Técnicas de Aglutinación, Pruebas de Widal-Weil Félixhunddlenson

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
ASIGNATURA: INMUNOLOGIA
NOMBRES:
DOCENTE: Q.F SUAREZ CAMACHO LOURDES AMALIA.

TEMA:
Practica #2
TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN, PRUEBAS DE WIDAL-WEIL FÉLIXHUNDDLENSON
SEMESTRE:
“OCTAVO”
PERIODO
2020-2021
Objetivos de la Práctica de Laboratorio
Detectar por acción de las reaginas con antígeno de cardiolipina, lecitina y colesterol adsorbido sobre
partículas de carbón la presencia de aglutinación.
Observar si la muestra contiene los anticuerpos correspondientes y si se produce una aglutinación visible
macroscópicamente.
Conocer las técnicas de aglutinación mediante las pruebas de Widal-Weil Felix- Hunddlenson para la
detección de antígenos y anticuerpos
Investigar los antígenos que se utilizan en esta técnica especifica de aglutinación
Instrucciones o consideraciones previas
TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN
El suero del paciente se pone en Mientras que el entrecruzamiento de

contacto con antígenos específicos. En los antígenos proteicos multivalentes
este caso se utilizan suspensiones de con el anticuerpo produce una
Salmonellas o Brucellas muertos. Si la precipitación, la interrelación entre
muestra contiene los anticuerpos células o partículas de gran tamaño
correspondientes se producirá una con los anticuerpos dirigidos contra los
aglutinación visible antígenos de superficie conducen a una
macroscópicamente. aglutinación.
Reacción de Widal
Es un test basado en Para el

el principio de serodiagnóstico de
aglutinación antígeno- fiebre tifoidea, sin
anticuerpo, determina embargo debido a su
la presencia de falta de especificidad,
anticuerpos contra el debe ser interpretado
antígeno O y H de la en el contexto clínico
Salmonella typhi del paciente.
Reactivos de laboratorio
Antígenos Febriles Salmonella: Suspensión en solución salina con conservantes apropiados,
conteniendo los siguientes antígenos bacterianos:
-Antígenos Paratyphoid A (Salmonella, antígeno flagelar
- Antígenos Paratyphoid B (Salmonella, antígeno flagelar
- Antígenos Typhoid H (Salmonella, antígeno flagelar d)
- Antígenos Typhoid O (Salmonella, antígeno somático)
Antígenos Febriles Brucella: Suspensión de antígenos bacterianos (Brucella abortus, cepa 1119- 3)
en solución fisiológica con conservantes apropiados. La concentración celular de los antígenos se
encuentra entre el 4 y el 6%. Las bacterias utilizadas se encuentran en fase lisa.
Antígenos Febriles Controles:

Control Positivo: dilución de suero humano inactivado positivo.
Control Negativo: dilución de suero humano negativo.
Materiales de laboratorio
- Placa de vidrio
- Micropipetas BBB
- Tubos de hemólisis
- Varilla
- Reloj o timer
Equipos
- Centrifuga
Toma y Preparación de Muestra
Actividades por desarrollar/ técnica operatoria
TECNICA RAPIDA EN PLACA
Colocar en una placa una gota Observar la presencia o

Mezclar y agitar la placa en
(50 ul) de suero y agregar una ausencia de aglutinación
forma circular durante 2
gota (50 ul) de suspensión de utilizando una luz indirecta
minutos.
Antígeno. sobre fondo oscuro.
II- TITULACION RAPIDA EN PLACA
Empleando las micropipetas

Dividir una placa de vidrio en Colocar 1 gota de Antígeno
apropiadas colocar en estos
sectores de 4 cm2 previamente agitado sobre
sectores 80 ul, 40 ul, 20 ul, 10 ul
aproximadamente. cada gota de suero.
y 5 ul de suero límpido. Repetir
el procedimiento para un control
negativo y uno positivo.
Mezclar el suero y el Antígeno
utilizando una varilla abarcando un
Observar la aglutinación
área de 2 cm de diámetro Agitar la placa durante 2 utilizando luz indirecta
aproximadamente. Debe emplearse minutos en forma sobre fondo oscuro.
una varilla distinta para cada dilución circular.
de suero o la misma varilla mezclando
a partir de la muestra más diluida.
Resultados obtenidos
Dentro de los cuadrantes las diluciones 1:20 de 80 mL son utilizados como referencia, si se encuentra
dicho anticuerpo en el torrente sanguíneo, para las diluciones de 1:40 y 1:80 son tomadas para el
control de calidad y verificar la presencia o ausencia de dichos anticuerpo.
Conclusiones
Mediante esta práctica se logra detectar por acción de las reaginas con antígeno de cardiolipina, lecitina y
colesterol adsorbido sobre partículas de carbón la presencia de aglutinación y observar si la muestra contiene
los anticuerpos correspondientes y si se produce una aglutinación visible macroscópicamente. Además se
conoció las técnicas de aglutinación mediante las pruebas de Widal-Weil Felix- Hunddlenson para la detección
de antígenos y anticuerpos y se aprendió sobre los antígenos que se utilizan en esta técnica especifica de
aglutinación
Recomendaciones
 Usar el equipo de protección necesario
 Ser precisos y exactos al emplear la micropipeta
 Los reactivos verificar su fecha de caducidad para evitar interferencias
 Se debe utilizar luz directa al momento de la lectura
Bibliografía
Castro, H. A. (2006). Detección de anticuerpos anti-Brucella spp. en cerdos mediante técnicas de
aglutinación y ELISA indirecto en las provincias de Buenos Aires y La Pampa. Revista argentina
de microbiología, 38(2), 75-78.
Jorge, L. F. (Dirección). (2019). Como hacer las REACCIONES FEBRILES en el laboratorio facil
y rapido, y para que son importantes [Película].
Pascacio, I. R. (2007). Curso de Métodos Fisicoquímicos en Biotecnología. Mexico:
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO.
Widal, F. (22 de Diciembre de 2020). Bull. Soc. Med. Hop. Obtenido de wiener-lab:
https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum
%20espanol/antigenos_febriles_sp.pdf

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