SEMINARIO 1: Enzimas en

Clínica
MG JAVIER DANIEL BOJORQUEZ DE LA TORRE
PATOLOGO CLINICO
 ENZIMA
• Son moléculas de naturaleza proteínica que aceleran las reacciones
bioquímicas.

• Son catalizadores biológicos que disminuyen la energía de activación

de las reacciones que catalizan, de forma que se aceleran
sustancialmente la tasa de reacción.
 ¿QUÉ ES UN CATALIZADOR?
• Es una molécula inorgánica u orgánica que incrementa notablemente
la velocidad de las reacciones químicas sin ser modificada o
consumida en la reacción.
 HOLOENZIMA
• Hay enzimas que para trabajar necesitan la presencia de moléculas
no proteicas ( cofactor) que colaboran con el proceso enzimático.

• Los cofactores pueden ser iones metálicos (grupo prostético) o

sustancias orgánicas (coenzimas).
 HOLOENZIMA
• Una enzima desprovista de los cofactores o los grupos prostéticos
que puedan ser necasarios para su actividad se denomina apoenzima,
el cuál es catalíticamente inactivo

• La enzima activa (holoenzima) que resulta de la combinación de una

apoenzima y su(s) cofactor(es).
Los cofactores participan de dos maneras
distintas:
• 1. A través de una fijación muy fuerte a la proteína y salen sin ser
modificados del ciclo catalítico

• 2. Como un segundo substrato; salen modificados del ciclo catalítico y

por lo general requieren otra enzima para volver al estado original.
 COFACTORES ENZIMÁTICOS
• Los cofactores enzimáticos suelen ser moléculas complejas, que
nuestro organismo no puede sintetizar, por lo general.

• Por esa razón muchos cofactores enzimáticos deben ser, en todo en

parte, ingresados con la dieta; muchos de ellos son, por lo tanto,
vitaminas.
 Coenzima
• Las coenzimas son cofactores orgánicos no proteicos, termoestables, que unidos
a una apoenzima constituyen la holoenzima o forma catalíticamente activa de
la enzima.

• Tienen en general baja masa molecular y son claves en el mecanismo de catálisis,

por ejemplo, aceptando o donando electrones o grupos funcionales, que
transportan de una enzima a otra.

• Por ejemplo, el NAD+ se reduce a NADH cuando acepta dos electrones y por

tanto se agota; cuando el NADH libera sus electrones se recupera el NAD +, que de
nuevo puede actuar como coenzima.
Coenzima
Coenzima
 CLASIFICACION
• Oxidorreductasas: Actúan en reacciones de oxidorreducción (Ej.:
deshidrogenasas, oxidasas).

• Transferasas: Catalizan la transferencia de un grupo químico de una sustancia a

otra. Ej: aminotransferasas o transaminasas.

• Hidrolasas: Producen hidrólisis (fosfatasas, peptidasas).

• Liasas: Actúan al añadir grupos a ligaduras dobles o quitar grupos del sustrato y
provocar la aparición de dobles ligaduras (fumarato-hidrasas).
 CLASIFICACION
• Isomerasas: Su acción catalizadora provoca la transformación de un
sustrato en un isómero. Son mutasas cuando producen una transferencia
intramolecular (fosfoglucomutasa) y racemasas o epimerasas cuando
provocan la inversión de grupos asimétricos.

• Ligasas o sintetasas: Estas enzimas catalizan la unión de dos moléculas.

Variantes enzimáticas
• Las isoenzimas son proteínas que difieren en la secuencia de aminoácidos, pero
que catalizan la misma reacción, estando presentes en la misma especie.

• Estas enzimas poseen diferentes propiedades físicas y químicas determinadas

genéticamente (punto isoeléctrico, especificidad de sustrato y cofactor, etc),
suelen mostrar diferentes parámetros cinéticos (por ejemplo: diferentes valores
de KM), o propiedades de regulación diferentes.

• La existencia de las isoenzimas permite el ajuste del metabolismo para

satisfacer las necesidades particulares de un determinado tejido o etapa del
desarrollo.
Variantes enzimáticas
• Isoenzimas:
• La información genética para estas moléculas enzimáticas están localizadas
en distintos genes. Por ejemplo la MDH tiene 3 isoenzimas que están
codificadas en los cromosomas 1, 4 y 6.
• Cuando los monómeros constituyentes de una enzima están codificadas en
genes diferentes. Por ejemplo la LDH, tiene 2 monómeros el M se encuentra
en el cromosoma 11 y el H se encuentra en el cromosoma 12.
• Mutaciones: hay genes que codifican para ciertas ez que están
predispuestos a mutar más que otros. Por ejemplo la Glutámico
Deshidrogenasa (GLDH), presenta hasta 50 formas diferentes, todas son
normales, pero difieren en algunos aminoácidos, estas diferencias
aminoacídicas se deben a mutaciones puntuales.
 Distribución de las enzimas en los espacios
extra e intracelular
• Hay enzimas 100 % citoplasmáticas es decir que se encuentran
solamente en el citosol, a estas se las llama uniloculadas.
• Por ejemplo GPT ó LDH .

