Tinción de Argentica

IMPREGNACIÓN
ARGÉNTICA
IMPREGNACIÓN ARGÉNTICA
IMPREGNACIÓN
Impregnación es la coloración que utiliza sales metálicas para originar
precipitados metálicos sobre los tejidos que van a ser teñidos.
Dentro de las sales metálicas tenemos el cloruro de oro, sales de cromo,
nitrato de plata, etc. de ellas la mas empleada es el Nitrato de Plata ya
que es la sal metálica de mayor solubilidad en agua.
AgNO3
AuCl3
K2Cr2O7
La Impregnación Argéntica es la coloración que utiliza sales de plata
(Nitrato de Plata) para originar precipitados de plata metálica sobre los
tejidos que van a ser teñidos.
AgNO3
AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3
FORMAS DE IMPREGNACIÓN ARGÉNTICA
Existen dos tipos de Impregnación Argéntica:
A. Impregnación Argéntica FísicoQuimica
B. Impregnación Argéntica Histoquímica
Impregnaciones Argénticas Impregnaciones Argénticas

Fisicoquimicas Histoquimicas
A.Impregnación Argéntica Físico Química
Es la propiedad de algunas estructuras histológicas electronegativas
por aproximar y fijar (Atracción Electrostática: Mecanismo
FísicoQuímico) los Iones de Plata cargados positivamente (Ag+) de la
solución de impregnación.
Ag+NO3
Ag+NO3 Ag+NO3 Ag+NO3 Ag+NO3

Ag+NO 3 Ag+NO 3
Posteriormente estas Sales de Plata son reducidas (descompuestas) por
un agente externo y la Plata Metálica precipita (Mecanismo Físico) sobre
las estructuras tisulares.
C6H4(OH)2
Ag+ Ag+ Ag+ Ag+

Ag+ Ag+
La Plata Metálica tiene especial apetencia por depositarse sobre:
*Estructuras fibrilares finas: Fibras Reticulares
*Superficies celulares dotadas de delgadas prolongaciones: Neuronas.
Ag+
Conclusión I: No existe reacción química entre el tejido y la Sal de Plata que
reduzca la sal (descomponga la sal y libere Ag+)
Conclusión II: No todos los tejidos presentan igual apetencia por la Plata: la
carga eléctrica y la textura de las células es decisiva.
Ag+NO3 Ag+NO3 Ag+NO3 Ag+NO3

Ag+NO 3 Ag+NO 3
Puede dividirse en:
De Un Tiempo: Reduce el Nitrato de Plata a Plata Metálica directamente
De Dos Tiempos: Reduce el Nitrato de Plata a Plata Metálica en varias fases
I.A. por M.F.Q. de Dos Tiempos I.A. por M.F.Q. de Un Tiempo

De Un Tiempo: Reduce el Nitrato de Plata a Plata Metálica directamente.
I.- Se enfrenta el Nitrato de Plata a un Potente Agente Reductor: Pirogalol o Hidroquinona

que descompone el Nitrato de Plata en Plata Metálica y un Producto de Oxidación.
AgNO3 C6H4(OH)2
Hidroquinona
Nitrato de Plata
2Ag + Producto de Oxidación

Plata Metálica
De Un Tiempo: Reduce el Nitrato de Plata a Plata Metálica directamente.
La Plata Metálica se deposita específicamente sobre superficies celulares

dotadas de delgadas prolongaciones: Neuronas.
AgNO3 C6H4(OH)2
Hidroquinona
Nitrato de Plata
2Ag + Producto de Oxidación

Plata Metálica
De Dos Tiempos: Reduce el Nitrato de Plata a Plata Metálica en varias fases:
I.- Se trata el Nitrato de Plata con una base fuerte (Hidróxido de Sodio) con lo
que se obtiene Oxido de Plata que precipita como granulaciones parduscas.
AgNO3 NaOH
Nitrato de Plata Hidróxido de Sodio
2 AgNO3 + 2 NaOH = Ag2O + 2 NaNO3 + H2O

Oxido de Plata Agua
II.- Se agrega Amoniaco y se obtiene Oxido de Plata Amoniacal: OXIDO

DIAMINO ARGÉNTICO
AgNO3 NaOH
NH3
2 AgNO3 + 2 NaOH = Ag2O + 2 NaNO3 + H2O Amoniaco
Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O

