Cultivo, Serologia, Sensibiliodad, Timcion de Gram

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CULTIVO Y

ANTIBIOGRAMA
EN LA PRACTICA MEDICA

Dra. Aracely Zapata Rojas


INTRODUCCION
 CULTIVO: Es un método
para la multiplicación de
microorganismos.
 ANTIBIOGRAMA: Es la
prueba microbiológica
que determinarla
susceptibilidad de un
microorganismo a un
grupo de antibióticos.
 Permite seguir la
evolución de las
resistencias.
UTILIDAD

 Es de uso terapéutico y
epidemiológico.
SENSIBILIDAD BACTERIANA A LOS
ANTIBIÓTICOS
 CIM: es cantidad mínima
de la dilución de un ATB
que inhibe el crecimiento
de un microorganismo.
 Permite establecer la
escala de actividad de un
ATB.
 Se pueden clasificar en
Sensibles, Resistentes e
Intermedios.
SENSIBILIDAD BACTERIANA A LOS
ANTIBIÓTICOS
 Sensible: Existe una
buena probabilidad de
Éxito terapéutico con el
Tx a dosis habitual.
 Resistente: Éxito nulo o
muy reducido.
 Intermedia: El Éxito es
imprevisible, se puede
conseguir éxito bajo
ciertas condiciones.
TINCION DE GRAM
TINCION DE GRAM
PERMITE:
 Identificación preliminar de
la bacteria causal de una
infección.
 Realizar el control calidad
del aislamiento bacteriano.
 Correlacionar con los
aislamientos bacterianos
realizados en los cultivos.
 reconsiderar los medios de
cultivos empleados así como
la atmósfera de incubación al
que fueron sometidos.
UTILIZACION
 Es un aprueba que va
acompañada del cultivo,
después de un cultivo de
material biológico, se
sigue con la tinción de
Gram .
 El reconocimiento de del
microorganismo nos
permitirá la toma de
decisiones para el Tx.
SEROLOGIA
INTRODUCCION
 Reacción antígeno –
anticuerpo.
 Los anticuerpos pueden
estar presentes sin que
existe un antígeno
(vacunas, enfermedades
que dejan inmunidad).
INTRODUCCION
 PRUEBAS DIRECTAS:
Están basadas en el principio
de la reacción antígeno
anticuerpo, buscan el la
presencia del antígeno.
 PRUEBAS INDIRECTAS:
Están basadas en la reacción
antígeno anticuerpo ,
investigan la huella que dejo
la infección.
PRUEBAS SEROLOGICAS
 Para el diagnóstico indirecto se debe
recordar conceptos de : Distinción
entre propio y extraño, especificidad y
memoria.
 Distinción entre propio y extraño: el
sistema inmune no debiera responder
en condiciones normales frente a sus
propias sustancias
 La especificidad: es la propiedad que
permite al sistema inmune responder
frente al agente externo que la provocó
la respuesta, no afectando a otros
antígenos.
 La memoria inmunológica: permite
que el sistema inmune recuerde haber
tenido contacto previo con un antígeno
y responda frente a él de forma
anamnésica.
NECESIDAD DE DIAGNOSTICO
INDIRECTO
 El diagnostico indirecto se hace
indispensable en:
1) Los cultivos, en ocasiones, pueden ser
negativos si las muestras se obtienen
después del tratamiento o el agente no
es cultivable.
2) El aislamiento del patógeno puede ser
imposible si la muestra se tomó tarde
cuando el agente ya se elimino.
3) En algunas fases subagudas de la
enfermedad los microorganismos son
difícilmente recuperables,
indeterminables en el caso del portador
sano.
4) En casos atípicos o asintomáticos
5) En los aislamientos mixtos en los que
es difícil predecir cuál es el agente
etiológico causal.
PRUEBAS SEROLOGICAS
 Las pruebas indirectas Pueden ser
primarias o secundarias.
 Las pruebas primarias implican la
búsqueda de la IgM, es una detección
precoz y los títulos de esta no son
muy altos, su persistencia es muy
corta; la detección se identifica con
una infección aguda, otras pueden
encontrase en estados crónicos o
reagudizados (HB, Delta)

