ANALISIS CLINICO TEMA 4 EXAMEN

QUIMICOS DE ORINA

•Dra Ingrid Scarlet Lopez Arauz

 ANALISIS QUIMICO
• Le conforman las tiras reactivas, las
cuales logran evidenciar la
presencia de proteínas, hematíes,
leucocitos, nitritos, así como aportan
información acerca del pH y la
densidad. Sin embargo, el médico
debe conocerlas limitaciones y
ventajas de las tiras reactivas y del
estudio del sedimento.
 TIRAS REACTIVAS
• Se realiza mediante reacciones
químicas y enzimáticas de química
seca, en la cual se impregna una fase
sólida con los reactivos respectivos a
cada determinación
• El procesamiento manual de la tira
reactiva incluyendo la comparación
visual de colores presenta una serie de
desventajas que afectan la
reproducibilidad y la exactitud de los
resultados.
TIRAS REACTIVAS
• La presencia de altas
concentraciones de ácido
ascórbico en orina de individuos
que ingieren vitamina C de rutina,
puede interferir con las pruebas de
glucosa, sangre, bilirrubina y
nitritos. Si se detecta ácido
ascórbico, la prueba debe repetirse
por lo menos 24 horas después de
la última dosis ingerida de vitamina
C.
 RECOMENDACIONES PARA LAS TIRAS REACTIVAS
• Mojar adecuadamente las zonas reactivas
• Secar el exceso de orina de la tira reactiva
• Cuidar el tiempo de reacción de la tira reactiva
• Buena iluminación para la lectura de la tira
• Conservar la integridad de la carta de colores:
 TIRAS REACTIVAS
Los resultados nos proporciona
información con respecto:
• Estado del metabolismo de los
carbohidratos
• Función renal
• Función hepática
• Balance acido – base
• Infecciones del tracto urinario
 PH
Valores normales: 4,5 – 8,0
El riñón es la última instancia encargada de corregir los trastornos
acido base.
La orina puede tener una concentración de iones H+ hasta 1000
veces mayor que en la sangre.

El valor de pH ayuda a identificar cristales observados

en el sedimento urinario.
Ciertos cristales están asociados a orinas ácidas como lo son los
de urato amorfo y oxalato de calcio.
 PH
Los cristales característicos de las orinas alcalinas son los fosfatos
amorfos, fosfatos triples, fosfato de calcio y carbonato de calcio.
El conocimiento del Ph es importante para el tratamiento de
cálculos renales
Los cálculos de ácido úrico precipitan en orinas ácidas y son más
solubles en alcalinos
 VALORES NORMALES
Las tiras reactivas cuentan actualmente con 10 parámetros, con los
siguientes valores normales:
• Densidad…. 1.005 a 1.025
• pH…………………… 4,5 a 8,0
• proteínas …………….negativas
• glucose………………negativa
• cuerpos cetónicos negativos
• bilirrubina negativa
• urobilinógeno…….. De 0 a 0.2 mg/dl
• hemoglobina negativa
• nitritos……………….negativos
• leucocitos……………..negativos
 Alteraciones patológicas mas frecuentes
DESCENSO AUMENTO

• Diabetes mellitus • Hiperparatiroidismo

• Malnutrición proteica • Hiperfunción corticoadrenal
• Gota • Alcalosis metabolica
• Acidosis metabólica • Estenosis pilorica
• Diarrea • Acidosis tubular
 Causas en orinas acidas
• Dieta rica en proteínas cárnicas.
• Acidificacion por fármacos como ser el cloruro de amonio, metionina y
el mandelato de mietenamina en el tratamiento de algunos cálculos.
• En pacientes con acidosis respiratoria o metabólica.
• En depleción de potasio por vomito prolongado.
• Deshidratación.
• Ayunos prolongados.
• Proliferación en la orina de bacterias productoras de acido.
• Uso de diuréticos en forma prolongada
• Cetoacidosis diabética
 Causas en orinas alcalinas

• Debido a dieta rica en verduras y frutas (cítricos).

• En el tratamiento de cálculos (ácido úrico, cistina u oxalato de calcio) por

utilizar bicarbonato sódico, citrato potásico y acetazolamida.

• En infecciones del tracto urinario se utilizan los antibioticos como ser

neomicina, kanamicina y estreptomicina son mas activos en la orina alcalina

• En alcalosis respiratoria debido al aumento de excreción de bicarbonato.