Oxido de Plata Oxido Diamino Argéntico
III.- Se agrega Formol 10% el cual capta el oxigeno del Oxido de Plata
Amoniacal y libera Plata Metálica + Acido Fórmico + Amoniaco.
AgNO3 NaOH
NH3
Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O CHOH

Formol
4NH3 HCOOH
Amoniaco Ácido Fórmico
2Ag
Plata Metálica
De Dos Tiempos: Reduce el Nitrato de Plata a Plata Metálica en varias fases.
La Plata Metálica se deposita específicamente sobre estructuras fibrilares finas:

Fibras Reticulares.
AgNO3 NaOH
NH3
Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O CHOH

Formol
4NH3 HCOOH
Amoniaco Ácido Fórmico
2Ag
Plata Metálica
B.Impregnación Argéntica Histoquímica
Es la propiedad de algunos componentes de la célula (por ejemplo:
Tetrahidrocarbolina) para reaccionar químicamente sobre la Sal de Plata
originando su reducción (descomposición) y posterior precipitación como Plata
Metálica: Ag+
AgNO3
NaOH NH3
Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2 +

Oxido Diamino Argéntico TetrahidroCarbolina
NH3 + Ag+ + Producto de Oxidación

Esta propiedad es característica de Granulaciones Citoplasmáticas presentes
en:
*Células Cutáneas: Melanocitos
*Células Digestivas: Pilóricas.
Conclusión1: Existe una reacción química entre el tejido y la Sal de Plata que
libera Plata Metálica lo que origina su posterior precipitación.
Conclusión 2: No todos los componentes de la célula presentan igual
capacidad de descomposición de las Sales de Plata (selección discriminatoria).
[Ag(NH3)2]2
TetrahidroCarbolina Ag+
ARGENTAFINIDAD VS ARGIROFILIA
Argirofilia: Propiedad de algunos tejidos de unirse a los Iones de Plata de las
Sales de Plata, empleando agentes externos para una posterior reducción
(descomposición y liberación de Ag+)
Argentafinidad: Propiedad de algunos componentes celulares de reducir
(descomponer y liberar Ag+) las Sales de Plata (AgNO3) sin intervención de
agentes externos.
Argirofilia Argentafinidad
ARGENTAFINIDAD VS ARGIROFILIA
Argirofilia: Se da en Impregnaciones Argénticas Fisicoquímicas
Argentafinidad: Se da en Impregnaciones Argénticas Histoquímicas
Argirofilia Argentafinidad
Impregnaciones Argénticas Impregnaciones Argénticas
Fisicoquimicas Histoquimicas
Impregnación Argéntica en Tejido Nervioso: Neurofibrillas: Bodian
Es una Impregnación Argéntica FisicoQuímica en Un Tiempo.
Las Neurofibrillas son haces de microfilamentos de actina y miosina, que corren
paralelas entre si a través del cuerpo celular formando parte del citoesqueleto
de la Neurona.
Especificaciones Técnicas
Fijación: Formol 10%

Secciones: Parafina
Soluciones:
Solución de Protargol
Protargol: 1 gr
H2O: 100 mL
Rociar al Protargol sobre la superficie del agua y dejar que se disuelva sin agitar ni mezclar
Solución Reductora
Hidroquinona: 1 gr
Sulfito Sódico: 5 gr
H2O: 100 mL
Disolver la Hidroquinona en al agua y añadir el Sulfito Sódico
Solución de Cloruro de Oro al 1%
Añadir 3 gotas de Ácido Acético Glacial por cada 100 mL
Solución de Ácido Oxálico al 2%
Solución de Tiosulfato de Sodio al 5%
Procedimiento Técnico:
1) Desparafinar
2) Hidratar
3) Tratar con Protargol a 37ºC …………………………….....….. 48 horas
4) Lavar 3 veces con H2O …………………………………………… 2 minutos
5) Reducir con la Solución de Hidroquinona ………………….. 10 minutos
6) Lavar 3 veces con H2O …………………………………………… 2 minutos
7) Contrastar con la Solución de Cloruro de Oro …………….. 10 minutos
8) Lavar 3 veces con H2O ………………………………………….. 2 minutos
9) Revelar en Solución de Ácido Oxálico ……………………….. 5 minutos
10) Lavar 3 veces con H2O …………………………………………. 2 minutos
11) Fijar con Tiosulfato Sódico al 2% ………………………….... 5 minutos
12) Lavar 3 veces en H2O …………………………..………………… 2 minutos
13) Deshidratar
14) Aclarar
15) Montar
Procedimiento Técnico
1. Desparafinar: Se empleara el procedimiento físico de la temperatura, para lo
cual se llevaran las láminas con secciones de tejido en parafina a la estufa a
60ºC por 60 minutos.
1. Desparafinar: Este procedimiento eliminará gran parte de la Parafina que
rodea el tejido sin embargo aun quedara Parafina Intracelular y Extracelular
para lo cual se emplea posteriormente dos baños sucesivos de Xilol de 5
minutos cada uno.
1. Desparafinar: Finalmente el tejido se encontrara embebido de Xilol intra y
extracelular
Impregnación Argéntica de Tejido Nervioso: Neurofibrillas: Bodian
2. Hidratar: Debido a que el agua y el xilol no son miscibles se deberá eliminar
en primer termino el xilol empleando para ello una batería decreciente de
alcoholes empezando por dos baños sucesivo de Alcohol Absoluto por 5
minutos cada uno.
2. Hidratar: El alcohol absoluto al ser miscible con el xilol y encontrarse en
mayor concentración lo desplazará y reemplazará, posteriormente se
realizan sucesivos baños de alcohol de 96%, 80%, 70% y finalmente agua
con lo que termina el proceso de hidratación.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