• Otras enzimas están en un cierto porcentaje en las organelas y otro

porcentaje en el citoplasma, es decir que son biloculadas, como la GOT que
está 60% en el citoplasma y 40% en mitocondria, MDH (malato
deshidrogenasa) 50 % en citoplasma y 50% en mitocondria

• Membrana: FAL, 5NT, GGT (γ-GT) (Aumentan en lesiones particulares, por

ejemplo en colestasis).
 FACTORES QUE DETERMINAN LA
CONCENTRACION Y ACTIVIDAD
ENZIMATICA EN SUERO
• En procesos inflamatorios aparecen primero, en el plasma, las enzimas de bajo e intermedio peso
molecular (Hepatitis: enzimas de entre 40.000 a 140.000 Da).

• En nivel de enzimas en el suero que se observa en una lesión es generalmente proporcional a la magnitud
de membrana celular afectada.

• En los daños celulares mínimos, primero pasan a la sangre las enzimas citoplasmáticas y en caso de daño
extenso o más intenso, lo hacen las enzimas localizadas en las membranas de las organelas (Ej.: la
glutámico deshidrogenasa (GLDH) mitocondrial).
 FACTORES QUE DETERMINAN LA
CONCENTRACION Y ACTIVIDAD
ENZIMATICA EN SUERO
• Hay factores que alteran la permeabilidad selectiva de la membrana celular
y que provocan una salida al espacio extracelular de enzimas intracelulares.
Los más conocidos son:
• Baja concentración de oxígeno (hipoxia)
• Baja de concentración en el medio
• Alta concentración en el medio
• Agentes químicos (iodoacetato, cianuro, tetracloruro de carbono)
• Agentes físicos (pH, temperatura osmolaridad)
• Algunos virus.
 ENZIMAS DE IMPORTANCIA
CLÍNICA
• Las enzimas son empleadas en los laboratorios clínicos y en las
investigaciones biomédicas como reactivos biológicos para la
determinación de analitos, y la medición de sus niveles de actividad
en el suero u otras muestras biológicas constituyen herramientas
eficaces en el diagnostico y pronostico de una enfermedad.
 Enzimas Plasmoespecíficas:
• Serían las enzimas que tienen su lugar de acción en el plasma.

• Estas enzimas son sintetizadas en determinados tejidos y vertidas a la

sangre activamente, que es su lugar de acción, donde se encuentran su
sustrato y su coenzima.

• Por ejemplo las enzimas del complejo protrombínico, lipoproteinlipasa,

plasminógeno y pseudocolinesterasa.
 Enzimas Plasmoespecíficas:

•Entonces de este grupo de enzimas nos interesa saber sus valores

inferiores; porque una disminución de su actividad (normalmente alta
en suero) indica una alteración en la síntesis, y como la mayoría son
producidas en el hígado esto nos estaría indicando una alteración de la
funcionalidad hepática
 Enzimas secretadas o exocitoenzimas
• Son enzimas secretadas por órganos especializados , su lugar de acción está
alejado, es el caso de las enzimas digestivas segregadas por el páncreas y que van
al duodeno a ejercer su acción, como por ejemplo la amilasa, lipasa, tripsina, etc.

• Clínicamente, estas enzimas en sangre están en baja actividad.

• Aumentarían sus niveles en la patología aguda como la pancreatitis

 Enzimas celulares o endocitoenzimas

• Son las que se ubican en los distintos componentes celulares y cuya

salida se produce cuando una causa determinada altera la
estructura de la célula.

• La concentración en los tejidos de estas enzimas es miles de veces

mas alta que en el plasma.
 Enzimas celulares o endocitoenzimas
• Algunas de las enzimas que corresponden a este grupo son:
• Aspartato amino transferasa (AST) o Glutamicooxalacetico transaminasa
(GOT).
• Alanina amino transferasa (ALT) o glutâmico piruvico transaminasa (GPT).
• Lactato deshidrogenasa (LDH).
• Creatin quinasa (CK).
• γ-glutamiltranspeptidasa (γ-GT).
• 5´nucleotidasa y aldolasa (ALS).
 FACTORES QUE DETERMINAN LA
CONCENTRACION Y ACTIVIDAD
ENZIMATICA EN SUERO
• Al producirse el daño o la muerte celular, las moléculas de menor peso molecular son las primeras
en liberarse y escapar a la circulación.

