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Monographie
Pratique de la chromatographie ionique

Une Introduction
Introduction la pratique
de la chromatographie ionique
Dipl.-Ing. Claudia Eith

Prof. Dr. Maximilian Kolb
Prof. Dr. Andreas Seubert
Dr. Kai Henning Viehweger (diteur)
Tous droits rservs, y compris de traduction.

Imprim par Metrohm SA, CH-9101 Herisau, Suisse
8.792.5002 2002-11
Introduction la pratique de la chromatographie ionique 1

Table des matires
1 Les auteurs .................................................................................................................................. 4

2 Introduction .................................................................................................................................. 5
3 Partie thorique ............................................................................................................................ 7
3.1 Histoire et signification de la chromatographie ionique ........................................................... 7
3.2 Bases thoriques de la chromatographie ................................................................................ 9
3.2.1 Classification et terminologie de la chromatographie ................................................... 9
3.2.2 Concepts thoriques de description de la chromatographie ....................................... 12
3.3 Principes de base de la chromatographie ionique (CI) .......................................................... 17
3.3.1 Terminologie et position au sein de la CL .................................................................. 17
3.3.2 Lchange ionique .................................................................................................... 18
3.3.3 La formation de paires dions ................................................................................... 19
3.3.4 Lexclusion ionique ................................................................................................... 20
3.4 Modles de rtention de la chromatographie ionique ............................................................ 21
3.4.1 Modles de rtention pour la chromatographie danions ............................................ 21
3.4.2 Modles de rtention pour la chromatographie de cations ......................................... 27
3.5 Systmes de dtection en chromatographie ionique ............................................................. 30
3.5.1 Mthodes de dtection lectrochimiques .................................................................. 30
3.5.2 Mthodes de dtection spectroscopiques ................................................................. 35
3.6 Les phases stationnaires en chromatographie ionique .......................................................... 36
3.6.1 Vue densemble sur les phases stationnaires courantes ............................................ 36
3.6.2 Les phases stationnaires en chromatographie danions ............................................. 38
3.6.3 Les phases stationnaires en chromatographie de cations .......................................... 39
3.6.4 changeurs de cations base de gel de silice .......................................................... 39
3.6.5 changeurs de cations base de polymres organiques ........................................... 40
3.6.6 changeurs de cations pelliculaires .......................................................................... 40
3.6.7 Phases stationnaires en chromatographie par exclusion ionique ................................ 40
3.6.8 La signification de la capacit dchangeurs ioniques ............................................... 41
3.7 luants en chromatographie ionique .................................................................................... 42
3.7.1 Chromatographie danions ....................................................................................... 42
3.7.2 Chromatographie de cations ..................................................................................... 45
3.7.2.1 Chromatographie dions alcalins, alcalino-terreux et ammonium avec
dtection conductimtrique ........................................................................ 45
3.7.2.2 Chromatographie des ions mtalliques de transition et alcalino-terreux
avec drivation post-colonne et dtection photomtrique ............................ 46
3.7.2.3 Chromatographie par exclusion ionique ...................................................... 48
2 Monographie Metrohm
4 Partie pratique ............................................................................................................................ 49
4.1 Conseils relatifs aux travaux pratiques .................................................................................. 49
4.2 Expriences relatives la thorie de la chromatographie ionique .......................................... 52
4.2.1 Exprience 1 Chromatographie ionique avec et sans suppression chimique ........... 52
4.2.2 Exprience 2 Capacit des colonnes de sparation ................................................ 56
4.2.3 Exprience 3 Slectivit des colonnes de sparation .............................................. 59
4.2.4 Exprience 4 Calibrage, limites de dtection et de dtermination en
chromatographie ionique .......................................................................................... 64
4.2.5 Exprience 5 Variation de la slectivit laide dthers couronnes
(18-couronne-6) ...................................................................................................... 68
4.2.6 Exprience 6 Variation de la slectivit laide dagents complexants ..................... 71
4.2.7 Exprience 7 Technique de prconcentration ......................................................... 77
4.3 Expriences pour la dtermination des anions ...................................................................... 81
4.3.1 Exprience 8 Anions dans leau potable ................................................................. 81
4.3.2 Exprience 9 Anions dans lthanol et les alcools .................................................. 85
4.3.3 Exprience 10 Anions dans la laitue ...................................................................... 92
4.3.4 Exprience 11 Acide phosphorique dans les boissons base de Cola .................... 96
4.3.5 Exprience 12 Acides organiques dans le vin ...................................................... 102
4.3.6 Exprience 13 Contaminations dans le borate dtermination du chlorure et
du sulfate dans des solutions de borax ................................................................... 108
4.3.7 Exprience 14 Anions dans les eaux uses .......................................................... 113
4.3.8 Exprience 15 Fluorure dans des ptes dentifrices ............................................... 119
4.3.9 Exprience 16 Anions dans le sucre blanc et le sucre roux ................................... 123
4.3.10 Exprience 17 Contaminations dans le peroxyde dhydrogne .............................. 129
4.4 Expriences pour la dtermination des cations ................................................................... 136
4.4.1 Exprience 18 Mtaux alcalins et alcalino-terreux dans leau potable .................... 136
4.4.2 Exprience 19 Dtermination de mtaux de transition .......................................... 140
4.4.3 Exprience 20 Contaminations prsentes dans le gel de silice dtermination
des ions calcium et magnsium ............................................................................. 147
4.4.4 Exprience 21 Cosmtiques et protection contre la corrosion:
dtermination dthanolamines et de mtaux alcalins .............................................. 151
4.4.5 Exprience 22 Mtaux alcalins et alcalino-terreux dans le vin ............................... 156
5 Littrature ................................................................................................................................. 160

1 Les auteurs
Claudia Eith
tudes de chimie la Fachhochschule dAalen (Allemagne); semestre pratique dans le domaine de lana-
lyse de leau potable et des eaux uses Adlade (Australie). Depuis 2000, employe Metrohm SA dans
le dpartement recherche & dveloppement.
Maximilian Kolb
tudes de chimie luniversit technique de Munich (Allemagne); doctorat dans le domaine de la catalyse
homogne, ensuite cinq annes responsable du domaine du traitement des eaux au bureau central de
lconomie hydraulique de Traunstein. Depuis 1982, Professeur la Fachhochschule dAalen; domaine de
travail: techniques et analyses relatives la protection de lenvironnement et chimiomtrie.
Andreas Seubert
tudes de chimie luniversit dHanovre (Allemagne); doctorat obtenu en 1990 sur le thme: Analyse
dultra-traces dans des mtaux rfractaires de trs haute puret utilisant la sparation traces-matrice par
chromatographie ionique; professorat obtenu en 1995 sur le thme: Applications du couplage on-line
HPLC-spectromtrie atomique dans le domaine de lanalyse lmentaire. De 1998 2000, professeur
supplant dans le dpartement de chimie analytique de luniversit de lcole suprieure gnrale de
Kassel. Depuis mars 2000, professeur de chimie analytique luniversit Philipps de Marburg.
Kai Henning Viehweger

tudes de chimie luniversit de Hambourg; thse de diplme dans le domaine de lanalyse organique;
doctorat dans le domaine de la recherche de systmes cologiques marins et estuaires. Depuis 1996,
employ Metrohm SA, dans le dpartement Marketing, en tant que responsable international des ventes
de chromatographie ionique.
2 Introduction
Cest toujours un dfi de reprsenter labstrait. Les raisons de ce dfi peuvent aller de la simple curiosit
jusqu une ncessit lmentaire permettant la survie. Il existe diverses faons de jeter un petit coup
doeil dans les coulisses. Le plus simple est de se servir des sens humains tels que loue, lodorat, le
toucher, le got et la vue. Lalchimie, autrefois, a souvent fait usage de ces sens humains. Cest la raison
pour laquelle on dit que les acides ont une got acide et que le nom brome provient de bromos, terme
grec pour puer. Le chrome apparat loeil de faon color, car chroma correspond dun point de vue
historique linguistique au mot couleur.
Beaucoup dautres choses ne se montrent pas directement. Elles sont bien mlanges ou les mthodes
danalyses sensorielles humaines ne suffisent pas leur identification. Cest le moment o lanalyse rentre
en jeu. Elle peut, partir dun mlange indfini extraire des informations extrmement prcises, pouvant
alors tre interprtes par les sens humains.
Bien que lorganisme en contienne beaucoup, ils ne se montrent pas directement aux sens humains; on
considre ici les ions et chaque atome ou molcule charg, faisant partie intgrante de presque toutes les
matires vivantes et mortes. Les ions sont responsables du fait que les nerfs conduisent les informations,
que la digestion fonctionne, que la pression sanguine soit correcte et que suffisamment doxygne afflue
dans le sang. Les ions amnent le sel la mer, ils rgulent la soif et des composs ioniques servent
dalimentation tous les tres vivants de la bactrie ltre humain.
Le fait de connatre le type et la quantit dions prsents dans lenvironnement aide comprendre les
processus relationnels biochimiques et cologiques. La connaissance de la concentration ionique dans
les produits alimentaires livre des informations quant leur qualit: si ces derniers sont bons pour la sant
ou peut-tre toxiques.
Il existe de nombreuses possibilits de dterminer des ions, qualitativement selon leur type et quanti-
tativement selon leurs concentrations. Ces deux informations jouent un rle primordial. La chromatogra-
phie ionique est un procd permettant dobtenir ce genre dinformations. Chromatographie signifie littra-
lement crire avec des couleurs. Dans le domaine de lanalyse traditionnelle, ceci signifie sparer les
substances selon leur couleur, puis les dterminer de manire visuelle. Bien que tous les ions ne soient
pas caractriss par une couleur visible, cette expression est reste. Actuellement, dautres procds de
dtermination sont mis en application.
La chromatographie ionique fait partie de la grande famille de ces procds chromatographiques. Grce
elle si lon part dun principe de prsentation fort simple il est possible de dterminer tous les ions
portant une charge mono- ou bivalente. Autrefois, la chromatographie ionique ou CI (en anglais, IC pour
ion chromatography) tait rpute tre un procd trs onreux; ceci a normment chang, elle est
entre temps devenue beaucoup plus abordable. La CI reprsente aujourdhui un outil analytique universel,
extrmement performant et trs facile demploi.
Ce recueil Introduction la pratique de la chromatographie ionique montre que la CI nest plus une
mthode analytique litiste, mais quelle est au contraire en position de donner une rponse rapide des
questions de la vie de tous les jours: cette eau potable est-elle adapte lalimentation des nourrissons?
Combien de nitrates se trouvent dans les pinards? Pourquoi la machine laver le linge est-elle autant
charge de calcaire? Cette eau use est-elle polluante pour lenvironnement? Comme il est impensable
dvoquer une pratique analytique exacte sans bases thoriques, la prsente monographie contient des
informations dtailles ce sujet, dans la partie rserve plus particulirement la thorie.

Grce au recueil Introduction la pratique de la chromatographie ionique, il est possible non seulement
de prendre connaissance des grandes lignes de la CI, mais galement de donner un aperu des principes
gnraux de la chromatographie. Et celle-ci permet beaucoup de choses: elle rassasie la curiosit relative
aux sciences naturelles et garantie une survie saine dans un environnement relativement pollu.
3 Partie thorique
3.1 Histoire et signification de la chromatographie ionique
La chromatographie ionique (CI) ou plus exactement la chromatographie par exclusion ionique dbute au
milieu du 19e sicle. Entre 1935 et 1950, les connaissances relatives lchange ionique et ses applica-
tions ont t normment amliores grce au Projet Manhattan. Les annes 50 et 60 ont surtout
permis de dfinir des modles thoriques permettant linterprtation de lchange ionique ainsi que la
comprhension de la chromatographie ionique, fondamentalement base sur cet change ionique. Dans
les annes 70, des dtecteurs continus ont t mis en application et ont ainsi permis le passage de la
chromatographie basse pression la chromatographie haute pression ou haute performance (HPLC).
Tableau 1 Histoire de lchange ionique et de la chromatographie ionique en rsultant

Vers 1850 Sols en tant quchangeur dions pour Mg2+, Ca2+ Thomson et Way CL
et NH4+
1935 Polymres condenss sulfons et amins Adams, Holmes
(phnol/formaldhyde)
1942 Rsine sulfone PS/DVB en tant quchangeur dAlelio
de cations (projet Manhattan)
1947 Rsine amine PS/DVB en tant quchangeur danions McBurney
1953 Chromatographie par exclusion dions Wheaton, Baumann
1957 changeurs ioniques macroporeux Corte, Meyer, Kunin
entre autres
1959 Principes de base de comprhension thorique Helfferich
1967-70 changeurs dions pelliculaires Horvath, Kirkland
1975 Chromatographie par exclusion dions avec HPLC
dtection conductimtrique laide dun stripper Small, Stevens, Baumann
1979 Dtection conductimtrique sans stripper Gjerde, Fritz, Schmuckler
1976-80 Chromatographie ionique par paire dions Waters, Bidlingmeier,
Horvath entre autres
Le terme chromatographie ionique fut introduit en 1975 avec lapparition de la dtection conductimtrique
en combinaison avec une rduction de conductivit chimique, par Small, Stevens et Bauman; cette ex-
pression fut pendant longtemps utilise des fins de marketing. Entre temps, le terme abrg
chromatographie ionique sest tabli en tant que terme gnral pour les mthodes de la chromatographie
par change ionique, par exclusion ionique et par paire dions, lintrieur de la chromatographie liquide
haute performance (HPLC) [1]. De nos jours, cest justement dans le domaine de la dtermination des
anions que la CI joue un rle primordial, alors que la dtermination des cations est de prfrence ralise
laide de mthodes spectromtriques atomiques communes.

Le domaine dapplication de la chromatographie danions se situe aujourdhui dans le contrle routinier de
systmes aqueux; lanalyse de leau potable jouant ici un rle tout particulier [2, 3, 4]. Dautre part, la CI
est utilise galement pour lanalyse dlments se trouvant sous forme anionique ou complexe et ceci
plus particulirement lors de problmes dans le cadre de la protection de lenvironnement. Le troisime
domaine dapplication de la chromatographie ionique est lanalyse des ultra-traces dans des produits
chimiques de procds de haute puret, tels quils sont utiliss par exemple dans lindustrie des semi-
conducteurs.
Normalement, les changeurs danions utiliss en HPLC sont constitus de particules polymres sphriques
de diamtre variant entre 5 et 15 m. Sur la surface polymre sont dposs, laide de diffrents procds,
des groupements faisant fonction dancre et ayant pour rle de maintenir un certain espace (spacer) entre
la base polymre et les vritables groupes fonctionnels. Ces derniers sont constitus en rgle gnrale
dions ammonium quaternaires, fixs aux groupes ancres de manire chimique. Le nombre total de groupes
fonctionnels dfinit la capacit dchange et reprsente une caractristique primordiale des changeurs
ioniques.
Les matriaux de remplissage de colonne de chromatographie danions disponibles dans le commerce
sont de faible capacit dchange variant, en rgle gnrale, entre 50 et 100 mol par colonne de sparation.
Cela provient du fait que la dtection conductimtrique est utilise de prfrence. Plus la conductivit
propre du systme dlution est faible, plus la sensibilit atteinte est importante. Les changeurs danions
de faible capacit permettent lutilisation de solutions base de NaOH trs dilues ou de tampons base
de carbonate, dont la conductivit propre peut encore tre rduite de manire chimique (phnomne
connu sous le nom de suppression chimique) [2, 4].
De nos jours, dans le domaine de la chromatographie danions, ce sont la plupart du temps des groupes
fonctionnels de type I (trimthyle ammonium, TMA) et type II (dimthyle thanol ammonium, DMEA) qui
sont utiliss. Comme la vritable interaction entre la phase stationnaire et les anions analytes a lieu au
niveau du groupe fonctionnel, cela signifie que la structure de ce dernier joue un rle fondamental quant
aux caractristiques de slectivit du matriau de remplissage. Daprs de trs rcents dveloppements,
la polarit des groupes fonctionnels, pouvant tre contrle par le nombre de groupes de type hydroxythyle
(-CH2CH2OH) restants sur lazote quaternaire, est dune importance toute particulire [2, 4].
Le terme chromatographie ionique inclue tous les modes de sparation despces ioniques lintrieur de
lHPLC avec dtection en ligne et est ainsi largement indpendant des limites poses par les appareillages
[5]. Grce limportante slection de colonnes de sparation, de systmes dlution et de dtecteurs, la CI
est devenue la mthode de choix, surtout pour lanalyse des anions. En effet, il nexiste que peu de
procds de sparation des anions. En outre, ceux-ci ne sont que peu adapts une application pratique.
Les procds gravimtriques et volumtriques sont limits par leur sensibilit et leur slectivit. Mme les
dveloppements fulgurants de la chromatographie gazeuse partir de 1965 nont pas apport les avantages
escompts pour les anions, parce que les ions non volatils doivent tout dabord tre drivs et que la
sensibilit nest pas suffisante pour assouvir les exigences actuelles de lanalyse des traces [6]. Pour
lanalyse des cations, il existe des alternatives performantes la CI, bases sur la spectromtrie atomique,
telles que lICP-AES/MS. Contrairement lanalyse des anions, lanalyse chromatographique des cations
nest donc pas ncessairement la mthode idale. La chromatographie de cations possde cependant un
certain intrt dans le domaine de lanalyse des alcalins et alcalino-terreux, par exemple pour la dtermination
de lazote-ammonium, dans le domaine de lanalyse des eaux potables. Lors de la spciation de composs
ioniques, la CI en combinaison avec des dtecteurs lmentaires spcifiques est indispensable. Les travaux
de Haddad et al. et Weiss [2, 4] donnent une bonne vue densemble des diffrentes applications de la CI
dans les divers domaines de lanalyse.
3.2 Bases thoriques de la chromatographie
3.2.1 Classification et terminologie de la chromatographie
La chromatographie est un procd physico-chimique permettant la sparation de substances en mlange.
Leffet de sparation est bas sur la distribution de ces substances entre une phase stationnaire et une
phase mobile qui se dirige dans une direction dfinie [7, 8]. Les diffrentes techniques de la chromatographie
sont organises selon ltat physique de ces deux phases:
Figure 1 Rpartition des mthodes

chromatographiques selon ltat
physique des phases mobiles et
stationnaires
Une autre diffrenciation entre les mthodes chromatographiques peut tre faite suivant les procds de
base intervenant pendant la sparation, tels que adsorption ou distribution, ou bien selon le type de tech-
nique utilise (sur colonne ou plane) [9].
Paramtres de rtention
Si on prend en considration un mlange de substances et que lon impose ce mlange une sparation
chromatographique, on observe pour chaque compos un quilibre de distribution entre la phase mobile
et la phase stationnaire. Une sparation de substances nest alors ralise avec succs que lorsque les
coefficients de distribution D des composs diffrent suffisamment les uns des autres. D est dfini
comme le rapport des concentrations dune substance A dans la phase stationnaire (index S) et la phase
mobile (index M):
(1)
Il en rsulte que les substances possdant un coefficient de distribution D lev sont plus longtemps
retenues que celles possdant une faible valeur de D. Le processus de sparation chromatographique est
schmatis sous la forme dun chromatogramme, reprsentant le signal du dtecteur en fonction du
volume dlution de la phase mobile ou du temps. Le chromatogramme correspond ainsi un profil de
concentration ou de masse en fonction du temps. Le signal du dtecteur doit tre proportionnel la
concentration dun analyte en fin de processus de sparation [8]. Le temps de rsidence ou temps de
rtention brut tR dune substance sur la phase stationnaire est obtenu, comme reprsent dans lquation
2, en additionnant le temps de rtention net tS (correspondant au temps de rsidence rel pendant le
processus de sparation) et le temps de passage de la phase mobile sans interaction, le temps mort tM.
(2)

cause de la formation de chemins prfrentiels, de la diffusion des composs ou dirrgularits pendant
linstallation de lquilibre entre phase mobile et phase stationnaire, il est possible que des particules
passent la phase stationnaire plus rapidement ou plus lentement quescompt, par rapport au temps de
rtention net tS. Cest la raison pour laquelle un chromatogramme nest pas seulement compos de signaux
bien pointus mais, dans le cas idal, de pics gaussiens (voir figure 2).
Les processus de diffusion prennent une importance plus particulire sur la phase stationnaire lorsque le
temps de rsidence augmente. Cest pourquoi on observe un largissement du pic lorsque le temps de
rtention de la substance augmente. Ce phnomne est par ailleurs caractristique de tout procd
chromatographique.
Comme mentionn plus haut, un pic de chromatogramme ressemble, dans le cas idal, une distribution
selon Gauss (figure 3).
Figure 2
Chromatogramme dlution dune
sparation de chromatographie
ionique avec schmatisation des
grandeurs principales
Figure 3
Distribution selon Gauss avec
reprsentation des grandeurs
principales
La largeur du pic mi-hauteur, note b0,5, correspond 2,354 fois lcart-type de la distribution. La largeur
de base w est dfinie comme la distance obtenue entre les deux points dintersection des tangentes aux
points dinflexion ( la monte et la descente) avec laxe x. Cette largeur gale quatre fois lcart-type de
la fonction de Gauss. Ces deux grandeurs sont essentielles pour valuer lefficacit dune colonne de
sparation chromatographique et peuvent tre utilises pour le calcul du nombre de plateaux, dans le cas
de pic gaussiens.
Les pics non idaux peuvent tre dcrits laide de ce quon appelle le facteur dasymtrie T. Ce dernier
est dfini comme le rapport entre les distances A et B entre les verticales centrales et les pentes de
distribution 10% de la hauteur (voir figures 2 et 3) et peut tre calcul de la faon suivante:
(3)
Pour les pics de Gauss, T = 1 car le pic est parfaitement symtrique. Les dviations vers des valeurs T
suprieures 1 sont appeles tailing et celles vers des valeurs infrieures sont dnommes fronting.
En pratique, il est prfrable dobtenir des facteurs dasymtrie T entre 0,9 et 1,1.
Facteur de rtention, slectivit et rsolution

Comme le temps de rtention brut tR dpend fortement des conditions chromatographiques, il nest
caractristique dune substance que lorsque ces conditions sont bien dfinies. Dans ce cas, il est ensuite
utilisable pour une identification qualitative. Cest la raison pour laquelle on introduit une grandeur sans
unit, le facteur de rtention k, qui permet de saffranchir des conditions chromatographiques. Il permet
de quantifier le temps de parcours total du compos par rapport au temps pass en contact avec la phase
stationnaire [8]. Dun point de vue mathmatique, le facteur de rtention est dfini comme le produit du
coefficient de distribution D avec le rapport des volumes VS/VM de la phase stationnaire et la phase
mobile. Le facteur de retention peut galement tre exprim par le rapport entre temps de rtention net tS
et temps mort tM. Un dernier mode de calcul utilise la longueur L du chemin de sparation et la vitesse u
de la phase mobile (quation 4).
(4)
Pour des valeurs faibles de k, une substance est lue peu de temps aprs le temps mort, ou dans un
volume faiblement suprieur au volume mort du systme de chromatographie. La sparation est alors
inefficace. Si la valeur de k est trs grande, la sparation est correcte mais le temps de rsidence sur le
chemin de sparation est trs important, ce qui entrane un largissement du pic. En pratique, le facteur de
rtention devrait se trouver entre 2 et 5.
Deux analytes sont suffisamment spares lorsque leurs facteurs de rtention diffrent suffisamment les
uns des autres. La slectivit
, dnomm galement facteur de sparation relatif, donne une information
quant au pouvoir de sparation de deux substances et est dfini de la manire suivante:
(5)
Sil savre impossible de sparer deux substances, on a = 1 et on obtient une colution. Plus est
grand, meilleure est la sparation. Cependant, la dure de sparation augmente galement lorsque
augmente; cest la raison pour laquelle, en pratique, on essaie de se rapprocher le plus possible dune
slectivit de lordre de 1,5 [10].

La slectivit ne donne aucune information quant la qualit dun processus de sparation. La rsolution
R prend en considration non seulement les positions relatives des pics les uns par rapport aux autres,
mais galement leurs largeurs mi-hauteur, b0,5 ainsi que leurs largeurs de base w, comme lindique
lquation 6.
(6)
Si la diffrence des temps de rtention de deux pics est grande par rapport leurs largeurs de base, ou
leurs largeurs mi-hauteur, on obtient alors une haute rsolution. En supposant une symtrie de pic idale,
il est encore possible didentifier deux substances lorsque R = 0,5. Pour des sparations qualitatives, il
est prfrable davoir R = 1 (sparation 4 ), pour une quantification, il est prfrable davoir une rsolution
variant de R = 1,2 1,5 [25]. Des rsolutions de lordre de R 2 (sparation 8 ) ne sont pas souhaitables,
car elles impliquent des temps danalyse trs longs.
3.2.2 Concepts thoriques de description de la chromatographie
Le modle du nombre de plateaux thoriques

Le modle du nombre de plateaux thoriques observ lors de processus de distillation permet galement
de dcrire les sparations chromatographiques [11]. Il spare la phase stationnaire en plusieurs zones
individuelles, appeles tages thoriques ou plateaux. Sur chacun de ces plateaux sinstalle exactement
une fois un quilibre rapide rversible et infini entre phase mobile et phase stationnaire. La performance
(efficacit) dun systme de chromatographie est caractrise par le nombre de ces plateaux thoriques.
Le nombre de plateaux thoriques N peut tre obtenu directement partir du chromatogramme, en
utilisant lcart-type, la largeur de base w ou la largeur de pic mi-hauteur b0,5 et peut tre calcul de la
manire suivante [12]:
(7)
Il est galement possible dutiliser la hauteur quivalente un plateau thorique, appele en anglais: HETP
(Height Equivalent to a Theoretical Plate) pour dcrire la performance de sparation.
(8)
partir des quations 5 8, on peut dduire quune phase stationnaire possdant un trs grand nombre
de plateaux thoriques est encore capable de sparer deux substances lune de lautre mme lorsque leurs
facteurs de rtention ne diffrent que trs peu lun de lautre, cest dire mme lorsque la slectivit est
proche de 1. Les quations permettent galement le calcul du nombre de plateaux thoriques absolument
indispensable la rsolution de problmes de sparation.
Le modle des plateaux thoriques peut galement tre utilis pour expliquer lapparition de signaux gaussiens
en chromatographie. En effet, les processus de courant et de diffusion ne permettent lobtention que dun
tat dquilibre rapide fini et incomplet entre la phase mobile et la phase stationnaire. Il en rsulte un
largissement des pics car en dbut du chemin de sparation, les zones de substance troites deviennent
clairement plus larges lorsque le temps de rsidence sur la phase stationnaire augmente.
Le calcul du nombre de plateaux thoriques selon lquation 7 est bas sur une forme de pic idale,
rarement rencontre. Lorsque les pics sont asymtriques, le calcul doit tre effectu par lintermdiaire de
la mthode des moments [13]. Lquation 9 donne, en prenant compte du facteur dasymtrie T, des
valeurs proches de la ralit.
(9)
Le nombre de plateaux effectifs n, se rapprochant de faon plus relle de la performance de sparation

que le nombre de plateaux thoriques N, est corrig par le facteur de rtention k et peut tre calcul de la
faon suivante:
(10)
La thorie dynamique (selon van Deemter)

La faiblesse dcisive du modle bas sur les plateaux thoriques rside dans le fait que la distillation et la
chromatographie sont deux processus physico-chimiques fondamentalement diffrents. En outre, certains
paramtres importants pourtant exprimentalement accessibles ne sont pas pris en compte alors quils
peuvent affecter le type ou la qualit de la phase stationnaire elle-mme [14, 15]. Ces derniers pourraient
tre:
Vitesse de dbit de la phase mobile
Diamtre des particules de la phase stationnaire
paisseur de couche des films de surface sur le matriau
En plus, des grandeurs telles que les coefficients de diffusion dans les phases mobile et stationnaire, la
temprature ou le volume du dtecteur jouent un rle fondamental sur la performance de sparation en
chromatographie liquide.
La thorie dynamique dveloppe par van Deemter est base sur le modle des plateaux thoriques, mais
prend en considration les conditions limitantes non idales [16]. Les hypothses suivantes sont faites:
Pas dtablissement spontan et non entrav des quilibres
Transport des masses retard dans les phases mobile et stationnaire
Pas de dbit homogne de la phase mobile sur une section de colonne
Apparition de diffusion et formation de canaux prfrentiels dans la phase stationnaire
Diffusion longitudinale indpendante de la vitesse de la phase mobile et directement proportionnelle au
temps de rsidence sur le chemin de sparation
La relation entre les effets dynamiques cits et la hauteur des plateaux thoriques est exprime dans
lquation de van Deemter.
(11)
Les trois termes A, B C dpendent de faon diffrente de la vitesse de dbit u de la phase mobile. Les
termes A et B dcrivent le transport de masse complet travers la phase stationnaire, tandis que le terme
C est dtermin par des interfrences lors de ltablissement de lquilibre entre la phase mobile et la
phase stationnaire.

