Cap 7-Control Del Crecimiento
Cap 7-Control Del Crecimiento
Cap 7-Control Del Crecimiento
Procesos de Descontaminacin
Desinfeccin: Reduccin del nmero de microorganismos en un ambiente inanimado Esterilizacin. Proceso cuyo fin es lograr un producto o lote con AUSENCIA DE TODA FORMA DE VIDA Asepsia: Inhibicin o destruccin de microorganismos en la superficie de tejido vivo tendiente a prevenir una infeccin
SISTEMAS DE CONTROL
Segn el mecanismo de accin Microbiocidas.
Alteracin de permeabilidad de membrana. Alteracin de protenas y cidos nucledos
Microbiostaticos Segn el mtodo de tratamiento. Fsicos: Calor, Fro, Radiacin, Filtracin, Desecacin, Elevada presin osmtica Qumicos: halgenos, ozono, fenol,
2.1. El calor
El tratamiento por el calor es simple, barato y efectivo. Es el mejor mtodo si el material a tratar no se daa por altas temperaturas. La ventaja del calor es que penetra a travs del objeto y puede matar todos los mo presentes en el mismo. Mecanismo: desnaturalizan las protenas. La esterilizacin puede realizarse por: a) Calor seco. La desnaturalizacin es por oxidacin. El calor seco se aplica mediante el flameado y mediante hornos. Flameado. Paso de una pipeta o la boca del matraz por la llama del mechero. La esterilizacin con aire caliente requiere; 171C durante una hora, 160C durante 2 horas, o 121C durante 16 horas; los objetos de gran tamao requieren ms tiempo.
b) Calor hmedo.
Se realiza en autoclaves. Es ms efectivo que calor seco (T menores) y penetra ms rpidamente. El agua hirviendo mata la mayora de las bacterias y hongos e inactiva muchos virus en slo pocos minutos. Las endosporas sobreviven a la ebullicin. Se esteriliza a 121C por 15 min. Mecanismo. Desnaturaliza las protenas, porque rompe los enlaces debiles Procesos industriales. Pasteurizacin Esterilizacin. Tyndalizacin (fraccionada por vapor)
Calor hmedo.
Parmetros termicos
La resistencia al calor vara entre los mo. Estas diferencias se expresan por: (a)Punto de muerte trmica (PMT) La temperatura ms baja requerida para matar a todos los mo de un medio lquido en 10 minutos. (b) Tiempo de muerte trmica (TMT), el menor tiempo necesario para que todas las bacterias de un caldo mueran a una temperatura determinada. PMT y TMT son guas tiles que indican la severidad del tratamiento requerido para matar a una poblacin dada
(c) El tiempo de reduccin decimal (TRD o valor D) Es el tiempo, en minutos, en el que se destruye el 90% de la poblacin de bacterias a una temperatura determinada. El valor D es especialmente til en la industria de conservas enlatadas.
D = -1 pend.
T m (C e p ) 7 .7 1 7 0 5 5 5 5 6 0 6 0
D
1 s .2 3 0 -4 0m 6 8 in 4 m .8 in 1 .6m 4 in 2 m .5 in 7 .5m 2 in
Ejemplo.1
Determinar el valor D116 de un m. o. que sometido a la accion del calor arroja los siguientes datos de conteo:
Tiempo (min) 5 10 15 20 25
2.5315 1.8129
log X
2 ,5 2 1 ,5 1 0 ,5
0 0 5 10 15 20 25 30 tie m p o (m in )
5 10 15 20 25
Mtodo analitico
D = (t1 t2)
Log (Xo/Xi)
Con los datos de la ltima tabla. (tiempo de 10 a 20 min) D116 = (20- 10)
(1.8775- 0.6785)
D116 = 8.63 minutos A la T de 116C, y en las condiciones de ensayo, la poblacin del m.o. disminuye a la decima parte cada 8.63 min.
Ejemplo 2.
El valor de D120 para un m.o es de 3 minutos, si tenemos una contaminacin inicial de 8x1012 cel/gr Qu valor de contaminacin tendr la muestra despues de un tratamiento termico a 120 por 18 min? Rpta. 8x106 cel/gr.
