Project TT

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
UNIVERSITE AKLI MOHAND OULHADJ – BOUIRA -

FACULTE DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE LA VIE ET DES SCIENCES DE LA TERRE
DEPARTEMENT DE BIOLOGIE
Réf : ……./UAMOB/F.SNV.ST/DEP.BIO/2017
MEMOIRE DE FIN D’ETUDES

EN VUE DE L’OBTENTION DU DIPLOME MASTER
Domaine : SNV Filière : Sciences Biologiques
Spécialité : Eau santé et environnement
Présenté par :
DJEFFAL Amel
SMAILI Naouel
Thème
Etude phytochimique et biologique de deux plantes de genre
Asphodelus: Asphodelus microcarpus et Asphodelus
tenuifolius
Soutenu le : 01/07 / 2017 Devant le jury composé de :
Nom et Prénom Grade
Mr. LAMINE Salim MAA Univ. de Bouira Président

Mr. CHIBANE Mohamed Pr Univ. de Bouira Promoteur
Mme. KARBACHE Fatima MAA Univ. de Bouira Examinatrice
Mlle. DAHMOUNE Bouchra Doctorante Univ. de Bouira Co-promotrice
Année Universitaire : 2016/2017

Liste des formules
Numéro Formules page
22
(1)  Le taux d’humidité (H%)
H% = ((m1 –m2)/m1) ×100
 Le taux d’extraction (rendement)

25
M ext
R% = × 100
(2) M éch
 L’indice de mousse (IM)

26
(3)
IM =1000/N
 La Concentrations de la chlorophylle a
27
(4) Ca (µg /ml) = 13,36A664 , 1- 5,19A648,6
 La Concentrations de la chlorophylle b
27
(5)
Cb (µg /ml) = 27,43A648, 6 - 8, 12A664,1
 La Concentrations des caroténoïdes

28
(6)
CX+C (µg /ml) = (1000A470 – 2, 13 Ca – 97,64Cb)/209
 Le pourcentage d’inhibition I
28
. (7)
I % = 100(A0 - At)/ A0
Liste des Figures
Liste des Figures

N° Titre Page
01 Morphologie des parties d’Asphodelus microcarpus 07
02 Asphodelus microcarpus 18
03 Asphodelus tenuifolius 18
04 Schéma récapitulative des étapes de traitements initiaux 20
des échantillons
05 Étapes de préparation des échantillons. 21
06 Extraction des métabolites secondaires par l’extracteur de 24

soxhlet.
07 Schéma récapitulatif de tout la partie expérimental 33
08 Rendement d’extraction de la partie sous terraine et 35

aérienne d’Asphodelus microcarpus.
9 Rendement d’extraction de la partie sous terraine et 35
aérienne d’Asphodelus tenuifolius
10 Rendement d’extraction des deux plantes étudiées 36
Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius.
11 La courbe d’étalonnage réalisée avec l’étalon acide 44

gallique pour le dosage des polyphénoles totaux
12 Teneurs en polyphénols totaux dans les extraits 45

l'Asphodelus microcarpus.
13 Teneurs en polyphénols totaux dans les extraits 46

d'Asphodelus tenuifolius
14 Courbe d’étalonnage de la catéchine pour le dosage des 47

flavonoïdes.
15 Teneurs en Flavonoïde dans les extraits d’Asphodelus 47

microcarpus étudiés.
16 Teneurs en Flavonoïde dans les extraits d’Asphodelus 48

tenuifolius
17 Courbe d’étalonnage de la catéchine pour le dosage des 49

tannins.
Liste des Figures
18 teneurs en tanin dans les extraits de l'Asphodelus 49

microcarpus étudiés.
19 Teneurs en tanin dans les extraits de l'Asphodelus 50

tenuifolius étudiés.
20 Le pourcentage des flavonoïdes et des tanins dans les 52

polyphénoles totaux
21 Concentration en chlorophylle a, chlorophylle b et 53

caroténoïdes dans les différents extraits d’Asphodelus
microcarpus
22 Concentration en chlorophylle a, chlorophylle b et 54

caroténoïdes des différents extraits d’Asphodelus
tenuifolius.
23 Pourcentages d’inhibition du radical libre DPPH en 56

fonction des différentes concentrations de l’extrait
éthanolique
24 Activité anti-radicalaire des extraits d’Asphodelus et le 57

BHT.
25 Résultats de l’activité anti-bactérienne des deux plantes 59

étudié Asphodelus microcarpus et Asphodelustenuifolius
Sommaire
Sommaire
Introduction…….………………………………………………………………..…1
Chapitre I: Synthèse bibliographique

I. Description des plantes étudiées
I.1. La famille des Liliaceae …………………………………………..……………....3
I.2. Le genre Asphodelus………………………………………………...……….……3
I.2.1. Asphodelus microcarpus …………………………………………………...….6
I.2.1. Asphodelus tenuifoliu….………………………………………….…………....7
I.3. Différence entre Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius……………...8
I.4.Composition chimique d’Asphodelus microcarpus et d’Asphodelus

tenuifolius…………………………………………………………………………...…9
I.5. Propriétés pharmacologiques d’Asphodelus ……………………….………..….11
II. Généralités sur les métabolites secondaires
II.1. Les composés phénoliques……………………………………………………….13
II.2. Les alcaloïdes…………………………………………………………….……..15
II.3. Les quinones ………………………………………………..……………….....15
II.4. Les terpénoïdes …………………………………………….…………………...15
II.5. Les saponines …………………………………………..………………….……15

Sommaire
III. Propriétés biologiques des métabolites secondaires
III1. Activités biologiques ………………………………………………………….16
III.1.1.Activité antioxydante …………………………………………….…..16
III.1.2. Activité antibactérienne ……………………………………...………16
III.1.3.Activité antifongique ……………………………………………....…16
III.1.4. Activité anti-inflammatoire…………………………………………...17
Chapitre II: Matériels et méthodes
II.1. Matière végétale ………………………………………………………….……17
1.1. Origine géographique et période de récolte de plantes……….………..18
1.2. Préparation des échantillons……………………………………….…..18
II.2. Détermination du taux d’humidité et la matière sèche ………………………..21
II.3. Extraction …………………………………………………………………..….21
3.1. Extraction par soxhlet…………………………………………………..21
3.2. Macération à froid ………………………………..………….….……..23
3.3. Taux d’extraction…………………………………………………..…...24
II. 4. Tests photochimiques……………………………………………………..…...24
II. 4.1. Dosages qualitatifs ……………………………………………………..24
II.4.2. Dosages quantitatives………………………………………….…….25
II.5. Activités biologiques…………………………………………...……………...28

Sommaire
II.5.1. Activités anti-oxydante ………………………………………..…28
II.5.2. Activité anti-bactérienne……………………………………….....29
II. 6. Analyse statistique……………………………………….………………...32
Chapitre III: Résultats et interprétation

I.Détermination du Taux d’humidité du matériel végétal …………………...34
II.Rendement d’extraction ……………………………………………………34
III. Tests phytochimiques
III.1. Dosage qualitatifs ………………………………………………………..…36
III.2. Dosage quantitatif…………………………………………………….……..44
III.2.1. Dosage des polyphénols totaux, des flavonoïdes et des tanins ………..44
III.2.1.1.les phénols totaux ………………………………………………....44

III.2.1.2.Les flavonoïdes………………………………………………….... 46
III.2.1.3. Les tannins ……………………………………………………….49
III.2.2. Dosage de la chlorophylle a, b, et caroténoïdes ……………..…………52
IV. Activités biologiques
IV.1. Activité antioxydant …………………………………………………….…….55
IV.2. Activité anti-bactérienne …………………………………………………….58
Conclusion …………………………………………………………….60
Références bibliographiques
Annexes
Introduction
Les plantes sont une source immense de molécules chimiques complexes

exploitées par l’homme dans plusieurs industries telles que l’industrie cosmétique,
l’industrie agro-alimentaire et l’industrie pharmaceutique. La diversité de ces
molécules naturelles qui ne sont pas essentielles à la viabilité des plantes reste une
énigme pour les biologistes qui essayent de décrypter leur rôle dans la nature. De
même, l'élucidation des voies de biosynthèse conduisant à des produits naturels
originaux est un champ d'investigation inépuisable pour les scientifiques. L'homme
préhistorique, qui avait très peu de moyens, devait se nourrir des produits de
cueillette et de chasse. En assimilant la flore locale, il a découvert les plantes utiles et
indispensables pour survivre. Ce régime, essentiellement végétarien, a constitué le
berceau de l'utilisation des produits naturels (Barnham et al., 2004).
L’Algérie est une région dotée d’une biodiversité très importante, avec une
avalanche de plantes aromatique et médicinale. L’utilisation de ces plantes à des fins
thérapeutiques est fréquente surtout dans les zones rurales.
Les effets protecteurs de ces plantes contres divers maladies ont été attribuée à la
présence de composés phytochimique (Barejo et al., 2003). Donc pour mieux
expliquer d’où provient l’effet thérapeutique d’une plante, il faut procéder à une
étude phytochimique des plantes suivie par une étude biologique. De ce fait, on a
proposés d’étudier la composition phytochimique et l’activité biologique de deux
espèces de plante du genre asphodèle : Asphodelus microcarpus et Asphodelus
tenuifolius utilisée en pharmacopée traditionnelle pour traiter les fièvres, les
indigestions, les constipations et des lésions cutanées.
Les plantes de genres asphodèle sont utilisées à l’Ouest d’Algérie et au Maroc

contre toutes les formes d’abcès et contre les rhumatismes (Baba Aissa, 1991).
Dans notre payé l’Algérie, les racines fraîches de l’Asphodèle macérées dans de
l’huile servent à traiter les otites, la poudre sèche de ces racines est utilisée en
cataplasmes dans les douleurs des rhumatisme, la poudre sèche d’Asphodèle
mélangée avec l’orge est conseillée comme diurétique (Ghileb, 1987) et le suc de la
racine de l’Asphodèle est utilisée dans le traitement des mycoses cutanées (Boukef
,1988 ; Ghileb, 1987, ; Baba Aissa 1991) .
1
Introduction
Dans ce travail, on s’est intéressés à valoriser Asphodelus microcarpus et Asphodelus

tenuifolius par la recherche des principaux groupes chimiques et le dosage des
polyphénols totaux, des flavonoïdes et des tannins, et par l’évaluation de l’activité
antioxydante et anti-microbienne de leurs extraits.
Les objectifs de ce travail sont donc:

 Une contribution à une meilleure connaissance de la nature chimique
d’Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius.
 Une évaluation des activités antioxydants et antibactériennes des extrais
Le présent manuscrit est organisé en trois chapitres. La première partie de ce

travail concerne tout d'abord la synthèse bibliographique qui porte sur une
description botanique et chimique des plantes du genre Asphdeluse.
La deuxième partie est consacrée aux matériel et méthodes où sont détaillés les
protocoles expérimentaux relatifs à l’extraction, au dosage qualitatifs et quantitatif
des composés phytochimiques, à l’évaluation des activités anti-oxydantes et
antibactérienne des composés isolés. Puis la partie résultats et discussion qu’est
consacrée pour la présentation et la discussion des différents résultats. Et conclusion
générale ainsi que des perspectives de recherche sont apportées pour compléter le
présent travail.
2
Chapitre I Synthèse bibliographique
I. Description des plantes étudiées
I.1. La famille des Liliaceae
Les plantes de genre asphodèles appartiennent à la famille des Liliacées, qu’est

l’une des plus grandes familles des angiospermes. Les espèces de cette famille
botanique représentent 4,6% des plantes médicinales.
Cette famille englobe le plus souvent les plantes herbacées et vivaces

monocotylédones, présentant généralement des organes de réserve (bulbes, cormes
ou rhizomes), parfois succulentes. Leur distribution est cosmopolite, même si
quelques groupes occupent des aires restreintes (Philippe, 2013).
Les limites de cette famille font l’objet de discussions sans fin, entre une approche
large (280 genre et prés de 5000 espèces) et une approche plus restrictive (5-10 genre
et 350 espèces) (Philippe, 2013).
I.2. Le genre Asphodelus
L'asphodèle est une liliacée de très grande taille avec une tige qui peut atteindre
facilement une hauteur d'un mètre cinquante. Ce genre pousse généralement
autour du bassin méditerranéen et occupe surtout les sols calcaires.
Les asphodèles se sont des plantes annuelles ou bisannuelles caractérisées par

(BOUAZZA, 2001):
- Des feuilles lancéolées ou toutes radicalaires, d’un beau vert brillant ;