 Metodos para determinar el PH
Peachímetro: En algunos pacientes con alteraciones del balance
acido-base se debe medir con precisión el pH urinario. Se debe
calibrar con 3 tampones de pH conocido, lavar el electrodo con
agua destilada, limpiar y secar con papel e introducir en la muestra
de orina.
 Metodos para determinación PH
Acidez titulable de la orina: El pH de la orina depende en gran
parte de la cantidad de fosfato mono y dibásico presente. Alícuotar
la orina de 24 horas (mantenida en hielo) con NAOH 0,1N pH 7,4
como punto final. La acidez titulable normal se encuentra en el
rango de 200 ml a 500 ml de NAOH 0,1N
Colocamos 5 ml de orina e un tubo de prueba más dos gotas de
fenolftaleína luego titulamos con NaOH 0.1 N hasta alcanzar un pH de
7.4 y anotamos el volumen de NaOH utilizado. Calculamos la acidez por
titulación.
 Proteinuria
En la zona de reacción de la tira hay mezcla de tampón y un indicador que
cambia de color de amarillo a verde en presencia de proteínas en la orina.
Los indicadores utilizados en las distintas tiras reactivas varían según el
fabricante, la mayoría de los fabricantes utilizan como indicador el azul de
tetrabromofenol.

Trazas 5 a 20 mg/dl
1+ 30 mg/dl
2+ 100 mg/dl
3+ 300 mg/dl
4+ ˃ 2000 mg/dl
 Proteinas en orinas
Fisiología de la proteinuria
La presencia de mayor cantidad de proteínas en la orina puede ser un
indicador importante de enfermedad renal. Sin embargo existen otras
situaciones fisiológicas como el ejercicio físico y la fiebre que
pueden conducir al aumento de secreción de proteínas en la orina
 Proteinuria
Proteinuria Normal
Normal
En el adulto se puede encontrar entre 0 y
150 mg de proteína en 24 hr
En un niño, la excreción normal es menor a 100 mg/m 2/24 h.
Aproximadamente el 60% de estas proteínas son
de origen plasmático y 40% es de origen renal o
vías urinarias.
 Proteinuria
Es importante determinar como se elimina la proteinuria excesiva, esta
puede ser transitoria o constante, siendo la ultima ortostática o
persistente.

La proteinuria transitoria se presenta en alteraciones febriles, en

asociación a una cardiopatía, anemia grave, alteraciones del tiroides y
en crisis abdominales.

La proteinuria ortostática o postural es frecuente en niños, adolescentes y

adultos jóvenes: la orina recogida, por la mañana no contiene cantidades
anormales de proteínas, mientras que la obtenida después de estar en
posición erecta o en movimiento contiene grandes cantidades.
 Proteinuria
El hallazgo de proteinuria ortostática en los jóvenes indica un
proceso benigno, pero en el anciano presenta serias
alteraciones del parénquima.

La proteinuria persistente se asocia a nefropatías primarias y a

alteraciones que implican el parénquima y la circulación renal. A
partir de los 0.3 g/kg de peso corporal suele indicar un síndrome
nefrótico.
 CUANTIFICACION DE LA PROTEINURIA

La información útil para el diagnostico de las enfermedades renales y para el

seguimiento de la respuesta del tratamiento se obtiene del análisis
cuantitativo de la cantidad de proteínas excretadas en 24 horas.

Proteinuria severa (˃4 g/día): En síndrome nefrótico con nivel bajo de

albumina en suero, edema generalizado y un aumento de lípidos en suero
(col, TG y fosfátidos) los LDL y VLDL son altas en suero, el HDL son mas
pequeñas se han observado en orina. El síndrome nefrótico esta asociado a
daño función glomerular debido a: enfermedad renal primaria (idiopática),
enfermedad sistémica con implicación renal.
 Proteinas en orinas
Proteinuria severa (˃4 g/día): Entre las causas transitorias esta fallo
cardiaco congestivo severo, pericarditis constrictiva y la trombosis de
las venas renales. En los niños la causa común del síndrome nefrótico
es la lesión del trastorno glomerular, la glomerulonefritis aguda que
puede ir acompañada de eritrocitos o cilindros eritrocitositarios, la
diabetes mellitus y el lupus eritematoso causan generalmente daño
glomerular y proteinuria severa.
La malaria, la hipertensión maligna, toxemia del embarazo, metales
pesados (oro, mercurio), fármacos (penicilamina), neoplasia en general,
anemia falciforme, rechazo de trasplante renal son causas de proteinuria
grave.
 Proteinas en orinas
Proteinuria moderada (1 g/día a 4,0 g/día): En la mayoría de
enfermedades renales, incluyendo las anteriores
mencionadas y la nefroesclerosis, mieloma múltiple y las
nefropatías toxicas, también las alteraciones degenerativas
malignas e inflamatorias del tracto urinario inferior, incluyendo
las alteraciones irritativas como presencia de litiasis renal.
 Proteinas en orinas