Pasteurizacin
LHT, (Low temperature holding) 30 minutos a 63C HTST, (High temperature short time). 15 segundos a 72C . UHT, 140C-150C durante 1 seg. Destruye patgenos (Coxiella burnetti, Mycobacterium tuberculosis) y reduce flora de deterioro Usos: leche, lcteos, jugos de fruta
Tyndalizacin
Calentamiento: 50-100 C por 30 min. Incubacin a 37C por 24 Hr. 3 das sucesivos Proceso discontinuo con perodos de incubacin intercalados Usos: esterilizacin de productos de baja resistencia trmica, cuando no existe otra opcin
Esterilizacin
Condiciones : 121C durante 15 minutos, con cargas iniciales bajas 121C durante 30 minutos, con cargas iniciales altas
120 110
2
15
3
Tiempo (min.)
ar u are p m T t e
100
Etapa de enfriamiento
frio
Congelacin (menos de 0 C) Las levaduras pueden explotar por la formacin de cristales Las bacterias, son tan pequeas que no se pueden formar cristales de hielo en su interior, por esta razn no mueren. En lugar de ello, son destruidas por la elevada fuerza osmtica que se origina cuando el agua de su entorno se congela La congelacin es ms daina para las bac-terias cuando se realiza lentamente; los cristales de hielo que se forman y crecen rompen la estructura celular y molecular de las bacterias.
Radiacion ionizante:
Rayos X: 0.1 40 nm (ionizante) Rayos gamma: 0.001 a 0.1 nm (ionizante) Tienen gran poder de penetracin. Los productos se irradian en su embalaje final, evitando recontaminacin. Para tratar materiales sensibles al calor. Ejemplo: radiacin de frutas, vegetales y conservas para exportacin. Efecto: (60Co, 137Cs), maquinas de rayos X (5 MeV) Provocan la formacin de iones. Rompen la estructura proteica y el ADN. Algunos m.o resisten RI, como: deinococos radiodurans.
Desventajas: Equipo especial, personal entrenado No todos los materiales resisten el tratamiento Reacciones no deseadas en alimentos
Radiaciones no ionizantes: UV
Caractersticas: Baja energa, sin poder penetrante Mxima eficiencia biocida a 250-260nm. A 254 nm penetra la pared celular y se absorbe en ADN y ARN, con formacin de dmeros de timina. Generacin de UV: lmpara de arco de mercurio a baja presin. No forma compuestos toxicos. Como la luz solar es rica en radiacin UV, los mo han desarrollado mecanismos de fotorreactivacin para reparar los daos causados en el DNA por UV.
Control de microorganismos con radiaciones Una lmpara ultravioleta se utiliza para descontaminar la superficie del interior de una cabina de seguridad biolgica.
Lampara de mercurio
Microondas
Ondas de radio de alta frecuencia. (TV, radar, celulares). Los metales reflejan las microondas. Ondas de 2450 MHz, energa de 500 a 1900 Watts. Las microondas son emitidas por un tubo electrnico llamado magnetn. En el horno, estas ondas son dispersadas por un ventilador interno, y se reflejan en las paredes metlicas del horno. Para mejorar el calentamiento uniforme, el horno cuenta con una base giratoria. Las molculas de agua vibran con las ondas, lo que produce calentamiento. Tiempos de esterilizacin - 4 min para 1000-1100W. 5 min para 800950W. 8 min para 500-750W.
La filtracin
Los mo, mas no virus, pueden ser eliminados por filtracin. Para materiales termolbiles y sensibles a radiaciones. Tamao del poro: 0.005-1. En la industria, se usa en farmaceutica. Se utiliza para tratar soluciones de vitaminas, antibiticos y otras sustancias, termolabiles. Desinfeccin y esterilizacin (0.22 m) Materiales: nylon, acero inoxidable, steres de celulosa
La Desecacin
La desecacin (eliminacin de agua), puede llevarse a cabo por evaporacin o por sublimacin. Casi no se utiliza en el laboratorio porque causa dao qumico, pero si en la industria de alimentos. La liofilizacin, elimina el agua mediante sublimacin. La sublimacin evita los daos qumicos causados por el secado mediante calor. Sin embargo, es un mtodo caro y tiene un uso industrial limitado.