- Des fleurs en grappes ou panicules, solitaires, avec une bractée scarieuse à la
base et à pédoncule articulé. à six pétales (trois sépales et trois pétales
absolument identiques) de quatre centimètres environ. Les pétales sont ornés
d'une unique ligne longitudinale et les 06 étamines hypogynes et à filet dilaté à
la base, dorsifixes, sont couronnées d'anthères orange ;
- Périanthe à tépales libres ou à peine connés à la base, uninerves ;
- Ovaire à 03 loges biovulées. Styles à stigmate trilobé ;
- Capsule loculicide, à valves ridées ou nerviées en travers ;
3
- Une tige drue, florifères nues de fort diamètre couronnée d'un énorme bouton
marron bientôt strié de noir et de blanc. La taille nominale de cette tige est
entre soixante-dix centimètres et un mètre cinquante.
Les principales espèces qui fait partie du genre asphodèle sont : Asphodelus
albus ( asphodèle blanc) , Asphodelus arrondeaui (asphodèle d'Arrondeau) .,
Asphodelus cerasiferus (asphodèle-cerise), Asphodelus fistulosus (asphodèle
fistuleux) , Asphodelus ramosus (asphodèle ramifié), Asphodelus macrocarpus ,
Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius (Asphodelus à feuilles
étroites) (Philippe, 2013).
Le tableau 1 récapitule les principales espèces rencontrées sur le territoire Algérien.
4
Tableau 1 : Les espèces d’asphodèles en Algérie.
Espèce Synonymes Nom arabe Localisation

Asphodelus acaulis Clausiana acaulis Azzidda Pâturages, clairières, fissures
des rochers.
Ain Mlila, Sétif.
Assez commune :
Sous secteur littoral algérois :
près de Boghar.
Sous secteur des sahels
littoraux oranais.
Sous secteur de l’Atlas tellien
oranais.
Asphodelus Asphodelus repens Berouaga Forets et pâturages de

cerasiferus Asphodelus Ançal montagnes.
corsicus Belouaz Assez commune :
Sous secteur de l’Atlas tellien
oranais, monts de Tlemcen et
de Daya.
Asphodelus Asphodelus Baton de Forets et pâturages
microcarpus nervosus saint joseph Très commune :
Asphodelus Berouaga Tell, hauts plateaux, Atlas
morisitanus Ançal saharien.
Belouaz
Asphodelus Asphodelus Acheub el Pâturages sablonneux

refractus pendulinus Ibel désertiques et subdésertiques.
Izéan, Tazia. Assez commune dans la Sahara
septentrional.
Rare au Sahara central et
méridional.
Asphodelus Bouzlima Pâturages arides, steppes.
fistulosus Boussila Assez rare :
Belouaz sous secteur du littoral algérois.
Berouiga sous secteur des hauts plateaux
Zittout algérois et oranais.
sous secteur des hauts plateaux
constantinois.
sous secteur de l’Atlas saharien.
Asphodelus Acheub el Dunes, pâturages arides,

tenuifolius Ibel steppes.
Izéan, Tazia. Commune :
Sous secteur des sahels
littoraux oranais.
Sous secteur des hauts plateaux.
Tout le Sahara.
5
Dans notre mémoire on se propose d’étudier l’Asphodelus microcarpus et

Asphodelus tenuifolius.
I.2.1. Asphodelus microcarpus
a. Systématique
La systématique d’Asphodelus microcarpus est la suivante (Zellagui, 1998) :
Règne Végétal
Embranchement Spermaphytes
Sous- embranchement Angiospermes
Classe Monocotylédones
Ordre liliiflorae
Famille liliaceae
Genre Asphodelus
Espèce Asphodelus microcarpus
b. Description botanique et structure morphologique
Asphodelus microcarpus est connus en Algérie sous différents noms vernaculaires:

Barouag (dans l’est algérien), Balouaz (dans le centre algérien) et Ighri (chez le
berbère). Cette plante à scape nettement marquée et plus ou moins élevée est
caractérisée par :
- Des feuilles cylindriques ou semi-cylindriques (parfois planes sur la face interne
seulement) et fistuleuses;
- Des fleurs blanches ou carnées (fig 1, b), de 15 mm de long maximum;
- Des tépales carénés, à carène verte ou pourpre;
- Des Capsule de 6-14 mm de long, oblongues, ovoïde ou subglobuleuse, à valves
nettement ridées transversalement sur le sec (Fournier, 1947).
6
a b c
a : Feuilles ; b : Fleurs c : Capsule
Figure 1: Morphologie des parties d’Asphodelus microcarpus
c . Répartition Géographique
La plante est endémique du bassin méditerranéen poussant sur les terrains pauvres
moyennement arrosés, dans Garrigue, falaises, steppe, préfère région semi-aride ou
le sol est peu profond comme les endroits rocheux. Dans les régions sableuses et
rocailleuses des forêts du Nord de l’Afrique et les hauts plateaux, le Tell et l’atlas
saharien de l’Algérie (Zellagui, 1998).
I.2.2. Asphodelus tenuifolius
a. Systématique
La systématique d’Asphodelus tenuifolius est la suivante (OZENDA, 2004) :
Règne Végétal
Embranchement Spermaphytes
Sous- embranchement Angiospermes
Classe Monocotylédones
Ordre Asparagales
Famille Liliaceae
Genre Asphodelus
Espèce Asphodelus tenuifolius
7
b. Description botanique et structure morphologique

Asphodelus tenuifolius est communément appelé en Algérie exactement à Beni
mezab« Tazia » c’est une plante annuelle herbacée monocotylédone. Cette plante à
scape nettement marquée et plus ou moins élevée est caractérisée par :
- Des feuilles cylindriques ou semi cylindriques (parfois planes mais sur la face
interne seulement), et creuses partent toutes de la base ; fistuleuses. Feuilles scabres
sur les nervures ;
- Des fleurs blanchâtres ou rosées, de 5à12 mm de long, à tépales libres;
- Des graines plissées sont à trois angles;
- Des pédoncules fructifères dressés, généralement articulés sous le milieu ou,

parfois, un peu au dessus.
- Des inflorescences qui portent peu de fleurs ;
- Des fruits avec des capsules sphériques de 4à 6mm contenant des graines
noires, plissées et triangulaires (OULD EL HADJ et al., 2003).
c. Répartition Géographique
Asphodelus tenuifolius est une espèce assez commune dans tout le Sahara Algérien
et dans les sous secteur des hauts plateaux (OZENDA, 2004). Cette plante est
originaire d'Afrique du Nord, du Sud Ouest de l'Europe, de la péninsule arabique, de
l'Asie du Sud, du Pakistan et de l'Inde (FREIJE et al, 2013).
I.3. Différence entre Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius
Le tableau ci-après récapitule les différences entre les deux plantes étudiées
Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius.
8
Tableau 2: Différence entre Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius.
Asphodelus microcarpus Asphodelus tenuifolius

 Appareil végétatif
 Forme
Eriger
biologique Eriger
 Ramification Unique, scape ramifié Unique ramifié
 Feuille - Disposition : Rosette basale Cylindriques, creuses, très

- Attachement : forme sessile et étroites
tige souterraine
- Forme : d’épée, longue et plate Couleur vert vif prenant
devient pointu à la fin. naissance à la base, avec les
- Nervures : nervures parallèles hampes courtes.
- Bord de la feuille : feuille
entière à extrémité lisse
 Bourgeon - Couleur blanche avec des

rayures brune rougeâtre
verticales
 Appareil
reproducteur
 Fleur - Couleur : blanche ou carnées - Couleur : blanche ou

- Parfum : agréable, doux rosées, à pédoncule non
- Taille : 35 mm recourbé après la floraison
- Nombre de pétale :6
 Inflorescence panicule portent peu de fleurs

 Fruits -Capsules vertes de forme -Forment des capsules qui
ovoïde contiennent de minuscules
graines noires.
I.4. Composition chimique d’Asphodelus microcarpus et d’Asphodelus

tenuifolius.
La composition chimique d’Asphodelus microcarpus et d’Asphodelus tenuifolius est

récapitulée dans le tableau suivant.
9
Tableau 3 : Quelques données chimiques sur d’Asphodelus microcarpus et d’Asphodelus tenuifolius.
Espèce Organes étudiés Molécules extraites Références

Asphodelus microcarpus 1.8 dihydroxyanthraquinone A. M. RIZK, 1971
Bichrysophanol
Aloe-emodin
Chrysophanol
Tige
Chrysophanol glycoside
Fleurs Racines
Feuilles
Partie aérienne Partie terrestre

A.M. RIZK,1971.
Fleurs Aloe-emodin
Chrysophanol
Asphodelus tenuifolius Chrysophanol glycoside
Partie aérienne
Tiges
Feuilles
10
I.5. Propriétés pharmacologiques d’Asphodelus
I.5.1. Utilisations comestibles
Les racines (tubercules), les graines et les tiges ont été consommés dans le passé. Le
tubercule peut être mangé cuit. Car il est riche en amidon, séchés et cuits à l'eau il
devient mucilagineuse et peut être mélangé avec les grains pour faire du pain nutritif.
L’ébullition détruit le principal âcre dans les tubercules, et les rendant très agréable à
manger la hampe florale (tige qui porte les fleurs) peut également être cuite et mangé.
Hésiode, poète grec (8ème siècle A.J.C), décrit asphodèle comme l'ingrédient de base
de la pâte d'un pauvre homme : " imbéciles qu'ils ne savent pas le grand bienfait de
l'asphodèle ". Hippocrate et Dioscoride disaient que les racines ont été mangés rôties
dans la cendre. Théophraste a raconté que la racine a été haché en purée avec les figues
et le toute a été consommé. Le byzantine (5ème siècle de notre ère) lexicographe
Hésychius d'Alexandrie (Hesychius d'Alexandrie), a également déclaré que la racine de
l'asphodèle est comestible. Les feuilles également ont été utilisées pour la production
d’un type spéciale du fromage italien Rignano garganico (Fournier ,1947).
I.5.2. Rôle et usage traditionnels :
Elle été utilisé pour traiter plusieurs maladies par les grecques et les latins mais elle
n’est pas très utilisé dans la médecine actuellement. Et elle est utilisé pour soulager ou
prévenir les spasmes (surtout pour le muscle lisse), et tend à augmenter le flux de l'urine
et favorise l'écoulement menstruel chez les femmes.
Une autre utilisation traditionnelle qui n’est plus utilisé actuellement est celle de la
dermatite et les brûleurs du soleil (Ruiz el al., 1990).
I.5.3. Intérêt thérapeutique
L’Asphodèle est une plante importante dans la pharmacopée traditionnelle (Fournier,

1948). La plante est utilisée en tisane, en poudre, ou en pommade pour les traitements
des fièvres, des indigestions, des constipations et des lésions cutanées.
En Maroc la décoction des racines est utilisée contre toutes les formes D’abcès et la
décoction de feuilles en cataplasmes contre les rhumatismes (Baba Aissa, 1991).
11
En Inde (Kotb, 1983), l’Asphodèle est utilisé pour traiter l’ulcère gastrique chez
l’homme en lui faisant absorber la poudre de la plante séchée dans un verre de lait.
La poudre issue des graines d’Asphodelus tenuifolius s’utilise par les populations de
Thari (Nara Désert, Pakistan) contre les hémorroïdes
En Algérie, les racines fraîches de l’Asphodèle macérées dans de l’huile servent à

traiter les otites. La poudre sèche de ces racines est utilisée en cataplasmes dans les
douleurs des rhumatismes. En mélange avec l’orge, la poudre d’Asphodèle est
conseillée comme diurétique (Ghileb 1987) Quand à la propriété curative la plus
certaine et confirmée par de nombreux travaux (Boukef ,1986 ; Ghileb, 1987 ; Baba
Aissa 1991) est l’utilisation du suc de la racine de l’Asphodèle dans le traitement des
mycoses cutanées.
12
II. Généralités sur les métabolites secondaires
Les plantes possèdent des métabolites dits « secondaires » par opposition aux
métabolites primaires que sont les protéines, les glucides et les lipides. On appelle
métabolites secondaires des composés bio synthétisés naturellement ces composées
possèdent des propriétés thérapeutiques et sont utilisés en médecine traditionnelle et
moderne (Nguyen et al., 2013).
On distingue classiquement plusieurs catégories de métabolites secondaires en fonction

de leur nature biochimique et de leur origine biosynthétique : les composés phénoliques
(tanins, quinones, flavonoïdes), les alcaloïdes, les quinones, les tritérpanoides et les
saponines (Priva et Aparna, 2012).
II.1. les composés phénoliques
Durant ces dernières années, plusieurs chercheurs se sont intéressés aux composants
phénoliques à cause de leur pouvoir à piéger les radicaux libres et les bienfaits
potentiels de leur consommation sur la santé humaine (Manach et al., 2004).
II.1.1. Définition des composés phénoliques
Les composés phénoliques regroupent un vaste ensemble de plus de 8 000 molécules,

divisées en une dizaine de classes chimiques, qui présentent tous un point en commun :
la présence dans leur structure d’au moins un cycle aromatique à 6 carbones, lui-même
porteur d’un nombre variable de fonctions hydroxyles OH (Hennebelle et al., 2004).
Les composés phénoliques diffèrent dans leur structure selon le nombre et la position
des hydroxylations et méthylations du cycle aromatique. On les retrouve dans de
nombreux fruits, légumes, le café, les prunes, les myrtilles, le raisin et les pommes
(Bourgou et al., 2008)..
II.1.2. Classification des composés phénoliques

