Pruebas Bioquimicas para Enterobacterias

 TEMA:
PRUEBAS BIOQUIMICAS PARA

ENTEROBACTERIAS
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS
INTEGRANTES:
LOANMY DISLA ROSARIO 2020-0033404
JUSTO REYES 2021-3100113
ANABEL CASTILLO 2020-3300266
ANDREINA SENA 2020-3100048
APCALIX MARTE FERMIN 2020-3300320
Pruebas bioquímicas
para enterobacterias
Características de las enterobacterias
• Crecen en agar MacConkey
• Bacilos Gram negativas
• Desdoblan los nitratos a nitritos
• Aerobios facultativos
• Oxidasa (-) Catalasa (+)
• Fermentan glucosa
Bioquímica
TSI (Triple Sugar Iron)
• Color: rojo ladrillo
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: rojo de fenol
• Sustratos principales: lactosa, sacarosa y glucosa (la
proporción en el medio de lactosa y sacarosa es de 10: 1
con la glucosa)
• Sustratos secundarios: tiosulfato sódico, peptona, citrato
férrico amoniacal y extractos.
• Se siembra por picadura profunda con aguja y luego se
siembra por estrías en el pico
1.- Rx en bacterias glucosa, lactosa y sacarosa +
A/A +;- A/A -;- A/A ++, ++

Ej.: Escherichia Ej.: Citrobacter
freundii
coli
2.- Rx en bacterias solo fermentadoras de glucosa (glucosa +; lactosa y
sacarosa -)
K/A -, ++++ K/A -;-

Ej.: Proteus mirabilis Ej.: Shigella flexneri
3.- Bacilos no fermentadores
N/N -;-
Pseudomonas
* Este resultado no es de una enterobacteria
LIA (Lysine Iron Agar)
• Color: lila
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: lisina y glucosa
• Sustratos secundarios: peptona, tiosulfato de sodio,
extracto de levaduras.
• Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por
estrías en el pico
• 1.- Lisina descarboxilasa +
Lisina
descarboxilasa
Lisina cadaverina (alcaliniza el medio)
Ej.: Escherichia coli
2.- Lisina descarboxilasa +, H2S + 3.- Lisina descarboxilasa -
Ej.: Salmonella Ej.: Shigella

• 4.- Lisina deaminasa +
Lisina
deaminasa
Lisina alfa cetácido
Ej.: Proteus mirabilis
N/N -;-
Pseudomonas
* Este resultado no es de una enterobacteria

Citrato de Simmons
• Color: verde
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: azul de bromotimol
• Sustrato principal: citrato de sodio
• Sustratos secundarios: fosfato dipotásico, cloruro de
sodio, sulfato de magnesio y fosfato monoamónico.
• Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por
estrías en el pico.
Citrato de Simmons
Citrato de Simmons
Este medio nos permite comprobar la capacidad de la bacteria de
utilizar el citrato como fuente exclusiva de carbono.
La degradación del citrato conlleva a la alcalinización del medio y el

viraje del indicador azul de bromotimol de verde a azul prusia.
Citrato de Simmons
1.- Citrato positivo:
La bacteria consume el citrato como fuente
exclusiva de carbono
citrasa
Cit- Na+ Cit+ Na+ OH
alcaliniza el medio
Ej.: Klebsiella pneumoniae citritasa

Citrato de Simmons
2.- Citrato negativo
La bacteria no consume el citrato como
fuente de carbono.

Úrea
En este medio se observa la capacidad de la bacteria de degradar la
úrea por medio de la enzima ureasa formando amoniaco y carbonato
de amonio, que alcalinizan el medio por lo cual el rojo de fenol vira a un
rojo cereza
• Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia

• Bacterias úrea + retardada: Klebsiella, Citrobacter y Enterobacter.
• Bacterias úrea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella
Urea
Ej.: Klebsiella pneumoniae Ej.: Escherichia coli Ej.: Morganella morganii

MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
• Color: lila
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: ornitina y glucosa.
• Sustratos secundarios: peptona, triptona y
extractos.
• Se siembra por picadura profunda
Este medio se usa para la identificación de enterobacterias en base a su
movilidad, producción de indol y actividad de ornitina descarboxilasa.
M: negativa
I: positivo
O: negativo
Ej.: Klebsiella oxytoca
M: positiva
I: negativo
O: positiva
Ej: Enterobacter aerogenes
M: positiva
I: positivo
O: positivo
Voges-Proskauer
• Determinar la capacidad de algunos microorganismos de producir
acetilmetilcarbinol, producto final neutro, a partir de la fermentación
de la glucosa.
• Medios empleados: Caldo RM-VP (Clark y Lubs)

• Sustrato: Glucosa
• Reactivo: BARRIT Solución A: alfa-noftol
Solución B: HOK 40%
ENTEROBACTERIAS

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PRUEBAS BIOQUIMICAS PARA

A/A +;- A/A -;- A/A ++, ++

K/A -, ++++ K/A -;-

Ej.: Salmonella Ej.: Shigella

* Este resultado no es de una enterobacteria

La degradación del citrato conlleva a la alcalinización del medio y el

Ej.: Klebsiella pneumoniae citritasa

Ej.: Escherichia coli

• Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia

Ej.: Klebsiella pneumoniae Ej.: Escherichia coli Ej.: Morganella morganii

• Medios empleados: Caldo RM-VP (Clark y Lubs)

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