Proteinuria mínima (˂1 g/día): En pielonefritis crónica y en

fases inactivas de las enfermedades glomerulares, en
nefroesclerosis, nefritis intersticial crónica (se observa
eritrocitos, leucocitos y celular tubulares), enfermedades
congénitas como la poliquisticas y la enfermedad quistica
medular y las enfermedades tubulares renales.
 Proteinas en orinas
Categorías cualitativas de la proteinuria

Patrón glomerular: La enfermedad glomerular causa proteinuria que puede

ser severa (˃3 o 4 g/día) una perdida o reducción de la carga negativa
constante de la membrana glomerular basal permite a la albumina permear
hacia el espacio de Bowman en grandes cantidades mayores a las que pueden
ser absorbidas por las células tubulares proximales.

Patrón Tubular: Asociado a la perdida de una pequeña cantidad de

proteínas urinarias de bajo peso molecular, se encuentran en enfermedades
como el síndrome de Fanconi, enfermedad de Wilson, la pielonefritis y en el
rechazo de trasplante renal.
 Métodos de laboratorio para determinar la proteinuria
Tiras de orina reactivo tetrabromofenol.
 Tiene la ventaja de ser un método rápido y barato
 Ofrece muchos falsos positivos
 Se basa en un método colorimétrico y da los resultados en rangos:
 Negativo (0-10 mg/dL)
 Trazas (10-20 mg/dL)
 +(30 mg/dL)
 ++(100 mg/ dL)
 +++(300 mg/dL)
 ++++(1000 mg/dL)
 Es bastante sensible para la albúmina, pero no detecta proteínas
pequeñas como las macro y micro globulinas ni las proteínas Bence Jones
 Métodos de laboratorio para determinar la proteinuria
Prueba del Ácido Sulfosalicílico: Se usa para precipitar proteínas y no
necesita calor, es especifica para todas las proteínas incluida la albumina.
Preparación de Reactivo de Exton
- Disolver 88 g de sulfato de sodio en 600 ml de agua destilada con la
ayuda de calor.
- Enfriar
- Agregar 50 g de acido Sulfosalicílico
- Diluir llevando a 1000 ml
 Métodos de laboratorio para determinar la proteinuria
Prueba del Ácido Sulfosalicílico:
Procedimiento
- Centrifugar la orina y usar el sobrenadante.
- Mezclar volúmenes iguales de sobrenadante y reactivo de Exton.
- Graduar la turbidez sobre un fondo negro.
Interpretación

- Negativo: No hay turbidez

- Traza: Se percibe turbidez solo contra un fondo negro
- 1 +: Se observa turbidez, pero no es granular
- 2 +: Se observa turbidez y es granular
- 3 +: La turbidez es considerable y hay aglutinación
- 4 +: La nube es densa con masas de gran tamaño que pueden solidificarse
 Métodos de laboratorio para determinar la proteinuria
Prueba del Calor y del Ácido Acético
Principio de precipitación del acido: Este método se basa en el hecho de que
el calor torna insolubles a las proteínas y las coagula.
Procedimiento
-Centrifugar o filtrar alrededor de 10 ml de orina
-Decantar el sobrenadante a un tubo se debe llenar aproximadamente los 2/3 del
tubo.
-Llevar a ebullición por 2 minutos, si hay turbidez puede deberse a proteínas,
fosfatos o carbonatos.
-Agregar de 3 a 5 gotas de acido acético al 5% o 10%
-Llevar a ebullición nuevamente el acido disolverá cualquier fosfato o carbonato
que cause turbidez, la turbidez se puede incrementar después de agregar el
acido debido a la precipitación aumentada de las proteínas.
 Métodos de laboratorio para determinar la proteinuria
Prueba del anillo de Heller
Solo cuando hay poca cantidad de orina, no es muy sensible.

Procedimiento
-Colocar pocos ml de ácido nítrico concentrado en el fondo del tubo.
-Cubrir el tubo con orina centrifugada dejándola caer por las paredes.
-Se forman dos capas de liquido.

