Clase 3 - H.F. Identificadora

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DIRECCIÓN DE CRINIMALÍSTICA DE LA

POLICÍA NACIONAL DEL PERÚ

ESCUELA DE
CRIMINALÍSTICA

Manejo de Muestras, Indicios y Evidencias de


Biología y Genética.
Clase 3: Hematología Forense
(Identificadora)
CAP. SPNP GUTIÉRREZ MÉNDEZ, ROSA

LIMA, 2018.
Objetivos:
Que los participantes aprendan a identificar y
describir las manchas que presumiblemente sean
sangre.
Conocer cómo y qué exámenes solicitar al
enviar la muestra al laboratorio forense.
Al mismo tiempo conocer la forma en que se
debe recoger, envasar y transportar las muestras
para ser remitidas al laboratorio forense.
HEMATOLOGÍA FORENSE
IDENTIFICADORA
Es una rama que se ocupa de identificar la sangre.
Los procedimientos están destinados a investigar si es
sangre, a que especie pertenece y en lo posible
individualizarlo.
El aspecto macroscópico de las manchas a menudo
inducen a error, por lo que es necesario recurrir a las
pruebas de laboratorio para tener la certeza de lo que
es.
La muestra sospechosa de sangre, puede ser fresca o
antigua, sólida o líquida o estar contenida en diversos
soportes. 
Hematología Forense
Identificadora:
A partir de una mancha visible (o
invisible) encontrada en la escena, se
puede determinar:
La naturaleza de la mancha.
Precisar si es humana o no.
Determinar el grupo sanguíneo.
Pruebas realizadas en el
Laboratorio:
Pruebas de orientación.
Pruebas de certeza.
Pruebas de especificidad.
Pruebas de individualización /
identificación (determinación del
grupo sanguíneo)
Pruebas de orientación:
Son pruebas rápidas basadas en la actividad
de la PEROXIDASA de la sangre que
posee el grupo HEMO (de la
Hemoglobina), que en presencia de agua
oxigenada y de ciertos reactivos orgánicos
dan lugar a la aparición de coloraciones o
luminiscencia que orientan sobre la posible
existencia de sangre en las muestras
estudiadas.
La peroxidasa al contacto con el agua
oxigenada, libera oxígeno y este
oxígeno es el que actúa sobre los
reactivos orgánicos, produciéndose así
la oxidación que se transforma en
coloraciones.
En el caso que el resultado fuera
negativo, se descartará la mancha, si
da positivo se debe continuar con los
ensayos confirmatorios.
1.Investigación de la catalasa de Vandervelde o hemasa de
Senter (Agua oxigenada). Conocida también como
reacción de Schoenbein, basada en la acción de la
peroxidasa sobre el agua oxigenada, el oxígeno liberado
forma pequeñas burbujas formando una espuma
blanquecina. Sensibilidad: 1/40 000.
Se pueden confundir con : sales minerales como sales de cobre,
de níquel, cobalto, hierro, pus de heridas infectadas, secreción
nasal, manchas de origen vegetal
https://www.youtube.com/watch?v=bjlcNE-3FeQ
2. Reacción de Adler. El grupo hem de la hemoglobina
posee actividad enzimática que puede catalizar la
ruptura del peróxido de hidrógeno. Mientras no estén
presentes otras sustancias orgánicas oxidantes, esta
descompone el peróxido y al reaccionar con la
bencidina la oxidará formando un compuesto
intensamente azul. Sensibilidad: 1 en 100 000 (1 en 300
000 a 500 000 ).
3. Prueba de Kastle-Meyer. Se fundamenta en la
actividad de la peroxidasa, presente en la
hemoglobina de la sangre, este cataliza la oxidación
de la fenolftalina (forma reducida e incolora de la
fenolftaleína) a fenolftaleína, que es visible por su
color rosado brillante.
Sensibilidad: 1 en 1 000 000 (1/ 10 000 000).
4. Prueba de Leucomalaquita verde. Es una
prueba química que se da por la óxido-reducción del
grupo N de la sangre, si al aplicar el reactivo la
coloración se torna verde, hay presencia de sangre. Esta
técnica fue reportada por Hunt, quien señala la encontró
más confiable para sangre, aunque menos sensible que
la bencidina.
5. Pruebas de quimioluminiscencia.
Entre las principales y más usadas tenemos:
A).- Luminol (5-amino-2,3-dihidroftalazina-1,4-diona)
es un compuesto químico que exhibe
quimioluminiscencia, emitiendo luz azul al ser
mezclado con el agente oxidante adecuado.
Detecta trazas de sangre al reaccionar con el hierro de la
hemoglobina.
Sensibilidad: 1:1 000 000 (1 en 5 000 000)
https://www.youtube.com/watch?v=tCi-snpUNbY
5. Pruebas de quimioluminiscencia.
B).- Bluestar. Sensibilidad: 1:10 000 (1 en 1 000
000)
https://www.youtube.com/watch?v=pZlt5dxa1ns
6. Luces forenses. La hemoglobina se encuentra en una
absorbancia de 412 nm (próxima a la región del
ultravioleta). La sangre absorbe pero no emite la
fluorescencia.
https://www.youtube.com/watch?v=QAuePQ2ybM0
https://www.youtube.com/watch?v=VhcbCOIv76M
Restricciones de las Pruebas
de orientación:
Existen sustancias orgánicas e inorgánicas que tienen
semejanzas con la sangre. Dentro de las sustancias orgánicas
que pueden generar falsos positivos tenemos:
Vegetales como: la mora, la fresa, la beterraga, el tomate,
entre otros.
Látex, la sangre de grado, el carmín, vino, etc.
Entre las sustancias químicas tenemos:
Aseptil rojo.
Tintura de yodo.
Anilina y
Mezclas como la cera de piso.
Pruebas de certeza:
La hemoglobina puede formar microcristales con ciertos
reactivos los cuales deben ser observados con un
microscopio.
1.Cristales de hemina o cristales de
teichmann. En caso positivo aparecerá cristales
romboidales de color café oscuro.
Pruebas de certeza:
2. Prueba de takayama. En caso
positivo se observarán cristales romboides
de color rosa o alrededor de la muestra.
Pruebas de especificidad
(determinación de especie)
Una vez confirmada la presencia de sangre se procede a la
determinación de la especie, con el objetivo de establecer si es
humana o no. Antes se hacían observaciones microscópicas para
visualizar los elementos formes que componen la sangre y así
poder identificar la si pertenecían a la especie humana o a otro
animal.

