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ANTIBIOGRAMA

MSP Lilia E. Fragoso Morales 28 de marzo de 2012

Pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos


CLSI Pruebas de susceptibilidad por el mtodo de difusin con discos

Materiales

Nefelmetro de Mac Farland 0.5 que equivale aproximadamente a 1x108 ufc/ml Agar de Mueller Hinton Caldo Mueller Hinton, caldo tripticasa de soya o solucin salina Sensidiscos estandarizados producidos por el propio productor del antibitico o de casas comerciales. Cepas Bacterianas ATCC Cultivos puros para aplicar las pruebas

Inoculacin de las placas


Antes de 15 min de haber ajustado la turbidez inocular las placas Tomar con el hisopo la muestra del tubo presionando en las paredes del tubo para eliminar el exceso Rotar el hisopo por la superficie del agar por lo menos tres veces para extender el inculo, rotando la placa 60 Aplicar los discos entre 3 y 15 min despus No deben estar ms cerca de 24 mm de centro a cetro Aplicar los discos con una pinza estril No aplicar ms de 5 discos por placa de 100 mm de dimetro No mover los discos una vez que han hecho contacto con el medio Incubar por 18 a 24h y los EMR y los Enterococos resistentes a vancomicina por 6 a 8 hs ms

Lectura de las placas

Con la ayuda de una lmpara mida el dimetro con la ayuda de un Bernier En los medios opacos como MH suplementado con sangre remover la cubierta y leer con la lmpara arriba Leer la zona de inhibicin y no confundir con la zona de inhibicin de la hemlisis Cuando se emplee un mtodo de prueba como H. influenza y N gonorrhoeae, reportar que se realiz por un proceso no estandarizado. S pneumoniae y otros estreptococos se prueban en AMH adicionado con sangre de carnero al 5%

Procedimiento para la dilucin en Agar


El caldo MH debe tener un pH entre 7.2 y 7.4 a 25C Si se van a probar cepas para a resistencia a meticilina suplementar el agar con NaCl (4% w/v; 0.68 mol/L) y 6 g de oxacilina por ml Observar con luz la aparicin de colonias pequeas Reportar la resistencia como resistencia a todas las drogas beta lactmicas (incluyendo cefalosporinas e imipenem) y puede significar resistencia a otros agentes como aminoglycocidos, eritromicina, clindamicina y tetraciclinas

Cepas de referencia

Enterococcus faecalis ATCC 29212 Escherichia coli ATCC 35218 Haemophilus influenza ATCC 49247 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Streptococcus pneumoniae ATCC 49619
El control de calidad debe hacerse cada vez que se inicie un nuevo lote de medio, discos, etc Si cualquier valor esta fuera de lo normal Cada inicio de semana Si los resultados son errneos cada da hasta controlar la falla

Consideraciones importantes

Los antibiticos beta lactmicos, imipenem y cido clabulnico oxacilina son los ms lbiles Los discos de los AB anteriores se mantienen inalterados una semana despus de descongelarlos Antes de usar las placas de MH incubarlas a 37 durante un tiempo no mayor de 30 Las placas de 100 mm de dimetro deben medir 4 mm de profundidad La sangre contiene timidina (excepto la de caballo), la cual interfiere con la prueba para SxT, por lo que hay que probar el medio con la cepa de Enterococcus faecalis ATCC29212. Una zona > de 20mm indica aceptabilidad

Interpretacin

Susceptible Intermedio Resistente

Programa de resistencia bacteriana en Mxico. Paneles de antimicrobianos. Programa 2002


Haemophilus influenzae
Nitrocefin

1 eleccin

Ampicilina Cloramfenicol SXT Eritromicina Levofloxacina Ampicilina/sulbactam

2 eleccin

Claritromicina Imipenem Ciprofloxacina Ceftriaxona

Programa de resistencia bacteriana en Mxico. Paneles de antimicrobianos. Programa 2002


Streprococcus pneumoniae

Cefotaxima Cloramfenicol Eritromicina Levofloxacino Oxacilina (< 19 mm de inhibicin reportar penicilino resistente) Tetraciclinas SXT Vancomicina

Programa de resistencia bacteriana en Mxico. Paneles de antimicrobianos. Programa 2002


Enterococcus sp

Ampicilina Ciprofloxacino Gentamicina 120 Linezolid Nitrofurantoina (Uro) Piperacilina/tazo Quinupristina Vancomicina

1 eleccin

Ampicilina/sulbactam 2 eleccin

Ampicilina Gentamicina Ciprofloxacina Nitrofurantoina

Vancomicina Levofloxacino Teicoplanina B lactamasa

Programa de resistencia bacteriana en Mxico. Paneles de antimicrobianos. Programa 2002


Staphylococcus spp

Ciprofloxacino Clindamicina Eritromicina Gentamicina Linezolid Oxacilina Rifampicina SXT Vancomicina

1 eleccin

2 eleccin

Oxacilina Eritromicina Gentamicina Clindamicina SXT Levofloxacino cefalotina Ciprofloxacina Vancomicina Amikacina Netilmicina Teicoplanina

Programa de resistencia bacteriana en Mxico. Paneles de antimicrobianos. Programa 2002


Streptococcus pyogenes

Ampicilina Azitromicina Cefotaxima Clindamicina Claritromicina Cloramfenicol Eritromicina Ofloxacino Tetracicinas SXT Vancomicina

Streptococcus sp no neumococo 1 eleccin

2 eleccin

Oxacilina Eritromicina Tetraciclina SXT Levofloxacina Clindamicina penicilina Vancomicina Cefotaxima ofloxacino

Programa de resistencia bacteriana en Mxico. Paneles de antimicrobianos. Programa 2002


E. coli, Proteus sp y Morganella

Amikacina Ampicilina Ampicilina/sulbactam Cefepime Ceftazidima Ceftriaxona Ciprofloxacino Gentamicina Imipenem Nitrofurantona (uro) SXT Piperacilina Tazobactam

1 eleccin

Amikacina Ampicilina Amoxicilina clavulanato SXT Cefalotina Ciprofloxacina Nitrofurantoina

2 eleccin

Netilmicina Imipenem Levofloxacina cefepime

lactamasas de espectro extendido son resistentes a penicilinas, cefalosporinas y aztreonam

Programa de resistencia bacteriana en Mxico. Paneles de antimicrobianos. Programa 2002


Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Citrobacter

1 eleccin

Amikacina Aztreonam Cefepime Ceftazidima Ceftriaxona Ciprofloxacino Gentamicina Imipenem Nitrofurantona (uro) SXT Piperacilina/tazo

Amikacina Ampicilina Amoxicilina clavulanato SXT Cefalotina Ciprofloxacina Nitrofurantoina

2 eleccin

Netilmicina Imipenem Levofloxacina cefepime

lactamasas de espectro extendido son resistentes a penicilinas, cefalosporinas y aztreonam

Programa de resistencia bacteriana en Mxico. Paneles de antimicrobianos. Programa 2002


Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter

Amikacina Ampicilina/sulbactam Aztreonam Cefepime Ceftazidima Ciprofloxacino Gentamicina Imipenem Ticarcilina/clavulanato Trimetoprim/sulfametoxazol Piperacilina/tazo

1 eleccin

2 eleccin

Amikacina Gentamicina Ceftazidima Aztreonam Ticarcilina/clav Ciprofloxacina Cefepime Piperacilina/tazo Imipenem Levofloxacina Ceftazidima

IMIPENEM ACINETOBACTER SXT- STENOTROPHOMONAS

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