Le terme A dcrit la diffusion turbulente, pouvant tre assimile un largissement de pic cause dun
effet multi-chemins. Ce terme est aussi connu sous le nom de facteur matriau et est indpendant de la
vitesse de dbit linaire u de la phase mobile, ceci en premire approximation. La relation suivante sapplique
pour le terme A:
A = 2 dP (12)
Dans lquation (12), dp est le diamtre moyen de particule dans la phase stationnaire, reprsente
lirrgularit statistique du matriau, devant tre idalement le plus homogne possible et form de particules
toutes identiques.
Le terme B dcrit la diffusion longitudinale co-courant ou contre-courant de la phase mobile. Il prend
une importance toute particulire lors de lutilisation de colonnes capillaires en chromatographie gazeuse
(CG), car les coefficients de diffusion dans les gaz sont de 4 5 ordres de grandeurs suprieurs aux
coefficients de diffusion dans les liquides. B est calcul comme le produit entre les coefficients de diffu-
sion dans la phase mobile DM et le facteur labyrinthe , lequel dcrit la porosit de la phase stationnaire.
B = 2 DM (13)
Comme limportance de la diffusion diminue avec une augmentation de la vitesse de dbit de la phase
mobile, B est inversement proportionnel u.
Le terme C dcrit le transfert de masse. Le transfert de masse ralenti entre phase mobile et phase stationnaire
influe normment sur llargissement des pics. Les interfrences dtablissement dquilibre entre phase
mobile et stationnaire deviennent de plus en plus grandes lorsque u augmente; cest la raison pour laquelle
il y a une directe proportionnalit la vitesse de dbit linaire. Les retards de transfert de masse rsultent
des faibles valeurs des coefficients de diffusion DS dans la phase stationnaire comparativement la phase
mobile. Cest la raison pour laquelle des particules profondment incluses dans les pores de la phase
stationnaire restent derrire le maximum du pic, lequel avance avec la phase mobile. La terme C peut tre
rduit de manire remarquable, grce de courts chemins de diffusion et des procds dchange rapides.
Ceci peut tre ralis laide dune localisation des pores essentiellement en surface. Peu de particules
parviennent alors atteindre le coeur de la phase stationnaire. Le terme de transfert de masse C est
calcul de la manire suivante:
(14)
La reprsentation graphique de lquation de van Deemter est une courbe hyperbolique dont le minimum
correspond au dbit uopt pour une hauteur de plateau minimale (nombre de plateaux thoriques maximal)
(figure 4).
Figure 4 Reprsentation des termes individuels

partir de la thorie de van Deemter avec
la courbe qui en rsulte, faisant appa-
ratre le dbit optimal uopt
Mme la thorie dynamique est finalement base sur des conditions idales. En ralit, les trois termes A,
B et C ne sont indpendants les uns des autres quen premire approximation; il existe un effet supplmentaire
de la vitesse de dbit u sur la diffusion turbulente (en anglais: eddy diffusion, terme A). Le terme C peut
tre scind en deux termes CM et CS, dcrivant respectivement le transfert de masse de la phase mobile
vers la phase stationnaire (CM) et inversement. Cest ainsi que lquation originale de van Deemter a t
modifie lors de nombreuses applications en HPLC, GC et TLC (thin-layer chromatography =
chromatographie en couche mince CCM) [17, 18].
Chromatographie liquide moderne (CL)

Le terme chromatographie liquide, en anglais liquid chromatography (LC) est un terme gnral pour de
nombreux procds de sparation de chromatographie liquide. Cette mthode peut tre utilise pour les
classes de substances les plus diverses et se caractrise par sa performance analytique excellente. Cest
probablement aujourdhui la mthode de sparation la plus importante dans la chimie analytique moderne
[3]. La chromatographie ionique (CI) reprsente une partie de la chromatographie liquide.
LHPLC reprsente lun des dveloppements de la chromatographie liquide classique (CL). La CL classique,
introduite par Tswett en 1906, utilise des colonnes de verre de diamtre variant entre 1 et 5 cm et de
longueur maximale 500 cm, remplies de phase de sparation avec des tailles de particules allant de 150
200 m. Mme les sparations de mlanges de matires simples duraient souvent plusieurs heures et
disposaient de performance de sparation mdiocre. Grce une comprhension croissante de la
chromatographie (voir quation 11), il est rapidement apparu quune augmentation de performance tait
possible uniquement grce une importante rduction du diamtre des particules de la phase stationnaire.
Cependant, cela posait de toutes nouvelles exigences quant aux quipements de chromatographie.
Depuis environ 1970, une technique dappareillage spciale et beaucoup plus performante est notre
disposition. Elle est en mesure de supporter des pressions retours leves variant de 10 50 MPa pouvant
tre obtenues lors de lutilisation de matriaux possdant un diamtre allant de 3 10 m et de colonnes
de sparation de longueur 125 250 mm x 4 mm DI.
Grce limportante miniaturisation, lHPLC est devenue une mthode de sparation uniquement analytique,
alors que la CL classique nest utilise lheure actuelle qu des buts prparatifs. Les avantages de
lHPLC comparativement la CL classique sont avant tout les suivants:
Efficacit chromatographique excellente
Travail continu
Dtection en ligne des substances spares
Haute sensibilit et reproductibilit
Utilisation des temps de rtention pour une identification qualitative des matires
Dures danalyse courtes
Quel que soit le domaine dapplication, un systme HPLC est constitu en rgle gnrale des lments
reprsents dans la figure 5: pompe haute performance avec rservoir pour la phase mobile (luant),
injecteur (introduction de lchantillon), colonne de sparation et systme de dtection (y compris drivation,
enregistrement et traitement des donnes):

Figure 5 Schma dun systme HPLC respectivement IC avec les principaux lments
La pompe est, avec la colonne de sparation, le cur de tout systme HPLC. Elle doit tre en mesure de
dlivrer lluant de manire constante et sans pulsation mme lors de fortes pressions. Ces dernires
impliquent lutilisation dune valve dinjection boucle spciale pour lintroduction des chantillons. On
utilise normalement une valve six voies, capable de prendre un volume dchantillon dfini laide dune
boucle sous pression normale et de transporter ce dernier dans un systme HPLC haute pression. La
composition de la phase mobile doit tre adapte au type de colonne de sparation, mais aussi au problme
analytique. Ceci est galement valable pour le choix du systme de dtection. Lenregistrement et le traitement
des donnes sont raliss de nos jours pratiquement exclusivement par ordinateur. Suivant le problme
pos, il est possible de complter, au choix, ce systme dappareillage HPLC de base.
Principes de sparation dans la CL

LHPLC se dcline en plusieurs groupes, suivant les changes physico-chimiques entre les substances de
lchantillon et la phase stationnaire. Bien que plusieurs mcanismes soient responsables dune sparation
russie [9], il est possible de raliser une classification grossire selon les mcanismes de sparation
suivants:
Adsorption
Distribution
Exclusion par taille
Affinit
change ionique
Formation de paire dions
Exclusion ionique
La chromatographie par adsorption est dfinie par des ractions aux surfaces limites, pendant lesquelles
des matires liquides ou gazeuses se trouvent concentres sur une phase solide. Plusieurs modles
dcrivant les processus dadsorption de manire qualitative et quantitative existent, bien que on ne se
rfre ici quasiment qu une littrature de chimie physique [19]. En pratique, on distingue deux tech-
niques de ralisation. Dans la chromatographie en phase normale, la phase stationnaire est gnralement
un gel de silice et donc beaucoup plus polaire que la phase mobile (hydrures de carbone). En
chromatographie en phase inverse (en anglais: Reversed Phase Chromatography, RPC), les rapports sont
galement inverss. Essentiellement pour des raisons de manipulation des luants, on ne travaille aujourdhui
pratiquement plus quavec la RPC [3, 9].
Dans la chromatographie par distribution, la phase stationnaire est constitue dun liquide non miscible
avec la phase mobile. La sparation est base sur la diffrence de solubilit des diffrents analytes dans
les deux phases. Dans la cas idal, la loi de distribution de Nernst est valable. Ce mcanisme de sparation
joue un rle important surtout dans la chromatographie gazeuse, lorsque lon utilise des capillaires recouverts
de liquides de sparation comme phase stationnaire. La chromatographie par distribution trouve galement
sa place en HPLC lorsque des gels de silice modifis avec des hydrures de carbone non polaires, comme
par exemple les phases octadcyle, sont utilises comme matriaux de support.
La chromatographie par exclusion de taille (en anglais: Size Exclusion Chromatography, SEC) permet
une sparation selon la taille des molcules par un effet tamis. Des gels de silice ou des rsines polymres
organiques structure de pore dfinie sont utiliss comme phase stationnaire. Les plus petits analytes
peuvent diffuser dans les pores et sont retenus. Lorsque la taille des molcules augmente, une interaction
avec les pores devient de plus en plus difficile, jusqu ce quune exclusion ait lieu partir dune certaine
taille de molcule. Ces molcules sont alors pratiquement lues dans le volume mort. La SEC est surtout
utilise pour lanalyse des polymres et la biochimie.
La chromatographie par affinit rend possible une sparation de mlanges de substances grce des
forces dinteraction slectives ou spcifiques. Ce sont surtout dans les domaines des enzymes et de leurs
substrats quon observe des interactions hautement spcifiques, de manire similaire linteraction entre
anticorps et antignes (principe cl-serrure). En pratique, les enzymes ou anticorps sont immobiliss
chimiquement sur une phase stationnaire. Si un substrat ou un antigne correspondant se trouve dans
lchantillon, ce dernier est alors retard avec une extrme slectivit. Cest la raison pour laquelle la
chromatographie par bio-affinit est un procd irremplaable dans le domaine de la pharmacologie.
La chromatographie par change ionique (CI) divise en chromatographie par paire dions et
chromatographie par exclusion ionique est traite plus en dtail dans le chapitre suivant.
3.3 Principes de base de la chromatographie ionique (CI)

3.3.1 Terminologie et position lintrieur de la CL
La chromatographie par change ionique ou chromatographie ionique (CI) reprsente un sous-groupe de
lHPLC. Selon lIUPAC, la chromatographie par change ionique est dfinie de la manire suivante [7, 8]:
La sparation en chromatographie par change ionique est base sur les diffrences daffinit dchange
ionique des diffrents analytes. Lorsque des ions inorganiques doivent tre spars et dtects laide
dun dtecteur de conductivit ou par dtection UV indirecte, on appelle cela de la chromatographie ionique.
Pour diverses raisons, cette dfinition nest malheureusement que peu satisfaisante. La technique de
dtection devrait tre observe indpendamment du mcanisme de sparation. De plus, la thse dune
restriction du terme chromatographie ionique des ions inorganiques nest pas du tout plausible, puisquen
pratique, il est souvent possible de dterminer simultanment et didentifier avec un systme dfini aussi
bien des ions organiques quinorganiques.

Une autre dfinition plus ancienne de la chromatographie ionique parat plus approprie [20]:
La chromatographie ionique regroupe toutes les sparations rapides de chromatographie liquide
dions sur des colonnes en couplage on-line avec un dtecteur cellule continu permettant dtection
et quantification.
Cette dfinition caractrise la chromatographie ionique indpendamment du mcanisme de sparation et
de dtection, mais pose galement une limite: celle de lchange ionique classique. Les principes de
sparation suivants jouent un rle en chromatographie ionique:
change ionique
Formation de paire dions
Exclusion ionique
Les mthodes chromatographiques sont dfinies selon le mcanisme de sparation appliqu. La
chromatographie par change dions est dnomme de nos jours plus simplement chromatographie ionique
(CI); la chromatographie par paire dions (en anglais: IPC, Ion Pair Chromatography) et chromatographie
par exclusion ionique (en anglais: IEC, Ion Exclusion Chromatography) jouent le rle dapplications spciales.
3.3.2 Lchange ionique

La chromatographie par change ionique (CI) est base sur une raction chimique se droulant de manire
stchiomtrique entre les ions dune solution et une matire solide quelconque portant des groupes
fonctionnels et ayant la proprit de fixer des ions grce des forces lectrostatiques. Dans la chromato-
graphie ionique cationique, les groupes fonctionnels sont, dans le cas le plus simple, des groupes dacide
sulfoniques et dans la chromatographie ionique anionique, des groupes ammonium quaternaires. En principe,
il est possible que des ions chargs identiquement puissent tre changs de faon rversible entre les
deux phases. Les processus dchange ionique atteignent alors un tat dquilibre. Laffinit des ions
concerns avec les groupes fonctionnels de la phase stationnaire va imposer le ct dans lequel lquilibre
va prendre place. La figure 6 montre schmatiquement les processus ayant lieu lors de lchange de
cations et danions. Les ions analytes, qui sont en concurrence avec les ions luants E, sont dnomms
par la lettre A.
Figure 6 Reprsentation schmatique du processus dchange ionique dans la chromatographie ionique.

A gauche: change de cations, droite: change danions
Aspects thermodynamiques du processus dchange ionique
Les changeurs ioniques sont normalement constitus de phases solides sur lesquelles des groupes
ioniques sont fixs en surface. En raison des conditions dlectroneutralit, un contre-ion se trouve toujours
proximit des groupes fonctionnels. Le contre-ion provient en principe de la phase mobile et est pour
cette raison appel ion luant.
Si on introduit un chantillon comportant deux ions analytes A et B, ces derniers prennent alors pour un
court instant la place des ions luant E et sont retenus la charge fixe, jusqu ce quils soient de
nouveau changs de leur ct, par un ion luant. Pour la chromatographie ionique anionique, on a alors
les quilibres rversibles suivants:
Rsine - N+R3 E + A Rsine - N+R3 A + E (15)
Rsine - N R3 E + B
+
Rsine - N R3 B + E
+
(16)
Grce aux affinits diffrentes de A et B vis vis des groupes fonctionnels, il est possible de raliser une
sparation des composs. La constante dquilibre K est galement appele coefficient de slectivit et se
calcule pour lanion A, de la faon suivante:
(17)
Si on suppose que la concentration des ions luants est trs largement suprieure celle des ions analytes,
on peut considrer [E] constant dans la phase mobile comme dans la phase stationnaire. On peut ainsi
calculer le coefficient de distribution DA (quation 1) et le facteur de rtention kA (quation 4). Thoriquement,
de tels calculs ne sont permis que lorsque les concentrations dans lquation 17 correspondent aux
activits; cependant cela nest vrai que dans le cas de dilutions infinies [19]. Les activits des ions dans la
phase stationnaire sont en principe inaccessibles [4]. On considre les activits comme ngligeables dans
le cas des changeurs ioniques de faibles capacits (les plus souvent utiliss) car ils ne peuvent tre
utiliss quavec des phases mobiles composes dlectrolytes trs dilus. Cette simplification nest plus
valable ni pour les matriaux de forte capacit (>200 mmol/g), ni pour les luants concentrs. Ces
derniers montrent un comportement dviant fortement du comportement idal.
3.3.3 La formation de paires dions

La chromatographie par paire dions permet de sparer les mmes analytes que la chromatographie par
change dions. Le mcanisme de sparation est cependant totalement diffrent. Les matriaux phase
inverse compltement apolaires, connus de la chromatographie par distribution, sont utiliss comme
phases stationnaires. Un ractif de paire dions constitu de tensioactifs anioniques ou cationiques (sels
ttra alkyle ammonium ou acides n-alkyle sulfoniques) est ajout lluant. Les ractifs formation de
paire dions forment avec les ions analytes de charge oppose une paire dions non charge, qui peut tre
retenue sur la phase stationnaire grce des interactions hydrophobes. En raison des constantes de
formation des paires dions et de leurs adsorption plus ou moins forte, il est possible deffectuer une
sparation. La figure 7 montre de manire simplifie un modle statique dchange ionique, o lon considre
que cest seulement aprs une adsorption du ractif formation de paire dions sur la phase stationnaire
quune interaction avec lanalyte a lieu.

Figure 7
Reprsentation schmatique du
modle dchange ionique statique
en chromatographie par paire
dions (IPC). Le principe de spara-
tion est valable aussi bien pour les
anions que pour les cations.
3.3.4 Lexclusion ionique

La chromatographie par exclusion ionique (en anglais: IEC, Ion Exclusion Chromatography) permet avant
tout la sparation dacides ou de bases faibles [2, 4]. LIEC joue un rle important lors de la dtermination
dacides faibles tels que les acides carboxyliques, les hydrures de carbone, les phnols ou les acides
amins. La figure 8 montre le principe de sparation de lIEC, avec lexemple dun acide carboxylique R
COOH.
Figure 8
Lexclusion selon Donnan comme
principe de sparation dans la
chromatographie par exclusion
ionique (IEC)
En IEC, on utilise souvent un changeur de cations compltement sulfon, dont les groupes acides
sulfoniques sont lectriquement neutres grce aux protons jouant le rle de contre-ions. Dans les luants
aqueux, les groupes fonctionnels sont hydrats. Lenveloppe hydrate est limite par une membrane
imaginaire charge ngativement (membrane Donnan). Cette dernire nest permable que pour les
molcules non charges et non dissocies, telles que les molcules deau. Les acides carboxyliques
organiques peuvent tre spars lorsque des acides minraux forts (tels que lacide sulfurique) sont
utiliss comme phase mobile. Les acides carboxyliques faibles ont des constantes dacidit (valeurs pKa)
faibles et se trouvent donc sous une forme pratiquement non dissocie dans un luant fortement acide. Ils
peuvent alors traverser la membrane Donnan et tre adsorbs sur la phase stationnaire, pendant que les
ions sulfates de lacide sulfurique compltement dissocis sont exclus.
La figure 9 montre une dpendance typique du volume dlution dun acide (de constante pKa) pour une
sparation par exclusion ionique. Des adsorptions superposes (acides carboxyliques longues chanes,
H2S) et les limites du domaine de travail pratique sont faciles reconnatre. La sparation dacides
carboxyliques est ralise finalement grce la diffrence de leurs valeurs pKa.
Figure 9
Dpendance du volume dlution dans la chromatographie
par exclusion ionique de la valeur pKa correspondante de
lacide
3.4 Modles de rtention de la chromatographie ionique

Dans le cas idal, la rtention dun analyte en chromatographie ionique est dtermine par son affinit vis
vis des groupes fonctionnels de lchangeur ionique. Cette affinit peut tre dcrite par la formulation
dune raction chimique, la raction de lchange ionique, et peut tre explique par la loi daction de
masse.
Les expriences prsentes dans les modles de rtention suivants essaient de donner une prdiction
quant au comportement de rtention des analytes sous des conditions chromatographiques particulires.
Si les modles rsultant sont capables dexpliquer les observations macroscopiques, on peut alors par
exemple optimiser un systme dlution en vue dun problme de sparation particulier.
3.4.1 Modles de rtention pour la chromatographie danions

Les observations suivantes prennent tout dabord en considration uniquement le mcanisme de
chromatographie ionique le plus simple: le dplacement isoionique. Lexemple concret est bas sur la
chromatographie danions, mais des observations identiques sont galement observes pour la
chromatographie de cations. Lorsquun dagent complexant est ajout lluant, il faut davantage dvelopper
le modle de rtention. Ceci est dcrit de manire plus dtaille dans le paragraphe Modle de rtention
pour llution en prsence dagents complexants (chapitre 3.4.2).
Modles de rtention pour luants avec un anion

Si on suppose que llectroneutralit est vrifie, lapproche la plus simple est celle o un seul ion luant
Ey rentre en comptition avec un ion analyte Ax pour un groupe fonctionnel de la phase stationnaire [4].
La concentration des anions luants Ey est alors constante dans le temps (lution isocratique).
Les sites dchange de la colonne de sparation de capacit Q sont, en dbut du processus chromato-
graphique, occupes par des anions luants Ey. Si un chantillon comportant lanion analyte Ax est
introduit, on observe alors entre phase stationnaire (index S) et phase mobile (index M) linstallation de
lquilibre suivant:
y AMx + x ESy y ASx + x EMy (18)

Selon la loi daction de masse, lquilibre peut tre dcrit par une constante dquilibre thermodynamique.
On obtient, en prenant en considration lactivit des ions par ticipants, la constante dquilibre
thermodynamique suivante:
(19)
Comme les activits des ions participants dans la phase stationnaire et la phase mobile ne peuvent tre
dtermines, lactivit dans la phase stationnaire est nglige et assimile 1.
Si pour lanion analyte Ax, on introduit deux grandeurs connues du chapitre 3.2.1, le coefficient de distri-
bution DA et le facteur de rtention kA,
(20)
on peut alors convertir lquation 19, en incluant ces quantits et en ngligeant les activits comme dcrit
ci-dessous:
(21)
Comme la concentration des ions luants E est, en rgle gnrale, suprieure la concentration des
anions analytes Ax de plusieurs ordres de grandeur, on obtient une bonne approximation en faisant
lhypothse que tous les groupes fonctionnels sont occups par Ey. En suivant cette hypothse, la con-
centration en Ey, non dterminable dans la phase stationnaire peut alors tre remplace par les paramtres
plus accessibles que sont la capacit Q et la charge de lanion luant y:
(22)
Ceci signifie que lquation 21 peut tre convertie en:
(23)
Le facteur de rtention kA de lanion analyte Ax est facile daccs grce au chromatogramme. Lquation
23 est alors rsolue pour cette quantit.
(24)
Cette quation est dune importance particulire pour la chromatographie danions, car elle livre une
relation quantitative entre le facteur de rtention kA et quelques paramtres accessibles exprimentalement,
tels que la concentration de lluant et la capacit dchange. En pratique, pour plus de clart, on travaille
avec la version logarithmique de lquation 24.
(25)
partir de lquation 25, on obtient tout dabord les consquences suivantes:
Une augmentation de la concentration de lluant [Ey] acclre llution
Des facteurs de rtention plus levs sont obtenus lors de constantes dquilibre plus grandes
KA,E, de capacits dchange Q plus hautes et un rapport phase-volume plus lev.
Les analytes multivalents Anx sont retenus plus longtemps que les monovalents Ax,
Au moins aussi longtemps que la concentration de lluant [Ey] est relativement basse. Ceci est
connu en tant qulectroslectivit.
Les luants multivalents Eny ont une force dlution plus haute que les monovalents Ey
Llution danalytes multivalents Anx est influence de manire plus importante par des concentra-
tions croissantes dions luants monovalents Ey que les analytes monovalents Ax.
Dans une premire approximation, on peut considrer que les coefficients de slectivit sont indpendants
de Q lorsque est constant; on obtient alors la proportionnalit suivante:
(26)
partir de lquation 26, on voit que lors dune augmentation de la capacit dchange Q la concentration
de lluant [Ey] doit tre galement augmente proportionnellement, de faon ce que des facteurs de
rtention constants soient obtenus. Cest la raison pour laquelle, en chromatographie ionique on utilise
normalement des phases de sparation de basse capacit, car lun des modes de dtection les plus
importants en chromatographie ionique est la dtection conductimtrique, et que cette dtection devient
pratiquement impossible lors de fortes concentrations dlectrolytes.
Pour optimiser les analyses de sparation, on fait souvent varier la concentration de lluant [Ey]. Si tous
les paramtres de lquation 25 rentrant en ligne de compte sont maintenus constants, celle-ci peut se
simplifier de la manire suivante:
(27)
La reprsentation graphique de lquation 27 donne une ligne droite de pente m = x/y et dintersection C1
avec laxe vertical, C1 comprenant les grandeurs Q, et KA,E. Lors de lutilisation dun luant monoanionique,
m est connu sous le nom de charge effective. La figure 10 reprsente de manire schmatique le rsultat
obtenu par lquation 27, pour diffrentes combinaisons dions analytes et luants chargs diffremment.
Figure 10
Reprsentation graphique de lquation 28 pour
diffrentes combinaisons dions analytes et luants
chargs diffremment [4]

Lquation 27 a t confirme dans de nombreuses publications, cependant dans lhypothse que des
matriaux de sparation de faible capacit et des luants dilus soient utiliss.
En revanche, si on varie la capacit Q dans des conditions constantes, lquation 25 est alors simplifie.
On a:
log k'A = C2 + x log Q (28)
y y
La reprsentation graphique de cette quation ressemble la figure 10, avec cependant des pentes de
droite positives. Des expriences chromatographiques en faisant varier Q nont t jusquici ralises
quune seule fois lors de la sparation de cations divalents. Ceci a montr, contrairement aux hypothses
prcdemment considres, que le facteur de rtention et les coefficients de slectivit ne peuvent pas
tre considrs comme indpendants de la capacit dchange. Il apparat clairement que, pour optimiser
les analyses de sparation, il faut tenir compte non seulement de la concentration de lluant [Ey], mais
galement de la capacit dchange Q .
Les observations obtenues jusqu prsent ne sont valables que pour un anion analyte. Si, par contre,
deux anions diffrents Ax et Bz se font concurrence pour un groupe fonctionnel, on a alors pour les
coefficients de slectivit KA,B:
(29)
En considrant lquation 20, on obtient tout dabord la slectivit AB,
(30)
et ensuite, aprs conversion, on a les quations 31a et b,
(31a)
(31b)
qui peuvent tre simplifies pour les analytes chargs de manire similaire (x = z):
(32) resp. (33)
Pour la slectivit entre deux anions analytes chargs de manire similaire, cela signifie:
Elle est seulement une fonction du coefficient de slectivit KA,B et des charges z resp. x,
Elle ne dpend, lorsque KA,B est constant, ni de la concentration [Ey], ni de la constitution chimique de
lanion luant (!)
Si A et B ont des charges diffrentes,
A,B dpend du facteur de rtention dun des deux analytes,
Les deux facteurs de rtention kA et kB ne sont pas indpendants lun de lautre (!)
Dans les quations 31 jusqu 33, il est particulirement intressant de remarquer que la slectivit entre
deux anions ne dpend au dpart ni de la constitution chimique ni de la charge de lanion luant, et ceci
aussi longtemps que le rapport volume de phase/coefficient de slectivit est constant. En pratique, il est
cependant possible dobtenir un changement de A,B travers une variation de [Ey], car deux analytes,
mme sils sont chargs de la mme faon, peuvent tre diffrencis trs clairement par leurs proprits
chimiques, telles que polarisabilit et hydratation, ce qui implique ensuite une affinit diffrente vis vis de
la phase stationnaire. Ces interactions ne sont pas prises en considration dans la drivation classique.
Modles de rtention pour les luants avec plusieurs anions

Les observations faites jusqu prsent ne se rfrent quaux systmes dlution avec un seul anion luant.
En pratique, on a normalement plusieurs espces luantes prsentes, comme cest le cas avec les tam-
pons carbonate/hydrognocarbonate ou les acides multi-bases tels que lacide phosphorique, dont la
dissociation et par consquent la distribution despces dpend trs fortement de la valeur pH.
Mme dans les cas les plus simples, lorsque aucun des anions luants participants nest actif lquilibre
acide-base, on ne peut pas reprsenter la relation entre le facteur de rtention k et la concentration de
lluant [E] sous la forme dune relation log-log simplifie, conformment lquation 28. Ceci ne serait
possible que si la concentration ou la force dlution des anions luants restants pouvait tre nglige; ceci
correspondrait au modle de rtention des luants monoanioniques.
Dans la littrature, divers modles traitant des luants polyanioniques sont dcrits; ils sont discuts
succinctement dans le paragraphe suivant:
Modle de lquilibre dominant [21]
Modle de la charge effective [22-24]
Modle des quatre espces dluants [25, 26]
Si lon observe un luant base de phosphate H2PO4, HPO42 et PO43, (autrement H2P, HP2 et P3) et les
ions analytes monovalents A , les quilibres suivants sont forms:
; x1 (34)
; x2 (35)
; x3 (36)
Les grandeurs x1...3 correspondent aux proportions de la raction particulire dans la rtention, cest pourquoi
on a:
x1 + x2 + x3 = 1 (37)

