“AÑO DE LA DIVERSIFICACION PRODUCTIVA Y FORTALECIMIENTO DE

LA EDUCACION”

PERFIL COLESTASICO

BIOQUÍMICA CLÍNICA II

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MEDICA
ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA

Lic. T.M. CUYUBAMBA PEREZ, EDGAR.

CTMP 8778
 FUNCION HEPATICA NORMAL
La sangre procedente del intestino y del páncreas
alcanza al hígado a través del sistema venoso porta

Transportando los bioelementos necesarios para

síntesis de proteínas, azúcares para el
almacenamiento de energía y hormonas para
regular la producción de glucosa.

Centro de síntesis de: proteínas plasmáticas, lípidos

endógenos, lipoproteínas (colesterol), factores de la
coagulación y glucógeno/glucosa.
 FUNCION HEPATICA NORMAL
Metabolización de las drogas liposolubles
(compuestos potencialmente tóxicos)

Componente fundamental del Sistema

Reticuloendotelial y las células de Kupffer:
constituyen principal dentro de defensa contra
bacterias intestinales y de eliminación de los
complejos antígeno-anticuerpo

Centro de almacenamiento: energía en forma de

glucógeno, de hierro y vitaminas (A, D y B12).
Localización de las enzimas hepatocelulares
Se localizan en distintos sitios del hepatocito
Diferentes patrones de liberación
Distintos mecanismos de daño

FAL
GGT GGT

ALT
ASTc
LDH

ASTm
5’ -NT
 PRUEBAS DE DAÑO HEPATICO
Enzimas que reflejan daño celular
Las enzimas citoplasmáticas y mitocondriales
Daño irreversible en la membrana celular (acompaña a
la muerte celular)
Marcadores: ALT, AST, LDH

Enzimas que reflejan daño canalicular

Las enzimas canaliculares
Acumulación de ácidos biliares en la obstrucción canalicular
Marcadores: GGT, FAL, 5‘ N
 ENFERMEDADES HEPATICAS
AGUDAS
Asintomáticas en su mayoría.
Elevación de la bilirrubina conjugada (ictericia)
Causas: Hepatitis aguda u obstrucción del tracto biliar (ictericia
colestásica u obstructiva)

CRONICAS
Infección crónica por VHB o VHC.
Hemocromatosis
Enfermedad de Wilson
Hepatitis Autoinmune
Cirrosis
Carcinoma hepatocelular
Lesiones ocupantes de espacio
 PERFIL
COLESTASICO

Consideraciones Generales
Fundamentos y características
Interpretación
 GENERALIDADES
LA SECRECIÓN BILIAR
Involucra complejos mecanismos.
Formación de bilis (hepatocito).
Modificación en los conductillos y conductos biliares.
Excretada en el intestino.

INTERFERANCIA: de los mecanismo a cualquier

nivel y por diferentes causas

Consecuencia: COLESTASIS. 1956, Hans Popper

 GENERALIDADES
 Las alteraciones que esta produce,
independientemente de la etiología, son la
disminución del flujo biliar y la acumulación en
el hígado (con aumento en la sangre) de
sustancias normalmente excretadas por la bilis.
 Síndrome clínico-humoral, caracterizada por
prurito, ictericia, elevación de las enzimas
colestásicas (fosfatasa alcalina, gamma-glutamil-
transferasa y 5‘-nucleotidasa).
 Existe un impedimento de la secreción biliar y
defectos en la secreción de aniones orgánicos.
 GENERALIDADES
 Desde el punto de vista clínico es un conjunto de
signos y síntomas (ictericia, prurito, xantelasmas,
etc.) secundario a la acumulación en el plasma de
productos normalmente excretados por la bilis tales
como bilirrubina, ácidos biliares y colesterol.
 DEFINICION
SÍNDROME RESULTANTE DE TRASTORNOS
Formación, secreción o drenaje
Bilis al Intestino.
Alteraciones morfológicas, fisiológicas y clínicas.

PROCESO BIOQUIMICO: incremento de la fracción

hepatobiliar de la FAL, GGT, 5‘-NT, ácidos biliares y
colesterol entre otros.