Les polyphénoles sont divisés en plusieurs classe chimiques selon différents critères,
plusieurs classifications on été proposées :
 Lopéz et al., ont classé les polyphénols selon le nombre de carbone en dix
groupes (phénols simples , acide phénoliques, acide phénylacétique, acide
13
cénamique…, Naphtoquinones, Xanthones, Stilbènes, Flavonoïdes, Lignines,

Biflavonoides).
 Ribero-Gayou (1986) à classé les polyphones selon leurs répartition dans le
monde végétale en trois groupes : les composés les plus répondus (flavonoïdes),
les composés peu rependus ( biflavanoles), les composés complexes (tanins).
 Hennebelle et al., 2004 ont classé les polyphones selon en trois groupes selon la
couleur : les composés incolores (tanins), les composés jaunes orangés (les
flavonoïdes) , les composés jaunes violet (les anthocyanes).
 Fine (2000) ; Sarni-Manchado et Chynier (2006) classe les polyphénoles ont se
basant sur leurs squelette en deux groupes : les composés phénoliques simples
et les composés complexe (Forme condensés).
II.1.2.1. Les composés phénoliques simples
a. Acides phénoliques
Ce sont des composés organiques possédant au moins une fonction carboxylique et un

Hydroxyle phénolique. Ils sont représentés par deux sous-classes :
Les dérivés de l’acide hydroxybenzoïque et de l’acide hydroxycinnamique

(Thompsen et al., 1984).
b. Flavonoïdes
Présentes dans la plupart des plantes, les flavonoïdes sont des pigments polyphénoliques
qui sont responsable dans la plupart des colorations des fleurs et des fruits. Ils possèdent
de nombreuses vertus thérapeutiques. Ils sont particulièrement actifs dans le maintien
d’une bonne circulation. Certains ont aussi des propriétés anti-inflammatoires et anti
virales, d’autres ont des effets protecteurs sur le foie (Igor, 2002).
II.1.2.2. Polyphénols complexes (tanins)
Les tanins sont un groupe diversifié de métabolites secondaires des plantes qui ont deux
caractéristiques communes : tous sont des polyphénols et tous ont la capacité de fixer
les protéines. Cependant, l'étude des effets nutritionnels des tanins est complexe parce
que les plantes contiennent une grande diversité de tanins.
14
Certains tanins produisent des effets toxiques tandis que d'autres bénéficient de la santé
et de la nutrition (Harvey, 2006).
II.2. Les alcaloïdes
Sont des substances organiques d’origine végétale, azotées et à caractère alcalin. Bien
que beaucoup d’entre eux soient toxiques (comme la strychnine ou l’aconitine), ils
représentent les principes actifs de nombreuses plantes médicinales. Ils ont joué un rôle
important dans la découverte des médicaments (morphines, quinine cocaïne, atropine…)
et dans le développement de l’industrie pharmaceutique (Omulokoli et al, 1997).
L’étude de leur mécanisme d’action a conduit à les employer comme réactifs

biologiques en neurochimie et en chimiothérapie. Ils sont dotés aussi d’un pouvoir
antioxydant (Roué, 2011).
II.3. Quinones
Les quinones sont des composés intéressants qui ont des caractéristiques uniques et
plusieurs rôles importants. Ils sont largement distribués dans la nature, y compris dans
les tissus animale et végétale. Ils ont un rôle important dans la chaîne de transport
d'électrons pour maintenir les fonctions biologiques des plantes et des animaux. En plus
de ces rôles biologiques, les quinones ont été utilisées dans une grande variété de
pratique clinique (Girre et al ., 2006).
II.4. Les terpénoïdes
Ils représentent le groupe le plus diversifié des métabolites secondaires des végétaux,
plus de 15.000 composés différents sont décrits dans la littérature. Ils dérivent d’une
structure de base à cinq carbones (C5H8), communément appelée isoprène selon le
nombre répétitif de cette unité, les terpénoïdes sont classés en : monoterpénoïdes (CIO),
sesquiterpénoïdes (C15) et diterpénoïdes (C20) (Anderson et al., 2006).
II.5. Les saponines

Principaux constituants de nombreuses plantes médicinales, les saponines doivent leur
nom au fait que, comme le savon, elles produisent de la mousse quand on les plonge
dans l’eau. Les saponines existent sous deux formes, les stéroïdes et les triterpénoides
(Cavina et al ., 1999).
15
III. Propriétés biologiques des métabolites secondaires
III.1. Activités biologiques
Les métabolites secondaires responsables de multiples activités biologiques et

thérapeutiques, des études antérieures ont prouvé l'implication de ces composés
phénolique dans plusieurs activités biologiques telles que l’activité antioxydant,
l’activité antibactérienne l’activité anticancéreuse et l’activité enzymatique.
III.1.1. Activité antioxydante
Un antioxydant est défini comme étant toute substance qui peut retarder ou empêcher
l’oxydation des substrats biologiques. Les antioxydants sont des composés qui
réagissent avec les radicaux libres et les rendent ainsi inoffensifs, la raison pour laquelle
les antioxydants sont importants vient du fait que l'oxygène est un élément
potentiellement toxique puisqu'il peut être transformé en formes plus réactives telles que
le superoxyde (0 °2), le peroxyde d'hydrogène (H202), l'oxygène singulier (102) et les
radicaux hydroxyles (HO), collectivement connu sous le nom d'oxygène actif (Bozin et
al., 2008).
III.1.2. Activité antibactérienne
Les plantes n’ont pas un système immunitaire proprement dit qui peut identifier une
infection spécifique, leurs propriétés antimicrobiennes sont généralement efficaces
contre une large gamme de micro-organisme. Ces propriétés sont utiles pour les
infections chez les humais (Remmal et al., 1993).
III.1.3.Activité antifongique
Le pouvoir antifongique des plantes aromatiques a été mis en évidence par de nombreux
auteurs contre les moisissures allergisantes et contre les dermaphytes et les
champignons pathogènes et opportunistes tels que Candida albicans (levure)
(Billerbeck et al., 2002)
16
III.1.4. Activité anti-inflammatoire
Les plantes à activité anti-inflammatoire, sont des espèces ayant une action sur
plusieurs facteurs de l’immunité extra et intracellulaire comme ceux du
complément et, sont le plus souvent des plantes contenant des polysaccharides
spécifiques ayant une activité immunomodulatrice. Les polysaccharides sont les
constituants immunostimulants les plusefficaces (GOETZ, 2004). Les espèces
Astragalus armatus, Plantago notata, Asphodelus tenuifolius, et Urginea
noctiflora ont retenu l’attention en premier lieu pour leur utilisation traditionnelle
à Ghardaïa comme anti-inflammatoire et, en second lieu, en raison du peu de
travaux d’activités biologiques répertoriés sur ces quatre espèces végétales.
17
Chapitre II Matériels et méthodes
II. Matériels et méthodes
II.1. Matière végétale
Dans notre travail on a étudié deux plantes de genre Asphodèle à savoir

Asphodelus microcarpus (Fig.2) et Asphodelus tenuifolius (Fig.3). Ce sont les
feuilles et les tiges (partie aérienne) les tiges (partie aérienne) ainsi que les racines
(partie sous terraine) de ces plantes qui font l’objet de ce travail.
Figure 02: Asphodelus microcarpus Figure 03: Asphodelus tenuifolius
18
II.1.1. Origine géographique et période de récolte des plantes
Les échantillons d’Asphodelus microcarpus ont été récoltés dans la période de

floraison durant le mois de Mars 2017 dans la région de wellad guefiffa à 5
kilomètres de la Wilaya de BOUIRA.
Les échantillons d’Asphodelus tenuifolius ont été récoltés durant le moins d’avril
dans le Sahara Algérien (région de chaabna de Ghardaia).
La récolte des échantillons à été effectuée le matin pour éviter les effets de la
chaleur.
II.1.2. Préparation des échantillons
Les plantes étudiées subissent plusieurs étapes de traitements initiaux en vue

d’obtenir les extraits sur lesquels notre recherche sera réalisée.
Les opérations essentielles impliquées dans le traitement sont récapitulées dans le

schéma suivant (Fig.4 et Fig.5):
19

(Feuilles + racines) (Tiges + feuilles+ racines)
 Afin d’éliminer toute trace

Lavage
de terre
 Racines : en fines lamelles

Découpage  Feuilles+tiges : en petit
morceaux
 Dans un lyophilisateur qui consiste

Séchage à éliminer sous vide toute fraction
aqueuse contenue dans le produit.
 A l’aide d’un mortier à café

Broyage pour obtenir des poudres fines
qui vont faire l’objet de
l’extraction.
 Avec un tamiseur, afin d’obtenir

Tamisage une poudre fine et homogène de
granulométrie inférieur à 125 µm
 Dans des flacons en verre

Conservation hermétiquement fermés, étiquetés et
recouvre avec de l’aluminium pour
évité tout contacte avec la lumière.
Figure 04 : Schéma récapitulatif des étapes de traitements initiaux des

échantillons
20
A. Lavage a l’eau courante B. Découpage
D. Broyage avec un moulin

C. Lyophilisation
F. Conservation dans des flacons

E. Tamisage des poudres
en verre
Figure 5: Étapes de préparation des échantillons.
21
II.2. Détermination du taux d’humidité et la matière sèche
Le taux d’humidité est la quantité d’eau contenue dans le végétal frais. Le

principe de la détermination de l’humidité consiste à prendre une masse m1 de
l’échantillon et l’apporter à une température de 103°C à l’étuve jusqu'à ce que la
masse devienne constante (m2) (Barros et al., 2010).
Le taux d’humidité (H%) est calculé selon la formule suivante:
H% = ((m1 –m2)/m1) ×100 …………. (1).

D’où :
H% : Taux d’humidité en pourcentage;
m1 : Masse de l’échantillon avant séchage;
m2 : Masse de l’échantillon après séchage.
II.3. Extraction des métabolites secondaires

L’extraction est une étape qui permet la transformation de la matière végétale en
un extrait. Le choix du solvant d’extraction est un facteur déterminant dans la
procédure d’extraction. Ce choix dépend da la nature des composés recherchés.
Dans le présent travail, l’extraction a été réalisée par deux méthodes décrites par
(Raaman, 2006). Ces méthodes sont : une extraction par soxhlet et une
macération à froid.
Dans notre étude l’extraction a été réalisée en utilisant les solvants suivants :
eau/méthanol (30:70) (v/v) et eau/éthanol (30:70) (v/v) et eau bi- distillée.
II.3.1. Extraction par soxhlet

 Principe
L’extraction par Soxhlet est une méthode simple et convenable permettant de
répéter infiniment le cycle d’extraction avec du solvant frais jusqu'à l’épuisement
complet du soluté dans la matière première (william, 2007).
 Mode opératoire
Une quantité de poudre lyophilisée (20g) de chaque plante étudiée a été placées
dans une cartouche de cellulose (une matière Pénétrable pour le solvant), celle-ci
est placée à son tour dans l'extracteur de l'appareil de Soxhlet . Ce dernier est
monte sur un ballon chauffe à 60°C, contenant 250 ml de solvant d’extraction.
22
Dans notre étude l’extraction par soxhlet à été réalisée en utilisant les solvants
suivants : eau/méthanol (30:70) (v/v) et eau/éthanol (30:70) (v/v).
Au dessus duquel est placé un réfrigérant servant à liquéfier les vapeurs du
solvant.
Le ballon étant chauffé, le liquide est amené à ébullition, les vapeurs du solvant
passent par le tube de distillation et rentrent dans le réfrigérant pour être
liquéfiées. Ensuite, le condensat retombe dans le corps de l'extracteur sur la
cartouche, faisant ainsi macérer le solide dans le solvant. Le solvant condensé
s'accumule dans l'extracteur jusqu'au niveau du sommet du tube-siphon, suivi par
le retour dans le ballon du liquide de l’extracteur accompagné de substances
extraites. Ainsi le solvant dans le ballon s'enrichit progressivement en composants
solubles. L’extraction continue jusqu’à l’épuisement de la matière solide chargée
dans la cartouche.
L’extrait obtenu est filtrés à l’aide de papier filtre de 20 µm de diamètre et
conservée dans des flacons en verre opaque à une température de 4°C.
A l’issue de cette opération, l’extrait brut est évapore en utilisant un rotavapeur de
type STUART.
Le schéma d’extraction par un appareil Soxhlet est représenté sur la figure 6
23
Eau de refroidissement
Réfrigérant
Corps de l’extracteur
Cartouche
Tube de distillation
Ballon
Chauffe ballon
Figure 06: Extraction des métabolites secondaires par l’extracteur de soxhlet.
II.3.2. Macération à froid

 Macération
Une quantité de 5g de poudre végétale sont ajustés avec 100 ml de solvants
organiques: eau/méthanol (30:70) (v/v), eau/éthanol (30:70) (v/v), eau bi-distillée
(extrait aqueux).
Pour maintenir les particules en suspension, les solutions sont soumises à une
agitation pendant 24h à la température ambiante et à l’abri de la lumière.
Après 24 h de macération, les solutions ont été filtré sur un papier filtre. Les
filtrats récupérés sont en suite évaporés pendant 2h à 35 °C, à l’aide d’un rota
vapeur de type STUART.
Les extraits secs sont reconstitué dans l’eau bi-distillée, lyophilisés, et conservés à
4°C.
24
II.3.3. Taux d’extraction