Resultado
-Formación de precipitado blanco en la unión de los líquidos al cabo de 3 minutos indica la
presencia de proteínas.
-Falsos positivos: Por fármacos y antibióticos
-Falsos negativos: En orinas diluidas.
 Métodos de laboratorio para determinar la proteinuria
Proteína de Bence Jones Es una proteína pequeña compuesta de células
plasmáticas.se encuentre en la orina de la mayoría de las personas con
mieloma múltiples una rara proteína de bajo peso molecular,constituida
por cadenas ligeras de las inmunoglobulinas.
Procedimiento
-Colocar 5 ml de orina centrifugada y acidificar la orina a un pH 5,0-5,5
usando acido acético al 10%.
-Calentar en BM por 15 min. a 56 ̊ C, la formación de precipitado indica
Proteína de BJ positivo.
-Si hay precipitación llevar el tubo en agua hirviendo y dejar por 3 min.
-Si el precipitado disminuye indica proteína de BJ positivo.
-Si el precipitado aumenta = otras proteínas
 MICROALBUMINURIA
Es la presencia de albumina en orina por encima del nivel normal pero por
debajo del rango detectable por los métodos habituales de tiras reactivas.

Estos niveles bajos de albumina en orina oscilan entre 20 mg/l y 200 mg/l son indicadores de
daño glomerular temprano y posiblemente reversible.

En pacientes diabéticos esta asociada a un aumento en la mortalidad cardiovascular de entre

4 y 6 veces, un factor independiente de riesgo de mortalidad renal.

Es mas prevalente en sujetos hipertensos.

Se considera micro albuminuria a una elevación entre 30 – 300 mg/24 horas.

Normal Menor a 30 mg/24 hrs
Esta cantidad no se detecta mediante tira reactiva normal.
Métodos de laboratorio para determinar la microalbuminuria
Dosificación de Albumina

Método de Exton: En orina y LCR (pequeña cantidad)

Método turbidimétrico.
Reactivos
- Acido Sulfosalicílico 5g
- Sulfato de Na 1g
- H2O 100 cc

Usar el estándar por ser espectrofométrico, usar albumina bovina de

concentración conocida 0,5g/% o 500 mg.
 Métodos de laboratorio para determinar la microalbuminuria
Dosificación de Albumina
Método de Exton
Técnica:

Incubar durante 5 min. Leer dentro de los 30 min.

Leer a 420 nm – 650 nm ó 520 nm y aplicar la formula.
Cx= CC x Ab m
Abs. St
Dosificación de Albumina
Método de Exton

Linealidad: Otros métodos 2 g/l (200 mg/dl)

VN: En orina 10 – 140 mg/24 h
 Glucosa y otros azucares en la orina
La presencia de cantidades significativas de glucosa en la orina se denomina
GLUCOSURIA.
La cantidad de glucosa que aparece en la orina depende del nivel de glucosa
en sangre, del índice de filtración glomerular y del grado de reabsorción
tubular.
La glucosuria aparece cuando los niveles de glucosa en sangre exceden los
160-180 mg/dl, que es el umbral renal normal para la glucosa.
 Glucosa y otros azucares en la orina
Diabetes Mellitus: Glucosuria acompañada de poliuria, polidipsia, polifagia; utilización inadecuada
de los carbohidratos por estos pacientes da lugar a niveles elevados de cetonas en sangre y orina
debido al aumento del metabolismo de grasas.

Otras causas de glucosuria: En hiperglucemia en varios trastornos endocrinos, los pituitarios,

Síndrome de Cushing, tumores pancreáticos, hipertiroidismo, carcinoma, pancreatitis,
tumores o hemorragias cerebrales, quemaduras, infección, fracturas, IAM, enfermedades
hepáticas, obesidad, embarazo.
Normalmente se excretan pequeñas cantidades de disacáridos (aprox. 50 mg/24 h) puede
aumentar a 250 mg o mas cuando existe enfermedades intestinales (esprúe severo o enteritis
aguda).

Fructosa, galactosa, lactosa, maltosa y L – xilosa se encuentran en la orina de pacientes con

trastornos metabólicos hereditarios. Se puede identificar el azúcar por medio de cromatografía
de capa fina.
 Métodos de laboratorio para determinar la glucosa
Estos procedimientos se basan en la propiedad de los
azúcares de reducir con rapidez el cobre de la solución alcalina
del reactivo de benedict,( se detecta glucosa,
maltosa ,lactosa haciéndolo pasar de ion cúprico a oxido
cuproso con formación del precipitado del color.
Otros métodos para la determinación de glucosa en orina:
· fehling.
· nylander
· tiras reactivas.
Métodos de laboratorio para determinar la glucosa
 Métodos de laboratorio para determinar la glucosa
Tiras reactivas
Están impregnadas con enzima glucosa oxidasa, detecta solo glucosa.
Glucosa + O2 Glucosa Oxidasa Ácido glucónico + H2O2

H2O2 + Cromógeno Peroxidasa

Cromógeno oxidado (coloreado) + H2O

Falsos positivos: No presenta, pero si la muestra de orina esta

contaminada con peróxido o hipoclorito .
Falsos negativos: Concentraciones urinarias elevadas de acido
ascórbico o vitamina C.
 Cetonas en orinas
Siempre que hay defecto en el metabolismo o la absorción de los
carbohidratos o una cantidad inadecuada de carbohidratos en la dieta, el
cuerpo lo compensa metabolizando mayores cantidades de ácidos
grasos.