Glóbulos rojos Glóbulos rojos de aves


humanos
Hoy en día estas pruebas se basan en
reacciones mediadas por sueros antihumanos
que reaccionan con elementos específicos de
la sangre humana (proteínas) que componen la
sangre y así poder identificar la si pertenecen a
la especie humana o a otro especie animal.
1. Ensayo de precipitación. La reacción
antígeno anticuerpo se visualizara mediante
la formación de un precipitado.
2. Pruebas inmunocromatográficas.
BLUESTAR® OBTI 
(antigua denominación : HEXAGON OBTI)

La hemoglobina humana
(hHb) en la muestra
reacciona con un reactivo
consistiendo en partículas
de color y anticuerpos Hb
La prueba detecta sangre entera monoclonales
hasta una dilución de antihumanos, formando
1 : 2 000 000.
Se requiere una cantidad mínima una línea roja/rosada que
de 250 glóbulos rojos para un indica que la prueba ha
resultado positivo. dado un resultado positivo.
Pruebas de individualización /
identificación (determinación del grupo
sanguíneo)
El rastreo hemático en la práctica forense en
muchas ocasiones aporta a los tribunales
elementos de prueba muy importantes tanto para
señalar si una mancha de sangre recogida del
lugar de los hechos puede provenir de la víctima
o del victimario, o indicar con mayor certeza que
no hay similitud entre la sangre hallada y la de la
víctima o su asesor.
Karl Landsteiner descubrió la existencia del sistema ABO en
1901, él observó que la sangre humana tenía características
individuales que se manifestaban por reacciones de aglutinación,
pues encontró que los eritrocitos de unas personas eran
aglutinados o agrupados por el suero sanguíneo de solamente
algunos otros individuos. Este hallazgo dio origen al hallazgo de
otros grupos como el MN, el P, el sistema Rh y muchos más.
. Método directo.