• La liberación y velocidad de aparición de las enzimas en la circulación depende de la localización

intracelular y de las características del órgano o tejido dañado.

• La aparición de las enzimas en el suero depende de la forma en que logren el paso desde el liquido
intersticial a la sangre, lo que varia de un tejido a otro.

• Las vías de eliminación de enzimas séricas

 Determinación de enzimas séricas
hepáticas
• Las transaminasas son enzimas que participan activamente en el
metabolismo de aminoácidos.

• Catalizan la transferencia el grupo amino de un aminoácido a un

cetoácido con la consiguiente transformación del aminoácido original
en cetoácido y del cetoácido inicial en aminoácido.
 Aspartato aminotransferasa
• La aspartato aminotransferasa (AST), o Glutamato-oxalacetato
transaminasa (GOT), localizada sobre todo en la mitocondria y en el
citosol, por lo que se la llama enzima bilocular.
• Ésta está presente, además del hígado, en otros órganos, como son, en orden
de abundancia: el miocardio, el músculo esquelético, los riñones, el cerebro,
el páncreas, el pulmón, los leucocitos y los eritrocitos.
 Aspartato aminotransferasa
• Esta enzima cataliza la reacción de transferencia de un grupo
amino desde el L-aspartato al 2-oxoglutarato, formándose L-
glutamato y oxaloacetato.

• Esta enzima utiliza el piridoxal 5'-fosfato como cofactor.

L-aspartato + 2-oxoglutarato   oxaloacetato + L-glutamato

 ALANINA AMINOTRANSFERASA
• La alanina aminotransferasa (ALT), o glutamato-piruvato
transaminasa (GPT), se localiza fundamentalmente en el citosol
del hepatocito, por lo que se la denomina unilocular.

• Cataliza la transferencia de un grupo amino (NH2) de la alanina al

ácido α-cetoglutárico dando lugar a piruvato y glutamato. La reacción
es reversible.

• L-alanina + ácido α-cetoglutárico ⇌ piruvato + L-glutamato
 ALANINA AMINOTRANSFERASA

•En el músculo esquelético, el piruvato actúa como receptor de un

grupo amino y se transforma en alanina, que se transporta a través del
torrente sanguíneo hasta el hígado, donde la alanina aminotransferasa
(ALT) transfiere el grupo amino al α-cetoglutarato, regenerando así el
piruvato que puede incorporarse a la gluconeogénesis como fuente de
carbono; la glucosa resultante podrá pasar de nuevo al músculo.
 Determinación de enzimas séricas
hepáticas
• Con un aumento de TGO>TGP el compromiso necrótico es más
profundo y severo.

• El Indice de De Rittis (TGO/TGP) es menor de 1 cuando el daño es leve

(citoplasmático) en los casos de hepatitis viral aunado a la menor vida
media de la TGO con respecto a la TGP.

• Cuando supera a 1 y particularmente 2, la necrosis celular es

profunda tal el caso de hepatitis alcohólicas o en hepatitis crónicas
activas.
GAMMAGLUTAMILTRANSPEPTIDASA

• Es una glicoproteína unida a la membrana plasmática que desempeña una

función fundamental en el metabolismo del glutatión y el transporte de
aminoácidos

• La GGT cataliza la transferencia de grupos γ-glutamil de un aminoácido a otro

o de un péptido a un aminoácido y se relaciona directamente con el
metabolismo del glutatión.
 Gammaglutamiltranspeptidasa
• El tejido más rico en esta enzima es el riñón, seguido del páncreas, el hígado,
el bazo y el pulmón.

• En las células se localiza en las membranas, fundamentalmente del retículo

endoplásmico liso, en los microsomas, en la fracción soluble del citoplasma y
en los conductillos biliares.
 Gammaglutamiltranspeptidasa
• Está involucrada en la transferencia de aminoácidos a través de la
membrana celular y el metabolismo de los leucotrienos.

• Su rol principal es en el metabolismo del glutatión mediante la

transferencia de la fracción glutamil a una variedad de moléculas
aceptoras como el agua, algunos L-aminoácidos y péptidos, dejando
el producto cisteína para preservar la homeostasis intracelular
del estrés oxidativo. 
 Gammaglutamiltranspeptidasa
• La γGT aumenta en la mayoría de las enfermedades del hígado, por lo que su
especificidad es escasa.

• Los mayores aumentos se ven en procesos obstructivos o neoplásicos,

también está aumentada en hepatitis.