3. Tratar: Con Protargol que es un complejo Proteinato de Plata que se
mantendrá en solución homogénea en el tejido mientras no ocurra la
reducción.
Ag
4. Lavar con 3 cambios de H2O: El Agua Destilada por arrastre físico eliminara
los restos de Protargol no unidos a estructuras tisulares.
H2O
5. Reducir: Con la Solución de Hidroquinona la cual es un Potente Reductor,
que disolverá el complejo de Proteinato de Plata en Plata Metálica y un
Producto de Oxidación Proteico.
C6H4(OH)2
Ag
Ag
5. Reducir: La Plata Metálica tiene especial apetencia por depositarse sobre
estructuras fibrilares finas: Neurofibrillas.
C6H4(OH)2
Ag
Ag
Ag
Ag
los restos de Hidroquinona y Productos de Oxidación Proteica.
H2O
Ag
Ag
7. Viraje: Se emplea Cloruro de Oro, el cual es un electrolito ya que tiene
cargas + y – en solución, provenientes del Oro y del Cloro, pero cuando se
separan el Oro presenta carga neutra: Auº que se une sobre la Plata
Metálica en las estructuras fibrilares e intensifica su color.
ClAu
Auº
Auº
Ag
Ag
los restos de Cloruro de Oro no reducidos.
H2O
Auº
Auº Ag
Ag
9. Fijar: Con Tiosulfato de Sodio: Na2S2O3 el cual se une y retira la Plata y Oro
que no está unida a ninguna estructura tisular.
Na2S2O3
Auº Ag
Ag
10.Lavar con 3 cambios de H2O: El Agua Destilada por arrastre físico eliminara
los restos de Tiosulfato de Sodio libre o unido a los iones metálicos: Au y Ag
H2O
11.Deshidratar: Emplear una batería creciente de alcoholes que retiren
lentamente el agua de las estructura tisulares hasta llegar al alcohol
absoluto.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

11.Aclarar: Emplear Xilol en dos baños sucesivos de 5 minutos cada uno los
cuales transparentaran las estructuras tisulares y permitirán un posterior
montaje con los agentes cementantes.
Xilol
12.Montar: Con Bálsamo de Canadá, Entellán, Merkoglass, etc., lo cual sellará
el preparado histológico impidiendo el ingreso de microorganismos que
produzcan la putrefacción del tejido.
Resultados:
Neurofibrillas: Negras
Impregnación Argéntica de Grimelius
Es una Impregnación Argéntica FisicoQuímica en Un Tiempo.
Permite detectar la presencia de células Argirófilas (células endocrinas que
elaboran diferentes hormonas) en la mucosa del estómago, páncreas endocrino
y sistema respiratorio.