Cuando el aumento es grande empieza a aparecer en la sangre cuerpos

cetónicos que son excretados en la orina.

En la cetonuria los 3 cuerpos cetónicos presentes son: acido acetoacético

(20%), la acetona (2%) y el β-hidroxibutirato (aprox. 78%).
 Cetonuria
Cetonuria diabética: Un aumento de cetonas produce un
descenso electrolitico, deshidratación y si no se corrige , acidosis
y por ultimo puede constituir un aviso de un coma, pueden estar
presentes hasta 50 mg de acido acético/dl. Pacientes con diabetes
mellitus tipo 1 son mas susceptibles, asociados con
infecciones, estrés.
Cetonuria no diabética: En bebes y niños, como enfermedades
febriles e intoxicaciones, acompañadas de vómitos y diarrea,
durante el embarazo con un nivel de glucosa en ayunas bajo y
cetonuria leve, después de la exposición al frio se observa
cetonuria, en dietas de adelgazamiento bajas en carbohidratos,
ejercicio severo.
 Cetonuria
Acidosis Láctica: En presencia de diabetes mellitus, fallo renal,
enfermedades hepáticas y las infecciones producidas en respuesta a
ciertas drogas (envenenamientos con salicilato).
El olor a acetona se detecta en el aliento con altos niveles de cetona
en sangre.
VN en orina: 2 – 20 mg/dl.

Tiras reactivas: Principio de la prueba Legal. El ácido acetoacético y

la acetona reaccionan con nitroprusiato sódico y glicina en medio
alcalino para tomar un complejo color violeta
 Métodos de laboratorio para determinar la glucosa
Acetona
- Reacción de Imbert
Solución al 10% de Nitroprusiato de Na
Solución acética al 50% en 100 cc de agua
Amoniaco

Técnica: En un tubo de ensayo

10 cc de orina
1 cc de reactivo Imbert
Mezclar
Gotas de amoniaco

Resultado: Anillo rojo violeta en interfase = Acetona positiva

 Métodos de laboratorio para determinar la glucosa
Prueba con Tiras Reactivas
La marca Multistix contiene los reactivos de nitroprusiato de sodio y
una solución amortiguadora alcalina que reacciona con el acido
diacético de la orina para formar un color rojo oscuro según la
siguiente reacción:
Reacción con Nitroprusiato alcalino
Ácido acetoacético + nitroprusiato de Na + glicina pH
color
violeta
 Sangre, hemoglobina, hemosiderina y mioglobina en orina

La presencia en orina de un numero de glóbulos rojos anormal se

conoce como hematuria, hemoglobinuria es la presencia de
hemoglobina libre en solución en la orina. La hematuria es
relativamente común, la hemoglobinuria es poco común y la
mioglobinuria es rara.

Normalmente hay entre 0 – 2 hematíes por ml que se escapan del

filtrado que no suelen dar positivo; equivale a menos de 5 hematíes
por campo.
 Sangre, hemoglobina, hemosiderina y mioglobina en orina

Sangre oculta
Detecta cantidades mínimas, detectan hemoglobina libre procedente de
hematíes lisados.

Hoy en día las tiras reactivas detectan los hematíes intactos provocando su
lisis al tomar contacto con la almohadilla de la prueba.

La orina normalmente esta libre de todas estas sustancias, por lo tanto, una
prueba de sangre oculta (+) deberá seguirse con la determinación de la causa
exacta y el origen.
correlacionar con el examen microscópico
 Sangre, hemoglobina, hemosiderina y mioglobina en orina

Hematuria

Es la presencia de sangre o hematíes intactos en la orina.