Les deux modles de lquilibre dominant ou de la charge effective postulent une charge particulire pour
lanion luant, bien que plusieurs espces soient prsentes, de faon ce que le modle de rtention
driv (voir plus haut) pour luant monoanionique puisse tre utilis.
Le modle de lquilibre dominant suppose que lquilibre dans lquation 36 tend du ct droit, car P3
est bien plus fortement li la phase stationnaire que H2P et HP2, de par la supriorit de sa charge. P3
est ainsi seul responsable de llution, de faon ce que la charge de lanion luant donne 3. Ce modle
nobtient cependant de bons rsultats. Il ne savre applicable quavec des analytes multivalents [4].
Avec le modle de la charge effective, on calcule une charge effective, en prenant en considration la
valeur pH, partir des fractions molaires des espces possibles H2P, HP2 et P3 [22]. En utilisant ceci
avec les concentrations existantes des espces luantes, on obtient une relation analogue lquation 27.
Cependant une condition sine qua non, pour que de tels calculs soient possibles vient du fait que les
slectivits des espces dluants ne se diffrencient pas essentiellement comparativement aux ions analytes
A. Le modle de charge effective peut surtout tre utilis de manire intressante, avec des analytes
monovalents [4].
En ralit, le modle des espces dluants multiple est plus adapt la description dluants dont les
composs drivent les uns des autres. Les observations suivantes sont bases sur le modle de Mongay
et al. [27], qui reprsente un dveloppement supplmentaire des travaux raliss par Jenke et Pagenkopf
[25].
Grce aux quations 34 jusqu 36, il est possible de reprsenter lquilibre global sur la colonne de
sparation (quation 38). Si on considre lquation 37, les constantes dquilibre KA,P peuvent tre
dfinies pour le processus dchange, si les activits sont ngliges (quation 39).
(38)
(39)
Comme pour la drivation du modle de rtention pour les luants monoanioniques, les traitements
mathmatiques suivants sont raliss. Il faut surtout prendre en considration:
La (possible) dissociation de lanion analyte A
La concentration totale de lespce luante: cP = [H3P] + [H2P] + [HP2] + [P3]
La force des interactions des espces dluants avec les groupes fonctionnels
Lintroduction du facteur de rtention kA (quation 20) et de la capacit dchange Q (quation 22) livre,
aprs quelques conversions mathmatiques supplmentaires, une expression complique pour kA [28],
qui est ici seulement reprsente sous sa forme logarithmique et simplifie:
(40)
C3 est une constante, qui, de faon analogue lquation 27, comprend des grandeurs telles que rapport
volumes de phases, capacit dchange et constante dquilibre et cP (qui est la somme des concentra-
tions des espces de lluant). A partir de lquation 40, on peut dduire que les pentes des droites dans
une reprsentation logarithmique double doivent toujours tre plus petites que celles conformes au modle
de rtention simple pour luants monoanioniques (quation 27), car la somme entre parenthses est
toujours plus petite que 1. Il est galement clair que la valeur pH a une influence notable sur la faon dont
la relation log-log est elle-mme influence.
Pour les espces dluants ne drivant pas dun point de vue chimique les unes des autres, il existe un
modle, celui de Jano et al., dvelopp pour dcrire des luants contenant un tampon phosphate en plus
du perchlorate [29]. La drivation de ce modle est effectue de faon similaire aux observations cites
plus haut; un quilibre dchange supplmentaire doit cependant tre pris en considration pour un autre
ion luant monovalent. Les calculs livrent des expressions trs compliques du facteur de rtention, qui
deviennent trs simples pour des luants neutres ou acides. Dans la cas o une autre espce dluant
monovalente est prsente ct du perchlorate, on obtient lquation 41, o x et y reprsentent les contri-
butions des ractions dquilibre correspondant la rtention (x: tampon phosphate, y: perchlorate).
Comme dans les autres modles, C4 est une constante, alors que le facteur a difficilement accessible est
cens prendre en considration la force de fixation la phase stationnaire des ions perchlorate
comparativement aux espces phosphates.
(41)
Comme les termes entre parenthses de lquation 41 sont infrieurs 1, la pente dans la reprsentation
log-log devrait toujours tre infrieure celle obtenue avec le modle de rtention simple. Le modle livre,
dans des cas concrets dapplication, une bonne concordance avec les donnes exprimentales. Ce nest
cependant pas applicable, sous cette forme, dans le cas de systmes dlution alcalins.
3.4.2 Modles de rtention pour la chromatographie de cations

La chromatographie de cations doit tre spare en deux groupes, afin de pouvoir observer les modles
de rtention. Un des groupes concerne les analytes alcalins et alcalino-terreux et ncessite un systme
dlution bas sur un dplacement isoionique. La phase stationnaire porte des groupes fonctionnels dacides
carboxyliques. Lors de la sparation dions mtalliques bivalents ou de charge suprieure, lutilisation dun
agent complexant devient invitable. Son rle sera dcrit de manire plus dtaille ci-dessous.
Modle de rtention avec un cation

Les explications du paragraphe Modle de rtention pour luant avec un anion sont valables de faon
analogue pour la chromatographie de cations avec lution par dplacement isoionique. En pratique, ceci
concerne les mtaux alcalins et alcalino-terreux, lammonium et les amines courtes chanes. Dautres
luants que H+ peuvent aussi tre utiliss, par exemple des cations organiques tels que lacide 2,3-
diaminopropionique (ADP) en solution dans de lacide chlorhydrique dilu. Selon la valeur pH ajuste de
lluant, lADP se trouve dans les formes ioniques (1) et (2) (figure 11). Aprs suppression, on obtient la
forme zwitterion (3), qui possde une conductivit propre faible.
Figure 11
Espces ioniques de lacide
diaminopropionique

Modle de rtention pour llution en prsence dagents complexants
La sparation dions alcalino-terreux, de transition et des mtaux lourds, ncessite lutilisation dluants
contenant un agent complexant en plus du cation luant Ey+. Les agents complexants utiliss sont des
acides dicarboxyliques H2L, tels que lacide tartrique, lacide oxalique et lacide pyridine dicarboxylique
(pyridinedicarboxylic acid = PDCA) ou lacide citrique. Les analytes forment des complexes plus ou
moins stables avec les anions des agents complexants HL et L2; leurs stoechiomtries diffrent aussi.
cause du processus de complexation, la charge effective, cest dire la charge de lanalyte prsente sur
une priode de temps moyenne, est rduite. tant donne la relation directe avec les cintiques de forma-
tion et les constantes de stabilit des complexes, les slectivits diffrent suffisamment pour que la sparation
danalytes mme similaires devienne possible. Au del de lchange ionique, la formation de complexe
joue elle-aussi un rle prdominant quant la sparation des ions mtalliques de charge suprieure.
(42)
(43)
(44)
Afin de pouvoir prendre en considration linfluence de lagent complexant sur la sparation chromato-
graphique, le modle du dplacement isoionique est tendu (voir paragraphe Modle de rtention pour
les luants avec un anion, chapitre 3.4.1). Le paramtre M est introduit afin de dcrire le degr de
complexation de lanalyte. La fraction M de lion analyte libre dans la phase mobile est exprime comme
suit:
(45)
avec [Me]: concentration totale des ions mtalliques. La valeur M est calcule partir des constantes de
formation de complexe, des constantes de dissociation acides (pKa) des acides carboxyliques et du pH de
lluant. Pour les coefficients de distribution DMe , on obtient, en tenant compte de la formation de complexe:
(46)
Si lon suppose quune interaction na lieu quentre les ions analytes libres Mex+ et les groupes dacides
carboxyliques ou sulfoniques et que c(Ey+) >> c(H+), on a alors pour lquation 23:
(47)
On obtient la forme logarithmique de lquation 47, de faon analogue lquation 25:
(48)
Si plusieurs espces mtalliques cationiques se trouvent les unes ct des autres, par exemple Mex+ et
MeHL(x1)+, la plupart du temps, un seul pic est alors observ. Le nombre de pics observs dpend de la
cintique des quilibres de complexation et de dcomplexation dans la phase mobile. On nobtient quun
seul pic lorsque lquilibre de complexation dans la phase mobile sinstalle rapidement comparativement
au temps de rsidence du complexe sur la phase complexe. En revanche, si la dcomplexation se droule
lentement, il est possible dobtenir des pics asymtriques ou multiples pour llment Me.
Si lon suppose que toutes les espces mtalliques prsentes dans la phase mobile peuvent entrer en
interaction avec la phase stationnaire, on obtient alors lexpression suivante pour le facteur de rtention
kexp de lanalyte dtermin exprimentalement:
(49)
Si lon considre la dpendance du facteur de rtention des variables Q, [Ey+] ainsi que M, alors la relation
prsente dans lquation 48 est utilise comme point de dpart, car les analytes divalents forment
principalement des complexes neutres ou anioniques avec les agents complexants puissants.
Calcul des valeurs M

La valeur M est dfinie selon lquation 45 comme le rapport de la concentration des ions mtalliques
libres et de la concentration totale en ions mtalliques. Les concentrations des espces mtalliques prsentes
dans la phase mobile peuvent tre calcules laide des constantes de complexation et des constantes de
dissociation des acides carboxyliques utiliss.
Si lacide tartrique est lagent complexant utilis dans les luants, il se forme avant tout des complexes
neutres 1:1 de formule MeL avec les mtaux alcalino-terreux, ceux de transition et les mtaux lourds, mais
galement en quantit moindre le complexe dhydrogne tartrate de formule MeHL+. Pour le calcul de M,
on obtient pour les luants dacide tartrique:
(50)
o cL reprsente la concentration totale en acide tartrique et HL ainsi que L les fractions molaires des
anions acides HL et L2.
Avec lacide oxalique, et/ou lacide pyridine dicarboxylique, certains ions mtalliques forment, en plus des
complexes 1:1, des complexes MeL22 stables. M se calcule alors de la manire suivante:
(51)
Calcul de la dissociation acide

Le pH et la concentration de lagent complexant dans la phase mobile dterminent la concentration de
ligand et donc donnent une information sur la complexation des analytes. Un acide possdant deux pro-
tons se dissocie en deux tapes:
(52)

(53)
avec les constantes acides KS1 et KS2. Les fractions molaires utilises pour le calcul de M, H2L, HL ainsi
que L, sont obtenues partir des lois daction de masse des tapes individuelles de dprotonisation:
(54)
(55)
(56)
3.5 Systmes de dtection utiliss en chromatographie ionique

Toute une srie de procds diffrents existent dans le domaine de lHPLC afin de dtecter des sub-
stances. Le choix dun dtecteur adapt dpend cependant de la question analytique rsoudre. Les
exigences relatives au dtecteur peuvent tre rsumes de la manire suivante:
Haute sensibilit de mesure et temps de rponse court
Proportionnalit entre le signal de mesure et la concentration de lanalyte (grande gamme linaire)
Faible variation de la ligne de base (drift ou drive)
Faible bruit de fond propre
Volume propre aussi faible que possible afin davoir disposition le plus faible largissement de bande
possible
En gnral, on fait une diffrence entre les dtecteurs slectifs et non slectifs. Tandis quun dtecteur
slectif ragit directement lune des proprits de lanalyte, les dtecteurs non slectifs ragissent un
changement dune proprit physique du systme dlution complet provoqu par lanalyte. Les dtecteurs
utiliss en chromatographie ionique ne se diffrencient en principe pas de ceux, conventionnels, mis en
application en HPLC. Les systmes de dtection les plus importants seront voqus dans ce chapitre. Le
dtecteur le plus universel et le plus utilis en CI est le dtecteur de conductivit.
3.5.1 Mthodes de dtection lectrochimiques
Dtection conductimtrique
La dtection conductimtrique possde environ 55% du march de la chromatographie ionique [4]. Vu le
nombre de chromatographes ioniques vendus jusqu ce jour, cette proportion devrait mme aujourdhui
tre bien suprieure. La dtection conductimtrique est un principe de dtection non slectif, mais dans ce
cas, il est possible de raliser des dterminations directes et indirectes. Comme la chromatographie
ionique met en application des phases mobiles sous forme dlectrolyte aqueux, le dtecteur doit tre en
position de pouvoir ragir un changement de conductivit total provoqu par une quantit dions analytes
relativement faible. Grce lutilisation de techniques dites de suppression, il est possible de rduire
fortement la conductivit propre de certains luants ce qui permet dans le cas danions acides forts
dobtenir une augmentation importante de la sensibilit.
La conductivit dune solution est linverse de la rsistance R quun liquide produit entre deux lectrodes
de surface A, places une distance L lune de lautre.
= L / (A R) (57)
La conductivit quivalente dune solution peut tre dtermine de la manire suivante:
=/c (58)
La conductivit limite et la dpendance de la conductivit par rapport la concentration peuvent tre
dtermines laide de lquation 59. Les constantes A et B sont des constantes empiriques.
(59)
La conductivit dun lectrolyte est obtenue en additionnant les deux conductivits ioniques anion et
+cation:
(60)
Figure 12
Construction dune cellule de mesure de conductivit
Selon la loi de Kohlrausch, la conductivit dune solution dilue est proportionnelle la somme des
conductivits de tous les ions, multiplie par leurs concentrations:
(61)
o est la conductivit en S cm1, la conductivit limite en S cm2 (z mol)1 et c la concentration en z mol

L1 (z correspond la charge de lion). Le facteur 1000 rsulte du fait que 1 litre correspond 1000 cm3.
La variation de conductivit provoque par les analytes est proportionnelle leur concentration dans
lluant,
(62)

o S et E reprsentent respectivement lion analyte et lion luant. Comme avec la dtection conductimtrique,
cest la variation de conductivit qui est mesure et seulement de faibles changements de conductivit
sont obtenus en chromatographie danions pour des conductivits de base leves. Il est donc prfrable
de conserver la conductivit de base aussi faible que possible.
Figure 13
Changement de la conductivit de lluant
dune sparation de chromatographie ionique
dun mlange de plusieurs substances. Les
changements dun luant de forte conductivit
sont reprsents en rouge et ceux dun luant
de faible conductivit en bleu
En chromatographie ionique, la conductivit dun luant peut tre dtermine soit directement, soit aprs
passage travers un suppresseur. Ces deux variantes portent respectivement les noms de technique
mono-colonne et technique par suppression. Un calcul simple permet de dterminer celle des deux formes
qui est la plus approprie.
Si on utilise, dans le domaine de la chromatographie danions, la dtection conductimtrique directe, on a
alors une dpendance directe de la sensibilit Peak et de la diffrence entre la conductivit quivalente de
lion analyte et celle de lluant. Dans le cas du chlorure (analyte) et du carbonate comme anion luant, on
obtient les quations suivantes:
Peak cAnalyte (-Cl -CO 2) Peak cAnalyte (76 72)

3
Peak cAnalyte 4
Si lluant est adapt aux exigences de la dtection conductimtrique directe, on peut alors envisager le
remplacement de lluant base de carbonate par un luant base de phtalate et lon obtient pour lexemple
ci-dessus la sensibilit suivante:
Peak cAnalyte (-Cl -Phthalate) Peak cAnalyte (76 38)
Peak cAnalyte 38
Si la suppression chimique de la conductivit de lluant (change des ions luants contre H+) est utilise,
la sensibilit est alors dpendante de la somme des conductivits quivalentes des anions analytes et des
ions H+; on obtient pour Cl analyte le rsultat suivant:
Peak cAnalyte (-Cl + +H+) Peak cAnalyte (76 + 350)
Peak cAnalyte 426
partir de ce simple calcul, on peut dduire que pour les anions, la dtection conductimtrique directe est
moins sensible dun facteur 10 environ que la dtection conductimtrique aprs suppression chimique.
Pour la chromatographie de cations, la mme dmarche est effectue avec Na+ ion analyte et H+ cation
luant. Dans le cas de la dtection conductimtrique directe (NaCl/HCl), on obtient pour la sensibilit de
mesure Peak les quations suivantes:
Peak cAnalyte (+Na+ +H+) Peak cAnalyte (50 350)
Peak cAnalyte (300)

Lors dune suppression chimique de la conductivit de lluant (change des anions luants Cl contre OH),
on obtient:
Peak cAnalyte (+Na+ + -OH) Peak cAnalyte (50 + 198)
Peak cAnalyte 248

Contrairement aux anions, on obtient ainsi une sensibilit suprieure de la dtection conductimtrique
directe des cations par rapport la dtection conductimtrique aprs suppression chimique.
Tableau 2 Conductivit quivalente de quelques ions
Cations + (S cm2 eq-1) Anions (S cm2 eq-1)

H+ 350 OH 198
Li+ 39 F 54
Na+ 50 Cl 76
K+ 74 Br 78
NH4+ 73 I 77
Mg2+ 53 NO2 72
Ca2+ 60 NO3 71
Sr2+ 59 HCO3 45
Ba2+ 64 CO32 72
Zn 2+ 52 H2PO4 33
Hg 2+ 53 HPO42 57
Cu 2+ 55 1
/3 PO43 69
Pb 2+ 71 SO42 80
Co 2+ 53 CN 82
1
/3 Fe3+ 70 SCN 66
N(Et)4+ 33 Actate 41
Phtalate 38
Propionate 36
Benzoate 32
Salicylate 30
Oxalate 74

Les suppresseurs de chromatographie ionique sont soit des suppresseurs packed-bed travaillant de
faon discontinue (Figure 14), soit des suppresseurs membranes travaillant de manire continue. Le
suppresseur lit fixe de Metrohm (packed-bed suppressor) est une version rotative et possde trois units
de suppression identiques: lune delle joue le rle de suppresseur, la deuxime unit est rgnre et la
troisime est rince avec de leau ultrapure. Aprs ralisation dune analyse, le revolver pivote de 120
degrs et lunit rince auparavant est utilise comme suppresseur; de cette faon, on peut pratiquement
travailler de manire continue.
Figure 14
Construction schmatique dun suppresseur packed-
bed pour un travail quasi-continu
Le suppresseur membrane prsent dans la figure 15 permet un mode de travail continu. cause de
lutilisation de membranes changeuses dions, il reste cependant sensible aux occupations non dsires
de la surface de membrane, qui provoquent une rduction de la capacit de suppression et qui entranent
finalement un dysfonctionnement du suppresseur.
Figure 15
Construction schmatique dun suppresseur
membrane travaillant de manire continue
Dtection ampromtrique
Les dtecteurs voltampromtriques peuvent en principe tre utiliss pour tous les composs qui peuvent
tre facilement rduits ou oxyds ou qui possdent des groupes fonctionnels oxydables. Le dtecteur
ampromtrique est le plus important. On applique une certaine tension fixe entre une lectrode de travail
et une lectrode de rfrence. Un analyte est lectrochimiquement actif la valeur de tension applique si
son potentiel de demi-vague est tel quil subit soit une rduction, soit une oxydation. Si un tel compos se
prsente, un courant passe et reprsente alors le signal de mesure. Lampromtrie est trs sensible, bien
que le taux de conversion ne soit que denviron 10%. Outre des cations tels que Fe3+ ou Co2+, ce sont
surtout des anions tels que nitrite, nitrate, thiosulfate ainsi que les halognures et les pseudohalognures
qui sont analyss. La plupart des applications concernent lanalyse des sucres ainsi que lanalyse clinique
par chromatographie anionique. De par sa conception particulire, le dtecteur coulomtrique permet
dobtenir un rendement quantitatif; cependant, il nen rsulte aucune augmentation de sensibilit.
Dtection potentiomtrique
Dans le cas de la dtection potentiomtrique, on travaille avec des lectrodes ioniques sensitives, possdant
parfois une trs haute slectivit. La miniaturisation croissante des lectrodes peut cependant poser quelques
problmes de fiabilit. Ce type de dtection nest donc utilis en chromatographie ionique que dans des
applications trs prcises.
3.5.2 Mthodes de dtection spectroscopiques
Dtection photomtrique
En raison de son domaine dapplication trs tendu, la dtection photomtrique ou UV/VIS est le type de
dtection le plus important en HPLC. En effet, presque toutes les molcules organiques possdant des
groupes chromophores, ou pouvant absorber dans le domaine UV ou VIS peuvent tre analyses. La
condition sine qua non est que lluant utilis nabsorbe pas dans le domaine de longueur donde souhait.
Lors dune dtection directe au maximum dabsorption dun analyte, la dtection UV/VIS est quasiment
slective. Les substances qui montrent une faible ou aucune absorption dans le domaine de longueur
donde considr peuvent tre analyses directement, en mesurant dans le domaine dabsorption maxi-
mum du systme dlution. Dans le domaine de lanalyse des ions inorganiques, la dtection UV/VIS joue
un rle moindre. Parmi les anions simples, seuls les analytes tels que nitrate, bromure ou iodure absor-
bent. De plus, les analytes importants tels que fluorure, sulfate ou phosphate ne peuvent tre dtermins
quindirectement [4]. De nombreux cations nabsorbent pas du tout. Plus particulirement les multivalents
et les mtaux de transition peuvent tre transforms laide dune drivation post-colonne avec des
chlates tels que 4-(2-pyridyle azo)-rsorcine (PAR) ou Tiron, pour former des complexes colors. Les
analytes actifs doxydorduction, tels que bromate et autres ions oxohalognures peuvent tre dtermins
par dtection UV/VIS, grce une raction post-colonne avec un indicateur actif lectrochimique.
Dtection par fluorescence

La dtection par fluorescence est trs sensible et toujours possible lorsque les analytes peuvent tre
amens livrer une certaine fluorescence, ce qui est surtout le cas pour les composs organiques avec
des systmes dlectrons tendus. Les applications typiques se situent surtout dans le domaine de
lanalyse organique et clinique. La dtection par fluorescence peut tre utilise en combinaison avec la
chromatographie ionique dans des cas spciaux, car seuls certains ions particuliers tels que Ce3+ sont
accessibles directement. Les ions non fluorescents ne peuvent tre dtects quaprs drivation. Le
dveloppement de systmes dlution pour cette mthode de dtection est difficile, car elle est trs sen-
sible aux interfrences par contamination. De plus le domaine linaire de ce procd est relativement troit
et souvent infrieur deux ordres de grandeur pour des raisons deffets dabsorption propre.
Techniques de couplage
Les techniques de couplage permettent la liaison dun systme chromatographique avec une mthode
danalyse indpendante, souvent avec des procds spectromtriques [3]. Ces procds ont gagn en
intrt ces dernires annes. Alors que les couplages avec la spectromtrie de masse se sont tablis dans
le domaine de la chromatographie en phase gazeuse (GC-MS), le couplage de lHPLC avec la spectromtrie
pose dimportants problmes techniques. Pour lHPLC classique ou lanalyse de composs organiques,
on dispose aujourdhui de couplages avec la spectromtrie de masse (LC-MS), la spectroscopie IR (LC-

FTIR) et la spectromtrie par rsonance magntique nuclaire (LC-NMR) [3]. En chromatographie ionique
(CI), on utilise surtout des dtecteurs de spectromtrie atomique performants. Des exemples tels que
lmission atomique et la spectromtrie de masse coupls avec une torche plasma couple par induction
(IC-ICP-AES, MS) donnent des rsultats exceptionnels grce leur spcificit lmentaire et leur sensibilit.
Cest la raison pour laquelle ces couplages, mme sils restent trs chers lachat, sont mis en application
dans le domaine de lanalyse dultra-traces.
Rfractomtrie
La rfractomtrie diffrentielle est une autre mthode de dtection base sur un procd optique. Ce
dtecteur est galement appel dtecteur RI (en anglais: Refractive Index). Il nest pas du tout spcifique
et peut tre utilis de manire universelle. En effet, la grandeur mesure correspond la diffrence entre
lindice de rfraction de lanalyte et celui de lluant pur. Ce systme de dtection est trs sensible aux
interfrences tant donne la forte dpendance de lindice de rfraction la temprature. Ce procd est
linaire sur trois ordres de grandeur partir du moment o lon considre une temprature constante. Les
ions inorganiques simples possdent un indice de rfraction extrmement faible. Ces derniers ne peuvent
donc tre dtermins quindirectement laide dun luant modifi avec des composs indice de rfraction
lev.
3.6 Les phases stationnaires en chromatographie ionique

Une chromatographie ionique efficace ncessite des matriaux de colonne composs de particules trs
petites, les plus sphriques possibles et possdant des tailles de particules trs homognes. Des diamtres
de particules de 2 10 m sont utiliss. Par ailleurs, la cintique dchange dions doit tre rapide. La
cintique dchange et la taille des particules dfinissent la performance des changeurs dions.
3.6.1 Vue densemble des phases stationnaires courantes

En chromatographie ionique, les matriaux les plus divers de nature organique comme inorganique sont
utilisables. Ils portent tous en surface des groupes fonctionnels capables de jouer le rle dchangeur
dions. Ils peuvent tre classs de la faon suivante [4]:
Rsines polymres modifies organiquement
Gels de silice modifis
Sels inorganiques (par exemple polyphosphates)
Verres
Zolithes
Oxydes mtalliques (par exemple Al2O3)
Drivs de cellulose
En plus de ces phases, il est galement possible dutiliser des systmes trs complexes tels que des
groupes fonctionnels composs dions mtalliques alcalins relis la phase stationnaire par de lther
couronne. En pratique, on rencontre essentiellement des rsines polymres organiques modifies et des
gels de silice. La figure 16 donne une vue densemble des matriaux de sparation utiliss en CI:
Figure 16
Phases stationnaires
utilises couramment
en chromatographie
ionique [4]
Toutes les phases stationnaires peuvent tre diffrencies selon leur domaine dapplication (chromatographie
ionique anionique ou cationique) ou selon la structure de leurs groupes fonctionnels. Initialement, ce sont
les matriaux base de gel de silice qui ont t mis en application en chromatographie ionique. Ils possdent
un excellent pouvoir de sparation et sont mcaniquement extrmement stables, mais ils ne peuvent tre
utiliss quentre pH 2 et 7 du fait de leur labilit chimique.
Ce nest quau dbut des annes 80 que les premiers changeurs ioniques base de polymres organiques
ont fait leur apparition en chromatographie ionique. Ils taient alors synthtiss partir de rsines adsorbantes
disponibles dans le commerce et ensuite modifies. Aujourdhui, on utilise des matriaux soit base de
copolymres polystyrne-divinylbenzne (PS-DVB), soit base de polymres mthacrylates (MMA).
Les deux types de copolymres de base se diffrencient avant tout par leurs polarits. Alors que les
copolymres PS-DVB sont totalement apolaires et reprsentent des phases RP, les polymres MMA sont
en revanche relativement polaires. Cette proprit est essentielle en CI, car les phases de sparation plus
polaires ont tendance provoquer des interactions secondaires (adsorption).
Le principal avantage des rsines polymres organiques est leur trs grande stabilit quel que soit le pH.
Leur efficacit chromatographique est similaire celle des gels de silice. La stabilit mcanique des
phases MMA est cependant relativement faible, ce qui limite la longueur de la colonne ou le dbit maxi-
mum de lluant.
De nos jours, on utilise en chromatographie ionique deux principes de construction de phases stationnaires
diffrents: les changeurs ioniques surface fonctionnelle et les changeurs pelliculaires. Dans les pre-
miers, les groupes fonctionnels sont localiss directement la surface du polymre ou dans les pores,
alors quavec les matriaux pelliculaires, de trs petites particules surface fonctionnelle sont fixes des
particules de tailles suprieures [4]. La liaison peut tre mcanique ou provoque par des interactions
hydrophobes ou lectrostatiques. La figure 17 reprsente la construction schmatique des deux types de
matriaux de colonne ainsi que les changeurs anioniques associs.

