COCAINA

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Universidad Nacional de

la Rioja
Toxicología
Metabolismo y extracción
de la cocaína
 La cocaína se transforma en dos metabolitos
principales: la benzoilecgonina y el éster
metílico de la ecgonina. Recientemente se han
detectado otros metabolitos de menor
importancia en orina humana, entre ellos la
norcocaína . La cocaína se elimina en la orina en
forma de droga sin modificar (1% a 9% de la
dosis), benzoilecgonina (35% a 54%) y éster
metílico de la ecgonina (32% a 49%). Las
sustancias que se recomienda buscar son la
cocaína y sus metabolitos: la benzoilecgonina y
el éster metílico de la ecgonina.
Metabolismo y extracción
de la cocaína
 El valor máximo de la cocaína en el plasma se
alcanza poco después de su administración
por vía intranasal, intrapulmonar o
intravenosa. El tiempo necesario para alcanzar
los efectos sicotrópicos y fisiológicos máximos
también es breve; a continuación los efectos
eufóricos disminuyen en un plazo de 30 a 60
minutos (20 minutos si se ha fumado). El
período medio de eliminación de la cocaína
del plasma tras su administración por vía
intravenosa o intrapulmonar es de 38 a 39
minutos.
PREPARACIÓN DE LA
MUESTRA
 Hay que observar algunas otras precauciones al
manipular muestras de orina que se van a
someter a análisis de detección de cocaína y sus
metabolitos, pues las sustancias que se buscan
tienen escasa estabilidad hidrolítica, en
particular si se encuentran en un ambiente
alcalino. En la medida de lo posible, las muestras
deberán mantenerse en un entorno frío y oscuro
tras la toma. Se ha determinado que con un pH 8
las concentraciones de cocaína en las muestras
de orina disminuyen entre un 40% y un 70% si
se almacenan a 4ºC durante 21 días.
PREPARACION DE LA
MUESTRA
 Por consiguiente, conviene ajustar el pH
de la muestra a 5 con ácido acético
diluido. El éster metílico de la ecgonina,
por ejemplo, es estable en un período de
hasta tres años en la orina entre un pH 3
y 5, almacenada a 4 a 5ºC [80]. Cabe
señalar además de que las muestras de
sangre que se utilicen para el análisis de
cocaína y sus metabolitos se conservan
mejor con fluoruro a un pH 5.
METODOS
 Metodo de campo: Método utilizado
en lugares del hecho, en donde se
precisa la identificación de sustancias
de origen desconocido; con el fin de
determinar si esa sustancia pertenece
o no a algún alucinógeno o toxico
determinado. Su principal
caracteristica es la de ser un método
economico y rapido.
METODO
 Metodo de laboratorio: Los inmuno
ensayos o de laboratorio son test
cualitativos, consiste en el uso de una
mezcla de anticuerpos selectivos para las
distintas drogas y sus metabolitos,
obtenemos un resultado con alto grado de
sensibilidad, son mas elaborados y
requieren de un conocimiento técnico del
personal. Su principal caracteristica es la
de ser un método con el cual podemos
obtener exactitud, sensibilidad y precision.
METODO
 Metodo de certeza: No se pueden
realizar en el lugar del hecho ni en
cualquier lado, son realizados en
ámbitos muy especializados, como en
laboratorio, laboratorios móviles. Se
necesita una infraestructura especial,
personal muy entrenado, con mucha
experiencia en el aparato y en la
interpretación del aparato.
MÉTODO DE CAMPO

 Ensayo de Scott o prueba de tiocianato de cobalto:


