods and strategies for the synthesis
of diverse nanoparticles and their applications: a comprehensive overview. Rsc
Advances, 5(127), pp.105003-105037.
[51] Gulati, S., Sachdeva, M., & Bhasin, K. K., 2018. Various synthetic routes for the
preparation of nanoparticles. In AIP Conference Proceedings, 1953(1), p.030215.
[52] Khanna, P., Kaur, A., & Goyal, D., 2019. Algae-based metallic nanoparticles: Synthesis,
characterization and applications. Journal of Microbiological Methods, 163, p.105656.
[53] Silva, G. A., 2006. Neuroscience nanotechnology: progress, opportunities and challenges.
Nature Reviews Neuroscience, 7(1), pp.65-74.
42
Chapitre I Généralités
[54] Liu, Y., Mai, S., Li, N., Yiu, C. K. Y., Mao, J., Pashley, D. H., & Tay, F. R.,
2011. Differences between top-down and bottom-up approaches in mineralizing thick,
partially demineralized collagen scaffolds. Acta Biomaterialia, 7(4), pp.1742-1751.
[55] Ayesha Arshad., 2017. Bacterial Synthesis and Applications of Nanoparticles. Nano
Science & Nano Technology: an Indian Journal, 11(2), p.119.
[56] Manoj Singh, S. Manikandan and A.K. Kumaraguru., 2011. Nanoparticles: A New
Technology with Wide Applications. Research Journal of Nanoscience and Nanotechnology,
1, p.1-11.
[57] Agarwal, H., Kumar, S.V. and Rajeshkumar, S., 2017. A review on green synthesis of
zinc oxide nanoparticles–An eco-friendly approach. Resource-Efficient Technologies, 3(4),
pp.406-413.
[58] Saxena, A., Tripathi, R. M., Zafar, F., & Singh, P., 2012. Green synthesis of silver
nanoparticles using aqueous solution of Ficus benghalensis leaf extract and characterization
of their antibacterial activity. Materials Letters, 67(1), pp.91-94.
[59] Suresh, D., Nethravathi, P. C., Udayabhanu, Rajanaika, H., Nagabhushana, H., &
Sharma, S. C., 2015. Green synthesis of multifunctional zinc oxide (ZnO) nanoparticles
using Cassia fistula plant extract and their photodegradative, antioxidant and antibacterial
activities. Materials Science in Semiconductor Processing, 31, pp.446-454.
[60] Diallo, A., Ngom, B. D., Park, E., & Maaza, M., 2015. Green synthesis of ZnO
nanoparticles by Aspalathus linearis : Structural & optical properties. Journal of Alloys and
Compounds, 646, pp.425-430.
[61] Sharma, D., Sabela, M. I., Kanchi, S., Bisetty, K., Skelton, A. A., & Honarparvar, B.,
2018. Green synthesis, characterization and electrochemical sensing of silymarin by ZnO
nanoparticles: Experimental and DFT studies. Journal of Electroanalytical Chemistry, 808,
pp.160-172.
[62] Iravani, S., 2011. Green synthesis of metal nanoparticles using plants. Green Chemistry,
13(10), pp.2638-2650.
[63] Gnanasangeetha, D. and SaralaThambavani, D., 2013. One pot synthesis of zinc oxide
nanoparticles via chemical and green method. Res. J. Mater. Sci, 2320, p.6055.
[64] Waris, A., Din, M., Ali, A., Afridi, S., Baset, A., Khan, A.U. and Ali, M., 2021. Green
fabrication of Co and Co3O4 nanoparticles and their biomedical applications: A
review. Open Life Sciences, 16(1), pp.14-30.
[65] Thunugunta, T., Reddy, A. C., & Reddy D.C., L., 2015. Green synthesis of nanoparticles:
current prospectus. Nanotechnology Reviews, 4(4).
43
Chapitre I Généralités
[66] Aromal, S. A., Vidhu, V. K., & Philip, D., 2012. Green synthesis of well-dispersed gold
nanoparticles using Macrotyloma uniflorum. Spectrochimica Acta Part A: Molecular and
Biomolecular Spectroscopy, 85(1), pp.99-104.
[67] Ingale, A.G. and Chaudhari, A.N., 2013. Biogenic synthesis of nanoparticles and
potential applications: an eco-friendly approach. J Nanomed Nanotechol, 4(165), pp.1-7.
[68] Jadoun, S., Arif, R., Jangid, N. K., & Meena, R. K., 2020. Green synthesis of
nanoparticles using plant extracts: a review. Environmental Chemistry Letters. 19, pp.355-
374.
[69] El-Kassas, H.Y. and El-Sheekh, M.M., 2014. Cytotoxic activity of biosynthesized gold
nanoparticles with an extract of the red seaweed Corallina officinalis on the MCF-7 human
breast cancer cell line. Asian Pacific journal of cancer prevention, 15(10), pp.4311-4317.
[70] Singh, P., Kim, Y.J., Zhang, D. and Yang, D.C., 2016. Biological synthesis of
nanoparticles from plants and microorganisms. Trends in biotechnology, 34(7), pp.588-599.
[71] Sathishkumar, G., Gobinath, C., Karpagam, K., Hemamalini, V., Premkumar, K. and
Sivaramakrishnan, S., 2012. Phyto-synthesis of silver nanoscale particles using Morinda
citrifolia L. and its inhibitory activity against human pathogens. Colloids and Surfaces B:
Biointerfaces, 95, pp.235-240.
[72] Mittal, A.K., Tripathy, D., Choudhary, A., Aili, P.K., Chatterjee, A., Singh, I.P. and
Banerjee, U.C., 2015. Bio-synthesis of silver nanoparticles using Potentilla fulgens Wall. ex
Hook. and its therapeutic evaluation as anticancer and antimicrobial agent. Materials Science
and Engineering: C, 53, pp.120-127.
[73] Anbu, P., Gopinath, S. C., & Jayanthi, S., 2020. Synthesis of gold nanoparticles using
Platycodon grandiflorum extract and its antipathogenic activity under optimal conditions.
Nanomaterials and Nanotechnology, 10, pp.1-9.
[74] Narasaiah, P., Kumar Mandal, B., & Sarada, N. C., 2017. Green synthesis of Pd NPs
from Pimpinella tirupatiensis plant extract and their application in photocatalytic activity dye
degradation. IOP Conference Series: Materials Science and Engineering, 263, p.022013.
[75] Shi, L.-B., Tang, P.-F., Zhang, W., Zhao, Y.-P., Zhang, L.-C., & Zhang, H., 2017. Green
synthesis of CuO nanoparticles using Cassia auriculata leaf extract and in vitro evaluation of
their biocompatibility with rheumatoid arthritis macrophages (RAW 264.7). Tropical Journal
of Pharmaceutical Research, 16(1), p.185.
[76] Dudhane, A.A., Waghmode, S.R., Dama, L.B., Mhaindarkar, V.P., Sonawane, A. and
Katariya, S., 2019. Synthesis and Characterization of Gold Nanoparticles using Plant Extract
44
Chapitre I Généralités
of Terminalia arjuna with Antibacterial Activity. International Journal of Nanoscience and
Nanotechnology, 15(2), pp.75-82.
[77] KSV, G., 2017. Green Synthesis of Iron Nanoparticles Using Green Tea leaves Extract.
Journal of Nanomedicine & Biotherapeutic Discovery, 07(01), p.151.
[78] Parthasarathy, S., Jayacumar, S., Chakraborty, S., Soundararajan, P., Joshi, D., Gangwar,
K., Bhattacharjee, A. and Venkatesh, M.P.D., 2020. Fabrication and characterization of
copper nanoparticles by green synthesis approach using Plectranthus amboinicus leaves
extract.
[79] Dhand, C., Dwivedi, N., Loh, X.J., Ying, A.N.J., Verma, N.K., Beuerman, R.W.,
Lakshminarayanan, R. and Ramakrishna, S., 2015. Methods and strategies for the synthesis
of diverse nanoparticles and their applications: a comprehensive overview. Rsc
Advances, 5(127), pp.105003-105037.
