Departamento BQ Rojo de Metilo Voges Proskauer

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Unidad 7.

Nutrición Microbiana y
Caracterización de Bacterias

PRUEBAS BIOQUÍMICAS
ROJO DE METILO-VOGES PROKAUER
RMVP

• El objetivo de la prueba es determinar si el


microorganismo fermenta la glucosa por la vía
ácido mixta o la butilenglicólica.
Rojo de Metilo-Voges Proskauer

ALFA-NAFTOL, KOH 40%


Caldo Rojo de Metilo-Voges Proskauer
Componente Cantidad (g/L agua) Función
Fuente de nutrientes
Pluripeptona 7.0 g para el crecimiento
Glucosa 5.0 g Sustrato
Fosfato dipotásico 5.0 g Amortiguador
pH 6.9 ± 0.2
Prueba Rojo de Metilo
Vía de Indicador
Medio Sustrato fermentación Producto Revelador
RMVP Ác. Láctico,
Glucosa, Glucosa Ácido-mixta acético, succínico Rojo de
peptonas y y fórmico Metilo
fosfatos pH < 4.4
Prueba Rojo de Metilo
Fermentación ácido-mixta:
• En esta vía de fermentación se producen ácidos láctico,
fórmico, succínico y acético que ocasionan una gran
acidez en el medio (pH<4.4).

• El indicador ácido-base rojo de metilo es el adecuado


para revelar esta prueba ya que su rango de viraje está
dentro de pH´s ácidos.
o Amarillo: pH > 5.1
o Rojo: pH < 4.4
Prueba Rojo de Metilo
Prueba de Voges-Proskauer
Medio Sustrato Vía de Productos Revelador
fermentación
RMVP Butilenglicólica Acetoína
Glucosa, KOH al 40%
peptonas, Glucosa (productos (acetilmetilcarbinol) y α-naftol
neutros) y 2,3-butanodiol
fosfatos
Prueba de Voges-Proskauer
Fermentación butilenglicólica:
• El producto de esta fermentación, la acetoína
(acetilmetilcarbinol), es un producto neutro por lo que
necesitamos otro tipo de revelador de la prueba.

• Se utiliza el KOH al 40% y el alfa naftol.


Prueba de Voges-Proskauer
• El KOH y el α-naftol oxidan a la acetoína en presencia de
oxígeno produciendo diacetilo.
• Este compuesto reacciona con el grupo guanidino de
aminoácidos provenientes de las peptonas que contiene el
medio, dando una coloración rosa-roja.
Prueba de Voges-Proskauer

ALFA-NAFTOL
Inoculación del medio
• Para esta prueba, se inoculan dos tubos de caldo
RMVP.
• Al ser un medio líquido, cada tubo se inocula con
2 asadas de la suspensión del microorganismo de
interés.
• Se incuban a 37°C/48 h y uno de ellos se utiliza
para la prueba del rojo de metilo y el otro para la
de Voges-Proskawer.
Resultados
Rojo de metilo:

+ - + -
Resultados
Voges-Proskauer:

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