MANIFESTACIONES CLINICAS: ictericia, prurito,

xantelasmas, etc.
 CLASIFICACION
 Pueden ser:
 Intrahepáticas / Extrahepáticas.
 Ictéricas / Anictéricas.
 Agudas / Crónicas.

Universalmente aceptada: Normas de

Estandarización para las enfermedades del
Hígado y de Vía biliar (1994).
 INTRAHEPATICA EXTRAHEPATICA

Alteraciones hepatocelulares de Alteraciones

los canalículos biliares o de los de los conductos biliares.
pequeños conductillos.
 En conclusión, la simple clasificación de las
colestasis en intra o extrahepáticas provee un
esquema práctico, con importantes implicancias
diagnósticas y terapéuticas.

 Las alteraciones de los Conductos biliares

principales comprenden a los procesos que
producen obstrucción mecánica de los
mismos, tanto extra como intrahepáticos.
 ETIOPATOGENIA
 Colestasis Extrahepática: Obstrucción parcial o
total de los conductos biliares (por litiasis, tumores
benignos o malignos, extrechez inflamatoria,
parasitos, etc).

 Colestasis Intrahepática: resultado de fallas en

los hepatocitos para secretar cantidades
adecuadas de bilis (por injuria viral, hepatitis,
drogas, alcohol o toxinas endógenas y exógenas).
Destrucción progresiva de los conductillos biliares
(Cirrosis biliar primaria).
 ETIOPATOGENIA
Colestasis congénita
(Colestasis intrahepática familiar progresiva: CIFP)
 MANIFESTACIONES CLÍNICAS
 Los antecedentes de tóxicos y medicamentos deben
ser exhaustivamente interrogados.
 El dolor en el hemiabdomen superior es en general
orientador de patología biliopancreática.
 El antecedente de dolor cólico en epigastrio y en el
hipocondrio derecho acompañado de escalofríos es
característico de la colangitis aguda en general debida
a litiasis coledociana.
 Un dolor fijo en epigastrio con irradiación posterior es
una manifestación frecuente de patología pancreática.
 Colestasis “silenciosa” (indolora), con o sin prurito, es
una forma frecuente de presentación del carcinoma de
la cabeza de páncreas.
 MANIFESTACIONES CLÍNICAS
 Las colestasis intrahepáticas son indoloras, el prurito
puede ser la primera manifestación, en especial en las formas
crónicas.
 La presencia de ictericia, coluria, hipocolia y prurito son
comunes a la mayoría de los pacientes con colestasis.
 Otros síntomas dependen de la etiología (el dolor cólico,
fiebre y escalofríos en las de origen litiásico, dolor
epigástrico con irradiación posterior y pérdida de peso en el
cáncer de páncreas).
 La ictericia es el signo más frecuente, puede haber
colestasis sin ictericia y sin hiperbilirrubinemia como sucede
en las OBP y en estadíos tempranos de la CBP o de la CEP.
 En las colestasis crónicas el aumento de la bilirrubina suele
aparecer meses o años después del prurito y del aumento de
las enzimas colestásicas.
 Características de Laboratorio
de la Colestasis
 Los hallazgos comunes a todas las formas de
Colestasis son:

 Aumento de la bilirrubina conjugada.

 Aumento de la Fosfatasa Alcalina.
 Aumento de la Gamma-glutamil-transferasa.
 Aumento de la 5‘-Nucleotidasa.
 Aumento del colesterol total, ácidos biliares,
aparición de bilirrubinuria.
 Características de Laboratorio
de la Colestasis
La obstrucción del árbol biliar es la causa mas común
del desarrollo de ictericia.

Con menor frecuencia, la obstrucción intrahepática

generalizada (mecánica o funcional) puede producir
ictericia.

La ictericia colestásica u obstructiva va acompañada de

prurito (opiáceos endógenos).