Orinas altamente alcalinas o de muy baja densidad (˂1,007) puede causar que
los hematíes se lisen, liberando su hemoglobina en la orina.
En la microhematuria la cantidad de sangre es pequeña que no afecta el
color y su detección es solo química o microscópica.
La hematuria abundante: Altera el color y es visible macroscópicamente,
presente en: Glomerulonefritis aguda, hipertensión maligna, poliquistosis
renal, nefritis lupica, infarto renal, infección renal aguda, tumores renales,
trombosis de la vena renal, glomerulonefritis crónica, tuberculosis renal,
síndrome nefrótico, medicamentos, etc.
 Sangre, hemoglobina, hemosiderina y mioglobina en orina

Hemoglobinuria

Es la presencia de hemoglobina libre en la orina como resultado de la hemolisis intravascular.

La hemoglobina liberada de los hematíes se una a la globulina plasmática (haptoglobina)
cuya función es impedir la excreción glomerular de la hemoglobina.
La unión a la proteína conserva el hierro y protege a los túbulos del efecto de la hemoglobina.
CAUSAS La hemoglobinuria puede ser: anemias hemolíticas por fármacos, agentes químicos
o parásitos del paludismo, transfusiones de sangre incompatibles, quemaduras, veneno de
víbora, etc.
 Investigación de Sangre

Reacción de Weber

Se usa sol. de Guayacol en alcohol al 2%, acido acético y agua

oxigenada.

Técnica: Al sedimento de orina agregar gotas de acido acetico para

destruir los glóbulos rojos, liberando Hb, se añade gotas de H2O2 y
gotas de Guayacol.
Reacción + color verde ó azul dependiendo de la cantidad de sangre
 Investigación de Sangre
Reacción de Tevenon Roland

Reactivos: Piramidón sol. Alcohólica al 5%

Agua oxigenada y acido acético

Técnica: Al sedimento de orina agregar gotas de acido acético para

destruir los GR y liberar la Hb que con el H2O2 descompone la
catalasa y libera oxigeno, se combina con el Piramidón para dar
color azul violeta +.
 Investigación de Sangre
Pruebas con Tiras Reactivas

El procedimiento de las tiras reactivas se basa en la actividad

seudoperoxidasa de la hemoglobina y mioglobina que cataliza la oxidación
de un cromógeno mediante un peróxido orgánico como en la siguiente
reacción:
Reacción de hemoglobina
hemoglobina cromógeno
H2O2 + cromógeno peróxido …. oxidado
+ H2O2

Los indicadores utilizados por las tiras Reactivas:

Diisopropilbenceno, hidroperóxido, tetrametilbenzidina
 Bilirrubina en orina
La bilirrubina se forma por degradación de la hemoglobina en el sistema
reticuloendotelial, luego se une a la albumina y es transportada a través de la
sangre hacia el hígado.

Esta bilirrubina libre o no conjugada es insoluble en agua y no se puede

filtrar a través del glomérulo.

En el hígado es captada y conjugada con acido glucurónico para formar

diglucorónido de bilirrubina, denominada bilirrubina conjugada o directa. Es
hidrosoluble, excretada por el hígado a través de las vías biliares hacia el
duodeno.
 Bilirrubina
Bilirrubinaen
enorina
orina
Cuando cambia el camino hacia el sistema sanguíneo, esta en el
plasma en concentraciones inferiores a 0,2 – 0,4 mg/dl.

Como la B. Conjugada o directa no esta unida a proteínas filtra por

los glomérulos a la orina cuando aumenta en el plasma.
VN en orina = no detectable.

Bilirrubina total en el plasma es ˃ 2,5 mg/dl = ictericia. Umbral ˃ 1,6

mg/dl.
 Bilirrubina en orina
Ictericia hepática: Por lesión o daño hepático, hepatitis viral o
cirrosis, intoxicación con químicos por inhibición del paso de B.
conjugada al duodeno y paso de esta a la sangre.

Clínica:
 Bilirrubina en Orina +
Urobilinógeno fecal disminuido
Urobilinógeno en orina normal o alterado +/-
 Investigación de Bilirrubina

Pigmentos biliares

Se basan en la oxidación de la bilirrubina mediante el empleo de oxidantes

enérgicos que ponen de manifiesto su coloración característica.
Interpretación
Verde azulado o verde oscuro = Pigmento +
Concentración en orina es proporcional a concentración en sangre.
Aparece antes de ictericia de piel y mucosas.
Desaparece primero.
Obstrucción total= Coluria intensa con urobilina –
Ictericia hemolítica = B. en orina – y urobilina +
 Bilirrubina en orina

Ictericia hemolítica: Producción excesiva de bilirrubina, por ˃

destrucción hematíes, el hígado no puede conjugarla y excretarla =
ictericia por B. no conjugada, en hemolisis intravascular, anemia
hemolítica y talasemia.