•  Al estar elevada en conjunto a la fosfatasa alcalina, el diagnóstico orienta

altamente a enfermedad de la vía biliar

• La utilidad de la elevación de la GGT yace en descartar que el aumento de la

fosfatasa alcalina no provenga de alguna patología ósea.
 Gammaglutamiltranspeptidasa
• La GGT también se eleva posterior al consumo excesivo de alcohol.

• El alcohol puede aumentar ya sea la síntesis de GGT vía inducción

microsomal o la salida de la enzima directamente desde los
hepatocitos.
 ENZIMAS QUE AYUDAN AL
DIAGNOSTICO DE INFARTO AGUDO DE
MIOCARDIO
• LACTATO DESHIDROGENASA
• Es una enzima tetramerica que consta de 2 tipos de monómeros: H y M que
se combinan para dar 5 izoenzimas
• LDH 1 (HHHH): Miocardio, eritrocito
• LDH 2 (HHHM): Miocardio, eritrocito
• LDH 3 (HHMM): Células linfoide, cerebro , riñón
• LDH 4 (HMMM): Hígado, músculo esquelético
• LDH 5 (MMMM): Hígado, músculo esquelético
 LACTATO DESHIDROGENASA
• Corresponde a la categoría de las oxidorreductasas, dado que cataliza una
reacción redox, en la que el piruvato es reducido a lactato gracias a la
oxidación de NADH a NAD+.

• Dado que la enzima también puede catalizar la oxidación del hidroxibutirato,

ocasionalmente es conocida como Hidroxibutirato Deshidrogenasa (HBD).
 LACTATO DESHIDROGENASA
• Si bien la LDH es abundante en las células de los tejidos, los niveles en
la sangre son, por lo general, bajos.

• Sin embargo, cuando los tejidos se dañan a causa de una lesión o una
enfermedad, liberan más LDH en el torrente sanguíneo. 
 LACTATO DESHIDROGENASA
• Tiene un importante papel en el metabolismo de glúcidos,
interviniendo en el último paso de la glucolisis anaerobia y en un
primer paso hacia la gluconeogénesis a partir de lactato.

• Además aporta combustible al ciclo de Krebs en tejidos consumidores

de lactato como el músculo cardíaco.
 ENZIMAS QUE AYUDAN AL
DIAGNOSTICO DE INFARTO AGUDO DE
MIOCARDIO
• CK es un compuesto de alto peso molecular –alrededor de 80
KiloDaltons- que se encuentra dentro de las células musculares y
nerviosas.
• Dentro de la célula está presente tanto en el citoplasma como en
las mitocondrias. Es también conocida como creatin-fosfo-quinasa, o
CPK.
 ENZIMAS QUE AYUDAN AL
DIAGNOSTICO DE INFARTO AGUDO DE
MIOCARDIO
• La creatina quinasa (CK) es una enzima dimérica compuesta por dos
tipos de subunidades monoméricas, M (muscular) y B (cerebral) que
se combinan para formar tres isoenzimas creatina quinasa distintas:
• CK-1 (BB)
• CK-2 (MB)
• CK-3 (MM)
 ENZIMAS QUE AYUDAN AL
DIAGNOSTICO DE INFARTO AGUDO DE
MIOCARDIO
• Cataliza la transferencia de un fosfato de alta energía desde el fosfato
de creatina, principal depósito de almacenamiento energético en el
músculo en reposo, a la adenosina difosfato.

• De tal manera, produce trifosfato de adenosina para su empleo por

los miocitos.
 ENZIMAS QUE AYUDAN AL
DIAGNOSTICO DE INFARTO AGUDO DE
MIOCARDIO
• La creatina quinasa (CK) desempeña una importante función en el
músculo proporcionando ATP.

• Cuando el músculo se contrae, el ATP se consume y la creatinina

quinasa cataliza la refosforilación del ADP para formar ATP, usando
fosfocreatina como reservorio de la fosforilación.
 ENZIMAS QUE AYUDAN AL
DIAGNOSTICO DE INFARTO AGUDO DE
MIOCARDIO
• El músculo esquelético contiene principalmente MM (95%)
• El músculo cardíaco MM (80%) y MB (20%)
• El cerebro, el sistema gastrointestinal y el aparato genitourinario
contienen mayoritariamente BB.
 ENZIMAS QUE AYUDAN AL
DIAGNOSTICO DE INFARTO AGUDO DE
MIOCARDIO
• La CK sérica procede fundamentalmente del músculo y su
concentración depende de una serie de variables fisiológicas (sexo,
edad, masa muscular, actividad física y raza).

• Tiene como sustrato natural principal a la creatina, pero también a

ciclocreatina, glicociamina y N-etilglicociamina.
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