Un grupo sanguíneo es
una clasificación de la
sangre de acuerdo con las
características presentes en
la superficie de los glóbulos
rojos y en el suero de la
sangre.
2. Método indirecto.
Recordar la clase de escena del crimen
1) Contaminación por material biológico
humano: se debe al depósito de material
biológico humano, en el lugar de los
hechos y/o el cuerpo de la víctima; con
posterioridad a la producción del delito.
Es frecuente durante el proceso de recogida
de indicios, si no se mantienen las
precauciones mínimas y por defectos en
el empaquetado de las muestras.
2)Transferencia de indicios biológicos:
Se refiere al traslado, normalmente accidental, de
los indicios de una localización a otra, lo que
da lugar a una contaminación o puede
ocasionar la perdida de la prueba.
3) Contaminación
microbiológica:
Este tipo de contaminación
tiene lugar por el desarrollo
de microorganismos y suele
ser favorecida por la
humedad y las altas
temperaturas. Normalmente
se produce o incrementa por
defectos en el empaquetado
y conservación de la
muestra hasta su envío al
laboratorio.
4) Contaminación química: se
debe a la presencia de productos
químicos que van a dificultar
algunos procesos del análisis en el
laboratorio, principalmente las
pruebas de ADN. Esto se produce
cuando las muestras se envían
inmersas en productos conservantes
como el fenol o la lejía (usados en
otros estudios, como el recojo de
huellas).
Como evitar o minimizar los
procesos descritos
Aislar y proteger, lo mas rápidamente posible la
escena del delito y salvo que alguna
circunstancia lo impida, los indicios biológicos
deben ser los primeros en ser recogidos y
analizados.
Perennizar o documentar lo mejor posible la
evidencia a base de las manchas de sangre, a
través de la descripción detallada, croquis, fotos,
videos, etc. utilizando las reglillas de referencia
de tamaño.
 Importante: NO olvidar usar los equipos de protección
personal.
La sangre es una fuente potencial de enfermedades.
Y recuerden que es un medio por el cual se identificará a un
individuo. Usar guantes limpios que deben cambiarse con
frecuencia, especialmente cuando se manipulan indicios
susceptibles de tener distinto origen.
Evitar hablar o estornudar sobre las muestras. Usar
mascarillas. Usar bata u otro tipo de ropa protectora.
No añadir conservantes a las muestras.
NO OLVIDAR incluir en su maletín recipientes y sobres donde
recoger muestras de sangre.
Diferentes recipientes y envoltorios donde se pueden recoger
muestras de sangre.
¿Cómo y con qué recojo las muestras de
sangre?
1º Identificar si la muestra está fresca o seca; e ubicarla (piso,
pared, prenda de vestir, armas, etc.)
2º Si la muestra es fresca será transferida directamente a un
soporte (hisopo, gasa, papel filtro, etc.) y puesto en un
contenedor adecuado (tubo, frasco, etc.)
3ºSi la muestra es seca será transferida a un soporte
humedeciéndolo con solución salina (suero) o en su defecto
agua destilada; para posteriormente ser puesto en un
contenedor.
¿Cómo y con qué recojo las muestras de
sangre?
4ºLas costras pueden ser recogidas con ayuda de una
espátula o algún objeto que cumpla esa función y ser
puestas directamente en un sobre de papel (sobre de
evidencias)

OJO: si las muestras a enviar son prendas de vestir,


armas punzo cortantes o contusas, entre otras; estas
pueden ser colocadas en una bolsa de evidencia.
¿Cómo son tratadas las muestras de
sangre antes de ser enviadas al
laboratorio?
Dejar secar a y temperatura ambiente, en un
lugar protegido, entes de empaquetarlas
para su envío definitivo al laboratorio.
 Empaquetar cada muestra por separado
 Empaquetar las muestras en bolsas de papel o
cajas de cartón evitando utilizar plástico siempre
que sea posible.
Una vez terminada la recogida de muestras, tirar todo
el material desechable utilizado (guantes, pipetas,
papeles) en bolsas de basura o contenedores, para
eliminarlos posteriormente según normas de
destrucción de residuos vigentes en cada centro.
http://archive.nytimes.com/www.nytimes.com/interactive/2011/11
/20/nyregion/nypd-crime-scene-panoramas.html

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