[80] Zhang, X., Yan, S., Tyagi, R.D. and Surampalli, R.Y., 2011. Synthesis of nanoparticles
by microorganisms and their application in enhancing microbiological reaction
rates. Chemosphere, 82(4), pp.489-494.
[81] Saleh, M.N. and Alwan, S.K., 2020, November. Bio-synthesis of silver nanoparticles
from bacteria Klebsiella pneumonia: Their characterization and antibacterial studies.
In Journal of Physics: Conference Series, 1664(1), p.012115.
[82] Kushwaha, A., Singh, V.K., Bhartariya, J., Singh, P. and Yasmeen, K., 2015. Isolation
and identification of E. coli bacteria for the synthesis of silver nanoparticles: characterization
of the particles and study of antibacterial activity. Eur J Exp Biol, 5(1), pp.65-70.
[83] Lengke, M.F., Fleet, M.E. and Southam, G., 2007. Synthesis of palladium nanoparticles
by reaction of filamentous cyanobacterial biomass with a palladium (II) chloride
complex. Langmuir, 23(17), pp.8982-8987.
[84] Alam, H., Khatoon, N., Khan, M. A., Husain, S. A., Saravanan, M., & Sardar, M.,
2019. Synthesis of Selenium Nanoparticles Using Probiotic Bacteria Lactobacillus
acidophilus and Their Enhanced Antimicrobial Activity Against Resistant Bacteria. Journal
of Cluster Science. 31(5), pp.1003-1011.
[85] Nanda, A., & Saravanan, M., 2009. Biosynthesis of silver nanoparticles from
Staphylococcus aureus and its antimicrobial activity against MRSA and MRSE.
Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine, 5(4), pp.452-456.
[86] Sabir, S., Zahoor, M.A., Waseem, M., Siddique, M.H., Shafique, M., Imran, M., Hayat,
S., Malik, I.R. and Muzammil, S., 2020. Biosynthesis of ZnO Nanoparticles Using Bacillus
45
Chapitre I Généralités
Subtilis: Characterization and Nutritive Significance for Promoting Plant Growth in Zea
mays L. Dose-Response, 18(3), p.1559325820958911.
[87] Yang, J., Wang, Q., Wang, C., Yang, R., Ahmed, M., Kumaran, S., Veluf, P., Li, B.,
2020. Pseudomonas aeruginosa synthesized silver nanoparticles inhibit cell proliferation and
induce ROS mediated apoptosis in thyroid cancer cell line (TPC1). Artificial Cells,
Nanomedicine, and Biotechnology, 48(1), pp.800-809.
[88] Abd El-Aziz, M., Badr, Y., & Mahmoud, M. A., 2007. Biosynthesis of Gold
Nanoparticles Using Pseudomonas Aeruginosa. AIP Conference Proceedings.
[89] Yadav, A., Theivasanthi, T., Paul, P.K. and Upadhyay, K.C., 2015. Extracellular
biosynthesis of silver nanoparticles from plant growth promoting rhizobacteria Pseudomonas
sp. arXiv preprint arXiv:1511.03130.
[90] Almaary, K. S., Sayed, S. R. M., Abd-Elkader, O. H., Dawoud, T. M., El Orabi, N. F., &
Elgorban, A. M., 2019. Complete green synthesis of Silver-Nanoparticles applying seed-
borne Penicillium duclauxii. Saudi Journal of Biological Sciences. 27(5), pp.1333-1339.
[91] Kumar, S.A., Peter, Y.A. and Nadeau, J.L., 2008. Facile biosynthesis, separation and
conjugation of gold nanoparticles to doxorubicin. Nanotechnology, 19(49), p.495101.
[92] Mishra, A., Tripathy, S.K. and Yun, S.I., 2012. Fungus mediated synthesis of gold
nanoparticles and their conjugation with genomic DNA isolated from Escherichia coli and
Staphylococcus aureus. Process Biochemistry, 47(5), pp.701-711.
[93] Ahmad, T., Wani, I.A., Manzoor, N., Ahmed, J. and Asiri, A.M., 2013. Biosynthesis,
structural characterization and antimicrobial activity of gold and silver
nanoparticles. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 107, pp.227-234.
[94] Tarafdar, J.C., Raliya, R. and Rathore, I., 2012. Microbial synthesis of phosphorous
nanoparticle from tri-calcium phosphate using Aspergillus tubingensis TFR-5. Journal of
Bionanoscience, 6(2), pp.84-89.
[95] Sarkar, J., Ray, S., Chattopadhyay, D., Laskar, A. and Acharya, K., 2012. Mycogenesis
of gold nanoparticles using a phytopathogen Alternaria alternata. Bioprocess and biosystems
engineering, 35(4), pp.637-643.
[96] Birla, S.S., Tiwari, V.V., Gade, A.K., Ingle, A.P., Yadav, A.P. and Rai, M.K., 2009.
Fabrication of silver nanoparticles by Phoma glomerata and its combined effect against
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus. Letters in Applied
Microbiology, 48(2), pp.173-179.
46
Chapitre I Généralités
[97] Agnihotri, M., Joshi, S., Kumar, A.R., Zinjarde, S. and Kulkarni, S., 2009. Biosynthesis
of gold nanoparticles by the tropical marine yeast Yarrowia lipolytica NCIM 3589. Materials
Letters, 63(15), pp.1231-1234.
[98] Abdeen, S. & Geo, S. & Sukanya, S. & P.K, Praseetha., 2014. Biosynthesis of silver
nanoparticles from Actinomycetes for therapeutic applications. Int J Nano Dimens, 5,
pp.155-162.
[99] Składanowski, M., Wypij, M., Laskowski, D., Golińska, P., Dahm, H., & Rai, M.,
2016. Silver and gold nanoparticles synthesized from Streptomyces sp. isolated from acid
forest soil with special reference to its antibacterial activity against pathogens. Journal of
Cluster Science, 28(1), pp.59-79.
[100] Kathiraven, T., Sundaramanickam, A., Shanmugam, N., & Balasubramanian, T.,
2014. Green synthesis of silver nanoparticles using marine algae Caulerpa racemosa and their
antibacterial activity against some human pathogens. Applied Nanoscience, 5(4), pp.499-504.
[101] Kalabegishvili, T., Kirkesali, E. and Rcheulishvili, A., 2012. Synthesis of gold
nanoparticles by blue-green algae Spirulina platensis (No. JINR-E--14-2012-31). Frank Lab.
of Neutron Physics.
[102] Bhuyar, P., Rahim, M.H.A., Sundararaju, S., Ramaraj, R., Maniam, G.P. and Govindan,
N., 2020. Synthesis of silver nanoparticles using marine macroalgae Padina sp. and its
antibacterial activity towards pathogenic bacteria. Beni-Suef University Journal of Basic and
Applied Sciences, 9(1), pp.1-15.
[103] El-Khateeb, A.Y., Hamed, E., Ibrahim, F.Y. and Hamed, S.E., 2019. Eco-Friendly
Synthesis of Selenium and Zinc Nanoparticles with Biocompatible Sargassum latifolium
Algae Extract in Preservation of Edible Oils. Journal of Food and Dairy Sciences, 10(5),
pp.141-146.
[104] Fang, X., Wang, Y., Wang, Z., Jiang, Z. and Dong, M., 2019. Microorganism assisted
synthesized nanoparticles for catalytic applications. Energies, 12(1), p.190.
[105] Reverberi, A., Vocciante, M., Lunghi, E., Pietrelli, L. and Fabiano, B., 2017. New trends
in the synthesis of nanoparticles by green methods. Chemical Engineering Transactions, 61,
pp.667-672.
[106] Sastry, Murali & Ahmad, Absar & Khan, M & Kumar, Rajiv., 2003. Biosynthesis of
metal nanoparticles using fungi and actinomycete. Current Science, 85, pp.162-170.