Indice de efectividad
El coeficiente fenlico, es un valor experimental que se realiza a las sustancias que tienen propiedades biocida, tomando como referencia la capacidad biocida del fenol
Halogenos: Cloro
El cloro es electronegativo. Tiene fuerte tendencia a captar electrones de otros compuestos. Alto potencial de oxidacin. Oxida los enlaces peptdicos y desnaturaliza las protenas. Al aadir Cl al agua, se forma acido hipocloroso: Cl2 + 2H2O -> HOCl + H3O + Cl A PH>8, el acido hipocloroso en parte se descompone en iones de hipoclorito. HOCl + H2O -> H3O+ + OCl Este se descompone en tomos de cloro y oxigeno: OCl- -> Cl- + O Acido hipocloroso ms reactivo que el ion hipoclorito. El cloro existente en el agua como cido hipocloroso (HOCl) o in hipoclorito(OCl-)se define como Cloro Libre Disponible.
La pared celular de mo patgenos est cargada negativamente. Puede ser penetrada por HOCl neutro, en lugar del Ion hipoclorito cargado negativamente. Mecanismo fundamental: Oxidacin de protenas, por interaccin con los grupos sulfhidrilo (SH) presentes en las mismas. El espectro de accin es amplio, alcanzando incluso actividad antiviral y esporicida (segn la concentracin y pH). Es muy soluble en agua (3L Cl/L agua). Accin bactericida en dosis de 0,2-0,4 mg/L.
Dixido de cloro
El ClO2 se usa en la desinfeccin del agua potable (E.E.U.U. desde 1944). Elimina formacin de THM (trihalomethanos) del cloro. Gas explosivo, debe producirse in-situ. El ClO2 es selectivo, solo reacciona con compuestos de sulfuro reducidos, aminas secundarias y terciarias, y reactivos orgnicos reducidos. Esto permite menor dosificacin de ClO2. Dosis de 0.5 y 2 mg/L de ClO2 con tiempo de contacto de 15 a 30min, es requerida para la pre-oxidacion y reduccin de las sustancias orgnicas. Para la post desinfeccin, se aplicar de 0.2 a 0.4mg/L . Capacidad de matar a esporas, virus y hongos en concentraciones bajas. No afecta gusto, olor o aspecto.
Hipoclorito
Es la sal del cido hipocloroso. Se aplica como el hipoclorito de sodio (NaClO) e hipoclorito de calcio (Ca(ClO)2). ClONa + H2O ---- HONa + HOCl Funcionan de la misma manera que el cloro, aunque son algo menos eficaces. Desventajas. a) Tienen efectos adversos para la piel. b) Se inactiva en presencia de materia orgnica. c) Son corrosivos para metales y otros materiales. d) Dejan fuerte olor a cloro. e) Baja estabilidad en solucin. f) En piscinas forman cloraminas, que son responsables del ataque a los tejidos de la piel, ojos (ojos enrojecidos de los nios) y pulmones y se sospecha sea carcinognico.
Ozono
Es inestable. Agente oxidante ms fuerte y un efectivo biocida. Se genera por descarga elctrica o irradiacin UV de aire con oxgeno 3 O2 ==== 2 O3 Su vida media es de cerca de 20 min. Dosis en agua: 0,5 ppm. Durante la oxidacin, el ozono se divide en O2 y un tomo de O, muy reactivo: O3 - > O2 + (O) La ozonizacin eleva la concentracin de oxigeno disuelto del agua hasta valores cercanos a la concentracin de saturacin.
Estable
Alta Alta
Alta Moderada
Alta N/A
Alta Alta
Pre sedimentacin El agua del rio es captada a travs del canal de Zamacola Desarenadores: slidos gruesos, arena etc. Luego es llevada a la planta de la tomilla por medio de tuberas Pre cloracin Se acondiciona el agua cruda aplicando cloro contra las algas y para disminuir la contaminacin bacteriana.