Selon (Falleh et al., 2008) le taux d’extraction (rendement) est calculé comme
suit :
M ext
R% = × 100 …………… (2).
M éch
Avec :
R% : Taux d’extraction ;
M ext : La masse de l’extrait après évaporation du solvant en mg;
M éch : La masse sèche de l’échantillon végétal en mg.
II. 4. Tests phytochimiques

II. 4.1. Dosages qualitatifs
Le dosage qualitatif permet de mettre en évidence les différentes familles
chimiques présentes dans les extraits Asphodelus microcarpus et Asphodelus
tenuifolius par plusieurs réactions de coloration et de précipitation.
II.4.1.1.Les composés phénoliques simple (Flavonoïdes)

La présence des flavonoïdes est indiquée par la formation d’un complexe jaunâtre
(Iqbal, 2011).De ce fait, 1ml de chaque extrait est ajouté à 100 µl de chlorure
d’aluminium à 3% et quelques copeaux de magnésium.
II.4.1.2. Les composés phénoliques complexes : Tanins

Dans un tube à essai contenant 1ml d’extrait on a ajouté 200 µl d’une solution
aqueuse diluée de FeCl3 à 1%. En présence des tanins, il se développe une
coloration verdâtre ou bleu noirâtre (Karumi et al., 2004).
II.4.1.3.Les quinones libres

Sur un volume de chacun de nos extraits, on a ajouté quelques gouttes de NaOH
1%.L’apparition d’une couleur qui vire au jaune, rouge ou violet indique la
présence des quinones libres (Oloyde, 2005).
25
II.4.1.4. Les terpénoïde: Test de Slakowski
Pour caractériser les terpénoïde, on a ajouté à 5 ml de l’extrait, 2 ml de

chloroforme et 3 ml d’acide sulfurique concentré. La formation d’un anneau
marron- rouge à l’interphase indique la présence des terpénoides (Khan et al.,
2011).
II.4.1.5. Les saponosides

La caractérisation des saponosides est réalisée selon le protocole décrit par
N’Guessan et al, 2009. Cette caractérisation consiste à agiter 10 ml de l’extrait
pendant 15 secondes à raison de deux agitations par seconde, puis à mesurer la
hauteur de mousse formé après 15 min de repos (N’Guessan et al., 2009).
Pour obtenir la mousse une série des dilutions est préparée (10% ,20%, 30%,
40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%) en introduisant dans 10 tubes à essai 1
ml à 10 ml d’extrait de chaque plante et on complète à 10 ml avec de l’eau bi-
distillée. Une hauteur de mousse persistante et supérieur à 1 cm indique la
présence de saponosides.
L’indice de mousse (Im) se calcule à partir du numéro du tube (N) dans lequel la
hauteur de la mousse est de 1 cm.
L’indice de mousse (IM) est calculé par la formule suivante :
IM =1000/N……………………….. (3)
N : nombre de tube dans lequel la hauteur de mousse est égale ou supérieur à 1cm.
II.4.2. Dosages quantitatifs
4.2.1. Dosage des phénols totaux
La teneur des composés phénoliques à été déterminée selon le protocole décrit par
(Singleton et Rossi, 1965). A un volume de 500 µl d’extrait a été additionné de
2.5 ml de réactif de Folin-ciocalteu dilué à (1/10). Après 2 minutes d’incubation à
l’obscurité, 2 ml de carbonate de sodium (75%) sont ajoutés. L’absorbance a été
mesurée au spectrophotomètre de type XP 3000 à 760 nm après 15 min
26
d’incubation au bain marie à 50°C et refroidissement direct dans un bain de glace,

le dosage est effectué en triple.
La concentration en composés polyphénols totaux a été déterminée à partir de

l’équation de régression de la courbe d’étalonnage réalisée avec le standard étalon
d’acide gallique. Les résultats sont exprimés en milligrammes équivalents d’acide
gallique par gramme de poudre sèche (mg EAG/g de MS).
4.2.2. Dosage des tanins
Un volume de 1ml de l’extrait a été additionné à 5ml d’une solution qui se

compose de deux volumes de vanilline à 4% (préparé dans le méthanol) avec un
volume de HCL à 37 %. L’absorbance a été mesurée au spectrophotomètre à 500
nm après 20 min d’incubation à l’obscurité (Iqbal, 2011).
La teneur en tanins a été déterminée à partir d’une courbe d’étalonnage réalisée

avec la catéchine. Les résultats sont exprimés en milligramme d’équivalent
catéchine par gramme de la matière sèche (mg EC/g de MS).
4.2.3. Dosage des flavonoïdes
La teneur en flavonoïdes totaux à été déterminée par la méthode d’AlCl3 de

(Lamaison et carnet, 1990). 100 μl de chaque extrait est mélangé avec 1ml de la
solution méthanolique de AlCl3 (0.1 M). Après, 10 min d’incubation à l’obscurité,
la lecture est faite à 430 nm contre un blanc préparé sans extrait.
La teneur en tanins à été déterminée à partir d’une courbe d’étalonnage réalisée

avec la quercitrine. Les résultats sont exprimés en milligramme d’équivalent
quercitrine par gramme de la matière sèche (mg EQ/g de MS).
4.2.4. Dosage des chlorophylles a, b et caroténoïdes
Le dosage des chlorophylles a, b et caroténoïdes est basée sur la mesure des

absorbances à différentes longueurs d’ondes des extraits dilués à (1/10) : 664 nm
pour la chlorophylle a ; 648 nm concernant la chlorophylle b et 470 nm pour les
caroténoïdes. Selon (Lichtenthaler, 1982) les concentrations de la chlorophylle a,
chlorophylle b et des caroténoïdes dans les extraits ont été calculées selon les
formules suivantes :
27
Ca (µg /ml) = 13,36A664 , 1- 5,19A648,6…….(4)
Cb (µg /ml) = 27,43A648, 6 - 8, 12A664,1……(5)
CX+C (µg /ml) = (1000A470 – 2, 13 Ca – 97,64Cb)/209………… (6)
II.5. Activités biologiques
II.5.1. Activités anti-oxydante
L’activité antioxydante des deux plantes Asphodelus microcarpus et Asphodelus

tenuifolius à été évalué sur l’extrait qui présente le rendement le plus élevé et la
quantité la plus élevée en poly phénols totaux.
Les méthodes les plus employés pour évaluer l’activité anti-oxydante des extraits
des plantes sont celles impliquant des composés chromogènes de nature
radicalaire. La présence des anti-oxydants dans les extraits des plantes conduit à la
disparition de ces radicaux. Les deux radicaux les plus utilisés sont les radicaux
ABTS et DPPH (Adhikari et al., 2007, Blanc et al., 2011).
Dans notre travail, l’activité antioxydante des extraits d’Asphodelus à été évaluée
in vitro par la méthode de piégeage du radical libre DPPH (2,2-diphényle-1-
picrylhydrazyl), qui se caractérise par sa capacité de former des radicaux libres
stables. La présence de ces radicaux DPPH donne lieu à une coloration violette
foncée de la solution, qui absorbe aux environs de 517 nm. La réduction des
radicaux DPPH par un agent antioxydant entraîne une décoloration de la solution
qui devient jaune pâle et une diminution de l’absorbance (Coelhoa et al., 2011).
Pour chaque extrait, des dilutions ont été préparées dans de méthanol (100 mg/l à
800 mg/l). 25 μl des extraits à différentes concentrations est ajouté à 975 μl
d’une solution de DPPH (10-3 M). Après incubation à l’abri de la lumière et à
température ambiante pendant 30 min, l’absorbance est mesurée à 517 nm (Atoui
et al., 2005).
Le pourcentage d’inhibition I est calculé selon la formule suivante :
I % = 100(A0 - At)/ A0 ……………………………. (7)
Avec :
I % : Pourcentage d’inhibition ;
A0 : Absorbance du contrôle (DPPH à 10-3 M) ;
28
At : Absorbance de l’extrait.
II.5.2. Activité anti-bactérienne
L’activité anti-bactérienne des deux plantes Asphodelus microcarpus et

Asphodelus tenuifolius à été évalué sur l’extrait qui présente le rendement le plus
élevé et la quantité la plus élevée en poly phénols totaux.
Pour la mise en évidence de l’activité antibactérienne, deux souches bactériennes

ont été testées vis-à-vis de nos extraits, à savoir Staphylococus aureus (bactérie
Gram Positif) et Escherchia Coli (bactérie Gram Négatif). Ces bactéries différent
l’une de l’autre par leurs structure cellulaire et leur métabolisme particulier
(Tab.4). Les souches bactériennes utilisées proviennent de l’Institut Pasteur
d’Alger.
29
Tableau 4 : Différence entre les deux bactéries.
Staphylococus aureus Escherchia Coli
 Ce sont des cocci à Gram positif  Bactérie à Gram Négatif

 De forme sphérique qui tendent à  Ce genre appartient à la famille des
se grouper en amas irréguliers ou entérobacteriacae, qui sont des
réguliers à la façon d’une grappe hôtes du tube digestif de l’homme
de raisin (Nauciel, 2000). et des animaux (nombreuses
 Des germes aérobie- anaérobie souches de cette famille ont été
facultatif (Nauciel, 2000). isolées de l’environnement
aquatique ou terrestre).
 Ce sont une composante  C’est l’espèce dominante de la flore
essentielle de la flore humaine aérobie du tube digestif (Nauciel,
normale, mais comprennent aussi 2000).
des espèces qui sont d’importants
pathogènes.
 Ce sont des germes ubiquistes  Ces bactéries cultivent facilement
largement distribués dans sur milieux ordinaires et utilisent
l’environnement naturel de des composés organiques simples
l’homme. comme source d’énergie (sucres,
acides aminés, acides organiques).
 L’espèce est responsable de  L’espèce est responsable
plusieurs infections (osseuses, d’infections intestinales (gastro-
digestives, pyogène de la peau et entérites et diarrhées) leurs pouvoir
des muqueuses…) (Tony et Paul, pathogène est induit par des
1997). facteurs d’adhésion et/ou par la
production d’entérotoxines
(Leclerc et al., 1995).
30
Pour évaluer l’activité antibactérienne des extraits d’Asphodelus microcarpus et

Asphodelus tenuifolius nous avons adopté la méthode de diffusion en milieu
solide ou méthode des disques. Cette méthode consiste à déterminer le diamètre
de la zone d’inhibition de la croissance microbienne autour de disque, ce qui
traduit l’effet du produit antimicrobien sur la cible (Bassole et al., 2001).
II.5.2.1. Préparation de l’inoculum
Préparation de l’inoculum s’effectue en deux étapes, la préparation de la pré-

culture et la préparation de la suspension bactérienne.
A.Préparation des pré-cultures
Dans une zone stérile à coté du bec benzène, on repique les différentes souches
bactériennes utilisées (Escherichia coli, Staphyloccocus aureus) à l’aide d’une
pipette pasteur stérile dans un bouillon nutritif (BN), puis elle est incubée à une
température de 37°C pendant 24heures. Ensuite ces souches bactériennes ont été
cultivées dans des boites de pétri contenant la gélose nutritive, pendant 18 heures
à 37°C (Bassole et al, 2001).
B. Préparation de la suspension bactérienne
On prépare des suspensions bactériennes à partir des cultures de gélose en

prélavent quelques colonies à l’aide d’une pipette Pasteur stérile et en
l’introduisant dans des tubes à essai contenant 5 ml d’eau physiologique stérile.
Après agitation par un vortex, on obtient des troubles au niveau du tube,
l’ajustement de la suspension à une concentration de 105 à 106 UFC/ml (UFC : p
II.5.2.2. L’ensemencement
Dans des boites de Pétri de 9 cm de diamètres, les milieux de culture gélose mac
conkey (milieu d'isolement des bactéries du genre Escherichia coli) et Chapman
(milieu d'isolement sélectif des bactéries du genre Staphylococcus) ont été coulé
et laissé refroidir et solidifier sur la paillasse, après chaque boites de Pétri est
inoculé avec 1ml de la suspension microbienne fraichement préparée
(L’ensemencement est effectué dans 15 minutes qui suivent la préparation de
l’inoculum) à l’aide d’un râteau.
 Dépôt des disques
31
A la surface des boites inoculées on dépose à l’aide d’une pince stérilisée des
disques à qui ont été stérilisés dans des tubes à essai dans l’autoclave. Chaque
disque est imbibé de 20 µl de l’extrait.
 Lecture
L’activité bactérienne se manifeste par l’apparition d’un halo d’inhibition de la

croissance bactérienne autour des disques contenant l’extrait à tester.
La lecture s’effectue par la mesure du diamètre d’inhibition (D) mesuré à l’aide

d’une règle, le résultat de cette activité est exprimé en mm.
Le micro-organisme testé est considéré comme :
Souche résistante (-) : D < 8mm
Souche sensible (+) : 9mm ≥ D ≤14mm
Souche très sensible (++) : 15mm ≥ D ≤19 mm
Souche extrêmement sensible (+++) : D > 20 m.
II. 6. Analyse statistique
Les courbes et les histogrammes sont tracés par le Microsoft Excel 2007.
Les résultats des tests effectués sont exprimés en moyenne ± écart-type SD. Les
valeurs d’IC50 (concentration inhibitrice à 50%) sont calculées par la méthode de
régression linéaire à partir de la courbe [% inhibition = f (concentration)].
La figure 07 récapitule les différentes expériences réalisées sur les extrais de la

partie aérienne (feuille te tige) et la partie sous terraine (racines) des deux plantes
étudiées Asphodelus microcarpus (Fig.02) et Asphodelus tenuifolius (Fig.03).
32
Matière végétale
Extraction sous reflux
Aqueux Méthanolique Éthanolique
Filtration
Evaporation
Redissolution
Extrait
Etude phytochimique Activités biologique
Tests Dosages Activité Activité anti-

qualitatifs quantitatifs antioxydante microbienne
Figure 07: Schéma récapitulatif de tout la partie expérimental
33
Chapitre III Résultats et interprétation
I. Détermination du Taux d’humidité du matériel végétal

Le taux d’humidité est la quantité d’eau contenue dans le végétal frais.
Le taux d’humidité Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius est récapitulé

dans le tableau ci-après.
Tableau 5 : Taux d’humidité d’ Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius.