Secciones: Parafina
Soluciones:
Solución de Tampón Acetato 0,1M a pH: 5,8:
Acetato de Sodio Puro: 1,64 gr + Acetato de Sodio Trihidrato: 2,72 gr + H2O: 100 mL = 95 mL
Acido Acético Glacial: 1,2 mL + H2O: 98,2 mL = 5 mL
H2O = 100 mL
Solución de Impregnación:
Tampon Acetato 0,1 molar a pH: 5,8 100 mL
Nitrato de Plata: 0,05 gr
Solución Reductora de Bodian:
Sulfito de Sodio Anhidro: 5 gr
Hidroquinona: 1 gr
H2O: 100 mL
Solución Fijadora:
Tiosulfato Sódico: 2 gr
H2O: 100 mL
1) Desparafinar
2) Hidratar
3) Tratar con la Solución de Impregnación a 60º ………....….. 03 horas
4) Reducir con la Solución de Bodian ……..…………………….. 5 minutos
5) Lavar con H2O ……………………………………………………… 2 minutos
6) Fijar con Tiosulfato Sódico al 2%…….……………………….... 30 segundos
7) Lavar en H2O ………………………………………………………… 2 minutos
8) Deshidratar
9) Aclarar
10) Montar
minutos cada uno.
extracelular
minutos cada uno.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

3. Tratar: Con la Solución de Impregnación en la cual el Nitrato de Plata es
captado por células con capacidad Argirófila sin llegar a reducir (desintegrar)
esta sal.
AgNO3
AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3

4. Reducir: Con la Solución de Bodian, la cual presenta Hidroquinona que es
un Potente Reductor el que desintegrará el Nitrato de Plata en Plata Metálica
y un Producto de Oxidación
C6H4(OH)2
AgNO3
Ag + Producto de Oxidación
AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3
Ag Ag Ag Ag Ag AgAg Ag Ag Ag Ag Ag
Ag Ag Ag Ag Ag Ag
5. Lavar con H2O: El Agua Destilada por arrastre físico eliminara los restos de
la Solución de Bodian y Productos de Oxidación
H2O
Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag
Ag Ag Ag Ag Ag Ag
6. Fijar: Con Tiosulfato de Sodio: Na2S2O3 el cual se une y retira la Plata que
no está unida a ninguna estructura tisular.
Na2S2O3
Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag
Ag Ag Ag Ag Ag Ag
7. Lavar con H2O: El Agua Destilada por arrastre físico eliminara el Tiosulfato
de Sodio libre y el unido a la Plata.
H2O
Ag Ag Ag Ag Ag Ag
8. Deshidratar: Emplear una batería creciente de alcoholes que retiren
absoluto.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%
Ag Ag Ag Ag Ag Ag
9. Aclarar: Emplear Xilol en dos baños sucesivos de 5 minutos cada uno los
Xilol
Ag Ag Ag Ag Ag Ag
Ag Ag Ag Ag Ag Ag
Resultados:
Células Argirófilas: Negras
Ag Ag Ag Ag Ag Ag
Impregnación Argéntica de Gomori para Fibras Reticulares
Es una Impregnación Argéntica FisicoQuímica de Dos Tiempos.
Las Fibras Reticulares son filamentos muy delgados de colágeno tipo III,
importantes en la estructura de la Lamina Basal, además forman redes que
rodean a las células musculares, hepáticas, renales y endocrinas.
Secciones: Parafina o por Congelación
Soluciones:
a) Solución Acuosa de Permanganato Potásico al 1%
b) Solución Acuosa de Metabisulfito Potásico al 2%
c) Solución Acuosa de Alumbre Férrico al 2% (prepara antes de usar)
d) Complejo de Plata Amoniacal: A 10mL de solución Nitrato de Plata al 10% se añaden 2mL
de Hidróxido Potásico al 10%, el precipitado se disuelve con Amoniaco concentrado, después se
añade Nitrato de Plata hasta que empiece a formarse de nuevo el precipitado, diluir con agua a
partes iguales
e) Formol al 10%
f) Solución Acuosa de Hiposulfito Sódico al 2%
1) Desparafinar
2) Hidratar
3) Oxidar con Permanganato Potásico …………………………….….. 2 minutos
4) Lavar con Agua Corriente …………………………………………….. 2 minutos
5) Blanquear con Metabisulfito ………………………………………… 2 minutos
6) Lavar con abundante Agua Corriente …………………………….. 5 minutos
7) Tratar con solución de Alumbre Férrico …………………………. 1 minuto
8) Lavar con Agua Corriente …………………………………………… 2 minutos
9) Lavar con Agua Destilada ………………….………………………… 10 segundos
10) Tratar con el Complejo de Plata Amoniacal ……………………… 1 minuto
11) Lava con Agua Destilada …………………………………………….. 10 segundos
12) Reducir con Formol ……………………………………………………. 1 minuto
13) Lavar con Agua Corriente ……………………………………………. 2 minutos
14) Tratar con la solución de Hiposulfito …………..…………………. 2 segundos
15) Lavar con abundante agua corriente ……………………………… 5 minutos
16) Deshidratar
17) Aclarar
18) Montar
Soluciones:
a) Solución Acuosa de Permanganato Potásico al 1%
b) Solución Acuosa de Metabisulfito Potásico al 2%
c) Solución Acuosa de Alumbre Férrico al 2% (prepara antes de usar)
partes iguales
e) Formol al 10%
f) Solución Acuosa de Hiposulfito Sódico al 2%
Soluciones:
partes iguales
AgNO3 NaOH
NH3
Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O