Coagulacin En esta etapa se aplican coagulantes y floculantes, como: Sulfato de Aluminio o policloruro de aluminio, y Polielectrolitos y a veces cal. Decantacin Los coagulos (FLOCKS) con mayor peso y volumen se van al fondo de los sedimentadores eliminndose por gravedad.
Perxido de hidrgeno
Oxidacion de proteinas y enzimas. Se utiliza como antisptico dbil (al 3%) para la limpieza de heridas y para desinfectar el material mdico y lentes de contacto. Al hechar H2O2 a las heridas se produce un burbujeo debido a la produccion de O2, por la descomposicion del H2O2 a H2 + O2, por la enzimas catalasa presentes en el cuerpo humano. Algunos Staphilococos poseen peroxidasa y son resistentes al agua oxigenada.
Alcoholes
Matan microorganismos porque desnaturalizan las protenas y desorganizan los lpidos de sus membranas plasmticas. No actan sobre las endosporas. El etanol y el isopropanol son utilizados como desinfectantes y antispticos clnicos.
El fenol
Desnaturaliza las protenas, y desorganiza los lpidos. En concentraciones superiores al 1 % el fenol es antibacteriano. Compuestos fenlicos: No es usado muy usado como desinfectante por su olor desagradable, por ser muy irritante. Los derivados del fenol ms utilizados son el hexaclorofeno (compuesto difenlico) y los cresoles (alquil fenoles). Los fenoles clorados primero se adsorben a la pared celular. Despus de la adsorcin se difunden a la clula donde quedarn en suspensin y precipitarn las protenas.
Hexaclorofeno: compuesto fenlico presente en los jabones carblicos. Se usaba en bao neonatos para controlar infecciones de Sthaphilococcus en soluciones al 3%. En los 70 se demostr que el hexaclorofeno se absorbe en la piel. Y nios que se baaban por mas de tres dias podan sufrir dao cerebral. ha sido reemplazado por la clorhexdina, es menos txica para humanos.
Clorhexidina
A bajas concentraciones produce una alteracin de la permeabilidad osmtica de la membrana e inhibicin de las enzimas del espacio periplasmtico. A concentraciones altas origina precipitacin de protenas y cidos nucleicos. Su estabilidad es buena a temperatura ambiente y pH entre 5 y 8, pero muy inestable en solucin. Necesita ser protegido de la luz. Con el calor se descompone en cloroanilina.
Clorhexidina
Formulaciones y formas de uso.
La clorhexidina se usa a diferentes concentraciones. En antisepsia de la piel: En solucin acuosa al 4% con base detergente para lavado corporal prequirrgico del paciente y lavado prequirrgico de manos. En solucin acuosa al 5% para antisepsia del campo quirrgico, sobre heridas a concentracin de 0,1-0.5% en solucin acuosa. En la higiene bucal, no suele emplearse por ser muy amarga. Es insoluble en agua, pero el gluconato de clorhexidina es muy soluble en agua y alcohol, por lo que es el producto ms utilizado.
Aldehdos
Son agentes alquilantes que actan sobre protenas, lo que provoca modificacin irreversible de enzimas. Se utilizan como desinfectantes y esterilizantes. Destruyen esporas. El glutaraldehdo es el nico esterilizante efectivo en fro. El formaldehdo como gas se utiliza para descontaminar edificios, ambientes. El formaldehdo gaseoso se obtiene por calentamiento del paraformaldehdo tiene la desventaja de ser muy irritante y perder actividad en ambientes refrigerados.
Glutaraldehido
Paraformaldehido
Formaldehido
rgano-Mercuriales
Se combinan con los grupos -SH de las protenas, inactivando enzimas. El Mertiolato, el metafen y el Mercurocromo, compuestos orgnicos que contienen mercurio, son antispticos utilizados en los tratamientos de la piel y mucosas.
Colorantes
Los derivados del trifenilmetano (violeta de genciana, verde de malaquita y verde brillante) bloquean la conversin del cido UDP-acetilmurmico en UDP-acetilmuramil-pptido.