Partie Partie sous Partie Partie sous
aérienne terraine aérienne terraine
(feuille +tige) (racine) (feuille +tige) (racine)
Taux 86.19 % 84.52% 83.23 % 81.90 %
d’humidité
Écart type (±0.06) (±0.04) (±0.05) (±0.04)
D’après les résultats obtenus le taux d’humidité des feuilles et des racines d’Asphodelus
microcarpus prévenant du nord algérien et de 86.19 % (±0.06), 84.52% (±0.04)
respectivement, tandis que le taux d’humidité d’Asphodelus tenuifolius prévenant du
sud algérien est de 83.23 % (±0.05), 81.90 % (±0.04). Ces différences sont
probablement dues aux différences environnementales entre les régions.
II. Rendement d’extraction
Après extraction et évaporation des filtrats, les taux d’extraction sont calculés et les
résultats obtenus sont présentés dans la figure 8 pour Asphodelus microcarpus, et la
figure 9 pour Asphodelus tenuifolius.
II.1. Asphodelus microcarpus
40 35,6 35,4
34,98 34,98
35 30,56
Rendements (%)
30 28,6
26,24
25,36 24
25
20 20,28
Partie terrestre
15
Partie aérienne
10
5
0
Soxhlet Soxhlet Macération Macération Macération
méthanol éthanol méthanol éthanol aqueuse
Figure 8: Rendement d’extraction de la partie sous terraine et aérienne d’Asphodelus

microcarpus.
34
D’après la figure 8, nous remarquons que le rendement le plus élevé est obtenu par
l’extracteur soxhlet. Et le solvant eau /méthanol aux proportions (30/70) (v/v) a permis
d’obtenir le meilleur rendement dans la partie sous terraine (35.6 %) et dans la partie
aérienne (34,98 %).
Les résultats obtenus (Fig. 8) montrent que la partie sous terraine d’Asphodelus
microcarpus présente les taux d’extraction les plus élevés.
II.2. Asphodelus tenuifolius
40
34,88 33,56
35 34,09
30,52 29,84
Rendements (%)
30 29,39
26,02
25 22
20 19,31
16
15
10 Partie terrestre
5 Partie aérienne
0
Figure 9: Rendement d’extraction de la partie sous terraine et aérienne d’Asphodelus

tenuifolius
D’après les résultats présentés dans la figure 9, on remarque que le rendement le plus
élevé est obtenu pour la méthode d’extraction par soxhlet avec des taux d’extraction
d’ordre de 34,88% pour la partie sous terraine et 34,09% pour la partie aérienne. Le
solvant eau/méthanol aux proportions (30/70) (v/v) a permis d’obtenir le meilleur
rendement 34.88% pour la partie sous terraine et de 34.09 % pour la partie aérienne,
suivis du solvant eau/éthanol (30/70) (v/v) avec un rendement de 30.52 % pour la
partie sous terraine et de 29.84 % pour la partie aérienne. Ces résultats indiquent que la
partie sous terraine d’Asphodelus tenuifolius présentent les taux d’extraction les plus
élevées.
L’extraction peut être influencée par la méthode et le solvant d’extraction. Le

choix du solvant d'extraction est primordial, il joue un rôle déterminant sur la quantité
ainsi que sur le type de composés phénoliques à extraire et la sensibilité de ces derniers
(Hayouni et al., 2007). D’autres paramètres peuvent influencer le taux d’extraction à
35
savoir le temps d’extraction, la taille des particules, les conditions de préparation des
échantillons, la durée et les conditions de stockage.
La figure 10 Récapitule les taux d’extraction des deux plantes étudiées Asphodelus
microcarpus et Asphodelus tenuifolius par la méthode la plus efficace pour l'extraction :
le solvant eau/méthanol aux proportions (30/70) (v/v) par l’extracteur soxhlet.
36
35,5
Asphodelus
Rendement (%)
35
microcarpus
34,5 Asphodelus
tenuifolius
34
33,5
33
Partie aérienne Partie terrestre
(feuille+tige) (racine)
Figure 10 : Rendement d’extraction des deux plantes étudiées Asphodelus microcarpus

et Asphodelus tenuifolius.
La figure 10 montre que les taux d’extraction d’Asphodelus microcarpus sont un peu
plus élevés que les taux d’extraction Asphodelus tenuifolius. Cette différence pourrait
être liée à la région de récolte des deux plantes Asphodelus microcarpus dans la région
de wellad guefiffa wilaya de Bouira et Asphodelus tenuifolius dans la région de
Ghardaia.
III. Tests phytochimiques
III.1. Dosage qualitatifs
La phytochimie qualitative permet de générer pour une première estimation des

données préliminaires sur les différentes familles chimiques présentes chez les deux
plantes Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius, et ce par des réactions
colorées et de précipitation.
36
III.1.1. Asphodelus microcarpus
Les résultats de dosage qualitatif réalisés sur les trois types d’extraits (éthanolique,
méthanolique et aqueux) d’Asphodelus microcarpus sont présentés dans les tableaux 6.
D’après les résultats obtenus nous remarquons la présence des flavonoïdes, des tanins,
des quinones libres et des terpénoïdes dans la partie sous terraine ainsi que la partie
aérienne de l’Asphodelus microcarpus.
L’analyse de ces résultats permet de constater que le solvant eau/méthanol (30 :70)
(v/v) a extrait une quantité meilleure en familles chimiques par rapport aux autres
solvants.
37
Tableau 6: Résultats du dosage qualitatif d’Asphodelus microcarpus.
Composés phénoliques
simple complexes
Extrait Quinones libres Terpénoïdes
Flavonoïdes Tanins
1.Asphodelus microcarpus
1.1. Asphodelus microcarpus partie sous terraine

A. Extrait méthanolique
A.1. Soxhlet + + ++ ++
A.2.Macération + + - +
B. Extrait éthanolique
B.1. Soxhlet + + ++ -
B.2. Macération + + ++ +
C. Extrait aqueux
C.1.Macération + + ++ +
1.2. A sphodelus microcarpus partie aérienne
A.1. Soxhlet + ++ ++ ++
A.2. Macération + ++ ++ -
B.1. Soxhlet + ++ + -
B.2. Macération + ++ + -
C. Extrait aqueux
C.1. Macération + + - +
+ : Présence Tanins : ++ : coloration bleu noirâtre ; + : coloration verdâtre
- : Absence Quinones libres : ++ : rouge ; + : jaun
38
D’après le tableau 7 la mousse est formée dans tous les extraits d’Asphodelus
microcarpus, cette mousse est due à la saponification des extraits testés. Ce résultat
reflète la présence des saponines dans les différents extraits.
Les résultats obtenus indiquent que les saponines sont présentes beaucoup plus dans les
racines d’Asphodelus microcarpus que dans les feuilles et les tiges.
L’indice de mousse calculé pour les extraits obtenus à partir des racines est de l’ordre
de 100 % pour l’extrait méthanolique. Ce résultat indique que le méthanol étant le
solvant le plus efficace pour l’extraction des saponines.
La comparaison des deux méthodes d’extraction montre que l’extraction à froid

(macération) étend la plus efficace pour la caractérisation des saponines.
39
Tableau 7: Résultats du dosage qualitatif des saponines d’Asphodelus microcarpus.
Extrait Saponine
1. Asphodelus Observation après 15 min IM

microcarpus
1.1. Asphodelus microcarpus partie sous terraine
A. Extrait méthanolique 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%
A.1. Soxhlet ++ ++ ++ ++ + + + + + + 250
A.2. Macération +++ +++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ 100
B. Extrait éthanolique 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%
B.1. Soxhlet + + + + + + + ++ ++ ++ 333,3
B.2. Macération +++ ++ ++ ++ + + + + + + 250
C. Extrait aqueux 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%
C.1. Macération T T T T T T T T T T
1.2. Asphodelus microcarpus partie aèrienne
A.1. Soxhlet T T T T T T + + ++ ++ 500
A.2. Macération + + + + + ++ ++ ++ ++ ++ 250
B.1. Soxhlet T T T T T T T T T T /
B.2. Macération T T T T T T T T T T /
C. Extrait aqueux 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%
C.1. Macération T T T T T T T T T T /
T : présence des saponines en état de traces + : 0.5˂ Hauteur de mousse ˂0.
++ : Hauteur de mousse = 1 cm +++ : Hauteur de mousse >1cm
40
III.1.2. Asphodelus tenuifolius
D’après les résultats (Tab.8 et de Tab.9) nous remarquons la présence des flavonoïdes,
des tannins, des quinones libres et des terpénoïdes et des saponines dans la partie sous
terraine ainsi que dans la partie aérienne de l’Asphodelus tenuifolius.
L’analyse de ces résultats permet de constater que le méthanol extrait une quantité
meilleure en familles chimiques par rapport aux autres solvants.
L’indice de mousse calculé pour les extraits obtenus à partir des racines (Tab.9) est de
l’ordre de 100 % pour l’extrait méthanolique. Ce résultat indique que le méthanol étant
le solvant le plus efficace pour l’extraction des saponines, et que la macération est plus
efficace pour la caractérisation des saponines.
41
Tableau 8: Résultats du dosage qualitatif d’Asphodelus tenuifolius.
Composés phénoliques
simple complexes
Extrait Quinones libres Terpénoïdes
Flavonoïdes Tanins
2. Asphodelus tenuifolius
2.1. Asphodelus tenuifolius partie sous terraine
A.1. Soxhlet ++ ++ ++ ++
A.2. Macération + + ++ +
B.1. Soxhlet + ++ ++ +
B.2. Macération - + + -
C. Extrait aqueux
C.1. Macération + ++ ++ +
2.2. Asphodelus tenuifolius partie aèrienne
A.1. Soxhlet ++ ++ ++ +
A.2. Macération + ++ ++ +
B.1. Soxhlet + ++ ++ -
B.2. Macération - ++ ++ -
C. Extrait aqueux
C.1. Macération + + - +
+ : Présence Tanins : ++ : coloration bleu noirâtre ; + : coloration verdâtre
- : Absence Quinones libres : ++ : rouge ; + : jaune
42
Tableau 9: Résultats de dosage qualitatif des saponines d’Asphodelus tenuifolius
Extrait Saponosides
2. Asphodelus tenuifolius Observation après 15 min IM