[107] Castro-Longoria, E., Moreno-Velasquez, S.D., Vilchis-Nestor, A.R., Arenas-Berumen, E.
and Avalos-Borja, M., 2012. Production of platinum nanoparticles and nanoaggregates using
Neurospora crassa. Journal of microbiology and biotechnology, 22(7), pp.1000-1004.
47
Chapitre I Généralités
[108] Rai, M., Bonde, S., Golinska, P., Trzcińska-Wencel, J., Gade, A., Abd-Elsalam, K.,
Shende, S., Gaikwad, S. and Ingle, A., 2021. Fusarium as a novel fungus for the synthesis of
nanoparticles: mechanism and applications. Journal of Fungi, 7(2), p.139.
[109] Boroumand Moghaddam, A., Namvar, F., Moniri, M., Azizi, S. and Mohamad, R., 2015.
Nanoparticles biosynthesized by fungi and yeast: a review of their preparation, properties,
and medical applications. Molecules, 20(9), pp.16540-16565.
[110] Kowshik, M., Deshmukh, N., Vogel, W., Urban, J., Kulkarni, S.K. and Paknikar, K.M.,
2002. Microbial synthesis of semiconductor CdS nanoparticles, their characterization, and
their use in the fabrication of an ideal diode. Biotechnology and bioengineering, 78(5),
pp.583-588.
[111] Mourato, A., Gadanho, M., Lino, A. R., & Tenreiro, R., 2011. Biosynthesis of Crystalline
Silver and Gold Nanoparticles by Extremophilic Yeasts. Bioinorganic Chemistry and
Applications, 2011, pp.1-8.
[112] Moghaddam, A. B., Moniri, M., Azizi, S., Rahim, R. A., Ariff, A. B., Saad, W. Z.,
Namvar, F., Navader, M., Mohamad, R., 2017. Biosynthesis of ZnO Nanoparticles by a New
Pichia kudriavzevii Yeast Strain and Evaluation of Their Antimicrobial and Antioxidant
Activities. Molecules, 22(6), p.872.
[113] Chaudhary, R., Nawaz, K., Khan, A.K., Hano, C., Abbasi, B.H. and Anjum, S., 2020. An
Overview of the Algae-Mediated Biosynthesis of Nanoparticles and Their Biomedical
Applications. Biomolecules, 10(11), p.1498.
[114] Kumari, S., Tehri, N., Gahlaut, A., & Hooda, V., 2020. Actinomycetes mediated
synthesis, characterization, and applications of metallic nanoparticles. Inorganic and Nano-
Metal Chemistry, pp.1-10.
[115] Tsekhmistrenko, S., Bityutskii, V., Tsekhmistrenko, O., Horalskyi, L., Tymoshok, N. and
Spivak, M., 2020. Bacterial synthesis of nanoparticles: A green approach. Biosystems
Diversity, 28(1), pp.9-17.
[116] Ceylan, A., Rumaiz, A. K., & Ismat Shah, S., 2007. Inert gas condensation of evaporated
Ni and laser ablated CoO. Journal of Applied Physics, 101(9), p.094302.
[117] Lee, K.X., Shameli, K., Yew, Y.P., Teow, S.Y., Jahangirian, H., Rafiee-Moghaddam, R.
and Webster, T.J., 2020. Recent developments in the facile bio-synthesis of gold
nanoparticles (AuNPs) and their biomedical applications. International journal of
nanomedicine, 15, p.275.
48
Chapitre I Généralités
[118] National Center for Biotechnology Information., 2021. PubChem Element Summary for
AtomicNumber 47, Silver. Retrieved April 17, 2021
from https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/element/Silver.
[119] M. Chauvel Romain, 2018. « Application des nanoparticules d‘argent en thérapeutique »,
Université Claude Bernard - Lyon 1, thèse de doctorat, p: 31.
[120] Sivaguru, P., & Bi, X., 2018. Introduction to Silver Chemistry. Silver Catalysis in
Organic Synthesis, pp.132.
[121] Britannica, The Editors of Encyclopaedia. "Silver". Encyclopedia Britannica, 13 May.
2020, https://www.britannica.com/science/silver. Accessed 17 April 2021.
[122] Hemmerlin, M., 2014. Toxicité de deux types de nanoparticules d'argent sur la
cyanobactérie modèle: Synechococcus elongatus PCC 7942 (Doctoral dissertation,
Université de Lorraine).
[123] Tran, Q.H. and Le, A.T., 2013. Silver nanoparticles: synthesis, properties, toxicology,
applications and perspectives. Advances in Natural Sciences: Nanoscience and
Nanotechnology, 4(3), p.033001.
[124] Yusuf, M., 2019. Silver Nanoparticles: Synthesis and Applications. Handbook of
Ecomaterials, pp.2343-2356.
[125] Syafiuddin, A., Salim, M.R., Beng Hong Kueh, A., Hadibarata, T. and Nur, H., 2017. A
review of silver nanoparticles: research trends, global consumption, synthesis, properties, and
future challenges. Journal of the Chinese Chemical Society, 64(7), pp.732-756.
[126] Calderón-Jiménez, B., Johnson, M.E., Montoro Bustos, A.R., Murphy, K.E., Winchester,
M.R. and Vega Baudrit, J.R., 2017. Silver nanoparticles: technological advances, societal
impacts, and metrological challenges. Frontiers in chemistry, 5, p.6.
[127] Verma, P. and Maheshwari, S.K., 2019. Applications of Silver nanoparticles in diverse
sectors. International Journal of Nano Dimension, 10(1), pp.18-36.
[128] Nurani, S.J., Saha, C.K., Khan, M.A.R. and Sunny, S.M.H., 2015. Silver nanoparticles
synthesis, properties, applications and future perspectives: A short review. Journal of
Electrical and Electronics Engineering, 10(6), pp.117-126.
[129] Al Rihaymee, Luma Majeed Ahmed., 2013. "Enhanced Photocatalytic Activity of
Titanium Dioxide Nanoparticles by Metal Deposition." PhD diss., College of Science
Chemistry Department Enhanced Photocatalytic Activity of Titanium Dioxide Nanoparticles
by Metal Deposition A Thesis Submitted to the Council of the College of Science, University
of Babylon.
49
Chapitre I Généralités
[130] Zulkifili, A.N.B., 2018. Alkali Metal Bismuthate and Bismuth Vanadate Microstructure
for Visible Light Driven Photocatalytic Activity (Doctoral dissertation, Shibaura Institute of
Technology).
[131] Beydoun, D., Amal, R., Low, G. and McEvoy, S., 1999. Role of nanoparticles in
photocatalysis. Journal of Nanoparticle Research, 1(4), pp.439-458.
[132] Peiris, S., McMurtrie, J., & Zhu, H.-Y., 2016. Metal nanoparticle photocatalysts:
emerging processes for green organ132ic synthesis. Catalysis Science & Technology, 6(2),
pp.320-338.
[133] Rajbongshi, B. M., 2020. Photocatalyst: mechanism, challenges, and strategy for organic
contaminant degradation. Handbook of Smart Photocatalytic Materials, pp.127-149.
[134] Miclescu, A. and Wiklund, L., 2010. Methylene blue, an old drug with new indications. J
Rom Anest Terap Int, 17(1), pp.35-41.
[135] Ghazali, S.N.B., 2013. Adsorption Of Methylene Blue Onto Xanthogenated-Modified
Chitosan Microbeads, p: 13.
[136] Schirmer, R. H., Adler, H., Pickhardt, M., & Mandelkow, E., 2011. ―Lest we forget you
— methylene blue ….‖ Neurobiology of Aging, 32(12), pp.2325.e7-2325.e16.
[137] Amarah, J.O.M., 2015. Removal of Methylene Blue from Industrial Wastewater in
Palestine Using Polysiloxane Surface Modified with Bipyrazolic Tripodal
Receptor (Doctoral dissertation), p: 9.
