Expression of MHC-I by Microglia and Lymphocytes in

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Expression of MHC-I and II by Microglia and

Lymphocytes in the Brain of Diet- Restricted Mice.


EXPRESIÓN DE MHC-I Y II POR MICROGLIA Y LINFOCITOS EN EL CEREBRO DE
RATONES CON DIETA RESTRINGIDA .

José Antonio ESTRADA, Uriel QUIJANO- JUAREZ and Irazú CONTRERAS.

Laboratorio de Neuroquímica, Facultad de Medicina, Universidad Autónoma del Estado de México, Paseo Tollocan esq.
Jesús Carranza s/n Colonia Moderna de la Cruz, C.P 50180, Toluca, México.

(Received June 5, 2018)

Expositor: L.T.O Alma Delia Cruz García


Resumen
 La microglía son células inmunocompetentes del sistema nervioso central preserva la homeostasis del tejido
nervioso, están asociadas al daño tisular.

 Restricción dietética.

 El objetivo de este estudio fue analizar el efecto de la restricción dietética en la expresión microglial de
MHC.
 Se alimentaron ratones BALB/c hembras y machos adultos ad libitum (controles) o se mantuvieron bajo
restricción dietética (reducción del 30% en la ingesta de alimentos) durante 4 semanas.

 Las células mononucleares de cerebro purificadas se analizaron mediante citometría de flujo, MHC-I y II.

• Las hembras bajo restricción dietética tuvieron un aumento significativo en la expresión de MHC-I en
microglía.
• (Intensidad de fluorescencia media = 7,854 (control) frente a 10,628 (dieta restringida))
• Mayores frecuencias de linfocitos en comparación con los controles (1,39 % (control) frente a 7,85 %
(dieta restringida))
 Las microglías se consideran células del sistema inmunitario residentes en el sistema
nervioso central (SNC) que comparten muchas de las características y funciones de
los macrófagos residentes en los tejidos.

En reposo, muestra una


Fundamentales para el
estructura ramificada lo que Cambios morfológicos
correcto desarrollo y
permite muestrear su medio en una estructura
funcionamiento de las
circundante en busca de ameboidea.
sinapsis neurológicas
patógenos.

Activación microglial clásica se


caracteriza por una mayor Activación microglial se
expresión de marcadores de relaciona con
activación como expresión MCH I neurotoxicidad. Restricción dietética.
y II.
Expression of MHC-I by Microglia and Lymphocytes in the Brain of Diet- Restricted Mice.

Expresión de MHC por microglía y linfocitos en el cerebro de ratones con dieta restringida.

 Los estudios de activación microglial de restricción dietética: Configuración ramificada a la


ameboidea y la expresión de marcadores microgliales/macrófagos comunes como ED-1 o
Iba1 después de la estimulación antigénica (21-23)

 El presente estudio tiene como objetivo contribuir a este problema explorando la


expresión microglial de las principales moléculas de histocompatibilidad en ratones bajo
un régimen de restricción dietética del 30%, para comprender mejor los efectos de este
tipo de intervención nutricional en las funciones microgliales.
MATERIALES Y MÉTODOS

ANIMALES Y GRUPOS EXPERIMENTALES.


Grupos experimentales:
Se separaron por sexo.
Ratones BALB/c de ocho semanas de edad, machos y hembras. (3 ratones por
jaula), con acceso a comida estándar para ratones y agua potable purificada, ciclo ad libitum (sin restricción
de luz de 12:12 h y temperatura de 22 °C. dietética)
y restricción dietética (DR,
La composición del alimento se informa de la siguiente manera: proteína alimentados con el 70 % de la
cruda no menos del 23%; grasa cruda no menos del 4,5%; fibra cruda no menos cantidad media de alimentos
de 6.0%; ceniza no más del 8,0% y; minerales añadidos no más del 2,5%. Esta ingeridos diariamente por el grupo
dieta aporta un 28,507% de calorías de proteínas, un 13,496% de grasas y un ad libitum).
57,996% de carbohidratos.
Cada grupo estaba compuesto
Las condiciones de crianza y los procedimientos experimentales (NOM 062-ZOO- por 12 animales de 8 semanas de
1999) edad, 6 ratones machos y 6
hembras cada uno.