2.1. Asphodelus tenuifolius partie sous terraine
A.1. Soxhlet + + + ++ ++ ++ ++ +++ +++ ++ 250
A.2. Macération ++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ +++ +++ +++ 100
B.1. Soxhlet +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ +++ ++ ++ 250
B.2. Macération T T T T + + + + ++ ++ 500
C. Extrait aqueux 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%
C.1. Macération T T T T T T T T T T
2.2. Asphodelus tenuifolius partie aèrienne
A.1. Soxhlet - - - - - - - - - -
A.2. Macération T T T T T + + ++ ++ ++
B.1. Soxhlet T T T - - - - - - -
B.2. Macération T T T T T T T T T T
C. Extrait aqueux 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%
C.1. Macération - - - - - - - - - -
T : présence des saponines en état de traces + : 0.5˂ Hauteur de mousse ˂0.
++ : Hauteur de mousse = 1 cm +++ : Hauteur de mousse >1cm
43
Au regard des résultats obtenus à partir de l’étude phytochimique qualitatif, il ressort
que le solvant eau / méthanol aux proportions (30/70) (v/v) est plus efficace pour une
première caractérisation de différents composés chimiques présentes dans les deux
plantes étudiées (Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius ) par rapport aux
autres solvants : eau / ethanol aux proportions (30/70) (v/v) et eau bi-distillée.
III.2. Dosage quantitatif
III.2.1. Dosage des polyphénols totaux, des flavonoïdes et des tanins
III.2.1.1.les phénols totaux
Le dosage des polyphénols totaux a été effectué selon la méthode au réactif de Folin
Ciocalteu (Singleton et al., 1999) et l’acide gallique a été utilisé comme étalon.
La courbe d’étalonnage réalisée avec l’étalon acide gallique pour le dosage des
polyphénoles totaux est représentée dans la figure 11.
Densités
optiques
1
0,9
0,8 y = 0,1148x - 0,0375
R² = 0,9976
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0 Concentration de
10 20 30 40 50 60 70 80 l'acide gallique en μg/ml
Figure 11 : La courbe d’étalonnage réalisée avec l’étalon acide gallique pour le dosage
des polyphénoles totaux.
a. Asphodelus microcarpus
Les résultats de dosage des phénols totaux pour Asphodelus microcarpus sont portés
dans la figure 12.
44
160 150,91
143,24
Concentrations en μg EAG/mg
140
120
de matière sèche
100
80 68,89 67,89
62,22 61,22 Partie terrestre
60
47,43 partie aériénne
40
29,22 34,7828,26
20
0
Extraits
Figure12: Teneurs en polyphénols totaux dans les extraits l'Asphodelus microcarpus.
D’après les résultats portés dans la figure 12, la plus grande quantité des polyphénols
totaux est détectée dans la partie sous terraine d’Asphodelus microcarpus (150.91
ugEAG/mg de MS), suivie de la partie aérienne ( 62.22 ugEAG/mg de MS).
Selon les résultats enregistrés la méthode d’extraction par soxhlet donne une teneur en
polyphénols totaux de 150.91 μg EAG/mg de MS pour le solvant eau/méthanol et de
143.24 μg EAG/mg de MS pour le solvant eau /éthanol, dans la partie sous terraine, et
dans la partie aérienne la quantité des polyphénols est de l’ordre de 62.22 EAG/mg de
MS et 61.22 EAG/mg de MS pour le solvant eau/ méthanol et eau/ éthanol
respectivement. Ces teneurs sont supérieures à ceux obtenues par macération (68.89μg
EAG/mg de MS, 67.89 μg EAG/mg de MS et 34.78 EAG/mg de MS pour les solvants
eau/méthanol, eau /éthanol et eau –bi distillée respectivement, dans la partie sous
terraine, et 42.43μg EAG/mg de MS, 29.26 μg EAG/mg de MS et 28.26 EAG/mg de
MS pour les solvants eau/méthanol, eau /éthanol et eau b-distillée respectivement, dans
la partie aérienne).
b. Asphodelus tenuifolius
Les résultats de dosage des phénols totaux pour Asphodelus tenuifolius sont portés dans
la figure 13.
45
Concentrations en μg EAG/mg 196,9

200 178,31
180 158,19
de matière sèche
160
140
120
100
Partie terrestre
80 62,37 58,92
49,72 Partie aérienne
60 43,59
31,71 34,59 27,88
40
20
0
Extraits
Figure 13: Teneurs en polyphénols totaux dans les extraits d'Asphodelus tenuifolius.
D’après les résultats obtenus pour Asphodelus tenuifolius (Fig.13) la méthode et le

solvant qui donne des teneurs les plus élevées en phénols totaux est soxhlet par
méthanol avec des valeurs de 196.90 μg EAG/mg MS dans la partie sous terraine et
178.31 μg EAG/mg MS dans la partie aérienne, suivi par la méthode de macération. Ces
résultats reflètent la richesse de la partie sous terraine en composés phénoliques.
III.2.1.2.Les flavonoïdes
Le dosage des flavonoïdes a été réalisé selon la méthode au trichlorure d’aluminium
(Kim et al., 2003) et la catéchine a été utilisé comme étalon (Fig.14). Les teneurs sont
exprimées en μg d’équivalant catéchine par mg de matière sèche (μg EC/mg MS).
46
Donsité optique
1 y = 0,119x - 0,0366
0,9 R² = 0,9974
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
10 20 30 40 50 60 70 80
Concentration de la cathéchine en ug/ml
Figure 14: Courbe d’étalonnage de la catéchine pour le dosage des flavonoïdes.

Les résultats de dosage de flavonoïdes d’ Asphodelus microcarpus sont portés dans la
figure 15.
Concentrations en μg EC/mg
45,05 45,05
50
39,67 36,53
40 35,05
de matière sèchee
32,83 31,35 31,27

29,5
30 22,27
Partie terrestre
20
Partie aérienne
10
0
Figure 15 : Teneurs en Flavonoïde dans les extraits d’Asphodelus microcarpus étudiés.
les résultats obtenus (Fig.15 ) pour le dosage des flavonoïdes indiquent que la méthode
d’extraction par soxhlet en utilisant le solvant eau/ méthanol présente la teneur la plus
élevée des flavonoïdes (45,05 μg EC/mg de MS dans la partie sous terraine et 42,44 μg
E C/mg de MS dans la partie aérienne), suivi par la méthode de macération, les extraits
méthanolique 2thAnolique et aqueux ont montré respectivement les concentrations
suivantes : 36.53 μg E C/mg de MS, 31.35 μg E C/mg de MS, 29.5 μg E C/mg de MS
pour la partie sous terraine respectivement, et 32.83 μg E C/mg de MS, 31.27 μg E
47
C/mg de MS, 22.27 μg E C/mg de MS pour la partie aérienne respectivement. Ces
résultats indiquent que les flavonoïdes sont très abondants dans la partie sous terraine
d’Asphodelus microcarpus que la partie aérienne.
60
μg EC/mg de matiére seche
49,84 49,47 47,43 47,99

50 44,88
42,44
Concentration en
41,7
40 35,05
30,08
30 29,32
Partie terrestre
20
Partie aérienne
10
0
Extraits
Figure 16: Teneurs en Flavonoïde dans les extraits d’Asphodelus tenuifolius.
Les résultats de dosage de flavonoïde (Fig.16) montrent que la partie sous terraine
d’Asphodelus tenuifolius est riche en flavonoïde que la partie aérienne. Ils contiennent
respectivement 49.84 μg EC/mg de MS et 49.47 μg EC/mg de MS pour la méthode
d’extraction par soxhlet en utilisant le solvant eau/méthanol cette méthode représente la
méthode la plus rentable pour le dosage quantitatif des flavonoïdes pour Asphodelus
tenuifolius.
III.2.1.3. Les tannins

Le dosage des tanins a été effectué selon la méthode à la vanilline (Sun et al,. 1998), et
l’étalon utilisé été la quercétine (Fig.17). Les résultats sont exprimés en μg d’équivalant
quercitrine par mg de la matière sèche (μg EQ/mg MS).
48
Dosité optique
1,2 y = 0,1264x + 0,0934
R² = 0,9971
1
0,8
0,6
0,4
0,2
Concentration de
0
la qercétine en ug/ml
5 10 15 20 25 30 35 40
Figure 17 : Courbe d’étalonnage de la catéchine pour le dosage des tannins.
Les résultats de dosage des tanins pour Asphodelus microcarpus sont portés dans la
figure 18.
25
22,38
21,38
20,29
20 Partie terrestre
18,37 17,5
Concentrations en
16,29
μg EQ/mg MS
Partie aérienne
14,72
15
11,41
10,54
10 8,63
0
Extraits
Figure 18: teneurs en tanin dans les extraits de l'Asphodelus microcarpus étudiés.
Les résultats de dosage des tanins dans Asphodelus microcarpus montre que c’est les
extraits de la partie sous terraine qui possèdent la teneur la plus élevés en tanins
(Fig.18) et ceux pour toute les méthodes d’extraction et les solvant utilisés.
La teneur des tanins des extraits Asphodelus microcarpus est bien évaluée par la
méthode d’extraction par soxhlet avec le solvant eau/méthanol pour les deux parties
49
terrestres et aérienne avec des teneurs de l’ordre de 22.38 de μg EQ/mg MS et 21.38 μg
EQ/mg MS respectivement.
La teneur en tanins des différents extraits est donnée dans la figure 19.
30
24,81
25 23,25 Partie terrestre
21,16 Partie aérienne
20
Concentrations en
18,2
μg EQ/mg MS
17,5
16,63 16,29
15
11,93
10
4,8 4,45
5
0
Extraits
Figure 19: Teneurs en tanin dans les extraits de l'Asphodelus tenuifolius.
D’après les résultats de la figure 19 les extraits de la partie sous terraine l'Asphodelus
tenuifolius sont plus riches en tanins que les extraits de la partie aérienne. Et ils
contiennent respectivement 24.81 μg EQ/mg MS et 21.16 (pour l’extraction par soxhlet
eau/méthanol). Ces teneurs représentent les valeurs les plus élevées en comparaison
avec les autres méthodes et solvant utilisés (Fig.19), ce qui nous laisse suggérer que
l’extraction par l’extracteur soxhlet avec eau/méthanol permet un meilleur dosage
quantitatif des tannins pour l'Asphodelus tenuifolius.
Les résultats enregistrés dans les figures (12, 13, 15,16, 18, 19) montrent que
l’extraction par soxhlet en utilisant le solvant eau/méthanol avec les proportions (30/70)
(v/v) est plus efficace pour le dosage quantitatif des polyphénols totaux, des flavonoïdes
50
et des tannins dans les deux plantes étudiées Asphodelus microcarpus et Asphodelus
tenuifolius.
Le tableau 10 récapitule les teneurs des poly phénols totaux, des flavonoides et des
tanins des deux plantes étudiées Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius par
la méthode la plus efficace pour l'extraction : le solvant eau/méthanol aux proportions
(30/70) (v/v) par l’extracteur soxhlet.
Tableau 10 : Les teneurs en poly phénols totaux, des flavonoides et des tanins des deux
plantes étudiées Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius.
plante Asphodelus microcarpus Asphodelus tenuifolius

Partie sous Partie Partie sous Partie
teneurs terraine aérienne terraine aérienne
Teneurs en 196.90 178.31 150.91 62.22

polyphénols totaux
en μg EAG/mg de
MS
Teneurs en 45.05 12.44 49.43 47.44
Flavonoïde
totaux en μg EC/mg
de MS
Teneurs en Tanins 22.38 21.29 24.81 21.16
en μg EQ/mg de MS
Le tableau 10 montre que :
- La plus grande quantité des polyphénols totaux à été détectée dans les extraits
de la partie sous terraine et aérienne d’Asphodelus microcapus.
 Le pourcentage des flavonoïdes et des tanins dans les polyphénoles

En comparant le pourcentage des flavonoïdes et des tanins dans les polyphénoles totaux
pour les extraits issus de l’extraction par soxhlet aves eau/méthanol (30/70) (v/v) nous
obtiendrons les résultats représentés dans la figure suivante.
51
100,00
34,49 54,12
65,75 86,05
80,00
60,00
32,75
Autres polyphénols %
40,00 11,87
11,37 Tanins en %
20,00 32,75 34,01 Flavonoide en%
22,88 6,98
6,98
0,00
partie Partie partie Partie
terrestre aérienne terrestre aérienne
Asphodelus Asphodelus
microcarpus tenuifolius
Figure 20: Le pourcentage des flavonoïdes et des tanins dans les polyphénoles totaux.
D’après les résultats portés dans la figure 20 nous remarquons que:
- d'autres composés phénoliques possédant d’autres structures chimiques que
celles des flavonoïdes et des tanins (acides phénoliques, Quinones libres...)
présentant le plus grande pourcentage des composés phénoliques d’ Asphodelus
microcarpus et d’Asphodelus tenuifolius.
III.2.2. Dosage de la chlorophylle a, b, et caroténoïdes

Les résultats de dosage quantitative de la chlorophylle a, b, et caroténoïdes des
différents extraits obtenus par macération et l’extraction par soxhlet sont représentés
dans la figure 21 et la figure 22 pour la partie aérinne d’Asphodelus microcarpus et
Asphodelus tenuifolius.
52
Tableau 11: Les concentration de la chlorophylle a, b et des caroténoïdes des extraits
d’Asphodelus microcarpus.
Extrait La concentration La concentration La concentration

la chlorophylle a la chlorophylle b des caroténoïdes
Soxhlet méthanol 50,69 77,86 1,34
Soxhlet éthanol 45.95 56.87 8.27
Macération méthanol 28.95 32.97 3.83
Macération éthanol 21,35 24,58 2,06
Macération 15,03 16,61 8,08
80
70
60
50
Chlorophylle a
40
caroténoïdes
30
Chlorophylle b
20
10
0
Figure 21: Concentration en chlorophylle a, chlorophylle b et caroténoïdes dans les

différents extraits d’Asphodelus microcarpus
La figure 21 montre que la teneur de la chlorophylle a et b de la partie aérienne
d’Asphodelus microcarpus est très élevés dans les extraits obtenus par la méthode de
soxhlet pour les deux solvants utilisées méthanols et éthanols. Tandis que, le taux le
plus élevé des caroténoïdes est enregistré pour l’extrait obtenu par la méthode de
soxhlet éthanol (fig. 21).
53
Tableau 12: Les concentration de la chlorophylle a, b et des caroténoïdes des extraits
d’Asphodelus tenuifolius.
Extrait La concentration La concentration La concentration

la chlorophylle a la chlorophylle b des caroténoïdes
Soxhlet méthanol 73,2 80,46 6,46