[138] Lee, N.-Y., Ko, W.-C., & Hsueh, P.-R., 2019. Nanoparticles in the Treatment of
Infections Caused by Multidrug-Resistant Organisms. Frontiers in Pharmacology, 10.
p.1153.
[139] Wang, L., Hu, C., & Shao, L., 2017. The antimicrobial activity of nanoparticles: present
situation and prospects for the future. International Journal of Nanomedicine, Volume 12,
pp.1227-1249.
[140] Slavin, Y.N., Asnis, J., Häfeli, U.O. and Bach, H., 2017. Metal nanoparticles:
understanding the mechanisms behind antibacterial activity. Journal of nanobiotechnology,
15(1), pp.1-20.
[141] Vanlalveni, C., Lallianrawna, S., Biswas, A., Selvaraj, M., Changmai, B. and Rokhum,
S.L., 2021. Green synthesis of silver nanoparticles using plant extracts and their
antimicrobial activities: a review of recent literature. RSC Advances, 11(5), pp.2804-2837.
[142] El Badawy, A. M., Silva, R. G., Morris, B., Scheckel, K. G., Suidan, M. T., & Tolaymat,
T. M., 2011. Surface Charge-Dependent Toxicity of Silver Nanoparticles. Environmental
Science & Technology, 45(1), pp.283-287.
50
Chapitre I Généralités
[143] Zhang, X.F., Liu, Z.G., Shen, W. and Gurunathan, S., 2016. Silver nanoparticles:
synthesis, characterization, properties, applications, and therapeutic approaches.
International journal of molecular sciences, 17(9), p.1534.
[144] Rai, M., Yadav, A., & Gade, A., 2009. Silver nanoparticles as a new generation of
antimicrobials. Biotechnology Advances, 27(1), pp.76-83.
[145] Sondi, I., & Salopek-Sondi, B., 2004. Silver nanoparticles as antimicrobial agent: a case
study on E. coli as a model for Gram-negative bacteria. Journal of Colloid and Interface
Science, 275(1), pp.177-182.
[146] Anees Ahmad, S., Sachi Das, S., Khatoon, A., Tahir Ansari, M., Afzal, M., Saquib
Hasnain, M., & Kumar Nayak, A., 2020. Bactericidal Activity of Silver Nanoparticles: A
Mechanistic Review. Materials Science for Energy Technologies.
[147] Prabhu, S., & Poulose, E. K., 2012. Silver nanoparticles: mechanism of antimicrobial
action, synthesis, medical applications, and toxicity effects. International Nano Letters, 2(1),
pp.1-10.
[148] Velmurugan, P., Park, J.H., Lee, S.M., Jang, J.S., Lee, K.J., Han, S.S., Lee, S.H., Cho, M.
and Oh, B.T., 2015. Synthesis and characterization of nanosilver with antibacterial properties
using Pinus densiflora young cone extract. Journal of Photochemistry and Photobiology B:
Biology, 147, pp.63-68.
[149] Lok, C.-N., Ho, C.-M., Chen, R., He, Q.-Y., Yu, W.-Y., Sun, H., Tam, P.K.H., Chiu, J.F.,
Che, C.-M., 2006. Proteomic Analysis of the Mode of Antibacterial Action of Silver
Nanoparticles. Journal of Proteome Research, 5(4), pp.916-924.
[150] Singh, D., Rathod, V., Ninganagouda, S., Hiremath, J., Singh, A. K., & Mathew, J., 2014.
Optimization and Characterization of Silver Nanoparticle by Endophytic FungiPenicilliumsp.
Isolated fromCurcuma longa(Turmeric) and Application Studies against MDRE. coliandS.
aureus. Bioinorganic Chemistry and Applications, 2014, pp.1-8.
[151] Ahamad, I., Aziz, N., Zaki, A. and Fatma, T., 2021. Synthesis and characterization of
silver nanoparticles using Anabaena variabilis as a potential antimicrobial agent. Journal of
Applied Phycology, 33(2), pp.829-841.
[152] Rónavári, A.; Igaz, N.; Adamecz, D.I.; Szerencsés, B.; Molnar, C.; Kónya, Z.; Pfeiffer, I.;
Kiricsi, M., 2021. Green Silver and Gold Nanoparticles: Biological Synthesis Approaches
and Potentials for Biomedical Applications. Molecules, 26(4), pp.26-844.
[153] Al-Zaban, M.I., Mahmoud, M.A. and AlHarbi, M.A., 2021. Catalytic degradation of
methylene blue using silver nanoparticles synthesized by honey. Saudi Journal of Biological
Sciences, 28(3), pp.2007-2013.
51
Chapitre I Généralités
[154] John, M.S., Nagoth, J.A., Ramasamy, K.P., Mancini, A., Giuli, G., Natalello, A.,
Ballarini, P., Miceli, C. and Pucciarelli, S., 2020. Synthesis of bioactive silver nanoparticles
by a Pseudomonas strain associated with the antarctic psychrophilic protozoon Euplotes
focardii. Marine drugs, 18(1), p.38.
52
Chapitre II
Matériels et méthodes
Chapitre II Matériels et Méthodes
Dans ce chapitre, nous allons décrire la méthodologie utilisée pour la synthèse des
nanoparticules d‘argent et présenter les différents paramètres opérationnels pour optimiser la
synthèse. Nous allons ainsi présenter la méthode de photocatalyse et l‘activité antibactérienne.
Quatre souches de référence ATCC (American Type Culture Collection) fournies par le
laboratoire de bactériologie médical de laboratoire interne de l‘hôpital "Mohamed Boudhiaf"
Ouargla, ont été utilisées dans cette étude : Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 à la fois pour
la synthèse des AgNPs et l‘activité antibactérienne et Listeria monocytogenes ATCC 13932,
Escherichia coli ATCC 25922 et Bacillus subtilis ATCC 14531 pour l‘activité antibactérienne
seulement.
II.3. Méthodes
La réalisation de ce test a été faite par le protocole décrite par Peiris et al. [1].
54
Chapitre II Matériels et Méthodes
La solution d‘AgNPs obtenue après 48 h est placée dans la centrifugeuse à 9000 tr/min
pendant 10 minutes. Le culot obtenu a été soigneusement nettoyé avec de l'eau distillé, et ce
mélange a été placé dans l‘ultrason pendant une minute, ensuit la solution a été placée dans une
centrifugeuse à 9000 tr/min pendant 10 minutes, ce procédé a été répété 3 fois. Après
centrifugation, une petite quantité d'éthanol a été mélangé avec des pastilles, ce mélange a été
placé dans l‘ultrason puis séché à l'étuve. Les AgNPs purifiées ont été séchées et obtenues sous
forme de poudre (Figure II.2).
La réaction de biosynthèse des AgNPs est très sensible et dépend de certains paramètres
opérationnels importants [4]. Ce sont des facteurs qui influencent la synthèse des NPs quelle que
soit la technique utilisée [5]. Dans cette étude, l‘évaluation de plusieurs facteurs expérimentaux
importants, y compris le pH, la concentration de solution d‘AgNO3, le temps d‘incubation, le
rapport de volume, l‘agitation, la lumière, et l‘aération à une température fixe de 37 °C.
II.3.2.1. Effet du pH
Cet effet est réalisé par le protocole décrit par Khan et al. [6]. 8 ml de surnageant est
incubé avec 2 ml d‘AgNO3 pendant 48 h à cinq pH différents soit 2, 4, 6, 8, 10. Des solutions
d‘acide chlorhydrique (HCl) et d'hydroxyde de sodium (NaOH) ont été utilisées pour ajuster le
pH. La synthèse des AgNPs a été confirmée par analyse spectrométrique UV-Visible.