Figure 17 Structure dchangeurs danions surface fonctionnelle (a) et pelliculaire avec liaison mcanique (b)
Les matriaux pelliculaires possdent une efficacit chromatographique suprieure. En effet, les chemins
de diffusion sont maintenus relativement courts grce lloignement suprieur des groupes fonctionnels
du matriau de base. Il en rsulte un excellent transfert de masse. La stabilit chimique de ces phases de
sparation est cependant clairement infrieure celle des matriaux de surface fonctionnelle.
3.6.2 Les phases stationnaires en chromatographie danions

Dans le domaine de la chromatographie danions, les groupes fonctionnels sont forms par transforma-
tion dun groupe ancre avec une amine approprie. Il se forme ainsi des ions ammonium fixs sur la
surface polymre. Pour la sparation danions laide de la CI, on utilise pratiquement exclusivement des
groupes fonctionnels base dazote. Ceci sexplique avant tout par leur stabilit chimique exceptionnelle et
le nombre presque illimit de substituants possibles latome dazote.
La gnration de groupes ammonium sur des surfaces polymres est ralise par transformation dune
groupe ancre avec une amine.
Les rsidus alkyles situs sur lazote charg positivement peuvent tre trs varis. Dans le cas le plus
simple, R = H et on obtient un ion ammonium primaire. Mais ce dernier peut tre dproton dans une
gamme de valeur pH suprieure et donc perdre sa charge. Avec ce genre de matriaux, la capacit dchange
est fonction de la valeur pH de lluant, cest la raison pour laquelle ils sont dcrits comme faiblement
basiques. Si on substitue de manire successive les atomes dhydrogne par des groupes alkyles, il se
forme alors tout dabord des groupes ammonium secondaires et tertiaires, qui peuvent galement tre
dprotons. Cest seulement lorsque tous les rsidus R sont des groupes alkyles que la capacit ou la
charge devient indpendante de la valeur pH; on obtient alors des changeurs danions quaternaires fortement
basiques. En ce qui concerne la chromatographie, on essaie de travailler avec une capacit indpendante
de la valeur pH. Cest pourquoi seulement des matriaux compltement alkyls sont utiliss. Lors
dapplications particulires telles que lanalyse des protines ou les techniques de prconcentration, des
matriaux faiblement basiques sont galement utiliss.
Les deux groupes fonctionnels les plus importants en chromatographie danions sont drivs de la
trimthylamine (TMA) et de la dimthylthanolamine (2-dimthylaminothanol, DMEA). En pratique, tous
les matriaux de sparation disponibles dans le commerce utilisent lun de ces groupes. Les groupes TMA
sont souvent appels type I et les groupes DMEA type II dans la littrature. Dautres fonctionnalits prsentant
une relation proche avec les deux groupes dnomms prcdemment, sont reprsentes dans la figure
18:
Figure 18 Vue densemble sur les groupes fonctionnels les plus importants, respectivement utiliss dans le cadre
de ce travail
TMA: trimthylamine (type I) DEMA: dithanolmthylamine
EDMA: thyldimthylamine TEA: trithanolamine
DMEA: dimthylthanolamine (type II)
Les matriaux commercialement disponibles drivent la plupart du temps des types I ou II; cependant, la
structure des groupes fonctionnels est souvent un secret bien gard [4].
3.6.3 Les phases stationnaires en chromatographie de cations

Dans la chromatographie de cations, des matriaux base de gel de silice ainsi que des matriaux base
de polymre sont utiliss. Contrairement la chromatographie danions utilisant la plupart du temps des
luants alcalins, les conditions relatives la chromatographie de cations sont galement compatibles avec
lutilisation des gels de silice.
3.6.4 changeurs de cations base de gel de silice

Avec les changeurs de cations base de gel de silice, on diffrencie les matriaux directement fonctionnels
et ceux qui sont recouverts dun film de polymre.
En ce qui concerne les matriaux directement fonctionnels, la littrature ne cite pratiquement que des
changeurs fortement acides avec groupes dacides sulfoniques [2, 4]. Ces derniers possdent une bonne
efficacit chromatographique, mais ils ne sont pas adapts la dtermination simultane des mtaux
alcalins et alcalino-terreux, cause de leurs grandes diffrences daffinit.
Avec les gels de silice recouverts dun film de polymre, appels phases de Schomburg, la surface sili
cate est occupe par un prpolymre qui sera ensuite immobilis par des liaisons rticules. Grce
une mise en fonction ultrieure, plusieurs types dchangeurs peuvent tre crs. Pour la reprsentation
dchangeurs cationiques faiblement acides, on utilise de lacide polybutadine maline (PBDMA), qui est
ensuite li radicalement in-situ de manire rticule [30]. Grce au film fin polymre denviron 1 5 nm
[31], les chemins de diffusion des analytes sont courts, ce qui a pour consquence une efficacit
chromatographique leve.
Il existe un grand nombre dapplications pour les changeurs ioniques base de gel de silice. La sparation
simultane des mtaux alcalins et alcalino-terreux fait partie des applications les plus importantes, la
sparation des ions mtalliques de transition et les mtaux lourds est galement possible. Lutilisation
universelle des changeurs ioniques base de gel de silice prsentent cependant quelques inconvnients:

Pour des valeurs pH <2, la liaison entre silicium-support de base et groupe fonctionnel est affaiblie de
manire croissante, ce qui conduit une rosion graduelle de la fonctionnalit et par consquent une
perte de capacit.
Pour des valeurs pH >7, la solubilit du gel de silice augmente considrablement, ce qui provoque une
rduction de la stabilit mcanique du matriau, une cassure des particules et cause un volume mort
en dbut de colonne.
3.6.5 changeurs cationiques base de polymres organiques

On utilise surtout des rsines base de copolymres styrne-divinylbenzne comme support de base.
Les restrictions spcifiques aux changeurs base de gel de silice ne sont pas valables dans ce cas. Les
changeurs cationiques base de polymres organiques sont utilisables sur la gamme pH complte entre
0 et 14 et sont inertes vis vis des fluorures. Bien que leur rsistance la pression soit infrieure celle
des gels de silice, elle est en principe correcte, lexception de quelques rsines mthacrylates.
Dans les changeurs cationiques commercialement disponibles, les groupes fonctionnels sont la plupart
du temps base de groupes dacide sulfonique. Ces derniers peuvent tre lis directement ou par
lintermdiaire dun spacer de longueur variable au systme aromatique. Les changeurs base dacide
sulfonique avec des spacers possdent une efficacit chromatographique nettement suprieure; la longueur
du spacer ne joue cependant quun rle secondaire. Cependant, ils ne sont pas adapts pour la dtermination
simultane des mtaux alcalins et alcalino-terreux, cause des diffrences daffinit trs grandes.
3.6.6 changeurs de cations pelliculaires

En plus des rsines directement fonctionnelles, il existe galement des changeurs pelliculaires. Ils possdent
une construction double paisseur, car il nest pas possible de reprsenter une particule substrat
compltement amine. Cest la raison pour laquelle une particule substrat totalement sulfone est tout
dabord recouverte dun film compos de particules latex sulfones. La fixation est ralise par des inter-
actions lectrostatiques et de van der Waals. Le diamtre relativement important des particules substrats
(10...30 m) a pour effet une pression bouchon comparativement faible. Le diamtre faible (20...250 nm)
des particules latex rend possible des chemins de diffusion courts avec des processus dchange rapides;
lefficacit de la colonne de sparation est alors trs leve. Les matriaux pelliculaires prsentent un
inconvnient: ils sont sensibles aux solvants organiques [32] et aux phases mobiles de force ionique
importante, car alors les particules latex sont dplaces.
La dtermination simultane des mtaux alcalins et alcalino-terreux est possible dans le cas o le film
amin est fix de manire covalente. Cependant les diffrences de slectivit entre potassium, magnsium
et calcium sont grandes; ainsi des temps danalyse relativement importants sont ncessaires. Ceci peut
tre expliqu par lutilisation de groupes dacides sulfoniques fortement acides.
3.6.7 Phases stationnaires en chromatographie par exclusion ionique

Le choix des phases stationnaires en IEC est relativement restreint. La formation de la membrane de
Donnan par des groupes fonctionnels dissocis est importante pour le processus de sparation; leur
nombre doit tre relativement lev. De plus, le matriau doit viter si possible toute adsorption des
analytes sur la phase stationnaire. Comme les analytes proviennent essentiellement des groupes des
acides carboxyliques et des sucres, il est souhaitable, dans ce cas, davoir disposition une surface si
possible polaire. Aucune exigence nest pose pratiquement vis vis de la cintique de la raction dchange
ionique, car la sparation est base sur un mcanisme dexclusion. En pratique, on utilise exclusivement
des polymres PS/DVB rticuls transversalement et totalement sulfons.
3.6.8 La signification de la capacit dchangeurs ioniques
ct de la nature du support de base et du type des groupes fonctionnels, la capacit dchange Q est
une grandeur caractristique des changeurs dions. Grce elle, on obtient une information sur le nombre
de places disponibles un change ionique.
La capacit dchange est normalement exprime en gramme de matriau sec, soit en micro-quivalent
(eq/g), soit en micro-mole (mol/g) [2]; dautres units sont galement communment utilises [33].
Pour des raisons analytiques, les changeurs ioniques peuvent tre classs selon leur capacit, on a:
Matriaux de faible capacit: Q < 100 mol/g
Matriaux de capacit moyenne: 100 < Q < 200 mol/g
Matriaux de haute capacit: Q > 200 mol/g
Les phases de sparation utilises dans lchange ionique classique sont avant tout de haute capacit,
avec des capacits variant de 3 5 mmol/g [4].
La dfinition de la capacit faite ci-dessus se base sur une attente dquilibre total entre phase stationnaire
et phase mobile. Cest la raison pour laquelle on la dnomme aussi capacit statique. On appelle capacit
dynamique (effective) le nombre de groupes fonctionnels vraiment disponibles pendant un processus
chromatographique. Elle sera toujours infrieure la capacit statique [2, 4].
La capacit dchange peut tre dtermine de diffrentes faons [33]:
Par volumtrie, titrage
Par analyse lmentaire
Par lintermdiaire de la dtermination des temps de rtention
Tous les procds livreront des valeurs diffrentes pour Q avec le mme matriau. En pratique, on utilise
la plupart du temps la volumtrie. Pour les changeurs anioniques, on charge une colonne de sparation
ou une quantit dfinie de rsine, avec une solution de chlorure par exemple. Aprs rinage des restes de
chlorure, on peut luer avec du nitrate. La quantit de chlorure lue, qui correspond la capacit dchange
statique dans des conditions dquilibre est alors titre avec une solution de AgNO3, puis quantifie.
La dpendance des changeurs danions en fonction du pH peut la plupart du temps tre nglige. Pour
les changeurs cationiques, la capacit des groupes acides carboxyliques (R-COOH) faiblement acides
nest donne que pour des valeurs pH suprieures (dprotonisation), alors que les groupes dacides
sulfoniques (R-SO3H) fortement acides sont dj fortement dprotons et disposent dune capacit
indpendante du pH.
En corrlation avec les modles de rtention (chapitre 3.4), la signification de Q pour le choix des systmes
dlution et des systmes de dtection est devenue trs claire. La dtection conductimtrique universelle
tait pratiquement irralisable avec des luants de force ionique leve, quelle que soit la technique employe.
Cest la raison pour laquelle, depuis lintroduction de la chromatographie ionique en 1975, on utilise
presque exclusivement des colonnes de sparation de faible capacit. Lemploi dchangeurs de forte
capacit en CI na t jusqu prsent dcrit quen corrlation avec des techniques de dtection ntant pas
fortement limites par le systme dlution, telle que par exemple la dtection UV/VIS [2, 4].
Les matriaux de sparation de faible capacit sont particulirement adapts lanalyse dchantillons de
faible force ionique. Cependant, ils atteignent vite leurs limites dans le cas de fortes forces ioniques. En
raison du nombre faible de groupes fonctionnels, on obtient des effets de surcharge et par consquent une
certaine dformation de pic et finalement une diminution dramatique de lefficacit. Dautres problmes se
posent galement lorsque les analytes se trouvent en rapport de concentration trs diffrents, ce qui est
pratiquement toujours le cas dans lanalyse des ultra-traces.

3.7 luants en chromatographie ionique
Comme dans toutes les sparations de chromatographie liquide, la phase mobile en chromatographie
ionique est le paramtre sur lequel il est le plus facile dagir pour influencer une sparation. Par contre, la
colonne de sparation ou le systme de dtection sont la plupart du temps prdfinis.
Le choix dun systme dlution appropri peut tre ralis laide de diffrents critres. En chromatographie
danions, il faut, entre autres, prendre en considration les paramtres suivants [4]:
Compatibilit avec la mthode de dtection
Nature chimique et concentration de lion luant
Valeur pH
Capacit tampon
Teneur en solvant organique (modificateur; en anglais; modifier)
Dans la littrature [2, 4, 5], le principal dbat concerne ladaptation des luants aux techniques dites
mono-colonne ou de suppression. Ceci sera galement dtaill plus bas, notamment la capacit dchange
Q des colonnes de sparation. On donne tout dabord une courte explication des termes technique
mono-colonne et technique par suppression. De mme que dans les chapitres prcdents, les obser-
vations se limitent essentiellement la chromatographie danions.
3.7.1 Chromatographie danions
Technique mono-colonne
Dans la technique mono-colonne, tablie par Gjerde et ses collgues en 1979 dans la chromatographie
ionique [33], la colonne de sparation est directement relie un dtecteur, ce qui correspond la con-
struction classique dun appareillage HPLC. Pour la diffrencier de lautre version de la CI, cette technique
est galement dnomme chromatographie ionique sans suppression chimique. Lluant quittant la
colonne de sparation et les analytes contenus lintrieur ne sont chimiquement pas modifis. Le nombre
de systmes dlution est dans ce cas pratiquement illimit. Outre les problmes propres la sparation,
il faut veiller ce que les luants soient compatibles avec le dtecteur. Par exemple, lorsque la dtection UV
directe doit tre utilise, lluant ne doit pas absorber dans le domaine spectral considr. Lorsque la
technique mono-colonne est employe; tous les dtecteurs standards de lHPLC peuvent en principe tre
utiliss.
Pour les changeurs anioniques de faible capacit (Q < 100 mol/colonne de sparation), un grand
nombre dluants avec des proprits trs diverses peuvent tre utiliss avec la technique mono-colonne.
La concentration de lluant se situe normalement dans une gamme de lordre du mmol/kg ou mme
infrieure. On peut employer entre autres, les classes de substances nommes ci-dessous [4]. Dans
certains cas particuliers, il est galement possible de mettre en application des agents complexants tels
que lEDTA ou les complexes borate-mannitol.
Acides carboxyliques aromatiques
Acides carboxyliques aliphatiques
Acides sulfoniques
Hydroxydes alcalins
Acides inorganiques tels que H2SO4, HCl ou H3PO4
Les composs les plus employs sont les acides carboxyliques aromatiques et leurs sels. Ceux qui sont
le plus frquemment utiliss sont reprsents dans la figure 19.
Figure 19 Structures des acides carboxyliques les plus importants pour une utilisation avec la technique mono-
colonne
Cette classe de substance est utilise trs souvent, car les solutions de leurs acides ou de leurs sels
possdent une force dlution importante, mais une conductivit propre relative faible. Ils peuvent ainsi
tre directement utiliss pour une dtection conductimtrique. Pour les acides multiples, il est possible de
contrler la charge et ainsi le pouvoir dlution par lintermdiaire de la valeur pH. Cette dernire doit
cependant tre strictement respecte. Les acides carboxyliques aromatiques possdent une forte absorp-
tion dans le domaine UV et peuvent tre utiliss de manire avantageuse en dtection UV/VIS indirecte.
Les mmes informations sont valables pour les acides sulfoniques aromatiques, tels que lacide sulfonique
p-tolune. Mais ces derniers se trouvent toujours sous forme dprotone et ne possdent donc pas de
capacit tampon. Leur pouvoir dlution ne peut tre contrl que par lintermdiaire de leur concentration.
Les acides carboxyliques aliphatiques tels que lacide oxalique et lacide citrique possdent une forte
conductivit propre, mais sont transparents aux UV. Ils peuvent donc tre utiliss avec la dtection UV/VIS
directe. Cest galement le cas des acides sulfoniques aliphatiques; lacide mthane sulfonique est celui
qui est utilis le plus couramment. Les homologues suprieurs des deux classes de composs rendent
possible lutilisation de la dtection conductimtrique directe, cause de leurs longues chanes de carbone
et par consquent de leur faible conductivit quivalente [2, 4].
Les hydroxydes alcalins ne peuvent tre utiliss que de faon limite dans la technique mono-colonne car
lion OH possde une trs faible affinit avec les groupes ammonium quaternaires. Cest la raison pour
laquelle, mme lors de faibles capacits, il est ncessaire davoir des concentrations dluant leves de
faon pouvoir utiliser la dtection conductimtrique indirecte. En revanche, il est possible demployer la
dtection UV/VIS directe, bien que lion hydroxyde normalement transparent dans le domaine UV montre
une absorption dans le domaine infrieur 220 nm lorsquil est concentr.
Lors de lutilisation dacides inorganiques ou de leurs sels, la dtection photomtrique est ncessaire. En
effet, leur dissociation quasi-totale leur confre une forte conductivit. Lors de lemploi dacide phosphorique
ou de phosphate, il est possible de contrler la capacit tampon et le pouvoir dlution grce la valeur pH
de lluant.
La plupart des luants cits ici peuvent tre galement employs avec dautres systmes de dtection tels
que lampromtrie, la fluorimtrie ou les techniques de couplage. Pour lutilisation des systmes dlution
cits avec les dtecteurs ci-dessus, veuillez vous rfrer la littrature plus dtaille [2, 4, 5].

Technique par suppression
La technique par suppression tait la technique originale de dtection lors de lintroduction de la CI [1].
Contrairement la technique mono-colonne, cette mthode utilise exclusivement la dtection
conductimtrique. Dans la technique par suppression, on place entre la colonne de sparation et le dtecteur
un module appel suppresseur. Cest la raison pour laquelle cette mthode est galement dnomme
chromatographie ionique avec suppression chimique [2, 4]. Dans le suppresseur, lluant et les analytes
sont modifis chimiquement de faon amliorer notablement la sensibilit de la dtection conductimtrique.
Le rle du suppresseur est de rduire la conductivit propre de lluant et si possible daugmenter la
sensibilit de la dtection des analytes.
Le principe de la suppression chimique est reprsent dans les quations 63 et 64, pour une application
de la chromatographie anionique. Lluant est base de NaHCO3 et lanalyte est lion chlorure. La suppres-
sion a lieu avec un changeur cationique fortement acide de forme H+.
R-SO3 H+ + Na+ + HCO3 R-SO3 Na+ + H2O + CO2 (63)
R-SO H + Na + Cl
3
+ +
R-SO Na + H + Cl
3
+ +
(64)
Lunit de suppression est compose, dans le cas le plus simple, dune colonne connecte aprs la
colonne de sparation, ce qui explique lancienne dnomination technique double colonne. Lluant
base dhydrognocarbonate de sodium est neutralis conformment lquation 63, car les ions sodium
sont remplacs par des protons. De cette manire, la conductivit propre de lluant est considrablement
rduite. Lanalyte Cl nest lui-mme pas transform (quation 64), cependant son ion oppos Na+ est
chang contre H+, qui possde une conductivit quivalente nettement suprieure [19]. Comme le signal
du dtecteur tient compte de la somme des conductivits des ions analytes et ions opposs, les deux
ractions permettent un gain de sensibilit remarquable.
Les colonnes avec changeurs cationiques sous forme H+ utilises initialement comme suppresseurs
taient clairement responsables dun certain largissement de pic (peak broadening) cause de leur
volume mort lev. En outre, elles ne pouvaient tre utilises que de faon discontinue, car lchangeur
cationique avait besoin dtre rgnr priodiquement. Par contre, les modernes suppresseurs lit fixe tel
que le Module de Suppression Metrohm (MSM) offrent une performance excellente et permettent un
travail quasi-continu. On utilise aussi des suppresseurs membrane travaillant de faon continue. Leur
solution rgnrante est normalement base dacide sulfurique dilue et circule dans le sens contraire de
lluant [6]. Cependant, compars aux suppresseurs lit fixe, les suppresseurs membrane sont plus
sensibles aux interfrences et moins rsistants la pression et aux solvants organiques.
La technique par suppression possde cependant quelques inconvnients importants. En pratique, en
chromatographie danions, seuls les luants base dhydroxydes alcalins et de carbonates peuvent tre
utiliss en suppression chimique avec succs. Les anions dacides faibles, tels que lactate ou le fluorure,
se trouvent sous forme protone aprs la raction de suppression. Ils sont donc dtects de faon plus
sensible avec la mthode danalyse mono-colonne. Les cations de charge leve doivent tre limins avant
lanalyse, car ils forment des hydroxydes trs difficilement solubles, qui prcipitent sur la colonne de sparation.
Comme il apparat dj clairement, la technique par suppression implique la suppression chimique de
lluant et lutilisation de la dtection conductimtrique directe [2, 4]. Cette technique est utilise couramment
en chromatographie danions car, dans de nombreux cas, elle est plus sensible que la dtection conduc-
timtrique directe. La conductivit propre des luants classiques pour la technique mono-colonne (par
exemple: 2 mmol/L phtalate, pH = 8) est de lordre de 200 S/cm. La conductivit des luants utilisables
pour la suppression chimique est de lordre de 12 16 S/cm.
La suppression chimique nest possible que pour quelques luants seulement. Ces derniers sont des
solutions base de [4]
Hydroxydes alcalins
Carbonates alcalins et hydrognocarbonates
Borates (par exemple B4O72)
Acides amins
En pratique, parmi les luants cits ci-dessus, seules les solutions base dhydroxyde alcalin et base de
tampon carbonate jouent un rle important, ce qui signifie que le choix des phases mobiles potentielles est
relativement restreint.
Lion hydroxyde est un ion luant extrmement faible, ce qui signifie que mme avec des matriaux de
sparation de faible capacit, on doit travailler dj avec de fortes concentrations, suprieures 50 mmol/L.
Lors de lutilisation de groupes fonctionnels trs polaires, il est possible daugmenter le pouvoir dlution
relatif de lion OH en utilisant la slectivit hydroxyde. Une modification des temps de rtention ou de la
slectivit ne peut alors tre obtenue que par une variation de la concentration de lluant.
Lutilisation de carbonates alcalins et dhydrognocarbonates alcalins permet une flexibilit bien suprieure.
Les deux espces HCO3 et CO32 se trouvent aprs suppression sous forme dacide carbonique H2CO3,
qui nest dissoci quen trs faible partie. Lhydrognocarbonate a un pouvoir dlution mme plus faible
que lhydroxyde, alors que le carbonate reprsente un luant relativement fort. Les deux anions sont
normalement utiliss ensemble et procurent lluant un pouvoir tampon qui peut tre contrl aisment
par les concentrations des deux composs et par leur rapport. En raison des charges des espces de
lluant, les slectivits pour les analytes mono- et multivalents peuvent tre modifies ponctuellement. Le
rapport en concentration des deux ions luants peut tre rgl trs exactement par lintermdiaire de la
valeur pH; cest la raison pour laquelle le domaine pH utilis pour les luants HCO3/CO32 se situe entre 8
et 11. Comme pour les luants OH, il est possible dacclrer llution en utilisant des phases stationnaires
possdant diffrents types de groupes fonctionnels.
Les deux systmes dlution ne peuvent tre utiliss avec succs avec des changeurs anioniques
surface fonctionnalise que lorsque que le support de base (copolymre mthacrylate) ou les groupes
fonctionnels possdent une forte polarit. Avec les colonnes de sparation bases sur PS-DVB, on ob-
serve pour les analytes (nitrate, bromure) une trs mauvaise symtrie de pic et des temps de rtention trs
longs, mme lors de lutilisation de groupements fonctionnels polaires. Avec les matriaux pelliculaires,
ces effets ninterviennent de faon pas aussi marquante, ce qui explique leur emploi courant dans la
technique par suppression [2, 4].
3.7.2 Chromatographie de cations
3.7.2.1 Chromatographie dions alcalins, alcalino-terreux et ammonium avec dtection

conductimtrique
Lluant le plus couramment employ pour la sparation chromatographique dions alcalins mtalliques et
ammonium ainsi que pour les amines aliphatiques de courte chane sur phases de sparation sulfones
est constitu dacides minraux tels que HCl ou HNO3 [4]. La concentration de lluant est fonction du type
et de la capacit de lchangeur cationique et se situe autour de quelques mmol/L. Les cations divalents
tels que les mtaux alcalino-terreux ne peuvent pas tre lus par des acides minraux, car ils possdent
une affinit trop forte pour la phase stationnaire. Une forte augmentation de la concentration acide impliquerait
une forte conductivit de base, ce qui rendrait la dtection trop peu sensible. La suppression devient alors
inefficace. Pour sparer les ions mtalliques alcalino-terreux, il est galement possible dutiliser des bases

organiques telles que lthylne diamine. A des faibles valeurs de pH, celle-ci est protone et se trouve
sous la forme dun cation divalent.
Lacide chlorhydrique et lacide 2,3-diaminopropionique sont la base des luants classiquement utiliss
pour lanalyse simultane des cations mtalliques alcalins et alcalino-terreux sur un changeur cationique
fortement acide [2]. Il est possible de faire voluer le degr de protonation des groupes amino et par
consquent le pouvoir dlution de lacide 2,3-diaminopropionique en faisant varier le pH (voir section
Modle de rtention pour luants avec un cation, chapitre 3.4.2).
Dans le cas dune analyse sans suppression chimique, des acides minraux ainsi que des acides organiques
faibles tels que lacide oxalique, lacide citrique ou lacide tartrique peuvent tre utiliss comme luants.
Par ailleurs, des agents complexants tels que lacide 2,6-pyridine dicarbonique (PDCA) et lther couronne
18-couronne-6 influencent les temps danalyse de certains cations de manire slective.
Il existe deux types de dtection conductimtrique. La dtection conductimtrique directe est adapte dans
le cas o la conductivit de base de lluant est leve (par exemple avec les acides minraux dilus, H+
ayant une trs forte conductivit spcifique). Les analytes doivent alors avoir une conductivit infrieure
celle de lluant; on obtient donc des pics ngatifs. Un chromatogramme standard est ensuite obtenu par
lintermdiaire dun inversement de polarit du dtecteur ou laide dune simple inversion. Lorsque la
qualit du dtecteur de conductivit ne permet pas une mesure de conductivit particulirement sensible,
une alternative est de travailler en chromatographie de cations avec suppression. La construction de
suppresseurs pour la chromatographie de cations est cependant bien plus difficile que pour la chroma-
tographie danions et leur dure de vie est nettement infrieure.
3.7.2.2 Chromatographie des ions mtalliques de transition et alcalino-terreux avec drivation post-
colonne et dtection photomtrique
Pour la sparation dions mtalliques de transition et des mtaux lourds, les cations monovalents H+ ou
Na+ ne sont pas des luants satisfaisants. En effet, la diffrence entre le coefficient de slectivit des
analytes et des cations luants, pour une charge identique, est trop faible. La sparation peut cependant
tre ralise par lintermdiaire dun quilibre secondaire. Pour ce faire, on utilise des luants acides
carboxyliques complexants (voir figure 20), tels que lacide citrique, lacide oxalique et lacide tartrique.
Ces derniers forment des complexes neutres ou anioniques avec les ions mtalliques (voir chapitre 3.4).
Figure 20 Diffrents acides carboxyliques en tant quluant en chromatographie de cations
La densit de charge effective des analytes est rduite en raison de la complexation des ions mtalliques.
En outre, la slectivit de la sparation peut tre rgule grce aux diffrentes constantes de complexation.
Le mcanisme dlution rsulte de lexpulsion isoionique par le contre-ion (effet pushing) et de la forma-
tion de complexes (effet pulling) par les ligands complexants [4].
Les quilibres participant au mcanisme dlution entre lanalyte Me2+, lagent complexant L2 et le contre-
ion E+ sont reprsents de faon schmatique dans la figure 21.
Figure 21
Reprsentation schmatique des
quilibres participant au
processus dchange [4]
Limportance de lexpulsion ionique provoque par les contre-ions E+ dpend de laffinit des cations pour
la phase stationnaire. Avec les contre-ions monovalents, le cation possdant la plus grande affinit pour la
phase stationnaire a un effet luant suprieur. Laction de lagent complexant varie en fonction du pH et de
la concentration de lluant. De plus, il est possible dinfluencer le pouvoir dlution en utilisant plusieurs
agents complexants, ainsi quen mettant en application un contre-ion divalent.
Contrairement aux alcalins et alcalino-terreux, les mtaux de transition et les mtaux lourds ne peuvent tre
dtermins que par mesure de conductivit directe, sans suppression. En effet, ces mtaux sont transforms
la plupart du temps en hydroxydes insolubles lors de la raction de suppression. De plus, la dtection
conductimtrique directe nest applicable que lorsque des changeurs basse capacit et des luants de
faible conductivit de base sont utiliss.
On utilise donc prfrentiellement la drivation post-colonne de ces ions mtalliques de transition et les
mtaux lourds afin de les transformer en complexes mtalliques colors dtectables par photomtrie. Pour
ce faire, un ractif mtallochrome est ajout lluant dans un racteur post-colonne. Divers pigments azo
peuvent tre utiliss [2, 4] et ragir avec un grand nombre de cations mtalliques: les lanthanides ragissent
avec 4-(2-pyridyleazo)-rsorcine (PAR) (figure 22) pour former des complexes colors. Les lanthanides et
les actinides peuvent tre dtects avec lacide 2,7-bis(2-arsenophnyle azo)-1,8-dihydroxynaphthalne-
3,6-disulfonique (arsenique azo III). Lacide pyrocatchol-3,5-disulfonique (Tiron) est utilisable pour la
drivation post-colonne de laluminium.
Figure 22 Structure de lindicateur de mtaux PAR

Pour la dtection des mtaux de transition et des mtaux lourds, on utilise surtout le ractif de PAR. Celui-
ci forme avec les espces Fe, Co, Ni, Cu, Zn, Mn, Pb et Cd des complexes colors qui absorbent des
longueurs donde allant de 490 520 nm avec des coefficients dabsorption allant jusqu 104 L mol1
cm1. La sensibilit de ce procd est base sur le fait que les coefficients dextinction des complexes
mtal-PAR sont levs par rapport au coefficient dabsorption du ractif la longueur donde employe.
3.7.2.3 Chromatographie par exclusion ionique (IEC)

Le choix du milieu dlution en IEC est, de mme que le choix du matriau, assez restreint (de leau pure
jusquaux acides minraux dilus). Afin de faire le choix du systme le mieux adapt, il faut prendre en
considration le mode de dtection. Les mthodes de dtection les plus courants sont la dtection
photomtrique et la conductivit. Dans le cas de la photomtrie, on utilise souvent de lacide sulfurique ou
de lacide perchlorique dilu car ils sont transparents en UV. En dtection conductimtrique, lacide sulfurique
dilu est lluant le plus adapt, car il permet dobtenir des chromatogrammes clairs avec un minimum
dappareillage (un suppresseur nest pas ncessaire). Dans le cas dune utilisation avec un suppresseur,
il est possible dutiliser un luant dacide chlorhydrique dilu.
Le pH de lluant (sa concentration) dtermine le degr de dissociation des analytes et ainsi leur rtention.
En principe une augmentation de la concentration en acide induit une diminution des temps de rtention.
La forme de pic est galement influence par la concentration de lluant. Pour les acides organiques, leau
pure ne constitue pas un luant satisfaisant car elle accentue les phnomnes dadsorption. En revanche,
leau fournit dexcellents rsultats pour lanalyse du carbonate et de lacide borique.
4 Partie pratique
Dans la partie pratique de cette monographie sont prsentes des expriences qui permettent une intro-
duction dtaille dans le monde de la chromatographie ionique. Dans un premier temps, le chapitre 4.2
comprend des expriences permettant dapprhender concrtement la thorie de la chromatographie ioni-
que. Une deuxime partie (chapitre 4.3) est relative la dtermination des anions. Enfin, la dernire partie
(chapitre 4.4) traite des cations organiques et inorganiques.
Les expriences peuvent en principe tre ralises sur tous les chromatographes ioniques. Lappareil doit
cependant remplir certains critres:
Pompe double piston faibles pulsations rsiduelles, travaillant si possible sans alimentation externe
dazote ou dhlium
Rglage de dbit correspondant aux exigences de la colonne
Vanne dinjection lectrique
Possibilits de connexion de diverses boucles dchantillonnage et colonne de prconcentration
Chromatographie ionique avec et sans suppression chimique
Dtecteur de conductivit temprature stabilise, si possible suprieure 0,01 C
Botier isol thermiquement et lectroniquement
Utilisation anionique et cationique
Contrle par logiciel recommand
Tous les systmes CI Metrohm, quils soient compacts ou modulables, remplissent videmment ces
exigences. Le Basic IC 792 a t cependant plus spcialement conu pour
lenseignement et est pour cette raison particulirement recommand
dans les expriences dcrites ci-dessous.
Figure 23 Le Metrohm Basic IC 792: spcialement conu pour

la recherche et lenseignement
4.1 Conseils relatifs aux travaux pratiques

Analyses de cations
Dans toutes les analyses effectues, les chantillons doivent tre acidifis (pH 2,5...3,5), avec de lacide
nitrique (environ 100 L 2 mol/L HNO3 pour 100 mL dchantillon) afin dobtenir une parfaite reproducti-
bilit pour les cations divalents.