Soxhlet éthanol 55.34 58.84 36.56
Macération méthanol 13.31 16.48 4.96
Macération éthanol 14,41 13,38 6,33
Macération 12,54 12,52 9,28
90
80
70
60
50
Chlorophylle a
40 caroténoïdes
30 Chlorophylle b
20
10
0
Figure 22: Concentration en chlorophylle a, chlorophylle b et caroténoïdes des différents

extraits d’Asphodelus tenuifolius.
D’après la figure 22 on a enregistré une concentration très élève de la chlorophylle a et

b dans les extraits éthanolique et méthanolique de la partie aérienne d’Asphodelus
tenuifolius par la méthode de soxhlet.
La teneur la plus élevé des caroténoïdes est enregistré dans l’extrait éthanolique
obtenu par l’utilisation de l’extracteur soxhlet.
54
IV. Activités biologiques
IV.1. Activité antioxydant
Les antioxydants dérivés des plantes sont largement utilisés en raison de leur intérêt
sécuritaire par rapport aux antioxydants synthétiques. Ces antioxydants réduisent le
stresse oxydatif dans les cellules car ce sont des agents réducteur puissants et agissent
en tant que piégeur des radicaux libres.
Dans le présent travail nous avons utilisés une méthode photométrique : le test de
piégeage du radical libre 2,2-diphényl-1 picrylhydrazyle (DPPH) pour évaluer in vitro
l’activité anti-oxydantes des extrais d’Asphodelus microcarpus et d’Asphodelus
tenuifolius.
Les extraits utilisés pour évaluer l’activité antioxydante se sont les extraits issus d’une
extraction par soxhlet avec eau/methanol (30/70) (v/v) car ils représentent les teneurs
les plus élevés des polyphénols responsables d’une activité antioxydante importante.
L’activité antioxydante des polyphénoles des plantes à été monté par plusieurs études.
Le test de DPPH est une méthode largement utilisée dans l’étude de l’activité
antioxydante. Le radical DPPH (2,2-diphényle-1-picrylhydrazyl) se caractérise par sa
capacité de former des radicaux libres stables. La présence de ces radicaux DPPH donne
lieu à une coloration violette foncée de la solution, qui absorbe aux environs de 517 nm.
La réduction des radicaux DPPH par un agent antioxydant entraîne une décoloration de
la solution.
Les résultats obtenus sont exprimés en pourcentage d’inhibition du radical libre DPPH
en fonction des concentrations des extraits.
Les valeur de IC 50 est calculé pour chaque extrait d’Asphodelus microcarpus et

d’Asphodelus tenuifolius. IC 50 est défini comme étant la concentration d’extrait pour la
quelle l’absorbance est égale à 0.5*A0. Ainsi une valeur faible de IC50 indique une
activité antioxydante élevée.
55
Les résultats de l’activité anti-oxydante obtenus pour les testes de DPPH appliqués
aux extraits de la partie térreste et de la partie aérienne d’Asphodelus microcarpus
et d’Asphodelus tenuifolius sont présentés dans la figure 23
100
90 Partie terrestre du
l’asphodelus microcarpus
80
70
% d’inhibition du DPPH
60
Partie aérienne du
l’asphodelus microcarpus
50
40
Partie terrestre du
30 l’asphodelus tenuifolius
20
10 Partie aérienne du
l’asphodelus tenuifolius
0
0 200 400 600 800 1000
Concentration mg/l
Figure 23: Pourcentages d’inhibition du radical libre DPPH en fonction des différentes
concentrations de l’extrait éthanolique
L’allure de courbes reportées dans la figure 23 montre que l’augmentation de la

concentration des extraits induit à une augmentation de leur pouvoir antioxydant.
D’après les résultats obtenus, on note pour une concentration de 25ug/ml un pouvoir
antioxydant de l’ordre de 14.08%, 13.90%, 13.12 % et de 9.9 % (pour les extraits
obtenus respectivement à partir de la partie aérienne d’Asphodelus tenuifolius, de la
partie aérienne d’Asphodelus microcarpus, de la partie sous terraine d’Asphodelus
tenuifolius, et de la partie sous terraine Asphodelus microcarpus). Ce pouvoir anti-
oxydant augmente jusqu’à 80 % pour une concentration de 800ug/ml, il est de l’ordre de
89.13 % pour l’extrait la partie aérienne d’Asphodelus microcarpus, de 87.73 % pour
l’extrait de la partie sous terraine Asphodelus microcarpus , de 83.62 % pour l’extrait de
la partie sous terraine d’Asphodelus tenuifolius et de 88.76pourl’extrait de la partie
aérienne d’Asphodelus tenuifolius.
56
À partir des équations des régressions linéaires des graphes représentés dans les figures
23 (annexe II) nous avons calculé les IC50 des extraits d’Asphodelus microcarpus et
d’Asphodelus tenuifolius . Les valeurs des IC50 sont représentées dans le
Tableau 13: Valeurs des CI50 des extraits extraits d’Asphodelus microcarpus et
d’Asphodelus tenuifolius.

Partie sous Partie Partie sous Partie
terraine aérienne terraine aérienne BHT
CI 50
exprimée en 178,859 89,789 94,826 88,657 8,655
μg/ml
180
CI 50 en μg/ml
160
140
120
100
80
60
40
20
0
BHT
Partie Partie Partie Partie
terrestre aérienne terrestre aérienne
Figure 24: Activité anti-radicalaire des extraits d’Asphodelus et le BHT.
D’après les valeurs obtenues nous constatant que la capacité réductrice des extraits
d’Asphodelus microcarpus et d’Asphodelus tenuifolius est inférieure à celle de BHT qui
présente un IC 50 de 8.655 ug/ml.
57
La partie aérienne d’Asphodelus tenuifolius présente le pouvoir anti-oxydant le plus
élevé avec une IC50 de 88.8 ug/ml. Et la partie sous terraine d’ Asphodelus microcarpus
présente le pouvoir le plus faible avec une IC 50 de 178.859 ug/ml.
IV.2. Activité anti-bactérienne
Le tableau suivant présente les effets antibactérinnes des extraits des deux plantes sur la
croissance de souches bactériennes testées (S.aureus et E. colli) .
Tableau 14: Les diamètres des zones d’inhibition (mm) des souches bactériennes
provoquées par les extraits de Asphodelus microcarpus et Asphodelustenuifolius
Souches
Extraits Escherichia coli Staphylococcus
aureus
Asphodelus microcarpus
(les feuilles) (-) 13 mm
Macération par méthanol
Asphodelus microcarpus
(les racines) (-) 12 mm
Macération par méthanol
Asphodelus tenuifolius
(les tiges) (-) 11 mm
Soxhlet par méthanol
Asphodelus tenuifolius
(les racines) (-) 10 mm
D’aprés les résultats de tableau (14) et de la figure (25), Il apparaît que l’extrait
d’Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius semble avoir une action inhibitrice
légère sur la croissance du Staphylococcus aureus (le diamètre de la zone d’inhibition
compris entre 10 et 14 mm), en revanche aucun effet antibactérien n’a pu être décelé sur
Escherichia coli (diamètre d’inhibition tout à fait nul). Ces bactéries ont montré un
grand potentiel de résistance contre l'action antibactérienne de l'ensemble des extraits
La grande résistance de la souche E.Coli bactéries à Gram négatif peut être liée en partie
à la complexité de l’enveloppe cellulaire de ces micro-organismes qui contiennent une
double membrane. La sensibilité de la souche S. aureus peut s’expliquer par la
probabilité de la sensibilité des bactéries Gram + aux changements environnementaux
externe (tels que la température, le pH et la présence des extraits naturels) est due à
l’absence de la membrane externe).
58
59
Résultats et interprétation
Figure 25: Résultats de l’activité anti-bactérienne des deux plantes étudié

Staphylococcus aureus
Asphodelus microcarpus et Asphodelustenuifolius

Escherichia coli
Chapitre III
Asphodelus microcarpus Asphodelus microcarpus Asphodelus tenuifolius Asphodelus tenuifolius

(les feuilles) (les racines) (les tiges) (les racines)
Macération par méthanol Macération par méthanol Soxhlet par méthanol Soxhlet par méthanol
Conclusion
Les dernières décennies sont marquées par l’intérêt particulier porté à la mise en valeur des
plantes à intérêt médicinal comme source de substances bioactives naturelles. À cet effet, dans
le cadre de la valorisation des espèces du genre Asphodelus deux espèces ont été étudiées, à
savoir Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius. Ce travail a pour objectif l’étude de
la composition phytochimique et de l’activité biologique de ces deux espèces.
L’extraction est faite par deux méthodes en utilisant trois solvants. Les résultats obtenus
montrent que l’utilisation de l’extracteur soxhlet avec le solvant eau / méthanol aux
proportions (30/70) (v/v) permet d’obtenir les meilleurs rendements pour les deux plantes.
L’étude phytochimique qualitative a mis en évidence la présence des flavonoïdes, des tanins,
des quinones libres, des terpénoïdes et des saponosides dans les différents extraits des deux
parties sous terraine et aérienne d’Asphodelus microcarpus et d’Asphodelus tenuifolius.
Les dosages photochimiques quantitatifs ont montré que les extraits de la partie sous terraine
et aérienne d’Asphodelus microcarpus présentent la teneur la plus élevée en polyphénols
totaux (196.90 μg EAG/mg de MS et 178.31 μg EAG/mg respectivement) en comparaison
avec les extraits d’Asphodelus tenuifolius (150.91 μg EAG/mg de MS et 22.22 μg EAG/mg
respectivement). La teneur des flavonoïdes et des tanins est plus élevée dans l’extrait de la
partie sous terraine d’Asphodelus microcarpus et sont respectivement de l’ordre de 49.43 μg
EC/mg de MS et de μg 24.81 EQ/mg de MS.
Pour l’activité anti-oxydante, les résultats obtenus montrent que les extraits d’Asphodelus
microcarpus et Asphodelus tenuifolius présentent une capacité de piégeage du radical DPPH
importante. Cette capacité de piégeage augmente avec l’augmentation de la concentration des
extraits. À la lumière des résultats de l’activité anti-oxydante on constate que c’est l’extrait de
la partie aérienne d’Asphodelus tenuifolius qui présente la capacité anti-oxydante la plus
élevée avec une IC50 de 88,657 ug/ml.
L'activité antibactérienne réalisée in vitro, à l'aide de la méthode de diffusion sur milieu

solide, montre que les extraits de la partie sous terraine et aérienne d’Asphodelus microcarpus
et Asphodelus tenuifolius présentent une activité anti-bactérinne modérée à l’encontre de
S.aureus (Gram+), mais aucune activité n’a été enregistrée contre la bactérie E.Coli (Gram -).
60
Conclusion
Les résultats de ce travail soulignent l’importance des espèces d’Asphodèlus étudiées,
(Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius). Ces deux plantes sont des sources
naturelles des composés phénoliques à pouvoir antioxydant important. À cet effet, il est
souhaitable de compléter le présent travail par :
 Le dosage des autres composés phénoliques tels que les acides phénoliques, les
Quinones libres;
 L’utilisation d’autres méthodes pour l’étude de l’activité antioxydante telle que les
méthodes éléctrochimiques;
 L’étude d’autres activités biologiques telles que l’activité antifongique et anti-
inflamatoire ;
 L’isolement et l’identification de la ou les molécule (s) bioactive (s) responsables de
l’activité antioxydantes par des techniques chromatographiques et spectrales ;
 Des études in vivo seront souhaitables pour déterminer les tissus et organes cibles par
les extraits Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius, et rechercher leurs
mécanismes d’action au niveau tissulaire et moléculaire.
61
Annexes
Annexes
Annexes I : Matériels utilisées
Milieu de Appareillage Verreries et Réactifs

culture autres
 Gélose  Soxhlet  Pipettes graduées  Ethanol à 70%

nutritive  Agitateur  Becher  Méthanol à70%
 Gélose mac magnétique  Boites de pétrie  Eau distillé
conkey  Autoclave  Tube en verres  Eau bi-distillé
 Chapman  Bec benzène  Eprouvette  Eau physiologique
 Etuve  Flacons  Chlorure
 spectrophotomètre  Pipette pasteur d’aluminium à3%
 Balance de  Ance de platine  Fecl3 à 1%
précision  Pince stérile  NaoH à 1%
 Chauffe ballon  Coteaux  Acide sulfurique
lyophilisateur  Micro pipettes  Chloroforme
 Brouilleur  Disques  Réactif de folin-
électrique absorbants ciocalteau
 Vortex  Papier filtre  Carbonate de sodium
 La haute  Portoir à 75%
 cuve  Vanilline à 4%
 Hcl à 37 %
 Chlorure
d’aluminium Alcl3 à
2%
 DPPH
Page 1
Annexes
Annexes II:
100
90 y = 0,086x + 21,877
80 R² = 0,8902
70
60
50
40
30
20
10
0
0 200 400 600 800 1000
Concentration μg/ml
Figure 1: Représentation des régressions linéaires des % d’inhibition du DPPH

pourl’extrait éthanolique par soxhlet de la partie sous terraine d’ Asphodelus
microcarpus
120,00
y = 0,0847x + 35,031
100,00 R² = 0,7215
80,00
60,00
40,00
20,00
0,00
0,00 200,00 400,00 600,00 800,00 1000,00
Figure 2: Représentation des régressions linéaires des % d’inhibition du DPPH pour

l’extrait éthanolique par soxhlet de la partie aérienne d’ Asphodelus microcarpus.
Page 2
Annexes
120,00
100,00 y = 0,082x + 30,247

