Analisis Microbiologico de Agua

Análisis microbiológico
de agua
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL
AGUA
Se puede definir el análisis microbiológico

como el conjunto de operaciones
encaminadas a determinar los
microorganismos presentes en una
muestra problema de AGUA.
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL AGUA
 El interés se centra en ENFERMEDAD AGENTE

los microorganismos ORIGEN BACATERIANO
patógenos, que son Fiebres tifoideas y

paratifoideas
Salmonella typhi,
Salmonella
los diferentes tipos Paratyphi A y B
de bacterias, virus, Disentería bacilar Shigella
protozoos y otros
organismos, que cólera Vibrio cholerae
transmiten Gastroenteritis
agudas y diarreas
Escherichia coli.
Campylobacter
enfermedades Yersiniae
nterocolitica
Salmonella sp
Shigellas
Microorganismos indicadores de la calidad del
agua
En el análisis rutinario de aguas no se aíslan

patógenos
 Podrían no aparecer en muestras de
laboratorio pues:
◦ Tienen acceso en forma esporádica
◦ No sobreviven en el agua por mucho tiempo
 Necesitan mucho tiempo para detectarse
 Si están en número muy pequeño no se
pueden detectar por métodos de laboratorio

Se usan microorganismos indicadores:
 Su presencia en el  Se encuentran sólo
agua prueba que en aguas
está polucionada polucionadas
con material fecal  Y cuando están
de personas o presentes en el
animales de sangre agua indican que
caliente hay patógenos
TOMA DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO
 Las muestras que se tomarán para el análisis deben ser

representativas para poder determinar así su calidad
microbiológica.
 Su análisis debe comenzar antes de que hayan transcurrido

6 horas desde el momento de la toma de muestras.
 En circunstancias excepcionales, las muestras pueden
conservarse a una temperatura de 4ºC durante un periodo
máximo de 24 h antes de su análisis.
 Para su muestreo debe utilizarse frascos estériles y debe

recolectarse cantidades comprendidas entre 500 y 1000
ml.
 Cuando se estime probable que el agua a analizar
contenga trazas de cloro, cloramina u ozono, será
necesario neutralizar su efecto bactericida en el momento
del muestreo.
 Se añadirá una cantidad suficiente de tiosulfato sódico.

- Para un volumen de 250 ml son suficientes 0,2 ml de una
solución acuosa al 3% de tiosulfato sódico
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO: BACTERIAS COLIFORMES
 FUNDAMENTO: Los coliformes reagrupan ciertas especies

bacterianas pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae,
de morfología bacilar, Gram negativas, aerobias o
anaerobias facultativas, oxidasa negativa, no esporuladas
y que fermentan la lactosa con producción de ácido a
37ºCen 24-48 horas
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO: BACTERIAS COLIFORMES
 El método consiste en desarrollar solo una prueba
presuntiva en el que una reacción negativa excluye
la presencia del grupo coliforme.
Colimetría
Prueba Presuntiva
Inoculación en caldo lactosado
Producción de gas + No producción de gas -

Fin de la prueba
Prueba Confirmativa
Resiembra a partir de los tubos positivos caldo
lactosado
Siembra de muestras + en EMB
Colonias pequeñas, con centro O Siembra en tubos con
oscuro y brillo metálico + CLVBB
Producción de gas +
Terminación de la prueba
Colonias más típicas de siembra por estría EMB
Coloración de Gram: Bacilos Gram - no
esporulados
 PROCEDIMIENTO. Inocular caldo de peptona
con diluciones decimales de la muestra de
agua, expresados en 10-1, 10-2, 10-3.
Inocular 3 tubos de lactosa bilis verde
brillante (a los que se les añade un tubo de
Durham invertido) con 1 ml de cada
dilución. Incubar a 37ºC (+/-1ºC) durante
24 ó48h.
Método de determinación del número de
patógenos
Número de patógenos
Número de unidades formadoras de

colonias totales o de una especie
determinada en un gr o en 1 ml de
material investigado bajo condiciones de
cultivo definidas
 Métodos de determinación del número de
gérmenes:
Métodos del número más

probable (NMP).
Método de filtro de membrana
 Método de la placa vertida
 Método de título
Método del número más probable
 Paralelamente
varias series  Número de tubos
decimales de con crecimiento
dilución (mínimo NMP, tablas de
tres) en medio de McRady, 100 ml
cultivo líquido. de muestra
Método de filtro de membrana
 Filtro estéril sobre unidad de filtración de
0.45
 Se filtra cierto volumen de agua: bacterias
quedan retenidas
 El filtro se coloca sobre soporte absorbente
saturado con el medio adecuado. Incubar en

cajas de petri especiales que permiten
acomodar el soporte y el medio adecuado
 Desarrollo de colonias sobre el filtro
Ventajas:
 Examinar grandes volúmenes de
agua
 Más rápidas que técnicas de tubo
 Estimación cuantitativa de tipos de
bacterias (coliformes, etc.)
Limitación
 Aguas con muchos sólidos disueltos o
suspendidos
NMP = #coliformes x 100/ vol filtrado

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Análisis microbiológico

Se puede definir el análisis microbiológico

 El interés se centra en ENFERMEDAD AGENTE

patógenos, que son Fiebres tifoideas y

En el análisis rutinario de aguas no se aíslan

 Si están en número muy pequeño no se

pueden detectar por métodos de laboratorio

 Las muestras que se tomarán para el análisis deben ser

 Su análisis debe comenzar antes de que hayan transcurrido

 Para su muestreo debe utilizarse frascos estériles y debe

 Se añadirá una cantidad suficiente de tiosulfato sódico.

 FUNDAMENTO: Los coliformes reagrupan ciertas especies

Producción de gas + No producción de gas -

Número de unidades formadoras de

Métodos del número más

saturado con el medio adecuado. Incubar en

bacterias (coliformes, etc.)

NMP = #coliformes x 100/ vol filtrado

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