El prurito normalmente precede al desarrollo de la

ictericia.
 Características de Laboratorio
de la Colestasis
Se desarrolla gradualmente un de las enzimas
canaliculares (FAL – GGT)
GGT alcanza valores anormales antes que FAL total
Obstrucción extrahepática o daño en conducto biliar
intrahepática ( ambas)
Se produce de bilirrubina conjugada (ictericia
severa en obstrucción total) remisión
Fracción de bilirrubina (BD) es similar en la Hepatitis y la
Obstrucción (no distingue entre daño hepático y Colestasis)
Obstrucción extrahepática transitorio de enzimas
citoplasmaticas (similares al daño hepatocelular
agudo) remisión a los 10 días aprox.
 PATRONES DE COLESTASIS
TIPO LOCALIZACION FAL
DE LA OBSTRUCCION ALT (ALP) BILI CAUSAS

Bilirrubinostasis Hepatocito N N Elev. Sepsis, NPT, esteroides

sexuales

Hepatitis Canalicular Elev. Elev. Elev. Daño inducido por

Colestásica drogas, deficiencia de
AAT neonatal
Daño Conductos biliares N Elev. N Cirrosis Biliar Primaria
Ductal Intrahepáticos Lig. Elev. Lig. Elev. Colangitis Esclerosante
Primaria
Obstrucción Conductos biliares Elev. * Elev. + Elev. + Cáncer pancreático
Completa Extrahepáticos Piedras en el conducto
biliar.

ALT: Alanina aminotransferasa; ALP: Fosfatasa alcalina; Bili: Bilirrubina;

NPT: Nutrición parenteral total; AAT: α1-antitripsina.
* Puede aumentar transitoriamente al comenzar la obstrucción.
+ Aumenta gradualmente con la obstrucción y es normal al principio de la misma.
 Distinción entre Daño Hepático
y Colestasis
CARACTER DAÑO HEPATOCELULAR COLESTASIS

ALT > 10 x LSR en la mayoría de las formas, Aumento transitorio > 10 x LSR en la
persiste durante semanas. obstrucción completa, disminuye
rápidamente
ALP < 3 x LSR en la mayoría de las formas > 3 x LSR en la mayoría de las formas,
normal en la obstrucción temprana

GGT Normalmente < 5 x LSR Normalmente > 5 x LSR, puede ser menor
en la obstrucción temprana

BILI 50 % a 80% de reacción directa 50 % a 80% de reacción directa

TP Normal o ligeramente elevada en la mayoría Normal en la mayoría de las formas; puede

de las formas aumentar en la obstrucción prolongada

Análisis de Conducto s normales Conductos anormales en la obstrucción

completa
Imágenes

LSR: Límites superiores de referencia

5’ –NUCLEOTIDASA (EC 3.1.3.5)
5’ –ribonucleosido fosfohidrolasa o NTP
 5’ –NUCLEOTIDASA
 Es una fosfatasa específica con un peso molecular
de aproximadamente 70 kDa.
 Actúa únicamente sobre nucleótidos (ATP Y GTP).
 Implicada en la producción de adenosina
extracelular, la absorción de nutrientes y la
proliferación celular.
 Ampliamente distribuida en el cuerpo (SNC,
testículos, pulmón, aorta, hipófisis), unida a
membranas celulares (como la ALP, GGT).
 La 5’ –NT de plasma deriva principalmente del
hígado.
 5’ –NUCLEOTIDASA
 IMPORTANCIA CLÍNICA
 Un aumento de la 5’ –NT en suero puede ser debido a
causas Extrahepáticas (cálculos o tumores ocluyendo
el conducto biliar) o Intrahepáticas (Colestasis, cirrosis
biliar, infiltración neoplasia del hígado).
 Contribuye a diferenciar el Incremento de fosfatasas
a nivel Hepático, Intestinal u Óseo.
 5’ –NT no esta comprometida en el metabolismo
óseo ni en el de la mucosa intestinal.
 En enfermedades del sistema hepatobiliar la actividad
de la 5’ –NT aumenta paralelamente a la ALP.
 La 5’ –NT cataliza la desfosforilación de AMP
(adenosina 5’ –monofosfato)

Máxima actividad de 5’ –NT a pH: 7.5 (alcalino)

A este pH el AMP también es hidrolizado

inespecíficamente por las fosfatasas alcalinas

5’ –nucleotidasa
AMP + H2O Adenosina + Pi
( y ALP)

Ni 2+ “inhibicion competitiva”
Ni 2+ P
Ni 2+ 5’ –nucleotidasa
DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA
5’ –NUCLEOTIDASA
Método Enzimático
Cinético de Puntos Múltiples