 Las pruebas secundarias son aquellas


en las cuales la reacción antígeno
anticuerpo da lugar a una
manifestación visible , lo que permite
una lectura visual macroscópica.
PRUEBAS PRIMARIAS
 Fijación de completo.
 Inmunofluorecencia
 Radioinmunoensayo
 Pruebas
inmunoenzimaticas
 Inmunoelectrotransferen
cia
 inmunocromatografia
PRUEBAS SEROLOGICAS
INDIRECTAS SECUNDARIAS
 Las pruebas indirectas
secundarias pueden ser:
 Cualitativas ( expresan la
existencia o no
anticuerpos)
 Cuantitativas: titulo del
suero – concentración en
el suero del paciente, es
útil para la determinación
de la situación clínica o
decidir si esta es una
respuesta de vacunación.
TITULO DEL SUERO
 Para la determinación , se
realiza diluciones seriadas
del suero que irán
sucesivamente disminuyendo
la concentración de
anticuerpos, el titulo del
suero será el de la ultima
dilución. Ejemplo: 1/32
tendrá menos anticuerpos
que un suero con un titulo de
1/256.
PRUEBAS SEROLOGICAS
INDIRECTAS SECUNDARIAS
 La precipitación determina
la similitud de los antígenos,
es una de las pruebas mas
versátiles, la característica es
que el antígeno esta siempre
en una solución tampón, que
generalmente es salina.
 Se coloca una serie de
capilares con una
concentración descendente de
anticuerpos, se pone en
incubación y se pueden
observar 3 zonas diferentes:
PRUEBAS SEROLOGICAS
INDIRECTAS SECUNDARIAS
 La aglutinación: esta
siempre en suspensión, se
trata de partículas , se
requiere de un antígeno en
suspensión, un sistema
Buffer y la disolución de
anticuerpos, se coloca en una
apropiada dilución de suero
que contenga anticuerpos
contra un antígeno especifico
y se espera a que se formen
grumos visibles.
PERFILES SEROLOGICOS
 Generalmente el problema clínico
requiere investigar varios
patógenos como posibles agentes
etiológicos, como responsables de
la patología del paciente.
 En ocasiones el perfil se divide en
dos o tres niveles que se ejecutan
progresivamente según los
resultados obtenidos en el nivel
anterior.
 Este método de perfiles no es
nuevo, pero en la actualidad la
disponibilidad comercial de
muchos antígenos y la
automatización
PERFILES SEROLOGICOS
 Perfil respiratorio:
Este perfil está orientado al
estudio de procesos
respiratorios que
fundamentalmente muestran
patrones radiológicos poco
compatibles con neumonías
localizadas o lobares
(bacterianas). Causadas quizas
por los de las neumonías
atípicas (Mycoplasma, Coxiella,
Chlamydia y Legionella).
PERFILES SEROLOGICOS
 Perfil para el estudio de
las Hepatitis Virales: Las
hepatitis producidas por
los virus A, B, C, Delta, y
E.
 Perfil serológico para
Virus de la
inmunodeficiencia
adquirida
 Perfil para gestantes e
infecciones congénitas.
Gracias………….
LABORATORIO
REUMATOLOGICO
INTRODUCCION
 El uso del laboratorio en
las enfermedades
reumatológicas es
indispensable para su
clasificación , apoyo
diagnostico y pronostico .
 Los resultados deben ser
analizados siempre en un
contexto clinico.
FACTOR REUMATOIDE
 Los Factores Reumatoides
(FR) se asocian a la artritis
reumatoide, pero pueden
encontrarse en otras
enfermedades autoinmunes e
infecciosas.
 Es un autoanticuerpo de tipo
IgM producido contra la
porción Fc de la
inmunoglobulina G (IgG)
FACTOR REUMATOIDE
 Es sensible y permite
reconocer a un
verdadero sano.
 Valores normales o
negativos:
*>1300 U/ml (por
nefelometría)
*>1:80 (método de
aglutinación)
FACTOR REUMATOIDE
Puede dar positivo en
otras enfermedades
como:
 Sindrome Sjogren
 LES
 Esclerosis sistémica
 Hepatitis Infecciosa
 Tuberculosis
 Sacoidosis
 Artritis idiopática
ANTICUERPOS ANTI-NUCLEARES
 Los ANA, son
fundamentales para el
diagnostico de
enfermedades del tejido
conectivo ( LES, SS, ES,
DM-PM y otras)
 Es un examen muy
sensible y poco
especifica.
ANTICUERPOS ANTI-NUCLEARES
 son autoanticuerpos que
tienen como blanco el
contenido del núcleo celular.
 La concentración de
anticuerpos antinucleares
está significativamente
aumentada en aquellos
pacientes con enfermedades
autoinmunes.
ANTICUERPOS ANTI-NUCLEARES
 El valor positivo es aquel
que esta aumentado en
relación a la población en
general.
 El ANA se encuentra
positivo a bajas
concentraciones en la
población en general.
 La medición del ANA se
realiza por IFI o ELISA.
ANTICUERPOS ANTI-NUCLEARES
 Los títulos de referencia
son 1:40 para adultos y
1:20 para niños.
 ANA superior a estos
títulos sugieren la
presencia de LES 90%,
SS 60%, AR, ESM, PTI,
etc.
 Es muy sensible.
CLASIFICACION DE LOS ANA
 Determinar a que subtipo
pertenecen.
 Esto se realiza en células de la
línea HEp-2 (células epiteliales
humanas de estipe neoplasica)
 Anti-ENA (Antígenos
nucleares extraíbles)
 Nuclear Anti-gp-210
(glicoproteína de poro nuclear
gp-210)
 Anti-p62 (Nucleoporina 62)
 Anti-ds DNA (ADN doble
cadena)
 Anticuerpos anticentrómeros
ANTICUERPOS ANTI - DNA
 Es un auto anticuerpo
actúa directamente
contra la doble cadena
de DNA .
 se usan para el
diagnostico de LES, con
una especificidad de
95% pero con una
sensibilidad de 30 –
70%
ANTICUERPOS ANTI - DNA

 Positivo: mayor 1:10


Negativo: menor1:10
 Se asocian a
compromiso renal
lúdico.
ATICUERPOS ANTICITOPLASMA
DE NEUTRÓFILOS (ANCA)
 Estos anticuerpos son
útiles para determinar
vasculitis.
 Se detectan por IFI, usando
como sustrato polimorfo
nucleares (PMN).
 PATRONES: La
fluorescencia
citoplasmática (C-ANCA)
y la perinuclear (P-
ANCA).
ATICUERPOS ANTICITOPLASMA
DE NEUTRÓFILOS (ANCA)
 Los anticuerpos que dan
C-ANCA están dirigidos
en su mayoría contra la
proteínas 3 (PR3).
 Son altamente
específicos de
Granulomatosis de
Wegener.
ATICUERPOS ANTICITOPLASMA DE
NEUTRÓFILOS (ANCA)
 Los anticuerpos que dan
un P-ANCA pueden
reaccionar a la
mieloperoxidasa (MPO),
elastasa, catepsina y
otros antígenos. Los que
reconocen MPO se
asocian a vasculitis
sistémica con
compromiso renal
Gracias………….

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