es una prueba química para mostrar la presencia
de alcaloides, me va a permitir obtener un
resultado presuntivo, es decir, orientativo. Se
utiliza para ello el tiocianato de cobalto, acido
acético y glicerina que conforman nuestro reactivo.
Si tenemos una muestra de polvo blanco se toma
una pequeña cantidad de esa muestra y se la
coloca en un tubo de ensayo, lo disolvemos con el
reactivo; debido a que es un método colorimétrico
se va a observar a simple vista si es cocaína
transformándose en un color azul, ya que la
cocaína es un alcaloide.
METODO DE CAMPO
 Seguidamente se le agrega acido clorhídrico
para neutralizar la reacción y va a bajar los
valores de PH tiñendo el tubo de un color
rosa o incoloro; de ahí se agrega cloroformo
que se usa para separar sustancias orgánicas
de inorgánicas. Se formarán 2 fases en donde
la cocaína se ira había el fondo por tener
mayor densidad que la glicerina que se
encuentra arriba del tubo y en color azul.
Esto nos indica que es una sustancia positiva.
 .
METODO DE CAMPO
 Para terminar de describir este método
se dirá que es un resultado presuntivo,
ya que pueden intervenir múltiples
factores, como lo son el medio
ambiente que puede reaccionar y dar
un falso positivo
METODO DE LABORATORIO
 Inmunocromatografía: es una técnica que se basa en
visualizar la formación de complejos de antígenos y
anticuerpos; en el caso de la cocaína no va a ser de
antígenos, sino de metabolitos y el anticuerpo va a estar
dirigido contra él.
 Esta técnica se la puede realizar con orina, sangre,
suero, saliva, pero el más común es la orina y solo se
necesita una pequeña muestra, debido a que el aparato
utilizado es un casete que contiene una tira de
nitrocelulosa donde se encuentra los reactivos que son
anticuerpos conjugados. Se colocará con un gotero la
muestra en el posillito S y se va a ir desplazando por
capilaridadhacia arriba donde tendremos una línea de
prueba T un una de control
METODO DE LABORATORIO
 Con esta técnica vamos a obtener un resultado
dentro de los 5 a 15 minutos. En caso de ser
negativo observaremos ambas líneas que se
tiñen (la C y la T) indicando que la
concentración de cocaína esta por debajo de
los 300 ng/ml; en caso de ser un resultado
positivo se teñirá solo la línea C, en donde en
este caso la concentración excede los 300
ng/ml.Podremos obtener también un resultado
no valido cuando el volumen de la muestra es
insuficiente o se haga realizado un mal
procedimiento.
METODO DE LABORATORIO
 Como se menciono antes los valores
por debajo de los 300 ng/ml no se
detectan, es por ello que las personas
mezclan su muestra de orina con agua
para diluirlo y obtener un resultado
falso.
METODO DE LABORATORIO
 Cromatografía en capa delgada Se debe
extraer un volumen de 5 a 20 ml de orina. La CCD
tradicional tiene un límite de detección de cocaína y
benzoilecgonina de 1 mg/ml de orina. La
cromatografía en capa delgada de gran rendimiento
(CCDGR) tiene un límite de detección de
benzoilecgonina de aproximadamente 0,3 mg/ml de
orina y debe emplearse preferentemente si se
dispone del instrumental necesario. Técnica
estándar de CCD En otros lugares [10] se exponen
detalladamente los materiales y procedimientos de
la CCD estándar, que son aplicables al análisis de
extractos biológico
METODOS SE CERTEZA
Cromatografías de confirmación

 Cromatografía de capa delgada

 Para este método procedimos a la extracción de la


cocaína y su principal metabolito: la benzoilecgonina,
para esto se alcalinizó la orina hasta alcanzar un pH
entre 8 y 9, se agregó 10 ml de cloroformo en un
embudo de separación; del extracto clorofórmico se
tomó una alícuota de 6 ml, el cual se evaporó a
sequedad para posteriormente retomarlo con 0,1 ml
de ácido acético 2N para sembrarlo en la
cromatoplaca y proceder a la migración de la
muestra aplicando el sistema de CCF para bases
nitrogenadas..
METODOS SE CERTEZA
Cromatografías de confirmación
 Cromatografía en fase gaseosa-
espectrometría de masas
 El método consiste en una purificación previa
por extracción en fase sólida y determinación
por cromatografía en fase gaseosa con
detector selectivo para nitrógeno y fósforo
(NPD), empleando lidocaína como estándar
interno. El método es preciso, exacto y
reproducible. El método validado se utilizó para
la determinación de cocaína en muestras de
saliva y para establecer su relación de
concentraciones en sangre y saliva.
METODOS SE CERTEZA
Cromatografías de confirmación

 Cromatografía liquida de alto


rendimiento
 Además de la GC, la HPLC es otra
importante técnica de separación
utilizada con frecuencia en el análisis
de drogas con fines forenses. Por la
facilidad de preparación de las
muestras y la mejor reproducibilidad y
capacidad de detección
¡¡Gracias por su
atención!!

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