AMP + H2O 5’ –nucleotidasa Adenosina + Pi

Adenosina + Pi ADA Iosina + Amonio
Amonio + 2-oxoglutarato + NADH GLDH Glutamato + NAD

La velocidad de formación de NAD, el cual produce disminución de

la absorbancia a 340 nm, es directamente proporcional a la
velocidad de formación de adenosina y por lo tanto
de la actividad de la 5’-Nucleotidasa.
DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA
5’ –NUCLEOTIDASA
5’-NT produce la hidrólisis de adenosin 5’-monofosfato (AMP)
formando adenosina y fosfato inorgánico (Pi)

La adenosin desaminasa (ADA) desamina la adenosina,

produciendo inosina y ión amonio (NH4+)

En una reacción acoplada catalizada por L-glutamato

deshidrogenasa (GLDH), el amonio reacciona con 2-
oxoglurato en presencia de Nicotinamida-adenina-
dinucleótido reducido (NADH)

para formar glutamato y NAD.

 Causas de resultados anormales
 Como ocurría con la GGT, la 5’-NT normalmente
se utiliza para determinar si los niveles de ALP
tiene origen hepático u óseo.
 Los niveles elevados de 5’-NT se deben a
trastornos colestásicos; sin embargo, la hepatitis
aguda produce un ligero incremento.
 La 5’-NT presenta niveles altos en el carcinoma
ovárico y en la artritis reumatoide.
 La mayoría de los agentes quelantes (como el
EDTA), inhiben la actividad enzimática.
FOSFATASA ALCALINA (EC 3.1.3.1)
 FOSFATASA ALCALINA (ALP)
 La ALP representa a una familia de enzimas
codificadas por diferentes genes.
 Las formas mas abundante de ALP están
codificadas por un único gen en el cromosoma
1; produce la isoenzimas no especifica de tejido
que se encuentra en riñón, hígado y hueso.
 Dos genes del cromosoma 2 codifican la ALP de
origen placentario e intestinal; otro la isoenzima
denominada de células germinales o semejante a
la placentaria (placental-like).
 FOSFATASA ALCALINA (ALP)
 En las células la ALP se encuentra
fundamentalmente unida a membranas.
 Los hepatocitos producen ALP hepática, unida a la
superficie canalicular.
 Los osteoblastos producen ALP de hueso,
implicada en la escisión del pirofosfato, un
inhibidor de la mineralización ósea.
 Las células del epitelio intestinal producen ALP
intestinal, se libera al intestino después de la
ingestión de comidas grasas.
 FOSFATASA ALCALINA (ALP)
 IMPORTANCIA CLINICA
 Diferentes mecanismos de liberación de ALP desde
las células (distintas formas de ALP plasmática).
 Se observa en suero una forma de ALP hepática;
cuando existe daño hepatobiliar se pueden
observar tanto el producto normal como la forma
unida a membrana.
 La vida media de las isoenzimas de ALP varía unas
de otras, conocer los niveles aumentados para
evaluar la tasa de eliminación: intestino, minutos; hueso,
un día; hígado, tres días; placenta, siete días.
 La variación diaria de ALP total oscila entre el 5% -
10%.
DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA
FOSFATASA ALCALINA
Método de Referencia: Bowers yMcComb
Punto Final Colorimétrico

ALP
p-nitrofenilo + H2O p-Nitrofenol + HPO42- + 2H+
ALP
p-NFp Mg ++ p-Nfenol
pH: 10.2 (alcalino)

La ALP hidroliza el p-NFp para formar

el cromógeno amarillo p-Nfenol.
El incremento en la absorbancia a 415nm es proporcional a
la actividad de la fosfatasa alcalina.
 Causas de resultados anormales
 Son las enfermedades del Hígado y Hueso.
 Los trastornos que causan Colestasis
producen elevación de ALP con mayor
frecuencia que los trastornos Hepatocelulares.
 La actividad osteoblástica aumentada
(enfermedad de Paget, osteosarcoma, tumores
metastásicos y enfermedades metabólicas de
hueso) incrementa la isoenzima de hueso.
 Aumento de la ALP intestinal son normales
en pacientes con diabetes, fallo renal y cirrosis.
 R SU
S P O
AC I A …
GR C I O N
AT E N