Arrt de lappareil
Si lon ne travaille pas avec le chromatographe ionique pendant une priode de temps prolonge (>1
semaine), il est alors recommand de dmonter la colonne de sparation et de rincer le chromatographe
ionique avec une solution mthanol/eau (1:4). Il faut faire attention ce que les trois units du suppresseur
soient rinces correctement.
Choix de colonne
La plupart des expriences prsentes ici ont t ralises sur des colonnes peu onreuses Metrosep
Dual 1 pour les anions et Metrosep C2 pour les cations. Ces colonnes permettent dobtenir une sparation
tout fait suffisante pour toutes les expriences dcrites. Naturellement la gamme de produits Metrosep
comporte dautres colonnes de sparation, bien plus performantes, mais galement plus onreuses.
Conseils de scurit
Pour la ralisation de toutes les expriences, il est fortement conseill de porter des lunettes de protection,
une blouse de laboratoire et si ncessaire des gants de protection galement. Les recommandations
relatives aux produits chimiques doivent absolument tre observes (phrases R/S).
Croissance bactriologique
Afin dempcher tout dveloppement bactrien, il est recommand de prparer toujours frachement les
luants, les solutions de rinage et de rgnration et de ne pas les utiliser sur une priode de temps
prolonge. Si malgr tout des bactries ou des algues prolifraient, il est alors possible dajouter 5% de
mthanol ou dactone lluant. Ceci nest pas possible lorsque des suppresseurs membranes sont
mis en application, car ces derniers sont dtruits par les solvants organiques. Par contre, le module de
suppression Metrohm MSM rsiste 100% aux solvants.
Dgazage des luants

Afin dviter toute formation de bulles dair, il est recommand de dgazer leau utilise pour la fabrication
des luants avant laddition des produits chimiques. Pour ce faire, on peut soit employer une trompe eau,
soit une pompe vide huile, soit un bain ultrasons pendant dix minutes environ.
Protection de lenvironnement
En chromatographie ionique, on travaille avant tout avec des milieux aqueux. Les ractifs chimiques em-
ploys en chromatographie ionique ne sont donc pas toxiques et ne polluent pas lenvironnement. Il est
cependant important de remarquer que lorsque lon travaille avec des acides, bases et solvants organi-
ques ou des standards base de mtaux lourds, ces derniers doivent tre recycls convenablement aprs
utilisation.
Qualit de leau
La qualit de leau a une influence directe sur la qualit des rsultats chromatographiques. Une moindre
qualit de leau risque dendommager lappareillage et les colonnes de sparation. Leau dminralise
utilise devrait avoir une rsistivit suprieure 18 MOhm cm et tre libre de particules. Cest la raison
pour laquelle il est vivement conseill de la filtrer 0,45 m.
Qualit des ractifs chimiques
Tous les ractifs chimiques doivent au moins tre de qualit p.a. (qualit analytique) ou puriss. (extrapure).
Les standards doivent tre spcialement adapts la chromatographie ionique (sels de sodium mis en
solution dans leau).
Sources de contamination
Tous les chantillons ainsi que les solutions de rgnration, leau et les luants doivent tre libres de
particules qui peuvent boucher la colonne de sparation. Ceci est conseill particulirement lors de la
fabrication des luants, car ces derniers traversent la colonne de manire continue (de 500 jusqu 1000
mL par journe de travail, comparativement environ 0,5 mL de solution chantillon).
Stockage des colonnes de sparation

Colonne CI pour anions Metrosep Anion Dual 1 (6.1006.020)
La cartouche colonne est stocke dans son support ferm pour une courte priode (quelques jours). Pour
une priode prolonge (semaines), il est conseill de stocker la colonne dans le rcipient de conservation
livr cet effet dans une solution actone/eau (1:9), labri de la lumire.
Figure 24 Colonne CI pour anions Metrosep Anion Dual

1 (6.1006.020) avec support de colonne
Colonne CI pour anions Metrosep A SUPP 5 (6.1006.530)

La colonne est conserve dans lluant.
Colonne CI pour cations Metrosep C2 (6.1010.210)
La colonne est conserve dans lluant, au rfrigrateur (4 C). Il faut absolument faire attention ce que
la colonne ne se dessche pas.
Figure 25 Colonne CI pour cations Metrosep C2

(6.1010.210)

Colonne CI pour cations Nucleosil 5SA (6.1007.000)
La colonne est conserve dans lluant pour de courtes priodes (jours), et dans mthanol/eau (1:4) pour
des priodes prolonges (semaines).
Colonne CI Metrosep Organic Acids (6.1005.200)
La colonne est conserve dans lluant pour de courtes priodes (jours) et dans de leau dminralise
pour des priodes prolonges (semaines).
Colonnes de sparation dautres fabricants
Prendre en considration les donnes du fabricant.
4.2 Expriences relatives la thorie de la chromatographie ionique

4.2.1 Exprience 1 Chromatographie ionique avec et sans suppression chimique
La conductivit quivalente est gale la somme des conductivits quivalentes de tous les anions et
cations prsents dans la solution:
= + +
De manire gnrale, la conductivit augmente avec la concentration en lectrolyte ou en ions. La relation
concentration-conductivit nest linaire que pour les solutions dilues, car est dpendant de la concen-
tration (loi de Kohlrausch). Les valeurs dans le tableau (comparer avec la section Dtection
conductimtrique) sont valables pour conductivit quivalente dans des solutions dilues linfini.
La conductivit quivalente dpend de la temprature 2% / C). Les effets de temprature sont particu-
lirement prsents lorsque lon travaille sans suppression chimique, la conductivit de base tant alors
leve. Cest pour cette raison que le dtecteur doit tre thermostat 0,01 C prs.
En chromatographie ionique sans suppression chimique, la conductivit de base est supprime de ma-
nire lectronique uniquement. Cest pourquoi il est prfrable dutiliser des luants de conductivit aussi
faible que possible. Les sels dacides faibles tels que lacide phtalique, lacide salicylique et lacide benzo-
que sont souvent utiliss. La valeur de mesure dtermine sans suppression chimique est dpendante de
la diffrence des conductivits quivalentes entre ion chantillon et ion luant.
~(P E)
Des pics ngatifs font toujours leur apparition lorsque la conductivit de lion chantillon est infrieure
celle de lion luant. Un exemple: lion phosphate. pH = 5, il se trouve principalement sous la forme
H2PO4. Comme la conductivit quivalente de H2PO4 avec 33 S*cm2/mol est infrieure la conduc-
tivit quivalente du phtalate avec 38 S*cm2/mol, on obtient un petit pic ngatif. Une valeur pH plus leve,
o le phosphate se trouve sous la forme HPO42 et possdant une conductivit quivalente de 57 S*cm2/
mol donne en revanche un pic positif.
La chromatographie ionique avec suppression chimique signifie que la conductivit de base est supprime
chimiquement. Un luant de forte conductivit est transform dans une raction post-colonne la raction
de suppression en un luant de conductivit infrieure.
Les luants utiliss dans ce cas sont des sels dacides faibles tels que HCO3, CO32 et BO33. Dans le
suppresseur, tous les cations contenus dans lluant et lchantillon sont changs contre des ions H+.
Conformment la raction suivante, ils forment alors partir de lluant des acides faiblement dissocis:
Na+ + HCO3 +H+ Na+ H2CO3
Lacide carbonique produit par cette raction se trouve surtout sous forme de CO2 + H2O. Cest la raison
pour laquelle la conductivit restante est trs faible. De la mme faon, les contre-ions des anions
dterminer sont changs contre des ions H+ dans le suppresseur. On peut donc formuler lquation
suivante:
+H Na
+ +
Na + Cl
+
H + Cl
+
Au lieu de mesurer la conductivit initiale des ions Na+ et Cl contenus dans lchantillon, on mesure la
conductivit quivalente bien plus leve de H+ et Cl , qui plus est avec une conductivit de base inf-
rieure. Thoriquement, on peut attendre un signal 10 fois plus grand que lors dune simple suppression
lectronique. En pratique cependant, on observe une augmentation de sensibilit dun facteur variant entre
2 et 4.
Contrairement la linarit obtenue sans suppression chimique, la suppression chimique amne une non-
linarit de la courbe de calibrage. Le domaine de linarit est donc plus restreint si lon travaille avec
suppression chimique (entre 1/20 et 1/50 environ).
Contenu apprendre
Construction de principe dun systme CI
Diffrences entre un travail avec ou sans suppression chimique
Dtermination des diffrentes sensibilits de ces deux mthodes
Exprience 1a Mesure sans suppression chimique

Tableau 3 Paramtres exprience 1a
Colonne 6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)

luant 8 mmol/L acide phtalique, 2% actonitrile; pH = 4.1 (TRIS)
Conductivit environ 400 S/cm
chantillon Standard (fluorure, chlorure, nitrite, bromure, nitrate, phosphate, sulfate)
Mthode exp_01_n.mtw
Systme anonsupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Dure danalyse 20 min
Boucle dchantillonnage 100 L
Polarit +
Fabrication de lluant
Mettre en solution 1,33 g dacide phtalique dans 20 mL dactonitrile et un peu deau, puis complter 1
L. Ajuster la valeur pH 4,1 par addition denviron 1 g de TRIS (solide). Dgazer leau utilise avant toute
addition de produits chimiques pendant 10 minutes laide dune trompe eau ou dun bain ultrasons.

Chromatogramme 1 Solution standard sans suppression chimique
Tableau 4 Composs Exprience 1a
Pic Composs tR [min] Conc. [mg/L] Nbre plateaux Surface [S/cm*s]

1 Fluorure 3.6 5 2310 51
2 Chlorure 4.9 5 3680 71
3 Nitrite 5.7 5 3670 36
4 Bromure 6.7 10 3960 63
5 Nitrate 7.8 10 3890 74
6 Sulfate 10.9 10 3430 88
Pic systme 17
Exprience 1b Mesure avec suppression chimique

Tableau 5 Paramtres Exprience 1b

luant 2.4 mmol/L NaHCO3 / 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% actone
Conductivit aprs suppression chimique, environ 16 S/cm
Mthode exp_01_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Suppresseur Milieu de rgnration: 50 mmol/L H2SO4, eau ultrapure
Autostep avec Fill
Polarit +
Mettre en solution 265 mg de carbonate de sodium (anhydride) et 201,5 mg dhydrognocarbonate de
sodium dans 980 mL deau ultrapure. Ajouter ensuite 20 mL dactone.
Chromatogramme 2 Solution standard avec suppression chimique
Tableau 6 Composs Exprience 1b

1 Fluorure 3.8 2 2780 48
2 Chlorure 5.7 5 4100 81
Pic systme 6.8
3 Nitrite 7.3 5 3900 46
4 Bromure 8.6 10 4510 69
5 Nitrate 10.4 10 4480 87
6 Phosphate 11.7 10 3220 43
7 Sulfate 14.4 10 3660 113
Remarques
Le pic systme est ici bien moins important que dans lexprience 1a, chromatogramme 1, et peut tre
observ seulement lorsquune chelle de conductivit trs sensible est utilise.

4.2.2 Exprience 2 Capacit des colonnes de sparation
Des pics coups, des pics en forme de nageoires de requin, des temps de rtention non reproductibles,
des pics montrant du tailing ou du fronting tous ces problmes peuvent avoir la mme cause: une
surcharge de la colonne.
Chaque colonne possde un nombre dtermin de sites dchange. Avant que lchantillon ne soit inject,
ces derniers sont compltement occups par les ions de lluant. Lchange ionique commence lorsque
lchantillon est introduit: les ions luants sont changs contre des ions chantillons et les ions chan-
tillons contre les ions luants. Comme les espces ioniques se diffrencient par leurs constantes de
liaison, elles luent et quittent la colonne des vitesses diffrentes. Le rsultat souhait est une sparation
dun mlange de substances et lobtention dun chromatogramme.
Ce procd fonctionne sans problme uniquement lorsque le nombre de sites dchange est bien plus
grand que le nombre de sites de liaison requis par lchantillon. Ainsi, par exemple, une colonne possdant
une capacit de 1 meq (milli quivalent) peut lier au maximum 1 mmol dions monovalents.
Un deuxime effet pouvant dtriorer la sparation vient du fait que chaque ion est en principe en mesure
dagir comme un ion luant. loccasion dune surcharge de colonne, un trop grand nombre dions
luants sont remplacs par des ions chantillons. Un nombre incalculable de changements dquilibre de
la colonne a alors lieu et la sparation se dtriore.
La capacit dune colonne se dtermine en la chargeant compltement avec des ions chlorure. Aprs une
tape de rinage avec de leau dminralise, les ions chlorure sont lus avec un luant base de
carbonate, puis quantifis laide de la chromatographie ionique ou dun titrage argentomtrique.
Dans lexprience suivante, la concentration en chlorure est augmente jusqu ce que la colonne soit
surcharge. Certains effets allant de paire avec la surcharge de la colonne sont dcrits ci-dessous:
les temps de rtention des ions suivants deviennent plus courts,
le pic de lion dominant est coup,
le pic de lion dominant possde un tailing,
le nombre de plateaux thoriques theoretical plate count (TP) devient plus petit,
le rapport surface/hauteur (Area/Height) devient de moins en moins bon ( surface constante, la
hauteur de pic diminue) et
la symtrie de pic se dtriore.
La symtrie de pic se dtriore galement lorsque le filtre lentre de la colonne est bouch, lors de
volumes morts levs provoqus par des phnomnes dabsorption sur le matriau de la colonne.
Contenu apprendre
Expliquer les paramtres chromatographiques: temps de rtention, rsolution, surface, nombre de
plateaux, symtrie et rapport surface/hauteur
Influence dun des composs principaux dominants sur les composs de concentration bien plus
infrieure: variation des paramtres cits ci-dessus
Tableau 7 Paramtres Exprience 2

+ NaCl (pese environ 1 g)
Mthode exp_02_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Autostep avec Fill
Polarit +
sodium dans 980 mL deau ultrapure et ajouter ensuite 20 mL dactone.
Chromatogramme 3 Solution standard avec forte concentration en chlorure

Chromatogramme 4 Solution standard avec forte concentration en chlorure; extrait du chromatogramme 3
agrandi
Remarques
Le chlorure de sodium est pes. Les temps de rtention des pics ainsi que les nombres de plateaux
thoriques et la surface peuvent varier selon la quantit de NaCl pese.
Le trs grand pic de chlorure perturbe lvaluation des pics suivants. Une identification correcte de chaque
pic nest possible que lorsque la solution chantillon est dope avec lanion dterminer.
4.2.3 Exprience 3 Slectivit des colonnes de sparation
Si on reprsente la force de lluant en fonction du logarithme du temps de rtention des ions monovalents
et divalents, on obtient alors une droite. La pente de cette droite est plus importante pour les ions divalents
que pour les ions monovalents. Laugmentation de la force luante a ainsi une influence plus importante
sur le temps de rtention des ions divalents que sur celui des ions monovalents.
Cet effet peut tre observ avec lion sulfate. Llution de lion sulfate est plus acclre que celle des ions
monovalents lors dune augmentation de concentration de lluant.
De manire gnrale, les ions luants divalents possdent une plus grande force dlution que les mono-
valents car ils peuvent former deux liaisons avec la phase stationnaire et donc entrer plus fortement en
interaction avec elle.
Lhydroxyde de sodium est plus basique que le mlange carbonate/hydrognocarbonate concentration
gale. Comparativement celle du carbonate, la force dlution de lion OH est infrieure parce que lion
hydroxyde prsente une interaction moindre avec la phase stationnaire.
Le temps de rtention de lion phosphate est fortement dpendant de la valeur pH. pH lev, lquilibre
se dplace de HPO42 vers PO43. Si lon ajoute de lhydroxyde de sodium un luant base de carbonate
de sodium, le temps de rtention du phosphate est plus long, alors que les temps de rtention de tous les
autres ions sont plus courts.
Contenu apprendre
Comparaison dluants avec des anions monovalents et divalents
Comparaison des luants base dhydroxyde de sodium et de carbonate/hydrognocarbonate
Influence de la valeur pH de lluant sur la rtention du phosphate
Tableau 8 Paramtres Expriences 3a jusqu 3d
luant a) 2.5 mmol/L Na2CO3 / 2.4 mmol/L NaHCO3
b) 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaHCO3
c) 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaOH
d) 1 mmol/L Na2CO3 / 4 mmol/L NaOH
Mthode exp_03_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Dure danalyse a) 14 min
b) 11 min
c) 11 min
d) 24 min
Autostep avec Fill
Polarit +

Exprience 3a luant: 2,5 mmol/L Na2CO3 / 2,4 mmol/L NaHCO3
sodium dans 1 L deau ultrapure.
Chromatogramme 5 Solution standard luant: 2,5 mmol/L Na2CO3 / 2,4 mmol/L NaHCO3

1 Fluorure 3.5 2 2733 47
2 Chlorure 5.1 5 4003 81
3 Nitrite 6.6 5 3344 48
4 Bromure 7.6 10 4156 69
5 Nitrate 9.1 10 4199 91
6 Phosphate 9.8 10 2902 47
7 Sulfate 11.8 10 3442 118
Exprience 3b luant: 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaHCO3
Mettre en solution 424 mg de carbonate de sodium (anhydride) et 84 mg dhydrognocarbonate de so-
dium dans 1 L deau ultrapure.
Chromatogramme 6 Solution standard luant: 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaHCO3

1 Fluorure 3.3 2 2422 50
2 Chlorure 4.6 5 3696 83
3 Nitrite 5.8 5 2797 47
4 Bromure 6.8 10 3970 69
5 Phosphate 7.7 10 4456 37
6 Nitrate 8.0 10 3500 102
7 Sulfate 8.7 10 3120 123

Exprience 3c luant: 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaOH
Mettre en solution 424 mg de carbonate de sodium (anhydride) et 40 mg de NaOH dans 1 L deau
ultrapure.
Chromatogramme 7 Solution standard luant: 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaOH
Tableau 11 Composs Exprience 3c

1 Fluorure 3.2 2 2386 51
2 Chlorure 4.4 5 3699 84
3 Nitrite 5.5 5 3624 47
4 Bromure 6.3 10 3997 70
5 Nitrate 7.5 10 3597 91
6 Phosphate + Sulfate 8.0 10 / 10 1772 175
Exprience 3d luant: 1 mmol/L Na2CO3 / 4 mmol/L NaOH
Mettre en solution 106 mg de carbonate de sodium (anhydride) et 160 mg de NaOH dans 1 L deau
ultrapure.
Chromatogramme 8 Solution standard luant: 1 mmol/L Na2CO3 / 4 mmol/L NaOH
Tableau 12 Composs Exprience 3d

1 Fluorure 3.6 2 2935 56
2 Chlorure 5.0 5 4131 91
3 Nitrite 6.1 5 4096 53
4 Bromure 6.9 10 4490 74
5 Nitrate 8.0 10 4417 100
6 Pic systme 9.4
7 Sulfate 12.5 10 3671 126
8 Phosphate 21.2 10 2836 47

4.2.4 Exprience 4 Calibrage, limites de dtection et de dtermination en chromatogra-
phie ionique
Les paramtres importants des mthodes danalyse sont: le domaine de linarit, la limite de dtection et
la limite de dtermination. Les procds mathmatiques se rfrant ces paramtres sont prsents par
exemple dans la norme DIN 32645.
Si les chromatogrammes sont enregistrs laide dun conductimtre, la quantification est ralise par
rapport la surface du pic qui est proportionnelle la quantit de substance. Si on reprsente la surface
de pic en fonction de la concentration, on obtient alors une fonction de calibrage qui est linaire pour les
mesures sans suppression chimique. Elle est proche dune fonction quadratique pour les mesures avec
suppression chimique. Les logiciels calculent les fonctions de calibrage de manire automatique.
Lvaluation laide de la hauteur de pic est utilise de prfrence pour les pics possdant un fort tailing ou
pour les pics ntant pas suffisamment spars par leur rapport surface/hauteur de pic; dans ces cas-l,
lvaluation par la surface est incorrecte.
La limite de dtection reprsente la concentration minimale dun analyte que lon peut encore dterminer
avec une incertitude statistique donne. On calcule ainsi la concentration thorique la plus basse que lon
peut diffrencier dune valeur blanc.
Il existe deux mthodes permettant de dterminer la limite de dtection (LD):
Mthode par la valeur blanc
Lchantillon blanc doit tre un chantillon ne contenant pas lion dterminer, mais qui livre un signal de
mesure au mme endroit que lion chantillon. La mesure rpte dun chantillon blanc donne la
concentration 0 (valeur x) des valeurs de mesure (valeurs y), dont la moyenne est dnomme valeur
blanc. La limite de dtection est dtermine grce la courbe de calibrage et elle est gale la valeur de
x correspondant la valeur maximale de y.
Mthode par la droite de calibrage
Cette mthode est utilise lorsquon ne peut pas effectivement dterminer de valeur blanc, car lion
dterminer dans lchantillon ne peut pas tre dtect. Pour la mthode par droite de calibrage, on mesure
diffrentes concentrations dun ion, plusieurs fois. Grce la dviation standard on obtient un domaine de
confiance. Cest ainsi que la concentration 0 correspond un intervalle y dtermin. Par lintermdiaire
de la fonction de calibrage, on fait correspondre lintervalle y un intervalle de concentration dont le
maximum correspond la limite de dtection.
Souvent, pour la dtermination de la limite de dtection, on utilise galement le rapport signal/bruit. Par
exemple, on dfinit comme limite de dtection la concentration en analyte, dont le signal de mesure est
trois, cinq ou sept fois suprieur au bruit de fond de la ligne de base.
La limite de dtermination est atteinte lorsque le rapport signal/bruit est au moins gal 3. Cest seulement
ce moment quune valeur numrique est donne comme valeur danalyse, car autrement lerreur de
mesure serait trop grande comparativement la valeur de mesure elle-mme. Comme approximation, on
peut dire que la limite de dtermination est suprieure dun facteur trois la limite de dtection.
Contenu apprendre
Que signifie calibrage?
Comparaison entre un calibrage un point et un calibrage plusieurs points estimation de lerreur
Dtermination du bruit de systme
Estimation de la limite de dtection
Exprience 4a Dtermination danions avec suppression chimique
Tableau 13 Paramtres Exprience 4a

Mthode exp_04_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Autostep avec Fill
Polarit +
sodium dans 980 mL deau ultrapure. Ajouter ensuite 20 mL dactone.
Chromatogramme 9 Superposition Solutions standards de diffrentes concentrations avec suppression

chimique

Pic Composs tR [min] Conc. [mg/L]

Niveau 1 Niveau 2 Niveau 3 Niveau 4
1 Fluorure 3.9 1 5 25 50
2 Chlorure 5.6 1 5 25 50
3 Pic systme 6.8
4 Nitrite 7.5 1 5 25 50
5 Bromure 8.6 1 5 25 50
6 Nitrate 10.3 1 5 25 50
7 Phosphate 11.7 1 5 25 50
8 Sulfate 14.3 1 5 25 50
Exprience 4b Dtermination danions sans suppression chimique


luant 8 mmol/L acide phtalique, 2% actonitrile; pH = 4.1
Mthode exp_04_n.mtw
Systme anonsupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Polarit +
Mettre en solution 1,33 g dacide phtalique dans 20 mL dactonitrile et un peu deau, puis complter 1 L.
Ajuster la valeur pH 4,1 par addition denviron 1 g de TRIS (solide).
Chromatogramme 10 Superposition Solutions standards de concentrations diffrentes sans suppression
chimique
Pic Composs tR [min] Conc. [mg/L]

Niveau 1 Niveau 2 Niveau 3 Niveau 4
1 Fluorure 3.6 1 5 25 50
2 Chlorure 4.9 1 5 25 50
3 Nitrite 5.7 1 5 25 50
4 Bromure 6.6 1 5 25 50
5 Nitrate 7.7 1 5 25 50
6 Sulfate 11.0 1 5 25 50
7 Pic systme 17.0