Oxido Diamino Argéntico
minutos cada uno.
extracelular
minutos cada uno.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

3. Oxidar: Luego se emplea Permanganato Potásico (KMnO4) el cual es un
fuerte agente oxidante, es decir, libera oxigeno pero que fundamentalmente
origina la aparición de grupos Aldehídos en las estructuras fibrilares
reticulares lo cual favorece la coloración específica de estas.
KMnO4
O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2

4. Lavar con Agua Corriente: Que por arrastre físico eliminara el Permanganato
Potásico.
H2O

5. Blanquear: Se emplea Metabisulfito de Sodio (NaHSO3) el cual es un Agente
Reductor ya que capta el oxigeno liberado durante la Oxidación lo que
entorpecería posteriormente la coloración y elimina los residuos color violeta
que pudiera haber dejado el Permanganato Potásico.
NaHSO3

6. Lavar con Agua Corriente: Que por arrastre físico eliminara el Metabisulfito
de Sodio.
H2O
H-C=O H-C=O H-C=O H-C=O

7. Mordentar: Se emplea Alumbre Férrico, que al ser una sal de carga
fuertemente positiva se unirá a los grupos Aldehídos fuertemente negativos
expuestos en las estructuras fibrilares reticulares, sirviendo de intermediario
entre el tejido y el colorante, potenciando la unión entre ambos.
KFe(SO4)2
KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2

8. Lavar con Agua Corriente: Que por arrastre físico eliminara el Alumbre
Férrico
H2O

9. Lavar con Agua Destilada: Lo cual eliminará los iones libres presentes en el
agua corriente.
H2O

10.Tratar: Con el Complejo Amoniacal: Oxido Diamino Argéntico: [Ag(NH3)2]2O,
el cual como sal presenta carga eléctrica fuertemente negativa y se unirá al
Alumbre Férrico que ya se encuentra unido a los grupos Aldehidos de las
Fibras Reticulares.
[Ag(NH3)2]2O
[Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O

11.Lavar con Agua Destilada: Que por arrastre físico eliminar el Oxido Diamino
Argéntico
H2O

12.Reducir: Con Formol el cual ocasionara la reducción (desintegración) del
Oxido Diamino Argéntico en: Plata Metálica + Acido Fórmico + Amoniaco, y
es la Plata Metálica (plata liberada) la cual precipitará sobre las estructuras
sobre las que se encuentre: Fibras Reticulares.
CHOH
4NH3 2Ag HCOOH 4NH3 2Ag HCOOH

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
12.Reducir: Este precipitado de Plata es de un color marrón oscuro pero como
se le agrega el ion Fe+ del Alumbre Férrico, el precipitado en conjunto es de
un color Negro, transmitiéndole este color a las fibras reticulares.
CHOH
4NH3 2Ag HCOOH 4NH3 2Ag HCOOH

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
13.Lavar con Agua Destilada: El agua destilada por arrastre físico eliminará el
Formol así como el ácido fórmico y el amoniaco, dejando las fibras
reticulares de color negro producto de complejo precipitado.
H2O
2Ag 2Ag
2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
14.Fijar: Con Hiposulfito de Sodio: Na2S2O3 el cual se une y retira la Plata no
unida a ninguna estructura tisular.
Na2S2O3
2Ag 2Ag
2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
15.Lavar con Agua Corriente: La cual por arrastre físico eliminara el Hiposulfito
de Sodio unido a la Plata sobrante.
H2O
2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

absoluto.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%
2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

Xilol
2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

18.Montar: Con Bálsamo de Canadá, Entella, Merkoglass, etc.
2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

Resultados:
Fibras Reticulares: Negras
2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