Cet effet est réalisé suivant le protocole de Khandel et al. [7]. Pour étudier l'effet de la
concentration de la solution d‘AgNO3 sur la synthèse des AgNPs, diverses concentrations
d‘AgNO3 (0.5, 1, 2 et 10 mM) ont été utilisées en gardant les deux autres paramètres fixes. Au
cours de la synthèse, 2 ml de chaque concentration et 8 ml de surnageant ont été prélevés et
incubés pendant 48 h. La synthèse des NPs d'Ag a été confirmée par une analyse spectrométrique
UV-Visible.
Cet effet est réalisé suivant le protocole d‘Arya et al. [4]. Tout d'abord, pour
l'optimisation du temps d‘incubation, les réactions ont été effectuées pour trois différentes durées
de temps, 24h, 48h et 72h, en maintenant le volume de d‘AgNO3 de 2ml et le volume de
surnageant de 8 ml pour former la solution mère. Après cela, toutes les réactions ont été
contrôlées par un spectrophotomètre UV-visible.
56
Chapitre II Matériels et Méthodes
Cet effet est réalisé suivant le protocole d‘Alzahrani et al. [8]. Différents rapports de
surnageant et de solution d‘AgNO3 ont été étudiés, 100, 80:20, 60:40, 40:60 et 20:80 (surnageant
: solution d‘AgNO3) pendant 48h afin de trouver la production maximale d‘AgNPs. La synthèse
des NPs d'Ag a été confirmée par une analyse spectrométrique UV-Visible.
La dégradation du bleu de méthylène par les AgNPs s a été effectuée selon le protocole
de Kumar et al. [9].
II.3.3.1. Principe
8 mg de colorant bleu de méthylène a été ajouté à 100 ml d'eau distillée (0,01 mM).
Environ 30 mg de nanoparticules d'argent ont été ajoutés à 10 ml de solution de colorant bleu de
méthylène. Le contrôle a également été maintenu sans ajouter les nanoparticules d'argent. Avant
l'exposition aux rayonnements, la solution a été bien mélangée pendant quelques minutes dans
un agitateur. Ensuite, il a été appliqué et examiné à des intervalles spécifiques (1,3 et 5 min), les
suspensions ont été ensuite centrifugées pendant quelques secondes et utilisés pour évaluer la
photolyse du colorant. Le spectre d'absorption du surnageant a ensuite été mesuré avec un
spectrophotomètre UV-Visible à différentes longueurs d'onde. La concentration de colorant
pendant l'hydrolyse a été calculée par la valeur d'absorbance à environ 660 nm [9].
57
Chapitre II Matériels et Méthodes
58
Chapitre II Matériels et Méthodes
Règne Bacteria
Embranchement Prokaryota
Division Proteobacteria
Classe Gammaproteobacteria
Ordre pseudomonadales
Famille Pseudomonadaceae
Genre Pseudomonas
Espèce Pseudomonas aeruginosa
Figure II. 4: Image de Listeria monocytogenes: (A) Observation de Listeria monocytogenes par
microscope optique [20], (B) Observation de Listeria monocytogenes par microscope
électronique [21].
59
Chapitre II Matériels et Méthodes
Règne Eubactéries
Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordre Bacillalles
Famille Listeriaceae
Genre Listeria
Espèce Listeria monocytogenes
Escherichia coli est une bactérie gram-négative en forme de bâtonnet. Elle mesure 1-3 x
0,4-0,7 µm et 0,6 à 0,7 µm de volume, et se trouve disposée seule ou en paires. Certaines
souches sont mobiles à cause des flagelles péritriches. Elles sont des anaérobies facultatifs et
non sporulants. Sa croissance se produit sur une large plage de températures de 15 à 45 °C [24].
Cette bactérie habite principalement dans le tractus intestinal inférieur des animaux à sang
chaud, y compris les humains, et est souvent rejetée dans l'environnement par les excréments ou
les effluents d'eaux usées [25]. La plupart des souches sont inoffensives, mais certaines
acquièrent des entérotoxines ou des facteurs d'invasion de bactériophages ou d'ADN plasmidique
et deviennent pathogènes [26].
60
Chapitre II Matériels et Méthodes
Règne Bacteria
Embranchement Proteobacteria
Classe Gamma proteobacteria
Ordre Enterobacteriales
Famille Enterobacteriaceae
Genre Escherichia
Espèce Escherichia coli
Bacillus subtilis est une bactérie du sol, à Gram positif, mobile par des flagelles
peritriches, aérobie, mais dans le cas de la présence de glucose et de nitrate, une croissance
anaérobie peut se produire. Cette bactérie est capable de produire une endospore ayant une haute
résistance aux conditions défavorables. Bacillus subtilis est connue par sa production abondante
de protéines [28]. Les cellules sont en forme de bâtonnet mesurent généralement de 2 à 6 µm de
long et un peu moins de 1 µm de diamètre. La température de croissance optimale est d'environ
30 à 35 °C, ce qui donne un temps de doublement d'à peine 20 min [29].
(a) (b)
61
Chapitre II Matériels et Méthodes
Domaine Bacteria
Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordre Bacillales
Famille Bacillaceae
Genre Bacillus
Espèce Bacillus subtilis
Un seul milieu de culture a été utilisé pour tester l‘action d‘AgNPs synthétisées contre
les souches décrites, il s‘agit de milieu "MRS".
L‘activité antibactérienne des AgNPs synthétisées est effectuée par la méthode de bien-
diffusion citée par Oza et al. [2]. Les AgNPs synthétisées à partir de Pseudomonas aeruginosa
ont été testées pour l'activité antibactérienne par la méthode de bien-diffusion contre des
organismes pathogènes testés, les cultures pures des bactéries ont été repiquées sur la gélose de
MRS à 37 °C sur un incubateur à 100 tr/min. L‘étape finale de la réalisation de l'activité
antibactérienne par la méthode de bien diffusion est la déposition à la surface de la gélose à
l‘aide d‘une pince, des disques stériles de 6 mm de diamètre (du papier Wathman N° 04) imbibés
d‘environ 20 μl à l'aide d'une micropipette de l'échantillon de solution d‘AgNPs. Après
incubation à 37 °C pendant 18 heures, les différents niveaux de zone d'inhibition ont été mesurés
[2].
Pour quantifier l'activité antibactérienne, le diamètre de l'inhibition a été mesuré avec une
règle et exprimé en millimètre (Tableau II.5) [32].
62
Chapitre II Matériels et Méthodes
Tableau II. 5: Sensibilité des souches microbiennes en fonction des zones d‘inhibition [33].
63
Chapitre II Matériels et Méthodes
Références bibliographiques
[1] Peiris, M.K., Gunasekara, C.P., Jayaweera, P.M., Arachchi, N.D. and Fernando, N., 2017.
Biosynthesized silver nanoparticles: are they effective antimicrobials?. Memórias do Instituto
Oswaldo Cruz, 112(8), pp.537-543.
[2] Oza, G., Pandey, S., Shah, R. and Sharon, M., 2012. Extracellular fabrication of silver
nanoparticles using Pseudomonas aeruginosa and its antimicrobial assay. Pelagia Res Lib
Adv Appl Sci Res, 3(3), pp.1778-1783.
[3] Abd, F.G., Mohsen, L.Y., Al–shalah, L.A.M. and Alkaim, A.F., 2018. Silver nanoparticles
that synthesis by using pseudomonas aeruginosa synergistically act with antibiotic. Asian
Journal of Microbiology, Biotechnology & Environmental Sciences, 21, pp.S62-S65.
[4] Arya, G., Kumari, R. M., Gupta, N., Kumar, A., Chandra, R., & Nimesh, S., 2017. Green
synthesis of silver nanoparticles using Prosopis juliflora bark extract: reaction optimization,
antimicrobial and catalytic activities. Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology,
46(5), pp.985-993.
[5] Dada, A.O., Inyinbor, A.A., Idu, E.I., Bello, O.M., Oluyori, A.P., Adelani-Akande, T.A.,
Okunola, A.A. and Dada, O., 2018. Effect of operational parameters, characterization and
antibacterial studies of green synthesis of silver nanoparticles using Tithonia
diversifolia. PeerJ, 6, p.e5865.