R² = 0,8236
80,00
60,00
40,00
20,00
0,00
0,00 200,00 400,00 600,00 800,00 1000,00
Figure 3: Représentation des régressions linéaires des % d’inhibition du DPPH pour

l’extrait éthanolique par soxhlet de la partie sous terraine d’ Asphodelus tenuifolius.
120,00
100,00 y = 0,0802x + 33,909

R² = 0,7482
80,00
60,00
40,00
20,00
0,00
0,00 200,00 400,00 600,00 800,00 1000,00
Figure 4 : Représentation des régressions linéaires des % d’inhibition du DPPH pour

l’extrait éthanolique par soxhlet de la partie aérienne d’ Asphodelus tenuifolius
Page 3
Résumé
L’Asphodelus est une plante utilisée depuis l’antiquité en médecin traditionnelle et il est
reconnu par ses vertus thérapeutiques. Dans ce travail deux plantes de genre Asphodelus à
savoir Asphodeluse microcarpuse et Asphodelus tenuifolius ont été étudiées.
Notre recherche porte en premier lieu sur une étude phytochimique des extraits obtenus selon
deux méthode d’extraction la macération à froid et l’extraction par Soxhlet, en utilisant
différents solvants eau/méthanol (30/70) (v/v), eau/éthanol (30/70) (v/ v) et l’eau bi-distillée,
et en deuxième lieu sur l’évaluation de leurs activités anti-oxydante et anti microbienne.
L’examen phytochimique qualitatif réalisé sur la partie sous terraine et la partie aérienne
d’Asphodeluse microcarpuse et d’Asphodelus tenuifolius à montré la présence des
flavonoïdes, des tanins, des terpénoïdes, de quinones libre et des saponosides dans les
plantes étudiées.
L’analyse quantitative des polyphénols, des flavonoïdes et des tanins, montre que les extraits
méthanolique obtenus par l’extracteur soxhlet sont les plus riches en composés phénoliques
par rapport aux autres extraits. Les résultats obtenus montrent aussi des teneurs importantes
en polyphénols totaux dans les deux plantes.La plus grande quantité des polyphénols totaux à
été détectée dans Asphodelus microcapus avec 196,90 μg EAG/mg de MS et 178,31 μg
EAG/mg de MS pour la partie sous terraine et aérienne respectivement. La teneur des
flavonoïdes et des tanins est plus importante dans Asphodelus tenuifolius.
L’étude de l’activité antioxydante in vitro de ces extraits par le piégeage du radical libre
DPPH, montre que l’extrait de la partie aérienne d’Asphodelus tenuifolius présente la
capacité la plus élevé de piégeage du radical libre DPPH avec une IC50 de 88,8 μg/ml. Et
l’extrait de la partie sous terraine d’ Asphodelus microcarpus présente la capacité la plus
faible avec une IC 50 de 178,859 ug/ml.
Les bactéries staphylococcus aureus (Gram+) et Escherichia coli (Gram -) ont été
sélectionnés pour l'évaluation de l'activité antibactérienne. Les résultats obtenus montrent que
les extraits d’Asphodelus microcarpus et d’Asphodelus tenuifolius semblent avoir une action
inhibitrice légère sur la croissance du Staphylococcus aureus.
Les mots clé : Asphodelus microcarpus, Asphodelus tenuifolius, étude phytochimique,

activité antioxydante, activité antimicrobienne.
Abstract
Asphodelus is a plant used since ancient times in a traditional medecine and is recognized for
its therapeutic virtues. In this work two plants of the genus Asphodelus namely Asphodelus
microcarpuse and Asphodelus tenuifolius were studied.
Our research focuses firstly on a phytochemical study of the extracts obtained using two
methods of extraction cold maceration and Soxhlet extraction using different solvents.water /
methanol (30/70) (v/v) , water / Ethanol (30/70) (v / v) and bi-distilled water, and secondly on
the evaluation of their antioxidant and anti-microbial activities.
The qualitative phytochemical examination carried out on both underground and aerial parts
of Asphodelus microcarpus and Asphodelus tenuifolius showed the presence of flavonoids,
tannins, terpenoids, free quinones and saponosides in the studied plants.
Quantitative analysis of polyphenols, flavonoids and tannins showed that the methanol
extracts obtained by the soxhlet extractor are the richest in phenolic compounds compared to
the other extracts. The obtained results have shown high levels of total polyphenols in both
plants. The greatest amount of total polyphenols was detected in Asphodelus microcapus with
196, 90 μg EAG / mg DM and 178.31 μg EAG / mg DM for both underground and aerial
parts respectively. The content of flavonoids and tannins was greater in Asphodelus
tenuifolius.
The study of the antioxidant activity in vitro of these extracts by trapping the free radical
DPPH showed that the extract of the aerial part of Asphodelus tenuifolius exhibits the
capability of trapping the free DPPH radical with an IC 50 of 88.8 μg / ml. And the extract of
the underground part of Asphodelus microcarpus showed the lowest capacity with an IC 50 of
178.859 μg / ml.
The bacteria staphylococcus aureus (Gram +) and Escherichia coli (Gram - ) were selected
for the evaluation of antibacterial activity. The results obtained have shown that the extracts
of Asphodelus microcarpus and Asphodelus tenuifolius appear to have a slight inhibitory
action on the growth of Staphylococcus aureus.
Key words: Asphodelus microcarpus, Asphodelus tenuifolius, phytochemical study,
antioxidant activity, antimicrobial activity.
‫ملخص‬
‫بروق هو النبات الذي يستخدم منذ العصور القديمة في الطب التقليدي وانه معترف به من قبل خصائصه العالجية‪ .‬في هذا‬
‫العمل درست نوعين من النباتات وهي ‪ Asphodeluse microcarpuse‬وبروق نحيف األوراق بروق‪.‬‬
‫بحثنا في المقام األول يتعلق بدراسة الكيميائي النباتي مقتطفات حصلت عليها وفقا لطريقتي استخراج اثنين النقع البارد‬
‫واستخراج سوكسليت باستخدام مختلف المذيبات الماء ‪ /‬الميثانول (‪( )03/03‬ت ‪ /‬ت)‪ ،‬والمياه ‪ /‬اإليثانول (‪( )03/03‬ت ‪/‬‬
‫ت) والماء المقطر المزدوج‪ ،‬وثانيا على تقييم األنشطة المضادة لألكسدة ومضاد ميكروبي‪.‬‬
‫وقد أظهرت دراسة الكيميائي النباتي النوعي التي أجريت على الجزء تحت االرض والجزء الجوي لل ‪Asphodeluse‬‬
‫‪ microcarpuse‬وبروق نحيف األوراق وجود مركبات الفالفونويد والعفص‪ ،‬تيربينويدس‪ ،‬كينونات وخالية من الصابونين‬
‫في النباتات المختبرة‪.‬‬
‫التحليل الكمي للمادة البوليفينول‪ ،‬الفالفونويد والعفص‪ ،‬وتبين أن مستخلص الميثانول التي حصل عليها جهاز سوكسلت هي‬
‫االكثر غنية بمركبات الفينول على معاينات أخرى‪ .‬تظهر النتائج أيضا مستويات عالية من إجمالي البوليفينول في كال‬
‫النبتتين و أكبر كمية من إجمالي البوليفينول تم الكشف في بروق ‪ microcapus‬مع ‪ EAG 196.90‬ميكروغرام ‪ /‬ملغ‬
‫‪ MS‬و‪ EAG 178.31‬ميكروغرام ‪ /‬ملغ لل‪ MS terraine‬الفرعي وجزء الجوي على التوالي‪ .‬محتوى من الفالفونويد‬
‫والعفص أعلى في بروق نحيف األوراق‪.‬‬
‫دراسة النشاط المضاد لألكسدة في المختبر من هذه المقتطفات التي كتبها محاصرة من ‪ DPPH‬الجذور الحرة‪ ،‬وتبين أن‬
‫مستخلص الجزء الجوي للبروق نحيف األوراق يسلك أعلى قدرة محاصرة من ‪ DPPH‬الجذور الحرة مع ‪ IC50‬من ‪88.8‬‬
‫ميكروغرام ‪ /‬مل‪ .‬وخالصة الجزء تحت االرض من بروق ‪ microcarpus‬لديه أدنى القدرات مع ‪ IC 50‬من ‪908،871‬‬
‫ميكروغرام ‪ /‬مل‪.‬‬
‫وقد تم اختيار لتقييم النشاط المضاد للبكتيريا ‪ -‬والعنقودية الذهبية بكتيريا المكورات العنقودية (غرام ‪ )+‬واإلشريكية‬
‫القولونية (غرام)‪ .‬وتظهر النتائج أن يستخرج بروق بروق ‪ microcarpus‬و‪ tenuifolius‬يبدو أن يكون لها تأثير كابح‬
‫بشكل طفيف على نمو المكورات العنقودية الذهبية‪.‬‬
‫الكلمات الرئيسية‪ :‬بروق ‪ ،microcarpus‬بروق نحيف األوراق‪ ،‬دراسة الكيميائي النباتي والنشاط المضادة لألكسدة‪،‬‬
‫والنشاط المضادة للميكروبات‪.‬‬

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MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

UNIVERSITE AKLI MOHAND OULHADJ – BOUIRA -

MEMOIRE DE FIN D’ETUDES

Soutenu le : 01/07 / 2017 Devant le jury composé de :

Nom et Prénom Grade

Mr. LAMINE Salim MAA Univ. de Bouira Président

Année Universitaire : 2016/2017

Numéro Formules page

H% = ((m1 –m2)/m1) ×100

 Le taux d’extraction (rendement)

 L’indice de mousse (IM)

 La Concentrations des caroténoïdes

Liste des Figures

05 Étapes de préparation des échantillons. 21

06 Extraction des métabolites secondaires par l’extracteur de 24

07 Schéma récapitulatif de tout la partie expérimental 33

08 Rendement d’extraction de la partie sous terraine et 35

11 La courbe d’étalonnage réalisée avec l’étalon acide 44

12 Teneurs en polyphénols totaux dans les extraits 45

13 Teneurs en polyphénols totaux dans les extraits 46

14 Courbe d’étalonnage de la catéchine pour le dosage des 47

15 Teneurs en Flavonoïde dans les extraits d’Asphodelus 47

16 Teneurs en Flavonoïde dans les extraits d’Asphodelus 48

17 Courbe d’étalonnage de la catéchine pour le dosage des 49

18 teneurs en tanin dans les extraits de l'Asphodelus 49

19 Teneurs en tanin dans les extraits de l'Asphodelus 50

20 Le pourcentage des flavonoïdes et des tanins dans les 52

21 Concentration en chlorophylle a, chlorophylle b et 53

22 Concentration en chlorophylle a, chlorophylle b et 54

23 Pourcentages d’inhibition du radical libre DPPH en 56

24 Activité anti-radicalaire des extraits d’Asphodelus et le 57

25 Résultats de l’activité anti-bactérienne des deux plantes 59

Chapitre I: Synthèse bibliographique

I.1. La famille des Liliaceae …………………………………………..……………....3

I.2. Le genre Asphodelus………………………………………………...……….……3

I.2.1. Asphodelus microcarpus …………………………………………………...….6

I.2.1. Asphodelus tenuifoliu….………………………………………….…………....7

I.3. Différence entre Asphodelus microcarpus et Asphodelus tenuifolius……………...8

I.4.Composition chimique d’Asphodelus microcarpus et d’Asphodelus

I.5. Propriétés pharmacologiques d’Asphodelus ……………………….………..….11

II. Généralités sur les métabolites secondaires

II.1. Les composés phénoliques……………………………………………………….13

II.2. Les alcaloïdes…………………………………………………………….……..15

II.3. Les quinones ………………………………………………..……………….....15

II.4. Les terpénoïdes …………………………………………….…………………...15

II.5. Les saponines …………………………………………..………………….……15

III1. Activités biologiques ………………………………………………………….16

III.1.1.Activité antioxydante …………………………………………….…..16

III.1.2. Activité antibactérienne ……………………………………...………16

III.1.3.Activité antifongique ……………………………………………....…16

III.1.4. Activité anti-inflammatoire…………………………………………...17

Chapitre II: Matériels et méthodes

II.1. Matière végétale ………………………………………………………….……17

1.1. Origine géographique et période de récolte de plantes……….………..18

1.2. Préparation des échantillons……………………………………….…..18

II.2. Détermination du taux d’humidité et la matière sèche ………………………..21

II.3. Extraction …………………………………………………………………..….21