Violeta de Genciana
Los tensioactivos
Tienen parte hidrofilica y parte hidrofbca. Solubilizan los lipidos de la membrana celular. sales de amonio cuaternario. (detergentes cationico) Son los ms eficaces contra bacterias en gamas alcalinas de pH. Se cargan y enlazan positivamente a los sitios negativamente cargados en la pared bacteriana de la clula. Estos enlaces electrostticos causarn a las bacterias tensiones en la pared de la clula.
El agua muy dura hace perder propiedades. Los compuestos de amonio cuaternario son principalmente bacteriostticos, fungistticos, son ms activos contra bacterias gram(+) que contra gram(-). Sales de amonio ms conocidas: cloruro de cetilpiridinio (Cepacol) y cloruro de benzalconio (Zephiran). Algunas soluciones empleadas para la higiene bucal contienen sales de amonio cuaternario.
Producto
CUADRO-RESUMEN DE LOS PRINCIPALES BIOCIDAS UTILIZADOS EN EL TRATAMIENTO DE AGUAS INDUSTRIALES Estructura Apariencia pH Aplicaciones
lquido lmpido incoloro a ligeramente amarillento liquido lmpido incoloro 8,0 a 9,0 3,2 a 4,2
Control de bioensuciamientos producidos por algas, bacterias, hongos y levaduras en circuitos abiertos de enfriamiento de agua Tratamiento de aguas blancas de mquinas de papel Control de bacterias sulfato reductoras en aguas de inyeccin en la industria petrolera Control de bioensuciamientos producidos por bacterias, hongos y levaduras en circuitos abiertos de enfriamiento de agua Control de bioensuciamientos producidos por algas, bacterias, hongos y levaduras en circuitos abiertos de enfriamiento de agua Tratamiento de aguas blancas de mquinas de papel Control de bacterias sulfato reductoras en aguas de inyeccin en la industria petrolera Control de bioensuciamientos producidos por algas, bacterias, hongos y levaduras en circuitos abiertos de enfriamiento de agua Control de bioensuciamientos producidos por algas, bacterias, hongos y levaduras en circuitos abiertos de enfriamiento de agua Tratamiento de aguas blancas de mquinas
NEWCIDE glutaraldehdo 12
NEWCIDE 2100
Jabones germicidas
El Jabn es un agente limpiador que se fabrica utilizando grasas vegetales, animales y aceites.
Mecanismo de accin: inhibe la sntesis de ARN. Antibacteriano y fungicida. Es poco soluble en agua, pero se disuelve en presencia de bases, por ejemplo en NaOH 1N. Soluble en disolventes organicos.
Triclosn
Acidos organicos
se utilizan como conservantes para controlar el crecimiento de hongos. El cido srbico (srbalo potsico) para inhibir el crecimiento de hongos en alimentos cidos, como el queso. El cido benzoico (benzoato sdico) es un antifngico eficaz a pH bajo. Uso en bebidas refrescantes y otros alimentos cidos. El propionato clcico evita el crecimiento de hongos en el pan.
Conservantes de alimentos
Esterilizantes gasesos
Son sustancias que se utilizan en una cmara hermtica. Ejplo. xido de etileno. Desnaturaliza protenas: los H lbiles de las protenas, como SH, COOH o OH, son reemplazados por grupos alquilo, como CH2CH2OH. Mata a todos los microorganismos y sus endosporas. Es txico y explosivo cuando est puro, por lo que normalmente se mezcla con un gas inerte como dixido de carbono o el nitrgeno. Ventaja: es altamente penetrante.
Mercuriales, fenlicos detergentes Para evitar el desarrollo de bacterias durante la recuperacin y catinicos almacenamiento del petrleo y de los productos de petrleo Para evitar el desarrollo de bacterias (p.ej.Legionella) en torres de enfriamiento Evitar el desarrollo de bacterias en condensadores y torres de enfriamiento Evitar el desarrollo de bacterias resistentes a la radiacin en reactores nucleares