[6] Khan, N.T., Jameel, N. and Rehman, S.U.A., 2016. Optimizing physioculture conditions for
the synthesis of silver nanoparticles from Aspergillus niger. J Nanomed Nanotechnol, 7(5),
pp.7-10.
[7] Khandel, P., Shahi, S. K., Soni, D. K., Yadaw, R. K., & Kanwar, L., 2018. Alpinia calcarata:
potential source for the fabrication of bioactive silver nanoparticles. Nano Convergence,
5(1), pp.1-17.
[8] Alzahrani, E. and Welham, K., 2014. Optimization preparation of the biosynthesis of silver
nanoparticles using watermelon and study of itsantibacterial activity. International Journal of
Basic and Applied Sciences, 3(4), p.392.
[9] Kumar, M.S., Supraja, N. and David, E., 2019. Photocatalytic degradation of methylene blue
using silver nanoparticles synthesized from Gymnema sylvestre and antimicrobial assay. Nov
Res Sci, 2, pp.1-7.
[10] Vanaja, M., Paulkumar, K., Baburaja, M., Rajeshkumar, S., Gnanajobitha, G., Malarkodi,
C., Sivakavinesan, M. and Annadurai, G., 2014. Degradation of methylene blue using
64
Chapitre II Matériels et Méthodes
65
Chapitre II Matériels et Méthodes
[22] Goudar, Vedavati & Prasad, Nagalambika., 2020. A Critical Review on Listeria
monocytogenes. 13, pp.95-103.
[23] Gonçalves, A.C.M., 2019. Identification and characterization of new listeria
monocytogenes virulence factors (Doctoral dissertation), p: 22.
[24] Sagar Aryal, 2020. Microbe Note. Escherichia coli (E. coli)- An Overview. 03 Juin 2021,
https://microbenotes.com/escherichia-coli-e-coli/
[25] Jang, J., Hur, H.-G., Sadowsky, M. J., Byappanahalli, M. N., Yan, T., & Ishii, S.,
2017. Environmental Escherichia coli : ecology and public health implications-a review.
Journal of Applied Microbiology, 123(3), pp.570-581.
[26] Makvana, S., & Krilov, L. R., 2015. Escherichia coli Infections. Pediatrics in Review,
36(4), pp.167-171.
[27] Faner, R., Sibila, O., Agustí, A., Bernasconi, E., Chalmers, J.D., Huffnagle, G.B.,
Manichanh, C., Molyneaux, P.L., Paredes, R., Brocal, V.P. and Ponomarenko, J., 2017. The
microbiome in respiratory medicine: current challenges and future perspectives. European
Respiratory Journal, 49(4).
[28] Jemni, Monia & Maaroufi, Abderrazak & Mejri, Slah., 2010. Caractérisation et
optimisation des conditions de croissance d‘un biopesticide bactérien. Revue des régions
Arides. 3, pp.1367-1370.
[29] Errington, J. and van der Aart, L.T., 2020. Microbe Profile: Bacillus subtilis: model
organism for cellular development, and industrial workhorse. Microbiology, 166(5), p.425.
[30] Bouhairi, S. 2017. Bacillus subtilis: caractères et applications, [Thèse]. Rabat : Université
Mohammed V, Faculté de médecine et de pharmacie, p : 11 et 12.
[31] Kovács, Á. T., 2019. Bacillus subtilis. Trends in Microbiology.
[32] Oinaala, D., Lehesvaara, M., Lyhs, U. and Tikkanen-Kaukanen, C., 2015. Antimicrobial
activity of organic honeys against food pathogenic bacterium Clostridium
perfringens. Organic Agriculture, 5(2), pp.153-159.
[33] Mouas, Y., Benrebiha, F.Z., Chaouia, C., 2017. Evaluation de l‘activité antibacterienne
de l‘huile essentielle et de l‘extrait méthanolique du romarin rosmarinus officinalis L. Revue
Agrobiologia, 7(1), pp. 363-370.
66
Chapitre III
Résultats et discussion
Chapitre III Résultats et discussion
En fait, la couleur brune des AgNPs résulte de la vibration concomitante d'électrons libres
de l'argent métallique qui sont en résonance avec l'onde lumineuse. Cela explique l'origine de
l'absorption par résonance plasmonique de surface (SPR) souvent observée avec des NPs
métalliques [1].
La confirmation de la synthèse des particules des AgNPs en solution a été contrôlée par
l‘analyse spectrale UV-vis pour laquelle des aliquotes du mélange réactionnel (après achèvement
de la réaction) ont été prélevées et utilisées pour les mesures de spectroscopie UV-vis. Dans le
spectre d'absorption UV-vis, un pic large et fort, situé à environ 440 nm, a été observé pour les
nanoparticules synthétisées à l'aide du surnageant de culture (Figure III. 1b). Ce pic indiquait une
résonance plasmonique de surface (SPR), qui a déjà été bien documentée pour diverses
nanoparticules métalliques avec des tailles allant de 2 nm à 100 nm [2].
67
Chapitre III Résultats et discussion
(a) (b)
Figure III. 1: a) Intensité de couleur des nanoparticules d'argent synthétisées par Pseudomonas
aeruginosa ; b) Spectre UV-visible de nanoparticules d'argent synthétisées.
68
Chapitre III Résultats et discussion
La poudre d‘AgNPs obtenue après le séchage de solution d‘AgNPs dans l‘étuve est
présentée dans la figure (III.3):
69
Chapitre III Résultats et discussion
III.2.1. Effet du pH
Le pH est considéré comme un paramètre important dans la synthèse des AgNPs [6].
Les résultats de l'inspection visuelle sont confirmés par leur absorbance à 440 nm à des
pH de 2, 4, 6, 8 et 10 (figure III. 4b), qui montrent également que l‘absorbance augment avec
l‘augmentation de pH.
(a) (b)
L‘étude de Lee et al. [10] a montrée également que la biosynthèse maximale des
AgNPs était pour une concentration de 10 mM, alors que celle de Dada et al. [11] était pour 1
mM.
(a) (b)
71
Chapitre III Résultats et discussion
Au fur et à mesure que la durée d‘incubation augmente, la couleur des solutions devient
plus foncée et donc plus les AgNPs se forment. Le temps optimal requis pour l'achèvement de la
réaction de notre étude était de 72 h (Figure III. 6a).
La figure (III. 6b) montre l'effet de différentes périodes d'incubation (temps) sur la
biosynthèse des AgNPs en fonction de l‘absorption. Plus la période d'incubation augmente, plus
la valeur d'absorbance augmente également jusqu'à 72 h.
En raison de l'instabilité des AgNPs, une durée optimale est requise, car l'agglomération
des nanoparticules d'argent après la durée optimale se traduit par des tailles de particules plus
grandes [12].
(a) (b)
72
Chapitre III Résultats et discussion
commence à diminuer. La meilleure absorption a été donnée par le volume 80:20 alors que la
faible absorption a été le volume de 100% surnageant.
(a) (b)
a) Effet d’agitation
Les spectres d'absorption avec et sans agitation sont présentés dans la figure (III.8b). La
bande d'absorption de plasmon de surface caractéristique a été observée à environ 440 nm pour
les deux échantillons. Les deux spectres sont presque identiques, sachant que le pic d‘échantillon
avec agitation est légèrement plus grand que l‘autre, donc l‘agitation ne montre pas d'effet
significatif sur la production des AgNPs et peut donc être négligée.
L‘étude de Kareem et al. [13] a révélé le rôle important de l'agitation lors de la synthèse
verte des NPs.
