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    Fundamentos Cromatografía

    Cargado por

    Camilo Andres Barreto
    La cromatografía separa las moléculas de una muestra compleja mediante interacciones entre fases móvil y estacionaria. Existen dos tipos principales: cromatografía de gases usa un gas como fase móvil, y cromatografía líquida de alta eficiencia usa un líquido como fase móvil. La cromatografía permite el análisis cualitativo y cuantitativo de muestras mediante la detección e interpretación de picos cromatográficos.

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    Fundamentos Cromatografía

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    Camilo Andres Barreto
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    La cromatografía separa las moléculas de una muestra compleja mediante interacciones entre fases móvil y estacionaria. Existen dos tipos principales: cromatografía de gases usa un gas como fase móvil, y cromatografía líquida de alta eficiencia usa un líquido como fase móvil. La cromatografía permite el análisis cualitativo y cuantitativo de muestras mediante la detección e interpretación de picos cromatográficos.

    Descripción original:

    fundamentos basicos de cromatografia hplc

    Título original

    FUNDAMENTOS CROMATOGRAFÍA

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    La cromatografía separa las moléculas de una muestra compleja mediante interacciones entre fases móvil y estacionaria. Existen dos tipos principales: cromatografía de gases usa un gas como fase móvil, y cromatografía líquida de alta eficiencia usa un líquido como fase móvil. La cromatografía permite el análisis cualitativo y cuantitativo de muestras mediante la detección e interpretación de picos cromatográficos.

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    La cromatografía separa las moléculas de una muestra compleja mediante interacciones entre fases móvil y estacionaria. Existen dos tipos principales: cromatografía de gases usa un gas como fase móvil, y cromatografía líquida de alta eficiencia usa un líquido como fase móvil. La cromatografía permite el análisis cualitativo y cuantitativo de muestras mediante la detección e interpretación de picos cromatográficos.

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    FUNDAMENTOS DE

    CROMATOGRAFÍA

    Dilan Jair Sanchez


    Diana Gabriela Alzate
    Estacionaria: Sólido,
    Muestra se líquido ligado sobre
    Estacionaria y Columnas empacadas
    distribuye en dos tubo capilar o una
    móvil superficie de partículas o capilares
    fases
    sólidas

    Técnicas de
    Móvil: gas, líquido o CG = FM gas separación – análisis Análisis cualitativos y
    FS de muestras análisis cuantitativos
    CL = FM líquido
    complejas
    2
    CLAE (Cromatografía Líquida de alta eficiencia) o
    HPLC (High Performance Liquid Chromatography)
    Tipos de interacciones Fase Estacionaria

    2
    CLAE (Cromatografía Líquida de alta eficiencia) o
    HPLC (High Performance Liquid Chromatography)

    • FE polar y FM Menos polar


    CL en Fase normal
    • Partículas de Silica

    • FE no polar y FM más polar


    CL en Fase reversa
    • C18

    2
    FASE MÓVIL Y GRADIENTE

    FASE MÓVIL
    • Muestra soluble en FM
    • Baja reactividad
    • Compatible con el detector
    • Baja toxicidad
    • Baja viscosidad
    • Alto grado de pureza

    2
    CLAE (Cromatografía Líquida de alta eficiencia) o
    HPLC (High Performance Liquid Chromatography)
    ¿Qué características necesito para
    seleccionar mi columna?
    Diámetro interno

    Longitud

    Tamaño de partícula

    Relleno

    2
    EQUIPO

    2
    PROCEDIMIENTO
    1. Equilibrate the column and detector with
    mobile phase at the specified flow rate until a
    constant signal is received.
    2. Inject a sample through the injector, or use
    an autosampler.
    3. Begin the gradient program.
    4. Record the chromatogram.
    5. Analyze as directed in the monograph.

    2
    INTERPRETACIÓN DE UN CROMATOGRAMA
    tm: tiempo requerido para la
    elución de un componente no
    retenido
    W: ancho de la banda (min)
    h: Altura
    W1/2: Ancho de la banda a la
    mitad de la altura

    2
    PARÁMETROS
    • PLATOS TEORICOS:
    • RESOLUCIÓN:

    • FACTOR DE RETENCIÓN:

    • FACTOR DE SEPARACIÓN:

    • ASIMETRÍA:

    2
    RESOLUCIÓN Aumente N (eficiencia) mediante:

    Aumento de la longitud de la columna


    Disminución del tamaño de las partículas
    Reducir las colas de los picos
    Aumento de temperatura
    Reducción del volumen extracolumna del sistema

    Cambie α (selectividad) mediante:

    Cambio de la fase estacionaria de la columna


    Cambio del pH de la fase móvil
    Cambio de disolvente (s) de fase móvil

    Incrementar k por:

    Usando un solvente con diferente polaridad


    Usando una fase estacionaria más fuerte (cambio de
    polaridad)

    2
    2

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