Citometría de flujo. 13106 células


de cada muestra-
RESULTADOS
Comportamiento alimentario y cambio de peso en ratones con dieta restringida

MACHOS. La restricción dietética efecto La ganancia de peso fue menor en las Los ratones hembra con dieta
significativo después de 1 semana, los ratones HEMBRAS con dieta restringida en restringida no mostraron diferencia en
con dieta restringida mostraron disminución de comparación con el grupo control. el peso en comparación con controles
peso (20,41760,458g y disminución del (2,03360,151 vs. 2,65060,138 g) al final del estudio (22.70060.460 vs.
aumento de peso (2,15760,133 g. semana 2 23.41760.458 g

Frecuencia de leucocitos en células mononucleares derivadas del cerebro

Ratones bajo restricción dietética, frecuencia de Al comparar ambos grupos No se encontraron diferencias
microglía (CD11b1 CD45lo), linfocitos discriminando por sexo, encontramos significativas entre los machos
(CD451CD11blo) y macrófagos diferencias en la frecuencia de
(CD451CD11bhi) en células mononucleares. Las microglía entre mujeres y hombres
comparaciones de grupos no diferencias grupo control (83,9963,82 vs.
significativas entre animales de control y dieta 74,3466,52%)
restringida
Expresión microglial de MHC-I y -II en animales con dieta restringida

Evaluamos la frecuencia y la intensidad de Diferencia significativa en MHC-I MFI Los animales machos no
fluorescencia media (MFI) para MHC-I y MHC-II entre las hembras del control y grupos de mostraron diferencias
en células CD11b1 CD45lo derivadas del cerebro. restricción arancelarios (7,8546443.3 vs. significativas.
No diferencias en la frecuencia de MHC-I1 10,6286)

Expresión de linfocitos de MHC-I y -II en animales con dieta restringida

-Los macrófagos. No se observaron Las comparaciones de grupos por sexo no


No diferencias significativas en MHC-I o MHC- diferencias entre los diferencias en linfocitos MHC I1 o MHC-
II entre los grupos control y de restricción grupos de restricción I1/MHC-II1 entre grupos, los controles
dietética (MHC-I: 71.5665.64 vs. 72.3267.53%; dietética. masculinos mayor frecuencia MHC-I en
MHC-II: 28.4465.63 vs. 27,6567,55% comparación con mujeres control
(75,5862,41 a 68,2165,41 %
En cuanto al análisis de MHC-I y MHC- En comparaciones por sexo, no El MHC-I MFI para los linfocitos fue
II MFI en linfocitos, no detectamos diferencias para MHC-I MFI entre consistentemente más alto que el MHC-
diferencias significativas en la expresión grupos, aunque mostró disminución de I MFI para la microglía.
de ninguna de las dos moléculas entre los MHC-I MFI para hembras con dieta
grupos control y de restricción dietética restringida en comparación con sus
(MHCI: 75,11266,525 vs. 73,43769,814 respectivos controles

La restricción dietética no afecta la Por el contrario, el análisis de MHC-II MFI mostró diferencias significativas entre
expresión de MHC-I o MHC-II en los las mujeres del grupo de control y el control de hombres (175,432630,785 vs.
linfocitos en ausencia de estimulación. 227,993627,083; p50,0281) y los grupos de restricción dietética
(175,432630). ,785 vs 224,691610,257
DISCUSIÓN.
 Restricción dietética para inhibir la activación microglial del SNC,morfología ramificada a la ameboidea.
 Diferencias dependientes del sexo en los efectos de los regímenes de restricción dietétic.
 Distribución de leucocitos dentro del cerebro de ratones, así como expresión de moléculas MHC en leucocitos del SNC, en ausencia de
estimulación antigénica.
 Disminución aproximada de 2 g en el peso corporal al el final del período de estudio. No diferencias en el peso corporal entre los
ratones hembra con dieta restringida y control, el aumento de peso también fue significativamente menor en los animales con dieta
restringida.
 Previniendo la desnutrición y manteniendo los efectos beneficiosos sobre parámetros bioquímicos, no tuvo efectos adversos en la salud
de estos animales.
 Nuestros resultados sugieren que una restricción del 30% en la ingesta diaria de alimentos promueve la acumulación de linfocitos
CD451 CD11blo en el cerebro de ratones BALB/c adultos sanos hembras, pero no machos.
 El régimen de restricción dietética induce alteraciones dependientes del sexo en la acumulación de linfocitos y la expresión de MHC-I
microglial en el cerebro de ratones. La expresión mejorada de MHCI por microglia puede promover la tolerancia inmune dependiente
de MHC I en los cerebros de ratones hembra al mejorar la presentación de antígenos propios a los linfocitos en ausencia de
estimulación antigénica o señales coestimuladoras.

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