Clínica:
 Bilirrubina en Orina -
Urobilinógeno fecal = Aumentado
Urobilinógeno en orina = Aumentado
 Bilirrubina en orina
Prueba con Tiras Reactivas
Muchas tiras reactivas se basan en la reacción de acoplamiento de una sal de
diazonio con la bilirrubina en un medio acido según esta reacción:
Reacción de la Bilirrubina:
Bilirrubina + diazido ácido azobilirrubina
Los indicadores utilizados por los principales fabricantes, entre ellos tenemos 2,4
– Sal de diazonio dicloroanilina
 Bilirrubina en orina

Ictericia Obstructiva: Obstrucción del colédoco por cálculos biliares,

carcinoma, pancreatitis afección de ganglios linfáticos, tumores en conductos
biliares, intoxicación por fármacos.

La bilirrubina retrocede pasando a la sangre (B. conjugada) y se excreta en

orina, heces despigmentadas.

Clínica:
 Bilirrubina en Orina +
Urobilinógeno fecal Negativo
Urobilinógeno en orina Negativo
 Urobilinogeno en orina

Urobilina: Pigmento de la bilis, los GR viejos y jóvenes

se destruyen en el bazo en el sistema
reticuloendotelial. De la destrucción de Hb se abre el
anillo y libera la globina quedando el HEM que se abre
forma la protoporfirina dando lugar a la oxidación y
metilación de la bilirrubina, que se deposita en la vesícula
biliar y desemboca en el duodeno.
 Urobilinogeno en orina

Parte de la bilirrubina formada interviene en el metabolismo.

Estercobilinógeno: Eliminado por heces.

Urobilinógeno: Una parte pasa al hígado nuevamente para formar
la bilirrubina y pigmentos nuevamente y otra parte es eliminado por
los riñones como urobilina.
 Urobilinogeno en orina

Prueba con Tiras Reactivas

Muchas tiras reactivas se basan en la reacción de aldehído de
Ehrlich:

p-dimetilaminiobenzaldehido + urobilinógeno = pigmento azo de

color rojo

Este es una simple reacción de desarrollo de color en la cual los

compuestos aldehído o diazonio reaccionan con el urobilinógeno y
producen un color de rosado a rojo en un medio ácido.
 Nitritos en Orina
La prueba de nitrito es un método indirecto y rápido para la detección
temprana de la bacteriuria asintomática y significativa.

Los organismos comunes que pueden causar infecciones urinarias, como

Escherichia coli y especies de Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella y
Proteus, producen enzimas que reducen el nitrato urinario a nitrito.

Para que esto suceda, la orina debe incubarse en la vejiga un mínimo de 4 hrs.
Por lo tanto la primer orina de la mañana es la muestra de elección
 Nitritos en Orina
Pruebas en Tiras Reactivas
Para la detección del nitrito en la orina utilizan habitualmente el
acido p - arsanílico y un compuesto de quinolina.

El nitrito reacciona con el acido p - arsanílico para formar un

compuesto de diazonio. Este compuesto luego se acopla con el
compuesto de quinolina y produce el color rosado
 Esterasa leucocitaria en orinas
Los leucocitos pueden estar presentes en cualquier fluido corporal, los leucocitos que se
observan comúnmente son los neutrófilos y normalmente están en cantidades bajas.
Las cantidades aumentadas usualmente indican la presencia de una infección del tracto urinario
y su presencia indica esterasa leucocitaria +.

Pruebas en Tiras Reactivas

Los neutrófilos contienen enzimas (esterasas). Estas esterasas pueden detectarse en las tiras
reactivas que contengan un sustrato apropiado como el éster del acido indoxilcarbónico y se
basa en la siguiente reacción.
Reacción A: granulocitica
Indoxilo Éster del ácido carbónico esterasa
indoxilo o pirolo
o pirolo
Reacción B:
Indoxilo + Sal de diazonio = Violeta
o pirolo
 Urine Strip
C 1 0 , 1 0 A A , 11, 11 A A
Tiras reactivas para la detección de urobilinógeno, glucosa,
cetonas, bilirrubina, proteínas, nitrito, pH, sangre, densidad,
leucocitos y ácido ascórbico en orina