Impregnación Argéntica de Gordon-Sweet para Fibras Reticulares
Es una Impregnación Argéntica FisicoQuímica de Dos Tiempos.
Las Fibras Reticulares son filamentos muy delgados de colágeno tipo III, que
también forman el armazón de los órganos hematopoyéticos (bazo, timo,
ganglios, etc).
Soluciones:
Solución A: Baño Argéntico de Wilder:
1.-Nitrato de Plata: 1 gr
H2O: 10 mL
2.-Hidróxido Sódico 0,3 gr
H2O: 10 mL
A 5 ml de la Solución A1 se le agrega Amoniaco y luego se le agrega 5 mL de la Solución A2 hasta
obtener un precipitado. Completar con H2O hasta 50 mL
Solución B:
Cloruro de Oro: 0,02 gr
H2O: 10 mL
Solución C:
Ácido Oxálico: 0,5 gr
H2O: 10 mL
Solución D:
Alumbre de Hierro: 0,2 gr
H2O: 10 mL
Solución E:
Tiosulfato Sódico: 0,5 gr
H2O: 10 mL
Solución F:
I.- Permanganato Potasico: 0,5 gr
H2O: 100 mL
II.- Acido Sulfúrico al 3%
Mezclar 47,5 mL de I con 2,5 mL de II
Solución G:
Formol 10%: 100 mL
1) Desparafinar
2) Hidratar
3) Oxidar con Solución F ………………………………………….….. 5 minutos
4) Lavar con H2O ………………………………….…………………….. 2 minutos
5) Blanquear con Solución C …………………………………….…… 1 minuto
6) Lavar 3 veces en H2O ……………………………………………….. 1 minuto
7) Mordentar con Solución D …………………………………………. 30 minutos
8) Lavar 2 veces en H2O ……………………………………………….. 1 minuto
9) Tratar con Solución A ………………………………………………… 5 segundos
10) Lavar con H2O ………………….…………………………..………… 1 minuto
11) Reducir con Solución G ………………………………..…………… 10 minutos
12) Lavar con H2O ………………………………………….…………….. 1 minuto
13) Viraje con Solución B …………..……………………………..……. 5 minutos
14) Lavar con H2O ………………………………………………………… 2 minutos
15) Fijar con Solución E ……………………………………………….... 10 minutos
17) Deshidratar
18) Aclarar
19) Montar
Soluciones:
H2O: 10 mL
H2O: 10 mL
H2O: 10 mL
H2O: 10 mL
AgNO3 NH3
AgNO3 NH3
NaOH 2 AgNO3 + 2 NaOH = Ag2O + 2 NaNO3 + H2O
Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O

minutos cada uno.
extracelular
minutos cada uno.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

3. Oxidar: Luego se emplea Permanganato Potásico (KMnO4) el cual es un
fuerte agente oxidante, es decir, libera oxigeno pero que fundamentalmente
origina la aparición de grupos Aldehídos en las estructuras fibrilares
reticulares lo cual favorece la coloración específica de estas.
KMnO4

4. Lavar con H2O: Que por arrastre físico eliminara el Permanganato Potásico.
H2O

5. Blanquear: Se emplea Ácido Oxálico (C2H2O4) el cual es un Agente Reductor
ya que capta el oxigeno liberado durante el Mordentaje lo que entorpecería
posteriormente la coloración y elimina los residuos color violeta que pudiera
haber dejado el Permanganato Potásico.
C2H2O4

6. Lavar 3 veces con H2O: Que por arrastre físico eliminara el Metabisulfito de
Sodio.
H2O

7. Mordentar: Se emplea Alumbre Férrico, que al ser una sal de carga
fuertemente positiva se unirá a los grupos Aldehídos fuertemente negativos
expuestos en las estructuras fibrilares reticulares, sirviendo de intermediario
entre el tejido y el colorante, potenciando la unión entre ambos.
KFe(SO4)2

8. Lavar 2 veces con H2O: Que por arrastre físico eliminara el Alumbre Férrico
H2O

9. Tratar: Con el Complejo Amoniacal: Oxido Diamino Argéntico: [Ag(NH3)2]2O,
el cual como sal presenta carga eléctrica fuertemente negativa y se unirá al
Alumbre Férrico que ya se encuentra unido a los grupos Aldehidos de las
Fibras Reticulares.
[Ag(NH3)2]2O