73
Chapitre III Résultats et discussion
(a) (b)
b) Effet de lumière
Pour confirmer les conclusions de l'inspection visuelle, des spectres UV-visible ont été
prisent. La figure (III.9b) montre les spectres UV-Vis des échantillons étudiés. Nous pouvons
clairement voir que le pic n'est présent que dans l'échantillon exposé à la lumière directe du
soleil, ce qui corrobore à nouveau la conclusion de l'inspection visuelle des échantillons en figure
(III.9b). Dans l‘échantillon exposé à la lumière, une augmentation de l'absorbance du pic et la
forme asymétrique du pic indique un nombre croissant d'AgNPs individuels ainsi que la
formation d'agrégats AgNPs [15] et à partir du pic large dans le spectre UV-Vis, on a supposé
que les particules sont polydispersées [14].
Les AgNPs sont extrêmement efficaces pour absorber et diffuser la lumière. La forte
interaction des AgNPs avec la lumière se produit parce que les électrons de conduction sur la
surface du métal subissent une oscillation collective lorsqu'ils sont excités par la lumière à des
74
Chapitre III Résultats et discussion
longueurs d'onde spécifiques. Connue sous le nom de résonance plasmonique de surface (SPR),
cette oscillation se traduit par des propriétés de diffusion et d'absorption exceptionnellement
fortes [16].
L‘étude de groupe de Kumar [14] a trouvée également les mêmes résultats que notre
étude alors que celle de groupe de Büyük [17] montre que la lumière ne montre pas d'effet
significatif sur la production de nanoparticules de chitosane (CS NPs) et peut donc être négligée.
(a) (b)
c) Effet d’aération
L'influence d‘aération sur la production des AgNPs a été évaluée (Figure III.10). Lors de
la synthèse, la couleur des deux échantillons passait progressivement du jaune au brun foncé
mais la coloration est plus remarquée dans le cas de l‘aération.
75
Chapitre III Résultats et discussion
Sans Aération
aération
Pour étudier la photodégradation du bleu de méthylène, nous avons comparé les courbes
de l‘UV-Vis de bleu de méthylène avant et après la photodégradation. Dans cette partie, nous
avons d‘abords étudié les propriétés optiques du BM avant l‘exposition à la lumière.
Le spectre d'absorption (Figure III.11b) a montré que les bandes d‘absorption de bleu de
méthylène diminuent pour différents intervalles de temps. Initialement, les bandes d'absorption
de bleu de méthylène commencent à partir de 660 nm puis diminuaient progressivement avec
76
Chapitre III Résultats et discussion
Rasheed et al. [18] ont constaté que la synthèse des nanoparticules réduit les avantages
des composés organiques qui sont hautement pollués dans l'environnement, y compris les
colorants azoïques toxiques, utilisés dans les méthodes chimiques et physiques. La méthode
biologique a été choisie comme méthode d'élimination des colorants principalement parce que
c'est une méthode très facile et non toxique comme mentionné par Robinson et al. [19].
Les nanoparticules d'argent sont considérées comme une option très efficace pour le
traitement photocatalytique car ils peuvent accueillir à la fois les régions UV et visible du spectre
électromagnétique pour un fonctionnement réel [20].
77
Chapitre III Résultats et discussion
80
Dégradation (%)
69,2
60 47,45
40 Degré de dégradation du
colorant (%)
20
0
0
Témoin 1 3 5
Temps d'exposition (minute)
Figure III. 12: Dégradation du bleu de méthylène (%) par des nanoparticules d'argent
synthétisées (30 mg).
Les AgNPs ont montrées un certain degré d'activité antibactérienne comme on peut le
voir dans les boites de pétri utilisées dans le test de diffusion (Figure III.13). La taille moyenne
de la zone d'inhibition mesurée pour toutes les souches est présentée dans le tableau (III.1),
Listeria monocytogenes, Bacillus subtilis et Escherichia coli étaient les souches les plus
sensibles respectivement alors que la Pseudomonas aeruginosa était la souche la moins sensible.
L'efficacité des AgNPs a montré une meilleure activité pour contrôler les bactéries Gram-
positives contre les bactéries Gram-négatives. Par contre des autres études comme l‘étude de
Kora et al. [21], montrent le contraire et cela était probablement lié aux différentes structures de
la paroi cellulaire et aux différents mécanismes antibactériens de l'Ag contre différentes cellules.
Par exemple, les bactéries Gram-négatives possèdent une fine couche de peptidoglycane, tandis
que les bactéries Gram-positives possèdent une épaisse couche de peptidoglycane, qui est plus
résistante à la diffusion d‘Ag+ [22].
78
Chapitre III Résultats et discussion
Figure III. 13: Activité antibactérienne des nanoparticules d'argent contre diverses souches
bactériennes pathogènes.
Tableau III. 1: Zone d'inhibition des nanoparticules d‘argent contre diverses bactéries
pathogènes.
79
Chapitre III Résultats et discussion
Références bibliographiques
[1] Kambale, E.K., Nkanga, C.I., Mutonkole, B.P.I., Bapolisi, A.M., Tassa, D.O., Liesse, J.M.I.,
Krause, R.W. and Memvanga, P.B., 2020. Green synthesis of antimicrobial silver
nanoparticles using aqueous leaf extracts from three Congolese plant species (Brillantaisia
patula, Crossopteryx febrifuga and Senna siamea). Heliyon, 6(8), p.e04493.
[2] Paul, D. and Sinha, S.N., 2014. Extracellular synthesis of silver nanoparticles using
Pseudomonas aeruginosa KUPSB12 and its antibacterial activity. Jordan J Biol Sci, 7(4),
pp.245-250.
[3] K.C. Mounika and Katta. M., 2017. Biosynthesis of Silver Nanoparticles and
Characterization. Indo American Journal of Pharmaceutical Research, 7(08).
[4] Mukherji, S., Bharti, S., Shukla, G., & Mukherji, S., 2018. Synthesis and characterization of
size- and shape-controlled silver nanoparticles. Physical Sciences Reviews, 0(0).
[5] Khan, N.T. and Jameel, J., 2016. Optimization of reaction parameters for silver nanoparticles
synthesis from Fusarium oxysporum and determination of silver nanoparticles
concentration. J Material Sci Eng, 5(283), pp.2169-0022.
[6] Christopher, J. G., Saswati, B., & Ezilrani, P., 2015. Optimization of Parameters for
Biosynthesis of Silver Nanoparticles Using Leaf Extract of Aegle marmelos. Brazilian
Archives of Biology and Technology, 58(5), pp.702-710.
[7] Rose, G., Soni, R., Rishi, P. and Soni, S., 2019. Optimization of the biological synthesis of
silver nanoparticles using Penicillium oxalicum GRS-1 and their antimicrobial effects against
common food-borne pathogens. Green Processing and Synthesis, 8(1), pp.144-156.
[8] Quintero-Quiroz, C., Acevedo, N., Zapata-Giraldo, J., Botero, L.E., Quintero, J., Zárate-
Triviño, D., Saldarriaga, J. and Pérez, V.Z., 2019. Optimization of silver nanoparticle
synthesis by chemical reduction and evaluation of its antimicrobial and toxic
activity. Biomaterials research, 23(1), pp.1-15.
[9] Rose, G. K., Soni, R., Rishi, P., & Soni, S. K., 2018. Optimization of the biological synthesis
of silver nanoparticles using Penicillium oxalicum GRS-1 and their antimicrobial effects
against common food-borne pathogens. Green Processing and Synthesis, 8, 144-156.
[10] Lee, K.X., Shameli, K., Mohamad, S.E., Yew, Y.P., Mohamed Isa, E.D., Yap, H.Y., Lim,
W.L. and Teow, S.Y., 2019. Bio-mediated synthesis and characterisation of silver
nanocarrier, and its potent anticancer action. Nanomaterials, 9(10), p.1423.
[11] Dada, A.O., Adekola, F.A., Dada, F.E., Adelani-Akande, A.T., Bello, M.O., Okonkwo,
C.R., Inyinbor, A.A., Oluyori, A.P., Olayanju, A., Ajanaku, K.O. and Adetunji, C.O., 2019.