FUNDAMENTOS DEL METODO Leucocitos: esta prueba revela la presencia de esterasas

La muestra reacciona con los reactivos desecados unidos granulocitarias. Las esterasas escinden un derivado del
a una fase sólida que se encuentra adherida a un soporte éster pirazol aminoácido para liberar un derivado de hi-
plástico. Se proveen reactivos para la detección de urobi- droxipirazol que luego con la sal de diazonio determina un
linógeno, glucosa, cetonas, bilirrubina, proteínas, nitrito, producto violeta.
pH, sangre, densidad, leucocitos y ácido ascórbico (ver Acido ascórbico: esta prueba está basada en el efecto
Presentaciones). Los principios químicos de cada prueba reductor del ácido ascórbico. Comprende un compuesto
son los siguientes: aromático coloreado en su estado oxidado, que se decolora
Urobilinógeno: la prueba está basada en la reacción de cuando es reducido por el ácido ascórbico. El color cambia
unión de una sal de diazonio con el urobilinógeno urinario en del verde intenso al amarillo verdoso.
un medio ácido. El color vira del rosa pálido al rosa intenso.
Glucosa: reacción enzimática secuencial donde la glucosa REACTIVOS PROVISTOS
oxidasa cataliza la oxidación de la glucosa dando ácido glu- Tiras conteniendo reactivos desecados para la determina-
cónico y peróxido de hidrógeno. Luego, la peroxidasa cataliza ción de algunas o todas las siguientes sustancias en orina,
la reacción del peróxido de hidrógeno con ioduro de potasio, dependiendo de la presentación (10, 10 AA, 11, 11 AA):
formándose productos coloreados que van desde celeste urobilinógeno, glucosa, cetonas (ácido acetoacético), bili-
verdoso, pasando por marrón verdoso intermedio, a marrón. rrubina, proteínas, nitrito, pH, sangre, densidad, leucocitos
Cetonas: se basa en la reacción de ácido acetoacético de la y ácido ascórbico. La composición de cada zona reactiva se
orina con nitroprusiato. El color resultante va desde tostado, detalla para 100 tiras:
cuando no hay reacción, a distintos tonos de púrpura para
Urobilinógeno 4-Metoxibencenodiazonio 2,5 mg
reacciones positivas.
URO Ácido cítrico 30,0 mg
Bilirrubina: se basa en la unión de la bilirrubina con la sal
de diazonio del 2,4-diclorofenilo en un medio fuertemente Glucosa Glucosa oxidasa 4,51 unidades
ácido. El color cambia de tostado suave a tostado intenso. GLU Peroxidasa 1,86 unidades
Proteínas: basada en el cambio de color del indicador, azul Ioduro de potasio 10,0 mg
de tetrabromofenol, en presencia de proteínas. Una reacción Cetonas Nitroprusiato de sodio 20,0 mg
positiva está indicada por un cambio de color del amarillo KET Sulfato de magnesio 246,5 mg
verdoso al verde, y luego al verde intenso.
Bilirrubina 2,4-Diclorofenildiazonio 3,0 mg
Nitrito: esta prueba está basada en la reacción de ácido p-
BIL Ácido oxálico 30,0 mg
arsanílico y nitrito, derivado del nitrato de la dieta en pre-
sencia de bacterias de la orina, para formar un compuesto Proteínas Azul de tetrabromofenol 0,3 mg
de diazonio. Este compuesto reacciona con N-(1-naftil) PRO Ácido cítrico 110,0 mg
etilendiamina en un medio ácido. El color resultante es rosa. Citrato trisódico 46,0 mg
Cualquier tonalidad rosada es considerada positiva. Nitrito Ácido p-arsanílico 5,0 mg
pH: esta prueba está basada en indicadores dobles (rojo NIT N-(naftil)-etilendiamina 0,6 mg
de metilo y azul de bromotimol) los cuales dan un amplio
pH Rojo de metilo 0,04 mg
espectro de colores cubriendo el rango de pH urinario
completo. Los colores varían desde ocre, pasando por Azul de bromotimol 0,5 mg
verdoso-amarillento, a verde azulado. Sangre Hidroperóxido 4,0 mg
Sangre: esta prueba está basada en la actividad de pseudo- BLO 3,3',5,5'-Tetrametilbencidina 3,7 mg
peroxidasa de la hemoglobina, la cual cataliza la reacción de Densidad Azul de bromotimol 1,2 mg
3,3',5,5'-tetrametilbencidina con hidroperóxido orgánico tam- SG Polielectrolito 12,0 mg
ponado. El color resultante varía desde verdoso-amarillento,
pasando por verde azulado, hasta azul oscuro. Leucocitos Derivado de éster
Densidad: basado en el cambio de pKa. En presencia de los LEU pirazol aminoácido 1,0 mg
cationes urinarios, se liberan protones de un polielectrolito Sal de diazonio 0,7 mg
produciéndose un cambio de color en el indicador azul de Acido ascórbico 2,6-Diclorofenol 1,6 mg
bromotimol desde azul a amarillo. AA indofenol

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