10.Lavar con H2O: Que por arrastre físico eliminar el Oxido Diamino Argéntico
H2O

11.Reducir: Con Formol el cual ocasionara la reducción (desintegración) del
Oxido Diamino Argéntico en: Plata Metálica + Acido Fórmico + Amoniaco, y
es la Plata Metálica (plata liberada) la cual precipitará sobre las estructuras
sobre las que se encuentre: Fibras Reticulares.
CHOH
2Ag 4NH3 2Ag HCOOH 4NH3 2Ag HCOOH 2Ag

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
11.Reducir: Este precipitado de Plata es de un color marrón oscuro pero como
se le agrega el ion Fe+ del Alumbre Férrico, el precipitado en conjunto es de
un color Negro, transmitiéndole este color a las fibras reticulares.
CHOH
2Ag 4NH3 2Ag HCOOH 4NH3 2Ag HCOOH 2Ag

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
12.Lavar con H2O: El agua destilada por arrastre físico eliminará el Formol así
como el ácido fórmico y el amoniaco, dejando las fibras reticulares de color
negro producto de complejo precipitado.
H2O
2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
13.Viraje: Se emplea Cloruro de Oro, el cual es un electrolito ya que tiene
Metálica libre o ligada a las Fibras Reticulares e intensifica su color.
ClAu
ClAu ClAu
2Ag ClAu 2Ag ClAu ClAu 2Ag ClAu 2Ag
2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
14.Lavar con H2O: El agua destilada por arrastre físico eliminará el exceso de
Cloruro de Oro unido a la Plata libre
H2O
2Ag ClAu ClAu ClAu ClAu 2Ag

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
15.Fijar: Con Tiosulfato de Sodio: Na2S2O3 el cual se une y termina retira la
Plata no unida a ninguna estructura tisular.
Na2S2O3
2Ag ClAu ClAu ClAu ClAu 2Ag

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
16.Lavar con H2O: La cual por arrastre físico eliminara el Tiosulfato de Sodio
unido a la Plata sobrante.
H2O
ClAu ClAu ClAu ClAu

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
absoluto.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%
ClAu ClAu ClAu ClAu

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
Xilol
ClAu ClAu ClAu ClAu

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
18.Montar: Con Bálsamo de Canadá, Entella, Merkoglass, etc.
ClAu ClAu ClAu ClAu

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
Resultados:
Fibras Reticulares: Negras azuladas
ClAu ClAu ClAu ClAu

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag
Impregnación Argéntica de Masson-Fontana
Es una Impregnación Argéntica Histoquímica.
Permite detectar la presencia de granulaciones citoplasmáticas reductoras de
plata, como por ejemplo los pigmentos endógenos: Melanina.
Soluciones:
Solución de Nitrato de Plata (Fontana):
Nitrato de Plata: 10 gr
H2O: 100 mL
Añadir a esta solución Hidróxido de Amonio hasta obtener una solución clara sin precipitados, luego
añadir gota a gota 5 mL de Nitrato de Plata, hasta que la solución se vuelva opalescente.
Solución de Cloruro de Oro:
Cloruro de Oro 1%: 10 mL
H2O: 40 mL
Solución de Tiosulfato Sódico al 5%:
Tiosulfato Sódico: 5 mL
H2O: 100 mL
Solución de Rojo Nuclear Rápido (Kernechtrot)
1) Desparafinar
2) Hidratar
3) Tratar con la Solución de Fontana a 56ºC (oscuridad)…..….. 60 minutos
4) Lavar con H2O ………………………………….…………………….. 2 minutos
5) Viraje con Cloruro de Oro …………..…………………..…..……. 10 minutos
6) Lavar 3 veces con H2O ……………………………………………… 1 minuto
7) Fijar con Tiosulfato Sódico …….……………………………….... 5 minutos
9) Contrastar con Solución de Kernechtrot …………………….. 5 minutos
10) Lavar 2 veces con H2O ……………………………………………… 1 minuto
11) Deshidratar
12) Aclarar
13) Montar
Soluciones:
H2O: 100 mL
Añadir a esta solución Hidróxido de Amonio hasta obtener una solución clara sin precipitados, luego
Soluciones:
H2O: 100 mL
Añadir a esta solución Hidróxido y Amoniaco hasta obtener una solución clara sin precipitados, luego
AgNO3
NaOH NH3
Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O

minutos cada uno.
extracelular
minutos cada uno.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