4.2.5 Exprience 5 Variation de la slectivit laide dthers couronne (18-couronne-6)
Il est possible de faire varier les temps de rtention des cations grce laddition dagents complexants dans
les luants. Lagent complexant joue le rle de ligand et le cation analyte est intgr en tant quion mtallique
central. Plus le ligand est slectif par rapport un ion mtallique central, plus son temps de rtention peut tre
influenc. Les temps de rtention des autres cations ne sont, dans le cas idal, que peu modifis.
Les agents complexants sont mis en application afin dobtenir une meilleure sparation des ions mtalliques
alcalins. Laddition dther couronne 18-couronne-6 permet de raliser une meilleure sparation de Na+, NH4+
et K+. Ceci est intressant dans le cas o par exemple des traces de NH4+ doivent tre dtermines ct
dune concentration en Na+ nettement plus leve, comme cest le cas dans les eaux naturelles. Laugmenta-
tion du temps de rtention de K+ est particulirement remarquable. Ceci peut tre expliqu par la liaison du
complexe de K+ lther dibenzo-18-couronne-6 (18-couronne-6). K+ rentre exactement dans la cage de
lther. Une complexation a lieu laide de la paire dlectrons de latome doxygne. Aprs la complexation,
cest une bien plus grosse molcule quil sagit de sparer, mme si la charge est identique. Le temps de
rtention du potassium devient donc plus grand, en raison
de la gne strique ainsi provoque.
La dnomination 18-couronne-6 montre que le systme
cyclique est compos de 18 atomes, dont 6 sont des ato-
mes doxygne. Les thers couronnes jouent un rle im-
portant dans la chromatographie ionique, mais ils sont
galement utiliss comme phase ionique slective dans
les lectrodes au potassium.
Contenu apprendre
Influence dun agent complexant trs slectif sur les
Figure 26 Complexe 18-couronne-6-potassium
temps de rtention
Explication de leffet comparativement lexprience 6
Tableau 17 Paramtres Expriences 5a et 5b
Colonne 6.1010.210 Metrosep C2 (4 x 100 mm)

luant a) 4 mmol/L acide tartrique / 0.75 mmol/L acide dipicolinique
b) 4 mmol/L acide tartrique / 0.75 mmol/L acide dipicolinique
+ 0.25 mmol/L ther couronne
Conductivit denviron 590 S/cm
chantillon Standard (lithium, sodium, ammonium, potassium, calcium, magnsium
+ 2 mmol/L HNO3)
Mthode exp_05_c.mtw
Systme cation.smt
Dbit 1 mL/min
Pression 8 MPa
b) 17 min
Polarit
Exprience 5a luant sans ther couronne
Mettre en solution en chauffant 600 mg dacide tartrique et 125 mg dacide dipicolinique dans 100 mL
deau ultrapure, puis complter 1 L avec de leau ultrapure.
Chromatogramme 11 Solution standard luant sans ther couronne

1 Lithium 2.7 1 4270 14
2 Sodium 3.6 5 4640 18
3 Ammonium 4.2 5 3640 19
4 Potassium 6.1 10 2890 17
5 Calcium 8.1 10 2950 33
6 Magnsium 9.9 10 2310 65

Exprience 5b luant avec ther couronne
deau ultrapure, puis ajouter 132 mg dther couronne et complter 1 L avec de leau ultrapure.
Chromatogramme 12 Solution standard luant avec ther couronne

1 Lithium 2.8 1 4250 14
2 Sodium 4.1 5 4550 18
3 Ammonium 5.1 5 3260 19
4 Calcium 9.3 10 2170 33
5 Magnsium 10.6 10 2200 66
6 Potassium 14.9 10 1910 17
4.2.6 Exprience 6 Variation de la slectivit laide dagents complexants
Lors de lanalyse des ions magnsium, sodium et potassium, en prsence dions zinc et calcium, on
utilise la proprit des ions zinc et calcium former des complexes avec lacide dipicolinique (en anglais:
DPA, 2,6-pyridindicarboxylic acid).
Figure 27
Complexe Me2+ de lacide dipicolinique
La constante rsultant de la formation de ce complexe

Me2+ + (DPA) [Me(DPA)]2+
est diffrente pour chaque mtal.
Les complexes suivants peuvent se former, en fonction de la valeur pH (dprotonation croissante avec
valeur pH croissante):
Domaine acide Domaine faiblement acide Domaine alcalin
Selon la valeur pH, on a disposition un complexe doublement ou simplement charg positivement ou un

complexe sans charge.
Le critre de sparation de base sur une colonne changeuse de cations est la charge de lion dtermi-
ner. Les complexes non chargs ne sont pas retenus, alors que les complexes de charge trois fois positive
sont trs fortement retenus. La charge dquilibre moyenne du complexe dpend de la constante de
complexation et la valeur pH utilise. Cette charge dquilibre dtermine le temps de rtention. Cest la
raison pour laquelle des ions mtalliques divalents peuvent tre acclrs par lintermdiaire dune addi-
tion dacide dipicolinique, dans une gamme de pH dtermine.
Les temps de rtention des ions mtalliques monovalents ne formant pas de complexe avec lacide
dipicolinique ne seront pas modifis.
Contenu apprendre
Influence de la constante de complexation sur le temps de rtention comparaison entre le zinc et le
calcium
Comportement dautres ions mtalliques de transition
Influence de la valeur pH sur la charge totale du complexe
Explication de leffet comparativement lexprience 5

Tableau 20 Paramtres Expriences 6a jusqu 6d

luant a) 4 mmol/L acide tartrique
b) 4 mmol/L acide tartrique + 0.1 mmol/L acide dipicolinique
c) 4 mmol/L acide tartrique + 0.25 mmol/L acide dipicolinique
d) 4 mmol/L acide tartrique + 0.75 mmol/L acide dipicolinique
chantillon Standard (sodium, zinc, potassium, calcium, magnsium
+ 2 mmol/L HNO3)
Mthode exp_06_c.mtw
Systme cation.smt
Dbit 1 mL/min
Pression 7 MPa
b) 20 min
c) 16 min
d) 13 min
Polarit
Exprience 6a luant: 4 mmol/L acide tartrique
Mettre en solution 600 mg dacide tartrique dans 1 L deau ultrapure.
Chromatogramme 13 Solution standard luant: 4 mmol/L acide tartrique

1 Sodium 4.3 5 4450 17
2 Potassium 7.8 10 2330 16
3 Zinc 11.2 5 2330 11
4 Magnsium 14.4 10 2010 63
5 Calcium 19.5 10 2640 34

Exprience 6b luant: 4 mmol/L acide tartrique + 0.1 mmol/L acide dipicolinique
deau ultrapure, puis complter 1 L.
Chromatogramme 14 Solution standard luant: 4 mmol/L acide tartrique + 0.1 mmol/L acide dipicolinique

1 Zinc 1.9 5 554 6.7
2 Sodium 4.4 5 4390 17
3 Potassium 7.6 10 2750 16
4 Magnsium 14.8 10 2100 64
5 Calcium 17.9 10 2720 33
Exprience 6c luant: 4 mmol/L acide tartrique + 0.25 mmol/L acide dipicolinique
Tableau 23 Composs Exprience 6c

Zinc ~1.1 5
1 Sodium 4.3 5 4450 18
2 Potassium 7.8 10 2330 17
3 Calcium + Magnsium 14.4 10 + 10 2010 98

Exprience 6d luant: 4 mmol/L acide tartrique + 0.75 mmol/L acide dipicolinique
Tableau 24 Composs Exprience 6d

Zinc ~1.1 5
1 Sodium 3.8 5 4540 17
2 Potassium 6.4 10 2900 17
3 Calcium 8.5 10 2630 33
4 Magnsium 10.5 10 2190 67
Remarques
Toutes les solutions doivent tre conserves dans des rcipients en plastique. Il est absolument nces-
saire dviter tout contact avec le verre pour permettre une dtermination correcte du sodium. La valeur pH
des solutions standards et des chantillons doit se trouver entre 2,5 et 3,5.
Lors dun changement dluant, il est ncessaire de laisser travailler le systme un certain temps afin
dobtenir une ligne de base constante.
Dans les chromatogrammes 15 et 16: le zinc est complex par lacide dipicolinique et est lu dans le pic
frontal.
4.2.7 Exprience 7 Technique de prconcentration
Lintroduction de lchantillon en chromatographie ionique a lieu laide dune boucle dchantillonnage
(en anglais: sample loop) qui est intgre dans la valve dinjection. Dans des conditions dutilisation
standards, le volume de la boucle dinjection varie de 20 L pour les anions 10 L pour les cations.
Grce de telles boucles dchantillon et laide dun systme de CI simple, il est possible dobtenir
aisment des limites de dtection de lordre de 100 g/L (100 ppb).
Une augmentation du volume de la boucle dchantillon (100 L) permet de rduire les limites de dtection
dun facteur 10 environ: il faut cependant considrer que des volumes dchantillons suprieurs ont pour
effet un pic dinjection nettement plus important, ce qui perturbe lvaluation des pics luant tt. La forme
des pics se dtriore galement pour les pics asymtriques.
La technique de prconcentration dchantillon est une mthode simple qui permet une rduction des
limites de dtection de plusieurs puissances. Une colonne de prconcentration est installe la place de
la boucle. Un volume dchantillon lev dans notre exemple 5 mL est conduit sur la colonne de
prconcentration, qui est en principe remplie du mme matriau que la colonne de sparation. Ceci permet
de garantir que tous les ions analyser en provenance de la solution chantillon soient retenus complte-
ment sur la colonne. Ils sont ensuite lus avec un faible volume dluant, ce qui permet la prconcentration.
Cependant, celle-ci ne fonctionne que lorsque lchantillon ne contient pas d ions susceptibles de jouer le
mme rle que les ions de lluant.
La capacit dune colonne de prconcentration est trs infrieure celle dune colonne de sparation. Afin
de pouvoir luer les ions analytes enrichis dans le plus petit volume possible, lextraction a lieu laide de
lluant contre-courant, ce qui signifie que la direction du dbit pendant llution est contraire celle
utilise pendant la prconcentration.
De manire gnrale, on travaille avec des luants alcalins et avec suppression chimique.
Figure 28 Technique de prconcentration: figure de gauche: position fill, figure de droite: position inject
La technique de prconcentration permet de dterminer des concentrations dans la gamme des ppb
mme si le systme de chromatographie disposition est rudimentaire.

Contenu apprendre
Que reprsente la prparation des chantillons?
O est linterface entre chromatographie ionique et prparation des chantillons?
Quel est lavantage de la prconcentration dchantillon?
Quelles sont les limites de ce procd?
Pourquoi utilise-t-on des luants alcalins avec la suppression chimique?
Quel est leffet du CO2/carbonate dans lchantillon?

chantillon Eau ultrapure
Mthode exp_07_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 4 Mpa
Colonne de prconcentration 6.1006.300 Metrosep Anion
Volume dchantillon 5 mL sur la colonne de prconcentration
Autostep avec Fill
Polarit +
sodium dans 980 mL deau ultrapure et ajouter 20 mL dactone.
Chromatogramme 17 Solution standard (1 ppb de chaque anion) pour lanalyse de leau ultrapure
Tableau 26 Composs Exprience 7 Standard
Pic Composs tR [min] Conc. [g/L] Nbre plateaux Surface [S/cm*s]

1 Fluorure + Actate 3.8 1+1 1620 5.4
2 Chlorure 5.7 1 3090 5.2
3 Pic systme 6.8
4 Nitrite 7.4 1 3270 2.3
5 Bromure 8.6 1 3970 1.3
6 Nitrate 10.3 1 3600 1.9
7 Phosphate 11.6 1 3290 0.7
8 Sulfate 14.1 1 2980 1.1

Chromatogramme 18 Eau ultrapure
Tableau 27 Composs Exprience 7 Eau ultrapure

1 Chlorure 5.7 0.030 2240 0.17
2 Pic systme 6.8
Remarques
Rincer fond plusieurs fois les rcipients, seringues et le systme; utiliser des rcipients en plastique.
4.3 Expriences pour la dtermination des anions
4.3.1 Exprience 8 Anions dans leau potable
Leau potable est un lment essentiel notre vie. Elle est obtenue partir des nappes souterraines et de
leau de surface: eaux des lacs, barrages, filtrats de rive, eaux souterraines enrichies avec de leau de
surface, eaux de rivire.
Selon la norme DIN 2000, leau potable doit remplir les exigences de base suivantes:
Elle doit tre incolore, claire, frache, inodore et sans saveur.
Elle doit tre au possible, par nature, libre de bactries et de matires nocives la sant.
Elle ne devrait pas contenir trop de sels qui rendent leau dure, de fer, de manganse, ainsi que des
matires organiques (matire des marais et humiques).
Elle ne doit pas provoquer de corrosion.
Elle doit tre en quantit suffisante pour combler tous les besoins de la population.
Selon le degr dimpuret, diffrents procds de traitement des eaux peuvent tre employs.
Le dgrillage enlve les impurets grossires et les grosses particules.
Un filtre sable permet une filtration plus fine; des processus de biodgradation ont lieu dans le sable, qui
participent son nettoyage.
Figure 29 Schma du traitement de leau potable graphique selon Thomas Seilnacht, Tuttling (Rpublique
fdrale dAllemagne)

Des filtres charbon actif adsorbent les substances organiques dissoutes, par exemple pesticides.
Il faut supprimer le fer et le manganse par oxydation de Fe(II) et Mn(II); si cette raction avait lieu dans
les canalisations deau potable, elle aurait pour consquence une coloration marron et une certaine turbidit,
ainsi quune formation de particules.
Une dsinfection est toujours ncessaire lorsque leau nest pas libre dagents pathognes. On utilise le
chlore, lozone, le dioxyde de chlore et la lumire UV.
Chloration de scurit avant lentre dans la canalisation deau potable, afin dviter une nouvelle conta-
mination bactriologique sur le chemin vers le consommateur.
Contenu apprendre
Analyse du produit alimentaire Numro 1
Contrle des donnes des bouteilles deaux minrales
Tableau 28 Valeurs limites pour leau potable (Allemagne)
Fluorure 1,5 mg/L comme F

Nitrate 50 mg/L comme NO3
Nitrite 0,1 mg/L comme NO2
Chlorure 250 mg/L
Sulfate 250 mg/L

chantillon Eau potable (eau du robinet, eau minrale)
Mthode exp_08_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Autostep mit Fill
Polarit +
sodium dans 980 mL deau ultrapure et ajouter 20 mL dactone.
Chromatogramme 19 Eau du robinet de Herisau, Suisse
Tableau 30 Composs Exprience 8 Eau du robinet

1 Fluorure 3.7 0.05 2680 1.2
2 Chlorure 5.8 6.5 2500 104
3 Pic systme 6.8
4 Nitrate 10.3 8.4 4560 74
5 Sulfate 14.4 14.4 3670 68

Chromatogramme 20 Eau minrale sans gaz carbonique
Tableau 31 Composs Exprience 8 Eau minrale sans gaz carbonique

1 Fluorure 3.7 1.5 2560 35
2 Chlorure 5.7 14.1 2980 226
3 Pic systme 6.8
4 Bromure 8.5 0.075 4810 0.5
5 Nitrate 10.3 1.4 4400 12
6 Sulfate 14.3 300 3830 3400
Remarques
Les eaux minrales contenant de lacide carbonique doivent tre dgazes avant la mesure pourquoi?
4.3.2 Exprience 9 Anions dans lthanol et les alcools
La dtermination danions dans les solvants organiques est possible, mme si des pics interfrents dus
la matrice apparaissent souvent au dbut du chromatogramme. Des exemples danalyse du gin, whisky et
thanol sont prsents ici.
Afin datteindre des limites de dtection infrieures, on peut se servir de la technique de prconcentration
(voir chapitre 4.2.7). Cependant, il est possible que la matrice de lchantillon (par exemple lthanol)
perturbe la dtermination. Il en rsulte des pics dforms, difficilement valuables (voir chromatogramme
26). Dans ces cas-l, il est ncessaire dliminer la matrice, en rinant la colonne de prconcentration
avec de leau ultrapure (limination de matrice). De cette faon, on obtient de meilleurs chromatogrammes
(voir chromatogramme 25).
La technique par limination de matrice est adapte lanalyse de solvants polaires ou apolaires.
Il est galement possible de sparer les matires organiques de solutions aqueuses laide dune colonne
de prparation dchantillon sous forme RP (Reversed Phase).
Contenu apprendre
Analyse de produits alimentaires
Effet de matrice en chromatographie
Prparation des chantillons
Prconcentration dchantillon et limination de matrice
Tableau 32 Paramtres Expriences 9a jusqu 9c

chantillon a) Gin
b) Whisky
c) thanol
Mthode exp_09_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 5 MPa
b) 33 min
c) 17 min
Boucle dchantillonnage a) 100 L
b) 100 L
c) 500 L sur colonne de prconcentration Metrosep Anion 6.1006.300;
pour limination de matrice, rincer avec 2 mL deau ultrapure
Autostep avec Fill
Polarit +

sodium dans 980 mL deau ultrapure, puis ajouter 20 mL dactone.
Exprience 9a Dtermination danions dans le Gin
Chromatogramme 21 Solution standard pour lanalyse du Gin
Tableau 33 Composs Exprience 9a Standard

1 Chlorure 5.5 0.1 4240 7.8
2 Pic systme 7.0
3 Nitrate 9.6 0.02 2980 0.9
4 Sulfate 13.0 0.4 3320 22
5 Oxalate 14.9 0.02 3710 0.7
Chromatogramme 22 Analyse du Gin
Tableau 34 Composs Exprience 9a Gin

1 Chlorure 5.6 0.11 2230 8.8
2 Nitrate 9.7 0.014 3360 0.6
3 Sulfate 13.0 0.43 3260 23.5
4 Oxalate 14.9 0.013 3920 0.5

Exprience 9b Dtermination danions dans le whisky
Chromatogramme 23 Solution standard pour lanalyse du whisky
Tableau 35 Composs Exprience 9b Standard

1 Chlorure 5.5 1 4700 84
2 Pic systme 7.0
3 Nitrate 9.6 0.5 3640 20
4 Phosphate 10.8 0.5 2960 11
5 Malate 12.1 0.5 3730 306
6 Sulfate 13.0 1 3350 56
7 Oxalate 14.9 1 3250 41
Chromatogramme 24 Analyse du whisky
Tableau 36 Composs Exprience 9b Whisky

1 Chlorure 5.6 1.3 3300 167
2 Pic systme 7.3
5 Nitrate 9.8 0.22 4000 8.7
6 Phosphate 10.9 0.43 3510 9.6
7 Malate 12.4 0.81 4580 5.8
8 Sulfate 13.1 0.88 3040 49
9 Oxalate 15.1 1.91 3540 79
Remarques
Les pics 3, 4 et 10 nont pas t valus.

Exprience 9c Dtermination danions dans lthanol avec prconcentration et limination
de matrice
Chromatogramme 25 Dtermination danions dans lthanol avec limination de matrice
Tableau 37 Composs Exprience 9c thanol avec limination de matrice

1 Chlorure 5.3 0.021 3570 9.5
2 Pic systme 6.8
3 Nitrate 9.3 0.013 3940 2.8
4 Sulfate 12.3 0.046 2130 14
5 Oxalate 14.1 0.018 3250 3.8
Chromatogramme 26 Dtermination danions dans lthanol sans limination de matrice
Tableau 38 Composs Exprience 9d thanol sans limination de matrice

Pas de pics
Remarques
Rincer fond plusieurs fois les rcipients, seringues et le systme et utiliser des rcipients en plastique.

4.3.3 Exprience 10 Anions dans la laitue
Dans le corps humain, le nitrate est apport par leau potable ainsi que par la consommation de produits
alimentaires base vgtale (lgumes, salade, etc.). Lorganisation mondiale de la sant, lOMS, (en
anglais: WHO: World Health Organization) recommande de ne pas dpasser une consommation de nitrate
journalire de 220 mg par personne. En Allemagne, la consommation moyenne journalire est denviron
130 mg par personne. Environ 5% de cette consommation de nitrates provient des produits base de
viande et de charcuterie, le reste provenant part gale de leau potable et des lgumes.
Le nitrate peut avoir un effet nfaste, sur la sant de lhomme de manires diffrentes. Le nitrate lui-mme
nest pas vraiment toxique. Seulement la prise dune grosse quantit peut provoquer des inflammations de
lestomac et de lintestin. Mais dans des conditions bien dfinies, cest dire lors de la prsence de
bactries, comme cest le cas dans la bouche de lhomme, lenzyme nitrate rductase rduit le nitrate en
nitrite:
NO3 enzyme
NO2
Le nitrite lui-mme est en mesure de convertir lhmoglobine (les globules rouges du sang) en
mthmoglobine (Fe2+ est oxyd en Fe3+). La mthmoglobine, contrairement lhmoglobine, ne peut
pas transporter loxygne dans le sang. Chez les adultes, les ractions du mtabolisme sont capables de
rparer le dommages causs, mais le mtabolisme des bbs gs de moins de cinq mois nest pas
capable de le faire. Le manque doxygne apparu dans le sang rend la peau du bb bleute. Ce phno-
mne, dnomm galement mthmoglobinmie, peut entraner la mort.
Les nitrites peuvent encore former des nitrosamines dans le milieu acide de lestomac, par raction avec
diverses amines secondaires (deux atomes H de la molcule ammoniaque sont remplacs par des restes
alkyle). Ces amines secondaires peuvent tre apportes par les mdicaments et lalimentation.Abbildung
30
R = CH3 dimthylnitrosamine
Figure 30 Formation de nitrosamines partir de nitrite et damines secondaires
Les nitrosamines font partie des substances les plus cancrignes. Elles sont produites dans lorganisme
partir de composs non cancrignes.
Contenu apprendre
Contrle des produits alimentaires (nitrite et au nitrate)

chantillon Laitue
Mthode exp_10_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 5 MPa
Autostep avec Fill
Polarit +
sodium dans 980 mL deau ultrapure, ajouter ensuite 20 mL dactone.

Couper la salade en petits morceaux, la disperser et ajouter de leau ultrapure (rapport 1:100), puis filtrer.

Chromatogramme 27 Solution standard pour lanalyse de la laitue

1 Chlorure 5.3 5 4480 80
2 Pic systme 6.7
3 Nitrate 9.3 5 4320 42
4 Phosphate 10.4 5 2990 24
5 Malate 11.8 10 3140 26
6 Sulfate 12.7 2 3330 22
7 Oxalate 14.6 0.1 3500 0.9
Chromatogramme 28 Analyse de la laitue (dilution 1:100)
Tableau 41 Composs Exprience 10 Laitue

1 Chlorure 5.3 540 4260 86
2 Pic systme 6.6
4 Nitrate 9.4 410 4240 34
5 Phosphate 10.4 540 2960 25
6 Malate 11.8 1160 2180 30
7 Sulfate 12.6 206 2800 23
8 Oxalate 14.5 10 2300 1
Remarques

4.3.4 Exprience 11 Acide phosphorique dans les boissons base de Cola
Le Coca-Cola est une boisson sans alcool contenant de lacide carbonique et de la cafine. Le pharmacien
amricain Pemberton le fabriqua pour la premire fois en 1885. Ces composs sont base dextraits de
noix de cola, doranges amres, de bois de caroube, dessence de gingembre, 12% de sucre, 0,28%
dacide phosphorique (pH = 2,7), couleur caramel et dioxyde de carbone. La teneur en cafine est de
lordre de 16 mg/100 mL.
Il existe une multitude de boissons base de cola sur le march (Pepsi Cola, Club Cola, River Cola, Afri
Cola, etc.), qui se diffrencient par la constitution du Coca-Cola lui-mme.
La dtermination de la teneur en acide phosphorique dans les boissons base de cola est dune impor-
tance particulire, car les responsables rgionaux de remplissage de cola reoivent le concentr et le
contrle de remplissage a lieu par lintermdiaire de la teneur en acide phosphorique. Ceci requiert une
dtermination trs exacte.
Lacide phosphorique peut se prsenter sous 4 formes ( pKa1= 2,161, pKa2= 7,207, pKa3= 12,325). La
proportion des espces diffrentes est dpendante de la valeur pH et peut tre observe dans la figure
suivante:
Figure 31 Effet tampon de lacide phosphorique dans la gamme pH 6...8
Pour les solutions tampons, on utilise souvent un mlange de phosphate primaire et secondaire, qui tamponne
dans le domaine pH allant de 6...8 (90% H2PO4 + 10% HPO42 jusqu 10% H2PO4 + 90% HPO42).
Comparer galement avec lquation de Henderson-Hasselbalch (quation tampon)
Contenu apprendre
Chimie de lacide phosphorique
Influence de la valeur pH sur la sparation chromatographique
Statistique: reproductibilit
Tableau 42 Paramtres Expriences 11a jusqu 11c

chantillon Boissons base de Cola
Mthode exp_11_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Dure danalyse 18 min pour Coca-Cola, 30 min pour Coca-Cola light
Autostep avec Fill
Polarit +

Chromatogramme 29 Solution standard pour lanalyse de boissons base de Cola
Tableau 43 Composs Expriences 11a jusqu 11c Standard

1 Chlorure 5.3 1 4140 15
2 Pic systme 6.7
3 Nitrate 9.4 1 4220 8.0
4 Phosphate 10.5 50 3250 261
5 Sulfate 12.7 1 2950 13
Exprience 11a Analyse de Coca-Cola
Chromatogramme 30 Analyse de Coca-Cola (dilution 1:10)

1 Chlorure 5.3 5.9 3100 8.9
2 Pic systme 6.8
3 Nitrate 9.5 5.9 5000 4.7
4 Phosphate 10.5 510 3370 266
5 Sulfate 12.8 11.0 3520 14

Exprience 11b Analyse de Coca-Cola light
Chromatogramme 31 Analyse de Coca-Cola light (dilution 1:10)

1 Chlorure 5.3 6.0 2990 9.2
2 Pic systme 6.7
3 Nitrate 9.4 7.3 4290 5.8
4 Phosphate 10.5 663 1850 346
5 Sulfate 12.8 14.4 1630 19
Remarques

Exprience 11c Reproductibilit des mesures du phosphate dans le Coca-Cola
Chromatogramme 32 Superposition de 8 mesures (chantillon non dilu)
Tableau 46 Reproductibilit des mesures
Chromatogramme Surface phosphate Conc. phosphate

[S/cm*s] [mg/L]
1 3627 519
2 3629 520
3 3626 519
4 3626 519
5 3636 521
6 3638 521
7 3639 521
8 3638 521
Dviation standard: infrieure 0,2%
Remarques
Les boissons base de cola doivent tre dgazes. Pour le Cola light, on obtient le pic de ldulcorant
cyclamate sous le pic du phosphate.

4.3.5 Exprience 12 Acides organiques dans le vin
Conformment la loi allemande relative aux vins, le vin est un produit qui est obtenu seulement par
fermentation alcoolique totale ou partielle de grappes de raisin fraches ou crases ou partir du jus de
raisin. Le jus de fruit contient entre autres environ 12...25% dhydrures de carbone (glucose, fructose) et
0,9...1,5% dacides; les plus importants sont lacide tartrique L-(+) (2R, 3R) et lacide malique, ct de
lacide citrique, lacide ktoglutarique, lacide succinique et lacide lactique.
Un critre important dvaluation du jus de fruits est le degr Oechsle (Oe); il est dautant plus lev que
la teneur en sucre est grande. Il indique la diffrence de masse (en g) entre 1 L de jus de fruit 20 C et un
litre deau distille. Par exemple, un jus de fruit de poids spcifique 1,115 kg/L a le degr 115 Oe. Le
degr Oechsle permet donc de dterminer la teneur du vin en sucre et en alcool.
Il faut savoir que 1,7 g de sucre forme 1 mL (0,794 g) dthanol. partir de 12 15% dalcool dans le
milieu, la fermentation cesse car les levures sont dtruites elles-mmes par lalcool quelles ont produit.
Larme du vin comprend entre 600 et 800 composs: hydrocarbures, alcools, aldhydes, ctones, aci-
des, esters, lactones, thers, phnols et bien dautres encore.
Dun point de vue analytique, les acides intressants sont lacide tartrique 2R, 3R, lacide malique, lacide
citrique, lacide lactique et lacide succinique. La teneur totale (calcule en acide tartrique) se situe en
gnral entre 5,5 et 8,5 g/L. Lacide actique, propionique, les acides gras levs et des quantits anorma-
les dacide lactique sont prsents dans des vins malades et sont forms par des micro-organismes.
Figure 32 Acide tartrique L(+), forme (2R, 3R)
La fermentation alcoolique se droule selon lquation suivante:
levure
C6H12O6 + 2 ADP + 2 P 2 C2H5OH + 2 CO2 + 2 ATP
Abrviations: ADP = adnosine diphosphate, ATP = adnosine triphosphate, P = phosphate
Les acides organiques faibles sont dtermins laide de la chromatographie par exclusion ionique (voir
chapitres 3.3.4, 3.6.7 et 3.7.2.3).