80
Chapitre III Résultats et discussion
81
Chapitre III Résultats et discussion
[21] Kora, A.J. and Sashidhar, R.B., 2015. Antibacterial activity of biogenic silver
nanoparticles synthesized with gum ghatti and gum olibanum: a comparative study. The
Journal of antibiotics, 68(2), pp.88-97.
[22] Saravia, S.G.G.D., Rastelli, S.E., Angulo-Pineda, C., Palza, H. and Viera, M.R., 2020.
Anti-adhesion and antibacterial activity of silver nanoparticles and graphene oxide-silver
nanoparticle composites. Matéria (Rio de Janeiro), 25(2).
82
Conclusion générale et
perspectives
Conclusion générale et perspectives
Conclusion générale
L‘objectif de ce travail vise à biosynthétiser des nanoparticules d‘argent à partir de la
bactérie Pseudomonas aeruginosa et à optimiser les paramètres opérationnels, puis les utiliser
pour évaluer la dégradation de bleu de méthylène et l‘activité antibactérienne.
Dans ce travail, nous avons synthétisé avec succès des nanoparticules d'argent par une
méthode biologique simple en utilisant le surnageant de culture d‘une souche de référence de
Pseudomonas aeruginosa et sans aucun agent réducteur nocif. La présente étude indique la
synthèse extracellulaire des nanoparticules d'argent très stables.
Dans ce travail, nous avons réussi aussi à faire l‘optimisation des paramètres
opérationnels pour la synthèse des nanoparticules d‘argent. Il a été montré que la synthèse de ces
nanoparticules dépend de divers paramètres expérimentaux. On peut conclure que le pH de 10, la
concentration de 10 mM, le temps d‘incubation de 72 h, le rapport volumique de 80:20
(surnageant : solution d‘AgNO3), la présence de la lumière, l‘aération et l‘agitation et l‘absence
de l‘agitation favorisent un rendement optimal des nanoparticules d‘argent.
83
Conclusion générale et perspectives
Perspectives
84
Annexes
Annexes
Annexe 01 : Matériels
- Becher en verre
- Erlenmeyer en verre
- Micropipette
- Pipette
- Bec benzène
- Spatule
- Flacon en verre
- Tube en verre
- Boite de pétri
- Cylindre gradué
- Balance
- Agitateur
Annexe 03 : Appareils
- Centrifugeuse (ROTINA 380 R) (Sigma 2-16P)
- Autoclave vertical à vapeur (AE-75 DRY)
- Ultrasons (H.D)
- pH-mètre (starter 5000)
- Etuve (Memmert)
- Spectrophotomètre (UV 2300 II)
- Vortex multitubes (BenchmixerTM XL BV1010)
- Agitateur-incubateur de paillasse KS 3000
Annexes
BN Bouillon nutritif
- BN.................................................................................................. 08 g
- Glucose........................................................................................... 10 g
MRS (GELOSE) (De Man, Rogosa, Sharpe)
- Polypeptone.....................................................................................10 g
- Extrait de viande ..............................................................................8 g
- Extrait de levure ..............................................................................4 g
- Glucose............................................................................................20 g
- Tween 80.......................................................................................1,08 g
- Phosphate dipotassique .....................................................................2 g
- Acétate de sodium..............................................................................5 g
- Citrate d‘ammonium..........................................................................2 g
- Sulfate de magnésium...................................................................0,20 g
- Sulfate de manganèse....................................................................0,05 g
- Agar.................................................................... ............................10 g
Résumé
Résumé
La biosynthèse de nanoparticules d'argent (AgNPs) a été réalisée avec succès en utilisant le surnageant
de la souche Pseudomonas aeruginosa . Sept paramètres opérationnels impératifs (pH, concentration,
temps d’incubation, rapport volumique, lumière, agitation, aération) essentiels à la synthèse des
nanoparticules d'argent ont été étudiés. L'étude a montré que le pH de 10, la concentration de 10 mM, le
temps d’incubation de 72 h, le rapport volumique 80:20 (surnageant : solution d’AgNO3), la présence de
la lumière, l’aération et soit l’agitation ou l’absence de l’agitation étaient importants pour optimiser la
synthèse des nanoparticules d'argent. Cette étude a montré la bonne activité photocatalytique des
nanoparticules d'argent sur la dégradation du colorant bleu de méthylène à près de 92,7% à 5 minutes
de temps d'exposition. Les propriétés antibactériennes des nanoparticules d'argent ont été confirmées à
la fois par les bactéries gram positive et négative, Pseudomonas aeruginosa, Listeria monocytogenes,
Escherichia coli et Bacillus subtilis avec des zones d’inhibition de 10, 14, 12, et 13 mm respectivement.
Mots clés : Biosynthèse, Nanoparticules d’argent, Pseudomonas aeruginosa , Photocatalyse, Bleu de
méthylène, Activité antibactérienne.
ملخص
حًج.Pseudomonas aeruginosa ( بُجاح باسخخذاو طاف سالنتAgNPs) حى حُفٍذ انخخهٍك انحٍىي نجسًٍاث انفضت انُاَىٌت
( انخهىٌت، انخحزٌك، انضىء، َسبت انحجى، ولج انخاليس، انخزكٍش، (pH) ًٍُدراست سبع يخغٍزاث حشغٍهٍت )انزلى انهٍذروج
ساعت72 وسيٍ انحضاَت، 10 mM وحزكٍش، 10 ًٍُ أوضحج انذراست أٌ انزلى انهٍذروج.األساسٍت نخخهٍك جسًٍاث انفضت انُاَىٌت
وانخحزٌك أو عذو وجىد انخحزٌك حعخبز يهًت نخخهٍك، وانخهىٌت، ووجىد انضىء، (AgNO3 يحهىل: )طاف80:20 وَسبت انحجى،
أظهزث هذِ انذراست انُشاط انخحفٍشي انضىئً انجٍذ نجسًٍاث انفضت انُاَىٌت فً ححهم صبغت.ألصى نهجسًٍاث انُاَىٌت انفضٍت
حى حأكٍذ انخصائص انًضادة نهبكخٍزٌا نجسًٍاث انفضت. دلائك يٍ ولج انخعزض5 ً ف٪92.7 ٍانًٍثٍهٍٍ انشرلاء إنى يا ٌمزب ي
،Listeria monocytogenes ،Pseudomonas aeruginosa ، انُاَىٌت بىاسطت كم يٍ انبكخٍزٌا انًىجبت وانسانبت
.ً يهى عهى انخىان13 ، 12 ، 14 ، 10 بألطار حثبٍظBacillus subtilis وEscherichia coli
انًٍثٍهٍٍ األسرق،ً انخحفٍش انضىئ،Pseudomonas aeruginosa ، انجسًٍاث انُاَىٌت انفضٍت، انخخهٍك انحٍىي:الكلمات المفتاحية
. انُشاط انًضاد نهبكخٍزٌا،
Abstract
The biosynthesis of silver nanoparticles (AgNPs) has been successfully carried out using the supernatant
of the Pseudomonas aeruginosa strain. Seven imperative operational parameters (pH, concentration,
incubation time, volume ratio, light, agitation, and aeration) essential to the synthesis of silver
nanoparticles were studied. The study showed that the pH 10, the concentration of 10 mM, the
incubation time of 72 h the volume ratio 80:20 (supernatant: AgNO3 solution), the presence of light, the
aeration and either the agitation or absence of agitation was important for the maximum synthesis of the
silver nanoparticles. This study showed the good photocatalytic activity of silver nanoparticles on the
degradation of methylene blue dye to nearly 92.7% at 5 minutes of exposure time. The antibacterial
properties of silver nanoparticles were confirmed by both gram positive and negative bacteria,
Pseudomonas aeruginosa , Listeria monocytogenes, Escherichia coli and Bacillus subtilis with zones of
inhibition of 10, 14, 12, and 13 mm respectively.
Keywords: Biosynthesis, Silver nanoparticles, Pseudomonas aeruginosa , Photocatalysis, Methylene
blue, Antibacterial activity.