3. Tratar: Con la Solución de Fontana en la cual el Oxido DiaminoArgéntico es
reducido por el TetrahidroCarbolina presente en los gránulos
citoplasmáticos presentes en determinadas células cutáneas: Melanocitos y
en determinadas células digestivas: Pilóricas, Lieberkuhn y Apéndice
[Ag(NH3)2]2O
TetrahidroCarbolina
3. Tratar: El Oxido DiaminoArgentico es reducido en: Plata + Amoniaco +
Producto de Oxidación. La Plata Metálica es liberada y solo precipita sobre
aquellas granulaciones dotadas de capacidad reductora.
Ag + NH3 + Producto de Oxidación
Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag
4. Lavar con H2O: El Agua Destilada por arrastre físico eliminara la Plata no
Precipitada, Amoniaco y Productos de Oxidación
H2O
Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag
5. Viraje: Se emplea Cloruro de Oro, el cual es un electrolito ya que tiene
Metálica liberada en los gránulos citoplasmáticos e intensifica su color.
ClAu
Auº
Auº Ag Auº Ag Auº Ag Auº Ag Auº Ag Auº Ag Auº Ag Auº Ag Auº Ag Auº
6. Lavar con H2O: El Agua Destilada por arrastre físico eliminara el Cloruro de
Oro no reducido así como el Oro Metálico
H2O
7. Fijar: Con Tiosulfato de Sodio: Na2S2O3 el cual se une y retira la Plata y el
Oro no unidos a ninguna estructura tisular.
Na2S2O3
8. Lavar con H2O: El Agua Destilada por arrastre físico eliminara el Tiosulfato
de Sodio libre y el unido a la Plata y Oro.
H2O
9. Contrastar con la Solución de Kernechtrot: Es un colorante básico derivado
del Antraceno, el cual por Atracción Electrostática se unirá al núcleo celular
tiñéndolo de rojo.
10.Lavar en H2O 2 veces: El Agua Destilada por arrastre físico eliminar la
Solución de Kernechtrot
H2O
absoluto.
OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

Xilol
Resultados:
Sustancias Reductoras de Plata: Negras
Núcleos: Rosa
angello2001@ hotmail.com
991083044

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IMPREGNACIÓN

Impregnaciones Argénticas Impregnaciones Argénticas

Ag+NO3 Ag+NO3 Ag+NO3 Ag+NO3

Ag+ Ag+ Ag+ Ag+

Ag+NO3 Ag+NO3 Ag+NO3 Ag+NO3

I.A. por M.F.Q. de Dos Tiempos I.A. por M.F.Q. de Un Tiempo

I.- Se enfrenta el Nitrato de Plata a un Potente Agente Reductor: Pirogalol o Hidroquinona

2Ag + Producto de Oxidación

La Plata Metálica se deposita específicamente sobre superficies celulares

2Ag + Producto de Oxidación

2 AgNO3 + 2 NaOH = Ag2O + 2 NaNO3 + H2O

II.- Se agrega Amoniaco y se obtiene Oxido de Plata Amoniacal: OXIDO

Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O

Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O CHOH

La Plata Metálica se deposita específicamente sobre estructuras fibrilares finas:

Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O CHOH

2 AgNO3 + 2 NaOH = Ag2O + 2 NaNO3 + H2O

Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2 +

NH3 + Ag+ + Producto de Oxidación

Fijación: Formol 10%

OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

Fijación: Formol 10%

OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3 AgNO3

OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

2 AgNO3 + 2 NaOH = Ag2O + 2 NaNO3 + H2O

Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O

OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2

O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2

O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2

H-C=O H-C=O H-C=O H-C=O

KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2

KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2

KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2

[Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O

[Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O

4NH3 2Ag HCOOH 4NH3 2Ag HCOOH

4NH3 2Ag HCOOH 4NH3 2Ag HCOOH

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

2Ag 2Ag 2Ag 2Ag

NaOH 2 AgNO3 + 2 NaOH = Ag2O + 2 NaNO3 + H2O

Ag2O + 4 NH3 = [Ag(NH3)2]2O

OH100% OH100% OH96% OH80% OH70%

O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2

O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2

O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2 H-C=O H-C=O O2 O2

H-C=O H-C=O H-C=O H-C=O

KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2

KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2 KFe(SO4)2

[Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O

[Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O [Ag(NH3)2]2O

2Ag 4NH3 2Ag HCOOH 4NH3 2Ag HCOOH 2Ag