Tableau 47 Teneur en acide (mg/L) de vins allemands (Moyenne de 4 resp. 2 dterminations individuelles)
Vin de qua- Portu- Riesling Mller-Thurgau

lit typique gieser Kabinett Sptlese Auslese Beerenaus- Silvaner Sptlese Auslese Beeren-
Rotwein lese, Eiswein Kabinett auslese
Acide oxalique 15,7 13,0 11,0 45,8 16,0 21,7 16,7 40,9 15,4 19,5
Acide succinique 194,0 260,1 205,8 282,1 230,2 149,2 243,8 215,1 264,9 269,2
Acide fumarique 44,2 31,9 24,6 28,3 20,8 36,0 20,9 51,8 27,0 40,6
Acide glutarique 3,7 1,9 4,5 2,6 2,3 7,0 2,6 2,2 1,9 6,2
Acide c- resp. t-aconitique 2,1 1,9 + 5,5 4,9 6,4 1,4 2,5 1,6 4,5
Acide glycolique 1,8 1,3 + + 1,4 6,9 3,7 3,4 1,7 5,8
D- + L-Acide lactique 1789 2364 319,8 159,8 151,0 2141 793 221,0 208,1 2096
Acide anglycrinique 43,5 62,6 50,1 39,5 59,0 53,0 49,6 87,0 68,8 49,9
Acide triglycrinique
3-M-2,3-DHBS
Acide malique 3971 5080 3850 3871 4235 2251 2893 3163 3410 2897
Introduction la pratique de la chromatographie ionique

Acide tartrique 1586 994 1428 1431 817 1251 1280 1014 805 887
Acide citramalique 94,5 53,7 63,0 18,6 46,8 48,2 31,3 33,8 24,2 41,0
Acide -hydroxyglutarique 24,9 27,5 18,2 24,5 28,4 20,6 18,8 15,3 26,9 22,2
Acide citrique 138,9 150,2 241,1 222,8 298,6 287,3 200,7 221,7 240,2 335,1
Acide glyoxylique + 1,0 + + 4,0 6,1 2,9 1,8 1,1 3,1
Acide pyruvique 20,6 29,8 17,8 12,4 16,8 8,6 17,6 22,7 18,6 33,0
Acide -ktoglutarique 41,1 45,7 38,6 36,8 55,7 35,6 41,0 33,7 40,3 27,5
Acide gluconique 59,0 357,2 54,5 95,9 452,1 337,2 53,9 131,1 373,9 540
Acide mucique + 4,1 20,4 + 4,5 11,2
Acide glucuronique 2,1 3,4 3,8 5,8 7,9 14,5 1,7 6,0 7,6 10,2
Acide galacturonique 11,1 11,7 14,1 19,7 22,0 43,4 10,0 17,3 23,2 34,3
L-Acide ascorbique 12,9 9,0 13,7 10,1 9,8 9,6 12,0 10,4 9,7 8,5
Acides totaux 7977 9491 6349 6302 6474 6744 5685 5284 5565 7333
Remarques
= non dtectable = prsent sous forme de traces (environ 5 mg/L), non valu
103
+ = traces 3-M-2,3-DHBS = acide 3-mthyl-2,3-dihydroxybutyrique
Contenu apprendre
Analyse des produits alimentaires
Chromatographie par exclusion ionique
Quels ions peuvent tre dtermins laide de la chromatographie par exclusion ionique?
Colonne 6.1005.200 Metrosep Organic Acids (7.8 x 250 mm)

luant 0.5 mmol/L H2SO4 / actone (85:15)
chantillon Vin blanc, vin rouge
Mthode exp_12_o.mtw
Systme orgacids.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Polarit +
Mlanger 0.5 mmol de H2SO4 (850 mL) et actone (150 mL).

Diluer les chantillons de vin 1:100 et filtrer travers un filtre 0,45 m.

Chromatogramme 33 Solution standard pour la dtermination dacides organiques dans le vin
Tableau 49 Composs Expriences 12a et 12b Standard

1 Citrate 7.2 5 26200 1.1
2 Tartrate 7.5 20 7990 31
3 Malate 8.3 5 9210 4.5
4 Succinate 9.9 5 7140 1.2
5 Lactate 10.8 20 8830 11
6 Actate 13.1 10 11500 1.2
Pic systme 15.9

Exprience 12a Dtermination dacides organiques dans le vin blanc
Chromatogramme 34 Dtermination dacides organiques dans le vin blanc (dilution 1:100)

1 Citrate 7.2
2 Tartrate 7.5 1210 8430 19
4 Malate 8.2
7 Succinate 9.8 350 5660 0.8
8 Lactate 10.7 2190 8820 13
9 Actate 13.0 710 5200 0.8
Pic systme 15.8
Remarques

Exprience 12b Dtermination dacides organiques dans le vin rouge
Chromatogramme 35 Dtermination dacides organiques dans le vin rouge (dilution 1:100)

1 Citrate 7.2
2 Tartrate 7.5 2230 8300 34
4 Malate 8.2
7 Succinate 9.9 410 10500 1.0
8 Lactate 10.8 1560 9570 8.9
9 Actate 13.1 1010 7950 1.1
Pic systme 15.9
Remarques
Les pics 3, 5 et 6 nont pas t valus; le citrate et le malate nont pas pu tre quantifis correctement.

4.3.6 Exprience 13 Contaminations dans le borate dtermination du chlorure et du
sulfate dans des solutions de borax
Le borax (ttraborate disodique, Na2B4O710 H2O, Na2[B4O5(OH)4]8H2O) possde la structure suivante:
Figure 33 Borax (ttraborate disodique,

Na2B4O710 H2O,
Na2[B4O5(OH)4]8 H2O)
Lorsquil fond, le borax peut mettre en solution de nombreux oxydes mtalliques en formant des couleurs
caractristiques. Les perles de borax sont connues des travaux pratiques inorganiques. Le borax est
utilis entre autres lors de la fabrication du verre, de glaure pour la poterie, de porcelaines et comme
produit pour souder. 100 C, le borax perd 5 molcules deau et se transforme en pentahydrate borax
du bijoutier. Grce aux produits ajouts au produit souder, les contaminations de surface, la plupart du
temps des couches doxydes, sont dtruites. Elles provoqueraient un problme de formation dalliage
entre la soudure (dans ce cas-l, ce sont des alliages base dargent, cuivre et tain) et le matriau de
base.
Des solutions base de ttraborate disodique (borax) sont utilises dans les cycles intrieurs de refroidis-
sement des centrales atomiques en tant quabsorbeurs de neutrons. Dans ce domaine, la qualit du
matriau est tout particulirement importante, car des traces de chlorure et de sulfate pourraient provo-
quer une corrosion de la tuyauterie, ce qui doit tre tout prix vit.
Lacide borique H3BO3 ou B(OH)3 est un acide trs faible, dont la valeur pKa de 9,25 correspond HCN.
Lacide borique nest pas donneur de H+ (dfinition dun acide selon Brnsted), mais un accepteur de OH
(dfinition dun acide selon Lewis):
La chromatographie ionique sans suppression chimique utilise pour la dtermination des impurets dans
le borate, un luant acide pH = 4,1. cette valeur pH, le borate se trouve pratiquement exclusivement
sous la forme dacide borique B(OH)3. Lacide borique, contrairement aux anions chargs ngativement,
ne prsente pas dinteraction avec la phase stationnaire de la colonne de sparation et est lu ainsi dans
le volume mort.
Si par contre, on travaille avec la suppression chimique, lluant faiblement alcalin base de carbonate/
hydrognocarbonate est alors employ. Il est tout fait possible de sparer le borate en tant quanion,
mais la dtection ne fonctionne pas. Le problme se trouve au niveau du suppresseur. Ce dernier change
tous les ions Na+ contre des ions H+ et il se forme alors de lacide borique qui nest que trs faiblement
dissoci.
La grande quantit dacide borique perturbe le chromatogramme et rend la dtermination des anions
presque impossible. Une limination de matrice offre une solution ce problme (voir chapitre 4.3.2).
Dans les centrales atomiques, des traces danions doivent tre dtermines dans des solutions aqueuses
de 2 4% dacide borique. Dans ces cas-l, on utilise la technique dlimination de matrice, avec la
technique de prconcentration dchantillon (voir chromatogramme 38).

Contenu apprendre
Acides forts et faibles
Comparaison entre des mesures avec et sans suppression chimique
Prconcentration des chantillons et limination de matrice
Exprience 13a Mesure sans suppression chimique


luant 8 mmol/L acide phtalique, 2% actonitrile; pH = 4.1 (TRIS)
chantillon 1 g/L borax dans de leau ultrapure, dop avec 1 ppm de chlorure et sulfate
Mthode Exp_13_n.mtw
Systme Anonsupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 2 MPa
Polarit +
Mettre en solution 1,33 g dacide phtalique dans 20 mL dactonitrile et un peu deau, puis ajouter de leau
dgaze et complter 1 L. Aprs addition denviron 1 g de TRIS (solide), ajuster la valeur pH 4,1.
Chromatogramme 36 Borate dop avec 1 ppm de chlorure et sulfate Sans suppression chimique


1 Chlorure 4.4 1 2790 12
2 Sulfate 9.0 1 3270 8.4
Pic systme 19
Exprience 13b Mesure avec suppression chimique


Conductivit aprs suppression chimique environ 16 S/cm
chantillon 1 g/L Borax dans de leau ultrapure, dop avec 1 ppm de chlorure
et sulfate
Mthode exp_13_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 2 MPa
Autostep avec Fill
Polarit +

Chromatogramme 37 Borate dop avec 1 ppm de chlorure et sulfate avec suppression chimique

1 Chlorure 5.4 1 4170 15
2 Sulfate 13.7 1 3290 11
Chromatogramme exemple Dtermination de traces danions dans lacide borique avec

prconcentration et limination de matrice
Tableau 56 Paramtres Chromatogramme exemple
Colonne 6.1006.100 Metrosep Anion Dual 2 (4.6 x 75 mm)

luant 0.8 mmol/L NaHCO3 / 5.5 mmol/L Na2CO3
chantillon Solution aqueuse 4% dacide borique
Dbit 0.8 mL/min
Pression 4.6 MPa
Introduction dchantillon Faire passer 2 mL dchantillon sur une colonne de prconcentration,
sur laquelle les traces danions dterminer sont retenues. Rincer
ensuite la colonne de prconcentration avec de leau ultrapure, afin
dliminer lacide borique (limination de matrice), puis activer le dbit
dluant (inject). Les traces danions prconcentres sont alors lues
de nouveau et transportes sur la colonne Metrosep-Anion-Dual-2, o
elles sont ensuite spares.

Autostep avec Fill
Polarit +
sodium dans 1 L deau ultrapure.
Chromatogramme 38 Dtermination de traces danions dans une solution dacide borique 4% avec
prconcentration et limination de matrice
Tableau 57 Composs Chromatogramme exemple
Pic Composs tR [min] Conc. [g/L]

1 Chlorure 5.7 15.6
3 Nitrate 12.6 4.1
4 Phosphate 15.6 15.5
5 Sulfate 20.9 35.8

4.3.7 Exprience 14 Anions dans des eaux uses
Les eaux uses sont en gnral traites dans des stations dpuration laide de bactries. Les substances
organiques sont oxydes par consommation doxygne.
Substances org. + O2 bactries
CO2 + H2O + masse cellulaire
En plus de loxydation des substances organiques, suivant le fonctionnement de la station dpuration, il
est galement possible doxyder lammonium en nitrate (nitrification).
NH4+ + 2 O2 bactries
NO3 + H2O + 2 H+
Dans des bains exempts doxygne, les bactries utilisent loxygne contenu dans la molcule de nitrate
pour loxydation des substances organiques (dnitrification).
Substances org. + 2 NO3 bactries
2 CO2 + 2 OH + 2 H2O + N2
Le phosphate qui constitue un nutriment vgtal au mme titre que NH4+ et NO3 peut par exemple tre
prcipit par addition de solutions de sels de Fe3+. ct des paramtres globaux Demande Biochimi-
que en Oxygne (DBO), Demande Chimique en Oxygne (DCO), Carbone Organique Total (COT) qui
reprsentent un indice de contamination des eaux uses et des eaux de rejet, lanalyse individuelle de
NH4+, NO3, PO43 joue un rle important. Cl, SO42 sont seulement dtermins dans des cas spciaux.
Pour les stations dpuration communales de plus de 100 000 quivalents habitant (1 quivalent habitant
correspond la charge de dchets produite par un habitant), les valeurs limite sont les suivantes en
Allemagne:
DBO 15 mg/L
DCO 75 mg/L
NH4-N 10 mg/L*
Ntot 18 mg/L* (somme de NH4-N, NO2-N, NO3-N)
PO4-Ptot 1 mg/L
*
Nest valable que pour les tempratures deaux uses 12 C car la nitrification est fortement influence par la
temprature.
NH4-N, NO2-N, NO3-N signifie que les valeurs se reportent lazote inclus dans les ions pris en consid-
ration; il en va de mme pour PO4-P.
Contenu apprendre
Analyse relative la protection de lenvironnement
Technique de prparation des chantillons
Analyse de mlanges de substances avec dimportantes diffrences de concentration domaine de
concentration dynamique


chantillon Eau use communale (en provenance dHerisau, Suisse)
Mthode exp_14_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 2 MPa
Autostep avec Fill
Polarit +

Les chantillons doivent absolument tre filtrs, par exemple laide de Minisart (Sartorius) ou de sup-
ports filtres jetables (utilisable une seule fois) (Schleicher & Schll) de porosit 0,45 m ou infrieure.
Mme des solutions apparemment claires peuvent contenir de fines particules qui pourraient endomma-
ger la colonne.

Exprience 14a Entre dune station dpuration
Chromatogramme 39 Solution standard pour lanalyse de lentre dune station dpuration

1 Chlorure 5.2 100 3470 2270
2 Nitrate 9.1 2 4330 16
3 Phosphate 10.3 5 3040 21
4 Sulfate 12.5 100 3820 1470

Chromatogramme 40 Analyse de lentre dune station dpuration
Tableau 60 Composs Exprience 14a Entre dune station dpuration

1 Chlorure 5.2 128 2980 2910
5 Nitrate 9.2 2.1 4620 16
6 Phosphate 10.3 7.0 3040 30
7 Sulfate 12.5 132 3720 1940
Remarques
Les pics 2, 3, 4 et 8 nont pas t valus.

Exprience 14b Sortie dune station dpuration
Chromatogramme 41 Solution standard pour lanalyse de la sortie dune station dpuration

1 Fluorure 3.6 0.1 2900 2.1
2 Chlorure 5.2 5 4140 78
3 Nitrate 9.1 10 4210 87
4 Sulfate 12.5 5 3420 53

Chromatogramme 42 Analyse de la sortie dune station dpuration
Tableau 62 Composs Exprience 14b Sortie dune station dpuration

1 Fluorure 3.6 0.05 2900 1.1
2 Chlorure 5.2 7.3 3870 114
4 Nitrate 9.2 8.5 4390 73
5 Sulfate 12.5 6.8 3460 71
Remarques
Le pic 3 na pas t valu.

4.3.8 Exprience 15 Fluorure dans des ptes dentifrices
Les ptes dentifrices sont fabriques partir de diffrents composs:
Eau 30 40%
Corps nettoyants ce sont des substances inorganiques insolubles, qui augmentent leffet nettoyant
de la pte dentifrice. La taille des particules est infrieure 15 m. Les corps nettoyants utiliss
communment sont: Al2O3, CaCO3, CaHPO42H2O, SiO2H2O, silicate de sodium et daluminium.
Fluorure le fluor renforce la rsistance de lmail des dents contre les attaques acides qui provien-
nent de la plaque dentaire. En plus, les fluorures permettent une minralisation de lmail dentaire (la
partie inorganique de lmail dentaire est constitue essentiellement de phosphate de calcium,
hydroxyapatite, carbonate de calcium, phosphate de magnsium, fluorure de calcium et chlorure de
calcium). Le fluorure est important pour la prophylaxie contre les caries. Les composs base de fluor
utiliss le plus couramment sont le fluorure de sodium, monofluorophosphate de sodium et les fluorures
dammonium quaternaires qui contiennent galement des ions fluorures libres. Dans certains pays, le
fluorure est un supplment ajout directement leau potable.
Figure 34 Monofluorophosphate de sodium
Tensio-actifs (p. e. sodium laurylsulfate) ils rduisent la tension de surface et participent la rpar-
tition homogne de la pte dentifrice. Ils augmentent laction nettoyante, surtout dans les endroits
difficiles atteindre avec la brosse dents. Dautres composs de la pte dentifrice sont par exemple:
Milieux hydratants (par exemple la glycrine, sorbite, polythylne glycol) ils amliorent la stabilit
froid et vitent le desschement.
Matires agglutinantes et paississantes (par exemple le carboxymthyle cellulose de sodium)
elles vitent la sparation des particules solides de la phase liquide.
dulcorants (par exemple la saccharine de sodium) ils amliorent le got de la pte dentifrice.
Conservateurs (par exemple lacide 4-hydroxybenzoque) ils sont utiliss pour viter une dsagrga-
tion microbienne de la pte dentifrice.
Armes ils sont ajouts pour rendre le produit plus attrayant. On utilise entre autres de lhuile de
menthe, du menthol, de lhuile danis, de lhuile deucalyptus, des huiles aromatiques et de lhuile de
citron.
En chromatographie ionique, on analyse dans la pte dentifrice en plus des fluorures (provenant du fluorure
de sodium), galement le monofluorophosphate.
Remarques
Le citrate est lu sur la colonne Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150) seulement aprs environ 90 min.
Pour contrler si du citrate est contenu dans la pte dentifrice, on utilise dans lexprience 15b la cartou-
che prcolonne Metrosep Anion Dual 1 (6.1006.030), la place de la colonne de sparation Metrosep
Anion Dual 1.

Contenu apprendre
Contrle qualit
Exprience 15a Pte dentifrice sans citrate


chantillon Pte dentifrice (sans citrate)
Mthode exp_15_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 3 MPa
Autostep avec Fill
Polarit +

Dissoudre 1 g de pte dentifrice dans 19 mL deau ultrapure, puis filtrer travers un filtre de porosit
0,45 m.

Chromatogramme 43 Pte dentifrice sans citrate (dilution 1:20)

1 Fluorure 3.9 1304 1357 1663
2 Formiate 4.5 52 1643 19.8
3 Chlorure 5.6 66 4325 55.3
4 Pic systme 6.7
5 Monofluorophosphate 10.2 4527 3.1
6 Phosphate 11.5 260 3047 55.4
7 Sulfate 14.1 1346 3831 880
8 Saccharine 42.6 160 1917 179
Exprience 15b Pte dentifrice avec citrate

Colonne 6.1006.030 cartouche prcolonne Metrosep Anion Dual 1

chantillon Pte dentifrice (avec citrate)
Mthode exp_15b_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min

Pression 3 MPa
Autostep avec Fill
Polarit +

Dissoudre 1 g de pte dentifrice dans de leau ultrapure (dilution 1:20), puis filtrer travers un filtre de
porosit 0,45 m.
Chromatogramme 44 Pte dentifrice avec citrate (dilution 1:20)

1 Saccharine 8.2 160 510 177
2 Citrate 16.2 2600 267 360

4.3.9 Exprience 16 Anions dans le sucre blanc et le sucre roux
Figure 35 Le saccharose, exemple dun disaccharide
Les sucres sont des composs organiques avec un groupe carbonyle hmi-actal et plusieurs groupes
hydroxy. En termes gnraux, dans le langage courant, le nom de sucre se rfre au disaccharide saccha-
rose.
Lors de la fabrication de sucre partir de betteraves sucrires, ces dernires sont tout dabord laves,
coupes, puis extraites dans un courant deau contraire laide dune installation diffusion. Pendant ce
processus, les composants solubles tels que le sucre, les sels, les acides, les protines et la pectine se
mettent en solution. Par lintermdiaire dune addition de CaO, la plupart des constituants autres que les
sucres sont ensuite prcipits. On utilise ensuite le dioxyde de carbone CO2 pour prcipiter lhydroxyde de
calcium sous la forme CaCO3 Aprs filtration, la solution de sucre est concentre au cours de plusieurs
tapes dvaporation pour former le sirop, puis filtre de nouveau et concentre encore jusqu ce que
le sucre se spare sous forme de masse cuite de sucre blanc. Ce sucre est ensuite spar dans des
centrifugeuses et aprs nettoyage (recristallisation), on obtient du sucre cristallin blanc, avec une puret
de 99,95%. Le liquide sortant de la dernire tape de centrifugation est un sirop pais noir, connu sous le
nom de mlasse.
Le sucre roux est moins purifi et peut tre color par addition de mlasse. Outre des contaminations
organiques, il contient galement des ions alcalins, alcalino-terreux ainsi que des anions et possde un
tout autre got que le sucre cristallin blanc.
Les contaminations organiques peuvent tre limines avant la dtermination des anions laide dune
colonne RP (en anglais: Reversed Phase).
Contenu apprendre
Contrle de procds
Contrle de produits alimentaires contenant beaucoup de sucre, par exemple le miel


chantillon a) Sucre blanc
b) Sucre roux
Mthode Exp_16_s.mtw
Systme Asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 4 MPa
Autostep avec Fill
Polarit +

Dissoudre le sucre dans de leau ultrapure (dilution 1:10), puis filtrer travers un filtre de porosit
0,45 m.

Exprience 16a Sucre blanc
Chromatogramme 45 Solution standard pour lanalyse du sucre blanc

1 Chlorure 5.5 0.1 4408 8.1
2 Pic systme 7.0
3 Nitrate 9.6 0.1 3682 4.0
4 Malate 12.0 0.1 3587 1.2
5 Sulfate 12.9 0.1 2995 5.9
6 Oxalate 14.8 0.1 3260 3.7

Chromatogramme 46 Analyse du sucre blanc (dilution 1:10)
TTableau 69 Composs Exprience 16a Sucre blanc

1 Chlorure 5.5 1.3 4183 10.3
2 Pic systme 7.2
3 Nitrate 9.8 0.8 4157 3.2
4 Malate 12.2 1.5 2833 1.8
5 Sulfate 13.1 0.9 3404 5.2
6 Oxalate 15.0 1.4 3432 5.3

Exprience 16b Sucre roux
Chromatogramme 47 Solution standard pour lanalyse du sucre roux

1 Chlorure 5.3 20 3640 2200
2 Pic systme 6.9
3 Nitrate 9.6 0.1 3700 3.9
4 Phosphate 10.7 10 3330 245
5 Malate 12.1 5 3430 62
6 Sulfate 13.0 5 3600 294
7 Oxalate 14.9 1 3220 40

Chromatogramme 48 Analyse du sucre roux (dilution 1:10)
TTableau 71 Composs Exprience 16b Sucre roux

1 Chlorure 5.4 217 3480 2380
2 Pic systme 7.2
3 Nitrate 9.7 1.8 2870 7.0
4 Phosphate 10.8 84 3320 205
5 Malate 12.2 55 3840 68
6 Sulfate 13.0 74 3980 435
7 Oxalate 14.9 6.9 3530 28
Remarques
Dans le sucre roux, il est possible que des contaminations luent des temps de rtention trs levs. Ces
derniers pourraient perturber les chromatogrammes suivants, si le temps danalyse tait choisi trop court.
Cest la raison pour laquelle il est recommand danalyser tout dabord le sucre blanc et ensuite le sucre
roux.

4.3.10 Exprience 17 Contaminations dans le peroxyde dhydrogne
Le peroxyde dhydrogne pur (H2O2) fond 0,4 C et entre en bullition 150 C. Il ne peut tre fabriqu
comme substance pure que sous des conditions de scurit extrmes, par cristallisation fractionne. Le
produit chimique industriel H2O2 utilis est sous forme de solution aqueuse de concentration 35, 50, 60 ou
70%. Ces solutions sont purifies laide dchangeurs dions ou par distillation. La dcomposition forte-
ment exotherme de H2O2 en H2O et O2 na pas lieu de manire spontane; elle est cependant catalyse par
les mtaux lourds.
2 H2O2 2 H2O + O2 + 196,2 kJ
Les mtaux lourds peuvent tre lis grce laddition de stabilisateurs tels que les polyphosphates, lEDTA
et le stannate par exemple. La dcomposition est ainsi inhibe. La proprit caractristique de H2O2 est son
action oxydante. Le potentiel normal (E0) est de +1,8 V pH = 0 et de +0,78 V pH = 14.
Le peroxyde dhydrogne fait partie des produits chimiques de base les plus importants et dispose dune
production annuelle de 2,7 millions de tonnes. Il est fabriqu industriellement par conversion de
lanthrahydroquinone avec loxygne atmosphrique. Il se forme ainsi lanthraquinone correspondante et
H2O2. Lanthraquinone est rduite de nouveau laide dhydrogne lmentaire sur un catalyseur au palla-
dium pour former lanthrahydroquinone et retourne dans le systme.
Une grande quantit de H2O2 est utilise pour blanchir le papier et la cellulose. Dans de nombreux pays, le
blanchissage au chlore (avec Cl2 ou ClO2), a t en partie ou compltement remplac par dautres proc-
ds car il amne dans le circuit deau potable un certain nombre de composs chlors difficilement
biodgradables. De ce fait, H2O2 possde une importance tout fait particulire.
Dautres domaines dapplication sont:
limination du fer et du manganse dans leau potable.
Dpollution des eaux contenant du cyanure (CN CNO), par exemple les eaux uses de lindustrie
galvanoplastique, avec H2O2 ou H2O2/H2SO4.
La combinaison H2O2 et UV libre des radicaux HO (radicaux hydroxyle), qui sont des milieux oxydants
extrmement forts (E0 = +2,8 V). Ces derniers sont dune importance particulire pour la purification
deaux uses spciales.
Trs intressant galement: le dveloppement dun processus pour la fabrication doxyde de propylne
partir de propne et H2O2 (catalyseur couche de titane). Celui-ci remplace le procd base de
chlorhydrine, qui pollue les eaux.
Dans les produits drivant de H2O2, on compte le perborate de sodium et le percarbonate de sodium
comme les plus importants; ils sont utiliss comme agents de blanchissage dans les poudres laver.
H2O2 est utilis galement dans lindustrie lectronique pour le nettoyage de circuits imprims et des
plaques en silicium.
La dtermination des contaminations dans H2O2 joue un rle particulirement important dans lindustrie
lectronique cite ci-dessus. Mme de trs faibles quantits (ng/L ou ppt) dions trangers peuvent provo-
quer un mauvais rendement lors de la fabrication de plaques en silicium. Par exemple le phosphate et le
nitrate peuvent agir en tant querreur n dans le cristal de silicium.
fortes concentrations, le peroxyde dhydrogne attaque la colonne de sparation et perturbe lquilibre
du carbonate dans lluant (voir chromatogramme 50). Cest la raison pour laquelle, lors de dtermina-
tions de traces, on utilise la technique dlimination de matrice (voir chapitre 4.3.2), qui prsente les
avantages suivants: premirement, il est possible danalyser les solutions concentres sans dilution et
deuximement, on peut employer de plus grands volumes dchantillon (prconcentration).

Contenu apprendre
Contrle de procds
Prconcentration dchantillon et limination de matrice
Slectivit de diffrentes colonnes

chantillon Peroxyde dhydrogne 30%, suprapur
Mthode exp_17_s.mtw
Systme asupp.smt
Dbit 0.5 mL/min
Pression 2 MPa
Introduction de lchantillon 1 mL dchantillon sur la colonne de prconcentration; pour liminer
la matrice, rincer avec 1 mL deau ultrapure
Autostep avec Fill
Polarit +
Introduction de lchantillon
Rincer le systme fond avec de leau ultrapure, puis faire passer 1 mL dchantillon sur la colonne de
prconcentration et rincer avec 1 mL deau ultrapure.

Chromatogramme 49 Solution standard pour la dtermination des anions dans le peroxyde dhydrogne
Tableau 73 Composs Expriences 17a et 17b Standard

1 Actate 4.2 5 2620 108
2 Formiate 4.4 1 2940 222
3 Chlorure 5.3 1 3300 587
4 Pic systme 6.9
5 Nitrate 9.2 0.1 3730 31
5 Sulfate 12.4 0.5 3160 163
6 Oxalate 14.2 0.1 3010 21

Exprience 17a Analyse de peroxyde dhydrogne sans limination de matrice
Chromatogramme 50 Analyse du peroxyde dhydrogne (30%) sans limination de matrice

Exprience 17b Analyse de peroxyde dhydrogne avec limination de matrice
Chromatogramme 51 Analyse de peroxyde dhydrogne (30%) avec limination de matrice

2 Actate 4.2 8.8 1780
3 Formiate 4.4 0.83 2170
5 Chlorure 5.3 0.86 2960 507
6 Pic systme 7.2
7 Nitrate 9.3 0.15 4560 47
8 Sulfate 12.5 0.44 2520 142
10 Oxalate 14.1 0.05 2480 10
Remarques
Rincer prcautionneusement les rcipients, seringues et systmes plusieurs fois. Utiliser des rcipients en
plastique. Porter tout prix des lunettes de protection! Les pics 1, 4 et 9 nont pas t valus.

Exprience 17c Analyse de peroxyde dhydrogne avec limination de matrice sur une
colonne haute performance
Tableau 75 Paramtres Exprience 17c
Colonne 6.1006.530 Metrosep A Supp 5 (4 x 250 mm)

luant 1 mmol/L NaHCO3 / 3.2 mmol/L Na2CO3
chantillon Peroxyde dhydrogne 30%, suprapur
Mthode exp_17c_s.mtw
Systme asupp5.smt
Dbit 1.0 mL/min
Pression 11 MPa
Introduction de lchantillon 1 mL dchantillon sur la colonne de prconcentration; rincer avec
1 mL deau ultrapure pour llimination de matrice
Autostep avec Fill
Polarit +
Mettre en solution 339 mg de carbonate de sodium (anhydride) et 84 mg dhydrognocarbonate de so-
dium dans 1 L deau ultrapure.
Introduction de lchantillon
Rincer le systme fond avec de leau ultrapure, puis introduire 1 mL dchantillon sur la colonne de
prconcentration et rincer avec 1 mL deau ultrapure.

Chromatogramme 52 Analyse de peroxyde dhydrogne (30%) avec limination de matrice sur la Metrosep A
Supp 5
TTableau 76 Composs Exprience 17c

3 Actate 6.3 6.8 2850 219
4 Formiate 6.7 0.77 8740 123
6 Chlorure 8.9 0.78 17810 380
7 Pic systme 13.0
8 Nitrate 16.4 0.15 19100 37
10 Sulfate 23.3 0.35 16640 86
13 Oxalate 27.0 0.04 12100 7.7
Remarques
Les pics 1, 2, 5. 9, 10, 11 et 12 nont pas t valus.

4.4 Expriences pour la dtermination de cations
4.4.1 Exprience 18 Mtaux alcalins et alcalino-terreux dans leau potable
Leau naturelle contient, outre les gaz dissous O2, N2 et CO2, des sels qui proviennent des sols et pierres.
Ces sels parviennent dans les eaux souterraines par dissolution. Dautres ingrdients de leau naturelle
sont les composs organiques polaires, qui proviennent par exemple des couches dhumus du sol. Une
contamination par des eaux uses est aussi possible et peut expliquer la prsence de diffrents sels et
composs organiques. Les sels les plus importants sont: chlorure, sulfate et les hydrognocarbonates de
sodium, calcium et magnsium.
Un paramtre de base de leau potable est ce que lon appelle la duret de leau. Ce paramtre savre
crucial aussi bien pour une utilisation en tant que produit alimentaire que pour un emploi dans des proc-
ds de rinage ou des applications industrielles.
La duret de leau comprend la somme des concentrations molaires (mmol/L) des ions calcium et magn-
sium. La partie de la duret pouvant tre limine par bullition est appele duret carbonate (autrefois
dnomme galement duret temporaire). La duret permanente est provoque par les ions sulfate et
chlorure, dont les sels de Ca et Mg ne peuvent pas prcipiter lors dune bullition.
Les ions calcium et magnsium forment avec les savons classiques sels de sodium des acides gras
des composs difficilement solubles. Ces derniers ne sont tous deux pas efficaces lors du lavage et se
dposent comme un voile gris sur les textiles. Les poudres de lavage modernes contiennent des sulfa-
tes dalkyle, qui ne forment pas de sels de calcium et magnsium insolubles. Ces derniers possdent
galement des zolithes qui jouent le rle dchangeur ionique et forment une liaison avec les ions Ca2+ et
Mg2+. La prcipitation du CaCO3 difficilement soluble et du carbonate de magnsium basique est ainsi
vite lors dun chauffage.
Selon la rglementation relative leau potable, qui est une implmentation des directives de la CE (80/
778/EWG) pour les eaux potables, on dispose entre autres des valeurs suivantes pour les cations:
NH4+ 0,5 mg/L
Na+ 150 mg/L
K+ 12 mg/L
Mg2+ 50 mg/L
Ca2+ 400 mg/L
Une consommation leve dions sodium provoque une forte pression sanguine chez ltre humain. Le
besoin journalier en Na+ de 1 g est de nos jours largement dpass (3...7 g).
Dans toutes les analyses ralises, il a fallu acidifier les chantillons avec de lacide nitrique (pH 2,5...3,5),
car autrement on obtient une reproductibilit insuffisante pour les cations divalents.
Contenu apprendre
Analyse du produit alimentaire Numro 1
Contrle des donnes sur les bouteilles deaux minrales
Pourquoi doit-on acidifier les chantillons?


luant 4 mmol/L acide tartrique / 0.75 mmol/L acide dipicolinique
chantillon Eau du robinet, acidifie pH = 2,5...3,5 (+ environ 100 L
2 mol/L HNO3 pour 100 mL dchantillon)
Eau minrale, acidifie pH = 2,5...3,5 (+ environ 100 L 2 mol/L
HNO3 pour 100 mL dchantillon)
Mthode exp_18_c.mtw
Systme cation.smt
Dbit 1 mL/min
Pression 7 MPa
Polarit
Mettre en solution, en chauffant 600 mg dacide tartrique et 125 mg dacide dipicolinique dans 100 mL
Chromatogramme 53 Solution standard pour la dtermination de cations dans leau potable


1 Sodium 3.8 0.5 4200 1.5
2 Potassium 6.5 0.2 3090 0.9
3 Calcium 8.4 20 1960 66
4 Magnsium 11.0 5 2700 34
Chromatogramme 54 Eau du robinet de Herisau, Suisse (dilution 1:10)
Tableau 79 Composs Exprience 18 Eau du robinet

1 Sodium 3.8 5 4840 1.4
2 Calcium 8.7 85 2640 29
3 Magnsium 11.2 19 3520 13

Chromatogramme 55 Eau minrale (dilution 1:10)
Tableau 80 Composs Exprience 18 Eau minrale

1 Sodium 3.7 4.3 4190 1.3
2 Potassium 6.4 0.8 6350 0.3
3 Calcium 8.3 344 1520 113
4 Magnsium 10.9 62 2550 43
Remarques
Toutes les solutions doivent tre conserves dans des rcipients en plastique. Pour obtenir une dtermina-
tion correcte du sodium, il faut absolument viter tout contact avec le verre. La valeur pH des solutions
standards et chantillons doit se situer entre 2,5 et 3,5.

4.4.2 Exprience 19 dtermination de mtaux de transition
Pour sparer les ions mtalliques de transition, on ajoute la phase mobile un agent complexant. Ce
dernier rduit la densit de charge et permet une amlioration de la slectivit de la sparation, qui est
relativement basse pour les ions mtalliques de transition de mme charge. En plus de lquilibre entre
rsine changeuse et ion analyte, on obtient grce laddition dagents complexants un quilibre suppl-
mentaire: celui entre lion mtallique et lagent complexant. Cet quilibre est influenc cependant par la
valeur pH de la solution, lorsque diffrents degrs de dissociation de lagent complexant sont possibles ou
lorsque lion mtallique forme un complexe hydroxy.
Les agents complexants frquemment utiliss sont des acides organiques faibles tels que lacide tartrique,
lacide citrique, lacide oxalique, lacide 2,6-pyridinedicarbonique (acide dipicolinique voir chapitre 4.2.6
Exprience 6 Variation de la slectivit laide dagents complexants). Le nombre de ligands L autour
de lion mtallique central Me appel nombre de coordination peut varier, par exemple MeL, MeL2,
MeL3. La charge rsultante peut aussi tre diffrente. Suivant la charge de lion mtallique, des ligands et
leur nombre, il est possible que des complexes cationiques, neutres ou anioniques soient forms. Selon
leur charge, les complexes peuvent alors tre spars en changeurs cationiques ou en changeurs
anioniques. Thoriquement, il est aussi possible dutiliser des changeurs contenant aussi bien des grou-
pes changeurs de cations que des groupes changeurs danions.
En fonction de lagent complexant deux ou trois agents complexants diffrents peuvent galement tre
ajouts la phase mobile et du pH, il est possible dinfluencer et doptimiser la sparation. Les effets
sont difficiles prvoir et peuvent mme se rvler contraires. Ci-dessous, quelques conseils gnraux
sont donns:
Diffrents paramtres (constantes de complexation) influencent la sparation.
Laddition de solvants organiques, par exemple lactone, dans les luants a une influence galement
sur la sparation. Les ions lipophiles luent plus rapidement aprs addition de ces solvants.
Dans la chromatographie par change de cations, lthylne diamine a fait ses preuves en tant quagent
luant. Elle se trouve, dans les conditions standards, sous forme de cation doublement proton.
Laugmentation de la valeur pH provoque, grce une rduction de la charge totale, une diminution des
temps de rtention.
Quand la concentration en ligand augmente dans la phase mobile, deux phnomnes se produisent:
dune part, le dplacement de lquilibre du complexe et dautre part une augmentation de la concen-
tration en ions H+ ou Na+ . Cela acclre le dplacement du complexe des sites dchange chargs
ngativement. La performance de sparation est donc rduite.
Laugmentation de la concentration en ligands a pour effet, dun ct une augmentation du temps de
rtention, car le nombre de coordination du complexe est augment; de lautre ct, les ligands anioniques
libres provoquent llution du complexe mtallique anionique, de telle faon que deux effets opposs
vis vis du temps de rtention existent.
La dtection du complexe peut soit tre effectu par conductivit, soit par photomtrie (drivation post-
colonne).
Avec la dtection conductimtrique, seule la dtection sans suppression chimique entre en question, car
lors de la raction du suppresseur, il pourrait se former des hydroxydes insolubles et les seuls ions luants
disposition sont le carbonate ou lhydroxyde.

Pour la dtection photomtrique, une drivation post-colonne est ncessaire, pendant laquelle un agent
complexant chromophore ajout prend la place de lagent initial (par exemple acide tartrique, acide oxalique,
etc.). Le nouveau complexe form absorbant en UV/VIS est dtect; cependant le maximum dabsorption
du ligand libre ne doit pas se trouver proximit du maximum du complexe. Comme pour la plupart des
agents colors formant des complexes, les maxima dabsorption de chaque mtal de transition-complexe
se trouvent dans des domaines de longueurs dondes diffrents, les limites de dtermination de chaque
mtal sont galement trs diffrentes.
Contenu apprendre
Influence de lluant sur la slectivit
Complexation des ions mtalliques de transition
Agent complexant pour la dtection photomtrique
Photomtrie
Colonne 6.1007.000 IC Colonne cations Nucleosil 5SA (4 x 125 mm)

luant a) 4 mmol/L acide tartrique, 0.5 mmol/L acide citrique, 3 mmol/L
thylne diamine, 5% actone
b) 3.5 mmol/L acide oxalique, 5% actone, pH = 4 (environ 120 L
dthylne diamine)
chantillon Eau du robinet
Mthode exp_19_c.mtw
Systme nucleosil.smt
Dbit 1.5 mL/min
Pression 13 MPa
b) 13 min
Polarit

Exprience 19a Dtermination de mtaux de transition avec un luant contenant de lacide
tartrique, de lacide citrique, de lthylne diamine et de lactone (luant a)
Mettre en solution 600 mg dacide tartrique et 105 mg dacide citrique dans de leau ultrapure. Ajouter 200 L
dthylnediamine et 50 mL dactone, puis complter 1 L avec de leau ultrapure.
Chromatogramme 56 Solution standard 1 pour la dtermination des mtaux de transition
Tableau 82 Composs Exprience 19a Standard 1

1 Nickel 3.4 5 1020 40
2 Zinc 4.4 5 5640 36
3 Cobalt 5.6 5 4370 34
4 Fer (II) 8.1 10 6150 30
5 Calcium 9.8 5 6340 29
6 Magnsium 10.8 5 6390 39

Chromatogramme 57 Solution standard 2 pour la dtermination des mtaux de transition
Tableau 83 Composs Exprience 19a Standard 2

1 Plomb 2.9 5 2680 8.6
2 Nickel 3.4 5 930 43
3 Zinc 4.3 5 5510 37
4 Cobalt 5.6 5 4310 34
5 Cadmium 8.6 5 6600 15
6 Manganse 9.9 10 6270 45

Chromatogramme 58 Analyse de leau du robinet (dilution 1:10)
Tableau 84 Composs Exprience 19a Eau du robinet

1 Zinc 4.2 1.2 6360 0.9
2 Calcium 9.8 89 5750 53
3 Magnsium 10.6 19 7460 15

Exprience 19b Dtermination des mtaux de transition avec un luant contenant de
lacide oxalique, de lthylne diamine et de lactone (luant b)
Mettre en solution 315 mg dacide oxalique dans de leau ultrapure, ajouter 50 mL dactone et complter
1 L avec de leau ultrapure. Ajuster pH = 4 avec de lthylne diamine (environ 120 L).
Chromatogramme 59 Solution standard pour la dtermination des mtaux de transition

1 Fer 2.2 10 2110 50
2 Manganse 4.0 10 1830 110
3 Magnsium 7.5 5 3110 98
4 Calcium 12.3 5 6000 45

Chromatogramme 60 Analyse de leau du robinet (dilution 1:10)
TTableau 86 Composs Exprience 19b Eau du robinet

1 Magnsium 7.3 21 4690 41
2 Calcium 12.4 91 4780 83
Remarques
Le calcium et le manganse coluent lors de lutilisation de lluant a. Avec lluant b, le calcium et le
manganse sont spars, le nickel, le zinc et le cobalt sont fortement complexs et luent dans le pic
frontal

4.4.3 Exprience 20 Contaminations prsentes dans le gel de silice dtermination des
ions calcium et magnsium
Le gel de silice est produit par exemple par hydrolyse du silicate de sodium aprs une limination presque
totale de leau. Il possde la structure suivante:
Figure 36 Structure du gel de silice
En plus de son utilisation comme milieu dadsorption technique, le gel de silice est aussi bien employ en
chromatographie gazeuse quen HPLC.
En chromatographie gazeuse, on utilisait autrefois et aujourdhui encore, mais en plus faible quantit
exclusivement des colonnes tasses. Pour ce faire, on dpose une phase liquide, par exemple de lhuile de
silicone sur un support rugueux, par exemple sur du gel de silice. Le nombre de plateaux thoriques de
ces colonnes est trs faible, comparativement au nombre de plateaux thoriques des colonnes capillaires
utiliss frquemment de nos jours.
Dans le domaine de la chromatographie liquide haute pression (HPLC), le gel de silice est utilis en tant
que phase stationnaire ou en tant que matriau support pour les phases dadsorption, les phases inverses
(Reversed Phase, RP), les phase normales et la chromatographie ionique. Pour certaines de ces applica-
tions, il est ncessaire de modifier la surface du gel de silice avec des groupes fonctionnels (par exemple
avec des groupes octadcyle ou des groupes changeurs dions).
galement en chromatographie dadsorption, le gel de silice peut tre employ comme phase station-
naire. La sparation chromatographique est base sur des liaisons diple-diple induit, diple-diple, par
ponts hydrogne et complexations . La chromatographie par adsorption est utilise pour la sparation de
substances non polaires, qui ne sont pas trs solubles dans leau.
Pour la chromatographie RP, les groupes silanol libres du gel de silice sont rendus hydrophobes par
liaison chimique avec des chanes alkyles longues (par exemple groupes octyle ou octadcyle):
Figure 37 Raction du gel de silice avec un

chlorosilane (R = C8H17 jusqu C18H37)
Lors de la transformation, il reste des groupes silanol qui peuvent adsorber des composs polaires et
provoquer un phnomne appel peak tailing (dformation du pic sous forme de trane). Les groupes
restants de silanol peuvent tre dsactivs avec le trimthyle chlorsilane en anglais: end capping.
En chromatographie phases normales les restes polaires sont lis chimiquement aux groupes silanol,
par exemple:
(CH2)nC N ou (CH2)n NH2

Avec cette phase stationnaire polaire, on utilise une phase mobile faiblement polaire ou apolaire pour la
sparation chromatographique. En chromatographie RP, qui reprsente environ 75% de toutes les applica-
tions HPLC, les polarits sont inverses et une phase stationnaire apolaire est employe avec une phase
mobile polaire. Le nom de phase inverse (Reversed Phase) est ainsi expliqu historiquement, car cette
mthode na t dveloppe que plus tard.
Dans la chromatographie ionique, lchangeur de cations utilis pour lanalyse dions alcalins est le gel de
silice sur lequel des groupes dacide sulfonique sont fixs.
La contamination du gel de silice par des ions mtalliques en chromatographie est dune importance
particulire, car elle peut provoquer des interactions non spcifiques, et donc des valeurs non nulles dans
le blanc. Pour la dtermination de ces contaminations, on utilise un changeur de cations fortement acide:
les cations monovalents luent dans le volume mort et seuls les cations divalents sont spars. Le Fe(III)
doit, avant lanalyse tre rduit en Fe(II) par lintermdiaire de lacide ascorbique.
Contenu apprendre
Contrle de qualit
Exprience supplmentaire: dopage de lextrait avec Fe(III); dtermination avec et sans addition dacide
ascorbique (vitamine C)
Colonnes de sparation HPLC base de gel de silice
Colonne 6.1007.000 IC Colonne cations Nucleosil 5SA (4 x 125 mm)

luant 4 mmol/L acide tartrique, 0.5 mmol/L acide citrique, 3 mmol/L
thylne diamine, 5% actone
chantillon Gel de silice (solution 5%)
Mthode exp_20_c.mtw
Systme nucleosil.smt
Dbit 1.5 mL/min
Pression 13 MPa
Polarit
Mettre en solution 600 mg dacide tartrique et 105 mg dacide citrique dans de leau ultrapure. Ajouter 200 L
dthylne diamine et 50 mL dactone, puis complter 1 L avec de leau ultrapure.

Chromatogramme 61 Solution standard pour la dtermination de cations dans le gel de silice

1 Calcium 9.6 0.5 6990 3.1
2 Magnsium 10.5 0.1 7260 0.7

Chromatogramme 62 Dtermination de cations dans le gel de silice
Tableau 89 Composs Exprience 20 Gel de silice

Fer 8.1 n.d.
1 Calcium 9.7 9.4 6850 2.9
2 Magnsium 10.6 1.4 10100 0.4

4.4.4 Exprience 21 Cosmtiques et protection contre la corrosion: dtermination
dthanolamines et mtaux alcalins
Les trois thanolamines suivantes, dont les noms systmatiques sont aminothanol, iminodithanol et
nitrilotrithanol, sont fabriques par raction de lammoniaque avec de loxyde dthylne.
Monothanolamine Dithanolamine
Trithanolamine
Toutes les trois substances sont utilises entre autres pour liminer CO2 et H2S de mlanges de gaz, par
exemple pour liminer le dioxyde de carbone de gaz de synthse et lors de la synthse de lammoniaque
ou encore pour llimination du sulfure dhydrogne en provenance des gaz de raffinerie.
une temprature plus leve, CO2 est libr de nouveau et lthanolamine NR3 retourne dans le proces-
sus dabsorption.
LH2S libr de nouveau haute temprature est oxyd en soufre liquide dans des units Claus, o il est
converti en acide sulfurique en passant par SO2 et SO3.
La monothanolamine (maximum allowable workplace concentration = concentration maximale accepta-
ble au travail = 3 ppm) est utilise comme ester dacide gras dans les tensio-actifs. La dithanolamine est
prsente dans les produits dentretien pour les meubles et les sols, crmes pour les chaussures et lubri-
fiants.
La trithanolamine forme avec les acides gras des savons de trithanolamine, par exemple avec lacide
starique C17H35COOH. Ces derniers sont facilement solubles dans leau et les huiles minrales et sont
pour cette raison employs en tant dmulsifiants. Ils peuvent galement faire partie de prparations cos-
mtiques (par exemple dans la mousse raser) .
La monothanolamine est utilise dans les centrales atomiques en tant quinhibiteur de corrosion, car elle
maintient une valeur pH lgrement alcaline et joue le rle de tampon pour les excs dions H+.

Pour leur dtermination par chromatographie ionique les thanolamines sont protones par laddition dacide
et peuvent tre dtermines comme drivs de lammonium.
Contenu apprendre
Dtermination de cations inorganiques et organiques
Modification de la slectivit par addition dagents complexants
Dtermination damines par chromatographie ionique

luant a) 4 mmol/L acide tartrique / 0.75 mmol/L acide dipicolinique
b) 4 mmol/L acide tartrique / 0.5 mmol/L acide dipicolinique
chantillon Standard (thanolamine, trithanolamine + cations standards)
Mthode exp_21_c.mtw
Systme cation.smt
Dbit 1 mL/min
Pression 6 MPa
b) 14 min
Polarit
a) Mettre en solution, en chauffant, 600 mg dacide tartrique et 125 mg dacide dipicolinique dans 100
mL deau ultrapure, puis complter 1 L avec de leau ultrapure.
b) Mettre en solution, en chauffant, 600 mg dacide tartrique et 84 mg dacide dipicolinique dans 100 mL

Chromatogramme 63 Solution standard 1 luant a
Tableau 91 Composs Exprience 21 Standard 1 (luant a)

1 Sodium 3.8 2 4520 6.8
2 Ammonium 4.3 2 4340 6.8
3 Monothanolamine 4.9 7 4120 10.8
4 Potassium 6.4 5 3070 7.9
5 Trithanolamine 9.0 20 2230 6.9

Chromatogramme 64 Solution standard 2 luant a
Tableau 92 Composs Exprience 21 Standard 2 (luant a)
Pic Composs tR [min] Conc. Nbre Surface

[mg/L] plateaux [S/cm*s]
1 Sodium 3.7 2 4500 7.2
2 Ammonium 4.3 2 4190 7.0
4 Potassium 6.4 5 2930 8.6
5 Calcium + Trithanolamine 8.7 5 + 20 2070 24
6 Magnsium 11.0 5 2970 32

Chromatogramme 65 Solution standard 2 luant b
Tableau 93 Composs Exprience 21 Standard 2 (luant b)

1 Sodium 3.9 2 4700 7.2
2 Ammonium 4.5 2 4110 7.0
4 Potassium 6.6 5 2920 8.4
5 Trithanolamine 9.3 20 2400 7.3
6 Calcium 10.8 5 3240 16
7 Magnsium 12.2 5 2820 32
Remarques
Lorsque lluant a est utilis, le calcium et la monothanolamine coluent.
tion correcte du sodium, il faut tout prix viter tout contact avec le verre.

4.4.5 Exprience 22 Mtaux alcalins et alcalino-terreux dans le vin
Les matires minrales contenues dans le jus de fruit se trouvent surtout sous la forme de phosphate de
calcium, magnsium et potassium. Les concentrations de ces composs varient entre 3 et 5 g/L. La
teneur en matire minrale du vin, aussi appele cendre, est infrieure celle du jus de fruit, car une
partie des matires minrales est consomme lors de lchange de matire avec la levure. De plus, la
teneur en matire minrale est rduite par la sparation de sels tartrates. Ainsi, les vins ne contiennent
quenviron 1,8 2,5 g/L de cendre. Les composs cationiques importants sont donns sous forme
doxydes et sont K2O (environ 40%), MgO (environ 6%), CaO (environ 4%) et Na2O (environ 2%).
(voir chapitre 4.3.5 Exprience 12 Acides organiques dans le vin)
Contenu apprendre
Analyse relative aux produits alimentaires
Analyse des procds contrle de la prcipitation de lacide tartrique

luant 4 mmol/L acide tartrique / 0.75 mmol/L acide dipicolinique
chantillon Vin blanc (Fechy, Suisse), vin rouge (Pinot Noir, Suisse)
Mthode exp_22_c.mtw
Systme cation.smt
Dbit 1 mL/min
Pression 6 MPa
Polarit
Mettre en solution, en chauffant 600 mg dacide tartrique et 125 mg dacide dipicolinique dans 100 mL
deau ultrapure, puis complter 1L avec de leau ultrapure.

Filtrer et diluer les chantillons de vin (1:10).

Chromatogramme 66 Solution standard pour la dtermination de cations dans le vin

1 Sodium 3.7 1 4360 3.5
2 Potassium 5.9 100 1480 180
3 Calcium 8.6 5 2950 16
4 Magnsium 10.8 10 2150 66
Remarques
tion correcte du sodium, il faut tout prix viter tout contact avec le verre. La valeur pH des solutions
standards et des chantillons doit se situer entre 2,5 et 3,5.

Chromatogramme 67 Dtermination de cations dans le vin blanc (dilution 1:10)
Tableau 96 Composs Exprience 22 Vin blanc

1 Sodium 3.7 24 4220 8.4
5 Potassium 6.0 590 1860 106
6 Calcium 8.6 72 2920 23
8 Magnsium 11.0 59 2880 39
Remarques
Les pics 2, 3, 4 et 7 nont pas t valus.

Chromatogramme 68 Dtermination de cations dans le vin rouge (dilution 1:10)
Tableau 97 Composs Exprience 22 Vin rouge

1 Sodium 3.7 10 2000 3.6
6 Potassium 5.8 1380 1300 248
8 Calcium 8.6 50 3030 16
10 Magnsium 10.8 80 2520 53
Remarques
Les pics 2, 3, 4, 5, 7 et 9 nont pas t valus.

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Monographie

Pratique de la chromatographie ionique

Dipl.-Ing. Claudia Eith

Tous droits rservs, y compris de traduction.

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 1

1 Les auteurs .................................................................................................................................. 4

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 3

Kai Henning Viehweger

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 5

Tableau 1 Histoire de lchange ionique et de la chromatographie ionique en rsultant

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 7

Figure 1 Rpartition des mthodes

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 9

Facteur de rtention, slectivit et rsolution

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 11

3.2.2 Concepts thoriques de description de la chromatographie

Le modle du nombre de plateaux thoriques

Le nombre de plateaux effectifs n, se rapprochant de faon plus relle de la performance de sparation

La thorie dynamique (selon van Deemter)

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 13

Figure 4 Reprsentation des termes individuels

Chromatographie liquide moderne (CL)

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 15

Principes de sparation dans la CL

3.3 Principes de base de la chromatographie ionique (CI)

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 17

3.3.2 Lchange ionique

Figure 6 Reprsentation schmatique du processus dchange ionique dans la chromatographie ionique.

3.3.3 La formation de paires dions

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 19

3.3.4 Lexclusion ionique

3.4 Modles de rtention de la chromatographie ionique

3.4.1 Modles de rtention pour la chromatographie danions

Modles de rtention pour luants avec un anion

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 21

Ceci signifie que lquation 21 peut tre convertie en:

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 23

En considrant lquation 20, on obtient tout dabord la slectivit AB,

et ensuite, aprs conversion, on a les quations 31a et b,

(32) resp. (33)

Modles de rtention pour les luants avec plusieurs anions

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 25

3.4.2 Modles de rtention pour la chromatographie de cations

Modle de rtention avec un cation

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 27

On obtient la forme logarithmique de lquation 47, de faon analogue lquation 25:

Calcul des valeurs M

Calcul de la dissociation acide

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 29

3.5 Systmes de dtection utiliss en chromatographie ionique

3.5.1 Mthodes de dtection lectrochimiques

o est la conductivit en S cm1, la conductivit limite en S cm2 (z mol)1 et c la concentration en z mol

Introduction la pratique de la chromatographie ionique 31

Peak cAnalyte (-Cl -CO 2) Peak cAnalyte (76 72)

Peak cAnalyte (-Cl -Phthalate) Peak cAnalyte (76 38)

Peak cAnalyte (-Cl + +H+) Peak cAnalyte (76 + 350)

Peak cAnalyte 426

Peak cAnalyte (300)

Peak cAnalyte 248